CN113041405A - 一种含透明质酸和四氢嘧啶的人体润滑液及其制备方法和应用 - Google Patents
一种含透明质酸和四氢嘧啶的人体润滑液及其制备方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种含透明质酸和四氢嘧啶的人体润滑液及其制备方法和应用,润滑液包括:透明质酸或其盐1%‑10%、四氢嘧啶1%‑10%、硫酸软骨素0.1%‑5%、刺梨提取物2%‑10%。该人体润滑液有效成分安全无副作用,可以很好的达到润滑和避孕的效果,且有效成分具有生物相容性和生物可降解性,使用后不需要冲洗排出体外,并能润养修复阴道,有利于女性身体健康。
Description
技术领域
本发明涉及一种含透明质酸和四氢嘧啶的人体润滑液及其制备方法和应用,属于性保健用品技术领域。
背景技术
人体润滑液是有别于机械使用、特别为人体设计的润滑剂,具有广泛的适用性和较高的安全性。人体润滑剂能增加润滑效果,同时更具有减少皮肤损伤,降低细菌、病毒等有害微生物对人体的侵蚀的作用;还能有效减少安全套的破损,降低意外受孕的几率。优秀的人体润滑剂是人体分泌物的补充剂,与人体体液类似,其具有无色、无嗅、无味、无油腻感的特性。
目前,人类有效的避孕手段有橡胶安全套、口服避孕药、外用避孕药三类。外用避孕药主要有避孕栓、避孕膜、避孕凝胶(也叫胶冻),这类外用避孕药是女性阴道给药,直接在女性阴道内杀死精子,使精子无法进入女性子宫,从而达到避孕的作用,其中避孕凝胶是目前外用避孕药在实际过程中避孕有效率最高的一种避孕方式,壬苯醇醚-9作为一种有效的避孕成分,可以降低精子细胞膜的表面活性,使其不能穿过宫颈口从而可以有效的达到避孕效果,但是由于其为化学合成的细胞毒性剂,长期使用会对女性的阴道造成不可避免的损伤,从而造成女性身体的损伤。且凝胶用后需要冲洗排出体外,增加了使用的不方便性。
发明内容
针对现有技术中避孕凝胶存在的不足,本发明提供了一种新型的人体润滑液,该人体润滑液有效成分安全无副作用,可以很好的达到润滑和避孕的效果,且有效成分具有生物相容性和生物可降解性,使用后不需要冲洗排出体外,并能润养修复阴道,有利于女性身体健康。
具体来说,本发明具有以下技术方案:
一种人体润滑液,其包括以下质量百分含量的成分:透明质酸或其盐1%-10%、四氢嘧啶1%-10%、硫酸软骨素0.1%-5%、刺梨提取物2%-10%。
优选的,所述人体润滑液包括以下质量百分含量的成分:透明质酸或其盐3%-6%,四氢嘧啶2%-5%,硫酸软骨素0.5%-2%,刺梨提取物5%-8%。
进一步的,透明质酸(Hyaluronic Acid, HA)是一种天然存在于人体组织细胞间质中的高分子多糖,其由呈直链的D-葡糖醛酸与N-乙酰葡糖胺的交替单元形成,广泛应用于医药、护肤品、食品等领域,安全性高。透明质酸分子在空间上呈刚性螺旋柱形,柱的内侧由于存在大量的羟基而产生强吸水性,另一方面由于羟基的连续定向排列,又在透明质酸分子链上形成憎水区,使得透明质酸能形成三维网状结构。透明质酸还有不同类型的盐,例如钠盐、钾盐、钙盐、锌盐等,常用的为钠盐。
进一步的,所述透明质酸或其盐为一种或多种,透明质酸或其盐的分子量可以从5kDa-2500kDa范围内选择。不同分子量的透明质酸或其盐都能形成三维网络结构,同时,分子量较低的透明质酸或其盐还具有促进表皮细胞的增殖和分化、清除氧自由基、抗炎等功能,预防和修复皮肤损伤,分子量较高的透明质酸或其盐分子链链长较长,形成的三维网状结构更为致密。
