CN113057126A - 一种标准化玉足海参苗种的培育方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种标准化玉足海参苗种的培育方法。本发明将玉足海参的苗种培育过程的每一个关键步骤,包括水质控制、病敌害生物防控、单胞藻饵料培养、人工催产以及苗种投喂等都进行标准化的管理,确保实现玉足海参苗种的稳定和高产。本发明育苗用水增加了微孔过滤袋过滤这个环节,可以进一步除去海水中的虫卵等微小颗粒物,从源头上杜绝敌害生物的爆发。本发明还采用全人工环境进行单胞藻培养,这种培养方法角毛藻不依赖自然光照,可以全天候不停地快速生长,能够避免受到室外培养风吹雨淋、高温等危害,也可以避免原生动物等敌害,可以稳定地为海参幼体提供鲜活单胞藻饵料,将其直接投喂也不会引入病/敌害。
Description
技术领域
本发明属于水产养殖技术领域,更具体地,涉及一种标准化玉足海参苗种的培育方法。
背景技术
玉足海参广泛地分布于热带和亚热带海域的近岸浅水区,该海参具有一定的经济价值,是很多太平洋岛国的传统渔业捕捞对象。玉足海参富含多糖和皂苷等天然活性物质,具有较高的药用价值。研究表明,玉足海参在海底生态系统中发挥着重要的作用,它们可以通过摄食和排泄等生理活动降低沉积物有机质含量,增加沉积物和水解界面的营养盐通量和溶解氧交换速率,另外,将玉足海参与鱼虾等其他养殖动物进行混养,可以有效地调控养殖环境,提高养殖对象的生长率和存活率,因此,玉足海参可以作为生物滤器用于构建复合生态养殖系统。
近年来,随着亚洲市场对海参需求的增加,大部分具有较高经济价值的海参种类自然资源已经遭到了严重破坏,玉足海参已经被列为重要的捞对象。一些国家,如中国,菲律宾,马来西亚,泰国和越南等国,由于对玉足海参的捕捞缺乏相应的管理,导致其资源呈现衰退的趋势。长此以往,玉足海参可能跟其他海参种类一样,在局部海域出现灭绝的现象。
目前,国内外对海参资源进行恢复的重要途径之一就是增殖放流,增殖放流需要稳定的苗种供应,相对于仿刺参以及糙海参等经济种类,玉足海参的人工繁育技术尚不成熟。玉足海参幼体的浮游期可达20余天,而仿刺参和糙海参的幼体发育较快,其浮游期仅为10天左右。水质、饵料、敌害以及育苗过程中的管理方法等都会影响海参浮游幼体的生长发育与成活。玉足海参浮游幼体期为仿刺参和糙海参的2倍,如此漫长的过程中稍有不慎就会导致苗种发育迟缓甚至大规模死亡。另外,海参育苗如果由经验丰富的技术人员进行管理,则成功率相较于经验较少的技术人员会高很多,究其原因主要在于后者对于水质控制、饵料培养和搭配以及敌害控制等关键过程照本宣科,缺乏相应的实践经验。现有的海参育苗技术只有仿刺参和糙海参相对成熟,而玉足海参等其他种类的热带海参人工繁育技术尚处于起步阶段。众所周知,每种海参都有自己独特的生物学特征,其他海参种类的人工繁育如果全盘仿照仿刺参、糙海参等种类的育苗手册进行管理,其结果往往并不理想。特别的,我们前期的实践发现,对于玉足海参人工繁育来说,由于幼体培育周期漫长,由各种不确定因素引起的风险尤其巨大。因此,玉足海参人工繁育过程的关键环节,包括水质调控、单胞饵料藻培养、敌害防控以及幼体培育等都必须进行优化和标准化管理。从实践角度来说,在保证育苗效果的前提条件下要尽量简化步骤,这样可以少走弯路并大幅度减少育苗技术人员的工作量,有效地降低风险,提高育苗的成功率。
发明内容
