CN112007163B - 用于治疗非洲猪瘟的药物组合物及其用途 - Google Patents
用于治疗非洲猪瘟的药物组合物及其用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112007163B CN112007163B CN202010783197.6A CN202010783197A CN112007163B CN 112007163 B CN112007163 B CN 112007163B CN 202010783197 A CN202010783197 A CN 202010783197A CN 112007163 B CN112007163 B CN 112007163B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- group
- composition
- methyltetrahydrofolate
- infection
- mice
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 27
- 208000007407 African swine fever Diseases 0.000 title claims abstract description 21
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 172
- 239000011578 levomefolic acid Substances 0.000 claims abstract description 72
- ZNOVTXRBGFNYRX-ABLWVSNPSA-N levomefolic acid Chemical group C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C)C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 ZNOVTXRBGFNYRX-ABLWVSNPSA-N 0.000 claims abstract description 67
- 235000007635 levomefolic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 66
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 50
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims abstract description 49
- 108010047620 Phytohemagglutinins Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 230000001885 phytohemagglutinin Effects 0.000 claims abstract description 18
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 claims description 48
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 44
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 22
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 12
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 claims description 12
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 claims description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 8
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 6
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 abstract description 83
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 66
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 56
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 28
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 27
- 102000008299 Nitric Oxide Synthase Human genes 0.000 abstract description 17
- 108010021487 Nitric Oxide Synthase Proteins 0.000 abstract description 17
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 abstract description 17
- DAYLJWODMCOQEW-TURQNECASA-N NMN zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP(O)([O-])=O)O2)O)=C1 DAYLJWODMCOQEW-TURQNECASA-N 0.000 abstract description 16
- SBJKKFFYIZUCET-JLAZNSOCSA-N Dehydro-L-ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(=O)C1=O SBJKKFFYIZUCET-JLAZNSOCSA-N 0.000 abstract description 14
- SBJKKFFYIZUCET-UHFFFAOYSA-N Dehydroascorbic acid Natural products OCC(O)C1OC(=O)C(=O)C1=O SBJKKFFYIZUCET-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 14
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 14
- 235000020960 dehydroascorbic acid Nutrition 0.000 abstract description 14
- 239000011615 dehydroascorbic acid Substances 0.000 abstract description 14
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 abstract description 12
- 244000052769 pathogen Species 0.000 abstract description 11
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 abstract description 8
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 abstract description 7
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 abstract description 7
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 abstract description 6
- 239000000411 inducer Substances 0.000 abstract description 5
- 239000004067 bulking agent Substances 0.000 abstract description 3
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 abstract description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 86
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 67
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 55
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 53
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 47
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 37
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 36
- JMNIIIQOMSQWJN-ACGFUFEJSA-L calcium;(4s)-4-[[4-[(2-amino-5-methyl-4-oxo-1,6,7,8-tetrahydropteridin-6-yl)methylamino]benzoyl]amino]-5-hydroxy-5-oxopentanoate Chemical compound [Ca+2].C1NC=2N=C(N)NC(=O)C=2N(C)C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC([O-])=O)C(O)=O)C=C1.C1NC=2N=C(N)NC(=O)C=2N(C)C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC([O-])=O)C(O)=O)C=C1 JMNIIIQOMSQWJN-ACGFUFEJSA-L 0.000 description 35
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 34
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 34
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 33
- 230000034994 death Effects 0.000 description 33
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 33
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 33
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 30
- 102000011779 Nitric Oxide Synthase Type II Human genes 0.000 description 29
- 108010076864 Nitric Oxide Synthase Type II Proteins 0.000 description 29
- CMFNMSMUKZHDEY-UHFFFAOYSA-M peroxynitrite Chemical compound [O-]ON=O CMFNMSMUKZHDEY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 26
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 25
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 23
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 21
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 21
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 21
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 20
- 241000701386 African swine fever virus Species 0.000 description 19
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 19
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 19
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 19
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 19
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 18
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 18
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 18
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 18
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 18
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 17
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 17
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 17
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 16
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 16
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 15
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 15
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 14
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 14
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 14
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 14
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 description 14
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 14
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 13
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 13
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 12
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 12
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 12
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 12
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 12
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 11
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 11
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 11
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 11
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 10
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 10
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 10
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 10
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 10
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 10
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 10
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 10
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 10
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 9
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 description 9
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 9
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 9
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 9
- GQPLMRYTRLFLPF-UHFFFAOYSA-N nitrous oxide Inorganic materials [O-][N+]#N GQPLMRYTRLFLPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 9
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 9
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 9
- -1 superoxide anions Chemical class 0.000 description 9
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 8
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 8
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 239000007845 reactive nitrogen species Substances 0.000 description 8
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 7
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 7
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 7
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 7
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 7
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 7
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 7
- FNKQXYHWGSIFBK-RPDRRWSUSA-N sapropterin Chemical compound N1=C(N)NC(=O)C2=C1NC[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O)C)N2 FNKQXYHWGSIFBK-RPDRRWSUSA-N 0.000 description 7
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 7
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical group OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- NCGICGYLBXGBGN-UHFFFAOYSA-N 3-morpholin-4-yl-1-oxa-3-azonia-2-azanidacyclopent-3-en-5-imine;hydrochloride Chemical compound Cl.[N-]1OC(=N)C=[N+]1N1CCOCC1 NCGICGYLBXGBGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 6
- 102000008052 Nitric Oxide Synthase Type III Human genes 0.000 description 6
- 108010075520 Nitric Oxide Synthase Type III Proteins 0.000 description 6
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 6
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 6
