CN109220913A - 一种通过持续刺激提高玉足海参产卵效率的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种通过持续刺激提高玉足海参产卵效率的方法。本发明通过亲参处理、阴干催产、雌雄亲参分离、持续刺激等步骤的操作，提高了热带玉足海参雌参的产卵效率、获得了足量的玉足海参受精卵，使得热带玉足海参苗种规模化培育成为可能。本发明方法操作简单、对设备要求低、适合推广，为热带玉足海参移植增殖及商业化应用提供技术支撑。
Description
技术领域：
本发明属于水产养殖技术领域，具体涉及一种通过持续刺激提高玉足海参产卵效率的方法。
背景技术：
近年来由于人类活动的加剧，南海热带珊瑚礁生态系统日益恶化，珊瑚礁生物多样性锐减，部分海底区域甚至出现了“荒漠化”的现象。进行珊瑚礁生物移植增殖能够加快海底生态系统的修复和重构，是恢复珊瑚礁生态系统生物多样性及保护珊瑚礁体健康可持续的有效方式之一，对维持岛礁的稳态安全具有重要的意义。
海参主要以海底泥沙中的有机碎屑为食，能够加快海洋底栖生态环境的物质循环，是一种关键的护礁生物。玉足海参(Holothuria leucospilota)广泛分布于热带和亚热带浅海海域，具有较强的环境适应能力和抗应激能力，是进行移植增殖的理想物种。到目前为止，玉足海参尚未实现规模化繁育及增殖技术成熟化应用，限制了海参规模化移植增殖工作的开展。
根据已公开的资料显示，目前较流行的海参催产技术流程为：阴干一定时间后，流水冲击，雌雄亲参单独产精、产卵，之后再按照一定比例进行受精，获得受精卵(对比文件1，一种海参人工育苗养殖方法，CN106069920A；对比文件2，一种刺参的人工育苗方法，CN102318572A)。如何规模化获得优质的玉足海参受精卵，是解决玉足海参增殖技术的难题之一，本申请人前期进行了玉足海参的催产实验，结果表明：根据已公开资料的操作方法虽然能够获得足量的玉足海参精子但却发现玉足海参的产卵效率较低，只能获得少量的玉足海参受精卵，限制了下一步玉足海参规模化育苗技术的发展。根据以往经验无法成功获得足量卵子的情况下，如何提高玉足海参产卵效率、获得足量的玉足海参受精卵成为本发明的创新点。
发明内容：
本发明的目的是提供一种通过持续刺激提高玉足海参产卵效率的方法。本发明首次通过流水冲击和旋涡水流的方式持续刺激玉足海参亲参，使得玉足海参的产卵效率产生了实质性的提高，通过本发明方法突破了玉足海参受精卵不足的限制。
本发明方法是通过以下技术方案予以实现的：
本发明的一种通过持续刺激提高玉足海参产卵效率的方法，包括以下步骤：
a、亲参处理：6～9月份，在天然海域海底采集体长20cm以上的野生玉足海参作为预备的亲参群体，此时无法判断亲参性别，对亲参进行饥饿处理，及时清理亲参排出的排泄物并换水，直至水体清洁无排泄物为止，使亲参在产精或产卵时不产生排泄物污染受精卵；
b、阴干催产：将步骤a中的玉足海参亲参转移到无水的桶中，海参保持分散不互相叠压，阴干处理，对亲参进行流水冲击后，继续加海水至0.7～1.2m深；
c、雌雄亲参分离：步骤b加海水后，亲参攀爬至水面上方，发现亲参产精、产卵则立即抓出，所有产精的雄参放置在单独的产精桶中，所有产卵的雌参放置在单独的产卵桶中；