本发明的目的是提供一种能提高玉足海参人工繁育效率的标准化玉足海参苗种的培育方法。通过该方法可以将玉足海参的苗种培育过程的每一个关键步骤,包括水质控制、敌害生物防控、单胞藻饵料培养、人工催产以及苗种投喂等都进行标准化的管理,通过该方法可以简化玉足海参人工繁育的步骤,实现了玉足海参苗种的稳定和高产。利用该方法进行玉足海参人工繁育步骤简单且容易操作,可以有效地克服苗种培育过程中的水质难以调控、敌害生物频发、单胞藻饵料易污染和产出不稳定以及饵料投喂不科学等一系列问题,实现玉足海参苗种的高效繁育,在热带海参人工繁育和增养殖领域具有十分广阔的应用空间。
本发明的标准化玉足海参苗种的培育方法,包括以下步骤:
A、水质控制:取用的天然海水,其污染物含量必须低于第二类海水水质标准,在使用前经过两级过滤处理或/和紫外杀菌消毒处理,两级过滤中第一级为普通的砂滤,用于除去天然海水中的大颗粒物,第二级为利用孔径不超过5微米的微孔过滤袋过滤,用于进一步除去海水中的虫卵等微小颗粒物;如果取水海区病菌较多,还需要在任何一级过滤处理前/后将海水进行紫外杀菌消毒处理,处理后海水盐度范围应为29-33,温度范围为28-31℃,由此得到处理好的海水;
B、亲参催产方法:玉足海参亲参暂养清空肠道后,采用阴干流水催产,然后放入处理好的海水中待产,控制好孵化密度,持续充气使受精卵悬浮,换水,待受精卵发育至小耳幼体能够开口摄食时进行分池;
C、玉足海参浮游幼体培育:玉足海参幼体在光照强度不超过1000lx的室内封闭环境中进行培育,整个培育过程中保持适度充气,使幼体一直处于悬浮状态;投喂包含角毛藻搭配面包酵母的饵料,培育期间换水,换水时选用筛绢网过滤,并且利用虹吸法吸池底,以除去池底死亡幼体和残余的饵料及粪便;
当30%以上的玉足海参幼体发育至樽型幼体阶段开始投放附着基,附着基为聚乙烯波纹板,使用前经消毒和附着硅藻,每立方米水体投放10-15套波纹板;
波纹板投放后,换水,投喂包含角毛藻搭配面包酵母的饵料,并投喂螺旋藻粉和仿刺参稚参配合饵料,当幼体全部附着后,停止投加角毛藻和面包酵母,转而以投喂稚参配合饵料为主,投饵量随着苗种的生长而增加,培育期间换水,换水时选用筛绢网过滤,并且利用虹吸法吸池底,以除去池底死亡幼体和残余的饵料及粪便。
优选,所述的标准化玉足海参苗种的培育方法,包括以下步骤:
A、水质控制:取用的天然海水,其污染物含量必须低于第二类海水水质标准,在使用前必须经过两级过滤处理或/和紫外杀菌消毒处理,两级过滤中第一级为普通的砂滤,用于除去天然海水中的大颗粒物,第二级为利用孔径不超过5微米的微孔过滤袋过滤,用于进一步除去海水中的虫卵等微小颗粒物;如果取水海区病菌较多,还需要在任何一级过滤处理前/后将海水进行紫外杀菌消毒处理,处理后海水盐度范围应为29-33,温度范围为28-31℃,由此得到处理好的海水;
B、亲参催产方法:每年7-9份采捕玉足海参亲参,亲参采捕后暂养以清空肠道,将清空肠道的亲参阴干2小时后流水刺激20分钟,然后放到处理好的海水中待产,将所排放的精、卵混合受精,利用150目的筛绢洗卵以除去多余精子,然后置于孵化池中进行培育,孵化池中受精卵密度为3-5个/ml,培育期间持续充气使受精卵不至于沉底,每天换水1/4~1/2,培育2天待受精卵发育至小耳幼体能够开口摄食时进行分池,分池后幼体的密度不超过0.6个/ml;
C、玉足海参浮游幼体培育:玉足海参幼体在光照强度不超过1000lx的室内封闭环境中进行培育,整个培育过程中保持适度充气,使幼体一直处于悬浮状态;
利用角毛藻搭配面包酵母进行制备,其中角毛藻密度不低于200万个/ml,面包酵母利用200目筛绢在处理好的海水中搓碎配成0.1g/L的悬浊液,然后将角毛藻液和面包酵母悬浊液按照体积比3:1的比例混合后作为饵料;