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 6
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 6
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 6
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 6
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 6
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 6
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 6
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 6
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 6
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 6
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 6
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 6
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 6
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 6
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 5
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 5
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 5
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 5
- 208000029523 Interstitial Lung disease Diseases 0.000 description 5
- RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N L-citrulline Chemical compound NC(=O)NCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 5
- 241000202934 Mycoplasma pneumoniae Species 0.000 description 5
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 5
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 5
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 5
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 5
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 5
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 5
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 5
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N curcumin Chemical group C1=C(O)C(OC)=CC(\C=C\C(=O)CC(=O)\C=C\C=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N 0.000 description 5
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 5
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 5
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 5
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 5
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 5
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 230000009935 nitrosation Effects 0.000 description 5
- 238000007034 nitrosation reaction Methods 0.000 description 5
- 229940126578 oral vaccine Drugs 0.000 description 5
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 5
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 5
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 239000004606 Fillers/Extenders Substances 0.000 description 4
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 4
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 4
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 4
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 4
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 description 4
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 4
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 4
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 4
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 4
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 4
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 4
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 4
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 4
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 229960004617 sapropterin Drugs 0.000 description 4
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 4
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 4
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 4
- BOJKULTULYSRAS-OTESTREVSA-N Andrographolide Chemical group C([C@H]1[C@]2(C)CC[C@@H](O)[C@]([C@H]2CCC1=C)(CO)C)\C=C1/[C@H](O)COC1=O BOJKULTULYSRAS-OTESTREVSA-N 0.000 description 3
- 208000031636 Body Temperature Changes Diseases 0.000 description 3
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 3
- 238000012449 Kunming mouse Methods 0.000 description 3
- RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N Ndelta-carbamoyl-DL-ornithine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=O RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 206010037742 Rabies Diseases 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 description 3
- LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N Trans-resveratrol Chemical group C1=CC(O)=CC=C1\C=C\C1=CC(O)=CC(O)=C1 LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 3
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 150000004636 anthocyanins Chemical group 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 235000013477 citrulline Nutrition 0.000 description 3
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 3
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 3
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 3
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 3
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 3
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 3
- 230000001571 immunoadjuvant effect Effects 0.000 description 3
- 239000000568 immunological adjuvant Substances 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 3
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- DMJNNHOOLUXYBV-PQTSNVLCSA-N meropenem Chemical group C=1([C@H](C)[C@@H]2[C@H](C(N2C=1C(O)=O)=O)[C@H](O)C)S[C@@H]1CN[C@H](C(=O)N(C)C)C1 DMJNNHOOLUXYBV-PQTSNVLCSA-N 0.000 description 3
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 3
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 3
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 3
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 3
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 3
- RMLUKZWYIKEASN-UHFFFAOYSA-M sodium;2-amino-9-(2-hydroxyethoxymethyl)purin-6-olate Chemical compound [Na+].O=C1[N-]C(N)=NC2=C1N=CN2COCCO RMLUKZWYIKEASN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 3
- 229940031000 streptococcus pneumoniae Drugs 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 3
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 3
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 3
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 2
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 2
- SMDOOINVMJSDPS-UHFFFAOYSA-N Astragaloside Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)OC2C(C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(O)C(CO)O2)O)=C1 SMDOOINVMJSDPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000031648 Body Weight Changes Diseases 0.000 description 2
- 208000025721 COVID-19 Diseases 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000003322 Coinfection Diseases 0.000 description 2
- 102000010451 Folate receptor alpha Human genes 0.000 description 2
- 108050001931 Folate receptor alpha Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010069767 H1N1 influenza Diseases 0.000 description 2
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 2
- 241000712431 Influenza A virus Species 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KCWZGJVSDFYRIX-YFKPBYRVSA-N N(gamma)-nitro-L-arginine methyl ester Chemical compound COC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N[N+]([O-])=O KCWZGJVSDFYRIX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 229940123424 Neuraminidase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 241001077878 Neurolaena lobata Species 0.000 description 2
- 206010068319 Oropharyngeal pain Diseases 0.000 description 2
- 201000007100 Pharyngitis Diseases 0.000 description 2
- 208000035415 Reinfection Diseases 0.000 description 2
- QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N Resveratrol Natural products OC1=CC=CC(C=CC=2C=C(O)C(O)=CC=2)=C1 QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006295 S-nitrosylation Effects 0.000 description 2
- 241000256103 Simuliidae Species 0.000 description 2
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 206010051379 Systemic Inflammatory Response Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 2
- 210000000068 Th17 cell Anatomy 0.000 description 2
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 2
- 208000000260 Warts Diseases 0.000 description 2
- XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N [[(2r,3r,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3-hydroxy-4-phosphonooxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [(2s,3r,4s,5s)-5-(3-carbamoylpyridin-1-ium-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl phosphate Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N 0.000 description 2
- 229960004150 aciclovir Drugs 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 208000038016 acute inflammation Diseases 0.000 description 2
- 230000006022 acute inflammation Effects 0.000 description 2
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 2
- ASLUCFFROXVMFL-UHFFFAOYSA-N andrographolide Natural products CC1(CO)C(O)CCC2(C)C(CC=C3/C(O)OCC3=O)C(=C)CCC12 ASLUCFFROXVMFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000010208 anthocyanin Nutrition 0.000 description 2
- 239000004410 anthocyanin Substances 0.000 description 2
- 229930002877 anthocyanin Natural products 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000011861 anti-inflammatory therapy Methods 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 2
- QMNWISYXSJWHRY-XWJCTJPOSA-N astragaloside Chemical compound O1[C@H](C(C)(O)C)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@]2(C)CC[C@]34C[C@]4(CC[C@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)CO4)O)C4(C)C)C4[C@@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)CC3[C@]2(C)C[C@@H]1O QMNWISYXSJWHRY-XWJCTJPOSA-N 0.000 description 2
- 229960004099 azithromycin Drugs 0.000 description 2
- MQTOSJVFKKJCRP-BICOPXKESA-N azithromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)N(C)C[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 MQTOSJVFKKJCRP-BICOPXKESA-N 0.000 description 2
- 238000009529 body temperature measurement Methods 0.000 description 2
- 230000004579 body weight change Effects 0.000 description 2
- 230000004641 brain development Effects 0.000 description 2