d、持续刺激：步骤c之后，每隔15～30min对攀爬至水面上方的未产精、产卵的亲参用流水冲击至脱落为止，之后亲参会重新附着爬壁；每隔15～30min，搅动产卵桶水体形成旋涡水流，使停止产卵的雌参脱离附着状态，漂浮于水中，之后亲参会重新附着爬壁；持续刺激期间发现未产精、产卵的亲参产精、产卵则立即抓出，所有产精的雄参放置在步骤c所述的产精桶中，所有产卵的雌参放置在步骤c所述的产卵桶中；
e、湿法人工授精：将精子和卵子进行湿法人工授精，调整受精卵密度至25～50万个/吨海水进行后续孵化。
步骤b所述的阴干处理的时间优选为2.0～2.5h。
本发明与已公开的海参催产方法的不同之处在于：在利用已公开方法无法取得足量受精卵的情况下，本发明采用了流水冲击和旋涡水流的方式持续刺激玉足海参亲参，明显提高了玉足海参的产卵效率，获得了足量的玉足海参受精卵，与已公开的一次性阴干流水刺激后待产的方式具备显著的差异，已公开的方法无法预料本发明方法是否可行，亦无法对本发明方法形成启示性的作用。本发明打破了海参催产过程中一次性刺激后等待产卵的传统，通过流水冲击和旋涡水流的方式持续刺激玉足海参雌参，显著提高了玉足海参的产卵效率，为玉足海参的规模化增殖技术的成熟化应用提供支撑。本发明方法操作简单、对设备要求低、适合推广，为热带玉足海参移植增殖及商业化应用提供技术支撑。
具体实施方式：
实施例1
a、亲参处理：于2018年8月份，在海南三亚的天然海域具有礁石的海底采集体长20cm以上的野生玉足海参56头作为预备的亲参群体，此时无法判断亲参性别，对亲参进行饥饿处理，每天4次及时清理亲参排出的泥沙等排泄物、100％换水，直至水体清洁无泥沙排泄物为止，使亲参产精或产卵时不产生排泄物污染受精卵；
b、阴干催产：将步骤a中的玉足海参亲参转移到无水的桶中，海参保持分散不互相叠压，阴干处理2.0h，对亲参进行流水冲击后，继续加海水至1.0m深；
c、雌雄亲参分离：步骤b加海水2h后，亲参攀爬至水面上方，发现亲参产精、产卵则立即抓出，所有产精的雄参放置在单独的产精桶中，所有产卵的雌参放置在单独的产卵桶中；此步骤共发现6头产精的雄参，1头产卵的雌参；
d、持续刺激：步骤c之后，每隔20min，用瓢舀起桶中的海水对未产精、产卵的亲参进行流水冲击，将攀爬至水面上方的亲参冲击至脱落为止，之后亲参会重新攀爬至水面上方，刺激尚未产卵的雌参开始产卵；每隔20min，对步骤c产卵桶中停止产卵的雌参进行持续刺激，搅动产卵桶水体形成旋涡水流，使雌参脱离附着状态，漂浮于水中，之后雌参会重新附着爬壁，刺激停止产卵的雌参继续产卵。持续刺激期间发现未产精、产卵的亲参产精、产卵则立即抓出，所有产精的雄参放置在步骤c的产精桶中，所有产卵的雌参放置在步骤c的产卵桶中。
e、湿法人工授精：步骤b加海水8h后，共发现14头产精的雄参，6头产卵的雌参；一般情况下雄参产精充足，精子浓度远高于卵子，以100L体积的产精、产卵桶为例，将精子和卵子按照体积比为1:100进行湿法人工授精能够有效避免多精受精，获得较高比例的优质受精卵，调整受精卵密度至约50万个/吨海水进行后续孵化。
经过本发明实施例1的操作，将受精卵分散至18个1吨桶中孵化，得到受精卵约875万个(最后1个桶受精卵密度约为25万个/吨)，雌参的平均产卵量约为145.83万个/头，孵化2天后统计成活胚胎共计约787万个，孵化率为89.71％，为后续规模化培育提供了较好的基础。
实施例2