玉足海参浮游幼体培育以中耳幼体后期为界,分为两个阶段,第一个阶段为幼体发育至中耳幼体后期之前,每天下午换水1/3,清晨和下午换水后各投喂一次,每次投喂量为5L/m3水体,全天投喂量为10L/m3水体;第二阶段,大耳幼体至樽型幼体阶段,每天换水1/2,清晨和下午换水后投喂一次,每次投喂量为10L/m3水体,全天投喂量为20L/m3水体;换水时根据幼体的发育情况选用合适规格的筛绢网过滤,以避免玉足海参浮游幼体漏出,每3天利用虹吸法吸一次池底,以除去池底死亡幼体和残余的饵料及粪便;
当30%以上的玉足海参幼体发育至樽型幼体阶段开始投放附着基,附着基为聚乙烯波纹板,使用前经消毒和附着硅藻,提前一周以上进行硅藻附着,每立方米水体投放10-15套波纹板,波纹板投放后每天换水1/2,清晨和下午换水后投喂一次,每次投喂量为10L/m3水体,全天投喂量为20L/m3水体;另外每天早晚各投喂1次5ppm的螺旋藻粉和5ppm的仿刺参稚参配合饵料,螺旋藻粉和稚参配合饵料使用前均用利用200目筛绢在处理好的海水中搓碎配成悬浊液;
当幼体全部附着后,停止投加角毛藻和面包酵母,转而以投喂稚参配合饵料为主,投饵量随着苗种的生长而增加,当苗种体长达到2mm以上时,每周通过虹吸法清除池底残饵和粪便一次,每天早晚各换水一次,每次换水1/2,换水后均进行投喂,每次投喂量增至20ppm,具体视苗种附着量而定,培养获得玉足海参苗种。
当参苗体长达到10-20mm以上,就可以转移至室外养殖池内养殖或进行海区底播增殖放流,底播放流效果随着体长的增加而提高,当体长达到50mm以上进行底播放流效果更佳。
所述的角毛藻是牟氏角毛藻,优选是对数生长期的牟氏角毛藻,通过以下方法制备:采用F/2培养基对牟氏角毛藻进行单独培养。优选是采用三级培养,其中一、二级培养均在三角瓶中进行,F/2培养基所用的海水是经煮沸后使用;三级培养则在200-400L塑料桶中进行,海水加20ppm消毒粉过夜,然后用10ppm硫代硫酸钠中和后使用,角毛藻培养均在室内进行,利用20~50瓦的全光谱日光灯,持续提供10000~30000lx的光照,晚上三级培养所用的塑料桶用透明有机玻璃板做盖进行全程保护。如此培养可以加快微藻生长速度。根据接种密度,一般2-3d内角毛藻就可以达到指数增长期。这种培养方法角毛藻不依赖自然光照,可以全天候不停地快速生长,能够避免受到室外培养风吹雨淋、高温等危害,也可以避免原生动物等敌害,可以稳定地为海参幼体提供鲜活单胞藻饵料,将其直接投喂也不会引入病/敌害。
本发明将玉足海参的苗种培育过程的每一个关键步骤,包括水质控制、病敌害生物防控、单胞藻饵料培养、人工催产以及苗种投喂等都进行标准化的管理,确保实现玉足海参苗种的稳定和高产。
所述的水质控制,为育苗所取用的天然海水在使用前必须经过两级过滤处理或/和紫外杀菌消毒处理。
所述的病敌害防控方法一是通过过滤或/和紫外杀菌消毒清除虫卵和病菌,二是通过控制单胞藻培养来避免从饵料中引入敌害,三是通过向苗种培育系统中投加药物来杀灭敌害和控制病菌滋生。
当海参幼体培育水体爆发桡足类和蚊幼等敌害生物,通过投加2-3ppm的敌百虫予以杀灭,投加敌百虫2小时后彻底换水;为了抑制病菌滋生,育苗期间每隔3天投加一次2-3ppm的青霉素等抗菌药物。
与现有技术相比,本发明的有益效果在于:
(1)本发明相较于已有的玉足海参及其他海参种类幼体的培育方法来说,育苗用水增加了微孔过滤袋过滤这个环节,可以进一步除去海水中的虫卵等微小颗粒物,从源头上杜绝敌害生物的爆发。本发明还对育苗海水相关参数进行了进一步限定,以杜绝由于海水理化因子不适导致的育苗失败。
(2)本发明的单胞藻饵料培养完全在室内条件下进行,并且利用全光谱植物生长灯提供光源,加盖无色透明的有机玻璃盖防止飞虫和其他污染物进入培养系统。该方法相较于传统的饵料藻培养方法,不受自然光照的影响,单胞藻可以24小时不间歇地生长,生长速度至少比传统单胞藻的培养方法快1倍。并且可以免受天气、温度、污染物以及飞虫等的影响,可以为海参幼体稳定高效地提供鲜活饵料。
