CN112999235B - 糖基聚醚化合物在制备抗副粘病毒或肠道病毒药物的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明主要目的在于为糖基聚醚化合物提供了用作抗副粘病毒或肠道病毒药物的用途。所述副粘病毒为HPIV3、RSV毒株中的至少一种;所述肠道病毒为EV68、EV69、EV70、EV71毒株中的至少一种。经过发明人大量研究证明糖基聚醚化合物会大范围影响细胞代谢通路,影响钙离子通道蛋白,影响病毒的核蛋白、包衣前体、糖蛋白和基质蛋白功能,破坏病毒复制和感染周期,或影响宿主细胞相关蛋白的功能,可以达到广谱的抗病毒效果,尤其是能够用来抑制副粘病毒或肠道病毒的增殖。
Description
技术领域
本发明属于生物医药技术领域,具体涉及糖基聚醚化合物在制备抗副粘病毒或肠道病毒药物的用途。
背景技术
副粘病毒是一类不分节段的单股、负链RNA病毒,该科对人具有致病性的病毒主要有人副流感病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒和呼吸道合胞体病毒。人副流感病毒3型(HumanParainfluenza virus type 3,HPIV3)属于副粘病毒科呼吸道病毒属,是引起婴幼儿和免疫缺陷人群下呼吸道感染的主要病原之一。能够引起急性细支气管炎、肺炎和哮喘。然而,目前还没有有效的疫苗和抗病毒药物能够有效预防和治疗HPIV3的感染。人呼吸道合胞体病毒(Human Respiratory syncytial virus,HRSV)属于副粘病毒科肺病毒属,该病毒可引起从感冒、急性上呼吸道感染到急性气管炎、肺炎等重症下呼吸道感染。由于感染HRSV后不会产生终生免疫,所以几乎反复感染。
肠道病毒属于小RNA病毒科,主要感染人或动物的肠道。肠道病毒包括脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒和新型肠道病毒。肠道病毒引起的常见疾病有脊髓灰质炎、手足口病、流行性出血性结膜炎(俗称“红眼病”)、埃可病毒11型感染等,临床表现轻者只有倦怠、乏力、低热等,重者可全身感染,脑、脊髓、心、肝等重要器官受损,预后较差,并可遗留后遗症或造成死亡。尽管针对肠道病毒中的部分病毒开发了有效的疫苗,但一旦感染,对感染者的身体可造成严重的影响。
因此,针对副粘病毒或肠道病毒感染,急需开发出有效的抗病毒药物。
发明内容
经过研究发现,糖基聚醚化合物或其药学上可接受的盐可以破坏副粘病毒或肠道病毒的蛋白结构和功能,影响病毒感染周期的多个阶段,或影响宿主细胞相关蛋白的功能,由此达到广谱的抗病毒效果。因此利用糖基聚醚化合物或其药学上可接受的盐制备药物或者试剂盒,可以用于抗副粘病毒或肠道病毒。
本发明目的之一在于提供糖基聚醚化合物或其药学上可接受的盐在制备抗副粘病毒或肠道病毒药物的用途。本发明的发明人经过大量研究证明糖基聚醚化合物会大范围影响细胞代谢通路,影响钙离子通道蛋白,影响病毒的核蛋白、包衣前体、糖蛋白和基质蛋白功能,破坏病毒复制和感染周期,或影响宿主细胞相关蛋白的功能,可以达到广谱的抗病毒效果,尤其是能够用来抑制副粘病毒或肠道病毒的增殖。
按上述方案,所述副粘病毒为HPIV3、RSV毒株中的至少一种;所述肠道病毒为EV68、EV69、EV70、EV71毒株中的至少一种。
按上述方案,所述糖基聚醚化合物具有以下分子结构式之一:
其中,R3为
R4为
R5为糖基或-CH2-R1;
上述R1相互独立地为-H、烷基、烷氨基、烷氧基或羟基;
上述R2相互独立地为-H、甲基、烷氧基或糖基。
优选地,所述烷氨基、烷基和烷氧基的至少其中之一不超过3个碳原子。
优选地,各R1相互独立地为-CH3、-CH2CH3、-OCH3、-CH2CH2CH3或-OH。
优选地,R5和R2中所述糖基分别独立地为
其中各R6分别独立地为-H、-CH3、不超过8个碳的饱和链烃或不超过8个碳的磺酸基衍生物。
所述药物可以为液体制剂或者固体制剂。液体制剂包括但不限于溶液、胶体、微粒制剂、乳剂、混悬剂中的至少一种。糖基聚醚化合物或其药学上可接受的盐可以与常用辅料制备成液体制剂或者固体制剂等多种剂型,用于阻断副粘病毒或肠道病毒在细胞内的增殖,从而可用于杀死副粘病毒或肠道病毒,或可用于预防或者治疗由副粘病毒或肠道病毒引起的疾病。