- 210000005252 bulbus oculi Anatomy 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000004970 cd4 cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N chloral hydrate Chemical compound OC(O)C(Cl)(Cl)Cl RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002327 chloral hydrate Drugs 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 235000012754 curcumin Nutrition 0.000 description 2
- 239000004148 curcumin Substances 0.000 description 2
- 229940109262 curcumin Drugs 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 2
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 230000003205 diastolic effect Effects 0.000 description 2
- VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N diferuloylmethane Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C=CC(=O)CC(=O)C=CC=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 235000021050 feed intake Nutrition 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000003304 gavage Methods 0.000 description 2
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 230000007236 host immunity Effects 0.000 description 2
- 230000003832 immune regulation Effects 0.000 description 2
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 2
- 208000033065 inborn errors of immunity Diseases 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 2
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 238000010197 meta-analysis Methods 0.000 description 2
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 2
- KKMJGUDIUVOQTI-STWSTGMMSA-N methyl (2s)-2-(1-adamantylmethylamino)-3-(4h-imidazol-4-yl)propanoate Chemical compound C([C@@H](C(=O)OC)NCC12CC3CC(CC(C3)C1)C2)C1C=NC=N1 KKMJGUDIUVOQTI-STWSTGMMSA-N 0.000 description 2
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 description 2
- 230000007830 nerve conduction Effects 0.000 description 2
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 2
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 2
- 239000001272 nitrous oxide Substances 0.000 description 2
- 239000011022 opal Substances 0.000 description 2
- 210000004279 orbit Anatomy 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 208000028529 primary immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 2
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 2
- 235000021283 resveratrol Nutrition 0.000 description 2
- 229940016667 resveratrol Drugs 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 2
- 239000002911 sialidase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 201000010153 skin papilloma Diseases 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- 201000010740 swine influenza Diseases 0.000 description 2
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 2
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 2
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 2
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010044008 tonsillitis Diseases 0.000 description 2
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 2
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 2
- GIANIJCPTPUNBA-QMMMGPOBSA-N (2s)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-nitramidopropanoic acid Chemical compound [O-][N+](=O)N[C@H](C(=O)O)CC1=CC=C(O)C=C1 GIANIJCPTPUNBA-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- MGWGWNFMUOTEHG-UHFFFAOYSA-N 4-(3,5-dimethylphenyl)-1,3-thiazol-2-amine Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C=2N=C(N)SC=2)=C1 MGWGWNFMUOTEHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 6,7-dimethyl-3-[[methyl-[2-[methyl-[[1-[3-(trifluoromethyl)phenyl]indol-3-yl]methyl]amino]ethyl]amino]methyl]chromen-4-one;dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.C=1OC2=CC(C)=C(C)C=C2C(=O)C=1CN(C)CCN(C)CC(C1=CC=CC=C11)=CN1C1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000238876 Acari Species 0.000 description 1
- 108010009924 Aconitate hydratase Proteins 0.000 description 1
- 102100039702 Alcohol dehydrogenase class-3 Human genes 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 108010063104 Apoptosis Regulatory Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000010565 Apoptosis Regulatory Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241000238888 Argasidae Species 0.000 description 1
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 206010003757 Atypical pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 208000035404 Autolysis Diseases 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 108700003785 Baculoviral IAP Repeat-Containing 3 Proteins 0.000 description 1
- 102100021662 Baculoviral IAP repeat-containing protein 3 Human genes 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- BHKSYEZGBQDNRW-SCGRZTRASA-N C(CCC(=O)O)(=O)O.N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)O.N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)O Chemical compound C(CCC(=O)O)(=O)O.N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)O.N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)O BHKSYEZGBQDNRW-SCGRZTRASA-N 0.000 description 1
- 102100025752 CASP8 and FADD-like apoptosis regulator Human genes 0.000 description 1
- 210000005236 CD8+ effector T cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001239 CD8-positive, alpha-beta cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 206010007559 Cardiac failure congestive Diseases 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 102000003952 Caspase 3 Human genes 0.000 description 1
- 108090000397 Caspase 3 Proteins 0.000 description 1
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 description 1
- 108010071942 Colony-Stimulating Factors Proteins 0.000 description 1
- 208000001528 Coronaviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 208000028399 Critical Illness Diseases 0.000 description 1
- 206010011703 Cyanosis Diseases 0.000 description 1
- 102100039868 Cytoplasmic aconitate hydratase Human genes 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 230000005778 DNA damage Effects 0.000 description 1
- 231100000277 DNA damage Toxicity 0.000 description 1
- 230000007018 DNA scission Effects 0.000 description 1
- 241000725619 Dengue virus Species 0.000 description 1
- 201000011001 Ebola Hemorrhagic Fever Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 208000037487 Endotoxemia Diseases 0.000 description 1
- 241000709661 Enterovirus Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 208000025309 Hair disease Diseases 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 101000959452 Homo sapiens Alcohol dehydrogenase class-3 Proteins 0.000 description 1
- 101000914211 Homo sapiens CASP8 and FADD-like apoptosis regulator Proteins 0.000 description 1
- 101001046870 Homo sapiens Hypoxia-inducible factor 1-alpha Proteins 0.000 description 1
- 101001124991 Homo sapiens Nitric oxide synthase, inducible Proteins 0.000 description 1
- 206010020565 Hyperaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 208000001953 Hypotension Diseases 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- 102100022875 Hypoxia-inducible factor 1-alpha Human genes 0.000 description 1
- 102000040104 IAP family Human genes 0.000 description 1
- 108091069885 IAP family Proteins 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 102100023915 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 1
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 1
- 102000004125 Interleukin-1alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010082786 Interleukin-1alpha Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 206010023424 Kidney infection Diseases 0.000 description 1
- RWSXRVCMGQZWBV-PHDIDXHHSA-N L-Glutathione Natural products OC(=O)[C@H](N)CCC(=O)N[C@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-PHDIDXHHSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 239000012880 LB liquid culture medium Substances 0.000 description 1
- 206010024642 Listless Diseases 0.000 description 1
- 208000004852 Lung Injury Diseases 0.000 description 1
- 102000004317 Lyases Human genes 0.000 description 1
- 108090000856 Lyases Proteins 0.000 description 1
- 102000002151 Microfilament Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010040897 Microfilament Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000013379 Mitochondrial Proton-Translocating ATPases Human genes 0.000 description 1
- 108010026155 Mitochondrial Proton-Translocating ATPases Proteins 0.000 description 1
- 208000001572 Mycoplasma Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 1
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 206010053159 Organ failure Diseases 0.000 description 1
- 241000283977 Oryctolagus Species 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 206010035742 Pneumonitis Diseases 0.000 description 1
- 102000012338 Poly(ADP-ribose) Polymerases Human genes 0.000 description 1
- 108010061844 Poly(ADP-ribose) Polymerases Proteins 0.000 description 1
- 102000011195 Profilin Human genes 0.000 description 1
- 108050001408 Profilin Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940096437 Protein S Drugs 0.000 description 1
- 108700020978 Proto-Oncogene Proteins 0.000 description 1
- 102000052575 Proto-Oncogene Human genes 0.000 description 1
- 108010090931 Proto-Oncogene Proteins c-bcl-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000013535 Proto-Oncogene Proteins c-bcl-2 Human genes 0.000 description 1
- 102000000850 Proto-Oncogene Proteins c-rel Human genes 0.000 description 1
- 108010001859 Proto-Oncogene Proteins c-rel Proteins 0.000 description 1
- 206010037394 Pulmonary haemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 206010037596 Pyelonephritis Diseases 0.000 description 1
- 229940124861 Rabies virus vaccine Drugs 0.000 description 1
- 206010061481 Renal injury Diseases 0.000 description 1
- 206010039966 Senile dementia Diseases 0.000 description 1
- 241001591005 Siga Species 0.000 description 1
- 101710198474 Spike protein Proteins 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 1
- 210000000447 Th1 cell Anatomy 0.000 description 1
- 241001052560 Thallis Species 0.000 description 1
- 108010022394 Threonine synthase Proteins 0.000 description 1
- 206010069363 Traumatic lung injury Diseases 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 206010070995 Vascular compression Diseases 0.000 description 1