(3)传统的海参浮游幼体饵料包括角毛藻、盐藻、小新月菱形藻、小球藻以及面包酵母和海洋红酵母等,生产实践中,技术人员往往根据自己多年积累的经验进行投喂,而新手往往掌握不好饵料的搭配及用量;另外,育苗过程中的换水比例也众说纷纭。很多育苗技术手册中的方案多是经验的总结,并没有经过系统的实验进行优化,照本宣科进行海参育苗非常容易导致失败。本发明选择角毛藻这种易于在南方培养的单胞藻作为鲜活饵料,选择便宜易得的市售面包酵母作为替代饵料,通过实验将两者的比例进行优化。本发明将浮游幼体简化为两个阶段,相较于传统的方法减少一个阶段,对每个阶段的换水量、饵料的搭配比例和用量等都进行了标准化的管理,非常简单明了,易于掌握和操作,且育苗效果稳定,可以为热带海参的增殖放流提供良好的苗种基础。
附图说明
图1为水质控制过程中的微孔过滤袋过滤;
图2为角毛藻的一、二、三级培养,其中一二级培养在三角瓶中进行(A),三级培养系统加有机玻璃盖用于防止飞虫污染(B);
图3为发育正常的玉足海参的小耳幼体(A)、后期中耳幼体(B)、大耳幼体(C)以及樽型幼体(D);
图4为不同处理组玉足海参幼体体长随时间的变化;
图5为不同处理组玉足海参幼体成活率随时间的变化;
图6为不同饵料搭配比例玉足海参幼体附着情况比较;
图7为最佳饵料搭配比例附着基上的玉足海参苗种;
图8为不同处理组育苗水体中亚硝酸盐浓度随时间的变化;
图9为人工繁育的玉足海参苗种及海区底播增殖放流;
图10为盐度冲击造成玉足海参幼体畸形和溃烂。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步说明本发明,但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明,本发明采用的方法和设备为本技术领域常用方法和设备。
实施例1玉足海参人工繁育
2020年8月16日,在深圳中国科学院大亚湾海洋生物综合实验站进行了玉足海参人工繁育实验。相关过程如下:
水质控制:育苗所用的天然海水取自实验站附近海域,经监测,各种污染物含量均低于第二类海水水质标准。将抽取的海水经砂滤以后再用5微米的过滤袋进行过滤(图1)。由于当地海水病菌等污染物含量较少,因此未进行紫外杀菌消毒处理。本实验过程中处理后海水盐度范围为29-33,温度范围为28-31℃,由此得到处理好的海水。
亲参催产方法:玉足海参亲参采自大亚湾海域,暂养3天清空肠道后,于傍晚前阴干2小时,然后流水刺激20分钟,放入处理好的海水中待产。将受精卵置于数个lm3大桶中进行孵化,孵化密度为4个/ml,持续充气使受精卵悬浮,每天换水1/3左右。培育2天后,待受精卵发育至小耳幼体能够开口摄食时进行分池,分池后幼体的密度为0.5个/ml。用15个400L玻璃钢桶进行饵料配比优化实验。
单胞藻饵料培养:采用F/2培养基配方,对牟氏角毛藻进行单独培养。其中:一、二级培养均在三角瓶中进行,海水经煮沸后使用;三级培养则在200-400L塑料桶中进行,海水加20ppm消毒粉过夜,然后用10ppm硫代硫酸钠中和后使用(图2)。为避免室外培养所面临的污染、风吹雨淋、光线不稳定以及高温等危害,角毛藻培养均在室内进行:利用全光谱日光灯(20~50瓦,10000~30000lx)持续提供光照,晚上三级培养所用的塑料桶用透明有机玻璃板做盖进行全程保护。如此培养可以加快微藻生长速度。根据接种密度,一般2-3d内角毛藻就可以达到指数增长期。这种培养方法角毛藻不依赖自然光照,可以全天候不停地快速生长,能否避免受到室外培养风吹雨淋、高温等危害,也可以避免原生动物等敌害,能稳定地为海参幼体提供鲜活单胞藻饵料,将其直接投喂也不会引入病/敌害。
