CN113038967A - 人源化抗c5抗体及其用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及使用抗C5抗体抑制补体信号传导。具体地，本发明涉及通过使个体与抗C5抗体接触来治疗个体中补体介导的疾病或补体介导的病症的方法。

Description

人源化抗C5抗体及其用途
相关申请的引证
本申请要求于2018年9月6日提交的美国临时申请号62/727,666和于2019年4月24日提交的美国临时申请号62/837,833的优先权，其各自内容通过引用以其全文结合于本文。
关于联邦资助的研究或开发的声明
本发明是在美国国立卫生研究院(NIH)授予的NIH授予号AI085596和AI117410的资助下完成的。政府对本发明具有某些权利。
背景技术
补体系统是先天免疫的一部分，其在宿主防御中起关键作用。然而，激活的补体还具有引起显著组织损伤和破坏的潜力，并且已经发现失调的补体活性与许多罕见和常见疾病相关，如，阵发性夜间血红蛋白尿症(PNH)、非典型溶血性尿毒症综合征、类风湿性关节炎、年龄相关性黄斑变性等。因此，抗补体疗法是治疗这些人类病症的有期望的方式。
补体C5是补体激活的末端途径中的关键蛋白并且是用于生成有效的促炎介质C5a以及细胞溶解膜攻击复合物(MAC)的前体蛋白。
许多人类炎性和自身免疫性疾病是由C5a和/或MAC介导的，并且阻断C5激活应阻止C5a和MAC生成并且具有治疗价值。人源化小鼠抗人类C5 mAb，依库珠单抗(eculizumab)，已经用于治疗两种补体介导的疾病：阵发性夜间血红蛋白尿症(PNH)和非典型溶血性尿毒症综合征(aHUS)。然而，并非所有PNH患者都对依库珠单抗治疗有反应，并且非反应性的原因之一是人类C5的基因多态性，其中与依库珠单抗结合的表位缺失。此外，由于C5的高血浆浓度和靶向介导的抗体的快速去除，依库珠单抗必须以高剂量和频率向患者施用。
因此，本领域需要具有更长半衰期的抗人类C5 mAb，其可以经由C5上的不同机制和接触位点抑制末端的补体活性，并且由此更有效并更方便地治疗补体依赖性病变。本发明解决并满足这些和其他需要。
发明内容
在一个实施方式中，本发明包含特异性结合C5的抗体。在一种实施方式中，C5是人类C5。在一个实施方式中，抗体是单克隆抗体。在一个实施方式中，抗体是人源化抗体。在一个实施方式中，抗体是嵌合抗体。在一些实施方式中，抗体是全长抗体。在一些实施方式中，抗体是抗体片段，其包含但不限于Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2以及scFv。在一些实施方式中，抗体是构建体的一部分，例如包含抗体和靶向部分或效应子部分的融合构建体。在一些实施方式中，抗体是缀合构建体(如，抗体药物缀合构建体)的一部分。
在一些实施方式中，抗C5抗体表现出与C5的pH依赖性结合。在一些实施方式中，pH依赖性抗C5抗体在更中性pH(例如，约pH 7.4；如，在血液中发现的)下比在更酸性pH(例如，约pH 5.8；如，在内体中发现的)下与C5结合更强。在一些实施方式中，pH依赖性抗C5抗体在更酸性pH(例如，约pH 5.8；如，在内体中发现的)下比在中性pH(例如，约pH 7.4；如，在血液中发现的)下更快地从C5解离。
在一个实施方式中，pH依赖性抗体特异性结合人类C5，其中，pH依赖性抗体包含选自由以下各项组成的组中的至少一个CDR：VH-CDR1，包含相对于SEQ ID NO:3具有至少一个取代的SEQ ID NO:3的变体；VH-CDR2，包含相对于SEQ ID NO:4具有至少一个取代的SEQ IDNO:4的变体；VH-CDR3，包含相对于SEQ ID NO:5具有至少一个取代SEQ ID NO:5的变体；VL-CDR1，包含相对于SEQ ID NO:8具有至少一个取代的SEQ ID NO:8的变体；VL-CDR2，包含相对于SEQ ID NO:9具有至少一个取代的SEQ ID NO:9的变体；以及VL-CDR3，包含相对于SEQID NO:10具有至少一个取代的SEQ ID NO:10的变体。
在一个实施方式中，抗体包含选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ IDNO:8；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:11或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:11或其一种或多种变体。
在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列或其变体的重链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:13的氨基酸序列或其变体的轻链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:13的氨基酸序列或其变体的轻链。
在一个实施方式中，抗体包含选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ IDNO:14；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:14；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列或其变体的重链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:16的氨基酸序列或其变体的轻链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:16的氨基酸序列或其变体的轻链。
在一个实施方式中，抗体包含选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:17；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ IDNO:8；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:17；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:19的氨基酸序列或其变体的重链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:7的氨基酸序列或其变体的轻链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:19的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:7的氨基酸序列或其变体的轻链。
在一个实施方式中，抗体包含选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:20；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ IDNO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:20；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:22的氨基酸序列或其变体的重链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:22的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。
在一个实施方式中，抗体包含选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:26；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ IDNO:8；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:29或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:26；VH-CDR3：SEQID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:29或其一种或多种变体。
在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:28的氨基酸序列或其变体的重链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:31的氨基酸序列或其变体的轻链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:28的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:31的氨基酸序列或其变体的轻链。
在一个实施方式中，抗体包含选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:34；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ IDNO:8；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:34；VH-CDR3：SEQID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:36的氨基酸序列或其变体的重链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:7的氨基酸序列或其变体的轻链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:36的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:7的氨基酸序列或其变体的轻链。
在一个实施方式中，抗体包含选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:37；VH-CDR2：SEQ ID NO:38；VH-CDR3：SEQ ID NO:39；VL-CDR1：SEQ IDNO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:37；VH-CDR2：SEQ ID NO:38；VH-CDR3：SEQ ID NO:39；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:41的氨基酸序列或其变体的重链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:41的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。
在一个实施方式中，抗体包含选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:42；VH-CDR2：SEQ ID NO:43；VH-CDR3：SEQ ID NO:44；VL-CDR1：SEQ IDNO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:42；VH-CDR2：SEQ ID NO:43；VH-CDR3：SEQ ID NO:44；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:46的氨基酸序列或其变体的重链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:46的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。
在一个实施方式中，抗体包含选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:47；VH-CDR2：SEQ ID NO:48；VH-CDR3：SEQ ID NO:49；VL-CDR1：SEQ IDNO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:47；VH-CDR2：SEQ ID NO:48；VH-CDR3：SEQ ID NO:49；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:51的氨基酸序列或其变体的重链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:51的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。
在一个实施方式中，抗体包含选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:52；VH-CDR2：SEQ ID NO:53；VH-CDR3：SEQ ID NO:54；VL-CDR1：SEQ IDNO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:52；VH-CDR2：SEQ ID NO:53；VH-CDR3：SEQ ID NO:54；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:56的氨基酸序列或其变体的重链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:56的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。
在一个实施方式中，抗体包含选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:47；VH-CDR2：SEQ ID NO:57；VH-CDR3：SEQ ID NO:49；VL-CDR1：SEQ IDNO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:47；VH-CDR2：SEQ ID NO:57；VH-CDR3：SEQ ID NO:49；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:59的氨基酸序列或其变体的重链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:59的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。
在一个实施方式中，抗体包含选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:37；VH-CDR2：SEQ ID NO:62；VH-CDR3：SEQ ID NO:39；VL-CDR1：SEQ IDNO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体包括CDR：SEQ ID NO:37；VH-CDR2：SEQ ID NO:62；VH-CDR3：SEQ ID NO:39；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:64的氨基酸序列或其变体的重链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:64的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。
在一个实施方式中，抗体包含选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:42；VH-CDR2：SEQ ID NO:65；VH-CDR3：SEQ ID NO:44；VL-CDR1：SEQ IDNO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体包括CDR：SEQ ID NO:42；VH-CDR2：SEQ ID NO:65；VH-CDR3：SEQ ID NO:44；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:67的氨基酸序列或其变体的重链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:67的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。
在一个实施方式中，抗体包含选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:52；VH-CDR2：SEQ ID NO:68；VH-CDR3：SEQ ID NO:54；VL-CDR1：SEQ IDNO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体包括CDR：SEQ ID NO:52；VH-CDR2：SEQ ID NO:68；VH-CDR3：SEQ ID NO:54；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:70的氨基酸序列或其变体的重链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ ID NO:70的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。
在各种实施方式中，具有在本文描述的任何可变区的在本文描述的本发明的任何抗体可以包含Fc片段或Fc结构域。例如，在一些实施方式中，在本文描述的抗体包含免疫球蛋白的Fc片段。示例性免疫球蛋白包括但不限于IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgM、IgA、IgE以及IgD。在一个实施方式中，抗体包含人类IgG4 Fc。在一个实施方式中，抗体包含含有SEQ IDNO:32的氨基酸序列的人类IgG4 Fc。在一个实施方式中，抗体包含相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变的人类IgG4 Fc。在一个实施方式中，相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变的人类IgG4 Fc包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体包含相对于SEQ IDNO:32具有S108P突变、M308L突变和N314A突变的人类IgG4 Fc。在一个实施方式中，相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变、M308L突变和N314A突变的人类IgG4 Fc包含SEQ ID NO:61的氨基酸序列。
在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的至少一个：mAb L3-1、L1-2、H1-4、H1-8/L1-9以及H2-6/L3-5。在一个实施方式中，抗体是mAb H1-8/L1-9变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含相对于SEQ ID NO:4在VHCDR2中的位置#4处的脯氨酸残基(即，P4)的取代。在各种实施方式中，P4处的取代是P4→F4(即，P4F)、P4→L4(即，P4L)、P4→M4(即，P4M)、P4→W4(即，P4W)或P4→I4(即，P4I)。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含相对于SEQ ID NO:4在VHCDR2中的位置#9处的苏氨酸残基(即，T9)的取代。在各种实施方式中，T9处的取代是T9→H9(即，T9H)、T9→F9(即，T9F)、T9→L9(即，T9L)、T9→M9(即，T9M)、T9→W9(即，T9W)或T9→I9(即，T9I)。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含相对于SEQ ID NO:4在VHCDR2中的位置#4处的脯氨酸残基(即，P4)的取代和相对于SEQ ID NO:4在VH CDR2中的位置#9处的苏氨酸残基(即，T9)的取代。在各种实施方式中，P4处的取代是P4→F4(即，P4F)、P4→L4(即，P4L)、P4→M4(即，P4M)、P4→W4(即，P4W)或P4→I4(即，P4I)；并且T9处的取代是T9→H9(即，T9H)、T9→F9(即，T9F)、T9→L9(即，T9L)、T9→M9(即，T9M)、T9→W9(即，T9W)或T9→I9(即，T9I)。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含相对于SEQ ID NO:5在VHCDR3中的位置#16(即，V16)处的缬氨酸残基的取代。在各种实施方式中，V16处的取代是V16→F16(即，V16F)、V16→E16(即，V16E)或V16→W16(即，V16W)。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含相对于SEQ ID NO:20在VHCDR1中的位置#9(即，L9)处的亮氨酸残基的取代。在各种实施方式中，L9处的取代是L9→W9(即，L9W)、L9→I9(即，L9I)、L9→V9(即，L9V)、L9→Y9(即，L9Y)或L9→F9(即，L9F)。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含选自由以下各项组成的组的两个或更多个取代中的取代：相对于SEQ ID NO:4的VH CDR2中的脯氨酸4(P4)、相对于SEQID NO:4的VH CDR2中的苏氨酸9(T9)、相对于SEQ ID NO:5的VH CDR3中的缬氨酸16(V16)以及相对于SEQ ID NO:20的VH CDR1中的亮氨酸9(L9)。在各种实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含由以下各项组成组中的两个或更多个处的取代：相对于SEQ ID NO:4在VHCDR2中的脯氨酸4(即，P4)、相对于SEQ ID NO:5在VH CDR3中的缬氨酸16(即，V16)以及相对于SEQ ID NO:20在VH CDR1中的亮氨酸9(即，L9)，抗C5抗体或其抗原结合片段包含选自以下各项组成的组中的两个或更多个取代：L9I/P4M、L9I/P4W、L9I/P4F、L9F/P4M、L9F/P4W、L9F/P4F、L9I/P4M/V16W、L9I/P4W/V16W、L9I/P4F/V16W、L9F/P4M/V16W、L9F/P4W/V16W、L9F/P4F/V16W、L9I/P4M/V16E、L9I/P4W/V16E、L9I/P4F/V16E、L9F/P4M/V16E、L9F/P4W/V16E、L9F/P4F/V16E、L9I/P4M/T9H/V16W、L9I/P4W/T9H/V16W、L9I/P4F/T9H/V16W、L9F/P4M/T9H/V16W、L9F/P4W/T9H/V16W、L9F/P4F/T9H/V16W、L9I/P4M/T9H/V16E、L9I/P4W/T9H/V16E、L9I/P4F/T9H/V16E、L9F/P4M/T9H/V16E、L9F/P4W/T9H/V16E以及L9F/P4F/T9H/V16E。
在一个实施方式中，本发明涉及治疗个体的补体途径介导的疾病或病症的方法，其包括向个体施用权利要求的抗C5抗体的步骤。在一个实施方式中，疾病或病症至少选自由以下各项组成的组中的一个：黄斑变性(MD)、年龄相关性黄斑变性(AMD)、缺血再灌注损伤、关节炎、类风湿性关节炎、狼疮、溃疡性结肠炎、中风、术后全身炎症综合征、哮喘、过敏性哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)综合征、重症肌无力、视神经脊髓炎(NMO)、多发性硬化、移植物功能延迟恢复、抗体介导性排斥、非典型溶血性尿毒症(aHUS)综合征、视网膜中央静脉阻塞(CRVO)、视网膜中央动脉阻塞(CRAO)、大疱性表皮松解、脓毒症、器官移植、炎症(包括但不限于与心肺分流术和肾透析相关的炎症)、C3肾小球病、膜性肾病、IgA肾病、肾小球肾炎(包括但不限于抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)介导的肾小球肾炎、狼疮肾炎以及它们的组合)、ANCA介导的血管炎、志贺毒素诱导的HUS以及抗磷脂抗体诱导的妊娠丧失或者其任何组合。在一些实施方式中，AP介导的疾病是C3肾小球病。在一些实施方式中，AP介导的疾病是黄斑变性，如，年龄相关性黄斑变性。在一个实施方式中，抗C5抗体的施用抑制C5a或C5b蛋白的生成。
在一个实施方式中，本发明涉及一种降低个体的补体系统的活性的方法，其中，方法包括经由选自由以下各项组成的组中的施用途径向个体施用抗体：肠内施用、肠胃外施用以及它们的组合，并且其中，抗体包含具有以下氨基酸序列的六个互补决定区：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一个实施方式中，本发明涉及一种降低个体的补体系统的活性的方法，其中，方法包括经由选自由以下各项组成的组中的施用途径向个体施用抗体：肠内施用、肠胃外施用以及它们的组合，并且其中，抗体包含具有以下氨基酸序列的六个互补决定区：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:11或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一个实施方式中，本发明涉及一种降低个体的补体系统的活性的方法，其中，方法包括经由选自由以下各项组成的组中的施用途径向个体施用抗体：肠内施用、肠胃外施用以及它们的组合，并且其中，抗体包含具有以下氨基酸序列的六个互补决定区：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:14；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一个实施方式中，本发明涉及一种降低个体的补体系统的活性的方法，其中，方法包括经由选自由以下各项组成的组中的施用途径向个体施用抗体：肠内施用、肠胃外施用以及它们的组合，并且其中，抗体包含具有以下氨基酸序列的六个互补决定区：VH-CDR1：SEQ ID NO:17；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一个实施方式中，本发明涉及一种降低个体的补体系统的活性的方法，其中，方法包括经由选自由以下各项组成的组中的施用途径向个体施用抗体：肠内施用、肠胃外施用以及它们的组合，并且其中，抗体包含具有以下氨基酸序列的六个互补决定区：VH-CDR1：SEQ ID NO:20；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一个实施方式中，本发明涉及一种降低个体的补体系统的活性的方法，其中，方法包括经由选自由以下各项组成的组中的施用途径向个体施用抗体：肠内施用、肠胃外施用以及它们的组合，并且其中，抗体包含具有以下氨基酸序列的六个互补决定区：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:26；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:29或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一个实施方式中，本发明涉及一种降低个体的补体系统的活性的方法，其中，方法包括经由选自由以下各项组成的组中的施用途径向个体施用抗体：肠内施用、肠胃外施用以及它们的组合，并且其中，抗体包含具有以下氨基酸序列的六个互补决定区：VH-CDR1：SEQ ID NO:37；VH-CDR2：SEQ ID NO:38；VH-CDR3：SEQ ID NO:39；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一个实施方式中，本发明涉及一种降低个体的补体系统的活性的方法，其中，方法包括经由选自由以下各项组成的组中的施用途径向个体施用抗体：肠内施用、肠胃外施用以及它们的组合，并且其中，抗体包含具有以下氨基酸序列的六个互补决定区：VH-CDR1：SEQ ID NO:42；VH-CDR2：SEQ ID NO:43；VH-CDR3：SEQ ID NO:44；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一个实施方式中，本发明涉及一种降低个体的补体系统的活性的方法，其中，方法包括经由选自由以下各项组成的组中的施用途径向个体施用抗体：肠内施用、肠胃外施用以及它们的组合，并且其中，抗体包含具有以下氨基酸序列的六个互补决定区：VH-CDR1：SEQ ID NO:47；VH-CDR2：SEQ ID NO:48；VH-CDR3：SEQ ID NO:49；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一个实施方式中，本发明涉及一种降低个体的补体系统的活性的方法，其中，方法包括经由选自由以下各项组成的组中的施用途径向个体施用抗体：肠内施用、肠胃外施用以及它们的组合，并且其中，抗体包含具有以下氨基酸序列的六个互补决定区：VH-CDR1：SEQ ID NO:52；VH-CDR2：SEQ ID NO:53；VH-CDR3：SEQ ID NO:54；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一个实施方式中，本发明涉及一种降低个体的补体系统的活性的方法，其中，方法包括经由选自由以下各项组成的组中的施用途径向个体施用抗体：肠内施用、肠胃外施用以及它们的组合，并且其中，抗体包含具有以下氨基酸序列的六个互补决定区：VH-CDR1：SEQ ID NO:47；VH-CDR2：SEQ ID NO:57；VH-CDR3：SEQ ID NO:49；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一个实施方式中，本发明涉及一种降低个体的补体系统的活性的方法，其中，方法包括经由选自由以下各项组成的组中的施用途径向个体施用抗体：肠内施用、肠胃外施用以及它们的组合，并且其中，抗体包含具有以下氨基酸序列的六个互补决定区：VH-CDR1：SEQ ID NO:37；VH-CDR2：SEQ ID NO:62；VH-CDR3：SEQ ID NO:39；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一个实施方式中，本发明涉及一种降低个体的补体系统的活性的方法，其中，方法包括经由选自由以下各项组成的组中的施用途径向个体施用抗体：肠内施用、肠胃外施用以及它们的组合，并且其中，抗体包含具有以下氨基酸序列的六个互补决定区：VH-CDR1：SEQ ID NO:42；VH-CDR2：SEQ ID NO:65；VH-CDR3：SEQ ID NO:44；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一个实施方式中，本发明涉及一种降低个体的补体系统的活性的方法，其中，方法包括经由选自由以下各项组成的组中的施用途径向个体施用抗体：肠内施用、肠胃外施用以及它们的组合，并且其中，抗体包含具有以下氨基酸序列的六个互补决定区：VH-CDR1：SEQ ID NO:52；VH-CDR2：SEQ ID NO:68；VH-CDR3：SEQ ID NO:54；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明是针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)，该重链可变区具有与SEQ ID NO:2或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明是针对人类C5的抗体，其中，抗体具有轻链可变区(vL)，该轻链可变区具有与SEQ ID NO:7或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)和轻链可变区(vL)，其中，该vH区具有与SEQ ID NO:2或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列，并且其中，该vL区具有与SEQ ID NO:7或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明是针对人类C5的抗体，其中，抗体具有轻链可变区(vL)，该轻链可变区具有与SEQ ID NO:13或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)和轻链可变区(vL)，其中，该vH区具有与SEQ ID NO:2或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列，并且其中，该vL区具有与SEQ ID NO:13或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有轻链可变区(vL)，该轻链可变区具有与SEQ ID NO:16大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)和轻链可变区(vL)，其中，该vH区具有与SEQ ID NO:2或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列，并且其中，该vL区具有与SEQ ID NO:16或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)，该重链可变区具有与SEQ ID NO:19大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有轻链可变区(vL)，该轻链可变区具有与SEQ ID NO:7大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)和轻链可变区(vL)，其中，该vH区具有与SEQ ID NO:19或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列，并且其中，该vL区具有与SEQ ID NO:7或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)，该重链可变区具有与SEQ ID NO:22大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一个实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有轻链可变区(vL)，该轻链可变区具有与SEQ ID NO:25大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)和轻链可变区(vL)，其中，该vH区具有与SEQ ID NO:22或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列，并且其中，该vL区具有与SEQ ID NO:25或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)，该重链可变区具有与SEQ ID NO:28大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有轻链可变区(vL)，该轻链可变区具有与SEQ ID NO:31大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)和轻链可变区(vL)，其中，该vH区具有与SEQ ID NO:28或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列，并且其中，该vL区具有与SEQ ID NO:31或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)，该重链可变区具有与SEQ ID NO:41大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)和轻链可变区(vL)，其中，该vH区具有与SEQ ID NO:41或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列，并且其中，该vL区具有与SEQ ID NO:25或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)，该重链可变区具有与SEQ ID NO:46大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)和轻链可变区(vL)，其中，该vH区具有与SEQ ID NO:46或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列，并且其中，该vL区具有与SEQ ID NO:25或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)，该重链可变区具有与SEQ ID NO:51大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)和轻链可变区(vL)，其中，该vH区具有与SEQ ID NO:51或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列，并且其中，该vL区具有与SEQ ID NO:25或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)，该重链可变区具有与SEQ ID NO:56大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)和轻链可变区(vL)，其中，该vH区具有与SEQ ID NO:56或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列，并且其中，该vL区具有与SEQ ID NO:25或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)，该重链可变区具有与SEQ ID NO:59大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)和轻链可变区(vL)，其中，该vH区具有与SEQ ID NO:59或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列，并且其中，该vL区具有与SEQ ID NO:25或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)，该重链可变区具有与SEQ ID NO:64大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)和轻链可变区(vL)，其中，该vH区具有与SEQ ID NO:64或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列，并且其中，该vL区具有与SEQ ID NO:25或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)，该重链可变区具有与SEQ ID NO:67大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)和轻链可变区(vL)，其中，该vH区具有与SEQ ID NO:67或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列，并且其中，该vL区具有与SEQ ID NO:25或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)，该重链可变区具有与SEQ ID NO:70大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有重链可变区(vH)和轻链可变区(vL)，其中，该vH区具有与SEQ ID NO:70或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列，并且其中，该vL区具有与SEQ ID NO:25或其变体大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有Fc片段，该Fc片段具有与SEQ ID NO:32大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有Fc片段，该Fc片段具有与SEQ ID NO:33大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一些实施方式中，本发明涉及针对人类C5的抗体，其中，抗体具有Fc片段，该Fc片段具有与SEQ ID NO:61大于约90％(如，大于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一项)同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