- 108700022715 Viral Proteases Proteins 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 241000212749 Zesius chrysomallus Species 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000010398 acute inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 230000001919 adrenal effect Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- RNBGYGVWRKECFJ-ZXXMMSQZSA-N alpha-D-fructofuranose 1,6-bisphosphate Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@](O)(COP(O)(O)=O)O[C@@H]1COP(O)(O)=O RNBGYGVWRKECFJ-ZXXMMSQZSA-N 0.000 description 1
- LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N amoxicillin Chemical group C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000036592 analgesia Effects 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 230000002424 anti-apoptotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 230000002725 anti-mycoplasma Effects 0.000 description 1
- 230000001754 anti-pyretic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003260 anti-sepsis Effects 0.000 description 1
- 230000002785 anti-thrombosis Effects 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000436 anus Anatomy 0.000 description 1
- 150000001483 arginine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 1
- 229940031567 attenuated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- IKIIZLYTISPENI-ZFORQUDYSA-N baicalin Chemical group O1[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1OC(C(=C1O)O)=CC2=C1C(=O)C=C(C=1C=CC=CC=1)O2 IKIIZLYTISPENI-ZFORQUDYSA-N 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 210000000621 bronchi Anatomy 0.000 description 1
- 210000003123 bronchiole Anatomy 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 230000001964 calcium overload Effects 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 description 1
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 229940124579 cold medicine Drugs 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 230000006854 communication Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000008094 contradictory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 210000004292 cytoskeleton Anatomy 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000481 dehydro ascorbic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002074 deregulated effect Effects 0.000 description 1
- 230000003831 deregulation Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 102000004419 dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000007919 dispersible tablet Substances 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 230000007783 downstream signaling Effects 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 1
- 230000000094 effect on sepsis Effects 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 1
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000017188 evasion or tolerance of host immune response Effects 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 1
- 230000008713 feedback mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- AAXVEMMRQDVLJB-BULBTXNYSA-N fludrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@@]3(F)[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 AAXVEMMRQDVLJB-BULBTXNYSA-N 0.000 description 1
- 229960002011 fludrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 229940025237 fructose 1,6-diphosphate Drugs 0.000 description 1
- 150000002301 glucosamine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 208000024348 heart neoplasm Diseases 0.000 description 1
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-M hexadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000055708 human NOS2 Human genes 0.000 description 1
- TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N hydroxyl Chemical compound [OH] TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001146 hypoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 230000005934 immune activation Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 239000012642 immune effector Substances 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960003971 influenza vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 229940076144 interleukin-10 Drugs 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 208000037806 kidney injury Diseases 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 208000017971 listlessness Diseases 0.000 description 1
- 208000012866 low blood pressure Diseases 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 231100000515 lung injury Toxicity 0.000 description 1
- 230000005427 lymphocyte apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008558 metabolic pathway by substance Effects 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004089 microcirculation Effects 0.000 description 1
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000008383 multiple organ dysfunction Effects 0.000 description 1
- 210000000581 natural killer T-cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 238000006396 nitration reaction Methods 0.000 description 1
- JCXJVPUVTGWSNB-UHFFFAOYSA-N nitrogen dioxide Inorganic materials O=[N]=O JCXJVPUVTGWSNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008599 nitrosative stress Effects 0.000 description 1
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 238000001668 nucleic acid synthesis Methods 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000009965 odorless effect Effects 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 230000004768 organ dysfunction Effects 0.000 description 1
- UWYHMGVUTGAWSP-JKIFEVAISA-N oxacillin Chemical compound N([C@@H]1C(N2[C@H](C(C)(C)S[C@@H]21)C(O)=O)=O)C(=O)C1=C(C)ON=C1C1=CC=CC=C1 UWYHMGVUTGAWSP-JKIFEVAISA-N 0.000 description 1
- 229960001019 oxacillin Drugs 0.000 description 1
- 230000004792 oxidative damage Effects 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 230000008529 pathological progression Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000004963 pathophysiological condition Effects 0.000 description 1
- 230000007310 pathophysiology Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005502 peroxidation Methods 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 1
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000004853 protein function Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 208000005333 pulmonary edema Diseases 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 229960003127 rabies vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000000384 rearing effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008844 regulatory mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 238000009666 routine test Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000028043 self proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M sodium-L-ascorbate Chemical compound [Na+].OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 210000000225 synapse Anatomy 0.000 description 1
- 230000000946 synaptic effect Effects 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 description 1
- 208000037816 tissue injury Diseases 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 229940100615 topical ointment Drugs 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000002110 toxicologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- 208000019206 urinary tract infection Diseases 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000024883 vasodilation Effects 0.000 description 1
- 239000002435 venom Substances 0.000 description 1
- 210000001048 venom Anatomy 0.000 description 1
- 231100000611 venom Toxicity 0.000 description 1
- 229960004854 viral vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
- A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
- A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
- A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/365—Lactones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/365—Lactones
- A61K31/375—Ascorbic acid, i.e. vitamin C; Salts thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/4985—Pyrazines or piperazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/168—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Botany (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
本发明为用于治疗非洲猪瘟的药物组合物及其用途。一种在体内产生安全量的一氧化氮的药物组合物及其用途。其包括以下组分:NO减毒剂、NO增量剂和一氧化氮合酶诱导剂。本发明提供了通用性强而且又极为有效治疗致病微生物感染的药物组合物。其中NO减毒剂选自5‑甲基四氢叶酸,NMN以及去氢抗坏血酸,NO增量剂选自精氨酸,一氧化氮合酶诱导剂选自植物血凝素。本发明提供了5‑甲基四氢叶酸的新药用活性,其对因病原体感染导致的免疫系统具有多种活性作用,可用于治疗或预防病毒感染以及其他病原体感染所带来的疾病,特别的,本发明的组合物用于预防或治疗非洲猪瘟。
Description
技术领域
本发明属于医药领域,具体涉及一种可在动物体内产生一氧化氮的药物组合物,它能提供安全足量的一氧化氮,用于疾病的预防和治疗。
背景技术
非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swinefevervirus,ASFV)引起的一种急性、热性、高度接触性、致死性动物传染病。ASFV的主要宿主为各品种的家猪、非洲和欧亚野猪、钝缘蜱等,其中疣猪和灌木猪均可被感染,但不表现临床症状,疣猪等非洲野猪和钝缘蜱为ASFV的宿主。根据ASFV的毒力,ASF的临床症状和感染过程有显著差异,最急性和急性型感染死亡率为100%。
非洲猪瘟无有效的预防疫苗,无特效治疗药物。各阶段家猪、野猪和软蜱是非洲猪瘟自然宿主,可在家猪和野猪之间直接传播,也可通过蜱虫叮咬传播,还可以通过污染了病毒的 泔水、饲料以及腌制的干火腿等猪肉产品跨国家和地区传播。发现疫情,必须进行扑杀,是全球防范内危害猪群最严重的传染病之一,是我国重点防范的头号外来动物疫病。
人类的历史中新的病毒不断出现,已知的病毒不断变异,面对新的传染性病毒时,由于人体内没有相对应的特异性抗体,导致类周期性的出现大规模的感染。人类的几次流感病毒大流行,带走了很多人的生命。2009年美国和墨西哥爆发了H1N1流感病毒, 2020年全球爆发COVID-19病毒,不同个体感染相同的流感病毒,结果却不相同,有些病人会失去生命,而有些却几乎没有症状,尽管病毒的毒力可能会有所不同,但宿主的免疫状态也很重要。
当需要预防和治疗流感病毒感染时,抗体是最好的手段,但是流感病毒发展迅速,抗体对季节性流感病毒的选择性压力推动了逃逸突变体的出现,这些突变体可以在早期菌株免疫的社区中引起流行病,这就是为什么季节性流感疫苗需要经常更新的原因。不幸的是抗体反应的特异性也为流感大流行的出现奠定了基础。上个世纪,已经发生了多次流感病毒或冠状病毒大流行,包括,A(H1N1),A(H2N2),A(H3N2),A(H1N1),非典新型冠状病毒和COVID-19,上述流感或冠状病毒感染分别发生在1918、1957、1968、2009、2001和2020年。有趣的是上述的流感病毒感染流行发展中,宿主患病的严重程度均差异巨大。有学者证明免疫细胞中,特别是T细胞感染与激活的差异,导致抵抗流感病毒的能力差异[Kelso, Anne.CD4+ T cells limit the damage in influenza[J]. Nature Medicine, 2012, 18(2):200-202.]。
有证据表明,T细胞可以介导交叉保护免疫,T细胞无法预防病毒感染,但它们可以通过识别与感染的上皮细胞或抗原递呈细胞表面上的人类白细胞抗原(HLA)分子复合的病毒蛋白(表位)片段来感知被感染的细胞。由于T细胞优先看到源自病毒保守内部蛋白的表位,因此交叉保护性免疫已被归因于预先存在的细胞毒性CD8+T细胞,这些细胞会杀死递呈这些保守表位的病毒感染细胞,减少因缺乏抗体保护的大流行病毒感染的时间和严重程度。
非洲猪瘟病毒具有独特的性质,导致不会从感染中恢复过来的猪中诱导中和抗体,进一步的抵抗病毒的复发。未中和抗体的存在导致了非洲猪瘟可能存在ADE(抗体依赖性增强)效应,即抗体的存在不仅不阻止病毒的感染,反而加剧的病毒的感染以及有关疾病的病理进程。同时未中和抗体的存在导致,受到减毒疫苗免疫保护猪中持续的抗原阳性。在综述[Dixon L K, Islam M, Nash R, et al. African swine fever virus evasion ofhost defences[J]. Virus research, 2019.]中,作者描述分析了非洲猪瘟病毒的免疫逃脱策略,SFV pA179 L Bcl-2 家族蛋白结合并抑制一些仅BH3的结构域促凋亡蛋白。pA224L IAP家族蛋白结合并抑制caspase 3并激活NF-kB信号传导,从而增加抗凋亡基因(包括cFLIP,cIAP2和c-rel)的表达。上述机制的存在导致非洲猪瘟病毒能够抑制感染细胞的凋亡从而保证病毒的继续复制,而却通过TNF-α诱导未感染的淋巴细胞的凋亡,急性ASFV疾病的主要特征就是淋巴组织和血液中B和T淋巴细胞的大量凋亡。