饵料配比实验:将牟氏角毛藻(200万细胞/ml)与面包酵母悬浊液(0.1g/L,面包酵母利用200目筛绢在处理好的海水中搓碎配成0.1g/L的悬浊液)按照4:0、3:1、2:2、1:3和0:4的体积比混合投喂玉足海参幼体,依次标记为A、B、C、D和E组。
玉足海参幼体在光照强度不超过1000lx的室内封闭环境中进行培育,整个培育过程中保持适度充气,使幼体一直处于悬浮状态。
玉足海参浮游幼体培育以中耳幼体后期为界,分为两个阶段,第一个阶段为幼体发育至中耳幼体后期之前(第0~9d),每天下午换水1/3,清晨和下午换水后各投喂一次,每次投喂量为5L/m3水体,全天投喂量为10L/m3水体;第二阶段,大耳幼体至樽型幼体阶段,每天换水1/2,清晨和下午换水后投喂一次,每次投喂量为10L/m3水体,全天投喂量为20L/m3水体;换水时根据幼体的发育情况选用合适规格的筛绢网过滤,以避免玉足海参浮游幼体跑出,每3天利用虹吸法吸一次池底,以除去池底死亡幼体和残余的饵料及粪便;浮游幼体培育过程中每3d测定一次成活率、体长以及水质。
实验过程中发现混合角毛藻和面包酵母的玉足海参幼体生长情况较好(图3),特别是按照3:1比例投喂饵料的B组,幼体的生长发育以及成活率情况均优于其他组(图4、5),其中B组发育到樽型幼体阶段成活率高达54.35%(图5),远超过Huang et al.(2018)的实验结果(约25%,见对比文件Fig.6)(Huang W,Huo D,Yu Z,et al.Spawning,larvaldevelopment and juvenile growth of the tropical sea cucumber Holothurialeucospilota[J].Aquaculture,2018,488:22-29.)。当30%左右的玉足海参幼体发育至樽型幼体阶段开始投放附着基,附着基为海参育苗常用的聚乙烯波纹板,使用前经消毒和附着硅藻——为了提高幼体附着效果,必须提前一周以上进行硅藻附着。每立方米水体可以投放10-15套波纹板。波纹板投放后,每天换水1/2,清晨和下午换水后各投喂一次,每次投喂量为10L/m3水体,全天投喂量为20L/m3水体。换水时根据幼体的发育情况选用合适规格的筛绢网过滤,每3天利用虹吸法吸一次池底,以除去池底死亡幼体和残余的饵料及粪便。另外每天早晚各投喂1次5ppm的螺旋藻粉和5ppm的市售仿刺参稚参配合饵料,螺旋藻粉和稚参配合饵料使用前均用利用200目筛绢在处理好的海水中搓碎配成悬浊液。当幼体全部附着后(以育苗水体中无浮游幼体为准),停止投加角毛藻和面包酵母,转而以投喂稚参配合饵料为主,投饵量随着苗种的生长而增加,当苗种体长达到2mm以上时,每周通过虹吸法清除池底残饵和粪便一次。每天早晚各换水一次,每次换水1/2,换水后均进行投喂,每次投喂量增至20ppm,具体视苗种附着量而定。
幼体附着2个月后对附着基抽样测定发现,A、B、C、D、E组波纹板附着基上海参幼体数量分别为2.39、45.56、15.00、10.61、2.13头/板(波纹板面积31cm*39cm)(图6),B组海参苗种附着情况要远远优于其他组(图7)。
对各组育苗水体中的亚硝酸盐浓度跟踪监测发现,幼体培育过程中投加饵料含角毛藻比例较高的A、B组水体亚硝酸盐(NO2-N)增加明显,而含面包酵母比例较高的D、E组NO2-N增加幅度较小,这表明投加面包酵母比投加角毛藻对养殖水体的污染更低。但是从苗种附着效果来看,玉足海参幼体耐污染能力很强。相对常规育苗方法(每天至少彻底换水一次),我们采用的较小的换水比例并不会对幼体附着效果造成负面影响。