在一个实施方式中，本发明涉及包含至少一种在本文其他各处描述的抗体的细胞。在一些实施方式中，该细胞产生在本文其他各处所描述的抗体中的至少一种。在一个实施方式中，细胞是杂交瘤。
在一个实施方式中，本发明是包含至少一种在本文其他各处描述的抗体的细胞系。在一些实施方式中，细胞系产生在本文其他各处所描述的抗体中的至少一种。在一些实施方式中，细胞系是杂交瘤细胞系。
在一个实施方式中，本发明涉及基因修饰非人动物。在一个实施方式中，基因修饰非人动物表达人类C5。在一个实施方式中，基因修饰非人动物是啮齿动物。在一个实施方式中，基因修饰非人动物是小鼠。在一个实施方式中，基因修饰非人动物是NOD/SCID小鼠。在一个实施方式中，基因修饰非人动物是FcRn/SCID小鼠。
附图说明
当结合附图阅读时，将更好的理解前面的概述，以及本发明示例性实施方式的以下详细描述。然而，应当理解，本发明不限于附图中示出的实施方式的确切的布置和方法。在附图中：
图1描绘了mAb 2G1的人源化可变重链(VH)(人源化2G1 VH-11801)和mAb 2G1的人源化可变轻链(VL)(人源化2G1 VL-1901)的核苷酸和氨基酸序列。人源化通过从鼠mAb 2G1VH到生殖系编码的(germline encoded)人VH阅读框(11801)的CDR移植和从鼠mAb 2G1 VL到生殖系编码的人VL阅读框(1901)的CDR移植来实现。信号肽的氨基酸序列加下划线，并且CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列加粗和加阴影。
图2描绘了在VL-CDR3中具有Q→H取代的mAb L3-1、人源化VH-11801和人源化VL-1901的核苷酸和氨基酸序列。
图3描绘了在VL-CDR1中具有T→H取代的mAb L1-2、人源化VH-11801和人源化VL-1901的核苷酸和氨基酸序列。
图4描绘了在VH-CDR1中具有I→H取代的mAb H1-4、人源化VH-11801和人源化VL-1901的核苷酸和氨基酸序列。
图5描绘了在VH-CDR1中具有N→H取代并且在VL-CDR1中具有Y→H取代的mAb H1-8/L1-9、人源化VH-11801和人源化VL-1901的核苷酸和氨基酸序列。
图6描绘了在VH-CDR2中具有Y→H取代并且在VL-CDR3中具有E→H取代的mAb H2-6/L3-5、人源化VH-11801和人源化VL-1901的核苷酸和氨基酸序列。
图7描绘了在pH 5.8和pH 7.4下亲本人源化mAb 11801(VH-11801(SEQ ID NO:2)和VL-1901(SEQ ID NO:7))的C5结合和解离的Octet追踪。
图8描绘了在pH 5.8和pH 7.4下mAb L3-1的C5结合和解离的Octet追踪(Octettracing)。
图9描绘了在pH 5.8和pH 7.4下mAb L1-2的C5结合和解离的Octet追踪。
图10描绘了在pH 5.8和pH 7.4下mAb H1-4的C5结合和解离的Octet追踪。
图11描绘了在pH 5.8和pH 7.4下mAb H2-6/L3-5的C5结合和解离的Octet追踪。
图12描绘了在pH 5.8和pH 7.4下mAb H1-8/L1-9的C5结合和解离的Octet追踪。
图13描绘了经典途径补体介导的绵羊红细胞溶解测定的结果，以评估亲本人源化mAb 11801(VH-11801(SEQ ID NO:2)和VL-1901(SEQ ID NO:7))及其变体mAb L1-2、mAbL3-1和mAb H2-6/L3-5的C5抑制作用。
图14描绘了经典途径补体介导的绵羊红细胞溶解测定的结果，以评估亲本人源化mAb 11801(VH-11801(SEQ ID NO:2)和VL-1901(SEQ ID NO:7))以及变体mAb H1-8/L1-9的C5抑制作用。
图15描绘了经典途径补体介导的绵羊红细胞溶解测定的结果，以评估亲本人源化mAb 11801(VH-11801(SEQ ID NO:2)和VL-1901(SEQ ID NO:7))以及变体mAb H1-4和mAbL3-1的C5抑制作用。
图16描绘了评估经基因修饰以表达人类C5的NOD/SCID小鼠的血浆中人类C5的水平的ELISA测定的结果。M1、M3、M4和M5表示4只代表性小鼠。
图17描绘了评估在注射mAb H1-4、H1-8/L1-9、H2-6/L3-5、L3-1或L1-2后经基因修饰以表达人类C5的NOD/SCID小鼠的血浆中人类IgG4水平的测定的结果。
图18描绘了经典途径补体介导的鸡红细胞测定的结果，该测定评估亲本人源化mAb 2G1(VH-11801(SEQ ID NO:2)和VL-1901(SEQ ID NO:7))在经基因修饰以表达人类C5的NOD/SCID小鼠中的药效。
图19描绘了经典途径补体介导的鸡红细胞测定的结果，该测定评估mAb L3-1、L1-2、H1-4、H1-8/L1-9和H2-6/L3-5在经基因修饰以表达人类C5的NOD/SCID小鼠中的药效。
图20描绘了ELISA测定的结果，该测定证明在pH 7.4下在以下各处具有至少一个取代的mAb H1-8/L1-9 ScFV变体与C5的改善的结合：相对于SEQ ID NO:20在VH CDR1中的亮氨酸9(即，L9)、相对于SEQ ID NO:4在VH CDR2中的脯氨酸4(即，P4)、和/或相对于SEQ IDNO:5在VH CDR3中的缬氨酸16(即，V16)，(即，L9→W9(即，L9W)、L9→I9(即，L9I)、L9→V9(即，L9V)、L9→Y9(即，L9Y)、L9→F9(即，L9F)、P4→F4(即，P4F)、P4→L4(即，P4L)、P4→M4(即，P4M)、P4→W4(即，P4W)、P4→I4(即，P4I)、V16→F16(即，V16F)、V16→E16(即，V16E)以及V16→W16(即，V16W))。mAb H1-8/L1-9 ScFV变体的结合示于第3栏(OD450)和第4栏(OD450确认)，并且亲本mAb H1-8/L1-9 ScFV的结合示于第8栏(WT/OD450)。
图21描绘了Octet测定的结果，该Octet测定评估在Expi-CHO细胞中表达为人类IgG4的mAb H1-8/L1-9变体的相对C5结合亲和力。按规定用H1-8VH变体和L1-9 VL(SEQ IDNO:23)转染Expi-CHO细胞，并且在转染2天后检测细胞培养物上清液。对于给定的细胞培养物上清液，计算C5结合应答与抗体结合应答的比率并且将其用作C5结合亲和力的量度。图中所示为来自用mAb H1-8/L1-9 IgG4变体的转染实验的两个单独的Octet测定的计算比率，这些变体在以下各处具有至少一个取代：相对于SEQ ID NO:20在VH CDR1中的亮氨酸9(即，L9)、相对于SEQ ID NO:4在VH CDR2中的脯氨酸4(即，P4)、和/或相对于SEQ ID NO:5在VH CDR3中的缬氨酸16(即，V16)，(即，L9→W9(即，L9W)、L9→I9(即，L9I)、L9→V9(即，L9V)、L9→Y9(即，L9Y)、L9→F9(即，L9F)、P4→F4(即，P4F)、P4→L4(即，P4L)、P4→M4(即，P4M)、P4→W4(即，P4W)、P4→I4(即，P4I)、V16→F16(即，V16F)、V16→E16(即，V16E)以及V16→W16(即，V16W))。
图22描绘了在pH 7.4和pH 5.8下分别评估C5和mAb H1-8/L1-9变体的解离速率的Octet测定的结果。计算了在pH 7.4和pH 5.8下在从缔合相转换到解离相之后每种mAb从C5结合应答峰值的下降百分比。图中所示为用mAb H1-8/L1-9 IgG4变体的转染实验的两个单独的Octet测定中的计算的％下降，该变体在以下各处具有至少一个取代：相对于SEQ IDNO:20在VH CDR1中的亮氨酸9(即，L9)、相对于SEQ ID NO:4在VH CDR2中的脯氨酸4(即，P4)、和/或相对于SEQ ID NO:5在VH CDR3中的缬氨酸16(即，V16)，(即，L9→W9(即，L9W)、L9→I9(即，L9I)、L9→V9(即，L9V)、L9→Y9(即，L9Y)、L9→F9(即，L9F)、P4→F4(即，P4F)、P4→L4(即，P4L)、P4→M4(即，P4M)、P4→W4(即，P4W)、P4→I4(即，P4I)、V16→F16(即，V16F)、V16→E16(即，V16E)以及V16→W16(即，V16W))。
图23列出了18种组合取代变体(即，L9I/P4M、L9I/P4W、L9I/P4F、L9F/P4M、L9F/P4W、L9F/P4F、L9I/P4M/V16W、L9I/P4W/V16W、L9I/P4F/V16W、L9F/P4M/V16W、L9F/P4W/V16W、L9F/P4F/V16W、L9I/P4M/V16E、L9I/P4W/V16E、L9I/P4F/V16E、L9F/P4M/V16E、L9F/P4W/V16E以及L9F/P4F/V16E)。这些组合变体来源于mAb H1-8/L1-9 IgG4的7个单一变体(即，L9I、L9F、P4M、P4W、P4F、V16E、V16W)，这些变体示出超过亲本H1-8/L1-9mAb的改善的C5结合亲和力，并且同时保持差别的pH 7.4和pH 5.8解离速率(参见图21和图22)。
图24描绘了Octet测定的结果，该测定评估在Expi-CHO细胞中表达为人类IgG4的mAb H1-8/L1-9组合取代变体的相对C5结合亲和力。用H1-8 VH组合取代变体转染Expi-CHO细胞，并且在转染后2天评估细胞培养物上清液。对于给定的细胞培养物上清液，计算C5结合应答与抗体结合应答的比率并且将其用作C5结合亲和力的量度。图中所示为来自用mAbH1-8/L1-9组合取代变体(L9I/P4M、L9I/P4W、L9I/P4F、L9F/P4M、L9F/P4W、L9F/P4F、L9I/P4M/V16W、L9I/P4W/V16W、L9I/P4F/V16W、L9F/P4M/V16W、L9F/P4W/V16W、L9F/P4F/V16W、L9I/P4M/V16E、L9I/P4W/V16E、L9I/P4F/V16E、L9F/P4M/V16E、L9F/P4W/V16E以及L9F/P4F/V16E)的转染实验的计算比率。
图25描绘了在pH 7.4和pH 5.8下分别评估C5和mAb H1-8/L1-9组合取代变体的解离速率的Octet测定的结果。计算了在pH 7.4和pH 5.8下在从缔合相转换到解离相之后每种mAb从C5结合应答峰值的下降百分比。图中所示为用mAb H1-8/L1-9组合取代变体(L9I/P4M、L9I/P4W、L9I/P4F、L9F/P4M、L9F/P4W、L9F/P4F、L9I/P4M/V16W、L9I/P4W/V16W、L9I/P4F/V16W、L9F/P4M/V16W、L9F/P4W/V16W、L9F/P4F/V16W、L9I/P4M/V16E、L9I/P4W/V16E、L9I/P4F/V16E、L9F/P4M/V16E、L9F/P4W/V16E以及L9F/P4F/V16E)的转染实验中的计算的％下降。
图26描绘了测定来自mAb 1819亲和力成熟实验中另外的scFV变体(包括对应于VHCDR2的位置9中的T至H突变的克隆14C6)在pH 7.4下C5结合的亲和力的实验结果。
图27描绘了测定来自mAb 1819亲和力成熟实验中另外的scFV变体(包括对应于VHCDR2的位置9中的T至H突变的克隆14C6)在pH 7.4和pH 5.8下C5结合的差别亲和力的实验结果。
图28描绘了根据pH 7.4和pH 5.8下的差别结合对来自mAb 1819亲和力成熟实验另外的scFV变体进行排名的实验结果，示出了克隆14C6是这组变体中排名最高的变体。克隆14C6对应于VH CDR2的位置9中的T至H突变。
图29描绘了mAb H1-8/L1-9变体IWW-VH(顶部)、在VH-CDR1中具有N→H和L→I取代、在VH-CDR2中具有P→W取代并且在VH-CDR3中具有V→W取代的人源化VH-11801的核苷酸和氨基酸序列；以及mAb H1-8/L1-9变体IFW-VH(底部)、在VH-CDR1中具有N→H和L→I取代、在VH-CDR2中具有P→F取代并且在VH-CDR3中具有V→W取代的人源化VH-11801的核苷酸和氨基酸序列。
图30描绘了mAb H1-8/L1-9变体FME-VH(顶部)、在VH-CDR1中具有N→H和L→F取代、在VH-CDR2中具有P→M取代并且在VH-CDR3中具有V→E取代人源化VH-11801的核苷酸和氨基酸序列；以及mAb H1-8/L1-9变体FMW-VH(底部)、在VH-CDR1中具有N→H和L→F取代、在VH-CDR2中具有P→M取代并且在VH-CDR3中具有V→W取代的人源化VH-11801的核苷酸和氨基酸序列。
图31描绘了mAb H1-8/L1-9变体FMEH-VH、在VH-CDR1中具有N→H和L→F取代、在VH-CDR2中具有P→M和T→H取代并且在VH-CDR3中具有V→E取代的人源化VH-11801的核苷酸和氨基酸序列。
图32描绘了在pH 5.8和pH 7.4下mAb H1-8/L1-9、FMW、IFW、FME和IWW的C5结合和解离的Octet追踪。
图33描绘了在pH 7.4和pH 5.8下针对mAb VH-11801、H1-8/L1-9、FMW、IFW、FME、和IWW解离的C5结合的百分比。
图34描绘了经典途径补体介导的绵羊红细胞溶解测定的结果，以评估以下各项的的C5抑制作用：亲本人源化mAb H1-8/L1-9(VH-11801(SEQ ID NO:22)和VL-1901(SEQ IDNO:25))及其变体IFW PLA(VH-11801(SEQ ID NO:46)和VL-1901(SEQ ID NO:25))、FME PLA(SEQ ID NO:51)和VL-1901(SEQ ID NO:25))、IWW PLA(SEQ ID NO:41)和VL-1901(SEQ IDNO:25)以及FMW PLA(SEQ ID NO:56)和VL-1901(SEQ ID NO:25))。
图35描绘了在pH 5.8和pH 7.4下mAb H1-8/L1-9、FME、FMEH、FMW、和IFW的C5结合和解离的Octet追踪。
图36描绘了在pH 5.8和pH 7.4下与纯H1-8/L1-9、FME、FMEH、FMW以及IFW的pH依赖性结合的结果。
图37描绘了经典途径补体介导的绵羊红细胞溶解测定的结果，以评估亲本人源化mAb FME PLA(SEQ ID NO:51)和VL-1901(SEQ ID NO:25))、FMEH PLA(SEQ ID NO:59)和VL-1901(SEQ ID NO:25)、FMW PLA(SEQ ID NO:56)和VL-1901(SEQ ID NO:25))以及IFW PLA(VH-11801(SEQ ID NO:46)和VL-1901(SEQ ID NO:25))的C5抑制作用。
图38描绘了C5人源化FcRn/SCID小鼠的人类IgG4-Fc结构域突变的核苷酸和氨基酸序列。
图39描绘了通过流体动力学注射人类C5 cDNA产生的C5人源化小鼠的血浆C5结果。
图40描绘了测定在用mAb H1-8/L1-9 IFW-PLA、H1-8/L1-9 FMW-PLA或H1-8/L1-9FMEH-PLA注射之后经基因修饰以表达人类C5的FcRn/SCID小鼠的血浆中的总C5水平的测定的结果。
图41描绘了测定经基因修饰以表达人类C5的FcRn/SCID小鼠的血浆中注射mAbH1-8/L1-9 IFW-PLA、H1-8/L1-9 FMW-PLA或H1-8/L1-9 FMEH-PLA之后的总IgG4水平的测定的结果。
图42描绘了经典途径补体介导的鸡红细胞测定的结果，以评估mAb H1-8/L1-9IFW-PLA、H1-8/L1-9 FMW-PLA或H1-8/L1-9 FMEH-PLA在经基因修饰以表达人类C5的FcRn/SCID小鼠中的药效。
图43描绘了测定在用mAb 11801和FMEH-PLA注射之后经基因修饰以表达人类C5的FcRn/SCID小鼠的血浆中的总hIgG4水平的测定的结果。
图44描绘了测定mAb 11801和FMEH-PLA在经基因修饰以表达人类C5的FcRn/SCID小鼠中的药效的经典途径补体介导的鸡红细胞测定的结果。
图45描绘了测定在用mAb 11801和FMEH-PLA注射之后经基因修饰以表达人类C5的FcRn/SCID小鼠的血浆中的总C5水平的测定的结果。
具体实施方式
本发明涉及使用抗C5抗体抑制补体信号传导。在一些实施方式中，抗C5抗体表现出与C5的pH依赖性结合。在一些实施方式中，pH依赖性抗C5抗体在更中性的pH(例如，约pH7.4；如，在血液中发现的)下比在更酸性的pH(例如，约pH 5.8；如，在内体中发现的)下与C5结合更强。在各种实施方式中，本发明涉及通过使个体与抗C5抗体接触来治疗个体中补体介导的疾病或补体介导的病症的组合物和方法。可以用本发明的组合物和方法治疗的补体介导的病变和病症包括，但不限于黄斑变性(MD)、年龄相关性黄斑变性(AMD)、缺血再灌注损伤、关节炎、类风湿性关节炎、狼疮、溃疡性结肠炎、中风、术后全身炎症综合征、哮喘、过敏性哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)综合征、重症肌无力、视神经脊髓炎(NMO)、多发性硬化、移植物功能延迟恢复、抗体介导性排斥、非典型溶血性尿毒症(aHUS)综合征、视网膜中央静脉阻塞(CRVO)、视网膜中央动脉阻塞(CRAO)、大疱性表皮松解、脓毒症、器官移植、炎症(包括但不限于与心肺分流术和肾透析相关的炎症)、C3肾小球病、膜性肾病、IgA肾病、肾小球肾炎(包括但不限于抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)介导的肾小球肾炎、狼疮肾炎以及它们的组合)、ANCA介导的血管炎、志贺毒素诱导的HUS以及抗磷脂抗体诱导的妊娠丧失或者其任何组合。
限定
除非另有说明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的技术人员通常理解的相同的含义。虽然在实践中或本发明的试验中可以使用与本文描述的那些相似的或等价的任何方法和材料，已经描述了示例性方法和材料。
如本文使用的，以下术语中的每个具有其在本部分中相关联的含义。
本文使用的术语“一个”和“一种”是指一种或超过一种(即，至少一种)术语的语法的宾语。举例说明，“元件”是指一个元件或多于一个元件。
如本文所使用的术语“抑制(inhibit)”和“抑制(inhibition)”是指相对于对照值降低、抑制、减少或阻断活性或功能至少约10％。在一些实施方式中，活性与对照值相比被抑制或阻断了至少约50％。在一些实施方式中，活性被抑制或阻断至少约75％。在一些实施方式中，活性被抑制或阻断至少约95％。
术语“有效量”和“药学有效量”是指足够量的试剂以提供期望的生物学结果。该结果可以是疾病或病症的体征、症状或病因的减少和/或减轻，或生物学系统的任何其他期望的改变。在任何个案中的合适的有效量可以由本领域的技术人员使用常规实验决定。
术语“患者”、“受试者”、“个体”等在此可互换使用，并且是指具有补体系统的任何动物，在一些实施方式中是哺乳动物，并且在一些实施例中是人，包括需要治疗或易受疾病或其后遗症影响的人。个体可以包括例如狗、猫、猪、牛、绵羊、山羊、马、大鼠、猴和小鼠和人。
当在生物体、组织、细胞或其组分的背景下使用时，术语“异常”是指与在至少一个可观察的或可检测的特征(例如，年龄、治疗、一天中的时间等)方面与显示“正常”(预期/自平衡)对应特征的那些生物体、组织、细胞或其组分不同的那些生物体、组织、细胞或其组分。对于一种细胞、组织类型或受试者是正常的或预期的特征可能对于不同的细胞或组织类型是异常的。
“疾病”是受试者的健康状态，其中，受试者不能维持体内平衡，并且其中，如果疾病未缓解，则受试者的健康继续恶化。
相比之下，受试者中的“病症”是其中受试者能够维持体内平衡，但是其中受试者的健康状况不如没有病症时的好的健康状况。如果不治疗，病症不一定引起受试者的健康状态的进一步降低。
如果疾病或病症的体征或症状的严重性、患者经历这种体征或症状的频率或两者都降低，则该疾病或病症“缓解”。
化合物的“有效量”或“治疗有效量”是足以向施用该化合物的受试者提供有益效果的化合物的量。
如本文所使用的，“说明材料”包括出版物、记录、图表或任何其他表达介质，其可以用来传达试剂盒中本发明的化合物、组合物、载体或递送系统在用于实现本文所列举的不同疾病或病症的缓解的有用性。任选地或可替代地，说明材料可以描述缓解哺乳动物的细胞或组织中的疾病或病症的一种或多种方法。本发明的试剂盒的说明材料可以，例如，贴在含有本发明的已识别的化合物、组合物、载体或递送系统的容器上，或与含有已识别的化合物、组合物、载体或递送系统的容器一起运送。可替代地，说明材料可以与容器分开运送，目的在于由接受者合作使用说明材料和化合物。
如本文所使用的，“可操作地连接”或“可操作性地连接”可以意指基因的表达处于与其空间上连接的启动子的控制下。启动子可以定位在其控制下的基因的5’(上游)或3’(下游)。启动子与基因之间的距离可以与该启动子与其在启动子所来源的基因中控制的基因之间的距离大致相同。如本领域已知的，可以在不损失启动子功能的情况下适应这个距离的变化。
如本文所使用的，出于减轻或消除体征的目的，“治疗性治疗”是向表现出疾病或病症的体征的受试者施用的治疗。
如本文所使用的，“治疗疾病或障碍”意指降低患者所经历的疾病或障碍的体征和/或症状的频率和/或严重性。
如本文所使用的短语“生物样品”、“样品”或“标本”旨在包括包含细胞、组织或体液的任何样品，其中可以检测核酸或多肽的表达。生物样品可以含有适合于检测期望的生物标志物的任何生物材料，并且可以包含从个体获得的细胞和/或非细胞材料。此类生物样品的实施例包括但不限于血液、淋巴、骨髓、活组织检查和涂片。本质上是液体的样品在本文中被称为“体液”。生物样品可以通过多种技术从患者获得，包括例如通过刮擦或擦拭区域或通过使用针来获得体液。用于收集各种身体样品的方法是本领域公知的。
如本文所使用的，术语“抗体”是指能够特异性结合至抗原的特定表位的免疫球蛋白分子。抗体可以是源自天然来源或来自重组来源的完整免疫球蛋白，并且可以是完整免疫球蛋白的免疫反应性部分。本发明中的抗体可以以多种形式存在，包括例如，多克隆抗体、单克隆抗体、细胞内抗体(“内抗体(intrabodies)”)、Fv、Fab、Fab’、F(ab)2和F(ab’)2，以及单链抗体(scFv)、重链抗体(如，骆驼抗体)以及人源化抗体(Harlow et al.,1999,Using Antibodies:A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Laboratory Press,NY；Harlow et al.,1989,Antibodies:A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor,NewYork；Houston et al.,1988,Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:5879-5883；Bird et al.,1988,Science 242:423-426)。
如在本文使用的术语“合成抗体”意指使用重组DNA技术生成的抗体，如，例如像由噬菌体表达的抗体。该术语还应解释为是指通过合成编码抗体的DNA分子生成的抗体，并且该DNA分子表达抗体蛋白质或指定抗体的氨基酸序列，其中，使用合成的DNA或氨基酸序列技术获得了DNA或氨基酸序列，该技术是可获得的并且是本领域公知的。
如在本文所使用的，术语“重链抗体”或“重链抗体”包括衍生自骆驼科物种的免疫球蛋白分子，通过用肽免疫并且随后分离血清，或通过克隆和表达编码此类抗体的核酸序列。术语“重链抗体(heavy chain antibody)”或“重链抗体(heavy chain antibodies)”进一步涵盖从患有重链疾病的受试者分离或通过克隆和表达来自受试者的VH(可变重链免疫球蛋白)基因制备的免疫球蛋白分子。
“嵌合抗体”是指一种类型的工程化抗体，其包含源自供体抗体的天然存在的可变区(轻链和重链)以及源自受体抗体的轻链恒定区和重链恒定区。
“人源化抗体”是指一种类型的工程化抗体，其具有源自非人供体免疫球蛋白的CDR，分子的剩余免疫球蛋白衍生的部分源自一种(或多种)人类免疫球蛋白。此外，可以改变框架支持残基以保持结合亲和力(参见例如1989,Queen et al.,Proc.Natl.Acad SciUSA,86:10029-10032；1991,Hodgson et al.,Bio/Technology,9:421)。通过与供体抗体的核苷酸和氨基酸序列同源，合适的人受体抗体可以是选自常规数据库(例如KABAT数据库、LosAlamos数据库和SwissProtein数据库)的一种抗体。特征在于与供体抗体的框架区同源(基于氨基酸)的人抗体可以适合于提供用于插入供体CDR的重链恒定区和/或重链可变框架区。可以以类似的方式选择能够供给轻链恒定区或可变框架区的适合的受体抗体。应当注意，受体抗体重链和轻链不需要来源于相同的受体抗体。现有技术描述了几种产生此类人源化抗体的方法(参见例如EP-A-0239400和EP-A-054951)。
术语“供体抗体”是指将其可变区、CDR或其其他功能片段或类似物的氨基酸序列贡献给第一免疫球蛋白伴侣的抗体(单克隆抗体和/或重组抗体)，从而提供具有供体抗体的抗原特异性和中和活性特征改变的免疫球蛋白编码区和所得表达改变的抗体。
术语“受体抗体”是指与供体抗体异源的抗体(单克隆的和/或重组的)，该抗体将编码其重链和/或轻链框架区和/或其重链和/或轻链恒定区的氨基酸序列的全部(或任何部分，但是在一些实施方式中，全部)贡献给第一免疫球蛋白伴侣。在某些实施方式中，人抗体是受体抗体。
“CDR”被限定为抗体的互补决定区氨基酸序列，其是免疫球蛋白重链和轻链的高变区。参见例如Kabat et al.,Sequences of Proteins of Immunological Interest,4thEd.,U.S.Department of Health and Human Services,National Institutes of Health(1987)。在免疫球蛋白的可变部分中存在三个重链和三个轻链CDR(或CDR区)。因此，如本文所使用的“CDR”是指所有三个重链CDR或所有三个轻链CDR(或所有重链和所有轻链CDR两者，如果合适的话)。抗体的结构和蛋白质折叠可以是指其他残基被认为是抗原结合区的部分并且将被技术人员理解为如此。参见例如Chothia et al.,(1989)Conformations ofimmunoglobulin hypervariable regions；Nature 342,p 877-883。
如本文所使用的，“免疫测定”是指使用能够特异性地结合至靶分子的抗体来检测和定量靶分子的任何结合测定。
如在本文中相对于抗体所使用的术语“特异性结合”意指识别并且结合至特异性靶分子，但基本上不识别或结合样品中的其他分子的抗体。在一些情况下，术语“特异性结合”或“特异性地结合”用于意指识别和结合取决于靶分子上特定结构(例如，抗原决定簇或表位)的存在。例如，如果抗体特异性地结合至表位“A”，则包含标记的“A”和抗体的反应中包含表位A的未标记的分子(或游离的、未标记的A)的存在将减少结合至抗体的标记的A的量。
基因的“编码区”由基因的编码链的核苷酸残基和基因的非编码链的核苷酸组成，这些核苷酸残基分别与通过基因的转录产生的mRNA分子的编码区同源或互补。
mRNA分子的“编码区”还由mRNA分子的核苷酸残基组成，这些核苷酸残基在mRNA分子的翻译过程中与转移RNA分子的反密码子区匹配或编码终止密码子。因此，编码区可以包括核苷酸残基，该核苷酸残基包含mRNA分子编码的成熟蛋白质中不存在的氨基酸残基(例如，蛋白质外运信号序列中的氨基酸残基)的密码子。
“差别降低的表达”或“下调”是指至少10％或更多(例如，低20％、30％、40％或50％、60％、70％、80％、90％或更少、和/或2.0倍，1.8倍、1.6倍、1.4倍、1.2倍、1.1倍或更低)的生物标志物产物水平，以及其间比对照的任何和所有全部或部分增量。
“差别增加的表达”或“上调”是指至少10％或更多(例如，20％、30％、40％或50％、60％、70％、80％、90％更高或更多、和/或1.1倍，1.2倍、1.4倍、1.6倍、1.8倍、2.0倍或更高)的生物标志物产物水平，以及其间比对照的任何和所有全部或部分增量。
如在本文使用的“互补”是指核酸，是指两条核酸链的区域之间或同一条核酸链的两个区域之间的序列互补性的广义概念。已知第一核酸区的腺嘌呤残基能够与第二核酸区的残基形成特异性氢键(“碱基配对”)，如果残基是胸腺嘧啶或尿嘧啶，则残基与第一区反平行。类似地，已知第一核酸链的胞嘧啶残基能够与第二核酸链的残基碱基配对，如果残基是鸟嘌呤，则第二核酸链与第一链反平行。如果当两个区域以反平行方式排列时，第一区的至少一个核苷酸残基能够与第二区的残基碱基配对，则核酸的第一区与相同或不同核酸的第二区互补。在一些实施方式中，第一区包括第一部分并且第二区包括第二部分，由此，当第一部分和第二部分以反平行方式排列时，至少约50％、和/或至少约75％或至少约90％或至少约95％的第一部分的核苷酸残基能够与第二部分中的核苷酸残基碱基配对。在一些实施方式中，第一部分的所有核苷酸残基能够与第二部分中的核苷酸残基碱基配对。
如在本文所使用的术语“DNA”被限定为脱氧核糖核酸。
“编码”是指多核苷酸中的特定核苷酸序列(如，基因、cDNA或mRNA)的固有特性，以用于在具有限定的核苷酸序列(即，rRNA、tRNA和mRNA)或限定的氨基酸序列以及由此产生的生物学特性的生物过程中用作合成其他聚合物和大分子的模板。因此，如果对应于基因的mRNA的转录和翻译在细胞或其他生物系统中产生蛋白质，则基因编码蛋白质。其核苷酸序列与mRNA序列相同并且通常提供在序列表中的编码链和用作基因或cDNA转录的模板的非编码链两者都可以称为编码基因或cDNA的蛋白质或其他产物。
除非另外说明，“编码氨基酸序列的核苷酸序列”包括是彼此的简并形式并且编码相同氨基酸序列的所有核苷酸序列。编码蛋白质或RNA的短语核苷酸序列还可以包括内含子，其程度使得编码蛋白质的核苷酸序列在某些形式中可以包含一个或多个内含子。
“分离的”是指从天然状态改变或去除。例如，在正常环境下在活体受试者中天然存在的核酸或肽不是“分离的”，但是与其天然环境的共存材料部分或完全分离的相同核酸或肽是“分离的”。分离的核酸或蛋白质可以基本上以纯化的形式存在，或可以存在于非天然环境(例如像宿主细胞)中。
如在本文中所使用的，术语“杂交瘤”是指由B淋巴细胞和融合伴侣(如，骨髓瘤细胞)融合产生的细胞。杂交瘤可以在细胞培养物中无限地克隆和维持并且能够产生单克隆抗体。杂交瘤也可以被认为是杂交细胞。
“分离的核酸”是指与在自然存在的状态下其侧翼的序列分离的核酸片段或片段，即，已经从通常与片段相邻的序列(即，在其自然存在的基因组中与该片段相邻的序列)中去除的DNA片段。该术语还适用于已经从在细胞中自然伴随核酸的其他组分(即，RNA或DNA或蛋白质)中基本上纯化的核酸。因此，术语包括例如重组DNA，其并入载体中、并入自主复制质粒或病毒中或并入原核生物或真核生物的基因组DNA中，或者作为独立于其他序列的单独分子(即，作为cDNA或通过PCR或限制酶消化产生的基因组或cDNA片段)存在。它还包括作为编码另外的恶多肽序列的杂交基因的一部分的重组DNA。
在本发明的上下文中，使用以下缩写用于通常使用的核酸碱基。“A”是指腺苷，“C”是指胞嘧啶，“G”是指鸟苷，“T”是指胸苷，并且“U”是指尿苷。
如在本文所使用的术语“多核苷酸”被限定为核苷酸链。此外，核酸是核苷酸的聚合物。因此，如本文所用的核酸和多核苷酸是可互换的。本领域的普通技术人员具有以下常识：核酸是可以水解成单体“核苷酸”的多核苷酸。单体核苷酸可以水解成核苷。如本文所使用的，多核苷酸包括但不限于通过本领域中可获得的任何手段(包括但不限于重组手段)获得的所有核酸序列，即，使用普通克隆技术和PCR等以及通过合成手段从重组文库或细胞基因组克隆核酸序列。
如在此使用的，术语“肽”、“多肽”和“蛋白质”可互换使用，并且是指由通过肽键共价连接的氨基酸残基组成的化合物。蛋白质或肽必须包含至少两个氨基酸，并且对可以包括蛋白质或肽的序列的氨基酸的最大数目没有限制。多肽包括任何肽或蛋白质，其包含通过肽键彼此连接的两个或更多个氨基酸。如在本文所使用的，该术语是指短链(其在本领域中也通常被称为例如肽、寡肽以及寡聚物)以及长链(其在本领域中通常被称为蛋白质，其中存在许多类型)。“多肽”包括例如生物活性片段、基本上同源的多肽、寡肽、同源二聚体、异源二聚体、多肽的变体、修饰的多肽、衍生物、类似物、融合蛋白等。多肽包括天然肽、重组肽、合成肽或其组合。
如在本文所使用的术语“子代”是指后代(descendent)或产物(offspring)，并且包括哺乳动物的后代，并且还包括源自亲本细胞的分化的或未分化的后代细胞。在一个用途中，术语子代是指与亲本基因相同的后代细胞。在另一用途中，术语子代是指基因上和表型上与亲本相同的后代细胞。在又一用途中，术语子代是指已经从亲本细胞分化的后代细胞。
如在本文所使用的术语“RNA”被限定为核糖核酸。
如在本文所使用的术语“重组DNA”被限定为通过连接来自不同来源的DNA片段产生的DNA。
如本文所使用的术语“重组多肽”被限定为通过使用重组DNA方法产生的多肽。
如本文所使用的，“缀合”是指一个分子共价附接至第二分子。
如本文所使用的术语“变体”是核酸序列或肽序列，其序列分别不同于参考核酸序列或肽序列，但是保留了参考分子的基本生物学特性。核酸变体的序列中的变化可以不改变由参考核酸编码的肽的氨基酸序列，或可以使得氨基酸取代、添加、缺失、融合和截短。肽变体的序列的变化通常是有限的或保守的，使得参考肽和变体的序列整体上非常相似，并且在许多区域中是相同的。变体和参考肽在氨基酸序列上可以因任何组合的一个或多个取代、添加、缺失而不同。核酸或肽的变体可以是天然存在的，如，等位基因变体，或可以是未知为天然存在的变体。核酸和肽的非天然存在的变体可以通过诱变技术或通过直接合成来制备。在各种实施方式中，变体序列与参考序列至少99％、至少98％、至少97％、至少96％、至少95％、至少94％、至少93％、至少92％、至少91％、至少90％、至少89％、至少88％、至少87％、至少86％、至少85％相同。
如本文所使用的术语“调节”可以是指改变底物的水平或活性的任何方法。关于蛋白质调节的非限制性实施例包括影响表达(包括转录和/或翻译)、影响折叠、影响降解或蛋白质转换以及影响蛋白质的定位。关于酶的调节的非限制性实施例进一步包括影响酶活性。“调节子”是指其活性包括影响底物的水平或活性的分子。调节子可以是直接或间接的。调节子可以起到激活或抑制或以其他方式调节其底物的作用。
如本文所使用的，“扫描窗口”是指多个连续位置的区段，其中可以独立于任何侧翼序列评估序列。扫描窗口通常沿着待评估的序列的长度递增地移位，其中每个新片段被独立地评估。增量移位可以是1个或多于一个位置。
如本文所使用的“载体”可以是指包含复制起点的核酸序列。载体可以是质粒、噬菌体、细菌人工染色体或酵母人工染色体。载体可以是DNA或RNA载体。载体可以是自我复制的染色体外载体(extrachromosomal vector)或整合到宿主基因组中的载体。
范围：贯穿本公开，本发明的各个方面可以以范围形式呈现。应当理解，范围形式的描述仅仅是为了方便和简洁，而不应该解释为对本发明的范围的硬性限制。因此，范围的描述应认为具有具体公开的所有可能的子范围以及该范围内的单个数值。例如，如从1至6的范围的描述应当被认为已经具体公开了子范围，(如，从1至3、从1至4、从1至5、从2至4、从2至6，从3至6等)，以及该范围内的单个数字，例如，1、2、2.7、3、4、5、5.3和6。不论范围的宽度如何，这都是适用的。
描述
本发明涉及使用抗人类C5抗体抑制补体信号传导和补体相关病症。在一些实施方式中，抗C5抗体表现出与C5的pH依赖性结合。在一些实施方式中，pH依赖性抗C5抗体在更中性的pH(例如，约pH 7.4；如，在血液中发现的)下比在更酸性的pH(例如，约pH 5.8；如，在内体中发现的)下与C5结合更强。这样的pH依赖性结合提供了施用抗体分子的更大持久性，因为由细胞摄取的免疫复合物(即，结合至C5的抗C5mAb)将在内体的酸性环境中解离并且允许游离的抗体通过新生儿Fc受体(FcRn)再循环回到细胞外，在新生儿Fc受体处游离的抗体可用于结合至新的C5分子。
在一个实施方式中，本发明涉及通过特异性靶向补体组分C5蛋白质或蛋白质C5a或C5b的片段来抑制补体信号传导级联。在一个实施方式中，本发明涉及治疗和预防由不期望的、不受控制的、过度补体激活介导的炎症和自身免疫性疾病的方法。在一个实施方式中，本发明涉及通过使个体与抗C5抗体接触来治疗个体中的补体介导的疾病或补体介导的病症。
在一个实施方式中，本发明是治疗个体中补体介导的疾病或病症的方法，包括向个体抗C5抗体施用从而抑制C5a或C5b蛋白的生成和MAC形成的步骤。可以用本发明的方法治疗的补体介导的病变的实施例包括，但不限于黄斑变性(MD)、年龄相关性黄斑变性(AMD)、缺血再灌注损伤、关节炎、类风湿性关节炎、狼疮、溃疡性结肠炎、中风、术后全身炎症综合征、哮喘、过敏性哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)综合征、重症肌无力、视神经脊髓炎(NMO)、多发性硬化、移植物功能延迟恢复、抗体介导性排斥、非典型溶血性尿毒症(aHUS)综合征、视网膜中央静脉阻塞(CRVO)、视网膜中央动脉阻塞(CRAO)、大疱性表皮松解、脓毒症、器官移植、炎症(包括但不限于与心肺分流术和肾透析相关的炎症)、C3肾小球病、膜性肾病、IgA肾病、肾小球肾炎(包括但不限于抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)介导的肾小球肾炎、狼疮肾炎以及它们的组合)、ANCA介导的血管炎、志贺毒素诱导的HUS以及抗磷脂抗体诱导的妊娠丧失或者其任何组合。在一些实施方式中，本发明的组合物和方法可用于治疗对依库珠单抗治疗无反应的受试者，包括患有PNH的受试者。作为非限制性实施例，一些受试者可以在C5的α链中具有突变，该突变可以使它们对依库珠单抗的治疗具有耐药性(参见Genetic variants in C5 and poor response toeculizumab.Nishimura J,et al.,N Engl J Med.2014 Feb 13；370(7):632-9)。
免疫系统区分“自身”与“非自身”抗原的能力对于免疫系统作为针对侵入性微生物的特异性防御的功能至关重要。“非自身”抗原是进入或存在于体内的物质上与受试者自身的组分是可检测地不同的或外来的抗原，而“自身”抗原是在健康受试者中与其自身的成分不是可检测地不同的或外来的抗原。在这些方法的各种实施方式中，被抑制的补体激活是由以下各项组成的组中的至少一个触发：微生物抗原、非生物外源表面、改变的自组织或其组合。非生物性外来表面的一个实施例是血液管，如，用于心肺分流术或肾透析的血管。改变的自组织的实施例包括凋亡、坏死和缺血应激的组织和细胞，缺乏功能性补体调节蛋白的组织和细胞，或其组合。