a、亲参处理：于2018年9月份，在海南三亚的天然海域具有礁石的海底采集体长20cm以上的野生玉足海参作为预备的亲参群体，此时无法判断亲参性别，对亲参进行饥饿处理，每天4次及时清理亲参排出的泥沙等排泄物、100％换水，直至水体清洁无泥沙排泄物为止，使亲参产精或产卵时不产生排泄物污染受精卵；
b、阴干催产：将步骤a中的玉足海参亲参转移到无水的桶中，海参保持分散不互相叠压，阴干处理2.5h，对亲参进行流水冲击后，继续加海水至1.2m深；
c、雌雄亲参分离：步骤b加海水2h后，亲参攀爬至水面上方，发现亲参产精、产卵则立即抓出，所有产精的雄参放置在单独的产精桶中，所有产卵的雌参放置在单独的产卵桶中；
d、持续刺激：步骤c之后，每隔15min，用瓢舀起桶中的海水对未产精、产卵的亲参进行流水冲击，将攀爬至水面上方的亲参冲击至脱落为止，之后亲参会重新攀爬至水面上方，刺激尚未产卵的雌参开始产卵；每隔15min，对步骤c产卵桶中停止产卵的雌参进行持续刺激，搅动产卵桶水体形成旋涡水流，使雌参脱离附着状态，漂浮于水中，之后雌参会重新附着爬壁，刺激停止产卵的雌参继续产卵。持续刺激期间发现未产精、产卵的亲参产精、产卵则立即抓出，所有产精的雄参放置在步骤c的产精桶中，所有产卵的雌参放置在步骤c的产卵桶中。
e、湿法人工授精：步骤b加海水8h后；将精子和卵子按照体积比为1:50进行湿法人工授精，调整受精卵密度至约25万个/吨海水进行后续孵化。
实施例3
a、亲参处理：于2018年6月份，在海南三亚的具有礁石的天然海域海底采集体长20cm以上的野生玉足海参作为预备的亲参群体，此时无法判断亲参性别，对亲参进行饥饿处理，每天4次及时清理亲参排出的泥沙等排泄物、100％换水，直至水体清洁无泥沙排泄物为止，使亲参产精或产卵时不产生排泄物污染受精卵；
b、阴干催产：将步骤a中的玉足海参亲参转移到无水的桶中，海参保持分散不互相叠压，阴干处理2.0h，对亲参进行流水冲击后，继续加海水至0.7m深；
c、雌雄亲参分离：步骤b加海水2h后，亲参攀爬至水面上方，发现亲参产精、产卵则立即抓出，所有产精的雄参放置在单独的产精桶中，所有产卵的雌参放置在单独的产卵桶中；
d、持续刺激：步骤c之后，每隔30min，用瓢舀起桶中的海水对未产精、产卵的亲参进行流水冲击，将攀爬至水面上方的亲参冲击至脱落为止，之后亲参会重新攀爬至水面上方，刺激尚未产卵的雌参开始产卵；每隔30min，对步骤c产卵桶中停止产卵的雌参进行持续刺激，搅动产卵桶水体形成旋涡水流，使雌参脱离附着状态，漂浮于水中，之后雌参会重新附着爬壁，刺激停止产卵的雌参继续产卵。持续刺激期间发现未产精、产卵的亲参产精、产卵则立即抓出，所有产精的雄参放置在步骤c的产精桶中，所有产卵的雌参放置在步骤c的产卵桶中。
e、湿法人工授精：步骤b加海水8h后；将精子和卵子按照体积比为1:100进行湿法人工授精，调整受精卵密度至约50万个/吨海水进行后续孵化。
对比实施例1
参考实施例1，不同之处在于步骤d中，只对未产精、产卵的亲参进行了持续流水冲击，未对已经分离的停止产卵的雌参进行持续旋涡水流刺激。结果显示：总共104头预备的亲参中，发现共有31头产精的雄参，13头产卵的雌参，得到受精卵约675万个，雌参的平均产卵量约为51.92万个/头，胚胎存活数约为610万个，孵化率为90.37％。
对比实施例2