由于抗生素的发现,人们对于细菌感染已经具有了非常好的临床治疗手段,而对于病毒,目前还没有很好的手段去治疗。目前人类对于病毒的治疗药物主要分为两类,M2离子通道阻断剂以及神经氨酸酶抑制剂,M2离子通道阻断剂存在整体的病毒抵抗效应以及神经系统的副作用导致临床应用不是很理想,而神经氨酸酶抑制剂虽然能诱导病毒,但是效果比较弱。近年来出现了大量的病毒爆发,禽流感病毒、非洲猪瘟病毒、非典型肺炎病毒,这些病毒的毒理学后果非常严重,对于患者或患病动物医生也无法拿出良好的治疗手段。不仅新病毒无良好的治疗手段,很多长期存在的病毒人们也束手无策,包括登革热病毒、艾滋病病毒等等。治疗病毒最佳方案就是预防,也就是疫苗,通过人体的免疫系统达到预防病毒的效果,以上事实也说明了对于病毒的治疗,开发以抗生素那种直接杀死或抑制病原体的药物的思路其实是事倍功半。
人们需要以新的思路来开发抗病毒药物,利用人体免疫系统达到治疗病毒感染就是其中重要的方向,特别是针对NO和免疫的有关药物,以实现通用性强的抗病毒效果。
一氧化氮气体无色无味,能溶于水,醇类,脂肪。上世纪80年代以前,一氧化氮只是一种普通而无用的化学气体,人们只知道它存在于汽车尾气和某些化学过程的气体污染物中。在1980年之前的27中,人们发现了内皮细胞产生一种物质(称为“内皮源性舒张因子”),1986年Ignarro提交的第一篇实验论文,声称内皮源性舒张因子(EDRF)为一氧化氮。这些成果激起了人们极大的热情来关注和研究NO。它快速的进出细胞,传导信号调节血管扩张,神经传导,大脑发育甚至学习与记忆,它能够强化免疫,杀死部分外来微生物,它能够降低血压,预防中风,心脏病,肿瘤,老年痴呆。
NO是由L-精氨酸在一氧化氮合酶(NOS)催化下,经过NADPH还原而成,一氧化氮合酶可以分为内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导性一氧化氮合酶(iNOS)、神经型一氧化氮合酶(nNOS)。它们分别在人体不同的组织细胞中,分别参与了心、脑血管系统的调节、免疫调节、神经系统的调节。
参与免疫的NO可以由多种免疫细胞产生(树突状细胞,NK细胞,巨噬细胞,嗜酸粒细胞和中性粒细胞),在iNOS表达时,可产生大量的NO,作为人体主动防御的机制。有证据表明NO能够抑制病毒的复制,相关机制包括导致病毒刺突蛋白棕榈化减少,抑制病毒蛋白酶,阻碍病毒蛋白和核酸合成。
一氧化氮合酶是一种二聚体,其在氧化条件下会解偶联,从而导致原本合成NO的反应路径转变为产生O2-,NO3-(PON)等活性氧自由基(ROS)。而NO本身也可以与活性氧自由基(ROS)反应生成活性氮(RNS)。
NO在体内跟超氧阴离子迅速反应生产过氧亚硝酸。在酸性条件下,又会迅速分解产生羟基自由基。过氧化亚硝酸 是氧化性极强的物质,能够导致蛋白质硝基化、导致DNA链断裂。种种原因导致生物体内产生很多氧化性的自由基,既包括活性氧也包括活性氮。这些自由基的存在相当程度的破坏了过往的平衡。这些自由基中,影响最大的当属过氧亚硝基阴离子(PON)。其生产途径主要是一氧化氮跟超氧阴离子反应获得。
PON在人体内的作用大部分都是负面的。包括而不限于:
1. 氧化作用:PON本身是一种强氧化剂。在酸性条件下迅速分解出二氧化氮和羟基自由基。羟基自由基是更强的氧化剂,几乎可以氧化降解所有有机物。在生命体内,PON能够跟很多酶、蛋白质、细胞因子等的铁/硫中心,巯基,脂质等反应造成氧化损害,造成细胞功能损伤和凋亡;还能够降低谷胱甘肽清除自由基的机制,造成恶性循环。PON氧化作用可能引起各种疾病发生,如急性慢性炎症,败血症,外伤性局部缺血,动脉硬化,神经再生性失调等。
2. 硝基化作用:PON能够跟蛋白质中的酪氨酸反应生成硝基酪氨酸而影响蛋白质的功能,造成DNA 断裂等后果。
3. 影响能量代:酶蛋白在氧化作用和硝基化作用下活性降低。如线粒体的ATP合成酶,乌头酶活性受到抑制,导致能量减少。PON是多聚ADP-核糖合成酶的强烈激活物。该酶激活后会启动无效的修复循环,导致能量池迅速耗尽。细胞代谢和膜的完整性被破坏,导致细胞死亡。
4.干扰钙的运转:Na+/Ca2+交换蛋白的巯基被氧化,发生功能障碍,导致细胞内钙超载,造成功能障碍。
当然,可耐受剂量的PON也表现出正面的作用,比如抵抗病毒,病菌,病原虫,癌细胞等对人体的危害。
NO这个1992年的明星分子,实际上在生命体内无处不在。它是免疫系统的信使,调节血流,神经传导,大脑发育等方面起到重要的作用;它可以杀死病菌,病毒,病原虫,癌细胞,是非特异性免疫非常重要的组成部分。被NO杀死的外来微生物或者异常细胞自溶后可以释放大量的抗原物质,启动特异性免疫。NO还会使机体释放出很多细胞因子比如白细胞介素,干扰素,肿瘤坏死因子TNF,集落刺激因子CSF等,调节免疫应答。
NO跟超氧阴离子等自由基反应生成过氧化亚硝酸盐(PON),氧化性极强,具有特别的硝基化能力,积累到一定程度就会造成炎症,释放出影响病理进程的细胞因子。PON通过蛋白质硝基化破坏蛋白质功能,使DNA断裂,促使病毒变异,破坏免疫平衡,唤醒原癌基因,促发癌症。
NO参与免疫调控,急性炎症反应是一个复杂但高度协调的事件序列,涉及分子,细胞和生理学改变,其中如果宿主对感染的反应失调,进一步的产生异常免疫反应,从而产生以器官功能障碍的综合征即为脓毒症(Sepsis)。脓毒症的治疗的研究反映了我们人类对病理生理学和宿主-微生物相互作用的理解的进步。早期人们主要关注在微生物及其致病性上,在20世纪80年代,随着分子克隆的实施和人类炎症基因的测序,研究脓毒症更专注于宿主对入侵病原体的反应。
根据2016年脓毒症3的国际会议(The Third International ConsensusDefinitions for Sepsis)将脓毒症定义为由于宿主对感染的反应失调,而威胁宿主生命的器官功能障碍,其临床表现为发烧,呼吸加快,意识水平改变和血压低,并且伴随该病相关的症状比如肺部感染导致的肺炎、肾脏感染、尿路感染等。
尽管人类对脓毒症起源,进展的认识有了极大的提高,但是脓毒症的死亡率依然十分高,根据文章[Hotchkiss R S, Moldawer L L, Opal S M, et al. Sepsis andseptic shock[J]. Nature reviews Disease primers, 2016, 2(1): 1-21.]所述,对高收入国家的数据进行的初步推断表明,全球每年发生3150万例脓毒症和1940万例严重脓毒症,每年可能有530万人死亡。在许多情况下,尤其是在患有慢性疾病(例如癌症,充血性心力衰竭和慢性阻塞性肺疾病)的患者中,官方的死亡记录通常报告的是潜在疾病,而不是直接的死亡原因(脓毒症),这可能使得脓毒症死亡率明显被低估。这些数字只是估计,因为有关的发病率和低收入、中等收入国家的脓毒症死亡率记录仍然匮乏。
炎症是宿主对病原体入侵的防御反应,因此临床上优先采用的清除病原体的治疗方案是,使用抗生素药物或抗病毒药物来减少病原体抗原的外来刺激。病毒感染性疾病发展到免疫失调阶段,就会发生严重的炎症。一些终止炎症或者抗炎的治疗会减少炎症区域的巨噬细胞数量,提高免疫或是降低免疫反应的决策往往是困难的。常见的抗炎药物有非甾体抗炎药,糖皮质激素等。在严重炎症发生时,临床上往往使用糖皮质激素,然而对脓毒症来说,皮质醇的使用却没有实质益处,根据一项随机对照试验[Annane D, Cariou A,Maxime V, et al. Corticosteroid treatment and intensive insulin therapy forseptic shock in adults: a randomized controlled trial[J]. Jama, 2010, 303(4):341-348.]表明氟氢可的松并没有降低脓毒症患者的死亡率。而之后的萃取分析[Wang C,Sun J, Zheng J, et al. Low-dose hydrocortisone therapy attenuates septicshock in adult patients but does not reduce 28-day mortality: a meta-analysisof randomized controlled trials[J]. Anesthesia & Analgesia, 2014, 118(2):346-357.]也说明氢化可的松并不能降低严重感染患者或脓毒症的死亡率,目前临床上对严重感染患者,使用类固醇是有争议的。
过去20年内,人们一直尝试弄清维生素C与脓毒症之间的关系,脓毒症患者一般具有非常低的血清维生素C水平,人们认为危重病人低维生素C水平与血管加压,肾损伤,多器官功能障碍和死亡率增加相关。通过研究维生素C的作用机制,发现多种可能对脓毒症有作用的机制,包括抗氧化、抗炎、微循环、抗血栓、增加肾上腺敏感性、促进伤口愈合等。然而和预期不同的是,临床上使用维生素C未见具有显著的效果,根据[常雪妮, 李敏, 张正馨,et al.维生素C在脓毒症及脓毒性休克患者治疗中疗效的Meta分析[J]. 中华危重症医学杂志(电子版), 2019, 012(001):37-41.]统计,静脉输注维生素C不能改善脓毒症及脓毒性休克患者的病死率。
5-甲基四氢叶酸是叶酸在人体的活性形式,其并未观察到直接的抗病毒作用,目前叶酸与病毒的直接联系主要在叶酸受体α(FRalpha),其已被描述为介导包括埃博拉等病毒进入细胞的因子。5-甲基四氢叶酸具有直接的抗氧化作用,通过二氢叶酸还原酶的作用促进BH2转化为BH4,众所周知BH4是eNOS必要的辅助因子。已经有人证明了5-甲基四氢叶酸通过促进eNOS,有利于预防和保护心血管疾病,但几乎没有研究报道5-甲基四氢叶酸在先天免疫激活的条件下对iNOS及巨噬细胞分泌NO的影响。
L-精氨酸是NO内源性合成的前体,在一氧化氮合成酶作用下,会反应产生NO和L-瓜氨酸,尽管L-精氨酸只有一小部分通过这种途径在体内代谢,但是急性炎症的状况下,由巨噬细胞的iNOS所产生的NO会大大超过人体的正常剂量。L-精氨酸虽然是非必需氨基酸,可以在在脯氨酸,谷氨酰胺或谷氨酸的代谢途径中内源性合成(通过全身蛋白质降解过程),在肾脏中,瓜氨酸通过精氨酸琥珀酸合酶和精氨酸琥珀酸裂合酶的作用而转化为精氨酸,然而当精氨酸内源性合成不足以满足生物体的代谢需求时,其在不同的病理生理条件下非常重要。
发明内容
本发明发现,5-甲基四氢叶酸在“药理”浓度下,具有与“营养支持”的低浓度不同的生理活性,含有5-甲基四氢叶酸的组合物具有治疗病毒感染的作用,进一步发现其对不同病原体,包括细菌、真菌等均具有治疗效果。本发明还发现,去氢坏血酸以及NMN的活性与5-甲基四氢叶酸类似。
基于以上发现,本发明提供如下技术方案:
一种能在动物体内产生安全量的一氧化氮,即控制或降低体内活性氮比例的药物组合物,该组合物使得体内产生的一氧化氮能够达到预防和治疗疾病所需的剂量。
本发明的药物组合物,包括NO减毒剂,和任选的NO增量剂,所述NO减毒剂选自在用药剂量下清除过氧化亚硝酸或其盐(PON)的抗氧化物质。优选的,所述减毒剂在不低于10μmol/L浓度下不抑制诱导性一氧化氮合酶(iNOS)的表达,例如不抑制LSP诱导下巨噬细胞的iNOS的表达。
本发明的NO减毒剂选自抗氧化物质,该物质不影响iNOS合酶的激活,且对过氧化亚硝酸盐选择性猝灭。示例性的,其选自下列物质中的一种或者几种:5-甲基四氢叶酸或其盐,去氢抗坏血酸,NMN。
本发明的NO增量剂选自酶生NO底物,所述酶生NO底物选自L-精氨酸或其盐、瓜氨酸或其盐或精氨酸生素。
本发明的药物组合物,包括5-甲基四氢叶酸或其盐和精氨酸或其盐。进一步的,可包括植物血凝素。
本发明的药物组合物,所述5-甲基四氢叶酸单剂量不小于15mg,所述精氨酸单剂量不小于50mg。
本发明还提供上述药物组合物的用途,用于制备预防或治疗致病微生物感染导致的疾病的药物方面的用途。优选的,所述致病微生物感染为病毒感染。
根据本发明药物组合物的用途,其能够提高病毒感染宿主的T细胞水平,特别是CD4以及CD8T细胞,降低炎症因子的表达,从而用于抗病毒感染。
根据本发明药物组合物的用途,所述病毒为流感病毒、疱疹病毒、非洲猪瘟病毒、冠状病毒例如COVID-19。
特别的,本发明提供一种用于预防和治疗猪瘟的药物组合物,其包括NO减毒剂和NO增量剂,所述NO减毒剂选自5-甲基四氢叶酸或其盐,去氢抗坏血酸,NMN中的一种或者几种,所述NO增量剂选自精氨酸、瓜氨酸或精氨酸生素中的一种或几种。
根据本发明上述治疗猪瘟的组合物,其包括5-甲基四氢叶酸和精氨酸。进一步的,其可以包括
植物血凝素,三者的质量比为2:8:1。
根据本发明上述治疗猪瘟的组合物,所述猪瘟为非洲猪瘟。
根据本发明上述治疗猪瘟的组合物,所述组合物能够提高病毒感染宿主的T细胞水平,特别是CD4以及CD8T细胞,降低炎症因子的表达,抗病毒感染。
根据本发明上述治疗猪瘟的组合物,所述组合物单剂量的活性成分为至少30mg/公斤,例如50mg/公斤。根据本发明药物组合物的用途,所述组合物用于制备预防和治疗感染导致的脓毒症、全身性炎症反应综合征的药物用途。
根据本发明药物的组合物,其包括包含5-甲基四氢叶酸或其盐和维生素C。优选的,所述5-甲基四氢叶酸钙与维生素C的质量比为2:1至5:1,例如3:1,4:1。
本发明还提供上述药物组合物的用途,所述组合物用于制备治疗由非感染因素引起的全身性炎症反应综合征、脓毒症的用途。
根据本发明药物组合物的用途,所述脓毒症由金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、绿脓杆菌、流感病毒感染所引起的。
根据本发明的药物组合物,可以由活性成分和药学上可接受的辅料制成,例如,所述药物制选自片剂、胶囊剂、冲剂、注射剂、外用膏剂或喷剂。
根据本发明的药物组合物,其是一种免疫佐剂。
本发明中,安全量的一氧化氮是指,一氧化氮中转变为以过氧化亚硝酸为代表的毒性自由基、活性氮的比例可控,能够满足使用一氧化氮预防和治疗疾病的安全需求。这些自由基在体内严重影响物质和能量的代谢,影响甚至破坏细胞和组织的功能,显著增加基因突变的几率,还是很多疾病发生的原因。
本发明的组合物通过控制毒性自由基,并有效地提升一氧化氮的产生量到能够满足预防和治疗疾病的需求。
本发明中,产生安全量一氧化氮的药物组合物,在多种疾病的治疗中具有应用潜力,本发明的组合物能够促进T细胞的增殖与活化,提高宿主在感染过程中的CD4和CD8细胞的水平,阻断CD4和CD8 T细胞的凋亡,显著提高宿主的生存率,并且改善感染过程中的炎症反应。
本发明给感染流感病毒的小鼠使用含有5-甲基四氢叶酸、精氨酸组合物,得到了大比例痊愈的结果,而且病程显著缩短。
叶酸的主要功能为碳的传递者,参与DNA的甲基化,参与嘌呤和胸腺嘧啶的合成,进一步合成DNA和RNA。而病毒以DNA或RNA的结构,在宿主细胞中大量复制,充足的叶酸供给应该有利于病毒的复制与传播,而实验结果让人意外,5-甲基四氢叶酸联合一氧化氮增量剂,反而抑制了病毒。本发明首次提出5-甲基四氢叶酸和精氨酸等组合物在微生物感染,特别是病毒感染的应用。
iNOS是免疫系统中生成NO的关键酶,现有技术已知,该酶氧化会导致二聚体解偶联,使生成NO的反应路径转变为生成自由基,活性氮的反应路径。5-甲基四氢叶酸是内源性的抗氧化剂,能够激活NADPH,从而达到很好的抗氧化效果,具有直接的抗氧化作用。本发明组合物能够使得机体在病原体感染下,产生NO的同时避免产生不利于机体的自由基,包括活性氧(ROS)以及活性氮(RNS)。本发明已经验证了,包括5-甲基四氢叶酸或其盐,去氢抗坏血酸,NMN在内的抗氧化剂能够消除过氧化亚硝酸盐,并不影响iNOS表达的功能。
本发明提供一种在体内产生足量一氧化氮的方法。本发明的组合物通过抑制过氧化亚硝酸盐的生成,且不抑制并诱导提升一氧化氮合酶的活性,并进一步增加酶生一氧化氮底物精氨酸及其前体的方式,使得体内产生足量一氧化氮。
本发明中,足量的概念是指在达到或者超过预防和治疗疾病所需要的一氧化氮的最低剂量。
本发明为提供足量的一氧化氮提供了系统的方案,可以根据需要选择和优化。为提高一氧化氮产量,组合物中还可以使用一氧化氮合酶诱导剂,比如植物血凝素。植物血凝素PHA是一种有丝分裂原,是一种高效安全的一氧化氮合酶诱导剂,提取于豆类植物的技术已经可以规模化生产。本发明的另一目的是提供多种上述安全的一氧化氮组合物的用途。
本发明组合物中的活性成份包括5-甲基四氢叶酸或其盐。所述盐选自但并不限于钙盐,精氨酸盐,氨基葡萄糖盐, 钠盐。
在一种优选方案中,本发明每单剂量组合物中5-甲基四氢叶酸或其盐的用量为15mg以上,优选25mg以上,更优选50-1000毫克(折合5-甲基四氢叶酸盐以5-甲基四氢叶酸计)。
在一种方案中,组合物包含 5-甲基四氢叶酸或其盐或去氢抗坏血酸或NMN,和精氨酸;每单剂量组合物中包含5-甲基四氢叶酸或其盐的用量为15mg以上,优选25mg以上;优选50-1000毫克;更优选50-500毫克(折合5-甲基四氢叶酸盐以5-甲基四氢叶酸计)。示例性的,精氨酸的用量为50-5000毫克,优选100-1000毫克。
在一种方案中,组合物包括5-甲基四氢叶酸或其盐和精氨酸以及植物血凝素PHA。每单位剂量组合物中包含5-甲基四氢叶酸或其盐的用量为15mg以上,优选25mg以上;优选50-1000毫克;更优选50-500毫克(折合5-甲基四氢叶酸盐以5-甲基四氢叶酸计);每单位剂量组合物中精氨酸的用量为50-5000毫克,优选100-1000毫克;每单位剂量组合物中植物血凝素用量为10-500毫克,优选20-100毫克。
所述药物制剂可以选自片剂、胶囊剂、冲剂、注射剂、外用膏剂或气体制剂。
发明详述
NO诱导的HIF-1α的稳定化和磷酸化的p53水平被活性氧减少[Thomas DD,Ridnour LA, Espey MG, et al. Superoxide fluxes limit nitric oxide-inducedsignaling. J Biol Chem. 2006;281(36):25984–25993.],事实上,添加抗氧化剂对亚硝化信号具有保护作用[Edirisinghe I, Arunachalam G, Wong C, et al. Cigarette-smoke-induced oxidative/nitrosative stress impairs VEGF- and fluid-shear-stress-mediated signaling in endothelial cells [retracted in: Rahman I.Antioxid Redox Signal. 2013 Apr 2018(12):1535]. Antioxid Redox Signal. 2010;12(12):1355–1369.],因此NO水平和随后的下游信号传导被活性氧调节,也是调节氧化还原信号的一个因素。
NOS的表达需要同时激活STAT和NF-κB,NF-κB充当炎症的主要开关,与H2O2产生有关,NF-κB受到氧化还原调节。绝大部分的还原剂或抗氧化剂都会某种程度上上具有抗炎的作用,抑制NF-κB通路,能够抑制iNOS的表达,在我们的一个实施例中,我们比较了不同抗氧化剂对LPS诱导下的巨噬细胞表达iNOS的影响,结果表明5-甲基四氢叶酸、去氢抗坏血酸、BH4、谷胱甘肽、烟酰胺单核苷酸在10μmol/L的浓度下对iNOS的表达几乎不影响。考察上述抗氧化剂对过氧化亚硝酸盐的反应性,结果表明5-甲基四氢叶酸、去氢抗坏血酸、NMN均具有较高的消除过氧化亚硝酸盐的能力。已经证明在低氧条件下,淋巴细胞的免疫功能被抑制并且凋亡率增加,由于缺乏活性氧,它阻碍了iNOS的合成,破坏了iNOS和a-actinin4的结合,阻止了iNOS附着在肌动蛋白细胞骨架上。因此,抗氧化剂的存在可能会导致iNOS的下调。而本发明却发现,如下抗氧化剂:5-甲基四氢叶酸、去氢抗坏血酸、NMN具有独特的性质,它们在一定浓度下不会降低iNOS的表达,却具有较好的清除过氧化亚硝酸盐的能力。上述抗氧化剂均具有在抗原激活免疫后,不降低免疫应答能力,特别是不对感染过程中iNOS表达产生负面影响,且还会降低过氧化亚硝酸盐的产生,NO具有抑制细胞凋亡的作用,通过S-亚硝基化作用抑制caspases-8,caspases-9或caspases-3,而过氧化亚硝酸盐则会通过DNA损伤以及p53的上调促进细胞的凋亡。
NO对感染微生物具有直接和间接的作用,NO能够直接破坏病原微生物的酶结构,特别是[Fe-S]簇,在病毒感染中,表达NO能够抑制病毒的酶活性,抑制病毒的复制。NO的直接毒性尤其是细胞外抗病毒活性已经得到充分的证明,但是NO对免疫功能的调节的间接作用则复杂很多。有研究证明流感病毒感染的iNOS缺陷小鼠几乎没有肺炎的组织病理学证据,因此该学者认为宿主的iNOS可能比病毒复制对肺炎的贡献更大[Karupiah G, ChenJH, Mahalingam S, Nathan CF, MacMicking JD. Rapid interferon gamma-dependentclearance of influenza A virus and protection from consolidating pneumonitisin nitric oxide synthase 2-deficient mice. J Exp Med. 1998;188(8):1541–1546.]。在内毒素血症中,早期使用的iNOS抑制剂治疗的临床前模型结果令人失望[HauserB, Bracht H, Matejovic M, et al. Nitric oxide synthase inhibition in sepsis.Lessons learned from large-animal studies[J]. Anesthesia & Analgesia, 2005,101(2): 488-498.]迄今为止已经描述了有益的和有害的效果,人们疑惑NO是感染的积极因素还是消极因素。
人们观察到外源性的NO会抑制T淋巴细胞的增殖,外源性NO(即,NO不是由T细胞产生的本身)抑制增殖或甚至引起T细胞的死亡[Bogdan C . Regulation of lymphocytesby nitric oxide.[J]. Methods Mol Biol, 2011, 677:375-393.]。缺乏重要抗氧化剂机制的小鼠(即GSNOR)由于过度的S-亚硝基化和淋巴细胞凋亡而在外周显示出T和B细胞的明显缺乏。在另一方面,少量的NO支T细胞亚群,尤其是Th1细胞和FoxP3的阴性调节性T细胞群,可有效抑制Th17细胞分化。此外,最近的研究表明,外源NO也调节Th9和Th17细胞。
在本发明的一个实施例中发现,细胞培养液中5-甲基四氢叶酸在15.625μm的浓度下,几乎不影响巨噬细胞NO的分泌,更为有趣的是,在未加LPS刺激时,5-甲基四氢叶酸在低浓度时,发现可促进NO的分泌。
本发明中筛选的NO减毒剂与NO增量剂的联合使用显示出能够显著增加抗原刺激后CD4+ T细胞增殖的活性。现有研究以表明,病毒清除是由抗原特异性CD8+效应T细胞介导的,而记忆CD4+ T细胞在维持CD8+ T和B细胞记忆反应中起到重要作用[Stambas J,Guillonneau C, Kedzierska K, et al. Killer T cells in influenza[J].Pharmacology & therapeutics, 2008, 120(2): 186-196.]。另外,近期还有研究表明,CD4+和CD8+ T细胞均与肺炎的控制有关,并通过产生白介素10来限制过度的组织损伤。因此本发明的含有上述NO减毒剂与NO增量剂的药物组合物能够用于病毒清除和抗炎治疗中。