在一些实施方式中，本发明的抗C5抗体抑制替代补体途径(AP)、经典途径(CP)或凝集素途径(LP)的激活的下游效应。通常，CP是由抗原-抗体复合物引发的，LP是通过凝集素与微生物表面上的糖分子的结合来激活的，而由于缺乏调节蛋白，AP在低水平上组成性地有活性，但可以在细菌、病毒和寄生虫细胞表面上快速扩增。宿主细胞通常被调节蛋白保护免受AP补体激活。但是在一些情况下，例如当这些调节蛋白有缺陷或缺失时，AP还可以在宿主细胞上不可控地激活，从而使得补体介导的疾病或病症。CP由组分C1、C2、C4组成并且在C3激活步骤与AP汇聚(converge)。LP由甘露糖结合凝集素(MBL)和MBL相关丝氨酸蛋白酶(Masps)组成，并且与CP共享组分C4和C2。AP由组分C3和若干因子(如，因子B、因子D、备解素(properdin)、C5和流体相调节子因子H)组成。补体激活由三个阶段组成：(a)识别、(b)酶促活化以及(c)使得细胞死亡的膜攻击。CP补体激活的第一阶段以C1开始。C1由三种不同的蛋白质组成：识别亚基C1q和丝氨酸蛋白酶亚组分C1r和C1s，它们在钙依赖性四聚体复合物C1r2 s2中结合在一起。完整的C1复合物对于C1的生理激活是必需的。当完整的C1复合物结合至与抗原复合的免疫球蛋白时，激活发生。这种结合激活C1s，其然后切割C4和C2蛋白二者以生成C4a和C4b以及C2a和C2b。C4b和C2a片段组合以形成C3转化酶C4b2a，其进而切割C3以形成C3a和C3b。LP的激活由MBL与靶表面上的某些糖结合而启动，并且这触发MBL相关丝氨酸蛋白酶(MASP)的激活，其然后以与CP的C1s的活性类似的方式切割C4和C2，使得生成C3转化酶C4b2a。因此，CP和LP由不同的机制激活，但是它们共享相同的组分C4和C2，并且两种途径使得生成相同的C3转化酶C4b2a。由于两个原因，C3被C4b2a裂解为C3b和C3a是补体途径的中心事件。由于表面沉积的C3b是AP的中心中间体，因此它启动AP放大环路。C3a和C3b两者在生物学上是重要的。C3a是促炎性的并且与C5a一起称为过敏性毒素。C3b及其其他裂解产物还结合至存在于嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞上的补体受体，由此促进C3b调理的颗粒的吞噬作用和清除。最后，C3b可以与C4b2a缔合以形成CP和LP的C5转化酶以激活末端补体序列，从而使得C5a(有效的促炎介质)产生以及裂解膜攻击复合物(MAC)C5-C9的组装。
在一个实施方式中，使用本发明的方法抑制的补体途径的活性是由选自脂多糖(LPS)、脂寡糖(LOS)、病原体相关分子模式(PAMP)和危险相关分子模式(DAMP)的组中的至少一种诱导的补体途径活化。在另一实施方式中，使用本发明的方法抑制的补体信号传导的活性是C5a蛋白的生成。在另一实施方式中，使用本发明的方法抑制的补体信号传导的活性是C5b蛋白的生成。在另一实施方式中，使用本发明的方法抑制的补体信号的活性是MAC的形成。在另一实施方式中，使用本发明的方法抑制的补体途径的活性是C5依赖性的。
在一个实施方式中，本发明是抑制个体中末端补体激活的启动的方法，其包括向个体抗C5抗体施用的步骤，从而抑制个体中源自CP、LP或AP激活的末端补体激活的启动。这些实施方式的实施例是患有补体介导的溶血的PNH患者和患有补体介导的aHUS、哮喘、缺血性/再灌注损伤、类风湿性关节炎和ANCA介导的肾病的个体。在本发明的各种实施方式中，可以使用本发明的组合物和方法治疗的疾病和障碍包括但不限于补体介导的溶血、补体介导的aHUS、C3肾小球病、视神经脊髓炎、重症肌无力、哮喘、缺血/再灌注损伤、类风湿性关节炎和ANCA介导的肾疾病或病症。
在各种其他实施方式中，在此提供了识别对末端补体活化具有抑制作用的潜在抗C5抗体的方法。一种这样的方法是如下所描述的绵羊红细胞溶解测定。简言之，将绵羊RBC(在PBS,Complement Technology Inc中制备的每个测定样品1x107个细胞)在37℃下用明胶佛罗那缓冲液(GVB2+，Sigma；总测定体积：100μL)中的50％正常人血清(NHS，来自Complement Technology Inc)孵育20min。在添加至绵羊RBC之前，将NHS与抗C5mAb在4℃下预孵育1小时。通过在PBS中添加冰冷的40mM EDTA终止裂解反应。将孵育混合物在1500rpm下离心5min，并且收集上清液并且测量OD405 nm。将不含NHS或具有添加EDTA的样品用作阴性裂解对照，并且将用蒸馏水完全裂解的绵羊RBC的样品用作阳性对照(100％裂解)，针对其他样品中的裂解百分比进行标准化。可以用于确认筛选抗人类C5阻断性mAb的单独方法包括以下步骤：a)用脂多糖(LPS)涂覆平板；b)洗涤平板以除去未结合的LPS；c)在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中添加牛血清白蛋白(BSA)；d)洗涤平板以去除未结合的BSA；e)添加已与血清预孵育并与正常人血清混合的候选抗C5抗体化合物的混合物；f)洗涤平板；g)加入HRP缀合的抗人类C5b-9或抗人C6抗体(抗人TCC抗体、克隆aE11或生物素标记的抗人C6抗体，均来自Quidel)；h)洗涤平板以去除未结合的抗体；i)加入HRP底物试剂；j)加入硫酸以终止反应；k)在450nm下测量光密度；l)将包含候选抗C5抗体化合物的板的光密度与阳性比较物对照和阴性比较物对照的光密度进行比较；其中，当与阳性比较物对照相比光密度减小时，识别抗C5抗体。
抗C5抗体
在一些实施方式中，本发明包括包含特异性结合C5的抗体的组合物。在一个实施方式中，抗C5抗体是多克隆抗体。在另一实施方式中，抗C5抗体是单克隆抗体。在一些实施方式中，抗C5抗体是嵌合抗体。在又一实施方式中，抗C5抗体是人源化抗体。在一些实施方式中，抗C5抗体是抗体片段。在一些实施方式中，C5是人类C5。
在一些实施方式中，抗C5抗体表现出与C5的pH依赖性结合。在一些实施方式中，pH依赖性抗C5抗体在更中性的pH(例如，约pH 7.4；如，在血液中发现的)下比在更酸性的pH(例如，约pH 5.8；如，在内体中发现的)下与C5结合更强。
在一些实施方式中，抗体或抗体片段与人类C5的结合与C5a或C5b的生成的减少和完整生物体中补体活化途径中MAC的形成相关。在一些实施方式中，本发明是能够与人类C5结合的蛋白质或多肽。在一些实施方式中，抗C5抗体或抗体片段、蛋白质或多肽与人类C5的相关部分或部分或表位结合；并且抗体或其抗体片段或蛋白质或多肽与人类C5的相关部分的结合与C5a或C5b的生成的减少和完整生物体中MAC的形成相关。
在一些实施方式中，人类C5结合抗体或其C5结合抗体片段进一步缀合至蛋白质、肽或另一化合物。在一些实施方式中，人类C5结合抗体或其抗体片段与蛋白质、肽或其他化合物缀合。在一些实施方式中，人类C5结合抗体或其抗体片段所缀合的蛋白质、肽或其他化合物是靶向部分(即，靶向部分特异性结合除人类C5以外的分子)。在一些实施方式中，人类C5结合抗体或其抗体片段所缀合的蛋白质、肽或其他化合物是效应分子(例如，细胞毒性分子)。
在各种实施方式中，具有在本文描述的任何可变区的在此描述的本发明的任何抗体可以包含Fc片段或Fc结构域。例如，在一些实施方式中，在本文描述的抗体包含免疫球蛋白的Fc片段。示例性免疫球蛋白包括但不限于IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgM、IgA、IgE以及IgD。在一个实施方式中，抗体包含人类IgG4的Fc。SEQ ID NO:32是人类IgG4 Fc片段的示例氨基酸序列。在一些实施方式中，本发明的抗体包含对于SEQ ID NO:32具有S108P突变的人类IgG4 Fc片段。SEQ ID NO:33是相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变的人类IgG4 Fc片段的示例氨基酸序列。在一些实施方式中，本发明的抗体包含相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变、M308L突变以及N314A突变的一个或多个突变的人类IgG4 Fc片段。在一些实施方式中，本发明的抗体包含相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变、M308L突变以及N314A突变(在此还称为具有Fc PLA突变)的人类IgG4 Fc片段。SEQ ID NO:61是相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变、M308L突变和N314A突变的人类IgG4 Fc片段的示例氨基酸序列。
在一个实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包括选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在另一实施方式中，抗C5抗体包含以下各项的组的所有CDR：VH-CDR1：SEQ IDNO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:8或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:8。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1；包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL-CDR1；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一个实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包括选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:11或其一种或多种变体。在另一实施方式中，抗C5抗体包含以下各项的组的所有CDR：VH-CDR1：SEQ IDNO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:11或其一种或多种变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:8或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:8。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:11或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:11。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:11的氨基酸序列的VL-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:11的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1；包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL-CDR1；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2；以及包含SEQ ID NO:11的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列或其变体的重链。在其他实施方式中，抗C5抗体包含含有SEQ ID NO:13的氨基酸序列或其变体的轻链。在另一实施方式中，抗C5抗体是mAb L3-1或其变体。单克隆抗C5抗体mAbL3-1包含含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:13的氨基酸序列的轻链。在一个实施方式中，抗C5抗体包含Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含人类IgG4Fc片段或其变体。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb L3-1包含：含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:13的氨基酸序列的轻链；以及含有SEQ ID NO:32的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb L3-1包含：含有SEQ IDNO:2的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:13的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ IDNO:32具有S108P突变并含有SEQ ID NO:33的氨基酸序列的人类IgG4Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变、M308L突变和N314A突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb L3-1包含：含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:13的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变、M308L突变和N314A突变并含有SEQ ID NO:61的氨基酸序列的人类IgG4。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是人源化的。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是嵌合抗体。
在一个实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包括选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:14；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在另一实施方式中，抗C5抗体包含以下各项的组的所有CDR：VH-CDR1：SEQ IDNO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:14；VL-CDR2：SEQID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:14或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:14。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:14的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:14的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1；包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:14的氨基酸序列的VL-CDR1；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列或其变体的重链。在其他实施方式中，抗C5抗体包含含有SEQ ID NO:16的氨基酸序列或其变体的轻链。在另一实施方式中，抗C5抗体是mAb L1-2或其变体。单克隆抗C5抗体mAbL1-2包含含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:16的氨基酸序列的轻链。在一个实施方式中，抗C5抗体包含Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含人类IgG4Fc片段或其变体。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb L1-2包含：含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:16的氨基酸序列的轻链；以及含有SEQ ID NO:32的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb L1-2包含：含有SEQ IDNO:2的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:16的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ IDNO:32具有S108P突变并含有SEQ ID NO:33的氨基酸序列的人类IgG4Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变、M308L突变和N314A突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb L1-2包含：含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:16的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变、M308L突变和N314A突变并含有SEQ ID NO:61的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是人源化的。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是嵌合抗体。
在一个实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包括选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:17；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在另一实施方式中，抗C5抗体包含以下各项的组的所有CDR：VH-CDR1：SEQ IDNO:17；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:17的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:8或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:17的氨基酸序列的VH-CDR1；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:8。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:17的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:17的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:17的氨基酸序列的VH-CDR1；包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL-CDR1；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:19的氨基酸序列或其变体的重链。在其他实施方式中，抗C5抗体包含含有SEQ ID NO:7的氨基酸序列或其变体的轻链。在另一实施方式中，抗C5抗体是mAb H1-4或其变体。单克隆抗C5抗体mAbH1-4包含含有SEQ ID NO:19的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的轻链。在一个实施方式中，抗C5抗体包含Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含人类IgG4Fc片段或其变体。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-4包含：含有SEQ ID NO:19的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的轻链；以及含有SEQ ID NO:32的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-4包含：含有SEQ IDNO:19的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ IDNO:32具有S108P突变并含有SEQ ID NO:33的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变、M308L突变和N314A突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-4包含：含有SEQ ID NO:19的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变、M308L突变和N314A突变并含有SEQ ID NO:61的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是人源化的。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是嵌合抗体。
在一个实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包括选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:20；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在另一实施方式中，抗C5抗体包含以下各项的组的所有CDR：VH-CDR1：SEQ IDNO:20；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:20的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:23或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:20的氨基酸序列的VH-CDR1；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:23。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:20的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:20的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:20的氨基酸序列的VH-CDR1；包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR2；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:22的氨基酸序列或其变体的重链。在其他实施方式中，抗C5抗体包含含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。在另一实施方式中，抗C5抗体是mAb H1-8/L1-9或其变体。单克隆抗C5抗体mAb H1-8/L1-9包含含有SEQ ID NO:22的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链。在一个实施方式中，抗C5抗体包含Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含人类IgG4 Fc片段或其变体。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9包含：含有SEQID NO:22的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及含有SEQ IDNO:32的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ IDNO:32或其变体具有S108P突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9包含：含有SEQ ID NO:22的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变并含有SEQ ID NO:33的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变、M308L突变和N314A突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9包含：含有SEQ ID NO:22的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变、M308L突变和N314A突变并含有SEQ ID NO:61的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是人源化的。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是嵌合抗体。
在一个实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包括选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:26；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:29或其一种或多种变体。在另一实施方式中，抗C5抗体包含以下各项的组的所有CDR：VH-CDR1：SEQ IDNO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:26；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:29或其一种或多种变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:8或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:8。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:26的氨基酸序列的VH-CDR2或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:26的氨基酸序列的VH-CDR2；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:29或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:29。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:26的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:29的氨基酸序列的VL-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:26的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:29的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1；包含SEQ ID NO:26的氨基酸序列的VH-CDR2；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL-CDR1；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2；以及包含SEQ ID NO:29的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:28的氨基酸序列或其变体的重链。在其他实施方式中，抗C5抗体包含含有SEQ ID NO:31的氨基酸序列或其变体的轻链。在另一实施方式中，抗C5抗体是mAb H2-6/L3-5或其变体。单克隆抗C5抗体mAb H2-6/L3-5包含含有SEQ ID NO:28的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:31的氨基酸序列的轻链。在一个实施方式中，抗C5抗体包含Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含人类IgG4 Fc片段或其变体。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H2-5/L3-5包含：含有SEQID NO:28的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:31的氨基酸序列的轻链；以及含有SEQ IDNO:32的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ IDNO:32或其变体具有S108P突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H2-6/L3-5包含：含有SEQ ID NO:28的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:31的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变并含有SEQ ID NO:33的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变、M308L突变和N314A突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H2-6/L3-5包含：含有SEQ ID NO:28的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:31的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变、M308L突变和N314A突变并含有SEQ ID NO:61的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是人源化的。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是嵌合抗体。
在一个实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包括选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:34；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在另一实施方式中，抗C5抗体包含以下各项的组的所有CDR：VH-CDR1：SEQ IDNO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:34；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:8或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:8。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列的VH-CDR2或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列的VH-CDR2；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR1；包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列的VH-CDR2；包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL-CDR1；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:36的氨基酸序列或其变体的重链。在其他实施方式中，抗C5抗体包含含有SEQ ID NO:7的氨基酸序列或其变体的轻链。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体包含含有SEQ ID NO:36的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的轻链。在一个实施方式中，抗C5抗体包含Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含人类IgG4 Fc片段或其变体。在一个实施方式中，抗C5抗体包含：含有SEQ ID NO:36的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的轻链；以及含有SEQ ID NO:32的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含：含有SEQ ID NO:36的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变并含有SEQ ID NO:33的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变、M308L突变和N314A突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含：含有SEQ ID NO:36的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变、M308L突变和N314A突变并含有SEQ ID NO:61的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是人源化的。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是嵌合抗体。
在一个实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包括选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:37；VH-CDR2：SEQ ID NO:38；VH-CDR3：SEQ IDNO:39；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在另一实施方式中，抗C5抗体包含以下各项的组的所有CDR：VH-CDR1：SEQID NO:37；VH-CDR2：SEQ ID NO:38；VH-CDR3：SEQ ID NO:39；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:23或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列的VH-CDR1；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:23。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:38的氨基酸序列的VH-CDR2或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:38的氨基酸序列的VH-CDR2；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:39的氨基酸序列的VH-CDR3或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:39的氨基酸序列的VH-CDR3；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:38的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:39的氨基酸序列的VH-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:38的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:39的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列的VH-CDR1；包含SEQ ID NO:38的氨基酸序列的VH-CDR2；包含SEQ ID NO:39的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:41的氨基酸序列或其变体的重链。在其他实施方式中，抗C5抗体包含含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。在另一实施方式中，抗C5抗体是mAb H1-8/L1-9变体IWW或其变体。在一个实施方式中，单克隆抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体IWW包含含有SEQ ID NO:41的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链。在一个实施方式中，抗C5抗体包含Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含人类IgG4 Fc片段或其变体。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体IWW包含含有SEQ ID NO:41的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及含有SEQ ID NO:32的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含具有S108P突变的人类IgG4 Fc片段或其变体。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体IWW包含含有SEQ ID NO:41的氨基酸序列的重链；含有SEQID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变并含有SEQ IDNO:33的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ IDNO:32或其变体具有S108P突变、M308L突变和N314A突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体IWW包含含有SEQ ID NO:41的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变、M308L突变和N314A突变并含有SEQ ID NO:61的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是人源化的。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是嵌合抗体。