参考实施例1，不同之处在于采用常规方法进行催产，只进行一次性的催产刺激，即阴干水流冲击刺激后等待亲参产精或产卵(步骤b阴干催产)，未进行步骤d持续刺激。结果在89头预备亲参中，发现有18头产精的雄参，2头产卵的雌参，得到约63万个受精卵，雌参的平均产卵量约为31.50万个/头，胚胎存活数约为56万个，孵化率为88.89％。
对比实施例3
参考实施例1，不同之处在于采用常规方法进行催产，只进行一次性的催产刺激，即阴干水流冲击刺激后等待亲参产精或产卵(步骤b阴干催产)，未进行步骤d持续刺激。结果在523头预备亲参中，发现有63头产精的雄参，17头产卵的雌参，得到约525万个受精卵，雌参的平均产卵量为30.88万个/头，胚胎存活数约为427万个，孵化率为89.90％。
将本发明实施例1与对比实施例1～3进行对比，如表1所示：本发明实施例1的雌参平均产卵量达到145.83万个/头，催产效率远大于对比实施例2(31.50万个/头)和对比实施例3(30.88万个/头)中所采用的常规催产方法(即只进行步骤b阴干催产，未进行步骤d持续刺激)；本发明对诱导玉足海参亲参产卵、产精也具有较好的效果，实施例1中产精雄参的比例为14/56(即25％)，对比实施例2和对比实施例3中的相应比例分别为18/89(20.22％)和63/523(即12.05％)，实施例1中产卵雌参的比例为6/56(即10.71％)，对比实施例2和对比实施例3中的相应比例分别为2/89(2.25％)和17/523(即3.25％)；说明本发明通过增加流水冲击和旋涡水流持续刺激的操作步骤能够显著提高玉足海参的产卵效率，与现有的常规方法相比具备显著性差异及创新性的特征。
表1 不同实施例催产效果对比表
Claims (2)
1.一种通过持续刺激提高玉足海参产卵效率的方法，其特征在于，包括以下步骤：
a、亲参处理：6～9月份，在天然海域海底采集体长20cm以上的野生玉足海参作为预备的亲参群体，此时无法判断亲参性别，对亲参进行饥饿处理，及时清理亲参排出的排泄物并换水，直至水体清洁无排泄物为止，使亲参在产精或产卵时不产生排泄物污染受精卵；
b、阴干催产：将步骤a中的玉足海参亲参转移到无水的桶中，海参保持分散不互相叠压，阴干处理，对亲参进行流水冲击后，继续加海水至0.7～1.2m深；
c、雌雄亲参分离：步骤b加海水后，亲参攀爬至水面上方，发现亲参产精、产卵则立即抓出，所有产精的雄参放置在单独的产精桶中，所有产卵的雌参放置在单独的产卵桶中；
d、持续刺激：步骤c之后，每隔15～30min对攀爬至水面上方的未产精、产卵的亲参用流水冲击至脱落为止，之后亲参会重新附着爬壁；每隔15～30min，搅动产卵桶水体形成旋涡水流，使停止产卵的雌参脱离附着状态，漂浮于水中，之后雌参会重新附着爬壁；持续刺激期间发现未产精、产卵的亲参产精、产卵则立即抓出，所有产精的雄参放置在步骤c所述的产精桶中，所有产卵的雌参放置在步骤c所述的产卵桶中；
e、湿法人工授精：将精子和卵子进行湿法人工授精，调整受精卵密度至25～50万个/吨海水进行后续孵化。
2.根据权利要求1所述的通过持续刺激提高玉足海参产卵效率的方法，其特征在于，步骤b所述的阴干处理的时间为2.0～2.5h。
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| CN109220913B (zh) | 2020-07-28 |
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