糖基聚醚类药物可以和药学上可用的辅料制备成任何剂型。包括但不限于溶液剂、胶体、微粒制剂、乳剂、混悬剂、片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、颗粒剂、栓剂、冻干粉针剂。当然,为了进一步提高药物的治疗效果或者实现精准用药,可以根据需要,采用药物制剂领域常用的辅料,制备成缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。
所述药物可以呈口服或者注射剂。采用注射剂的方式,可以有效地被细胞吸收,提高药物的生物利用度。其中注射剂的给药方式包括静脉注射、肌肉注射、腹腔注射、皮下注射和皮内注射等。同时还可以利用脂质体包裹糖基聚醚化合物形成药物,用于副粘病毒或肠道病毒的治疗。
将所述药物制成注射剂时,其中包含的糖基聚醚化合物或其药学上可接受的盐的浓度为0.001μM-10μM,例如为0.01μM-10μM或者0.1μM-10μM,1μM-10μM。
本发明的第二个目的,提供了糖基聚醚化合物或其药学上可以接受的盐在制备试剂盒的用途。所述试剂盒用于抗副粘病毒或肠道病毒。所述副粘病毒为HPIV3、RSV毒株中的至少一种;所述肠道病毒为EV68、EV69、EV70、EV71毒株中的至少一种。
所述试剂盒包括各自独立的试剂单元,每个试剂单元含有上述糖基聚醚化合物或其药学上可接受的盐,所述糖基聚醚化合物或其药学上可接受的盐的浓度为0.001μM-10μM。例如0.01μM-10μM,0.1μM-10μM,1μM-10μM等。
本发明的第三个目的,提供了一种体外非治疗性抑制副粘病毒或肠道病毒对细胞感染的方法。包括在糖基聚醚化合物或其药学上可接受的盐的存在下,对副粘病毒或肠道病毒和细胞进行共培养。所述细胞为副粘病毒或肠道病毒感染的细胞或者病毒未感染的细胞。所述副粘病毒为HPIV3、RSV毒株中的至少一种;所述肠道病毒为EV68、EV69、EV70、EV71毒株中的至少一种。应用副粘病毒或肠道病毒感染的细胞作为施用对象,与糖基聚醚化合物和副粘病毒或肠道病毒共同作用,可以在细胞水平上研究或者验证不同糖基聚醚化合物对于副粘病毒或肠道病毒的治疗效果。应用病毒未感染的细胞作为施用对象,与糖基聚醚化合物和副粘病毒或肠道病毒共同作用,可以在细胞水平上研究或者验证不同糖基聚醚化合物对于副粘病毒或肠道病毒的预防效果。以此可以确定不同糖基聚醚化合物的合适用量,从而可以应用于制药工艺或者试剂盒的制备工艺中,并进一步指导临床用药或者科研。
在本发明的第四方面,本发明还提供了一种预防和/或治疗副粘病毒或肠道病毒感染的方法,包括向所需要的对象施用有效量的糖基聚醚化合物或其药学上可接受的盐。其中所提到的所需要的对象可以是感染或易感副粘病毒或肠道病毒的对象。可以为动物。所提到的动物包括人。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出,部分将从下面的描述中变得明显,或通过本发明的实践了解到。
附图说明
图1:马杜拉霉素对副粘病毒科病毒HPIV3的血凝素-神经氨酸酶蛋白HPIV3-HN的抑制结果;
图2:马杜拉霉素对副粘病毒科病毒RSV的P糖蛋白的抑制结果;
图3:马杜拉霉素对肠道病毒EV71的VP1结构蛋白的抑制结果;
图4:J1-001-4对副粘病毒科病毒HPIV3的血凝素-神经氨酸酶蛋白的抑制结果;
图5:J1-001-4对副粘病毒科病毒RSV的P糖蛋白的抑制结果;
图6:J1-001-4对肠道病毒EV71的VP1结构蛋白的抑制结果。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例,需要说明的是,所描述的实施例是示例性的,旨在用于解释本发明,而不能理解为对本发明的限制。
文件中“糖基聚醚化合物”、“糖基聚醚化合物”均是指带有糖基修饰的聚醚类化合物。
本发明提供了一种糖基聚醚化合物或其药学上可接受的盐在制备药物中的用途,所述药物用于抗副粘病毒或肠道病毒或者用于预防和/或治疗副粘病毒或肠道病毒引起的疾病。糖基聚醚化合物能够改变副粘病毒或肠道病毒在宿主细胞中的寄生环境,破坏蛋白结构,从而抑制副粘病毒或肠道病毒的增殖。根据本发明的实施例,所提到的病毒包括但不限于副粘病毒HPIV3、RSV,或肠道病毒EV68、EV69、EV70、EV71毒株中的至少一种。
所提到的副粘病毒或肠道病毒引起的疾病包括由副粘病毒或肠道病毒直接引起的疾病或者病毒间接引起的疾病。包括但不限于一些高热、剧烈咳嗽、脓性痰、呼吸困难等相关疾病。
本发明在具体实施过程中以副粘病毒HPIV3、RSV毒株,或肠道病毒EV68、EV69、EV70、EV71毒株为例,将糖基聚醚化合物对于这些病毒的抑制作用进行了验证,呈现在后续具体实施例中。结果表明这些糖基聚醚化合物表现出良好的副粘病毒科病毒或肠道病毒抑制效果。针对其他副粘病毒科病毒或肠道病毒的治疗效果未专门示出。
本发明还提供了一种防和/或治疗副粘病毒或肠道病毒感染的方法,包括向所需要的对象施用治疗有效量的糖基聚醚化合物或其药学上可接受的盐。
本发明所使用的术语“治疗”用于指获得期望的药理学和/或生理学效果。所述效果就完全或部分预防疾病或其症状而言可以是预防性的,和/或就部分或完全治愈疾病和/或疾病导致的不良作用而言可以是治疗性的。本文使用的“治疗”涵盖哺乳动物的疾病,包括:(a)在容易患病但是尚未确诊得病的个体中预防疾病或病症发生;(b)抑制疾病,例如阻滞疾病发展;或(c)缓解疾病,例如减轻与疾病相关的症状。本文使用的“治疗”涵盖将药物或化合物给予个体以治疗、治愈、缓解、改善、减轻或抑制个体的疾病的任何用药,包括但不限于将含本文所述聚醚类化合物、或其药学上可接受的盐的药物给予有需要的个体。
在施用药物时,药物的给药频率和剂量可以通过多个相关因素被确定,该因素包括要被治疗的疾病类型,给药途径,病人年龄,性别,体重和疾病的严重程度以及作为活性成分的药物类型。根据本发明的一些实施例,日剂量可分为适宜形式的1剂、2剂或多剂,以在整个时间段内以1次、2次或多次给药,只要达到治疗有效量即可。
本发明所使用的术语“治疗有效量”是指化合物足以显著改善某些与疾病或病症相关的症状的量,也即为给定病症和给药方案提供治疗效果的量。例如,在副粘病毒科病毒或肠道病毒等相关疾病治疗中,减少、预防、延缓、抑制或阻滞疾病或病症的任何症状的药物或化合物应当是治疗有效的。治疗有效量的药物或化合物不需要治愈疾病或病症,但将为疾病或病症提供治疗,使得个体的疾病或病症的发作被延缓、阻止或预防,或者疾病或病症的症状得以缓解,或者疾病或病症的期限被改变,或者例如疾病或病症变得不严重,或者加速康复。
下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解,下面的实施例仅用于说明本发明,而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件的,按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1
选取马度拉霉素作为式1所示化合物的代表化合物,具体结构如下:
先将马杜拉霉素(Mad)用DMSO配置成一定浓度的母液,后根据马杜拉霉素的分子量,用含有10%FBS的DMEM培养基进行稀释,稀释成下列浓度:1μM、5μM共2个浓度梯度,同时将马杜拉霉素脂质体(Mad-liposome)用DMEM培养基稀释成1μM和5μM两个浓度。
将正常Hela细胞接种到12孔板,约在12-16h后,细胞约60%铺满孔底,弃掉旧培养基,用DMEM稀释HPIV3病毒原液,按感染复数moi=0.1加入病毒原液量,2h后将病毒液弃掉,换成含药物的新的培养基,共培养24小时。收集Hela细胞,采用western blotting方法检测细胞内HPIV3的血凝素-神经氨酸酶蛋白(HPIV3-HN)的表达情况,得到的实验结果如图1所示。从图1可以得出,马杜拉霉素在5M浓度下对副粘病毒科病毒HPIV3毒株抑制效果非常显著,几乎检测不到HN蛋白的表达;在1M浓度下HN蛋白表达明显减弱。因此,马杜拉霉素在细胞水平对HPIV3表现出强烈的抑制作用。
实施例2
用实施例1相同的方法,检测马杜拉霉素糖基聚醚化合物对副粘病毒科病毒RSV毒株的抑制作用。收集Hela细胞,采用western blotting方法检测细胞内RSV的P糖蛋白(RSV-P)的表达情况,实验结果如图2所示。从图2可以得出,马杜拉霉素在5M浓度下对副粘病毒科病毒RSV毒株抑制效果非常显著,几乎检测不到P糖蛋白的表达;在1M浓度下P糖蛋白表达明显减弱。因此,马杜拉霉素在细胞水平对副粘病毒科病毒RSV表现出强烈的抑制作用。
实施例3
用实施例1相同的方法,检测马杜拉霉素糖基聚醚化合物对肠道病毒EV71毒株的抑制作用。收集Hela细胞,采用western blotting方法检测细胞内EV71的VP1结构蛋白(EV71-VP1)的表达情况,实验结果如图3所示。从图3可以得出,马杜拉霉素在5M和1M浓度下对肠道病毒EV71毒株抑制效果非常显著,几乎看不到VP1结构蛋白的表达。因此,马杜拉霉素在细胞水平对副粘病毒科病毒RSV表现出强烈的抑制作用。
实施例4
选取J1-001-4作为式2所示化合物的代表化合物,具体结构如下:
用实施例1相同的方法,检测J1-001-4(536)糖基聚醚化合物对副粘病毒科病毒HPIV3毒株的抑制作用,药物作用24h和36h后,收集Hela细胞,采用western blotting方法检测细胞内HPIV3的血凝素-神经氨酸酶蛋白(HN)的表达情况,实验结果如图4所示。从图4可以得出,J1-001-4在3M浓度下对副粘病毒科病毒HPIV3毒株抑制效果非常显著,几乎检测不到HN蛋白的表达;在1M浓度下HN蛋白表达也显著性减弱。因此,J1-001-4在细胞水平对HPIV3表现出强烈的抑制作用。
实施例5
用实施例1相同的方法,检测J1-001-4(536)糖基聚醚化合物对副粘病毒科病毒RSV毒株的抑制作用,药物作用36h和48h后,收集Hela细胞,采用western blotting方法检测细胞内RSV的P糖蛋白(P)的表达情况,实验结果如图5所示。从图5可以得出,J1-001-4在3M浓度下对副粘病毒科病毒RSV毒株抑制效果非常显著,几乎检测不到P糖蛋白的表达;在1M浓度下P糖蛋白表达明显减弱。因此,J1-001-4在细胞水平对副粘病毒科病毒RSV表现出强烈的抑制作用。
实施例6J1-001-4对肠道病毒EV71毒株的抗病毒活性检测
用实施例1相同的方法,检测J1-001-4(536)糖基聚醚化合物对肠道病毒EV71毒株的抑制作用。收集Hela细胞,采用western blotting方法检测细胞内EV71的VP1结构蛋白(VP1)的表达情况,实验结果如图6所示。从图6可以得出,J1-001-4在3M和1M浓度下对肠道病毒EV71毒株抑制效果非常显著,几乎看不到VP1结构蛋白的表达。因此,J1-001-4在细胞水平对副粘病毒科病毒RSV表现出强烈的抑制作用。
同样地,对于其他的副粘病毒毒株,或肠道病毒EV68、EV69、EV70毒株,采用所述的其他羰基聚醚聚醚类化合物中的一种或多种化合物混合等按照上述实施例相同的方法进行治疗,也能够表现出良好的抑制效果。
由于篇幅限制,具体实施方式中未能穷举式1和式2中所有构型的糖基聚醚化合物对所有副粘病毒或肠道病毒的抑制实施例。但通过发明人的研究,可以确定式1和式2中所有构型的糖基聚醚化合物均能够对不同种类的副粘病毒或肠道病毒表现出抑制作用,只是强弱有所不同。且式1和式2中所有构型的糖基聚醚化合物针对副粘病毒HPIV3、RSV毒株以及肠道病毒EV68、EV69、EV70、EV71毒株均具有特别好的抑制作用。
在本说明书的描述中,参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中,对上述术语的示意性表述不必针对的是相同的实施例或示例。而且,描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外,在不相互矛盾的情况下,本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例,可以理解的是,上述实施例是示例性的,不能理解为对本发明的限制,本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
Claims (4)
2.如权利要求1所述糖基聚醚化合物在制备抗副粘病毒或肠道病毒药物的用途,其特征在于所述药物为液体制剂或者固体制剂。
3.权利要求1所述糖基聚醚化合物在制备试剂盒的用途,其特征在于所述试剂盒用于抗副粘病毒或肠道病毒;所述试剂盒含有独立的试剂单元,所述试剂单元中含有糖基聚醚化合物,所述副粘病毒为HPIV3、RSV毒株中的至少一种;所述肠道病毒为EV71毒株。
4.一种体外非治疗性抑制副粘病毒或肠道病毒对细胞感染的方法,其特征在于权利要求1所述糖基聚醚化合物存在下对副粘病毒或肠道病毒和细胞进行共培养,所述副粘病毒为HPIV3、RSV毒株中的至少一种;所述肠道病毒为EV71毒株。
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PB01 | Publication | ||
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GR01 | Patent grant | ||
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