在一个实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包括选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:42；VH-CDR2：SEQ ID NO:43；VH-CDR3：SEQ IDNO:44；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在另一实施方式中，抗C5抗体包含以下各项的组的所有CDR：VH-CDR1：SEQID NO:42；VH-CDR2：SEQ ID NO:43；VH-CDR3：SEQ ID NO:44；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:23或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列的VH-CDR1；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:23。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列的VH-CDR2或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列的VH-CDR2；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列的VH-CDR3或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列的VH-CDR3；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列的VH-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列的VH-CDR1；包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列的VH-CDR2；包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:46的氨基酸序列或其变体的重链。在其他实施方式中，抗C5抗体包含含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。在另一实施方式中，抗C5抗体是mAb H1-8/L1-9变体IFW或其变体。在一个实施方式中，单克隆抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体IFW包含含有SEQ ID NO:46的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链。在一个实施方式中，抗C5抗体包含Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含人类IgG4 Fc片段或其变体。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体IFW包含含有SEQ ID NO:46的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及含有SEQ ID NO:32的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体IFW包含含有SEQ ID NO:46的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变并含有SEQ ID NO:33的氨基酸序列的人类IgG4Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变、M308L突变和N314A突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体IFW包含含有SEQ ID NO:46的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变、M308L突变和N314A突变并含有SEQ ID NO:61的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是人源化的。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是嵌合抗体。
在一个实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包括选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:47；VH-CDR2：SEQ ID NO:48；VH-CDR3：SEQ IDNO:49；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在另一实施方式中，抗C5抗体包含以下各项的组的所有CDR：VH-CDR1：SEQID NO:47；VH-CDR2：SEQ ID NO:48；VH-CDR3：SEQ ID NO:49；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:47的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:23或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:47的氨基酸序列的VH-CDR1；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:23。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:48的氨基酸序列的VH-CDR2或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:48的氨基酸序列的VH-CDR2；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:49的氨基酸序列的VH-CDR3或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:49的氨基酸序列的VH-CDR3；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:47的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:48的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:49的氨基酸序列的VH-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:47的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:48的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:49的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:47的氨基酸序列的VH-CDR1；包含SEQ ID NO:48的氨基酸序列的VH-CDR2；包含SEQ ID NO:49的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:51的氨基酸序列或其变体的重链。在其他实施方式中，抗C5抗体包含含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。在另一实施方式中，抗C5抗体是mAb H1-8/L1-9变体FME或其变体。在一个实施方式中，单克隆抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体FME包含含有SEQ ID NO:51的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链。在一个实施方式中，抗C5抗体包含Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含人类IgG4 Fc片段或其变体。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体FME包含含有SEQ ID NO:51的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及含有SEQ ID NO:32的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体FME包含含有SEQ ID NO:51的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变并含有SEQ ID NO:33的氨基酸序列的人类IgG4Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变、M308L突变和N314A突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体FME包含含有SEQ ID NO:51的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变、M308L突变和N314A突变并含有SEQ ID NO:61的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是人源化的。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是嵌合抗体。
在一个实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包括选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:52；VH-CDR2：SEQ ID NO:53；VH-CDR3：SEQ IDNO:54；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在另一实施方式中，抗C5抗体包含以下各项的组的所有CDR：VH-CDR1：SEQID NO:52；VH-CDR2：SEQ ID NO:53；VH-CDR3：SEQ ID NO:54；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:52的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:23或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:52的氨基酸序列的VH-CDR1；以及VL-CDR1：SEQ ID NO:23。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:53的氨基酸序列的VH-CDR2或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:53的氨基酸序列的VH-CDR2；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:54的氨基酸序列的VH-CDR3或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:54的氨基酸序列的VH-CDR3；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:52的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:53的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:54的氨基酸序列的VH-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:52的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:53的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:54的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:52的氨基酸序列的VH-CDR1；包含SEQ ID NO:53的氨基酸序列的VH-CDR2；包含SEQ ID NO:54的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:56的氨基酸序列或其变体的重链。在其他实施方式中，抗C5抗体包含含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。在另一实施方式中，抗C5抗体是mAb H1-8/L1-9变体FMW或其变体。在一个实施方式中，单克隆抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体FMW包含含有SEQ ID NO:56的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链。在一个实施方式中，抗C5抗体包含Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含人类IgG4 Fc片段或其变体。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体FMW包含含有SEQ ID NO:56的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及含有SEQ ID NO:32的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体FMW包含含有SEQ ID NO:56的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变并含有SEQ ID NO:33的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变、M308L突变和N314A突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体FMW包含含有SEQ ID NO:56的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变、M308L突变和N314A突变并含有SEQ ID NO:61的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是人源化的。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是嵌合抗体。
在一个实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包括选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:47；VH-CDR2：SEQ ID NO:57；VH-CDR3：SEQ IDNO:49；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在另一实施方式中，抗C5抗体包含以下各项的组的所有CDR：VH-CDR1：SEQID NO:47；VH-CDR2：SEQ ID NO:57；VH-CDR3：SEQ ID NO:49；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:57的氨基酸序列的VH-CDR2或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:57的氨基酸序列的VH-CDR2；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:47的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:57的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:49的氨基酸序列的VH-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:47的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:57的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:49的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:47的氨基酸序列的VH-CDR1；包含SEQ ID NO:57的氨基酸序列的VH-CDR2；包含SEQ ID NO:49的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:59的氨基酸序列或其变体的重链。在其他实施方式中，抗C5抗体包含含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。在另一实施方式中，抗C5抗体是mAb H1-8/L1-9变体FMEH或其变体。在一个实施方式中，单克隆抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体FMEH包含含有SEQ ID NO:59的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链。在一个实施方式中，抗C5抗体包含Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含人类IgG4 Fc片段或其变体。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体FMEH包含含有SEQ ID NO:59的氨基酸序列的重链；含有SEQID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及含有SEQ ID NO:32的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体FMEH包含含有SEQ ID NO:59的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变并含有SEQ ID NO:33的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变、M308L突变和N314A突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体FMEH包含含有SEQ IDNO:59的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ IDNO:32具有S108P突变、M308L突变和N314A突变并含有SEQ ID NO:61的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是人源化的。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是嵌合抗体。
在一个实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包括选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:37；VH-CDR2：SEQ ID NO:62；VH-CDR3：SEQ IDNO:39；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在另一实施方式中，抗C5抗体包含以下各项的组的所有CDR：VH-CDR1：SEQID NO:37；VH-CDR2：SEQ ID NO:62；VH-CDR3：SEQ ID NO:39；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:62的氨基酸序列的VH-CDR2或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:62的氨基酸序列的VH-CDR2；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:62的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:39的氨基酸序列的VH-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:62的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:39的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列的VH-CDR1；包含SEQ ID NO:62的氨基酸序列的VH-CDR2；包含SEQ ID NO:39的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:64的氨基酸序列或其变体的重链。在其他实施方式中，抗C5抗体包含含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。在另一实施方式中，抗C5抗体是mAb H1-8/L1-9变体IWWH或其变体。在一个实施方式中，单克隆抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体IWWH包含含有SEQ ID NO:64的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链。在一个实施方式中，抗C5抗体包含Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含人类IgG4 Fc片段或其变体。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体IWWH包含含有SEQ ID NO:64的氨基酸序列的重链；含有SEQID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及含有SEQ ID NO:32的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体IWWH包含含有SEQ ID NO:64的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变并含有SEQ ID NO:33的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变、M308L突变和N314A突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体IWWH包含含有SEQ IDNO:64的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ IDNO:32具有S108P突变、M308L突变和N314A突变并含有SEQ ID NO:61的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是人源化的。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是嵌合抗体。
在一个实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包括选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:42；VH-CDR2：SEQ ID NO:65；VH-CDR3：SEQ IDNO:44；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在另一实施方式中，抗C5抗体包含以下各项的组的所有CDR：VH-CDR1：SEQID NO:42；VH-CDR2：SEQ ID NO:65；VH-CDR3：SEQ ID NO:44；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:65的氨基酸序列的VH-CDR2或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:65的氨基酸序列的VH-CDR2；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:65的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列的VH-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:65的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列的VH-CDR1；包含SEQ ID NO:65的氨基酸序列的VH-CDR2；包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:67的氨基酸序列或其变体的重链。在其他实施方式中，抗C5抗体包含含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。在另一实施方式中，抗C5抗体是mAb H1-8/L1-9变体IFWH或其变体。在一个实施方式中，单克隆抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体IFWH包含含有SEQ ID NO:67的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链。在一个实施方式中，抗C5抗体包含Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含人类IgG4 Fc片段或其变体。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体IFWH包含含有SEQ ID NO:67的氨基酸序列的重链；含有SEQID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及含有SEQ ID NO:32的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体IFWH包含含有SEQ ID NO:67的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变并含有SEQ ID NO:33的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变、M308L突变和N314A突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体IFWH包含含有SEQ IDNO:67的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ IDNO:32具有S108P突变、M308L突变和N314A突变并含有SEQ ID NO:61的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是人源化的。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是嵌合抗体。
在一个实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包括选自由以下各项组成的组中的CDR中的至少一个：VH-CDR1：SEQ ID NO:52；VH-CDR2：SEQ ID NO:68；VH-CDR3：SEQ IDNO:54；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。在另一实施方式中，抗C5抗体包含以下各项的组的所有CDR：VH-CDR1：SEQID NO:52；VH-CDR2：SEQ ID NO:68；VH-CDR3：SEQ ID NO:54；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQ ID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:68的氨基酸序列的VH-CDR2或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:68的氨基酸序列的VH-CDR2；以及VL-CDR2：SEQ ID NO:9。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:52的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:68的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:54的氨基酸序列的VH-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:52的氨基酸序列的VH-CDR1或包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的其变体；包含SEQ ID NO:68的氨基酸序列的VH-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:54的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2或其包含多达约3个(如，约1、2或3个中的任一个)氨基酸取代的变体；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:52的氨基酸序列的VH-CDR1；包含SEQ ID NO:68的氨基酸序列的VH-CDR2；包含SEQ ID NO:54的氨基酸序列的VH-CDR3；包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VL-CDR1；包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VL-CDR2；以及包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:70的氨基酸序列或其变体的重链。在其他实施方式中，抗C5抗体包含含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。在另一实施方式中，抗C5抗体是mAb H1-8/L1-9变体FMWH或其变体。在一个实施方式中，单克隆抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体FMWH包含含有SEQ ID NO:70的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链。在一个实施方式中，抗C5抗体包含Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含人类IgG4 Fc片段或其变体。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体FMWH包含含有SEQ ID NO:70的氨基酸序列的重链；含有SEQID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及含有SEQ ID NO:32的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体FMWH包含含有SEQ ID NO:70的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变并含有SEQ ID NO:33的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体包含相对于SEQ ID NO:32或其变体具有S108P突变、M308L突变和N314A突变的人类IgG4 Fc片段。在一个实施方式中，抗C5抗体mAb H1-8/L1-9变体FMWH包含含有SEQ IDNO:70的氨基酸序列的重链；含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的轻链；以及相对于SEQ IDNO:32具有S108P突变、M308L突变和N314A突变并含有SEQ ID NO:61的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是人源化的。在一些实施方式中，单克隆抗C5抗体是嵌合抗体。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含相对于SEQ ID NO:4在VHCDR2中的位置#4处(即，P4)的脯氨酸的取代。在各种实施方式中，P4处的取代是P4→F4(即，P4F)、P4→L4(即，P4L)、P4→M4(即，P4M)、P4→W4(即，P4W)或P4→I4(即，P4I)。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含相对于SEQ ID NO:4在VHCDR2中的位置#9处(即，T9)的苏氨酸的取代。在各种实施方式中，T9处的取代是T9→H9(即，T9H)、T9是T9→F9(即，T9F)、T9→L9(即，T9L)、T9→M9(即，T9M)、T9→W9(即，T9W)或T9→I9(即，T9I)。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含：相对于SEQ ID NO:4在VHCDR2中的位置#4处(即，P4)的脯氨酸的取代；以及相对于SEQ ID NO:4在VH CDR2中的位置#9(即，T9)处的苏氨酸的取代。在一些实施方式中，P4处的取代是P4→F4(即，P4F)、P4→L4(即，P4L)、P4→M4(即，P4M)、P4→W4(即，P4W)或P4→I4(即，P4I)；并且T9处的取代是T9→H9(即，T9H)、T9是T9→F9(即，T9F)、T9→L9(即，T9L)、T9→M9(即，T9M)、9→W9(即，T9W)或T9→I9(即，T9I)。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含相对于SEQ ID NO:5在VHCDR3中的位置#16处(即，V16)的缬氨酸的取代。在各种实施方式中，V4处的取代是V16→F16(即，V16F)、V16→E16(即，V16E)或V16→W16(即，V16W)。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含相对于SEQ ID NO:3在VHCDR1中的位置#8处(即，N8)的天冬酰胺的取代。在各种实施方式中，N8处的取代是N8→H8(即，N8H)、N8→W8(即，N8W)、N8→I8(即，N8I)、N8→V8(即，N8V)、N8→Y8(即，N8Y)或N8→F8(即，N8F)。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含相对于SEQ ID NO:20在VHCDR1中的位置#9处(即，L9)的亮氨酸的取代。在各种实施方式中，L9处的取代是L9→W9(即，L9W)、L9→I9(即，L9I)、L9→V9(即，L9V)、L9→Y9(即，L9Y)或L9→F9(即，L9F)。
在一些实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含选自由以下各项组成的组的两个或更多个取代中的取代：相对于SEQ ID NO:4在VH CDR2中的脯氨酸4(P4)、相对于SEQID NO:4在VH CDR2中的苏氨酸9(T9)、相对于SEQ ID NO:5在VH CDR3中的缬氨酸16(V16)以及相对于SEQ ID NO:20在VH CDR1中的亮氨酸9(L9)。在各种实施方式中，抗C5抗体或其抗原结合片段包含由以下各项组成的组中的两个或更多个处的取代：相对于SEQ ID NO:4在VH CDR2中的脯氨酸4(即，P4)、相对于SEQ ID NO:4在VH CDR2中的苏氨酸9(即，T9)、相对于SEQ ID NO:5在VH CDR3中的缬氨酸16(即，V16)以及相对于SEQ ID NO:20在VH CDR1中的亮氨酸9(即，L9)，抗C5抗体或其抗原结合片段包含选自由以下各项组成组中的两个或更多个取代：L9I/P4M、L9I/P4W、L9I/P4F、L9F/P4M、L9F/P4W、L9F/P4F、L9I/P4M/V16W、L9I/P4W/V16W、L9I/P4F/V16W、L9F/P4M/V16W、L9F/P4W/V16W、L9F/P4F/V16W、L9I/P4M/V16E、L9I/P4W/V16E、L9I/P4F/V16E、L9F/P4M/V16E、L9F/P4W/V16E、L9F/P4F/V16E、L9I/P4M/T9H/V16W、L9I/P4W/T9H/V16W、L9I/P4F/T9H/V16W、L9F/P4M/T9H/V16W、L9F/P4W/T9H/V16W、L9F/P4F/T9H/V16W、L9I/P4M/T9H/V16E、L9I/P4W/T9H/V16E、L9I/P4F/T9H/V16E、L9F/P4M/T9H/V16E、L9F/P4W/T9H/V16E以及L9F/P4F/T9H/V16E。
在一些实施方式中，这些抗体是嵌合抗体。在一些实施方式中，抗人类C5抗体可以包含与以上说明书中描述的可变区CDR序列组合的人轻链和人重链恒定区。本领域的普通技术人员会能够使用交换感兴趣的特异性抗体的相关结构域的已知技术来制备并获得嵌合抗体。通过嫁接异质抗体结构域，并入本申请中描述的一个或多个CDR序列，容易地制备这样的抗体。使用已知的重组技术，可以获得和制备：包含由人重链和轻链恒定区的核酸序列编码的重链和轻链恒定区的重组抗体；以及包含由对应于本公开中列出的CDR序列的核酸序列编码的CDR的重链和轻链可变区。本领域技术人员可以制备包含本公开中描述的一个或多个CDR序列的抗人类C5抗体，其中，单独轻链的部分或单独重链的部分被来自属于另一物种(例如人类)的抗体的区域替换。可以通过本领域已知的常规方法制备人抗人类C5抗体与CDR区外部的鼠或非鼠抗体结构元件组合，该人抗人类C5抗体包含具有选自SEQ IDNO:3-5、8-11、14、17、20、23、26、29、34、37-39、42-44、47-49、52-54、57、62、65和68或其一种或多种变体的一个或多个CDR序列的可变区。在一些实施方式中，使用本领域已知的技术进一步人源化抗体或抗体片段。
在一些实施方式中，抗C5抗体包括与在此所描述的CDR序列具有至少约85％(如，至少约85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％中的任一项的至少一项)氨基酸同一性的抗体，列于SEQ ID NO 3-5、8-11、14、17、20、23、26、29、34、37-39、42-44、47-49、52-54、57、62、65和68中。
在一个实施方式中，本公开涵盖了具有与上述CDR序列至少约85％(如，至少约85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％中的任一项的至少一项)同一性的CDR序列的抗C5抗体。在一个实施方式中，针对人类C5的抗体具有重链可变(vH)区和轻链可变(vL)区，其中，该vH区具有与选自SEQ ID NO:2、19、22、28、36、41、46、51、56、59、64、67、和70中的一个序列大于约90％(如，大于约90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％中的任一项)同一性的氨基酸序列，并且其中，该vL区具有与选自SEQ ID NO:7、13、16、17、25、和31中的一个序列大于约90％(如，大于约90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％中的任一项)同一性的氨基酸序列。
在一些实施方式中，抗体或抗体片段被修饰。在一些实施方式中，修饰包括抗体或其抗原结合片段与另一蛋白质或蛋白质片段的部分的融合。在一些实施方式中，本发明的抗体或其抗体片段被修饰以增加同一体内循环半衰期。例如，片段的抗体可以与FcRn分子融合，FcRn分子也被称为新生儿Fc受体以在体内稳定抗体。(Nature Reviews Immunology7:715-725)。在一些实施方式中，抗体或其抗原结合片段缀合(例如，融合)至效应分子和/或另一靶向部分(如，识别不同分子、不同抗原或不同表位的抗体或抗体片段)。