优选的,所述透明质酸或其盐为混合物,更优选为高分子透明质酸或其盐和低分子透明质酸或其盐的混合物。其中,高分子透明质酸或其盐的分子量为800kDa-2500kDa,优选为1000kDa-2000kDa,低分子透明质酸或其盐的分子量为5kDa-50kDa,优选为10kDa-20kDa。更为优选的,高分子透明质酸或其盐和低分子透明质酸或其盐的质量比为1-5:1。
进一步的,刺梨(Rosa roxburghii)为蔷薇科多年生落叶灌木缫丝花的果实,又名金黄果、茨梨、刺梨子,别名刺菠萝、送春归、刺酸梨子、文先果,产自贵州西部特有野生资源地,生长于海拔500-2500m的向阳山坡、沟谷、路旁及灌丛中,是一种稀有的天然野果。研究表明,刺梨富含超氧化物歧化酶、18种氨基酸以及葡萄糖、多种醇、黄酮、酸等化合物,具有极好的抗炎、抗敏、抗衰老、提高皮肤活力以及抗氧化等活性。本发明所用刺梨提取物指的是刺梨的水溶性提取物,该水溶性刺梨提取物是从刺梨中提取后经浓缩或干燥而得,可以呈溶液形式或冻干粉形式,优选为冻干粉形式。
进一步的,四氢嘧啶,又称依克多因,其系统名称是2-甲基-1,4,5,6-四氢嘧啶-4-羧酸,四氢嘧啶不仅是一种重要的渗透压补偿溶质,而且对处于高温、高盐、冷冻、干燥、辐射等不良环境刺激下的细胞和生物大分子(生物膜、蛋白质、酶和核酸)有着很好的保护作用。四氢嘧啶分子的环状结构具有较强的电负性,容易与水分子形成氢键,增强水分子的缔合能力,使水分子在其周围定向排列,改变水分子的空间排布,具有长效保湿的作用。
进一步的,硫酸软骨素(CS)是共价连接在蛋白质上形成蛋白聚糖的一类糖胺聚糖。硫酸软骨素广泛分布于动物组织的细胞外基质和细胞表面,糖链由交替的葡萄糖醛酸和N-乙酰半乳糖胺(又称N-乙酰氨基半乳糖)二糖单位组成,通过一个似糖链接区连接到核心蛋白的丝氨酸残基上。硫酸软骨素存在于从线虫到人除植物外的所有生物中,发挥着许多重要的生理功能。虽然多糖的主链结构并不复杂,但就硫酸化程度、硫酸基和两种差异向异构糖醛酸在链内的分布来说,呈现高度的不均一性。硫酸软骨素的精细结构决定着功能的特异性和与多种蛋白质分子的相互作用。
进一步的,上述人体润滑液除了透明质酸或其盐、四氢嘧啶、硫酸软骨素、刺梨提取物这几种有效成分外,还包括pH调节剂和渗透压调节剂,以使人体润滑液满足使用要求。本发明人体润滑液为凝胶状,其pH为3.8-4.4。
进一步的,所述pH调节剂和渗透压调节剂可以从现有技术中的报道中进行选择,例如所述pH调节剂可以选自硼酸缓冲液、磷酸缓冲液、碳酸缓冲液、盐酸、氢氧化钠中的一种或多种。所述渗透压调节剂可以选自氯化钠或/和葡萄糖。
进一步的,所述人体润滑液还含有溶剂,所述溶剂为水。
本发明还提供了一种人体润滑液的制备方法,该方法包括以下步骤:
(1)将低分子透明质酸或其盐、四氢嘧啶、刺梨提取物、渗透压调节剂溶解在水中,得到溶液A;
(2)将高分子透明质酸或其盐、硫酸软骨素加入溶液A中,加热充分搅拌,得到溶液B;
(3)用pH调节剂调节溶液B的pH至3.8-4.4,灭菌,得人体润滑液。
进一步的,步骤(2)中,加热至40-50℃。
进一步的,步骤(3)中,灭菌方式为湿热灭菌。
上述人体润滑液通过透明质酸或其盐、四氢嘧啶、硫酸软骨素、刺梨提取物的复配,可以达到很好的避孕、阴道润滑、阴道修复功效。因此,本发明还提供了上述人体润滑液在避孕、阴道润滑、阴道修复领域的应用。
本发明通过各成分的复配,可以达到很好的避孕、阴道润滑、阴道修复功效,具有以下优势:
(1)透明质酸或其盐、四氢嘧啶、硫酸软骨素、刺梨提取物四者协同复配,一方面可以增强对透明质酸酶的抑制作用,使精子无法穿透卵子外层发生受精作用,而且透明质酸和硫酸软骨素复配形成的凝胶网络可以很好的保护和储藏其他成分,实现性生活过程中的长效避孕效果;另一方面,透明质酸和硫酸软骨素复配,可以增加凝胶对子宫口的封闭作用,使精子无法进入子宫从而失去活力达到避孕效果。通过这两方面双重避孕,增加避孕效果。
(2)透明质酸或其盐、四氢嘧啶、硫酸软骨素、刺梨提取物四者协同复配,所得人体润滑液的润滑性能大大提高,且通过抑制透明质酸酶的活性减少了对透明质酸或其盐的降解,使得润滑液的作用时间延长。
(3)本发明人体润滑液还可以很好的修复阴道黏膜,减少性生活中阴道黏膜受损对女性身体的损伤,且该人体润滑液具有一定的抑菌功效,有效避免黏膜受损可能带来的炎症反应。
(4)本发明人体润滑液不含防腐剂,有效成分安全无副作用,使用后不需要冲洗排除体外,且可润养修复阴道。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明进行进一步说明,应该明白的是,下述说明仅是示例性的,并不对其内容进行限制。
下述实施例中,所用透明质酸钠和四氢嘧啶均购自华熙生物科技股份有限公司,所用刺梨提取物为水溶性刺梨提取物,为市购产品。其他材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
实施例1
将1g低分子透明质酸钠(MW=15kDa)、3g四氢嘧啶、6g刺梨提取物、0.9g氯化钠加入适量水中,搅拌至全部溶解。将4g高分子透明质酸钠(MW=1500kDa)、1g硫酸软骨素加入上述溶液中,加热至45℃,搅拌使它们充分溶解溶胀,然后用磷酸缓冲溶液调节溶液pH至4.0,补水至100g,湿热灭菌,得人体润滑液。
实施例2-8
按照实施例1的方法制备人体润滑液,不同的是:低分子透明质酸钠、高分子透明质酸钠、四氢嘧啶、刺梨提取物、硫酸软骨素的分子量及用量如下表1所示。
对比例1-4
按照实施例1的方法制备人体润滑液,不同的是:低分子透明质酸钠、高分子透明质酸钠、四氢嘧啶、刺梨提取物、硫酸软骨素的分子量及用量如下表2所示。
验证例1 避孕效果
1、精液采集与常规品质测定
选取膘型中等、体质健康、性欲旺盛的同一只小尾寒羊种公羊,用假阴道法采集精液。精液采出后,立即在37℃条件下进行常规品质评定,要求原精液密度达到密级,活率在0.8以上,无异常气味,色泽乳白,形态正常,用于试验。
2、精液处理
精液常规检查完成后,将符合要求的新鲜精液根据活力和密度按3~6 倍比例,35℃条件下在超净工作台上加入实施例和对比例的润滑液,混匀后于4℃冰箱中放置2~3小时。
3、精子活率评定
将上述精液摇匀后,取中层精液10μL 滴于37℃恒温板上等温预热的载玻片上,以新鲜精液作为对照,盖片后置于配有37℃恒温台的显微镜上放大400倍检查精子1000个,分别计数呈直线运动精子数和总精子数,计算精子活率。精子活率=呈直线运动精子数/总精子数×100%。结果见下表3。
4、精子透明质酸酶活性测定
4.1 底物膜片的制备