本发明中精氨酸作为NO的增量物,与5-甲基四氢叶酸联合使用时,产生了意想不到的抗病毒、治疗脓毒症的效果。在一个实施例中,本发明的组合物能够显著的刺激小鼠胸腺和脾脏的T细胞的增殖,施用精氨酸和5-甲基四氢叶酸的组合,相对于仅添加精氨酸,CD4细胞的增殖明显提高,说明组合物能够提高效应CD4+T细胞的增殖能力。正如背景技术中所讲,病毒特异性记忆CD4+T细胞的数量可以预测人类感染流感病毒的严重程度,病毒特异性T细胞数量与疾病的严重程度成反比。因此本发明的组合物具有治疗流感病毒感染的潜力,可降低患病的严重程度。前已经知道,过氧化亚硝酸盐影响细胞的免疫反应,有研究支持过氧化亚硝酸盐阻止了抑制炎症反应和修复的反馈能力,容易使得宿主在感染中免疫失调。使用的组合物既能提高宿主免疫能力而且维持了炎症的负反馈机制,能够使得宿主能够抵御感染,特别是病毒感染。
现有的病毒感冒药,多数用于缓解症状、减轻感冒的痛苦,但是不能可靠且明显的缩短病程。而本发明的上述药物组合物对感冒治疗产生了颠覆性的效果:起效快,针对40多名试用者的回访结果,服用组合物之后一般48小时内感冒症状消失,虽然没有进行双盲对照的临床实验,但是有关的试用组合物的回馈结果也超乎预期。
进一步的,本发明在动物模型中验证了组合物的抗病毒感染效果,结果表明组合物能够保护小鼠的免疫功能,减轻流感病毒感染肺部的病理状态,减轻肺组织损伤。5-甲基四氢叶酸与精氨酸的组合物能够明显降低感染所致的炎性因子的水平,显著降低感染后5天肺部病毒滴度,提示组合物具有一定的抗病毒作用。此外,组合物的使用能够显著提高感染小鼠脾脏及胸腺的CD4+和CD8+T细胞的水平,提示虽然组合物降低炎性因子但是未降低宿主的免疫力。肺组织切片的结果表明组合物能够减少肺组织损伤和炎症状态,在对于感冒病毒的宿主模型中显示了非常好的疗效。
最近的研究表明,NO能够促进T细胞受体(TCR)介导的免疫突触(IS)信号[Garcia-Ortiz A, Martin-Cofreces N B, Ibiza S, et al. eNOS S-nitrosylates β-actin onCys374 and regulates PKC-θ at the immune synapse by impairing actin bindingto profilin-1[J]. PLoS biology, 2017, 15(4): e2000653.],IS对于调节T细胞活化、分泌和细胞间免疫信号通讯非常重要,这也是组合物能够显著提高T细胞数量的可能原因。
在本发明的一个实施例中,将组合物应用在非洲猪瘟病毒感染猪的治疗,获得了非常好的效果,显著提高了感染非洲猪瘟病毒的猪的存活率,进一步证明了组合物抗病毒的潜力。
此外,本发明发现,本发明上述组合物能够显著保护高剂量病毒的攻毒实验中宿主的生存,显示一定的治疗脓毒症的潜力。
在过去的三十年中,已经进行了100多次Ⅱ期和Ⅲ期临床试验,以测试各种新型药物和治疗干预措施,以期改善严重脓毒症和败血性休克患者的预后。所有这些努力最终都未能产出能够减少器官衰竭并改善脓毒症患者生存率的新型药物[Artenstein AW,Higgins TL, Opal SM. Sepsis and scientific revolutions. Crit Care Med. 2013;41(12):2770–2772.]。所有这些研究都使用特定分子或途径的单一药物,由于涉及到非常复杂的免疫代谢途径,以及上千个可能靶点,以此思路筛选药物并不容易。
外源性精氨酸的补充在脓毒症的治疗中是存在争议的,由于之前人们认为NO介导的过氧化在脓毒症的病理发展起重要作用。有人假设,NO产生过程中的药学阻断剂是一种治疗脓毒症的可行策略,因此开发了NOS合酶抑制剂,但是回顾临床结果,有关抑制NOS的疗法总体上无益处。另一方面脓毒症患者精氨酸水平降低,但是增加NO的内源性供体可能导致氧化应激的增强的有害影响。本发明的组合物中5-甲基四氢叶酸与精氨酸的联合使用在临床前动物模型中取得意想不到的非常好的疗效。
本发明发现5-甲基四氢叶酸能够显著降低LPS诱导下的脓毒症小鼠的死亡率,提示5-甲基四氢叶酸对由于严重过敏导致的脓毒症的治疗可能有益。
本发明发现5-甲基四氢叶酸与精氨酸组合物能够显著降低由于感染微生物(例如,金黄色葡萄球菌)所导致的脓毒症小鼠的死亡率。脓毒症是一种高度致死性疾病,其特征在于广泛的细胞凋亡诱导的免疫细胞耗竭和之后的免疫抑制。本发明发现5-甲基四氢叶酸和精氨酸的组合可以显著提供宿主存活率,阻断CD4和CD8 T细胞的凋亡,在多种细菌和病毒导致的脓毒症模型中均证明了组合物具有的疗效。
应该认识到,人体中的某些氧化性信号对感染性疾病是有益的,在保护性氧化信号和活性氧的有害作用之间存在微妙的平衡。本发明的组合物选用的抗氧化剂具有独特的性质,可以缓解病原微生物感染导致症状,且同时提高NO的水平,使得NO介导的病原体杀伤作用胜过NO触发的氧化应激机制。
T细胞确实在交叉保护中起着重要作用,在疫苗领域灭活的病毒疫苗往往针对某些病毒通透诱导特异性抗体来进行保护,而对增强交叉保护性T细胞反应的作用却很小,本发明组合物具有增强免疫反应的作用,在一个实施例中组合物的使用显著提高了接种狂犬疫苗后免疫动物的抗体水平。
本发明利用了人和动物体的免疫系统,这一天然而强大的抗病毒工具。非洲猪瘟这一烈性传染病,现有技术完全无能为力,致死率95%-100%,而使用本发明显示明确的疗效,显示组合物抗病毒感染的能力超乎预期。[Oura, C. A L . In vivo depletion ofCD8+ T lymphocytes abrogates protective immunity to African swine fever virus[J]. Journal of General Virology, 2005, 86(9):2445-2450.]中报道了,减毒病毒分离株OUR/T88/3,使用该病毒作为疫苗后发现,无毒ASFV分离株OUR / T88 / 3的感染可以保护远亲猪免受葡萄牙ASFV强毒分离株OUR / T88 / 1的攻击。但是暴露于OUR / T88 / 3然后耗尽了CD8(+)淋巴细胞的猪不再能完全免受OUR / T88 / 1攻击。这表明CD8+淋巴细胞对ASFV感染的保护性免疫应答中起到了重要作用。
近年来,人们对NO在免疫力的作用认识已发生巨大的进步,除了直接对病原微生物的抑制外,还广泛调节免疫功能,除iNOS外,还必须将eNOS作为免疫条件NO的来源。因此对NO的多种功能和目标靶点的认识的补充使我们认识到针对NOS亚型的抑制或激活难以应用到临床实践,但是,本发明的组合物的临床前动物模型的结果令人鼓舞,显示NO在抗病毒和脓毒症治疗潜力。
本发明首次提出安全和足量一氧化氮应用于抗病毒感染疾病的概念,使用的组合物相互协同体现了很好的效果。在免疫系统中存在复杂的调控机制,多个信号通路或目标靶点存在有益或有害的作用,有关一氧化氮的研究论文也多达数万篇,但是研究的结论却不一致,相互矛盾,难以理清。有研究人员甚至将东方文明的“阴与阳平衡”的概念引入,已表达各种靶点机制的双刃剑的作用[Burke A J, Sullivan F J, Giles F J, et al. Theyin and yang of nitric oxide in cancer progression[J]. Carcinogenesis, 2013,34(3): 503-512.]。本发明从免疫的整体角度发明的组合物,构成十分显著的技术效果:1.可以显著提升宿主的免疫细胞水平,或者阻止免疫细胞的凋亡;2.有效降低炎症因子,降低炎症损伤;3.利用调节免疫功能来抗病毒,能够使宿主较好的抵抗二次感染;4.组合物中各个成分安全性较好。
名词解释:
NO,一氧化氮;
NOS,一氧化氮合酶;
SNO,安全的一氧化氮,指过氧化亚硝酸等毒性自由基含量可控的一氧化氮,能够满足使用一氧化氮治疗和预防疾病时的安全需求
PON,过氧化亚硝酸及其盐;
NO减毒剂: 用以减少过氧化亚硝酸等毒性含氮自由基生成的还原性物质。
NO增量剂: 产生NO的前体物质。分为能够在体内释放NO的化学物质以及产生酶生NO的精氨酸,精氨酸生素等物质。
NO合酶诱导剂: 用以诱导产生NO合酶的物质
叶源酸:6S-5-甲基四氢叶酸钙。
本发明所述的盐,是指药学上可接受的盐。
附图说明
图1实施例7中各组体重变化曲线;
图2实施例7各组体温变化曲线;
图3实施例7各组采食量变化曲线;
图4实施例7各组饮水量变化曲线;
图5实施例7各组生存曲线;
图6实施例8中各种抗氧化剂在LPS诱导下对巨噬细胞表达iNOS的影响;
图7实施例9中各种抗氧化剂对过氧化亚硝酸盐清除作用;
图8实施例10中组合物对刺激CD4 T细胞三天的增殖的影响;
图9 实施例10中定量组合物对刺激CD4 T细胞三天的增殖的结果;
图10实施例12中炎性因子检测结果;
图11实施例12中炎性因子检测结果;
图12实施例12中炎性因子检测结果;
图13实施例13中中脾脏指数及脾脏各免疫细胞总数变化;
图14实施例13中中脾脏指数及脾脏各免疫细胞总数变化;
图15实施例13中中脾脏指数及脾脏各免疫细胞总数变化;
图16实施例13中中胸腺指数及胸腺各免疫细胞总数变化;
图17实施例13中肺组织切片图;
图18实施例13中外周血炎性因子分泌变化;
图19实施例13中各组小鼠病毒滴度;
图20实施例17中脓毒症模型小鼠脾脏淋巴细胞计数图;
图21实施例24中组合物对家猪耳静脉血常规的LYMP/NEUP变化图。
具体实施方式
下文通过对本发明实施例的描述,更加详细地对本发明的上述及其他特性和优势进行解释和说明。应当理解,下列实施例旨在对本发明的技术方案进行示例性的说明,而并非旨在对由权利要求及其等价方案所限定的本发明保护范围进行任何限制。
除非另有说明,本文中的材料和试剂均为市售商品,或可由本领域技术人员根据现有技术制备。
实施例1 胶囊
6s-甲基四氢叶酸钙200mg
维生素c 200mg
填充剂适量
粘合剂适量
崩解剂适量
实施例2 胶囊
6s-甲基四氢叶酸钙100mg
精氨酸 400mg
填充剂适量
粘合剂适量
崩解剂适量
实施例3 片剂
6S-5-甲基四氢叶酸钙 100毫克
植物血凝素 50毫克
精氨酸 400毫克
填充剂适量
粘合剂适量
崩解剂适量
实施例4 片剂
6S-5-甲基四氢叶酸钙 200毫克
维生素C 600毫克
填充剂适量
粘合剂适量
崩解剂适量
实施例5 片剂
6S-5-甲基四氢叶酸钙 400毫克
维生素C钠 100毫克
1,6-二磷酸果糖 2毫克
填充剂适量
粘合剂适量
崩解剂适量
实施例6 冻干粉针
6S-5-甲基四氢叶酸钙 800毫克
精氨酸 3克
溶解,过滤,冻干即可
实施例7 小鼠抗感冒试验
小鼠:Balb/c小鼠,雌性,6周龄,15-17g ,25只。
A,给药组,感染给药,10只;
B,模型组,感染不给药,10只;
C,正常组,不感染不给药,5只。
感染方法:使用150μl 5%水合氯醛腹腔注射麻醉小鼠,PR8流感病毒(1×106pfu/mouse)滴鼻感染。
给药方法:5-甲基四氢叶酸钙蒸馏水配制浓度6mg/ml,每只小鼠200μl,1.2mg/每只,灌胃,本次实验感染32小时后给药。
感染当天开始称体重、体温、饮水量、食量。小鼠体重、食物和水摄取量每日固定时间测定一次;体温测定:感染后3天内每日测定2次,间隔12小时,从感染4天起,每日固定时间测定一次。实验直至感染后第15天,小鼠体重基本恢复。
结果:各组体重变化曲线见图1,体温变化曲线见图2,采食量变化曲线见图3,饮水量变化曲线见图4,生存曲线见图5。从各图可以看出,给药组的状况大为改善。其中附图1-4的纵坐标以第一天数值为1的相对比值。
实施例8 组合物中减毒剂的筛选
一、 实验材料
1、细胞株:巨噬细胞RAW264.7。
2、试剂:LPS(Sigma);iNOS检测试剂盒(Stressgen);MTT(Biotopped)。
二、实验方案
1、细胞培养:
小鼠巨噬细胞RAW264.7在37℃、5%CO2培养箱用含10%FBS的 DMEM高糖培养基培养。
2、加药处理:
调整细胞密度为5×104cell/mL,于96孔板中每孔加入100μL细胞悬液,置于CO2培养箱中培养24h。
基于LPS诱导炎症模型:
LPS诱导:所有孔加入40μL LPS(至终浓度为0.1μg/mL);
维生素C组:每孔维生素C,LPS(至终浓度为10μmol/L维生素C,0.1μg/mL LPS);
维生素E组:每孔维生素E,LPS(至终浓度为10μmol/L维生素E,0.1μg/mL LPS);
谷胱甘肽组:每孔谷胱甘肽,LPS(至终浓度为10μmol/L 谷胱甘肽,0.1μg/mLLPS);
5-甲基四氢叶酸组:每孔5-甲基四氢叶酸钙,LPS,5-甲基四氢叶酸钙至终浓度为10μmol/L,LPS 至终浓度为0.1μg/mL LPS);
去氢抗坏血酸组:每孔去氢抗坏血酸,LPS(去氢抗坏血酸至终浓度为10μmol/L,LPS 0.1μg/mL LPS);
花青素组:每孔花青素,LPS(花青素至终浓度为10μmol/L,LPS 0.1μg/mL);
姜黄素组:每孔姜黄素,LPS(姜黄素至终浓度为10μmol/L,LPS 0.1μg/mL LPS);
白藜芦醇组:每孔白藜芦醇,LPS(白藜芦醇至终浓度为10μmol/L,LPS 0.1μg/mL);
穿心莲内酯组:每孔穿心莲内酯,LPS(穿心莲内酯至终浓度为10μmol/L,LPS 0.1μg/mL);
黄芩苷组:每孔黄芪苷,LPS(黄芪苷至终浓度为10μmol/L,LPS 0.1μg/mL);
NMN组,每孔NMN,LPS(NMN至终浓度为10μmol/L,LPS 0.1μg/mL);
四氢生物蝶呤组,每孔四氢生物蝶呤,LPS(四氢生物蝶呤,至终浓度为10μmol/L ,LPS 0.1μg/mL);
正常组:每孔加入50μL完全培养基。
混匀,于CO2培养箱中继续培养24h。
3、iNOS的检测
使用多克隆抗体抗人iNOS(Stressgen)通过ELISA测定巨噬细胞中的iNOS蛋白水平。使用自动流式细胞分析仪确定巨噬细胞的数量。
4、结果
结果见图6,结果表明5-甲基四氢叶酸、谷胱甘肽、NMN、四氢生物蝶呤在10μmol/L浓度下不影响iNOS的表达。
实施例9 不同抗氧化剂清除过氧化亚硝酸盐的比较
取过氧化亚硝酸盐供体3-morpholino-sydnonimine(SIN-1)分别置于15只试管中,浓度为1μmol/L。分别向含有SIN-1溶液的试管中加入5-甲基四氢叶酸钙至终浓度为1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L ,分别向含有SIN-1溶液的试管中加入去氢抗坏血酸至终浓度为1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L,分别向含有SIN-1溶液的试管中加入谷胱甘肽至终浓度为1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L,分别向含有SIN-1溶液的试管中加入NMN至终浓度为1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L,分别向含有SIN-1溶液的试管中加入四氢生物蝶呤至终浓度为1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L。过氧化亚硝酸盐浓度用分光光度法测定,检测波长为302nm。
结果见图7,结果表明去氢抗坏血酸、5-甲基四氢叶酸、NMN均具有非常好的过氧化亚硝酸盐消除效果。
实施例10 组合物介入下T细胞的增殖分化实验
颈椎脱臼法处死小鼠,无菌分离小鼠脾脏及淋巴结放于Hank’s液中,使用免疫微珠(CD4+细胞提取试剂盒;美国Miltenyi Biotec)从小鼠的脾脏和淋巴结中纯化CD4T细胞。在96多孔板上分别添加4μg/mL的小鼠CD3单抗以及2μg/mL的抗CD28(Biolegend公司),并且添加Dulbecco的改良Eagle培养基(不含L-精氨酸),微量青霉素,甘氨酸,10%的胎牛血清中。
组合物A组:细胞培养液中添加5-甲基四氢叶酸钙至终浓度10μmol/L,精氨酸至终浓度40μmol/L;组合物B组:细胞培养液中添加去氢抗坏血酸至终浓度10μmol/L,精氨酸至终浓度40μmol/L;组合物C组:细胞培养液中添加NMN至终浓度10μmol/L,精氨酸至终浓度40μmol/L;精氨酸组:细胞培养液中添加精氨酸至终浓度40μmol/L;空白组:使用初始细胞培养液(不含L-精氨酸)。
纯化的T细胞使用Cell Violet Trace Proliferation kit(Invitrogen)染色并培养三天,使用流式细胞仪分析测定增殖。
结果如图8,9。结果表明,经过筛选的组合物某种程度均能提高刺激后CD4细胞的增殖,显示出能够提高感染中宿主的细胞免疫的能力。
实施例11感冒患者试用组合物临床预实验
制备400毫克/粒叶源酸(6S-5-甲基四氢叶酸钙)胶囊,给予感冒患者试用,表1中记录用药后各症状的消失时间(小时)。扁桃体炎,咽喉疼痛之外的其他症状都消失的,定义为基本康复;包括扁桃体炎,咽喉疼痛在内的全部消失的定义为完全康复。
表1 感冒患者临床统计(症状消失时间,小时)
感冒患者试食处方GK301(叶源酸300毫克,L-精氨酸100毫克)胶囊,结果在表2中统计。
表2 感冒患者临床分析(症状消失小时数)
对照表1可以看出,加入精氨酸缩短了病程。服用组合物的抗感冒效果优于单独的5-甲基四氢叶酸。但不论是表1还是表2数据均显示,服用5-甲基四氢叶酸后,患者的感冒几乎都在2天内痊愈。
实施例12 5-甲基四氢叶酸对部分炎性因子的影响及NO分泌的影响
一、实验材料
1.细胞株:巨噬细胞RAW264.7。
2.试剂:LPS(Sigma);MTT(Biotopped);叶源酸即为5-甲基四氢叶酸钙(连云港金康和信药业有限公司);NO检测试剂盒(碧云天)
二、实验方案
1.细胞培养:小鼠巨噬细胞RAW264.7在37℃、5%CO2培养箱用含10%FBS的 DMEM高糖培养基培养。采用ELISA法检测上清液炎性因子(TNF-α、IL-1α、IL-6)。
2.加药处理:
1)调整细胞密度为2×105cell/mL,于96孔板中每孔加入100μL细胞悬液,置于CO2培养箱中培养24h。
2)叶源酸组每孔加入50μL叶源酸(至终浓度为15.625,62.5,250μmol/L);
LPS+叶源酸组,每孔加入50μL LPS(至终浓度为0.1μg/mL),培养箱中培养6h后,每孔加入10μL叶源酸(至终浓度为15.625,62.5,250μmol/L);
LPS组,50μL LPS(至终浓度为0.1μg/mL);
正常组每孔加入50μL完全培养基。
3)混匀,于CO2培养箱中培养24h。
在520nm的吸光度值用均数±标准差表示。计算NO分泌率=(OD样品孔-OD空白孔)/(OD正常孔-OD空白孔)×100%,根据标准曲线计算NO分泌量。
三、实验结果
表3 NO检测试剂盒在520nm测定OD值,以均值表示(n=6)
结果表明5-甲基四氢叶酸在15.625μmol/L的浓度下,并不会抑制LPS诱导的巨噬细胞表达NO。
炎症因子结果见说明书附图10,说明书附图11,说明书附图12。
上述结果表明5-甲基四氢叶酸钙对巨噬细胞及LPS诱导下的炎性因子表达未有显著影响。
实施例13 考察组合物不同剂量一次性给药对流感病毒感染小鼠的早期保护作用
1.1 材料与方法
1.1.1 小鼠
Balb/c小鼠,20只(每组5只),雌性,6周龄,15-17g,购自维通利华实验动物公司;
1.1.2 药物配制
使用去离子水溶解药物,现用现配,30分钟内使用。
1.1.3 给药方法
G1组:空白对照组
G2组:模型组
G3组:低剂量给药组(5-甲基四氢叶酸钙:精氨酸=1:4,0.173g/kg)
G4组:高剂量给药组(5-甲基四氢叶酸钙:精氨酸=1:4,0.346g/kg)
低剂量组、高剂量组灌胃给药,模型组:只造模不给药,给与等体积去离子水。空白对照组:给与等体积的去离子水。一次性给药。
1.1.4 感染方法
使用150μl 5%水合氯醛腹腔注射麻醉小鼠,PR8流感病毒(1×106pfu/mouse)滴鼻感染。
1.1.5 小鼠处理方法
感染当天开始称体重,小鼠体重每天固定时间测定一次。感染后3天,眼眶取静脉血100ul,制备血清、冻存。感染后5天处死小鼠,取肺、胸腺、脾脏及外周血。
血:制备血清,一部分检测细胞因子(外检),其余冻存。
肺脏:肺组织分为2份,一份(右侧肺叶)测定病毒滴度;一份(左侧肺叶的上尖端)固定,做石蜡包埋、切片并进行HE染色。
脾、胸腺:称重、拍照、细胞计数及免疫细胞染色。
1.1.6 观察指标
体重变化,每天称量体重。留取样本:第5天血清样品用于检测炎性因子(使用Biolegend的LEGENDplex Mouse Inflammation Panel检测,外检)。肺脏:测量病毒滴度;做肺组织病理切片;检测肺组织中炎性因子的变化。胸腺:称重、拍照、胸腺总细胞计数、淋巴细胞染色(CD4+、CD8+T细胞)。脾脏:称重、拍照、脾脏总细胞计数、脾淋巴细胞染色分析(表面染色, B细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞 、NK细胞、NKT细胞、单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、中性粒细胞)。
1.2 实验结果
1.2.1 脾脏指数及脾脏各免疫细胞总数变化
见说明书附图13、14、15。
1.2.3胸腺指数及各免疫细胞总数变化
见说明书附图16。
1.2.2肺部病理变化
见说明书附图17。
1.2.6外周血炎性因子分泌变化
见说明书附图18。
1.2.7肺部病毒滴度(5dpi)的变化
见说明书附图19。
结果表明,在感染流感病毒后,除正常对照组外,其他各组小鼠脾脏淋巴细胞都减少、胸腺都缩小,高剂量组胸腺变化较小。脾脏和胸腺均属于免疫器官,与小鼠免疫功能有关,胸腺缩小是导致免疫功能低下的原因之一,提示组合物可能有助于保护免疫器官,对抵抗病毒感染导致得免疫低下有一定的保护作用。肺部病理切片经HE染色后,模型组及治疗各组均呈现程度相似的淋巴细胞浸润及肺部组织结构的改变,高剂量治疗组较模型组的肺组织损伤程度略轻。提示组合物有助于减轻流感病毒感染早期肺部的病理状态,减轻肺组织损伤。
感染流感病毒后,感染后5天模型组外周血的多种细胞因子显著升高,给药组可明显降低感染所致的炎性因子的分泌。说明药物干预能够有效减低炎性因子水平,可能有助于减弱炎性因子风暴,防治炎性因子风暴所致的肺损伤。感染后5天的肺部病毒滴度,治疗组与模型组相比均呈现不同程度的下降趋势。特别是高剂量治疗组,与模型组相比病毒滴度的下降已经接近统计学的显著性差异的临界值。提示组合物降低病毒滴度能够抑制病毒在体内的复制,有一定的抗病毒作用。
实施例14 组合物对疱疹病毒I型脑炎小鼠的治疗
昆明小鼠60只,雄性,体重14~18g,HSV-1攻击Hela细胞,HSV-1在Hela细胞中培养48小时,收集病毒测定该病毒滴度,选择质量分数为100TCID5010-5病毒接种小鼠。小鼠分为对照组、模型组、生理盐水治疗组、阿昔洛伟治疗组(10mg/kg)、组合物组(5-甲基四氢叶酸14mg/kg、精氨酸50mg/kg、植物血凝素7m g/kg),对照组注射0.03ml无菌生理盐水,模型组和各治疗组注射HSV-1病毒液0.03ml后,灌胃给药,连用4天,观察各组死亡情况及其他变化。7天后,眼球取血0.5ml,35℃温箱保存2h,1000r/min离心5min,检测NO与1L-1β结果如下:
表4 不同组死亡数及死亡率
组别 | n | 48h | D4 | D7 | 死亡率 |