本领域技术人员会能够制备人类C5结合单链可变片段(scFv)，包括选自SEQ IDNO:3-5、8-11、14、17、20、23、26、29、34、37-39、42-44、47-49、52-54、57、62、65和68的至少一个特异性CDR序列或其一个或多个变体。scFv可以包含在SEQ ID NO 3-5、17、20、26、34、37-39、42-44、47-49、52-54、57、62、65以及68中指定的重链可变区序列或其一种或多种变体，以及SEQ ID NO:8-11、14、23和29中指定的轻链可变区或其一种或多种变体。并入scFv内的与本公开中描述的CDR序列具有至少约85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的氨基酸序列同一性的CDR序列涵盖在本公开的范围内。
在一些实施方式中，分离的抗体与人类C5结合，其中，抗体与人类C5的表位结合。在一些实施方式中，本发明的人类C5抗体是与人类C5的特定表位结合的抗体。在一些实施方式中，表位包括C5的α链中的至少一个氨基酸。在一些实施方式中，表位包括C5的β链中的至少一个氨基酸。
筛选测定
本发明在多种筛选测定中具有应用，包括确定候选抗C5抗体是否可以抑制补体活性。
在一些实施方式中，将在候选抗C5抗体存在下的补体活性水平与在阳性比较物对照中检测的补体活性进行比较。阳性比较物对照包括在不存在添加的测试化合物下的补体激活。在一些实施方式中，当在候选抗C5抗体存在下的补体活性小于在阳性比较物对照中检测到的补体活性的约70％时，候选抗C5抗体被识别为补体的抑制剂；这对应于在测试化合物存在下大于约30％的补体活性抑制。在其他实施方式中，当在候选抗C5抗体存在下的补体活性小于在阳性比较物对照中检测到的补体活性的约80％时，候选抗C5抗体被识别为补体的抑制剂；这对应于在测试化合物存在下大于约20％的补体活性抑制。在其他实施方式中，当在候选抗C5抗体存在下的补体活性小于在阳性比较物对照中检测到的补体活性的约90％时，候选抗C5抗体被识别为补体的抑制剂；这对应于在测试化合物存在下大于约10％的补体活性抑制。在一些实施方式中，将候选抗C5抗体的补体抑制水平与阴性比较物对照中检测的抑制水平进行比较。
多种免疫测定形式，包括竞争性和非竞争性免疫测定形式、抗原捕获测定、双抗体夹心测定和三抗体夹心测定是本发明的有用方法(Self et al.,1996,Curr.Opin.Biotechnol.7:60-65)。本发明不应被解释为限于任何一种已知的或在此用于未知的测定，条件是该测定能够检测补体的抑制。
酶联免疫吸附测定(ELISA)在本发明的方法中是有用的。可以将酶(如，但不限于辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶或脲酶)连接至例如用于本发明方法的抗C5抗体或二抗。辣根过氧化物酶检测系统可以例如与显色底物四甲基联苯胺(TMB)一起使用，其在过氧化氢的存在下产生在450nm可检测的可溶性产物。其他方便的酶连接系统包括例如碱性磷酸酶检测系统，其可以与显色底物对硝基苯基磷酸酯一起使用，以产生在405nm容易检测的可溶性产物。类似地，β-半乳糖苷酶检测系统可以与显色底物邻硝基苯基-β-D-吡喃半乳糖苷(ONPG)一起使用，以产生在410nm可检测的可溶产物。可替代地，可以将尿素酶检测系统与如尿素-溴甲酚紫(Sigma Immunochemicals,St.Louis,MO)的底物一起使用。有用的酶联一抗和二抗可以从许多商业来源获得。
化学发光检测也可用于检测末端补体途径的抑制。化学发光二抗可以从任何数量的商业来源获得。
荧光检测对于检测末端补体的抑制也是有用的。有用的荧光染料包括但不限于DAPI、荧光素、Hoechst 33258、R-藻蓝蛋白、B-藻红蛋白、R-藻红蛋白、罗丹明、德克萨斯红以及赖氨酸胺-荧光素-或罗丹明-标记的抗体。
放射免疫测定(RIA)也可用于本发明的方法中。此类测定是本领域公知的，并且描述于例如Brophy et al.(1990,Biochem.Biophys.Res.Comm.167:898-903)和Guechot etal.(1996,Clin.Chem.42:558-563)。例如，使用碘125-标记的一抗或二抗进行放射免疫测定(Harlow et al.,如上，1999)。
分析从可检测抗体发射的信号，例如，使用用于检测来自显色底物的颜色的分光光度计；用于检测辐射的辐射计数器，如，用于检测碘-125的伽马计数器；或在特定波长的光的存在下用于检测荧光的荧光计。当使用酶联测定时，使用分光光度计进行定量分析。应当理解，本发明的测定可以手动进行，或如果需要，可以是自动化的，并且在许多可商购的系统中可以同时检测从多个样品发射的信号。
本发明的方法还涵盖使用基于毛细管电泳的免疫测定法(CEIA)，如果需要，其可以是自动化的。免疫测定还可以与激光诱导的荧光结合使用，如描述于例如Schmalzing etal(1997,Electrophoresis 18:2184-2193)和Bao(1997,J.Chromatogr.B.Biomed.Sci.699:463-480)。还可根据本发明的方法使用脂质体免疫测定法，如，流动注射脂质体免疫测定法和脂质体免疫传感器(Rongen et al.,1997,J.Immunol.Methods 204:105-133)。
定量的蛋白质印迹法也可以用于确定本发明的方法中的末端补体抑制的水平。使用公知的方法(如，扫描光密度测定法(Parra et al.,1998,J.Vasc.Surg.28:669-675)对蛋白质印迹进行定量。
施用方法
本发明的方法包括向识别为患有补体介导的疾病或病症的个体施用治疗有效量的至少一种抗C5抗体或其结合片段(例如本文其他各处所描述的抗体或其片段中的任一个)。在一个实施方式中，个体是具有补体系统的哺乳动物。在一个实施方式中，个体是人。在各种实施方中，至少一种抗C5抗体或其结合片段是局部、区域性或全身性施用。
在各种实施方式中，疾病或病症至少选自由以下各项组成的组中的一个：黄斑变性(MD)、年龄相关性黄斑变性(AMD)、缺血再灌注损伤、关节炎、类风湿性关节炎、狼疮、溃疡性结肠炎、中风、术后全身炎症综合征、哮喘、过敏性哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)综合征、重症肌无力、视神经脊髓炎(NMO)、多发性硬化、移植物功能延迟恢复、抗体介导性排斥、非典型溶血性尿毒症(aHUS)综合征、视网膜中央静脉阻塞(CRVO)、视网膜中央动脉阻塞(CRAO)、大疱性表皮松解、脓毒症、器官移植、炎症(包括但不限于与心肺分流术和肾透析相关的炎症)、C3肾小球病、膜性肾病、IgA肾病、肾小球肾炎(包括但不限于抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)介导的肾小球肾炎、狼疮肾炎以及它们的组合)、ANCA介导的血管炎、志贺毒素诱导的HUS以及抗磷脂抗体诱导的妊娠丧失或者其任何组合。在一些实施方式中，补体介导的疾病是C3肾小球病。在一些实施方式中，补体介导的疾病是黄斑变性，如，年龄相关性黄斑变性。在一个实施方式中，抗C5抗体的施用抑制C5a或C5b蛋白的生成。在一些实施方式中，本发明的组合物和方法可用于治疗对依库珠单抗治疗无反应的受试者，包括患有PNH的受试者。作为非限制性实施例，一些受试者可以在C5的α链中具有突变，该突变可以使它们对依库珠单抗的治疗具有耐药性(参见Genetic variants inC5 and poor response to eculizumab(C5中的基因变体和对依库珠单抗的不良应答)(Nishimura J,et al.,N Engl J Med.2014 Feb 13；370(7):632-9)。
本发明的方法可以包括至少一种抗C5抗体或其结合片段的施用，但本发明不应解释为限于本文所描述的抗C5抗体，但应解释为包含任何已知和未知的减少和减少补体激活的抗C5抗体。
本发明的方法包括向个体施用治疗有效量的至少一种抗C5抗体或其结合片段，其中，本发明的组合物包含至少一种抗C5抗体或其结合片段，单独或与至少一种其他治疗剂组合。本发明可以与其他治疗方式组合使用，例如像抗炎疗法等。可以与本发明的方法组合使用的抗炎疗法的实施例包括例如采用甾体药物的疗法以及采用非甾体药物的疗法。
本发明的方法包括向受试者施用治疗有效量的抗C5抗体或其抗原结合片段。在一些实施方式中，本发明涵盖通过施用治疗有效量的本发明的抗体或治疗有效量的其抗体片段来治疗涉及补体信号传导失调的C5相关疾病的方法，使得在受试者中实现C5a或C5b或MAC形成的减少。在一些实施方式中，本发明涵盖通过施用治疗有效量的抗体或抗体片段来治疗涉及补体信号传导失调的C5相关疾病的方法。在一些实施方式中，本发明涵盖治疗涉及补体信号传导失调的C5相关疾病的方法，其通过向受试者施用有效量的抗体、抗体片段、多肽、肽、缀合肽，使得受试者中补体活化途径活化减少。在一些实施方式中，治疗方法包括向受试者施用全身有效剂量的抗体或抗体片段，由此在受试者中实现C5a或C5b或MAC形成的全身减少。
可以施用用于实施本发明的药物组合物以递送受试者体重的至少约1ng/kg、至少约5ng/kg、至少约10ng/kg、至少约25ng/kg、至少约50ng/kg、至少约100ng/kg、至少约500ng/kg、至少约1g/kg、至少约5g/kg、至少约10g/kg、至少约25g/kg、至少约50g/kg、至少约100g/kg、至少约500g/kg、至少约1mg/kg、至少约5mg/kg、至少约10mg/kg、至少约25mg/kg、至少约50mg/kg、至少约100mg/kg、至少约200mg/kg、至少约300mg/kg、至少约400mg/kg以及至少约500mg/kg的剂量。在一个实施方式中，本发明在个体中施用使本发明的抗C5抗体浓度为至少约1pM、至少约10pM、至少约100pM、至少约1nM、至少约10nM、至少约100nM、至少约1μM、至少约2μM、至少约3μM、至少约4μM、至少约5μM、至少约6μM、至少约7μM、至少约8μM、至少约9μM以及至少约10μM的剂量。在另一实施方式中，本发明在个体的血浆中施用使本发明的抗C5抗体浓度为至少约1pM、至少约10pM、至少约100pM、至少约1nM、至少约10nM、至少约100nM、至少约1M、至少约2μM、至少约3μM、至少约4μM、至少约5μM、至少约6μM、至少约7μM、至少约8μM、至少约9μM以及至少约10μM的剂量。
在一些实施方式中，可以施用用于实施本发明的药物组合物以递送受试者体重的不超过约1ng/kg、不超过约5ng/kg、不超过约10ng/kg、不超过约25ng/kg、不超过约50ng/kg、不超过约100ng/kg、不超过约500ng/kg、不超过约1μg/kg、不超过约5μg/kg、不超过约10μg/kg、不超过约25μg/kg、不超过约50μg/kg、不超过约100μg/kg、不超过约500μg/kg、不超过约1mg/kg、不超过约5mg/kg、不超过约10mg/kg、不超过约25mg/kg、不超过约50mg/kg、不超过约100mg/kg、不超过约200mg/kg、不超过约300mg/kg、不超过约400mg/kg以及不超过约500mg/kg的剂量。在一个实施方式中，本发明在个体中施用使本发明的抗C5抗体浓度不超过约1pM、不超过约10pM、不超过约100pM、不超过约1nM、不超过约10nM、不超过约100nM、不超过约1μM、不超过约2μM、不超过约3μM、不超过约4μM、不超过约5μM、不超过约6μM、不超过约7μM、不超过约8μM、不超过约9μM以及不超过约10μM的剂量。在另一实施方式中，本发明设想在个体的血浆中施用使本发明的抗C5抗体浓度不超过约IpM、不超过约10pM、不超过约100pM、不超过约1nM、不超过约10nM、不超过约100nM、不超过约1μM、不超过约2μM、不超过约3μM、不超过约4μM，不超过约5μM、不超过约6μM、不超过约7μM、不超过约8μM、不超过约9μM以及不超过约10μM的剂量。还考虑了在本文公开的任何剂量之间的剂量范围。
典型地，可以在本发明的方法中向受试者(在一些实施方式中是人)施用的剂量是每千克受试者体重从0.5μg至约50mg的量的范围。尽管所施用的精确剂量将取决于许多因素而变化，这些因素包括但不限于受试者的类型和所治疗的疾病状态的类型、受试者的年龄以及施用途径。在一些实施方式中，化合物的剂量将从每千克受试者体重约1μg至约10mg变化。在其他实施方式中，剂量将从每千克受试者体重约3μg至约1mg变化。
可以向受试者每天多次频繁地施用抗体，或可以不太频繁地施用，如，每天一次、每天两次、每天三次、每周一次、每周两次、每周三次、每两周一次、每两周两次、每两周三次、每月一次、每月两次、每月三次或甚至更不频繁，如，每几个月一次或甚至每年一次或几次或更少。剂量的频率对技术人员而言是显而易见的并且将取决于许多因素，如，但不限于所治疗疾病的类型和严重性、受试者的类型和年龄等。药物组合物的制剂可以通过任何已知的或此后在药理学领域中开发的方法来制备。一般来说，这类制备方法包括以下步骤：引入活性组分与载体或一种或多种其助剂的结合，并且然后，如果必要或需要的话，将产品成型或包装成期望的单剂量或多剂量单位。
虽然本文提供的药物组合物的描述主要针对在伦理上适合向人施用的药物组合物，但本领域的技术人员应该理解这类组合物通常适合向所有种类的受试者施用。对适合于向人施用的药物组合物进行修饰以使组合物适合于向多种受试者施用的方法是众所周知的，并且兽医药理学领域的普通技术人员可以仅通过常规实验(如果需要)来设计和实施这种修饰。本发明的药物组合物施用至其的个体考虑为包括，但不限于灵长类、哺乳动物，包括商业上有关的哺乳动物，如，非人类的灵长类动物、牛、猪、马、羊、猫和狗。
在本发明的方法中有用的药物组合物可以按适合于眼用、口服、直肠、阴道、肠胃外、局部、肺部、鼻内、口腔、眼内、玻璃体内、肌内、皮内和静脉内施用途径的制备来制备、包装或销售。其他期望的制剂包括投射的纳米颗粒、脂质体制剂、含有活性组分的释放的红细胞以及免疫类制剂。
本发明的药物组合物可以以批或作为单个单位剂量或作为多个单位剂量制备、包装或出售。单位剂量是包含预定量的活性成分的药物组合物的不连续量。活性组分的量通常等于向个体施用的活性组分的剂量，或者是这类剂量的适当分散，如，例如，这类剂量的二分之一或三分之一。
本发明的药物组合物中的活性成分、药学上可接受的载体和任何另外的成分的相对量将取决于所治疗的个体的身份、大小和状况并且进一步取决于组合物待施用的途径而变化。举例来说，组合物可以包含0.1％至100％(w/w)之间的活性成分。在各种实施方式中，组合物包含至少约1％、至少约2％、至少约3％、至少约4％、至少约5％、至少约6％、至少约7％、至少约8％、至少约9％、至少约10％、至少约11％、至少约12％、至少约13％、至少约14％、至少约15％、至少约16％、至少约17％、至少约18％、至少约19％、至少约20％、至少约21％、至少约22％、至少约23％、至少约24％、至少约25％、至少约26％、至少约27％、至少约28％、至少约29％、至少约30％、至少约31％、至少约32％、至少约33％、至少约34％、至少约35％、至少约36％、至少约37％、至少约38％、至少约39％、至少约40％、至少约41％、至少约42％、至少约43％、至少约44％、至少约45％、至少约46％、至少约47％、至少约48％、至少约49％、至少约50％、至少约51％，至少约52％、至少约53％、至少约54％、至少约55％、至少约56％、至少约57％、至少约58％、至少约59％、至少约60％、至少约61％、至少约62％、至少约63％、至少约64％、至少约65％、至少约66％、至少约67％、至少约68％、至少约69％、至少约70％、至少约71％、至少约72％、至少约73％、至少约74％、至少约75％、至少约76％、至少约77％、至少约78％、至少约79％、至少约80％、至少约81％、至少约82％、至少约83％、至少约84％、至少约85％、至少约86％、至少约87％、至少约88％、至少约89％、至少约90％、至少约91％、至少约92％、至少约93％、至少约94％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或至少约100％(w/w)的活性成分。
除活性成分之外，本发明的药物组合物还包含一种或多种另外的药学活性试剂。
本发明的药物组合物的控制释放或持续释放型制剂可以使用常规技术制备。
药物组合物的肠胃外施用包括其特征在于个体的组织的物理创口并且通过组织中的创口施用药物组合物的任何途径的施用。肠胃外施用可以是局部的、区域的或系统的。因此，肠胃外施用包括(但不限于)通过注射组合物、通过手术切口应用组合物、通过穿透组织的非手术创伤应用组合物等的药物组合物的施用。特别地，肠胃外施用期望包括但不限于静脉内、眼内、玻璃体内、皮下、腹膜内、肌内、皮内、胸骨内注射和肿瘤内。
适合用于肠胃外施用的药物组合物的制剂包括活性成分与药学上可接受的载体结合的载体，如，无菌水或无菌生理盐水。这类制剂可以以适合用于丸施用或连续施用的形式制备、包装或销售。可注射用组合物可以以单位剂量形式，如，以安瓿或包含防腐剂的多剂量容器的形式制备、包装或销售。用于肠胃外施用的制剂包括但不限于在油或水性载体中的悬液、溶液、乳液、糊剂以及可植入的持续释放的或可生物降解的制剂。这类制剂还包括一种或多种另外的成分，包括但不限于悬浮剂、稳定剂或分散剂。在用于肠胃外施用的制剂的一种实施方式中，在肠胃外施用重构组合物之前，以干燥(即粉末或颗粒)形式提供活性成分以用于与合适的载体(例如无菌无热原水)进行重构。
药物组合物可以以无菌可注射水溶液或油悬液或溶液的形式制备、包装、出售。悬液或溶液可以根据已知技术制备，并且除活性组分之外，可以包括另外的成分，如，分散剂、润湿剂或悬浮剂。例如，此类无菌可注射制剂可以使用无毒的肠胃外上可接受的稀释剂或溶剂(如，水或1,3-丁二醇)制备。其它可接受的稀释剂和溶剂包括(但不限于)林格氏溶液、等渗氯化钠溶液和不挥发油，如，合成单或双甘油酯。其他有用的肠胃外施用制剂包括含有以微晶形式、脂质体制剂形式或作为可生物降解的聚合物系统中的组分的活性成分的那些。用于缓释或植入的组合物可以包含药学上可接受的聚合物或疏水性材料，如，乳液、离子交换树脂、微溶聚合物或微溶盐。
本发明的药物组合物可以以适合用于经由口腔的肺部施用的制剂制备、包装、出售。此类制剂可以包括包含活性成分的干燥的颗粒，以及其具有约0.5至7纳米，和一些实施方式中约1至6纳米范围的直径。此类组合物方便地呈干粉形式，用于使用包含干粉贮存器的装置(推进剂流可以被引导至该干粉贮存器以分散粉末)或使用自推进溶剂/粉末分配容器(例如在密封容器中包含溶解或悬浮于低沸点推进剂中的活性成分的装置)来施用。在一些实施方式中，此类粉末包含颗粒，其中，按重量计至少98％的颗粒具有大于0.5纳米的直径和按数量计至少95％的颗粒具有小于7纳米的直径。在一些实施方式中，按重量计至少95％的颗粒具有大于1纳米的直径和按数量计至少90％的颗粒具有小于6纳米的直径。在一些实施方式中，干燥粉末组合物包括固体细粉稀释剂(如，糖)并且方便地以单位剂量形式提供。
低沸点推进剂通常包括在大气压下具有低于65°F的沸点的液体推进剂。推进剂通常可以占组合物的50至99.9％(w/w)，并且活性成分可以占组合物的0.1至20％(w/w)。推进剂还可以包含另外的成分，如，液体非离子表面活性剂或固体阴离子表面活性剂或固体稀释剂(在一些实施方式中具有与包含活性组分的颗粒相同等级的粒径)。
配制用于肺部递送的本发明的药物组合物还可以提供溶液或悬浮液的液滴形式的活性成分。此类制剂可以作为包含活性成分的水性或稀释的醇溶液或混悬液(任选地无菌的)制备、包装或销售，并且可以使用任何雾化或雾化装置方便地施用。此类制剂还可以包含一种或多种另外的成分，包括但不限于调味剂(如，糖精钠)、挥发性油、缓冲剂、表面活性剂或防腐剂(如，甲基羟基苯甲酸酯)。在一些实施方式中，由这种施用途径提供的液滴具有在从约0.1至约200纳米范围内的平均直径。
制剂也可用于鼻内递送本发明的药物组合物。
适合于鼻内施用的另一制剂是包含活性成分并且具有从约0.2至500微米的平均颗粒的粗粉。此类制剂以吸入鼻烟的方式施用，即，通过鼻道从靠近鼻孔保持的粉末容器中快速吸入。
适合于经鼻施用的配制品可以例如包含从约少至0.1％(w/w)并且多至100％(w/w)的活性成分，并且还可以包含一种或多种另外的成分。
本发明的药物组合物可以以适合于口腔施用的制剂制备、包装或销售。此类制剂可以(例如)处于使用常规方法制备的片剂或锭剂形式，并且可以包含(例如)0.1％至20％(w/w)的活性成分，余量包含口服可溶解或可降解的组合物和任选地一种或多种另外的成分。可替代地，适合于口腔施用的制剂可以包含粉剂或含有活性成分的气雾化或雾化溶液或混悬液。在一些实施方式中，当分散时，此类粉状、气雾化或气雾化制剂具有在从约0.1至约200纳米范围内的平均粒径或液滴尺寸，并且还可以包含一种或多种另外的成分。
如本文使用的，“另外的组合物”包括但不限于以下各项中的一种或多种：赋形剂；表面活性剂；分散剂；惰性稀释剂；造粒剂和崩解剂；粘合剂；润滑剂；增甜剂；调味剂；着色剂；防腐剂；生理上可降解的组合物，如，明胶；水性载体和溶剂；油性载体和溶剂；悬浮剂；分散剂或润湿剂；乳化剂，缓和剂；缓冲液；盐；增稠剂；填充剂；乳化剂；抗氧化剂；抗生素；抗真菌剂；稳定剂；以及药学上可接受的聚合材料的或疏水材料。可以是包括在本发明的药物组合物中的其他“另外的组合物”是本领域中已知的并且描述的，例如在Remington’sPharmaceutical Sciences(1985,Genaro,ed.,Mack Publishing Co.,Easton,PA)，其通过引用结合于此。
产生抗体的细胞及其抗原结合片段
在一些实施方式中，本发明是产生在此描述的抗C5抗体或抗原结合片段中的至少一种的细胞或细胞系(如，宿主细胞)。在一个实施方式中，细胞或细胞系是产生在此描述的抗C5抗体或抗原结合片段中的至少一种的基因修饰的细胞。在一个实施方式中，细胞或细胞系是产生在此描述的抗C5抗体或抗原结合片段中的至少一种的杂交瘤。
杂交细胞(杂交瘤)通常产生自鼠脾细胞和骨髓瘤“融合伴侣细胞”((Alberts etal.,Molecular Biology of the Cell(Garland Publishing,Inc.1994)；Harlow et al.,Antibodies.A Laboratory Manual(Cold Spring Harbor Laboratory,Cold SpringHarbor,1988)。随后将融合中的细胞分配到库中，可以对其分析以产生具有期望的特异性的抗体。可以进一步细分测试阳性的库，直到识别出产生具有期望的特异性的抗体的单细胞克隆。由这些克隆产生的抗体称为单克隆抗体。
还提供了编码本文公开的任何抗体或抗体片段的核酸，以及包含核酸的载体。因此，本发明的抗体和片段可以通过在细胞或细胞系(例如通常用于表达重组或人源化免疫球蛋白的细胞系)中表达核酸来产生。因此，本发明的抗体和片段还可以通过将核酸克隆到一个或多个表达载体中，并且将载体转化到细胞系(如，典型地用于表达重组或人源化免疫球蛋白的细胞系)中来产生。
可以根据方法(包括但不限于本领域已知的聚合酶链式反应(PCR))工程化编码免疫球蛋白重链和轻链的基因或其片段(参见，例如，Sambrook et al.,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,2nd ed.,Cold Spring Harbor,N.Y.,1989；Berger&Kimmel,Methods in Enzymology,Vol.152:Guide to Molecular Cloning Techniques,AcademicPress,Inc.,San Diego,Calif.,1987；Co et al.,1992,J.Immunol.148:1149)。例如，可以从抗体分泌细胞基因组DNA克隆编码重链和轻链的基因或其片段，或通过细胞RNA的逆转录产生cDNA。克隆是通过常规技术完成的，包括使用与待克隆的基因或基因区段侧翼或重叠的序列杂交的PCR引物。
可以根据用于在多种宿主细胞中或在体外翻译系统中产生特异性免疫球蛋白、免疫球蛋白链或其片段或变体的重组核酸技术来获得和使用编码本发明的抗体或者重链或轻链或其片段的核酸。例如，可以将编码抗体的核酸或其片段置于合适的原核或真核载体(例如，表达载体)中并且通过适当的方法(例如转化、转染、电穿孔、感染)引入合适的宿主细胞中，使得核酸可操作地连接至一个或多个表达控制元件，例如，在载体中或整合到宿主细胞基因组中。
在一些实施方式中，重链和轻链或其片段可以在可以用于共转染受体细胞的两个不同表达载体中组装。在一些实施方式中，每个载体可以包含两个或更多个可选择的基因，一个用于在细菌系统中进行选择并且一个用于在真核系统中进行选择。这些载体允许在细菌系统中产生和扩增基因，并且随后共转染真核细胞并且选择共转染的细胞。选择程序可以用于选择在两个不同DNA载体上引入真核细胞中的抗体核酸的表达。
可替代地，编码重链和轻链的核酸或其片段可以从一种载体表达。尽管轻链和重链是由单独的基因编码的，但是可以使用重组方法将它们连接。例如，两个多肽可以通过合成接头连接，该接头使得它们能够制备为单个蛋白质链，其中VL和VH区配对形成单价分子(称为单链Fv(scFv)；参见例如Bird et al.，1988，Science 242：423-426；和Huston等，1988，Proc.Nat1.Acad.Sci.USA 85：5879-5883)。
本发明提供了包含编码重链和/或轻链的核酸序列及其片段的分离的核酸分子。包含编码轻链和重链两者的序列或其片段的核酸分子可以被工程化为包含合成的信号序列，用于在细胞中产生抗体或片段时分泌该抗体或片段。此外，核酸分子可以含有特异性DNA连接，其允许插入其他抗体序列并且维持翻译读取框以便不改变抗体序列中通常发现的氨基酸。
根据本发明，可以将编码抗体的核酸序列插入适当的表达载体中。在各种实施方式中，表达载体包括用于转录和翻译插入的编码抗体的核酸的必要元件，以便产生指导抗体序列的表达以形成抗体或其片段的重组DNA分子。
可以对编码抗体的核酸或其片段进行本领域技术人员已知的各种重组核酸技术，如，定点诱变。
可以使用多种方法在细胞中表达核酸。核酸可以克隆到许多类型的载体中。然而，本发明不应被解释为限于任何特定的载体。相反，本发明应被解释为包括本领域容易获得和/或已知的多种载体。例如，本发明的核酸可以克隆到载体中，该载体包括但不限于质粒、噬菌粒、噬菌体衍生物、动物病毒和粘粒。特别感兴趣的载体包括表达载体、复制载体、探针生成载体和测序载体。
在具体实施方式中，表达载体选自由病毒载体、细菌载体和哺乳动物细胞载体组成的组。存在许多表达载体系统，其包含至少一部分或全部的上述组合物。可以使用基于原核生物和/或真核生物-载体的系统用于与发明的使用以产生多核苷酸或它们的同源多肽。许多这类系统是可商购的并且可广泛应用。
病毒载体技术是本领域中已知的，并且在，例如Sambrook et al.(2012)和在Ausubel et al.(1999)，以及在其他病毒学和分子生物学手册中进行了描述。作为载体有用的病毒包括，但不限于，逆转录病毒、腺病毒、腺病毒相关的病毒、疱疹病毒以及慢病毒。在一些实施方式中，使用鼠类干细胞病毒(MSCV)载体来表达期望的核酸。已证明MSCV载体在细胞中有效地表达期望的核酸。然而，本发明不应限于仅使用MSCV载体，而是任何逆转录病毒表达方法都包含在本发明中。病毒载体的其他实施例是基于莫洛尼鼠白血病病毒(MoMuLV)和HIV的那些。在一些实施方式中，合适的载体包含在至少一种生物体中起作用的复制起点、启动子序列、方便的限制性内切核酸酶位点和一个或多个选择性标记子。(参见，例如，WO 01/96584；WO 01/29058；美国专利号6,326,193)。
可以使用另外的调节元件(例如，增强子)来调节转录起始的频率。启动子可以与基因或核酸序列天然相关的启动子，如可以通过分离位于编码片段和/或外显子上游的5’非编码序列获得。此类启动子可以被称为“内源性的”。类似地，增强子可以是与位于序列的下游或上游的核酸序列天然相关的增强子。可替代地，在重组或异源启动子(通常与自然环境下的核酸序列不相关)的控制下，通过定位编码核酸片段可以获得一些优点。重组或异源增强子是指与在它的自然环境中的核酸序列通常不相关的增强子。这样的启动子或增强子可以包括其他基因的启动子或增强子，以及从任何其他原核细胞、病毒或真核细胞中分离的启动子或增强子，以及不是“天然发生”的启动子或增强子，例如，包含不同的转录调控区的不同元件和/或改变表达的突变。除了合成制备启动子和增强子的核酸序列之外，序列可以使用重组克隆和/或核酸扩增技术(包括PCR)结合本文所公开的组合物(美国专利号4,683,202、美国专利号5,928,906)制备。此外，也可以考虑的是可以使用在非核细胞器(如，线粒体、叶绿体)之内指导转录和/或表达的控制序列。
自然地，重要的是使用在选择用于表达的细胞种类、细胞器和生物体中有效地指导DNA片段的表达的启动子和/或增强子。分子生物学领域的技术人员通常知道如何使用用于蛋白表达的启动子、增强子和细胞种类，例如，参见Sambrook等(2012)。所采用的启动子在合适的条件下可以是组成型的、组织特异性的、可诱导的和/或有用的以指导导入的DNA片段的高水平的表达，如，在重组蛋白和片段的大规模的生产中是有利的。
启动子的实施例是即时早期巨细胞病毒(CMV)启动子序列。启动子序列是能够驱动可操作地连接至其的任何多核苷酸序列的高水平的表达的强效组成型启动子序列。然而，也可以使用其他组成型启动子序列，包括但不限于猿猴病毒40(SV40)早期启动子、小鼠乳腺肿瘤病毒(MMTV)、人免疫缺陷病毒(HIV)长末端重复(LTR)启动子、莫洛尼病毒启动子、禽类白血病病毒启动子、EB病毒即时早期启动子、劳氏肉瘤病毒启动子以及人基因启动子(如，但不限于肌动蛋白启动子、肌球蛋白启动子、血红蛋白启动子和肌肉肌酸启动子)。此外，本发明不应该限于组成型启动子的使用。诱导型启动子也可以考虑作为本发明的一部分。在本发明中使用的诱导型启动子提供了分子开关，其能够当表达不是期望时启动操作性连接的多核苷酸序列的表达，或者当表达不是期望的时关闭表达。诱导型启动子的实施例包括，但不限于金属硫蛋白启动子、糖皮质激素启动子、孕酮启动子以及四环素启动子。此外，本发明包括使用组织特异性启动子或细胞类型特异性启动子，其是仅在期望的组织或细胞中有活性的启动子。组织特异性启动子是本领域已知的，包括但不限于HER-2启动子和PSA相关启动子序列。
为了测定核酸的表达，待引入细胞中的表达载体还可以含有选择性标记基因或报告基因或两者，以促进来自寻求通过病毒载体转染或感染的多种细胞的表达细胞的识别和选择。在其他实施方式中，可以在分离的核酸上运载可选的标记子并且用于共转染方法。可选的标记子和报告基因可以侧翼有合适的调控序列以便能够在宿主细胞中表达。有用的可选的标记子在本领域中是已知的，并且包括，例如抗生素-抗性基因，如，neo等。
使用报告基因用于识别可能转染的细胞和用于评估调控序列的功能。编码容易分析的蛋白的报告基因是本领域中已知的。一般来说，报告基因是不存在于受体生物体中的基因或不由受体生物体或组织表达的基因，并且编码其表达表现为一些容易检测的特性(如，酶活性)的蛋白质的基因。在DNA导入受体细胞之后，在合适的时间检测报告基因的表达。
合适的报告基因可以包括：基因编码荧光素酶、B-半乳糖苷酶、氯霉素乙酰转移酶，分泌的碱性磷酸酶的基因或绿色荧光蛋白基因(参见，例如，Ui-Tei et al.,2000FEBSLett.479:79-82)。合适的表达系统是已知的并且可以使用已知的技术制备或者商业上获得。一般来说，表现出最高水平的报告基因的表达的具有最小的5’侧翼区的结构确定为启动子。这种启动子区可以连接至报告基因并且用于评价试剂的调控启动子驱动转录的能力。
将核酸引入和表达至细胞的方法是本领域已知的。在表达载体的背景下，可以通过本领域中的任何方法容易地将载体引入宿主细胞中，例如哺乳动物、细菌、酵母或昆虫细胞。例如，可以通过物理、化学或生物手段将表达载体转移到宿主细胞中。
用于将多核苷酸引入宿主细胞中的物理方法包括磷酸钙沉淀、脂转染、粒子轰击、显微注射、电穿孔、激光穿孔等。用于产生包含载体和/或外源核酸的细胞的方法是本领域公知的。参见，例如，Sambrook et al.(2012)和Ausubel et al.(1999)。
用于将感兴趣的核酸引入宿主细胞中的生物方法包括使用DNA和RNA载体。病毒载体，尤其是逆转录病毒载体，已经成为将基因插入哺乳动物，例如人细胞的最广泛使用的方法。其他病毒载体可以源自慢病毒、痘病毒、单纯疱疹病毒I、腺病毒和腺相关病毒等。参见，例如，参见美国专利号US 5,350,674和US 5,585,362。
用于将核酸引入宿主细胞的化学手段包括胶体分散体系(例如，大分子复合物、纳米胶囊、微球、珠粒)以及基于脂质的系统，包括水包油乳液、胶束、混合胶束以及脂质体。用作体外和体内递送载体的优选胶体系统是脂质体(例如，人工膜囊泡)。这种系统的制备和使用是本领域中众所周知的。
不管用于将外源核酸引入到宿主细胞中或以其他方式将细胞暴露于本发明的核酸的方法如何，为了确认重组DNA序列在宿主细胞中的存在，可以进行各种测定。此类测定包括例如，本领域技术人员公知的“分子生物学”测定，例如Southern和Northern印迹、RT-PCR和PCR；“生物化学”测定，例如检测特定肽的存在或不存在，例如通过免疫学手段(ELISA和Western印迹)或通过本文描述的测定来识别落入本发明范围内的试剂。
表达人类C5的非人动物
本发明还包括表达人类C5的基因修饰的非人动物。在一些实施方式中，表达人类C5的基因修饰的非人动物还表达非人动物C5。在一些实施方式中，表达人类C5的基因修饰的非人动物不表达非人动物C5。在一个实施方式中，本发明是基因修饰的非人动物，其从非人动物的内源性调节元件表达人类C5，但不表达非人动物C5。在一些实施方式中，非人动物是哺乳动物。在一些实施方式中，非人动物是啮齿动物。在一些实施方式中，非人动物是大鼠或小鼠。在一些实施方式中，小鼠是免疫缺陷小鼠。在一些实施方式中，小鼠是NOD/SCID小鼠。在一些实施方式中，小鼠是FcRn/SCID小鼠。
为了产生基因修饰的非人动物，可以将编码人类C5蛋白的核酸以适于在宿主细胞中表达人类C5蛋白的形式并入重组表达载体。术语“处于适于在宿主细胞中表达融合蛋白的形式”旨在意指重组表达载体包括一个或多个调节序列，该调节序列以允许整合到非人动物基因组中的方式可操作地连接至编码人类C5蛋白的核酸，从而使得核酸稳定且永久地转录成mRNA并且mRNA翻译成人类C5蛋白。术语“调节序列”是本领域公知的并且旨在包括启动子、增强子和其他表达控制元件(例如，聚腺苷酸化信号、PiggyBac和Sleeping Beauty转座子元件)。此类调节序列是本领域技术人员已知的并且描述于990,Goeddel,GeneExpression Technology:Methods in Enzymology 185,Academic Press,San Diego,Calif and in Nakanishi H,Higuchi Y,Kawakami S,Yamashita F,Hashida M.MolTher.2010Apr；18(4):707-14.doi:10.1038/mt.2009.302.Epub 2010 Jan 26.；HudecekM,Ivics Z.Curr Opin Genet Dev.2018Jun 22；52:100-108.doi:10.1016/j.gde.2018.06.003。[电子版打印前]综述([Epub ahead of print]Review)。应当理解，表达载体的设计可以取决于如待转染的宿主细胞和动物的选择和/或待表达的人类C5蛋白的量等因素。
基因修饰的非人动物可以例如通过将编码人类C5蛋白的核酸(典型地连接至适当的调节元件，如，组成型或组织特异性增强子)引入卵母细胞中，例如通过显微注射，并且允许卵母细胞在雌性创始小鼠中发育来产生。此类动物还可以通过经由在Suda T,Liu D.MolTher.2007 Dec；15(12):2063-9.电子公开2007年10月2日，综述，中所描述的尾静脉流体动力学注射将编码人类C5蛋白的核酸(典型地连接至适当的调节元件，如，组成型或组织特异性增强子和/或PiggyBac和Sleeping Beauty转座子元件)引入动物中来产生。内含子序列和多腺苷酸化信号也可以包括在转基因中以增加转基因的表达效率。用于产生基因修饰的动物(如，小鼠)的方法在本领域中已经变得常规并且描述于例如美国专利号4,736,866和4,870,009，以及1986，Hogan等人，A Laboratory Manual，Cold Spring Harbor，N.Y.，ColdSpring Harbor Laboratory。如果转基因被引入卵母细胞中，基因修饰的创始动物可以用于培育携带转基因的另外的受试者。携带编码经由本发明的卵母细胞注射产生的C5蛋白的转基因的基因修饰动物可以进一步培育成携带其他转基因的其他基因修饰动物，或培育成其他敲除动物，例如不表达鼠C5基因的敲除小鼠。携带经由流体动力学尾静脉注射产生的编码C5蛋白的转基因的基因修饰动物可以容易地使用其他基因敲除或转基因小鼠(例如，用于实验用途的FcRn/SCID小鼠)来产生。应当理解，除了基因修饰的动物之外，该系统还可以用于产生其他人类C5表达受试者。
在一个实施方式中，表达来自非人动物的调节元件的人类C5的基因修饰的非人动物使用将非人动物的C5外显子序列(或外显子和内含子序列)替换为人类C5外显子序列(或外显子和内含子序列)的系统来产生，但是保留一个、多个或所有的天然非人动物的调控元件(例如，启动子、增强子、侧翼区、内含子等)序列不变。虽然可以使用任何适合的系统，但是能够以这种方式产生基因修饰的非人动物的一个示例性系统是CRISPR/Cas9系统。“CRISPR/Cas”系统是指一类广泛存在的用于防御外源核酸的细菌系统。CRISPR/Cas系统在广泛范围的真细菌和古细菌生物体中发现。CRISPR/Cas系统包括I型、II型和III亚型。野生型II型CRISPR/Cas系统利用RNA介导的核酸酶与指导和激活RNA复合的Cas9来识别并裂解外源核酸。Cas9同系物发现于多种真细菌中，包括但不限于以下分类组的细菌：放线菌、水生菌、拟杆菌-小球藻、衣原体-疣状微生物、丘柔氏菌、蓝细菌、厚壁菌、变形杆菌、螺旋菌以及嗜热菌。示例性Cas9蛋白是化脓链球菌Cas9蛋白。另外的Cas9蛋白及其同源物描述于例如，Chylinksi,et al.,RNA Biol.2013 May 1；10(5):726-737；Nat.Rev.Microbiol.2011June；9(6):467-477；Hou,et al.,Proc Natl Acad Sci U S A.2013 Sep 24；110(39):15644-9；Sampson et al.,Nature.2013 May 9；497(7448):254-7；和Jinek,et al.,Science.2012 Aug 17；337(6096):816-21。
在一个实施方式中，本发明的基因修饰的非人动物从内源启动子表达人类C5。在本发明中有用的启动子的实施例包括但不限于天然小鼠启动子、DNA pol II启动子、PGK启动子、泛素启动子、白蛋白启动子、球蛋白启动子、卵白蛋白启动子、SV40早期启动子、劳氏肉瘤病毒(RSV)启动子、β-肌动蛋白启动子、逆转录病毒LTR以及慢病毒LTR。在本发明中有用的启动子和增强子表达系统还包括诱导型和/或组织特异性表达系统。
在一些实施例中，将表达人类C5的本发明的基因修饰的非人动物用于筛选、测试、评估或评抗C5抗体。在一些实施例中，将表达人类C5的本发明的基因修饰的非人动物用于筛选、测试、测定或评估抗C5抗体的特征、特性或活性。
试剂盒
本发明还包括试剂盒，其包含本发明的抗C5抗体或其组合以及描述例如向个体施用抗C5抗体或其组合作为如本文其他地方的治疗性治疗或非治疗用途的说明材料。在一个实施方式中，试剂盒还包含适合于溶解或悬浮治疗组合物的(任选地无菌的)药学上可接受的载体，该载体包含例如在向个体施用抗体之前的本发明的抗C5抗体或其组合。任选地，试剂盒包括用于施用抗体的施用器。
序列
人源化2G1 VH-11801
Figure BDA0003051171100001201
人源化2G1 VL-1901
Figure BDA0003051171100001202
Figure BDA0003051171100001211