最终,经专家现场鉴定,B组玉足海参幼苗的附着量约为5000头/m3水体,平均体长约为12mm。
当参苗体长达到10-20mm以上,就可以转移至室外养殖池内养殖或进行海区底播增殖放流,底播放流效果随着体长的增加而提高,当体长达到50mm以上进行底播放流效果更佳。我们还将4000余头参苗在海区现场进行了实验性的底播增殖放流(图9)。
所述的处理好的海水是经两级过滤,两级过滤中第一级为普通的砂滤,用于除去天然海水中的大颗粒物,第二级为利用孔径不超过5微米的微孔过滤袋过滤,用于进一步除去海水中的虫卵等微小颗粒物;如果取水海区病菌较多,还需要在任何一级过滤处理后将海水进行紫外杀菌消毒处理。
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
实施例2盐度对玉足海参育苗效果的影响
在实施例1之后,2020年9月20日通过人工催产的方法获得新一批玉足海参受精卵,继续按照本发明所述的方法进行培育。9月30日左右持续降雨导致海水盐度降为24.5左右,然而由于工人疏忽在未进行盐度测定的情况下即将低盐海水加入育苗池中,这直接导致该批玉足海参批苗严重畸形、溃烂(见图10),最终本次苗种繁育以失败告终。玉足海参繁育期正值雨季,因此实践过程中对盐度冲击必须采取有效的防范措施。
Claims (7)
1.一种标准化玉足海参苗种的培育方法,其特征在于,包括以下步骤:
A、水质控制:取用的天然海水,其污染物含量必须低于第二类海水水质标准,在使用前经过两级过滤处理或/和紫外杀菌消毒处理,两级过滤中第一级为普通的砂滤,用于除去天然海水中的大颗粒物,第二级为利用孔径不超过5微米的微孔过滤袋过滤,用于进一步除去海水中的虫卵等微小颗粒物;如果取水海区病菌较多,还需要在任何一级过滤处理前/后将海水进行紫外杀菌消毒处理,处理后海水盐度范围应为29-33,温度范围为28-31℃,由此得到处理好的海水;
B、亲参催产方法:玉足海参亲参暂养清空肠道后,采用阴干流水催产,然后放入处理好的海水中待产,控制好孵化密度,持续充气使受精卵悬浮,换水,待受精卵发育至小耳幼体能够开口摄食时进行分池;
C、玉足海参浮游幼体培育:玉足海参幼体在光照强度不超过1000lx的室内封闭环境中进行培育,整个培育过程中保持适度充气,使幼体一直处于悬浮状态;投喂包含角毛藻搭配面包酵母的饵料,期间换水,换水时选用筛绢网过滤,并且利用虹吸法吸池底,以除去池底死亡幼体和残余的饵料及粪便;
当30%以上的玉足海参幼体发育至樽型幼体阶段开始投放附着基,附着基为聚乙烯波纹板,使用前经消毒和附着硅藻,每立方米水体投放10-15套波纹板;
波纹板投放后,换水,投喂包含角毛藻搭配面包酵母的饵料,并投喂螺旋藻粉和仿刺参稚参配合饵料,当幼体全部附着后,停止投加角毛藻和面包酵母,转而以投喂稚参配合饵料为主,投饵量随着苗种的生长而增加,期间换水,换水时选用筛绢网过滤,并且利用虹吸法吸池底,以除去池底死亡幼体和残余的饵料及粪便,培养获得玉足海参苗种。
2.根据权利要求1所述的标准化玉足海参苗种的培育方法,其特征在于,包括以下步骤:
A、水质控制:取用的天然海水,其污染物含量必须低于第二类海水水质标准,在使用前必须经过两级过滤处理或/和紫外杀菌消毒处理,两级过滤中第一级为普通的砂滤,用于除去天然海水中的大颗粒物,第二级为利用孔径不超过5微米的微孔过滤袋过滤,用于进一步除去海水中的虫卵等微小颗粒物;如果取水海区病菌较多,还需要在任何一级过滤处理前/后将海水进行紫外杀菌消毒处理,处理后海水盐度范围应为29-33,温度范围为28-31℃,由此得到处理好的海水;
B、亲参催产方法:每年7-9份采捕玉足海参亲参,亲参采捕后暂养以清空肠道,将清空肠道的亲参阴干2小时后流水刺激20分钟,然后放到处理好的海水中待产,将所排放的精、卵混合受精,利用150目的筛绢洗卵以除去多余精子,然后置于孵化池中进行培育,孵化池中受精卵密度为3-5个/ml,培育期间持续充气使受精卵不至于沉底,每天换水1/4~1/2,培育2天待受精卵发育至小耳幼体能够开口摄食时进行分池,分池后幼体的密度不超过0.6个/ml;
C、玉足海参浮游幼体培育:玉足海参幼体在光照强度不超过1000lx的室内封闭环境中进行培育,整个培育过程中保持适度充气,使幼体一直处于悬浮状态;
利用角毛藻搭配面包酵母进行制备,其中角毛藻密度不低于200万个/ml,面包酵母利用200目筛绢在处理好的海水中搓碎配成0.1g/L的悬浊液,然后将角毛藻液和面包酵母悬浊液按照体积比3:1的比例混合后作为饵料;
玉足海参浮游幼体培育以中耳幼体后期为界,分为两个阶段,第一个阶段为幼体发育至中耳幼体后期之前,每天下午换水1/3,清晨和下午换水后各投喂一次,每次投喂量为5L/m3水体,全天投喂量为10L/m3水体;第二阶段,大耳幼体至樽型幼体阶段,每天换水1/2,清晨和下午换水后投喂一次,每次投喂量为10L/m3水体,全天投喂量为20L/m3水体;换水时根据幼体的发育情况选用合适规格的筛绢网过滤,以避免玉足海参浮游幼体漏出,每3天利用虹吸法吸一次池底,以除去池底死亡幼体和残余的饵料及粪便;
当30%以上的玉足海参幼体发育至樽型幼体阶段开始投放附着基,附着基为聚乙烯波纹板,使用前经消毒和附着硅藻,提前一周以上进行硅藻附着,每立方米水体投放10-15套波纹板,波纹板投放后每天换水1/2,清晨和下午换水后投喂一次,每次投喂量为10L/m3水体,全天投喂量为20L/m3水体;另外每天早晚各投喂1次5ppm的螺旋藻粉和5ppm的仿刺参稚参配合饵料,螺旋藻粉和稚参配合饵料使用前均用利用200目筛绢在处理好的海水中搓碎配成悬浊液;
当幼体全部附着后,停止投加角毛藻和面包酵母,转而以投喂稚参配合饵料为主,投饵量随着苗种的生长而增加,当苗种体长达到2mm以上时,每周通过虹吸法清除池底残饵和粪便一次,每天早晚各换水一次,每次换水1/2,换水后均进行投喂,每次投喂量增至20ppm,具体视苗种附着量而定,培养获得玉足海参苗种。
3.根据权利要求1或2所述的标准化玉足海参苗种的培育方法,其特征在于,所述的角毛藻是牟氏角毛藻。
4.根据权利要求3所述的标准化玉足海参苗种的培育方法,其特征在于,所述的角毛藻是对数生长期的牟氏角毛藻。
5.根据权利要求3所述的标准化玉足海参苗种的培育方法,其特征在于,所述的角毛藻是采用F/2培养基对牟氏角毛藻进行单独培养。
6.根据权利要求5所述的标准化玉足海参苗种的培育方法,其特征在于,角毛藻是采用三级培养,其中一、二级培养均在三角瓶中进行,F/2培养基中的海水是经煮沸后使用;三级培养则在200-400L塑料桶中进行,海水加20ppm消毒粉过夜,然后用10ppm硫代硫酸钠中和后使用,角毛藻培养均在室内进行,利用20~50瓦的全光谱日光灯,持续提供10000~30000lx的光照,晚上三级培养所用的塑料桶用透明有机玻璃板做盖进行全程保护。
7.根据权利要求1或2所述的标准化玉足海参苗种的培育方法,其特征在于,当海参幼体培育水体爆发桡足类或蚊幼等敌害生物,通过投加2-3ppm的敌百虫予以杀灭,投加敌百虫2小时后彻底换水;为了抑制病菌滋生,育苗期间每隔3天投加一次2-3ppm的青霉素等抗菌药物。
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