对照组 | 15 | 0 | 0 | 0 | 0 |
模型组 | 15 | 2 | 5 | 8 | 100% |
阿昔洛伟组 | 15 | 0 | 4 | 5 | 60% |
组合物组 | 15 | 2 | 4 | 1 | 33% |
表5对照组、模型组、阿昔洛伟和一氧化氮组合物组小鼠血清NO、1L-1β水平(±s)
组别 | n | NO(μmol/L) | 1L-1β(mg/L) |
对照组 | 15 | 43.31±9.16 | 0.153±0.02 |
模型组 | 0 | - | - |
阿昔洛伟组 | 6 | 79.21±6.23 | 0.264±0.01 |
组合物组 | 10 | 94.11±9.31 | 0.172±0.03 |
本实验表明组合物能够显著降低疱疹病毒感染下的小鼠死亡率,提高感染过程中小鼠NO的释放和降低炎症因子的水平。
实施例15 5-甲基四氢叶酸组合物抗脓毒症配方筛选
C57小鼠,雄性,6~8周龄,体重18~22g,观察动物的一般生理指标、体重和进食情况。适应性喂养一周。标准颗粒饲料饲养,自由饮水。自然昼夜光线照明,室温18~26℃,相对湿度40%~70%。LPS,购买于 sigma 公司,货号:L2880。
将49只雄性C57小鼠分为7组,6组给药组,1组模型组,每组7只,腹腔注射LPS13mg/kg(经预实验确定的剂量,由于20mgLPS剂量下无法观察120小时的情况,为了延长模型组存活时间,经预实验确认剂量为13mg/kg)。
A组,5-甲基四氢叶酸钙:维生素C=3:1(折合人体用量为5-甲基四氢叶酸钙300mg,维生素C 100mg);
B组,5-甲基四氢叶酸钙:维生素C=1:3(折合人体用量为5-甲基四氢叶酸钙100mg,维生素C 300mg);
C组,5-甲基四氢叶酸钙:维生素C=1:12(折合人体用量为5-甲基四氢叶酸钙50mg,维生素C 600mg);
D组,5-甲基四氢叶酸钙:维生素C=12:1(折合人体用量为5-甲基四氢叶酸钙600mg,维生素C 50mg);
E组,5-甲基四氢叶酸钙:维生素C=4:1(折合人体用量为5-甲基四氢叶酸钙1200mg,维生素C 300mg)
F组,5-甲基四氢叶酸钙:维生素C=3:1(折合人体用量为5-甲基四氢叶酸钙1200mg,维生素C 400mg
H组,模型组。
所有给药组均分3次:分别于造模后9小时给药一次(第一天晚上9点),次日早晨再给药一次,第三日早晨再给药一次,共3次,给药体积一致。结果如下。
表6腹腔注射LPS后各时间点动物表现及死亡情况
C组、D组在给药过程中,部分小鼠出现浑身发抖,明显精神萎靡等症状,E、F组状态最好,A、B组次之,144h后各组没有死亡动物。
结果表明不同剂量,不同配比的5-甲基四氢叶酸与维生素C组合物可不同程度抑制LPS诱导的小鼠死亡率,提高小鼠的存活率,口服灌胃给药即可达到良好的降低脓毒症模型小鼠死亡率的作用,其最佳比例为3:1。效果随剂量的加大明显改善,在折合人体用量1200mg的5-甲基四氢叶酸剂量下,与400mg维生素C作用能够对LPS诱导的脓毒症模型小鼠100%存活,具有极大的临床价值。
实施例16 5-甲基四氢叶酸组合物对金黄色葡萄球菌脓毒症模型小鼠的保护尝试
SPF级昆明种小鼠,体重20克左右,金黄色葡萄球菌取单个菌落接种于培养液中,37℃振荡培养过夜,收集菌液4000rpm离心3min,收集沉淀,用无菌生理盐水洗涤2次。菌液约(5×109CFU/ml,预实验表明腹腔注射菌液2ml,7天死亡率在90%以上)。
小鼠随机分为5组,雌雄各半,分组如下:
A组,高剂量组,5-甲基四氢叶酸钙:维生素C=3:1(折合人体用量为1200mg/日即192mg/日);
B组,中剂量组,5-甲基四氢叶酸钙:维生素C=3:1(折合人体用量为600mg/日即96mg/kg/日);
C组,低剂量组,5-甲基四氢叶酸钙:维生素C=3:1(折合人体用量为300mg/日即48mg/kg/日);
D组,联合治疗,5-甲基四氢叶酸钙:维生素C=3:1(折合人体用量为600mg/日即96mg/kg/日)+苯唑西林30mg/kg/d
模型组。
腹腔注射菌液后4h,开始给药,按上述剂量,分三次给药(0、2、4天),隔一天施用一次。
表7 金黄色葡萄球菌脓毒症模型的治疗
实验结果令人惊奇,在LPS模型组小鼠上切实具有保护性的组合物,在葡萄球菌模型小鼠上不能减缓疾病,二者没有显著差异。
实施例17 组合物C配方治疗脓毒症及抑菌试验
5-甲基四氢叶酸钙、精氨酸、植物血凝素,按:2:8:1比例混合,得到配方C的组合物。
健康ICR小鼠120只,体重18~24g,雌雄各半,取金黄色葡萄球菌,肺炎链球菌作为供试菌种,按体重随机分为正常组、模型组、组合物低剂量组(40mg/kg)、组合物中剂量组(80mg/kg)、组合物高剂量组(160mg/kg)、阿莫西林组(120mg/kg)。以上各组均按20ml/kg腹腔给药,每天1次,除正常组外,各组小鼠均以0.5ml/只腹腔注射金黄色葡萄球菌液(5×109CFU/ml)。(肺炎链球菌感染方式及分组情况与金黄色葡萄球菌相同)观察各组小鼠注入菌液后4天内死亡情况,比较组间差异,计算存活率。实验结果如下。
表8 受试组合物对感染小鼠具有保护作用(±s,n=10)/>
结果表明,对于有明确感染的模型动物,组合物应该加入L-精氨酸。
组合物能够显著提高宿主的存活率,为了进一步验证组合物对淋巴细胞的作用,开展了独立的实验,取ICR小鼠,分别注射0.5ml金黄色葡萄球菌菌液(5×109CFU/ml),其中取10只模型小鼠同时腹腔注射5-甲基四氢叶酸、精氨酸的组合物溶液20mg/kg,造模24小时后,处死小鼠,收集脾脏。脾脏总细胞计数、脾淋巴细胞染色分析(表面染色, B细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞 、NK细胞。
结果见图20,结果表明组合物可以防止败血症中CD4和CD8T细胞的凋亡,败血症小鼠在造模24小时后,败血症诱导所有类型的免疫效应细胞的凋亡,组合物阻止了CD4T,CD8T细胞以及B细胞的凋亡,但没有阻止NK细胞的减少(n=11)。这是迄今为止尚未报道组合物的作用,应强烈考虑组合物在脓毒症的治疗前景。
实施例18 组合物体内对革兰氏阴性菌的抑制作用
5-甲基四氢叶酸钙、精氨酸、植物血凝素,按:2:8:1比例混合,经过总混后,得到配方C的组合物。
取50只BAL B/C雄鼠,体重18~22g,分为6组,每组8只,其中实验组为2组,其余为各种对照组,分别为组合物低剂量组(40mg/kg)、组合物高剂量组(80mg/kg)、正常组、模型组、青霉素组(450mg/kg)、美罗培南组(75mg/kg)。绿脓肝菌的菌液在LB固体培养基上画线培养后,挑取典型菌落接种于普通LB液体培养基中,经过37℃过夜振荡培养约12h后4000r/min离心3min,弃去上清液,生理盐水重悬菌体后待用。 将致死剂量的绿脓杆菌菌液按500μL/只的剂量腹腔注射各实验组和三个对照组中BAL B/C雄鼠。实验组的BAL B/C雄鼠感染菌体30min后,组合物中剂量组、组合物高剂量组灌胃给药,青霉素组和美罗培南组同样灌胃给药,正常组灌胃纯净水。给药24h后,对各实验组和对照组的BAL B/C雄鼠进行二次给药,给药类型和剂量与第一次给药相同。BAL B/C雄鼠给药后每24h观察一次,记录存活情况,第15天处死所有动物。
结果表明,本发明的配方C组合物在动物体内能够起到对革兰氏阴性菌的抑制作用,且毒性小。本发明所述组合物可以使受到致死剂量绿脓杆菌感染的小鼠在14天保持100%的存活。美罗培南组小鼠在14天后存活率100%,而青霉素组全部死亡,模型组也全部死亡。
实施例19 组合物治疗和预防给药对H1N1(FM1)流感病毒感染小鼠的死亡保护作用
1.1 受试样品
组合物颗粒(5-甲基四氢叶酸钙:精氨酸=1:4),连云港金康和信药业有限公司
1.2 试验动物
ICR小鼠,SPF级,体重13~15g,雌雄各半。由北京维通利华试验动物有限责任公司提供,许可证号:SCXK(京)2016-0006,动物合格证:1100111911082385。
1.3接种毒株
购买FM1毒株(浓度为100. TICD50)。由本实验室传代,-80℃冰箱保存。
2 试验方法及结果
2.1 剂量设计
试验中受试物均采用1000倍FM1毒株稀释液进行小鼠滴鼻感染,组合物分高、中、低三个剂量组。另外,设置预防给药组,采用低剂量一次性给药,设置维生素组与中剂量组进行比较。
2.2菌液准备
取FM1毒株0.2ml,冻融后用生理盐水进行梯度稀释获得试验所需浓度(1000倍量)。
3.3 动物感染量确定
将不同浓度的FM1病毒液分别滴鼻感染小鼠,每个浓度组10只,每只45μl,观察感染后12天内动物的死亡情况,选用引起小鼠80±5%死亡的病毒液浓度作为正式试验的感染浓度。结果见表9。
表9 流感病毒FM1致小鼠死亡感染毒液浓度的确定
浓度 | 动物数 | 死亡数 | 死亡率 |
(只) | (只) | (%) | |
250倍稀释液 | 10 | 10 | 100 |
500倍稀释液 | 10 | 9 | 90 |
1000倍稀释液 | 10 | 8 | 80 |
根据以上结果:正式试验用浓度为1000倍FM1稀释液,45μl /只,滴鼻感染。
4.1动物感染及分组
取ICR小鼠130只,动物按体重等级随机分为7组,分别为正常对照组、模型对照组、组合物高、中、低剂量组、组合物预防组、组合物后期治疗组。取10只做为正常对照组外,其余各组20只动物按45ul/只滴鼻感染H1N1流感病毒。感染后各给药组灌胃给药,0.1ml/10g。
4.2治疗给药及预防给药剂量设计
正常对照组:给与等量的生理盐水
模型对照组:给与等量的生理盐水
高剂量组:组合物(5-甲基四氢叶酸钙:精氨酸=1:4)0.346g/kg体重,给药时间分别为感染后12h、24h各给药一次,第二次给药是第一次给药剂量的一半。
中剂量组:组合物(5-甲基四氢叶酸钙:精氨酸=1:4)0.173g/kg体重,给药时间分别为感染后12h、24h各给药一次,第二次给药是第一次给药剂量的一半。
低剂量组:组合物(5-甲基四氢叶酸钙:精氨酸=1:4)0.087g/kg体重,给药时间分别为感染后12h、24h各给药一次,第二次给药是第一次给药剂量的一半。
预防组:预防作用,即造模前12h一次性给予低剂量组用量,即组合物(5-甲基四氢叶酸钙:精氨酸=1:4)0.087g/kg体重。
后期治疗组:组合物(5-甲基四氢叶酸:精氨酸=1:4)0.173g/kg体重,给药时间分别为感染后12h、24h各给药一次,第二次给药是第一次给药剂量的一半。组合物(5-甲基四氢叶酸:精氨酸:维生素C=3:12:1)0.173g/kg体重,给药两次时间分别为感染后第3天、第6天。
观察感染后14天内动物的死亡情况,计算死亡率、死亡保护率(对照组死亡率-实验组死亡率)/对照组死亡率。肺指数=肺湿重(g)/体重(g)。结果采用组间比较X2检验和t检验进行统计学处理。结果见下表。
表10对初次感染FM1流感病毒致小鼠死亡的保护作用
表11对FM1流感病毒致小鼠肺部炎症的影响
组别 | 动物(只) | 肺指数 |
正常对照组 | 10 | 0.54 |
模型对照组 | 3 | 1.20 |
高剂量组 | 17 | 0.86 |
中剂量组 | 14 | 0.95 |
低剂量组 | 11 | 1.10 |
预防组 | 8 | 1.14 |
后治疗组 | 18 | 0.85 |
5. 组合物对治疗后存活小鼠重复感染的死亡保护作用
在上述实验中,于给药后第15天,对于经过上述流感病毒感染或药物干预后存活的小鼠,将继续复感实验,采用同种流感病毒再次感染存活动物1次,观察再次感染7天内死亡情况,比较不同处理组对流感病毒再次感染的小鼠的死亡率和死亡保护率的影响。复感实验各组不进行药物干预。
表12组合物对复感FM1流感病毒的小鼠死亡保护作用
组别 | 复感动物数(只) | 复感死亡数(只) | 复感死亡率(%) | 复感保护率(%) |
正常对照组 | 10 | 0 | 0 | - |
模型对照组 | 6 | 3 | 50 | - |
高剂量组 | 17 | 0 | 0 | 100 |
中剂量组 | 14 | 0 | 0 | 100 |
低剂量组 | 12 | 1 | 8.33 | 83.34 |
预防组 | 9 | 1 | 11.11 | 77.78 |
后治疗组 | 18 | 0 | 0 | 100 |
结果表明组合物高剂量组,在初次感染和重复感染后对动物死亡均有保护作用。预防给药组也有一定的保护作用。提示组合物除了降低流感病毒导致的小鼠死亡率,对动物有较好的治疗和死亡保护作用外,其预防给药也显示出一定的保护作用,能够延长小鼠存活时间。
实施例20 配方A组合物对内毒素引起的发热的抑制作用
配方A组合物的配制:5-甲基四氢叶酸钙与维生素C按1:1质量比混合,经三维混合总混后,制得配方A的组合物。
内毒素配制:根据以往报道,本实验经文献报道,预实验后将内毒素致热量确定为250ng/ml/kg,实验前用生理盐水配制。
家兔的选择:新西兰兔35只,体重2.0-3.0Kg,每日测肛温1次,连续2日,使兔适应此测温操作。选择体温范围在37.5-38.5℃,且体温波动在0.5℃以内者,用于实验。
每兔均从耳缘静脉注射内毒素,于注射后1小时,测肛温,根据体温变化均衡分组,分别为模型组、阳性药组、本发明药物组合物A配方大(40mg/kg)、中(20mg/kg)、小(10mg/kg)剂量组。各个给药组灌胃给药一次,2ml/kg,模型组在同等条件下给予蒸馏水。分别测定给药后0.5h、1h、1.5h、2h肛温。实验结果见表13。
表13 本发明配方A组合物对内毒素致热家兔体温变化的影响(n=6)
结果显示,注射内毒素后,各组家兔体温均明显升高,用药后,各组家兔体温均有所下降,显示组合物具有一定的解热作用。
实施例21 C配方体内抗肺炎支原体试验
肺炎支原体国际标准株(ATCCFH15531),购自美国菌种保藏中心。
C配方组合物,实验室自制,5-甲基四氢叶酸钙、精氨酸、植物血凝素,按:2:8:1比例混合,经过总混后,得到配方C的组合物。
BALB/C小鼠50只,雌雄各半,体重16-20g,购自广东省医学实验动物中心。
阳性药组,阿奇霉素分散片,哈药集团制药六厂,批号160303,规格,0.25g/片。
BALB/C小鼠适应性饲养一周后,分层随机分为5组,雌雄各半,分别为正常对照组、模型对照组、阳性药对照组(40mg/kg)、C组合物高剂量组(80mg/kg)、C(40mg/kg)组合物低剂量组。除正常对照组外,其余各组小鼠经乙醚麻醉后,滴鼻感染浓度为106CCU/ml的肺炎支原体(MP)菌液50μL,连续感染3天。之后开始灌胃给药,每日一次,连续10天。最后一次给药4h后,小鼠眼球取血处死,取肺脏、脾脏、胸腺称重后进行病理学观察,另取一小块肺组织,研磨后使用PCR定量检测MP的含量。结果如下。
表14 对小鼠脾指数和胸腺指数的影响
组别 | 给药剂量(mg/Kg) | 脾指数(mg/g) | 胸腺指数(mg/g) |
正常对照组 | - | 4.445±0.876* | 3.212±1.342 |
模型对照组 | - | 6.163±2.047 | 3.253±1.164 |
阳性药对照组 | 40 | 4.515±0.982* | 3.818±1.232 |
C组合物高剂量组 | 80 | 4.297±0.844* | 3.273±1.362 |
C组合物低剂量组 | 40 | 4.684±0.931* | 3.311±1.171 |
注:与模型对照组比较,*p<0.05
与模型组比较,空白对照组小鼠脾脏指数具有显著性差异,各给药组小鼠脾指数具有显著差异,提示给药后,机体内MP被杀灭。对免疫器官刺激减轻,降低脾指数。
小鼠肺脏组织病理学检查,解剖时可见于正常组相比模型组肺部组织病变明显,肺部外观充血、水肿,并且在肺叶分布有不等的坏死灶,病理学检查可见病变主要在肺内,主要为间质性肺炎和细支气管肺炎,支气管有明显的淋巴细胞浸润,空白组肺组织基本正常;阿奇霉素对照组可见轻度的间质性肺炎;C组合物组炎症明显减轻,细支气管周围可见少许炎性细胞浸润,间质性肺炎的程度随着剂量的增加而逐渐减轻。结果表明,C组合物具有控制小鼠肺炎支原体感染的作用,使肺组织病变情况减轻。
实施例22一氧化氮组合物作为免疫佐剂对狂犬病毒疫苗效果的影响
成年昆明小鼠30只,体重20~28g,雌雄各半够自新疆医科大学实验动物中心,狂犬病rSRV9减毒口服冻干活疫苗(北京中联康生物科技有限公司),一氧化氮组合物B配方制备:5-甲基四氢叶酸钙与精氨酸按质量比1:4混合,值得B配方组合物。将30只小鼠雌雄各半分成3组,每组10只。分别为空白对照组,病毒口服免疫组,B配方+病毒口服免疫组。 分别于试验第1天,7天,14天口服对应的疫苗,免疫后0,14,21,35,42,70天眼眶采血300μL/只,静置1h后,5000r/min离心5min,吸取血清;同步采集小鼠粪便0.05g左右,放入PBS(pH值约7.4)500μL,粉碎形成浑浊液,离心吸取上清,于-20℃冰箱保存,血清IgG抗体采用ELISA检测试剂盒检测,粪便IgA抗体采用小鼠血清狂犬病特异性IgA抗体ELISA检测试剂盒检测。结果如下表。
表15 各组小鼠初免后不同时间检测血清抗狂犬病特异性IgG水平(U/ml)
分组 | 14d | 21d | 35d | 42d | 70d |
空白对照组 | 73.00±53.26 | 73.42±55.73 | 71.13±52.73 | 79.73±51.72 | 75.32±54.61 |
B组合物+口服疫苗组 | 198.15±63.82 | 267.35±61.63 | 896.14±83.85 | 1945.76±94.44 | 2693.79±75.23 |
口服疫苗组 | 105.93±55.84 | 200.63±61.24 | 492.53±62.12 | 1013.83±59.43 | 1893.25±74.91 |
结果表明,组合物B能够提高血清中IgG的抗体水平,口服疫苗与组合物C联用后,第14天既具有相当程度的抗体,免疫21天后,不同组之间抗体差异明显。
表16各组小鼠初免后不同时间检测粪便SIgA水平(U/ml)
分组 | 14d | 21d | 35d | 42d | 70d |
空白对照组 | 1.63±0.01 | 0.74±0.08 | 0.22±0.08 | 0.32±0.08 | 0.92±0.09 |
B组合物+口服疫苗组 | 24.22±0.33 | 35.22±0.27 | 42.43±0.35 | 51.03+1.28 | 62.01+2.14 |
口服疫苗组 | 20.35±0.24 | 31.25±0.16 | 35.35±0.4.4 | 43.21±0.56 | 47.53±0.41 |
以上结果表明,配方B组合物能够,提高疫苗的免疫活性,在配方B组合物作为免疫佐剂的协同作用下,rSRV9病毒口服减毒疫苗能够明显提高小鼠体内的抗体表达,具有降低免疫接种次数,提高免疫效果的作用。
实施例23 配方C组合物应用在非洲猪瘟的治疗
江苏省动物疫病防控中心送检样品经中国动物卫生与流行病学研究中心确诊了一例非洲猪瘟,阳性样品来源于江苏省连云港赣榆区某养殖户,该户存栏生猪300头、发病130头、死亡120多头。对死亡病猪进行解剖,病理学检查发现:肺出血,间质性肺炎等症状,对脾脏解剖发现,脾脏严重肿大,严重的脾脏肿大7倍;胃部解剖发现胃浆膜面弥漫性出血;肾脏肿胀明显,符合非洲猪瘟的症状。
将取该户3头发病猪、及10头健康猪血液, 3000r/min离心,取血清加有陶珠的Roche中,加入PBS缓冲液,使用病毒DNA试剂盒提取DNA,检测确定为ASFV非洲猪瘟基因型,为2017年俄罗斯远东地区和东欧地区播放的病毒属。
使用配方C组合物介入非洲猪瘟的治疗。
配方C组合物注射剂的制备:5-甲基四氢叶酸钙与L-精氨酸与植物血凝素按按2:8:1比例混合,经过总混后,得到配方C的组合物。配方C组合物经过灭菌处理后,经生理盐水溶解,过微滤膜过滤,活性炭吸附热源,之后制备成注射剂。
对18头发病初期的猪进行隔离,相关饲料和废水、粪便进行无害化处理。患病猪体温平均在40℃,部分病猪出现皮肤充血、紫绀,并且在耳部、腹下出现多处出血点或红点,全部病猪进食不正常,食欲不振。对病猪进行血液检测发现白细胞水平较正常猪下降。
根据以上情况,对18头病猪进行配方C组合物介入治疗,每头猪每天注射含有配方C的注射液,剂量为50mg/公斤,持续2天,期间检测各猪的体温。
结果如下:
表17 18头病猪7天存活率统计汇总
对象 | 剂量 | 死亡例 | 存活例 | 动物存活率(%) |
非洲猪瘟患病猪 | 50mg/公斤 | 1 | 17 | 94.4 |
结果表明:对非洲猪瘟患病猪具有超乎预期的效果,提示配方C组合物具有非常好的抗病毒效果。结果表明7天内仅有1头猪死亡,之后由于政策要求,所有感染猪进行处死,该养殖户其他染病猪均在发病后3至4天死亡。
非洲猪瘟死亡病例解剖检测
对病死猪进行解剖,发现病死猪脾脏严重肿大,而且脾脏充血,质地变脆,易碎,肺部出现出血的现象,肺部出血较大规模出血,肺组织观察定性为间质性肺炎;胃部也同样出血,胃浆膜面弥漫性出血;肾脏肿胀明显。
取血液,静置1h后,5000r/min离心5min,吸取血清。检测IgG抗体水平。血液加入Krebs-HEPES缓冲液,维持在37℃,静置30分钟,加入L-NAME(100μM),使用电化学方法检测超氧化物,亚硝酸盐及NO的含量。
对治愈猪进行处死解剖进行病理学观察,发现治愈猪除了脾脏略微大之外,肺部局部有出血现象。取血液,静置1h后,5000r/min离心5min,吸取血清。检测IgG抗体水平。血液加入Krebs-HEPES缓冲液,维持在37℃,静置30分钟,加入L-NAME(100μM),使用光化学方法检测亚硝酸盐及NO的含量。
结果如下:
表18 病死组及治愈猪的生化指标
分组 | IgG(U/ml) | 亚硝酸盐(RLU/ml) | NO(RLU/ml) |
病死组 | 1173.00 | 8.5 | 61.1 |
治愈猪 | 2198.15 | 1.3 | 54.7 |
结果显示,治愈猪体内存在大量的抗体,提升组合物C能够提高猪的免疫系统水平,起到抗病毒的效果。
并且还发现了病死猪的NO水平也并不低,但是其中的活性氮水平大大提高,这提示我们由病毒引起的急性症状及死亡与活性氮的水平有关,高强度的免疫系统反而加剧了个体死亡,这个在病毒的治疗过程中是常见的。对于某些病毒,免疫基因敲除小鼠的存活时间反而大大超过正常小鼠。因此我们推测非洲猪瘟的死亡与免疫系统过度反应有关,通过比较发现病死猪血液中RNS/NO的比值是治愈猪血液RNS/NO比值的3倍之多。
提示,本发明组合物能够通过降低RNS,而减少恶性病毒由于免疫过度表达而导致的死亡,并且维持免疫系统正常运作,达到清除病毒的目的。本发明组合物的实施效果大大超乎预期。
实施例24 组合物对家猪免疫细胞的影响
取3只普通家猪,猪龄约3个月,体重25kg左右,分别给予含有5-甲基四氢叶酸的组合物,组合物的制备过程如下,5-甲基四氢叶酸钙与L-精氨酸与植物血凝素按1:4:0.1比例混合,得到药物组合物。服用组合物前取耳血,测血常规。之后每日按猪体重每公斤30mg口服组合物,分别在第一周,第二周取耳血,测血常规。血常规检测主要指标LYMP(淋巴细胞)、NEUP(中性粒细胞)。
血常规检测指标如下:
/>
免疫指数LYMP/NEUP较高的病人感染病毒症状会比较轻。在[Zhang B, Zhou X,Qiu Y, et al. Clinical characteristics of 82 death cases with COVID-19[J].MedRxiv, 2020.]文章中对新冠肺炎患者的临床分析,死亡的患者基本都是淋巴细胞/中性粒细胞的比值较低。在图21中,表明了组合物具有提高LYMP/NEUP比值,能够限制感染病毒的症状的严重程度。一定程度说明组合物对病毒具有预防作用。