人源化2G1 VL-1901变体(在CDR3中的Q->H变体)
Figure BDA0003051171100001212
人源化2G1 VL-1901变体(在CDR1中的T->H变体)
Figure BDA0003051171100001213
人源化2G1 VH-11801变体(在CDR1中的I->H变体)
Figure BDA0003051171100001221
人源化2G1 VH-11801变体(在CDR1中的N->H变体)
Figure BDA0003051171100001222
人源化2G1 VL-1901变体(在CDR1中的Y->H变体)
Figure BDA0003051171100001223
Figure BDA0003051171100001231
人源化2G1 VH-11801变体(在CDR2中的Y->H变体)
Figure BDA0003051171100001232
人源化2G1 VL-1901变体(在CDR3中的E->H变体)
Figure BDA0003051171100001233
人源化2G1 VH-11801变体(在CDR2中的T->H变体)
Figure BDA0003051171100001241
mAb H1-8/L1-9变体IWW的重链序列(在CDR1中的L->I变体，在CDR2中的P->W变体，在CDR3中的V->W变体)
IWW-VH
Figure BDA0003051171100001242
mAb H1-8/L1-9变体IFW的重链序列(在CDR1中的L->I变体，在CDR2中的P->F变体，在CDR3中的V->W变体)
IFW-VH
Figure BDA0003051171100001251
mAb H1-8/L1-9变体FME的重链序列(在CDR1中的L->F变体，在CDR2中的P->M变体，在CDR3中的V->E变体)
FME-VH
Figure BDA0003051171100001252
mAb H1-8/L1-9变体FMW的重链序列(在CDR1中的L->F变体，在CDR2中的P->M变体，在CDR3中的V->W变体)
FMW-VH
Figure BDA0003051171100001261
mAb H1-8/L1-9变体FMEH的重链序列(在CDR1中的L->F变体，在CDR2中的P->M和T->H变体，在CDR3中的V->E变体)
FMEH-VH
Figure BDA0003051171100001262
mAb H1-8/L1-9变体IWWH的重链序列(在CDR1中的L->I变体，在CDR2中的P->M和T->H变体，在CDR3中的V->W变体)
IWWH-VH
Figure BDA0003051171100001271
mAb H1-8/L1-9变体IFWH的重链序列(在CDR1中的L->I变体，在CDR2中的P->F和T->H变体，在CDR3中的V->W变体)
IFWH-VH
Figure BDA0003051171100001272
mAb H1-8/L1-9变体FMWH的重链序列(在CDR1中的L->F变体，在CDR2中的P->M和T->H变体，在CDR3中的V->W变体)
FMWH-VH
Figure BDA0003051171100001281
人类IgG4恒定重链区的氨基酸序列
Figure BDA0003051171100001282
Figure BDA0003051171100001291
具有S108突变的人类IgG4恒定重链区的氨基酸序列(相对于SEQ ID NO:32)
Figure BDA0003051171100001301
Figure BDA0003051171100001311
人类IgG4 Fc PLA结构域突变体的序列
Figure BDA0003051171100001312
Figure BDA0003051171100001321
实验实施例
现在参考以下实施例对本发明进行描述。提供这些实施例仅用于说明的目的，并且本发明不应被解释为限于这些实施例，而是应被解释为包括由于在此提供的教导内容而变得明显的任何和所有变体。
无需更进一步的说明，应相信本领域的普通技术人员使用之前描绘的和以下说明的实施例可以制造并利用本发明的化合物并进行所要求保护的方法。因此，以下操作实施例不应被解释为以任何方式限制本公开的其余部分。
实施例1
生成了人源化2G1的变体(VH-11801(SEQ ID NO:2)和VL-1901(SEQ ID NO:7))(参见图1)，目的是在pH 7.4时开发具有改善与C5结合并且在pH 5.8时降低与C5的结合的变体。
在此描述的方法是基于以下理解：在体外测量的mAb的亲和力和阻断功效不一定与其体内半衰期PK或PD相关。这至少部分是因为对于血液中以高浓度存在的可溶性抗原，例如C5，形成被靶向以从身体去除的免疫复合物(即，结合至抗原的mAb)。
这至少在一定程度上是因为血液中以高浓度存在的可溶性抗原(如，C5)会形成被靶向以从身体去除的免疫复合物(即，与抗原结合的单克隆抗体)。因此，通常，需要血液中的高抗体浓度来在体内阻断此类可溶性抗原的活性。
在此所描述的方法是基于以下理解：可以通过增加抗体再循环或半衰期(并且因此PK)并且通过产生具有“pH依赖性”结合特性的mAb来加速抗原细胞内降解来增强治疗性抗体的体内功效。在这方面期望的性质是治疗性mAb将在接近中性pH(约pH 7.4)(其是血液的pH)下很好地结合抗原(例如，C5)。以此方式，它有效地阻断抗原(例如，C5)活性。然后，免疫复合物被细胞吸收，并移向内体用于蛋白水解降解。早期内体的pH是酸性的(约pH 6.0)。因此，当治疗性mAb在酸性pH下与其抗原的结合较差时，mAb将从免疫复合物解离并且然后可以被新生儿Fc受体(FcRn)吸收并且返回到血浆中。以此方式，仅抗原(例如，C5)通过内体蛋白水解途径降解，而mAb通过FcRn的再循环有助于其在血浆中的延长的持久性。
由于其在酸性pH(H+)下质子化的倾向，在它们的CDR中含有组氨酸残基的mAb可能在酸性pH下质子化时具有减弱的结合亲和力。在此描述的方法利用所有CDR残基的“组氨酸扫描”(即，用组氨酸取代每个CDR残基)。然后使用Octet仪器(Pall ForteBio)测量在pH7.4和pH 5.8下的mAb和C5的解离，以识别在pH 5.8下具有相对更快的解离并且在pH 7.4下具有相对更慢的解离的组氨酸取代变体。
亲本人源化2G1 mAb(VH-11801(SEQ ID NO:2)和VL-1901(SEQ ID NO:7))似乎在pH 5.8下对C5具有更好的亲和力(参见图7)。生成在mAb(VH-11801(SEQ ID NO:2)和VL-1609(SEQ ID NO:7))的六个CDR中的每一个CDR中的每个残基处具有组氨酸取代的单取代变体，并且评估其pH依赖性结合特性。对于每个变体，构建VH和VL质粒，然后瞬时转染到HEK细胞中。在pH 5.8和pH 7.4下测试细胞培养物上清液中的mAb的结合。
在这些单取代变体中，三种(mAb L3-1、L1-2和H1-4)表现出pH依赖性结合的一些改善。L3-1的序列在图2中示出(SEQ ID NO:1-5、8、9以及11-13)。L1-2的序列在图3中示出(SEQ ID NO:1-5、9、10以及14-16)。H1-4的序列在图4中示出(SEQ ID NO:4、5、6-10以及17-19)。
除了生成单取代变体之外，将单取代轻链和重链组合以生成双取代变体。在这些双取代变体中，两种(mAb H1-8/L1-9和H2-6/L3-5)表现出pH依赖性结合的一些改善。H1-8/L1-9的序列在图5中示出(SEQ ID NO:4、5、9、10以及20-25)。H2-6/L3-5的序列在图6中示出(SEQ ID NO:3、5、8、9以及26-31)。
具有VH-11801 SEQ ID NO:2和VL-1901 SEQ ID NO:7的亲本人源化mAb 2G1以及不同的单和双组氨酸变体的C5结合和解离的Octet痕量在图7至图12中示出。使用绵羊红细胞溶解测定，将它们在阻断C5功能中的相对活性与亲本人源化2G1 mAb(VH-11801/VL-1901)进行比较，并且在图13和图14中示出。除了示出与亲本人源化2G1 mAb相同或改善的活性的mAb L3-1之外，所有其他变体显示出降低的活性。在这两种双取代变体的情况下，它们的活性大大降低，其中H1-8/L1-9基本上失去了所有C5阻断活性。这不是令人惊讶的，因为尽管我们观察到在pH 5.8下针对mAb H1-8/L1-9和H2-6/L3-5的一些期望的更快解离，在pH 7.4下它们的解离也显著加速(这解释了活性的损失)。
即使以上组氨酸取代的变体在体外变得活性更低，它们的体内半衰期可能得到改善并且因此它们的PK/PD特性可能由于pH依赖性结合的降解减少而相对于亲本mAb得到改善。
为了测试体内PK/PD，通过经由尾静脉流体动力学注射含有Sleeping Beauty转座子元件的人类C5 cDNA制造永久表达人类C5的NOD/SCID小鼠来开发C5人源化小鼠。NOD小鼠天然缺乏C5，因此内源性小鼠C5将不会干扰药效学(PD)测定。SCID基因背景确保转基因表达的人类C5将不引发针对人类C5的免疫应答。通过流体动力学注射含有用于稳定的基因组整合的Sleeping Beauty转座子序列元件的人类C5质粒来开发C5人源化小鼠。NOD/SCID小鼠中高水平人类C5表达的代表性数据在图16中示出。典型地，观察到C5的血浆浓度范围是从50至120μg/mL。这与约80μg/mL的人血浆中的C5浓度相当。
针对PK/PD测定五个组氨酸取代变体(即，mAb L3-1、L1-2、H1-4、H1-8/L1-9以及H2-6/L3-5)。这两种双取代变体(即，mAb H1-8/L1-9和H2-6/L3-5)表现出最大的持久性。在这三种单取代变体中，mAb H1-4和L1-2表现出比mAb L3-1更好的持久性(图17)。因此，虽然L3-1具有最佳pH 7.4亲和力和对人类C5的体外阻断活性，但它具有最短的半衰期。有趣的是，除了在体内未显示阻断活性的mAb H1-8/L1-9之外，所有其他变体具有超过亲本人源化2G1 mAb(VH-11801、VL-1901)的改善的PD谱(参见图18和图19)。
鉴于变体mAb H1-8/L1-9表现出最佳pH结合差异(即，抗原解离在pH 5.8下比pH7.4发生快得多(参见图12))，但是损失了其大部分阻断活性(因为在pH 7.4下抗原解离也增加)，进行简约诱变以随机取代H1-8/L1-9的6个CDR中的每个残基(同时保留H1-8和L1-9的组氨酸取代)。在ScFV构建体的ELISA平板测定中，在VH中识别了显著改善的pH 7.4结合的三个“热点”。这些残基是相对于SEQ ID NO:20在VH CDR1中的位置#9(即，L9)处的亮氨酸、相对于SEQ ID NO:4在VH CDR2中的位置#4(即，P4)处的脯氨酸以及相对于SEQ ID NO:5在VH CDR3中的位置#16(即，V16)处的缬氨酸。表现出最大改善的结合的取代是L9→W9(即，L9W)、L9→I9(即，L9I)、L9→V9(即，L9V)、L9→Y9(即，L9Y)、L9→F9(即，L9F)、P4→F4(即，P4F)、P4→L4(即，P4L)、P4→M4(即，P4M)、P4→W4(即，P4W)、P4→I4(即，P4I)、V16→F16(即，V16F)、V16→E16(即，V16E)以及V16→W16(即，V16W)(参见图20)。
生成这13个取代(即，L9→W9(即，L9W)、L9→I9(即，L9I)、L9→V9(即，L9V)、L9→Y9(即，L9Y)、L9→F9(即，L9F)、P4→F4(即，P4F)、P4→L4(即，P4L)、P4→M4(即，P4M)、P4→W4(即，P4W)、P4→I4(即，P4I)、V16→F16(即，V16F)、V16→E16(即，V16E)以及V16→W16(即，V16W))并且将其作为IgG的pH依赖性结合特性进行评估。对于每种变体，构建VH和VL质粒，并且然后瞬时转染到Expi-CHO细胞中。在pH 5.8和pH 7.4下测试细胞培养物上清液中的mAb的结合。图21和图22概述了这些变体的C5结合特性。图21示出C5结合相对于mAb结合信号的比率，并且图22示出在从缔合相转换到解离相之后结合信号从pH 7.4和pH 5.8中的峰值减少百分比。对于任何给定的变体，图21中的高比率是优选的；并且在图22上，在pH 7.4下解离的较低百分比(交叉影线条)和在pH 5.8下解离的较高百分比(方格条)是优选的。
从13个mAb H1-8/L1-9单组氨酸取代变体的筛选中，选择了七个变体以生成图23中列出的18个组合取代变体(即，L9I/P4M、L9I/P4W、L9I/P4F、L9F/P4M、L9F/P4W、L9F/P4F、L9I/P4M/V16W、L9I/P4W/V16W、L9I/P4F/V16W、L9F/P4M/V16W、L9F/P4W/V16W、L9F/P4F/V16W、L9I/P4M/V16E、L9I/P4W/V16E、L9I/P4F/V16E、L9F/P4M/V16E、L9F/P4W/V16E以及L9F/P4F/V16E)。生成这18种组合取代变体并且评估其pH依赖性结合性质。对于每种变体，构建VH和VL质粒，并且然后瞬时转染到Expi-CHO细胞中。在pH 5.8和pH 7.4下测试细胞培养物上清液中的mAb的结合。
图24和图25概述这18种组合取代变体的C5结合特性。图24示出C5结合相对于mAb结合信号的比率，并且图25示出在从缔合相转换到解离相之后结合信号分别从pH 7.4和pH5.8中的峰值减少百分比。图25示出在从缔合相转换到解离相之后，结合信号从pH 7.4和pH5.8中的峰值降低百分比。对于任何给定的变体，图24中的高比率是优选的；并且在图25上，在pH 7.4下解离的较低百分比(交叉影线条)和在pH 5.8下解离的较高百分比(方格条)是优选的。
实施例2
进行亲和力成熟计划(affinity maturation project)的另外的分析和数据挖掘，并且将CDR2位置9处的T至His突变识别为修复V1-8/L1-9的pH 7.4结合的另一期望的随机突变(图26至图28)。还进行了VH和VL的CDR中的每个残基向组氨酸的全身改变，并且在pH7.4和pH 5.8下针对人类C5结合测试了每个变体。目的是发现显示最大pH依赖性结合差异但是保留C5阻断活性的变体。因此，表征并测试了许多变体，包括双变体VH1-8/VL1-9，其在VH氨基酸8的CDR1和VL氨基酸9的CDR1中携带His突变(图5、图30和图31)。双变体(称为“H1-8/L1-9”；图5)示出大多数pH依赖性结合差异，但是丧失其大部分活性。因此，使用亲和力成熟过程来识别H1-8/L1-9的CDR中增加pH 7.4结合(pH 7.4结合与C5阻断活性相关)同时仍保留pH 7.4与pH 5.8差异结合的许多随机变体。
此外，通过组合排名最高的单变体生成H1-8/L1-9的许多双变体和三变体。通过瞬时转染细胞培养物上清液测试并且表征这些双变体和三变体的pH 7.4和pH 5.8结合曲线。基于最大pH 7.4与pH 5.8结合差异和最佳pH 7.4结合，选择IWW、IFW、FME和FMW作为V1-8/L1-9的前4个三变体克隆。表达IWW、IFW、FME和FMW并且纯化蛋白质以证实pH依赖性结合特性。还测试了溶血测定中的C5抑制活性(图29、图30、图32至图34)。
将上述三变体进一步与新的His突变(VH的CDR2，位置9，T至H突变)组合以产生4个四变体(IWWH、IFWH、FMEH和FMWH；例如，图31)。测试这些新变体的pH依赖性结合特性和C5抑制活性。其中，四变体FMEH被识别为相比其三变体亲本分子FME改善的变体(图35至图37)。
除了NOD/SCID小鼠上的C5人源化小鼠(描述于实施例1中并且通过流体动力学注射生成以测试抗C5 mAb的一些工程化变体的体内PK/PD)之外，还生成了SCID/FcRn转基因小鼠(人FcRn转基因和小鼠FcRn敲除)背景上的C5人源化小鼠。后一菌株能够测试pH依赖性抗C5mAb变体与IgG4抗体构建体的进一步工程化的Fc结构域(Fc结构域中的三个突变)的组合效应(图38和图39)。
在SCID/FcRn转基因背景上使用C5人源化小鼠，还以在Fc结构域(PLA)中具有三个残基突变的IgG4形式中测试H1-8/L1-9三变体IFW、FMW和FMEH的PK/PD。这些数据示出比原始人源化抗C5 mAb 11801(H1-8/L1-9源自人源化抗C5 mAb 11801)显著改善的PK/PD活性(图40至图42)。
实施例3
进行体内实验以比较亲本mAb 11801和工程化的mAb H1-8/L1-9 FMEH-PLA的PK、PD和C5水平。进行实验以测定在用mAb11801和mAb H1-8/L1-9 FMEH-PLA注射小鼠之后进行基因修饰以表达人类C5的FcRn/SCID小鼠的血浆中的总hIgG4水平(图44)。此外，使用经典途径补体介导的鸡红细胞测定，进行测定以评估基因修饰以表达人类C5的FcRn/SCID小鼠中mAb11801和mAbH1-8/L1-9FMEH-PLA的药效学。此外，进行测定以检查FcRn/SCID小鼠的血浆中的总C5水平，这些小鼠在用mAb11801和mAb H1-8/L1-9 FMEH-PLA注射小鼠之后进行基因修饰以表达人类C5(图45)。
现在描述在这些实施例中使用的材料和方法。
用于检测小鼠中人类C5的夹心ELISA法
夹心ELISA法检测流体动力注射人类C5 cDNA质粒后表达人类C5的NOD/SCID或FcRn/SCID小鼠中的人类C5：在37℃下，用在碳酸氢盐缓冲液中的终浓度为2μg/mL的抗人类C5抗体(Quidel，A217)涂覆96孔板1小时。在用含有0.05％吐温-20的PBS洗涤之后，在室温下将平板与稀释的血浆样品在封闭溶液中孵育1小时。洗涤后，将平板与生物素化的抗人类C5mAb9G6在RT下在封闭溶液中孵育1小时，再次洗涤，并且在室温下在封闭溶液中与缀合于辣根过氧化物酶的抗生物素蛋白或链霉抗生物素蛋白(BDpharmingen)孵育1小时。在最终洗涤之后，将平板用HRP底物显影3min。用2N H2SO4终止反应，并且在微板读数器中在450nm处读取平板。用于检测小鼠中人类IgG4的夹心ELISA法。
用于检测人类IgG4的夹心ELISA法
用于在用抗人类C5 IgG4 mAb处理的小鼠中检测人类IgG4的夹心ELISA法：在37℃下，用在碳酸氢盐缓冲液中的终浓度为2μg/mL的抗人κ轻链抗体(抗体溶液，AS75-P)涂覆96孔板1小时。在用含有0.05％吐温-20的PBS洗涤三次之后，在RT下将平板与稀释的血浆样品在封闭溶液中孵育1小时。在洗涤后，在室温下将平板与抗人类IgG4 HRP(1：2000稀释，Invitrogen，A10654)在封闭溶液中孵育1小时。在洗涤后，将平板用HRP底物显影3min。用2NH2SO4终止反应，在微板读数器中在450nm处读取平板。
绵羊红细胞溶解试验
将绵羊RBC(在PBS(Complement Technology Inc)中制备的每个测定样品1x107个细胞)在37℃下用明胶佛罗那缓冲液(gelatin veronal buffer)(GVB2+，Sigma；总测定体积：100μL)中的50％正常人血清(NHS，来自Complement Technology Inc)孵育20min。在添加至绵羊RBC之前，将NHS与抗C5mAb在4℃下预孵育1小时。通过在PBS中添加冰冷的40mMEDTA终止裂解反应。将孵育混合物在1500rpm下离心5min，并且收集上清液并且测量OD405nm。将不含NHS或具有添加EDTA的样品用作阴性裂解对照，并且将用蒸馏水完全裂解的绵羊RBC的样品用作阳性对照(100％裂解)，针对其他样品中的裂解百分比进行标准化。
鸡红细胞溶解测定
将鸡RBC(Rockland 1mmunochemicals Inc#R401-0050)用抗鸡RBC抗体(Rockland1mmunochemicals Inc#103-4139)(150ug/mL)敏化30min，并且用GVB缓冲液洗涤两次。将用mAb BB5.1预处理以阻断鼠C5活性的C5人源化小鼠来匹卢定血浆和耗尽C5的人血清(Quidel#A501)样品在GVB缓冲液(即，5mL至50mL最终测定体积)中稀释至10％并且与最终体积为50mL的5mL抗体敏化的cRBC细胞μL(5*108/mL)混合，并且在37℃下孵育30min。用在PBS中的100mL的冷10mM EDTA终止反应。在4℃下，将细胞在1500rpm下离心5min。在405OD测量收集的上清液。
人类C5转座子质粒构建
在EcoRI位点将来自pCMV Sport6亚基的C5 cDNA克隆到pCAGGS载体中。通过输注克隆法在Hinc II位点SB IR/DR(L)转座子识别序列处的增强子的5’位点和在rBG Stu I位点之后的3’位点处克隆SB IR/DR(R)识别序列。对于流体动力学注射到NOD/SCD或FcRn/SCID(B6.Cg-Fcgrttm1Dcr Prkdcscid Tg(FCGRT)32Dcr/DcrJ)小鼠中，通过尾静脉注射2μg的pCMV-T7-SB100质粒和具有转座子位点的pCAGGS中的25μg的hC5。在第1天后通过hC5 ELISA检查转染效率。在注射后2周，通过hC5 ELISA再次检查人类C5的稳定整合和永久表达。
组氨酸扫描
人源化单克隆抗体2G1(VH-11801和VL-1901)的组氨酸扫描：24孔板中的HEK细胞，使用8μL X-TremeGene HP DNA转染试剂(Roche#6366546001)转染1μg VH和2μg VL质粒。转染后2天收集Supt并且用于Octet测定。在Octet Red E仪器(ForteBio Inc.)上通过Biollayer干涉测量法分析11801组氨酸变体的pH依赖性解离。抗人类IgG生物传感器(ForteBio#18-5060)。抗体浸入200μL转染上清液中600秒，将其捕获到传感器上。随后将这些生物传感器与hC5孵育600秒，然后在pH 7.4和pH 5.8下分离。
简约诱变
为了识别在pH 7.4下改善C5结合的点氨基酸取代突变，通过定点诱变方法将mAbH1-8/L1-9的所有6个互补决定区(CDR)单独地突变成其他19个氨基酸。通过
Figure BDA0003051171100001421
(Agilent)或
Figure BDA0003051171100001422
定点诱变(NEB)，使用针对每个位置编码的设计突变的寡核苷酸将突变引入到靶向的CDR位置。为了筛选结合改善的变体，从每个转染反应中挑取88个克隆并且用捕获ELISA法检测大肠杆菌细胞培养基分泌的单链抗体。在捕获ELISA法中，使用滴定量的抗Fd抗体涂覆孔以从细菌上清液捕获scFv。这之后与生物素化的抗原孵育。使用HRP缀合的抗Lc抗体检测结合信号，随后与四甲基联苯胺(TMB)底物一起孵育。将反应用0.2M H2SO4淬灭，并且在450nm下读取这些板。挑选表现出比亲本克隆大450nm信号的光密度(OD)的克隆。再生上清液中的单链抗体用ELISA(如上)重复测定，以确认阳性结果。在直接结合ELISA中进一步确认结合改善的克隆，其中抗原涂覆在ELISA孔中，并且使用通过scFv定量ELISA确定的scFv的计算量。对重复表现出大于亲本scFv结合的克隆进行测序。
pH依赖性结合/解离的测量
亲和力成熟的H1-8L1-9变体的pH依赖性结合：将2-3x106/mL ExpiCHO接种到24孔板中并且使用8μL的X-TremeGene HP DNA转染试剂(Roche#6366546001)转染2μg的VH和4μg的VL质粒。转染后2天收集Supt并且用于Octet测定。在Octet Red E仪器(ForteBio Inc.)上通过Biollayer干涉测量法分析组氨酸变体的pH依赖性解离。将链霉亲和素生物传感器(ForteBio#18-5019)用3μg/mL捕获选择生物素抗人类IgG4 fab(Thermo fisher#7102902100)涂覆250-300秒并且用2mM Biocytin淬灭600秒。将这些生物传感器与10μg/mLhC5(Complement tech#A320)一起孵育600秒以使hC5与生物传感器的非特异性结合饱和。通过将抗体浸入200μL的转染上清液中持续600秒来将抗体捕获在传感器上。稍后将这些生物传感器用hC5孵育600秒，随后在pH 7.4和pH 5.8下解离。
大规模转染
大规模ExpiCHO转染方案：为了大规模生产用于体内研究的单克隆抗体，按照制造商的说明使用最大滴度方案使用ExpiCHO转染系统(Gibco#A29133)。对于200mL的Expi CHO培养基，使用150μg VH和300μg VL进行转染。
体内药代动力学(PK)和药效学(PD)实验
筛选通过尾静脉流体动力学注射人类C5 cDNA表达人类C5的NOD/SCID或FcRn/SCID小鼠，并且将在血液中具有75-100μg/ml的人类C5表达的小鼠用于PK/PD研究。将小鼠用mAb(人类IgG4形式)以40mg/kg静脉内注射，并且在mAb注射之前和注射之后的不同时间点经由眶后途径收集来匹卢定抗凝血血样。通过ELISA确定收集的样品中的人类IgG和C5的血浆水平，并且通过鸡红细胞溶解测试评估注射的mAb的药效学。
本文引用的每一个专利、专利申请和专利公开的公开内容以其全部内容作为参考并入本文。
虽然参考具体实施方式已经公开了本发明，显然的是本领域技术人员也可以设计本发明的其他实施方式和变化形式而不脱离本发明的真实精神和范围。所附权利要求旨在解释为包括所有这些实施方式和等价变形。所附权利要求旨在视为包含所有这些实施方式和等价变化。
序列表
<110> 宾夕法尼亚大学理事会(The Trustees of the University ofPennsylvania)
宋文超（Song, Wenchao）
三轮隆史（Miwa, Takashi）
达莫达·古尔莉帕利（Gullipalli, Damodar）
译名待定（Tsui, Ping）
<120> 人源化抗C5抗体及其用途
<130> 046483-6167-00WO
<150> 62/727,666
<151> 2018-09-06
<150> 62/837,833
<151> 2019-04-24
<160> 70
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 482
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VH-11801的核苷酸序列
<400> 1
cagcatatga tcagtgtcct ctccaaagtc cttgaacata gactctaacc atggactgga 60
cctgggtctt tctcttcctc ctgtcagtaa ctgcaggtgt ccactcccag gttcagctgg 120
tgcagtctgg agctgaggtg aagaagcctg gggcctcagt gaaggtctcc tgcaaggctt 180
ctggatacac aatcacagac tacaatttgg actgggtgcg acaggcccct ggacaagggc 240
ttgagtggat gggagatatt agtcctaact atggttatac tatctacaac cagaaattca 300
aggacagagt caccatgacc acagacacat ccacgagcac agcctacatg gagctgagga 360
gcctgagatc tgacgacacg gccgtgtatt actgtgcgag aagggacatt cgttactccg 420
gtaattccta caaatggtac ttcgatgtct ggggccaagg gacaatggtc accgtctctt 480
ca 482
<210> 2
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VH-11801的氨基酸序列
<400> 2
Met Asp Trp Thr Trp Val Phe Leu Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly
1 5 10 15
Val His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ile
35 40 45
Thr Asp Tyr Asn Leu Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Met Gly Asp Ile Ser Pro Asn Tyr Gly Tyr Thr Ile Tyr Asn
65 70 75 80
Gln Lys Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Asp Ile Arg Tyr Ser Gly Asn Ser Tyr Lys
115 120 125
Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 3
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VH-11801的CDR1的氨基酸序列
<400> 3
Gly Tyr Thr Ile Thr Asp Tyr Asn Leu Asp
1 5 10
<210> 4
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VH-11801的CDR2的氨基酸序列
<400> 4
Asp Ile Ser Pro Asn Tyr Gly Tyr Thr Ile Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Asp
<210> 5
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VH-11801的CDR3的氨基酸序列
<400> 5
Arg Asp Ile Arg Tyr Ser Gly Asn Ser Tyr Lys Trp Tyr Phe Asp Val
1 5 10 15
<210> 6
<211> 428
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VL-1901的核苷酸序列
<400> 6
gtcagagccc tggggaggaa ctgctcagtt aggacccaga gggaaccatg gaagccccag 60
ctcagcttct cttcctcctg ctactctggc tcccagatac caccggagac atccagttga 120
cccagtctcc atccttcctg tctgcatctg taggagacag agtcaccatc acttgcagga 180
caagtaagag cataagcaaa tatttagcct ggtatcagca aaaaccaggg aaagccccta 240
agctcctgat ctattctgga tccaccttgc aatctggggt cccatcaagg ttcagcggca 300
gtggatctgg gacagaattc actctcacaa tcagcagcct gcagcctgaa gattttgcaa 360
cttattactg tcaacaacat aatgaatacc cgtacacgtt tggccagggg accaagctgg 420
agatcaaa 428
<210> 7
<211> 127
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VL-1901的氨基酸序列
<400> 7
Met Glu Ala Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro
1 5 10 15
Asp Thr Thr Gly Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser
20 25 30
Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Thr Ser Lys Ser
35 40 45
Ile Ser Lys Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro
50 55 60
Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Gly Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Asn
100 105 110
Glu Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
115 120 125
<210> 8
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VL-1901的CDR1的氨基酸序列
<400> 8
Arg Thr Ser Lys Ser Ile Ser Lys Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 9
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VL-1901的CDR2的氨基酸序列
<400> 9
Ser Gly Ser Thr Leu Gln Ser
1 5
<210> 10
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VL-1901的CDR3的氨基酸序列
<400> 10
Gln Gln His Asn Glu Tyr Pro Tyr Thr
1 5
<210> 11
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VL-1901变体的CDR3的氨基酸序列
(Q->H突变，在CDR3中)
<400> 11
His Gln His Asn Glu Tyr Pro Tyr Thr
1 5
<210> 12
<211> 428
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VL-1901变体(Q->H
突变，在CDR3中)
<400> 12
gtcagagccc tggggaggaa ctgctcagtt aggacccaga gggaaccatg gaagccccag 60
ctcagcttct cttcctcctg ctactctggc tcccagatac caccggagac atccagttga 120
cccagtctcc atccttcctg tctgcatctg taggagacag agtcaccatc acttgcagga 180
caagtaagag cataagcaaa tatttagcct ggtatcagca aaaaccaggg aaagccccta 240
agctcctgat ctattctgga tccaccttgc aatctggggt cccatcaagg ttcagcggca 300
gtggatctgg gacagaattc actctcacaa tcagcagcct gcagcctgaa gattttgcaa 360
cttattactg tcatcaacat aatgaatacc cgtacacgtt tggccagggg accaagctgg 420
agatcaaa 428
<210> 13
<211> 127
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VL-1901变体的氨基酸序列(Q->H
突变，在CDR3中)
<400> 13
Met Glu Ala Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro
1 5 10 15
Asp Thr Thr Gly Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser
20 25 30
Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Thr Ser Lys Ser
35 40 45
Ile Ser Lys Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro
50 55 60
Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Gly Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys His Gln His Asn
100 105 110
Glu Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
115 120 125
<210> 14
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VL-1901变体的CDR1的氨基酸序列
(T->H突变，在CDR1中)
<400> 14
Arg His Ser Lys Ser Ile Ser Lys Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 15
<211> 428
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VL-1901变体的核苷酸序列(T->H
突变，在CDR1中)
<400> 15
gtcagagccc tggggaggaa ctgctcagtt aggacccaga gggaaccatg gaagccccag 60
ctcagcttct cttcctcctg ctactctggc tcccagatac caccggagac atccagttga 120
cccagtctcc atccttcctg tctgcatctg taggagacag agtcaccatc acttgcaggc 180
atagtaagag cataagcaaa tatttagcct ggtatcagca aaaaccaggg aaagccccta 240
agctcctgat ctattctgga tccaccttgc aatctggggt cccatcaagg ttcagcggca 300
gtggatctgg gacagaattc actctcacaa tcagcagcct gcagcctgaa gattttgcaa 360
cttattactg tcaacaacat aatgaatacc cgtacacgtt tggccagggg accaagctgg 420
agatcaaa 428
<210> 16
<211> 127
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VL-1901变体的氨基酸序列(T->H
突变，在CDR1中)
<400> 16
Met Glu Ala Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro
1 5 10 15
Asp Thr Thr Gly Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser
20 25 30
Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg His Ser Lys Ser
35 40 45
Ile Ser Lys Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro
50 55 60
Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Gly Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Asn
100 105 110
Glu Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
115 120 125
<210> 17
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VH-11801变体的CDR1的氨基酸序列
(I->H突变，在CDR1中)
<400> 17
Gly Tyr Thr His Thr Asp Tyr Asn Leu Asp
1 5 10
<210> 18
<211> 482
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VH-11801变体的核苷酸序列(I->H
突变，在CDR1中)
<400> 18
cagcatatga tcagtgtcct ctccaaagtc cttgaacata gactctaacc atggactgga 60
cctgggtctt tctcttcctc ctgtcagtaa ctgcaggtgt ccactcccag gttcagctgg 120
tgcagtctgg agctgaggtg aagaagcctg gggcctcagt gaaggtctcc tgcaaggctt 180
ctggatacac acatacagac tacaatttgg actgggtgcg acaggcccct ggacaagggc 240
ttgagtggat gggagatatt agtcctaact atggttatac tatctacaac cagaaattca 300
aggacagagt caccatgacc acagacacat ccacgagcac agcctacatg gagctgagga 360
gcctgagatc tgacgacacg gccgtgtatt actgtgcgag aagggacatt cgttactccg 420
gtaattccta caaatggtac ttcgatgtct ggggccaagg gacaatggtc accgtctctt 480
ca 482
<210> 19
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VH-11801变体的氨基酸序列(I->H
突变，在CDR1中)
<400> 19
Met Asp Trp Thr Trp Val Phe Leu Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly
1 5 10 15
Val His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr His
35 40 45
Thr Asp Tyr Asn Leu Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Met Gly Asp Ile Ser Pro Asn Tyr Gly Tyr Thr Ile Tyr Asn
65 70 75 80
Gln Lys Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Asp Ile Arg Tyr Ser Gly Asn Ser Tyr Lys
115 120 125
Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 20
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VH-11801变体的CDR1的氨基酸序列
(N->H突变，在CDR1中)
<400> 20
Gly Tyr Thr Ile Thr Asp Tyr His Leu Asp
1 5 10
<210> 21
<211> 482
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VH-11801变体的核苷酸序列(N->H
突变，在CDR1中)
<400> 21
cagcatatga tcagtgtcct ctccaaagtc cttgaacata gactctaacc atggactgga 60
cctgggtctt tctcttcctc ctgtcagtaa ctgcaggtgt ccactcccag gttcagctgg 120
tgcagtctgg agctgaggtg aagaagcctg gggcctcagt gaaggtctcc tgcaaggctt 180
ctggatacac aatcacagac taccatttgg actgggtgcg acaggcccct ggacaagggc 240
ttgagtggat gggagatatt agtcctaact atggttatac tatctacaac cagaaattca 300
aggacagagt caccatgacc acagacacat ccacgagcac agcctacatg gagctgagga 360
gcctgagatc tgacgacacg gccgtgtatt actgtgcgag aagggacatt cgttactccg 420
gtaattccta caaatggtac ttcgatgtct ggggccaagg gacaatggtc accgtctctt 480
ca 482
<210> 22
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VH-11801变体的氨基酸序列(N->H 突变，在CDR1中)
<400> 22
Met Asp Trp Thr Trp Val Phe Leu Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly
1 5 10 15
Val His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ile
35 40 45
Thr Asp Tyr His Leu Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Met Gly Asp Ile Ser Pro Asn Tyr Gly Tyr Thr Ile Tyr Asn
65 70 75 80
Gln Lys Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Asp Ile Arg Tyr Ser Gly Asn Ser Tyr Lys
115 120 125
Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 23
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VL-1901变体的CDR1的氨基酸序列
(Y->H突变，在CDR1中)
<400> 23
Arg Thr Ser Lys Ser Ile Ser Lys His Leu Ala
1 5 10
<210> 24
<211> 428
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VL-1901变体的核苷酸序列(Y->H 突变，在CDR1中)
<400> 24
gtcagagccc tggggaggaa ctgctcagtt aggacccaga gggaaccatg gaagccccag 60
ctcagcttct cttcctcctg ctactctggc tcccagatac caccggagac atccagttga 120
cccagtctcc atccttcctg tctgcatctg taggagacag agtcaccatc acttgcagga 180
caagtaagag cataagcaaa catttagcct ggtatcagca aaaaccaggg aaagccccta 240
agctcctgat ctattctgga tccaccttgc aatctggggt cccatcaagg ttcagcggca 300
gtggatctgg gacagaattc actctcacaa tcagcagcct gcagcctgaa gattttgcaa 360
cttattactg tcaacaacat aatgaatacc cgtacacgtt tggccagggg accaagctgg 420
agatcaaa 428
<210> 25
<211> 127
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VL-1901变体的氨基酸序列(Y->H 突变，在CDR1中)
<400> 25
Met Glu Ala Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro
1 5 10 15
Asp Thr Thr Gly Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser
20 25 30
Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Thr Ser Lys Ser
35 40 45
Ile Ser Lys His Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro
50 55 60
Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Gly Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Asn
100 105 110
Glu Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
115 120 125
<210> 26
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VH-11801变体的CDR2的氨基酸序列
(Y->H突变，在CDR2中)
<400> 26
Asp Ile Ser Pro Asn His Gly Tyr Thr Ile Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Asp
<210> 27
<211> 482
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VH-11801变体的核苷酸序列(Y->H 突变，在CDR2中)
<400> 27
cagcatatga tcagtgtcct ctccaaagtc cttgaacata gactctaacc atggactgga 60
cctgggtctt tctcttcctc ctgtcagtaa ctgcaggtgt ccactcccag gttcagctgg 120
tgcagtctgg agctgaggtg aagaagcctg gggcctcagt gaaggtctcc tgcaaggctt 180
ctggatacac aatcacagac tacaatttgg actgggtgcg acaggcccct ggacaagggc 240
ttgagtggat gggagatatt agtcctaacc atggttatac tatctacaac cagaaattca 300
aggacagagt caccatgacc acagacacat ccacgagcac agcctacatg gagctgagga 360
gcctgagatc tgacgacacg gccgtgtatt actgtgcgag aagggacatt cgttactccg 420
gtaattccta caaatggtac ttcgatgtct ggggccaagg gacaatggtc accgtctctt 480
ca 482
<210> 28
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VH-11801变体的氨基酸序列(Y->H 突变，在CDR2中)
<400> 28
Met Asp Trp Thr Trp Val Phe Leu Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly
1 5 10 15
Val His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ile
35 40 45
Thr Asp Tyr Asn Leu Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Met Gly Asp Ile Ser Pro Asn His Gly Tyr Thr Ile Tyr Asn
65 70 75 80
Gln Lys Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Asp Ile Arg Tyr Ser Gly Asn Ser Tyr Lys
115 120 125
Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 29
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VL-1901变体的CDR3的氨基酸序列
(E->H突变，在CDR3中)
<400> 29
Gln Gln His Asn His Tyr Pro Tyr Thr
1 5
<210> 30
<211> 428
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VL-1901变体的核苷酸序列(E->H 突变，在CDR3中)
<400> 30
gtcagagccc tggggaggaa ctgctcagtt aggacccaga gggaaccatg gaagccccag 60
ctcagcttct cttcctcctg ctactctggc tcccagatac caccggagac atccagttga 120
cccagtctcc atccttcctg tctgcatctg taggagacag agtcaccatc acttgcagga 180
caagtaagag cataagcaaa tatttagcct ggtatcagca aaaaccaggg aaagccccta 240
agctcctgat ctattctgga tccaccttgc aatctggggt cccatcaagg ttcagcggca 300
gtggatctgg gacagaattc actctcacaa tcagcagcct gcagcctgaa gattttgcaa 360
cttattactg tcaacaacat aatcattacc cgtacacgtt tggccagggg accaagctgg 420
agatcaaa 428
<210> 31
<211> 127
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VL-1901变体的氨基酸序列(E->H突变，在CDR3中)
<400> 31
Met Glu Ala Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro
1 5 10 15
Asp Thr Thr Gly Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser
20 25 30
Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Thr Ser Lys Ser
35 40 45
Ile Ser Lys Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro
50 55 60
Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Gly Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Asn
100 105 110
His Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
115 120 125
<210> 32
<211> 327
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人类IgG4恒定重链区的氨基酸序列
<400> 32
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
115 120 125
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
130 135 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145 150 155 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
165 170 175
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
180 185 190
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
195 200 205
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
210 215 220
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225 230 235 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
245 250 255
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
260 265 270
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
290 295 300
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
305 310 315 320
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325
<210> 33
<211> 327
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人类IgG4恒定重链区的氨基酸序列
具有S228P突变
<400> 33
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
115 120 125
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
130 135 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145 150 155 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
165 170 175
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
180 185 190
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
195 200 205
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
210 215 220
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225 230 235 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
245 250 255
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
260 265 270
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
290 295 300
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
305 310 315 320
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325
<210> 34
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VH-11801变体的CDR2的氨基酸序列
(T->H突变，在CDR2中)
<400> 34
Asp Ile Ser Pro Asn Tyr Gly Tyr His Ile Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Asp
<210> 35
<211> 482
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VH-11801变体的核苷酸序列(T->H 突变，在CDR2中)
<400> 35
cagcatatga tcagtgtcct ctccaaagtc cttgaacata gactctaacc atggactgga 60
cctgggtctt tctcttcctc ctgtcagtaa ctgcaggtgt ccactcccag gttcagctgg 120
tgcagtctgg agctgaggtg aagaagcctg gggcctcagt gaaggtctcc tgcaaggctt 180
ctggatacac aatcacagac tacaatttgg actgggtgcg acaggcccct ggacaagggc 240
ttgagtggat gggagatatt agtcctaact atggttatca tatctacaac cagaaattca 300
aggacagagt caccatgacc acagacacat ccacgagcac agcctacatg gagctgagga 360
gcctgagatc tgacgacacg gccgtgtatt actgtgcgag aagggacatt cgttactccg 420
gtaattccta caaatggtac ttcgatgtct ggggccaagg gacaatggtc accgtctctt 480
ca 482
<210> 36
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化2G1 VH-11801变体的氨基酸序列(T->H 突变，在CDR2中)
<400> 36
Met Asp Trp Thr Trp Val Phe Leu Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly
1 5 10 15
Val His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ile
35 40 45
Thr Asp Tyr Asn Leu Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Met Gly Asp Ile Ser Pro Asn Tyr Gly Tyr His Ile Tyr Asn
65 70 75 80
Gln Lys Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Asp Ile Arg Tyr Ser Gly Asn Ser Tyr Lys
115 120 125
Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 37
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9变体IWW的重链序列的CDR1的氨基酸序列
(L->I突变，在CDR1中, P->W突变，在CDR2中, V->W突变，在CDR3中)
<400> 37
Gly Tyr Thr Ile Thr Asp Tyr His Ile Asp
1 5 10
<210> 38
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9变体IWW的重链序列的CDR2的氨基酸序列
(L->I突变，在CDR1中, P->W突变，在CDR2中, V->W突变，在CDR3中)
<400> 38
Asp Ile Ser Trp Asn Tyr Gly Tyr Thr Ile Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Asp
<210> 39
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9变体IWW的重链序列的CDR3的氨基酸序列
(L->I突变，在CDR1中, P->W突变，在CDR2中, V->W突变，在CDR3中)
<400> 39
Arg Asp Ile Arg Tyr Ser Gly Asn Ser Tyr Lys Trp Tyr Phe Asp Trp
1 5 10 15
<210> 40
<211> 482
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9 变体IWW的重链序列的核苷酸序列
(L->I突变，在CDR1中, P->W突变，在CDR2中, V->W 突变，在CDR3中)
<400> 40
cagcatatga tcagtgtcct ctccaaagtc cttgaacata gactctaacc atggactgga 60
cctgggtctt tctcttcctc ctgtcagtaa ctgcaggtgt ccactcccag gttcagctgg 120
tgcagtctgg agctgaggtg aagaagcctg gggcctcagt gaaggtctcc tgcaaggctt 180
ctggatacac aatcacagac taccatatcg actgggtgcg acaggcccct ggacaagggc 240
ttgagtggat gggagatatt agttggaact atggttatac tatctacaac cagaaattca 300
aggacagagt caccatgacc acagacacat ccacgagcac agcctacatg gagctgagga 360
gcctgagatc tgacgacacg gccgtgtatt actgtgcgag aagggacatt cgttactccg 420
gtaattccta caaatggtac ttcgattggt ggggccaagg gacaatggtc accgtctctt 480
ca 482
<210> 41
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9 变体IWW 的重链序列的氨基酸序列
(L->I突变，在CDR1中, P->W突变，在CDR2中, V->W 突变，在CDR3中)
<400> 41
Met Asp Trp Thr Trp Val Phe Leu Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly
1 5 10 15
Val His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ile
35 40 45
Thr Asp Tyr His Ile Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Met Gly Asp Ile Ser Trp Asn Tyr Gly Tyr Thr Ile Tyr Asn
65 70 75 80
Gln Lys Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Asp Ile Arg Tyr Ser Gly Asn Ser Tyr Lys
115 120 125
Trp Tyr Phe Asp Trp Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 42
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9变体IFW的重链序列的CDR1的氨基酸序列
(L->I突变，在CDR1中, P->F突变，在CDR2中, V->W突变，在CDR3中)
<400> 42
Gly Tyr Thr Ile Thr Asp Tyr His Ile Asp
1 5 10
<210> 43
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9变体IFW的重链序列的CDR2的氨基酸序列
(L->I突变，在CDR1中, P->F突变，在CDR2中, V->W突变，在CDR3中)
<400> 43
Asp Ile Ser Phe Asn Tyr Gly Tyr Thr Ile Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Asp
<210> 44
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9变体IFW的重链序列的CDR3的氨基酸序列
(L->I突变，在CDR1中, P->F突变，在CDR2中, V->W突变，在CDR3中)
<400> 44
Arg Asp Ile Arg Tyr Ser Gly Asn Ser Tyr Lys Trp Tyr Phe Asp Trp
1 5 10 15
<210> 45
<211> 482
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9 变体IFW的重链序列的核苷酸序列
(L->I突变，在CDR1中, P->F突变，在CDR2中, V->W 突变，在CDR3中)
<400> 45
cagcatatga tcagtgtcct ctccaaagtc cttgaacata gactctaacc atggactgga 60
cctgggtctt tctcttcctc ctgtcagtaa ctgcaggtgt ccactcccag gttcagctgg 120
tgcagtctgg agctgaggtg aagaagcctg gggcctcagt gaaggtctcc tgcaaggctt 180
ctggatacac aatcacagac taccatatcg actgggtgcg acaggcccct ggacaagggc 240
ttgagtggat gggagatatt agtttcaact atggttatac tatctacaac cagaaattca 300
aggacagagt caccatgacc acagacacat ccacgagcac agcctacatg gagctgagga 360
gcctgagatc tgacgacacg gccgtgtatt actgtgcgag aagggacatt cgttactccg 420
gtaattccta caaatggtac ttcgattggt ggggccaagg gacaatggtc accgtctctt 480
ca 482
<210> 46
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9 变体IFW的重链序列的氨基酸序列
(L->I突变，在CDR1中, P->F突变，在CDR2中, V->W突变，在CDR3中)
<400> 46
Met Asp Trp Thr Trp Val Phe Leu Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly
1 5 10 15
Val His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ile
35 40 45
Thr Asp Tyr His Ile Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Met Gly Asp Ile Ser Phe Asn Tyr Gly Tyr Thr Ile Tyr Asn
65 70 75 80
Gln Lys Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Asp Ile Arg Tyr Ser Gly Asn Ser Tyr Lys
115 120 125
Trp Tyr Phe Asp Trp Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 47
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9变体FME的重链序列的CDR1的氨基酸序列
(L->F突变，在CDR1中, P->M突变，在CDR2中, V->E突变，在CDR3中)
<400> 47
Gly Tyr Thr Ile Thr Asp Tyr His Phe Asp
1 5 10
<210> 48
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9变体FME的重链序列的CDR2的氨基酸序列
(L->F突变，在CDR1中, P->M突变，在CDR2中, V->E突变，在CDR3中)
<400> 48
Asp Ile Ser Met Asn Tyr Gly Tyr Thr Ile Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Asp
<210> 49
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9变体FME的重链序列的CDR3的氨基酸序列
(L->F突变，在CDR1中, P->M突变，在CDR2中, V->E突变，在CDR3中)
<400> 49
Arg Asp Ile Arg Tyr Ser Gly Asn Ser Tyr Lys Trp Tyr Phe Asp Glu
1 5 10 15
<210> 50
<211> 482
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9 变体FME的重链序列的核苷酸序列
(L->F突变，在CDR1中, P->M突变，在CDR2中, V->E 突变，在CDR3中)
<400> 50
cagcatatga tcagtgtcct ctccaaagtc cttgaacata gactctaacc atggactgga 60
cctgggtctt tctcttcctc ctgtcagtaa ctgcaggtgt ccactcccag gttcagctgg 120
tgcagtctgg agctgaggtg aagaagcctg gggcctcagt gaaggtctcc tgcaaggctt 180
ctggatacac aatcacagac taccatttcg actgggtgcg acaggcccct ggacaagggc 240
ttgagtggat gggagatatt agtatgaact atggttatac tatctacaac cagaaattca 300
aggacagagt caccatgacc acagacacat ccacgagcac agcctacatg gagctgagga 360
gcctgagatc tgacgacacg gccgtgtatt actgtgcgag aagggacatt cgttactccg 420
gtaattccta caaatggtac ttcgatgagt ggggccaagg gacaatggtc accgtctctt 480
ca 482
<210> 51
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9 变体FME的重链序列的氨基酸序列
(L->F突变，在CDR1中, P->M突变，在CDR2中, V->E 突变，在CDR3中)
<400> 51
Met Asp Trp Thr Trp Val Phe Leu Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly
1 5 10 15
Val His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ile
35 40 45
Thr Asp Tyr His Phe Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Met Gly Asp Ile Ser Met Asn Tyr Gly Tyr Thr Ile Tyr Asn
65 70 75 80
Gln Lys Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Asp Ile Arg Tyr Ser Gly Asn Ser Tyr Lys
115 120 125
Trp Tyr Phe Asp Glu Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 52
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9变体FMW的重链序列的CDR1的氨基酸序列
(L->F突变，在CDR1中, P->M突变，在CDR2中, V->W突变，在CDR3中)
<400> 52
Gly Tyr Thr Ile Thr Asp Tyr His Phe Asp
1 5 10
<210> 53
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9变体FMW的重链序列的CDR2的氨基酸序列
(L->F突变，在CDR1中, P->M突变，在CDR2中, V->W突变，在CDR3中)
<400> 53
Asp Ile Ser Met Asn Tyr Gly Tyr Thr Ile Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Asp
<210> 54
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb
H1-8/L1-9变体FMW的重链序列的CDR3的氨基酸序列
(L->F突变，在CDR1中, P->M突变，在CDR2中, V->W突变，在CDR3中)
<400> 54
Arg Asp Ile Arg Tyr Ser Gly Asn Ser Tyr Lys Trp Tyr Phe Asp Trp
1 5 10 15
<210> 55
<211> 482
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9 变体FMW的重链序列的核苷酸序列
(L->F突变，在CDR1中, P->M突变，在CDR2中, V->W 突变，在CDR3中)
<400> 55
cagcatatga tcagtgtcct ctccaaagtc cttgaacata gactctaacc atggactgga 60
cctgggtctt tctcttcctc ctgtcagtaa ctgcaggtgt ccactcccag gttcagctgg 120
tgcagtctgg agctgaggtg aagaagcctg gggcctcagt gaaggtctcc tgcaaggctt 180
ctggatacac aatcacagac taccatttcg actgggtgcg acaggcccct ggacaagggc 240
ttgagtggat gggagatatt agtatgaact atggttatac tatctacaac cagaaattca 300
aggacagagt caccatgacc acagacacat ccacgagcac agcctacatg gagctgagga 360
gcctgagatc tgacgacacg gccgtgtatt actgtgcgag aagggacatt cgttactccg 420
gtaattccta caaatggtac ttcgattggt ggggccaagg gacaatggtc accgtctctt 480
ca 482
<210> 56
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9 变体FMW的重链序列的氨基酸序列
(L->F突变，在CDR1中, P->M突变，在CDR2中, V->W 突变，在CDR3中)
<400> 56
Met Asp Trp Thr Trp Val Phe Leu Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly
1 5 10 15
Val His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ile
35 40 45
Thr Asp Tyr His Phe Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Met Gly Asp Ile Ser Met Asn Tyr Gly Tyr Thr Ile Tyr Asn
65 70 75 80
Gln Lys Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Asp Ile Arg Tyr Ser Gly Asn Ser Tyr Lys
115 120 125
Trp Tyr Phe Asp Trp Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 57
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9变体FMEH的重链序列的CDR2的氨基酸序列
(L->F突变，在CDR1中, P->M和T->H 突变，在CDR2中，V->E突变，在CDR3中)
<400> 57
Asp Ile Ser Met Asn Tyr Gly Tyr His Ile Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Asp
<210> 58
<211> 482
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9 变体FMEH的重链序列的核苷酸序列
(L->F突变，在CDR1中, P->M和T->H突变，在CDR2中，V->E突变，在CDR3中)
<400> 58
cagcatatga tcagtgtcct ctccaaagtc cttgaacata gactctaacc atggactgga 60
cctgggtctt tctcttcctc ctgtcagtaa ctgcaggtgt ccactcccag gttcagctgg 120
tgcagtctgg agctgaggtg aagaagcctg gggcctcagt gaaggtctcc tgcaaggctt 180
ctggatacac aatcacagac taccatttcg actgggtgcg acaggcccct ggacaagggc 240
ttgagtggat gggagatatt agtatgaact atggttatca tatctacaac cagaaattca 300
aggacagagt caccatgacc acagacacat ccacgagcac agcctacatg gagctgagga 360
gcctgagatc tgacgacacg gccgtgtatt actgtgcgag aagggacatt cgttactccg 420
gtaattccta caaatggtac ttcgatgagt ggggccaagg gacaatggtc accgtctctt 480
ca 482
<210> 59
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9 变体FMEH的重链序列的氨基酸序列
(L->F突变，在CDR1中, P->M和T->H突变在CDR2中，V->E突变，在CDR3中)
<400> 59
Met Asp Trp Thr Trp Val Phe Leu Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly
1 5 10 15
Val His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ile
35 40 45
Thr Asp Tyr His Phe Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Met Gly Asp Ile Ser Met Asn Tyr Gly Tyr His Ile Tyr Asn
65 70 75 80
Gln Lys Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Asp Ile Arg Tyr Ser Gly Asn Ser Tyr Lys
115 120 125
Trp Tyr Phe Asp Glu Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 60
<211> 984
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人类IgG4 Fc PLA结构域突变的核苷酸序列
<400> 60
gctagcacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 60
agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacgaagacc 240
tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagtcc 300
aaatatggtc ccccatgccc accatgccca gcacctgagt tcctgggggg accatcagtc 360
ttcctgttcc ccccaaaacc caaggacact ctcatgatct cccggacccc tgaggtcacg 420
tgcgtggtgg tggacgtgag ccaggaagac cccgaggtcc agttcaactg gtacgtggat 480
ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagttcaa cagcacgtac 540
cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaacggcaa ggagtacaag 600
tgcaaggtct ccaacaaagg cctcccgtcc tccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 660
gggcagcccc gagagccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccaggagga gatgaccaag 720
aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctacc ccagcgacat cgccgtggag 780
tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gctggactcc 840
gacggctcct tcttcctcta cagcaggctc accgtggaca agagcaggtg gcaggagggg 900
aatgtcttct catgctccgt gctgcatgag gctctgcacg cccactacac acagaagagc 960
ctctccctgt ctctgggtaa atga 984
<210> 61
<211> 327
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人类IgG4 Fc PLA结构域突变的氨基酸序列
<400> 61
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
115 120 125
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
130 135 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145 150 155 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
165 170 175
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
180 185 190
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
195 200 205
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
210 215 220
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225 230 235 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
245 250 255
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
260 265 270
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
290 295 300
Cys Ser Val Leu His Glu Ala Leu His Ala His Tyr Thr Gln Lys Ser
305 310 315 320
Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
325
<210> 62
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9变体IWWH的重链序列的CDR2的氨基酸序列
(L->I突变，在CDR1中, P->W和T->H突变，在CDR2中，V->W突变，在CDR3中)
<400> 62
Asp Ile Ser Trp Asn Tyr Gly Tyr His Ile Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Asp
<210> 63
<211> 482
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9 变体IWWH的重链序列的核苷酸序列
(L->I突变，在CDR1中, P->W和T->H突变，在CDR2中，V->W突变，在CDR3中)
<400> 63
cagcatatga tcagtgtcct ctccaaagtc cttgaacata gactctaacc atggactgga 60
cctgggtctt tctcttcctc ctgtcagtaa ctgcaggtgt ccactcccag gttcagctgg 120
tgcagtctgg agctgaggtg aagaagcctg gggcctcagt gaaggtctcc tgcaaggctt 180
ctggatacac aatcacagac taccatatcg actgggtgcg acaggcccct ggacaagggc 240
ttgagtggat gggagatatt agttggaact atggttatca tatctacaac cagaaattca 300
aggacagagt caccatgacc acagacacat ccacgagcac agcctacatg gagctgagga 360
gcctgagatc tgacgacacg gccgtgtatt actgtgcgag aagggacatt cgttactccg 420
gtaattccta caaatggtac ttcgattggt ggggccaagg gacaatggtc accgtctctt 480
ca 482
<210> 64
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9 变体IWWH的重链序列的氨基酸序列
(L->I突变，在CDR1中, P->W和T->H突变，在CDR2中，V->W突变，在CDR3中)
<400> 64
Met Asp Trp Thr Trp Val Phe Leu Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly
1 5 10 15
Val His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ile
35 40 45
Thr Asp Tyr His Ile Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Met Gly Asp Ile Ser Trp Asn Tyr Gly Tyr His Ile Tyr Asn
65 70 75 80
Gln Lys Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Asp Ile Arg Tyr Ser Gly Asn Ser Tyr Lys
115 120 125
Trp Tyr Phe Asp Trp Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 65
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9变体IFWH的重链序列的CDR2的氨基酸序列
(L->I突变，在CDR1中, P->F和T->H突变，在CDR2中，V->W突变，在CDR3中)
<400> 65
Asp Ile Ser Phe Asn Tyr Gly Tyr His Ile Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Asp
<210> 66
<211> 482
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9 变体IFWH的重链序列的核苷酸序列
(L->I突变，在CDR1中, P->F和T->H突变，在CDR2中，V->W突变，在CDR3中)
<400> 66
cagcatatga tcagtgtcct ctccaaagtc cttgaacata gactctaacc atggactgga 60
cctgggtctt tctcttcctc ctgtcagtaa ctgcaggtgt ccactcccag gttcagctgg 120
tgcagtctgg agctgaggtg aagaagcctg gggcctcagt gaaggtctcc tgcaaggctt 180
ctggatacac aatcacagac taccatatcg actgggtgcg acaggcccct ggacaagggc 240
ttgagtggat gggagatatt agtttcaact atggttatca tatctacaac cagaaattca 300
aggacagagt caccatgacc acagacacat ccacgagcac agcctacatg gagctgagga 360
gcctgagatc tgacgacacg gccgtgtatt actgtgcgag aagggacatt cgttactccg 420
gtaattccta caaatggtac ttcgattggt ggggccaagg gacaatggtc accgtctctt 480
ca 482
<210> 67
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9 变体IFWH的重链序列的氨基酸序列
(L->I突变，在CDR1中, P->F和T->H突变，在CDR2中，V->W突变，在CDR3中)
<400> 67
Met Asp Trp Thr Trp Val Phe Leu Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly
1 5 10 15
Val His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ile
35 40 45
Thr Asp Tyr His Ile Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Met Gly Asp Ile Ser Phe Asn Tyr Gly Tyr His Ile Tyr Asn
65 70 75 80
Gln Lys Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Asp Ile Arg Tyr Ser Gly Asn Ser Tyr Lys
115 120 125
Trp Tyr Phe Asp Trp Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 68
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9变体FMWH的重链序列的CDR2的氨基酸序列
(L->F突变，在CDR1中, P->M和T->H 突变，在CDR2中， V->W突变，在CDR3中)
<400> 68
Asp Ile Ser Met Asn Tyr Gly Tyr His Ile Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Asp
<210> 69
<211> 482
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9 变体FMWH的重链序列的核苷酸序列
(L->F突变，在CDR1中, P->M和T->H突变，在CDR2中，V->W突变，在CDR3中)
<400> 69
cagcatatga tcagtgtcct ctccaaagtc cttgaacata gactctaacc atggactgga 60
cctgggtctt tctcttcctc ctgtcagtaa ctgcaggtgt ccactcccag gttcagctgg 120
tgcagtctgg agctgaggtg aagaagcctg gggcctcagt gaaggtctcc tgcaaggctt 180
ctggatacac aatcacagac taccatttcg actgggtgcg acaggcccct ggacaagggc 240
ttgagtggat gggagatatt agtatgaact atggttatca tatctacaac cagaaattca 300
aggacagagt caccatgacc acagacacat ccacgagcac agcctacatg gagctgagga 360
gcctgagatc tgacgacacg gccgtgtatt actgtgcgag aagggacatt cgttactccg 420
gtaattccta caaatggtac ttcgattggt ggggccaagg gacaatggtc accgtctctt 480
ca 482
<210> 70
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mAb H1-8/L1-9 变体FMWH的重链序列的氨基酸序列
(L->F突变，在CDR1中, P->M和T->H突变，在CDR2中，V->W突变，在CDR3中)
<400> 70
Met Asp Trp Thr Trp Val Phe Leu Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly
1 5 10 15
Val His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Ile
35 40 45
Thr Asp Tyr His Phe Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Met Gly Asp Ile Ser Met Asn Tyr Gly Tyr His Ile Tyr Asn
65 70 75 80
Gln Lys Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Asp Ile Arg Tyr Ser Gly Asn Ser Tyr Lys
115 120 125
Trp Tyr Phe Asp Trp Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
130 135 140

Claims (75)

1.一种特异性结合人类C5的pH依赖性抗体，其中，所述pH依赖性抗体包含选自由以下各项组成的组中的至少一个CDR：VH-CDR1，包含相对于SEQ ID NO:3具有至少一个取代的SEQ ID NO:3的变体；VH-CDR2，包含相对于SEQ ID NO:4具有至少一个取代的SEQ ID NO:4的变体；VH-CDR3，包含相对于SEQ ID NO:5具有至少一个取代SEQ ID NO:5的变体；VL-CDR1，包含相对于SEQ ID NO:8具有至少一个取代的SEQ ID NO:8的变体；VL-CDR2，包含相对于SEQ ID NO:9具有至少一个取代的SEQ ID NO:9的变体；以及VL-CDR3，包含相对于SEQID NO:10具有至少一个取代的SEQ ID NO:10的变体。
2.根据权利要求1所述的抗体，其中，所述抗体的结合是pH依赖性的，其中，所述抗体在中性pH下比在酸性pH下与C5结合更强。
3.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:47；VH-CDR2：SEQ ID NO:57；VH-CDR3：SEQ ID NO:49；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
4.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:59的氨基酸序列或其变体的重链。
5.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:59的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。
6.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQ IDNO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:11或其一种或多种变体。
7.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列或其变体的重链。
8.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:13的氨基酸序列或其变体的轻链。
9.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:13的氨基酸序列或其变体的轻链。
10.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:14；VL-CDR2：SEQ IDNO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
11.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列或其变体的重链。
12.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:16的氨基酸序列或其变体的轻链。
13.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:16的氨基酸序列或其变体的轻链。
14.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:17；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQ IDNO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
15.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:19的氨基酸序列或其变体的重链。
16.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:7的氨基酸序列或其变体的轻链。
17.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:19的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:7的氨基酸序列或其变体的轻链。
18.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:20；VH-CDR2：SEQ ID NO:4；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
19.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:22的氨基酸序列或其变体的重链。
20.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。
21.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:22的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。
22.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:26；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQ IDNO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:29或其一种或多种变体。
23.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:28的氨基酸序列或其变体的重链。
24.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:31的氨基酸序列或其变体的轻链。
25.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:28的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:31的氨基酸序列或其变体的轻链。
26.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:3；VH-CDR2：SEQ ID NO:34；VH-CDR3：SEQ ID NO:5；VL-CDR1：SEQ ID NO:8；VL-CDR2：SEQ IDNO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
27.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:36的氨基酸序列或其变体的重链。
28.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:36的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:7的氨基酸序列或其变体的轻链。
29.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:37；VH-CDR2：SEQ ID NO:38；VH-CDR3：SEQ ID NO:39；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
30.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:41的氨基酸序列或其变体的重链。
31.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:41的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。
32.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:42；VH-CDR2：SEQ ID NO:43；VH-CDR3：SEQ ID NO:44；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
33.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:46的氨基酸序列或其变体的重链。
34.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:46的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。
35.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:47；VH-CDR2：SEQ ID NO:48；VH-CDR3：SEQ ID NO:49；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
36.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:51的氨基酸序列或其变体的重链。
37.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:51的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。
38.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:52；VH-CDR2：SEQ ID NO:53；VH-CDR3：SEQ ID NO:54；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
39.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:56的氨基酸序列或其变体的重链。
40.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:56的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。
41.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:37；VH-CDR2：SEQ ID NO:62；VH-CDR3：SEQ ID NO:39；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
42.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:64的氨基酸序列或其变体的重链。
43.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:64的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。
44.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:42；VH-CDR2：SEQ ID NO:65；VH-CDR3：SEQ ID NO:44；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
45.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:67的氨基酸序列或其变体的重链。
46.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:67的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。
47.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含以下CDR：VH-CDR1：SEQ ID NO:52；VH-CDR2：SEQ ID NO:68；VH-CDR3：SEQ ID NO:54；VL-CDR1：SEQ ID NO:23；VL-CDR2：SEQID NO:9；以及VL-CDR3：SEQ ID NO:10或其一种或多种变体。
48.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:70的氨基酸序列或其变体的重链。
49.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:70的氨基酸序列或其变体的重链和含有SEQ ID NO:25的氨基酸序列或其变体的轻链。
50.根据权利要求3、7、11、15、19、23、26、29、32、35、38、41、44或47所述的抗体，其中，所述抗体包含相对于SEQ ID NO:4在VH CDR2中的脯氨酸4(P4)处的取代。
51.根据权利要求50所述的抗体，其中，所述脯氨酸4(P4)处的取代是选自由以下各项组成的组中的一个取代：P4→F4(P4F)、P4→L4(P4L)、P4→M4(P4M)、P4→W4(P4W)以及P4→I4(P4I)。
52.根据权利要求51所述的抗体，其中，所述抗体包含相对于SEQ ID NO:4在VH CDR2中的脯氨酸4处的取代(P4)和相对于SEQ ID NO:4在VH CDR2中的苏氨酸9处的取代。
53.根据权利要求52所述的抗体，其中，所述脯氨酸4(P4)处的取代是选自由以下各项组成的组中的一个取代：P4→F4(P4F)、P4→L4(P4L)、P4→M4(P4M)、P4→W4(P4W)以及P4→I4(P4I)；并且所述苏氨酸9(T9)处的取代是选自由以下各项组成的组中的一个取代：T9→H9(T9H)、T9→L9(T9L)、T9→M9(T9M)、T9→W9(T9W)以及T9→I9(T9I)。
54.根据权利要求3、7、11、15、19、23、26、29、32、35、38、41、44或47所述的抗体，其中，所述抗体包含相对于SEQ ID NO:5在VH CDR3中的缬氨酸16(V16)处的取代。
55.根据权利要求54所述的抗体，其中，所述缬氨酸16(V16)处的取代是选自由以下各项组成的组中的一个取代：V16→F16(V16F)、V16→E16(V16E)和V16→W16(V16W)。
56.根据权利要求15、19、23、26、29、32、35、38、41、44或47所述的抗体，其中，所述抗体包含相对于SEQ ID NO:20在VH CDR1中的亮氨酸9(L9)处的取代。
57.根据权利要求56所述的抗体，其中，所述亮氨酸9(L9)处的取代是选自由以下各项组成的组中的一个取代：L9→W9(L9W)、L9→I9(L9I)、L9→V9(L9V)、L9→Y9(L9Y)以及L9→F9(L9F)。
58.根据权利要求3、7、11、15、19、23、26、29、32、35、38、41、44或47所述的抗体，其中，所述抗体包含选自由以下各项组成的组中的两个或更多个取代中的取代：相对于SEQ ID NO:4在VHCDR2中的脯氨酸4(P4)、相对于SEQ ID NO:4在VH CDR2中的苏氨酸9(T9)、相对于SEQID NO:5在VH CDR3中的缬氨酸16(V16)以及相对于SEQ ID NO:20在VH CDR1中的亮氨酸9(L9)。
59.根据权利要求58所述的抗体，其中，所述抗体包含选自由以下各项组成的组中的两个或更多个取代：L9I/P4M、L9I/P4W、L9I/P4F、L9F/P4M、L9F/P4W、L9F/P4F、L9I/P4M/V16W、L9I/P4W/V16W、L9I/P4F/V16W、L9F/P4M/V16W、L9F/P4W/V16W、L9F/P4F/V16W、L9I/P4M/V16E、L9I/P4W/V16E、L9I/P4F/V16E、L9F/P4M/V16E、L9F/P4W/V16E、L9F/P4F/V16E、L9I/P4M/T9H/V16W、L9I/P4W/T9H/V16W、L9I/P4F/T9H/V16W、L9F/P4M/T9H/V16W、L9F/P4W/T9H/V16W、L9F/P4F/T9H/V16W、L9I/P4M/T9H/V16E、L9I/P4W/T9H/V16E、L9I/P4F/T9H/V16E、L9F/P4M/T9H/V16E、L9F/P4W/T9H/V16E以及L9F/P4F/T9H/V16E。
60.根据权利要求1或2所述的抗体，其中，所述抗体包含Fc片段。
61.根据权利要求60所述的抗体，其中，所述抗体包含含有SEQ ID NO:32的氨基酸序列的人类IgG4 Fc片段。
62.根据权利要求60所述的抗体，其中，所述抗体包含相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变的人类IgG4 Fc片段，所述人类IgG4 Fc片段包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列。
63.根据权利要求60所述的抗体，其中，所述抗体包含相对于SEQ ID NO:32具有S108P突变、M308L突变和N314A突变的人类IgG4 Fc片段，所述人类IgG4 Fc片段包含SEQ ID NO:61的氨基酸序列。
64.一种治疗个体中补体途径介导的疾病或病症的方法，所述方法包括向所述个体施用权利要求1至63中任一项所述的抗C5抗体的步骤。
65.根据权利要求64所述的方法，其中，所述疾病或病症至少选自由以下各项组成的组：黄斑变性(MD)、年龄相关性黄斑变性(AMD)、缺血再灌注损伤、关节炎、类风湿性关节炎、狼疮、溃疡性结肠炎、中风、术后全身炎症综合征、哮喘、过敏性哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)综合征、重症肌无力、视神经脊髓炎(NMO)、多发性硬化、移植物功能延迟恢复、抗体介导性排斥、非典型溶血性尿毒症(aHUS)综合征、视网膜中央静脉阻塞(CRVO)、视网膜中央动脉阻塞(CRAO)、大疱性表皮松解、脓毒症、器官移植、炎症(包括但不限于与心肺分流术和肾透析相关的炎症)、C3肾小球病、膜性肾病、IgA肾病、肾小球肾炎(包括但不限于抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)介导的肾小球肾炎、狼疮肾炎以及它们的组合)、ANCA介导的血管炎、志贺毒素诱导的HUS以及抗磷脂抗体诱导的妊娠丧失或者其任何组合。
66.一种降低个体的补体系统的活性的方法，其中，所述方法包括经由选自由以下各项组成的组中的施用途径向所述个体施用抗体：肠内施用、肠胃外施用以及它们的组合，并且其中，所述抗体是权利要求1至63中任一项所述的抗体。
67.根据权利要求66所述的方法，其中，所述抗体是选自由以下各项组成的组中的抗体片段：Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2、scFv以及它们的组合。
68.一种细胞，包含权利要求1-63中至少一项所述的抗体。
69.根据权利要求68所述的细胞，其中，所述细胞产生权利要求1至63中至少一项所述的抗体。
70.根据权利要求69所述的细胞，其中，所述细胞是杂交瘤。
71.一种表达人类C5的基因修饰非人动物。
72.根据权利要求71所述的基因修饰非人动物，其中，所述非人动物是啮齿动物。
73.根据权利要求72所述的基因修饰非人动物，其中，所述非人动物是小鼠。
74.根据权利要求72所述的基因修饰非人动物，其中，所述非人动物是NOD/SCID小鼠。
75.根据权利要求72所述的基因修饰非人动物，其中，所述非人动物是FcRn/SCID小鼠。
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