称取干明胶1.2 g,加超纯水10 mL,水浴锅80℃条件下溶化成均质液(浓度约12%)。称取透明质酸钠0.55 g,加8 mL 超纯水,摇匀,使其溶解成透明液。再取4 mL明胶溶液加入其中,摇匀,制成均质透明的NaHY-Gelatin基质液。取NaHY-Gelatin 基质液100μL,滴于干燥、清洁的载玻片上,用另一载玻片将其推成约45 mm×25 mm大小的均质薄膜,在室温下干燥18~24 h。将已干燥的底物膜片在40% 福尔马林溶液中固定1 h,取出后用流水冲洗20 min,垂直插入提篮或切片盒中,4℃冰箱保存备用。
4.2 精子透明质酸酶活性测定
涂片前取出底物膜片,用pH=4.0的醋酸-醋酸钠缓冲液(以0.2 moL/L NaAc 1.8mL +0.2 moL /L HAc 8.2 mL 配制)缓冲20~30 min,以纠正基质膜pH值。
将混有实施例和对比例润滑液的精液取100μL 加入离心管,以2400 r/min离心10min,弃精浆,沉淀物中加入pH值为7.3 的PBS缓冲液0.2 mL,摇匀;再以2400 r/min离心10min,弃上清液,之后将沉淀物悬浮于0.3 mL的PBS缓冲液中。以新鲜精液为对照组,同样进行上述处理。
吸取精子悬浮液约40μL 滴于底物膜片上,并以吸管管身将其滚涂均匀。置于38℃恒湿恒温箱中孵育,3h后取出,室温条件下干燥后用0.02% 甲苯胺蓝液染色20 s后平放于滤纸上,室温条件下干燥后置于相差显微镜下放大400倍观察精子200个,分别计数头部出现圆形晕圈精子数和总精子数,计算透明质酸酶阳性反应率,透明质酸酶阳性反应率=圆形晕圈精子数/总精子数×100%;用显微测微尺测量100个精子晕圈直径,取其平均值,判断透明质酸酶活性强度。结果见下表3。
5、结论:
与实施例、对比例的润滑液混匀放置2~3小时的精液,通过在超薄透明质酸钠-明胶底膜上孵育,来观察酶反应情况。实验结果表明,实施例中的精子透明质酸酶阳性反应率和平均成环直径均比对比例和对照组显著减少,表明本发明实施例的润滑液可以很好的抑制透明质酸酶的活性。
从上表可以看出,精子活率与透明质酸酶活性有一定的正相关性,经实施例处理过的精液,其精子活率和透明质酸酶活性均比对比例和对照组显著降低,说明本发明实施例制备的润滑液可以抑制透明质酸酶的活性,同时降低精子活率,从而发挥避孕作用。
验证例2 润滑性能
用MXD-01 摩擦系数仪进行润滑性测定。
摩擦系数仪主要由不锈钢水平面、质量恒定的滑块和力值传感器组成。在滑块底面和水平面上分别固定PE膜和纤维膜,将实施例和对比例制备的人体润滑液涂于PE膜和纤维膜之间,以涂抹水的作为对照,测定时将滑块与力值传感器连接并放于水平面上,力值传感器以恒定的速度拉动滑块运动一段距离后停止,即可测出滑块与水平面之间的摩擦系数,测定三次后仪器自动得出平均值。测定结果如下表4所示。
结论:动摩擦系数越小,表示润滑液的润滑性能越强。通过上表可以看出,涂抹本发明实施例人体润滑液后PE膜和纤维膜之间动摩擦系数明显较对比例的人体润滑液和涂抹水的对照组小,这说明本发明润滑液的存在减少了两者之间的摩擦力。
验证例3 细胞修复性能
1、制备人体润滑液浸提液
根据中华人民共和国国家标准《医疗器械生物学评价第12部分:样品制备与参照样品》制备浸提液。将实施例和对比例的人体润滑液通过紫外臭氧箱进行消毒,在无菌超净工作台中将人体润滑液放入无菌的浸提容器中,使消毒后的人体润滑液完全浸泡在溶液中,浸提人体润滑液的介质采用无血清的DMEM培养基。浸提时间为48h,浸提液过滤除菌,密封,4℃保存备用。
2、细胞培养
细胞创伤修复采用ibidi小室,在24孔培养板中形成规则的划痕区域,考察浸提液对人表皮角质形成细胞(HaCaT)向划痕区域迁移能力的影响,以评价人体润滑液是否具有创伤修复的能力。
在新的24孔培养板中,放置ibidi小室,取处于对数生长期的人表皮角质形成细胞HaCaT,以3×105个/mL的密度接种于24孔板中的ibidi小室中,小室的左右两孔各70μL细胞悬液,小室外补充400μL完全培养液,37℃、5% CO2条件下培养24h。取出小室,吸弃旧培养液,加入1mL浸提液溶液。浸提液溶液为实验例及对比例浸提得到的样品,用DMEM高糖培养液配制成10%浓度(v/v),用0.22μm滤膜过滤除菌后使用。对照组用不含浸提液的培养液代替。继续培养24h后观察拍照。结果用Image J软件分析计算迁移率。
迁移率=实验组划痕区域面积/对照组划痕区域面积×100%
结论:细胞迁移率越高表示创伤修复能力越强。从上表数据可以看出,本发明实施例的人体润滑液样品表现出了较强的人表皮细胞迁移能力,细胞迁移率均达到43.22%以上,表明本发明人体润滑液具有很好的创伤修复功能。其中以实施例1的人体润滑液创伤修复效果最好,其迁移率显著优于其他实施例和对比例样品数据。对比例的迁移率明显降低,这说明本发明中润滑液的各组分以合理的配比协同作用在创伤修复功能上达到了较好的效果,缺一不可。
综上所述,本发明的人体润滑液具有很好的避孕效果,且润滑性能和细胞修复性能优异。
Claims (10)
1.一种人体润滑液,其特征是:包括以下质量百分含量的成分:透明质酸或其盐1%-10%、四氢嘧啶1%-10%、硫酸软骨素0.1%-5%、刺梨提取物2%-10%。
2.根据权利要求1所述的人体润滑液,其特征是:包括以下质量百分含量的成分:透明质酸或其盐3%-6%,四氢嘧啶2%-5%,硫酸软骨素0.5%-2%,刺梨提取物5%-8%。
3.根据权利要求1或2所述的人体润滑液,其特征是:所述透明质酸或其盐为一种或多种,透明质酸或其盐的分子量为5kDa-2500kDa;所述刺梨提取物是刺梨的水溶性提取物。
4.根据权利要求1或2所述的人体润滑液,其特征是:所述透明质酸或其盐为高分子透明质酸或其盐和低分子透明质酸或其盐的混合物,其中,高分子透明质酸或其盐的分子量为800kDa-2500kDa,优选为1000kDa-2000kDa,低分子透明质酸或其盐的分子量为5kDa-50kDa,优选为10kDa-20kDa。
5.根据权利要求4所述的人体润滑液,其特征是:高分子透明质酸或其盐和低分子透明质酸或其盐的质量比为1-5:1。
6.根据权利要求4所述的人体润滑液,其特征是:还包括pH调节剂、渗透压调节剂和水;优选的,所述pH调节剂选自硼酸缓冲液、磷酸缓冲液、碳酸缓冲液、盐酸和氢氧化钠中的一种或多种,所述渗透压调节剂选自氯化钠或/和葡萄糖。
7.根据权利要求1或6所述的人体润滑液,其特征是:所述人体润滑液的pH为3.8-4.4。
8.一种权利要求4所述的人体润滑液的制备方法,其特征是,包括以下步骤:
(1)将低分子透明质酸或其盐、四氢嘧啶、刺梨提取物、渗透压调节剂溶解在水中,得到溶液A;
(2)将高分子透明质酸或其盐、硫酸软骨素加入溶液A中,加热充分搅拌,得到溶液B;
(3)用pH调节剂调节溶液B的pH至3.8-4.4,灭菌,得人体润滑液。
9.根据权利要求8所述的制备方法,其特征是:步骤(2)中,加热至40-50℃;步骤(3)中,灭菌方式为湿热灭菌。
10.权利要求1-7中任一项所述的人体润滑液在避孕、阴道润滑、阴道修复领域的应用。
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