以上,对本发明的实施方式进行了说明。但是,本发明不限定于上述实施方式。凡在本发明的精神和原则之内,任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (1)
1.5-甲基四氢叶酸或其盐、L-精氨酸和植物血凝素的组合物在制备预防或治疗非洲猪瘟的药物组合物中的用途,以5-甲基四氢叶酸计,5-甲基四氢叶酸或其盐:精氨酸:植物血凝素的质量比为2:8:1。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201910719544 | 2019-08-06 | ||
CN2019107195446 | 2019-08-06 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN112007163A CN112007163A (zh) | 2020-12-01 |
CN112007163B true CN112007163B (zh) | 2023-07-28 |
Family
ID=73500191
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202080055716.5A Pending CN114340609A (zh) | 2019-08-06 | 2020-08-06 | 产生安全量的一氧化氮的药物组合物及其用途 |
CN202010783197.6A Active CN112007163B (zh) | 2019-08-06 | 2020-08-06 | 用于治疗非洲猪瘟的药物组合物及其用途 |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202080055716.5A Pending CN114340609A (zh) | 2019-08-06 | 2020-08-06 | 产生安全量的一氧化氮的药物组合物及其用途 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20220280508A1 (zh) |
EP (2) | EP4011371A4 (zh) |
JP (2) | JP2022545341A (zh) |
CN (2) | CN114340609A (zh) |
AU (1) | AU2020324248A1 (zh) |
BR (2) | BR112022002123A2 (zh) |
WO (2) | WO2021023264A1 (zh) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP4138795A1 (en) * | 2020-04-23 | 2023-03-01 | Thirty Respiratory Limited | Nitric oxide or nitric oxide releasing compositions for use in treating sars-cov and sars-cov-2 |
CN113018306A (zh) * | 2021-03-05 | 2021-06-25 | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 | 烟酰胺单核苷酸在制备抑制SARS-CoV-2病毒易感性药物中的应用 |
CN113197902A (zh) * | 2021-04-16 | 2021-08-03 | 连云港金康和信药业有限公司 | 6s-5-甲基四氢叶酸及其药学上可接受的盐用于增强免疫力的应用 |
CN114469913B (zh) * | 2022-02-17 | 2024-03-22 | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) | Tilorone用于预防/治疗非洲猪瘟病毒感染的应用 |
Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1106296A (zh) * | 1993-09-08 | 1995-08-09 | 山道士营养有限公司 | 营养补剂 |
US6043268A (en) * | 1994-06-29 | 2000-03-28 | Hiroshi Maeda | Agent for treatment of viral infections |
EP1671630A2 (en) * | 1999-02-05 | 2006-06-21 | Angiogenix, Inc. | L-Arginine based formulations for treating diseases and methods of using the same |
CN103053863A (zh) * | 2013-02-06 | 2013-04-24 | 韶关金苹果饲料有限公司 | 一种具有提高免疫力和除臭效果的猪用饲料添加剂 |
CN104232564A (zh) * | 2014-05-12 | 2014-12-24 | 杭州国牧生物科技有限公司 | 一种st细胞制备猪瘟疫苗的培养基及其使用方法 |
CN106135895A (zh) * | 2015-04-21 | 2016-11-23 | 淄博维克勋医药技术有限公司 | 一种营养补充剂 |
CN108865995A (zh) * | 2018-08-16 | 2018-11-23 | 深圳市拓普生物科技有限公司 | 促进脾脏来源的cd8阳性t细胞增殖的诱导培养组合物及其应用 |
CN109350623A (zh) * | 2018-05-25 | 2019-02-19 | 泓博元生命科技(深圳)有限公司 | 包含nadh和神经酰胺的抗衰老组合物及其制剂和制备方法与应用 |
Family Cites Families (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6544994B2 (en) * | 2000-06-07 | 2003-04-08 | Eprov Ag | Pharmaceutical preparation for treating or preventing cardiovascular or neurological disorders by modulating of the activity of nitric oxide synthase |
US6689810B2 (en) * | 2001-08-21 | 2004-02-10 | Cellular Sciences, Inc. | Method for treating pulmonary disease states in mammals by altering indigenous in vivo levels of nitric oxide |
US8076373B2 (en) * | 2001-09-11 | 2011-12-13 | North Cell Pharmacetical | Method for treating mammalian diseases and injuries caused by the over-expression of peroxynitrite |
CH696628A5 (de) * | 2002-02-26 | 2007-08-31 | Eprova Ag | Verwendung von Folaten zur Herstellung einer Zubereitung geeignet zur Vorbeugung und Behandlung von Entzündungen und entzündungsassoziierter Krankheiten, im Speziellen zur Beeinflussung der |
US20080213403A1 (en) * | 2002-07-25 | 2008-09-04 | Alain Martin | Method for treating pulmonary disease states in mammals by altering indigenous in vivo levels of nitric oxide |
US20090047340A1 (en) * | 2006-03-29 | 2009-02-19 | Guilford F Timothy | Liposomal reduced glutathione and 1-arginine, including with other ingredient(s), capable of multipath administration for reversal and prevention of obesity and for mitochondrial biogenesis |
CN101116670B (zh) * | 2006-08-01 | 2010-11-10 | 广州和竺生物科技有限公司 | 可提供活性甲基或参与甲基转移的化合物作为制备治疗病毒性疾病的药的应用 |
US9359411B2 (en) * | 2008-07-31 | 2016-06-07 | Maw Hsing Biotech Co., Ltd. | Yeast expressed classical swine fever virus glycoprotein E2 and use thereof |
FI20095550A0 (fi) * | 2009-05-19 | 2009-05-19 | Bayer Schering Pharma Oy | Vaginaalinen antojärjestelmä |
EP2538790B1 (en) * | 2010-02-26 | 2015-07-29 | Ajinomoto Co., Inc. | Virus-inactivating composition containing low-molecular weight compound and arginine |
US9216178B2 (en) * | 2011-11-02 | 2015-12-22 | Biomarin Pharmaceutical Inc. | Dry blend formulation of tetrahydrobiopterin |
US20130129680A1 (en) * | 2011-11-23 | 2013-05-23 | Thomas Christian Lines | Method for treating hepatitis c virus infection using quercetin-containing compositions |
WO2017123418A1 (en) * | 2016-01-11 | 2017-07-20 | Synlogic, Inc. | Bacteria engineered to treat metabolic diseases |
MX2018009543A (es) * | 2016-02-03 | 2019-02-11 | Quercegen Pharmaceuticals Llc | Metodo para tratar la infección por el virus del zika con composiciones que contienen quercetina. |
-
2020
- 2020-08-06 CN CN202080055716.5A patent/CN114340609A/zh active Pending
- 2020-08-06 US US17/631,948 patent/US20220280508A1/en active Pending
- 2020-08-06 EP EP20850185.8A patent/EP4011371A4/en active Pending
- 2020-08-06 US US17/632,003 patent/US20220273686A1/en active Pending
- 2020-08-06 EP EP20850334.2A patent/EP4011372A4/en active Pending
- 2020-08-06 BR BR112022002123A patent/BR112022002123A2/pt unknown
- 2020-08-06 JP JP2022506894A patent/JP2022545341A/ja active Pending
- 2020-08-06 WO PCT/CN2020/107411 patent/WO2021023264A1/zh unknown
- 2020-08-06 WO PCT/CN2020/107409 patent/WO2021023263A1/zh unknown
- 2020-08-06 CN CN202010783197.6A patent/CN112007163B/zh active Active
- 2020-08-06 JP JP2022506932A patent/JP2022545771A/ja active Pending
- 2020-08-06 BR BR112022002156A patent/BR112022002156A2/pt unknown
- 2020-08-06 AU AU2020324248A patent/AU2020324248A1/en active Pending
Patent Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1106296A (zh) * | 1993-09-08 | 1995-08-09 | 山道士营养有限公司 | 营养补剂 |
US6043268A (en) * | 1994-06-29 | 2000-03-28 | Hiroshi Maeda | Agent for treatment of viral infections |
EP1671630A2 (en) * | 1999-02-05 | 2006-06-21 | Angiogenix, Inc. | L-Arginine based formulations for treating diseases and methods of using the same |
CN103053863A (zh) * | 2013-02-06 | 2013-04-24 | 韶关金苹果饲料有限公司 | 一种具有提高免疫力和除臭效果的猪用饲料添加剂 |
CN104232564A (zh) * | 2014-05-12 | 2014-12-24 | 杭州国牧生物科技有限公司 | 一种st细胞制备猪瘟疫苗的培养基及其使用方法 |
CN106135895A (zh) * | 2015-04-21 | 2016-11-23 | 淄博维克勋医药技术有限公司 | 一种营养补充剂 |
CN109350623A (zh) * | 2018-05-25 | 2019-02-19 | 泓博元生命科技(深圳)有限公司 | 包含nadh和神经酰胺的抗衰老组合物及其制剂和制备方法与应用 |
CN108865995A (zh) * | 2018-08-16 | 2018-11-23 | 深圳市拓普生物科技有限公司 | 促进脾脏来源的cd8阳性t细胞增殖的诱导培养组合物及其应用 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
Immunonutrition: role of sulfur amino acids, related amino acids, and polyamines;Grimble et al.;《Nutrition》;第14卷;第605-610页 * |
瓜氨酸的药理作用及生产方法的研究进展;刘娟等;《药学实践杂志》;第29卷(第3期);第173页右栏第1段至174页左栏第2段 * |
高枫译.影响猪瘟流行地区疫苗成功接种的关键因素.《国外畜牧学(猪与禽)》.2009,第29卷(第1期),第8页右栏第2段至第9页右栏第2段. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP4011372A1 (en) | 2022-06-15 |
CN114340609A (zh) | 2022-04-12 |
US20220280508A1 (en) | 2022-09-08 |
JP2022545341A (ja) | 2022-10-27 |
BR112022002156A2 (pt) | 2022-06-07 |
US20220273686A1 (en) | 2022-09-01 |
EP4011371A4 (en) | 2024-02-07 |
CN112007163A (zh) | 2020-12-01 |
EP4011372A4 (en) | 2023-08-30 |
AU2020324248A1 (en) | 2022-03-10 |
WO2021023264A1 (zh) | 2021-02-11 |
WO2021023263A1 (zh) | 2021-02-11 |
BR112022002123A2 (pt) | 2022-04-12 |
JP2022545771A (ja) | 2022-10-31 |
EP4011371A1 (en) | 2022-06-15 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN112007163B (zh) | 用于治疗非洲猪瘟的药物组合物及其用途 | |
Tufan et al. | COVID-19, immune system response, hyperinflammation and repurposingantirheumatic drugs | |
Peng et al. | Andrographolide sulfonate ameliorates lipopolysaccharide-induced acute lung injury in mice by down-regulating MAPK and NF-κB pathways | |
KR20190071765A (ko) | 코로나 바이러스에 연관된 감염의 치료를 위한 항바이러스 조성물 | |
Chu et al. | Paeoniflorin attenuates schistosomiasis japonica-associated liver fibrosis through inhibiting alternative activation of macrophages | |
Peng et al. | A comprehensive summary of the knowledge on COVID-19 treatment | |
Zheng et al. | Mechanism of COVID-19 causing ARDS: Exploring the possibility of preventing and treating SARS-CoV-2 | |
ITTO950112A1 (it) | Composizione e procedimemto per prevenire e trattare infiammazioni con immunoglobina a. | |
WO2021207399A1 (en) | Hydrolysable tannins for use in mitigating acute respiratory distress syndrome | |
Li et al. | Prophylactic, therapeutic and immune enhancement effect of liposome‐encapsulated PolyICLC on highly pathogenic H5N1 influenza infection | |
KR20230012469A (ko) | 바이러스 감염의 발생을 치료, 예방 또는 제한하기 위한 방법 및 조성물 | |
CN116459295B (zh) | 一种肺炎清化方及其应用 | |
Wang et al. | Avian safety guardian: Luteolin restores Mycoplasma gallisepticum-induced immunocompromise to improve production performance via inhibiting the IL-17/NF-kB pathway | |
WO2021239796A1 (en) | Method for the treatment of a viral infection with human alpha-1 antitrypsin | |
CN114469913B (zh) | Tilorone用于预防/治疗非洲猪瘟病毒感染的应用 | |
Latarissa et al. | Efficacy of quinine sulfate in patients with mild-to-moderate COVID-19: a randomized controlled trial | |
Rezghi Rami et al. | Therapeutic Potentials and Candidates for COVID-19 | |
Chao et al. | Carbon Nanoparticles in Mongolian Medicine Alleviate Acute Gastric Ulcer Induced by Ethanol by Regulating Fas/FasL Pathway | |
Zhang et al. | SARS-CoV-2: An Updated Review Highlighting Its Evolution and Treatments. Vaccines 2022, 10, 2145 | |
CN109833317B (zh) | 法匹拉韦在制备抑制犬瘟热病毒增殖药物中的应用 | |
Chaudhry et al. | A Review on the Advancements in COVID-19 Treatments and Vaccines | |
Zhang et al. | Impaired arginine/ornithine metabolism drives severe HFMD by promoting cytokine storm | |
CN117462633A (zh) | 荆银固表方在治疗流感以及流感继发细菌感染疾病中的应用 | |
Kösedağ et al. | Effectiveness of Propolis in the Treatment of Covid-19 | |
WO2022076816A1 (en) | Multiple viral antigen covid vaccine and therapeutic |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |