CN112980707A - 一种去除豆粕中抗营养因子的菌剂及发酵豆粕制备工艺 - Google Patents

一种去除豆粕中抗营养因子的菌剂及发酵豆粕制备工艺 Download PDF

Info

Publication number
CN112980707A
CN112980707A CN201911215711.XA CN201911215711A CN112980707A CN 112980707 A CN112980707 A CN 112980707A CN 201911215711 A CN201911215711 A CN 201911215711A CN 112980707 A CN112980707 A CN 112980707A
Authority
CN
China
Prior art keywords
fermentation
soybean meal
parts
bacillus
equal
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201911215711.XA
Other languages
English (en)
Inventor
陈敬帮
熊涛
李知洪
胡骏鹏
曾雨雷
戴晋军
聂琴
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Angel Yeast Co Ltd
Original Assignee
Angel Yeast Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Angel Yeast Co Ltd filed Critical Angel Yeast Co Ltd
Priority to CN201911215711.XA priority Critical patent/CN112980707A/zh
Publication of CN112980707A publication Critical patent/CN112980707A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2405—Glucanases
    • C12N9/2434—Glucanases acting on beta-1,4-glucosidic bonds
    • C12N9/2437—Cellulases (3.2.1.4; 3.2.1.74; 3.2.1.91; 3.2.1.150)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/12—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes by fermentation of natural products, e.g. of vegetable material, animal waste material or biomass
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A23K10/18—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/30—Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms
    • A23K10/37—Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms from waste material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
    • C12N1/18—Baker's yeast; Brewer's yeast
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01004—Cellulase (3.2.1.4), i.e. endo-1,4-beta-glucanase
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P60/00—Technologies relating to agriculture, livestock or agroalimentary industries
    • Y02P60/80—Food processing, e.g. use of renewable energies or variable speed drives in handling, conveying or stacking
    • Y02P60/87—Re-use of by-products of food processing for fodder production

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Beans For Foods Or Fodder (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明涉及一种低抗营养因子豆粕用发酵菌剂，其特征在于，按重量百分比计，其包含以下原料：纤维素酶10‑60份、蛋白酶10‑60份、活性干酵母0.1‑10份、芽孢杆菌0.1‑10份，乳酸菌0.1‑10份。通过本发明中的发酵菌剂及其配套工艺制备得到的发酵豆粕，抗营养因子得到大幅消除，提高了豆粕蛋白消化利用效率，发酵后的豆粕，粗蛋白≥50％，酸溶蛋白，占粗蛋白比例≥18％，蛋白溶解率≥80％，大豆球蛋白≤40000ppm，β伴大豆球蛋白≤60000ppm，胰蛋白酶抑制因子＜0.3mg/g，水苏糖≤1000ppm，棉籽糖≤1500ppm。

Description

一种去除豆粕中抗营养因子的菌剂及发酵豆粕制备工艺
技术领域
本发明涉及微生物应用技术领域，具体涉及一种发酵豆粕的菌剂及其制备方法和发酵豆粕的工艺。
背景技术
豆粕是大豆提取大豆油后的副产物，其粗蛋白含量高，氨基酸组成合理，是理想的饲用植物性蛋白原料。但是，大豆中的蛋白质主要是大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白，免疫原性强，易引起仔猪等幼龄动物的过敏反应。此外，大豆中存在大豆寡糖(主要为水苏糖和棉籽糖)、胰蛋白酶抑制因子、脲酶、植酸等抗营养因子，一定程度上降低了豆粕的消化利用率，易引起动物机体的胀气腹泻等症状，也在一定程度上限制了豆粕在动物养殖中的应用。
发酵豆粕是以豆粕(≥95％)为主要原料，麸皮等为辅助原料，使用农业部《饲料添加剂品种目录》中批准使用的饲用微生物菌种进行固态发酵，并经干燥制成的蛋白质饲料原料产品。通过微生物固态发酵，降解豆粕中的大分子抗原蛋白，消除抗营养因子，提高豆粕的消化利用率，是豆粕发酵的主要目的，也是行业认可的豆粕深加工方法。但是，市场上发酵菌剂良莠不齐，发酵豆粕的质量评价主要集中在粗蛋白、酸溶蛋白、有机酸等常规指标上，而对于抗营养因子的消除关注程度不够。因此，开发豆粕发酵菌剂，高效降解豆粕中的抗营养因子，是扩大发酵豆粕在养殖动物上使用的重要途径。
目前，豆粕深加工主要有物理方法、化学方法和生物发酵方法。其中物理方法主要包括蒸汽处理、浸泡蒸煮、加压烘烤、膨化等，湿热处理最常用，但对于热稳定性抗营养因子如大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白、大豆寡糖等消除不理想。化学方法主要有尿素处理、亚硫酸钠处理、半胱氨酸处理等，一方面会造成营养损失，另一方面也会影响原料适口性。生物发酵主要包括微生物发酵和酶解，发酵菌种主要有曲霉、酵母菌、芽孢杆菌和乳酸菌四大类，豆粕经生物发酵处理后，适口性增加，营养指标得到改善，同时抗营养因子也得到了有效消除，是目前豆粕的主要深加工手段之一。
发明内容
本发明解决的现有技术的问题是：豆粕中存在大量的抗营养因子，是影响豆粕生物利用效率的主要原因之一。但是，目前的豆粕发酵技术或菌剂主要侧重于对某些限制性氨基酸的提升、发酵后口感改善、溶解度、酸溶蛋白等指标的提升，而未针对豆粕中抗营养因子的消除。
本发明提供了一种可以大幅消除豆粕中中抗营养因子的发酵菌剂及其配套的发酵豆粕制备工艺。
一种豆粕用发酵菌剂，由以下原料按重量百分比组分构成：纤维素酶10-60％、蛋白酶10-60％、活性干酵母0.1-10％、芽孢杆菌0.1-10％，乳酸菌1-10％。一种低抗营养因子的发酵豆粕制备工艺，包括(1)发酵菌剂活化；(2)接种混合；(3)豆粕发酵；(4)干燥粉碎四步骤。
具体来说，本发明提出了如下技术方案。
本发明提供了一种低抗营养因子豆粕用发酵菌剂，其特征在于，按重量百分比计，其包含以下原料：纤维素酶10-60份，蛋白酶10-60份，活性干酵母0.1-10份，芽孢杆菌0.1-10份，乳酸菌0.1-10份。
优选的，其中，按重量百分比计，其包含以下原料：纤维素酶20-60份，蛋白酶20-60份，活性干酵母0.1-5份，芽孢杆菌0.1-5份，乳酸菌0.1-5份；优选为，纤维素酶30-60份，蛋白酶30-60份，活性干酵母0.1-2份，芽孢杆菌0.1-2份，乳酸菌0.1-2份。
优选的，其中，所述纤维素酶选自木霉来源的纤维素酶，曲霉来源的纤维素酶和芽孢杆菌来源的纤维素酶中的一种或两种以上；优选为木霉来源的纤维素酶。
优选的，其中，所述蛋白酶为碱性蛋白酶；优选的，所述蛋白酶选自曲霉来源的蛋白酶和/或地衣芽孢杆菌来源的蛋白酶。
优选的，其中，所述活性干酵母选自酿酒酵母和/或产朊假丝酵母的活性干酵母；优选为酿酒酵母活性干酵母；更优选为酿酒酵母菌安琪1.34的活性干酵母。
优选的，其中，所述芽孢杆菌选自枯草芽孢杆菌，地衣芽孢杆菌，凝结芽孢杆菌，短小芽孢杆菌，迟缓芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌中的一种或两种以上，优选为枯草芽孢杆菌。
优选的，其中，所述乳酸菌包括植物乳杆菌，干酪乳杆菌，副干酪乳杆菌，嗜酸乳杆菌，粪肠球菌和屎肠球菌中的一种或多种，优选为干酪乳杆菌。
优选的，其中，所述菌剂还包括辅料，优选的，所述辅料为酵母细胞壁。
本发明还提供了上述发酵菌剂的制备方法，其特征在于，将所述原料纤维素酶、蛋白酶、活性干酵母、芽孢杆菌和乳酸菌按所述重量比称取后，混合，即得到所述发酵菌剂。
本发明还提供了上述发酵菌剂发酵豆粕的制备工艺，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：发酵菌剂活化：将所述发酵菌剂在1％的蔗糖中溶解活化，温度25-40℃，活化时间10-60min；
步骤2：接种混合：将所述活化的发酵菌剂与豆粕混合，发酵菌剂与豆粕的质量比为0.5-5‰，混合后物料水分为37.5％-48.5％；
步骤3：豆粕发酵：将步骤2中所述的混合物料持续发酵，发酵温度30-35℃，发酵时间72-94h；优选为发酵温度35℃，发酵时间72h；
步骤4：干燥粉碎：发酵结束后物料干燥，控制水分5-10％，即得到发酵豆粕成品。
优选的，所述的制备工艺，其中，步骤1中还包括搅拌的过程，步骤4中还包括过筛的过程。
本发明还提供了一种上述的发酵菌剂在发酵豆粕中的应用，采用本发明制备的发酵菌剂及所述方法制备的发酵豆粕，粗蛋白≥50％，酸溶蛋白，占粗蛋白比例≥18％，蛋白溶解率≥80％，大豆球蛋白≤40000ppm，β伴大豆球蛋白≤60000ppm，胰蛋白酶抑制因子＜0.3mg/g，水苏糖≤1000ppm，棉籽糖≤1500ppm。
本发明所取得的有益效果是：
本发明中的发酵菌剂通过合理配比活性干酵母、芽孢杆菌、乳酸菌和酶，可以保证多种微生物共同发挥作用，同时去除多种抗营养因子，包括大豆球蛋白，β伴大豆球蛋白，胰蛋白酶抑制因子等，同时提高酸溶蛋白和蛋白溶解率。
通过本发明中的发酵菌剂及其配套工艺制备得到的发酵豆粕，抗营养因子得到大幅消除，提高了豆粕蛋白消化利用效率，发酵后的豆粕，粗蛋白≥50％，酸溶蛋白，占粗蛋白比例≥18％，蛋白溶解率≥80％，大豆球蛋白≤40000ppm，β伴大豆球蛋白≤60000ppm，胰蛋白酶抑制因子＜0.3mg/g，水苏糖≤1000ppm，棉籽糖≤1500ppm。
菌株保藏信息
该菌种酿酒酵母属菌株安琪1.34(Saccharomyces cerevisiae安琪1.34)于2018年03月29日保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO:M 2018160，保藏地址：中国.武汉.武汉大学，邮政编码：430072；电话：027-68754052。
具体实施方式
本发明提供了一种低抗营养因子豆粕用发酵菌剂，其特征在于，按重量百分比计，其包含以下原料：纤维素酶10-60份、蛋白酶10-60份、活性干酵母0.1-10份、芽孢杆菌0.1-10份，乳酸菌0.1-10份。
优选的，其中，按重量百分比计，其包含以下原料：纤维素酶20-60份，蛋白酶20-60份，活性干酵母0.1-5份，芽孢杆菌0.1-5份，乳酸菌0.1-5份；优选为，纤维素酶30-60份，蛋白酶30-60份，活性干酵母0.1-2份，芽孢杆菌0.1-2份，乳酸菌0.1-2份。
优选的，其中，所述纤维素酶选自木霉来源的纤维素酶，曲霉来源的纤维素酶和芽孢杆菌来源的纤维素酶中的一种或两种以上；优选为木霉来源的纤维素酶。
优选的，其中，所述蛋白酶为碱性蛋白酶；优选的，所述蛋白酶选自曲霉来源的蛋白酶和/或地衣芽孢杆菌来源的蛋白酶。
优选的，其中，所述活性干酵母选自酿酒酵母和/或产朊假丝酵母的活性干酵母；优选为酿酒酵母活性干酵母；更优选为酿酒酵母菌安琪1.34的活性干酵母。
优选的，其中，所述芽孢杆菌选自枯草芽孢杆菌，地衣芽孢杆菌，凝结芽孢杆菌，短小芽孢杆菌，迟缓芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌中的一种或两种以上，优选为枯草芽孢杆菌。
优选的，其中，所述乳酸菌包括植物乳杆菌，干酪乳杆菌，副干酪乳杆菌，嗜酸乳杆菌，粪肠球菌和屎肠球菌中的一种或多种，优选为干酪乳杆菌。
优选的，其中，所述菌剂还包括辅料，优选的，所述辅料为酵母细胞壁。
本发明还提供了上述发酵菌剂的制备方法，其特征在于，将所述原料纤维素酶、蛋白酶、活性干酵母、芽孢杆菌和乳酸菌按所述重量比称取后，混合，即得到所述发酵菌剂。
本发明还提供了上述发酵菌剂发酵豆粕的制备工艺，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：发酵菌剂活化：将所述发酵菌剂在1％的蔗糖中溶解活化，温度25-40℃，活化时间10-60min；
步骤2：接种混合：将所述活化的发酵菌剂与豆粕混合，发酵菌剂与豆粕的质量比为0.5-5‰，混合后物料水分为37.5％-48.5％；
步骤3：豆粕发酵：将步骤2中所述的混合物料持续发酵，发酵温度30-35℃，发酵时间72-94h；优选为发酵温度35℃，发酵时间72h；
步骤4：干燥粉碎：发酵结束后物料干燥，控制水分5-10％，即得到发酵豆粕成品。
优选的，所述的制备工艺，其中，步骤1中还包括搅拌的过程，步骤4中还包括过筛的过程。
本发明还提供了一种上述的发酵菌剂在发酵豆粕中的应用，采用本发明制备的发酵菌剂及所述方法制备的发酵豆粕，粗蛋白≥50％，酸溶蛋白，占粗蛋白比例≥18％，蛋白溶解率≥80％，大豆球蛋白≤40000ppm，β伴大豆球蛋白≤60000ppm，胰蛋白酶抑制因子＜0.3mg/g，水苏糖≤1000ppm，棉籽糖≤1500ppm。
下面通过具体实施例来说明本发明所述菌剂及其制备方法和发酵豆粕的工艺。
下面对本实施例所用的原料及设备的生产厂家，以及产品分析使用的设备和分析方法进行说明如下，其中所述的化学物质没有标明的均为常规试剂的化学纯级别。其中，实施例和对比例中所用到的原料的信息如下表所示。
表1本发明所用到的原料和仪器的信息
Figure BDA0002299443080000061
Figure BDA0002299443080000071
本发明中的实施例和对比例中使用的酿酒酵母活性干酵母是由酿酒酵母菌安琪1.34制备而成。
该酿酒酵母属菌株安琪1.34(Saccharomyces cerevisiae安琪1.34)于2018年03月29日保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO:M 2018160。
该酿酒酵母菌安琪1.34，细胞直径约4-6μm，呈现椭球形，以出芽方式无性繁殖；在固体培养基平板上30℃培养24h后，为乳白色，不透明，光滑圆形菌落，能耐36℃高温发酵，发酵浓度能达到200g/l，通过常规形态观察、生理生化试验，然后借助PCR技术通过鉴定26SrDNAD1/D2区基因序列，确定本发明菌株为酿酒酵母属菌株。
该酿酒酵母菌安琪1.34的酿酒酵母活性干酵母制备方法如下：
1)菌种活化：挑取酿酒酵母菌安琪1.34菌落一环放入YPD液体培养基中，放入摇床中将菌种活化。
2)菌种纯化：将上一步活化后的菌液梯度稀释铺平板，以获取单个菌落。
3)菌种扩大培养：挑取上一步平板中单个菌落接种至200mLYPD液体培养基，在30℃下，220rpm转速下培养20h；二级种子培养，按照二级培养基体积的10％将一级培养的种子接入1L二级培养基，28℃下，220rpm转速下培养18h；其pH控制在5.5。
4)种子富集：5000rpm离心，用钙离子和镁离子含量低的去离子水洗涤3次，富集得到酿酒酵母种子，至酵母湿重为220g/L。
5)酵母乳滚筒-流化床干燥：对以上得到的酵母乳经滚筒脱水，进入流化床干燥，进风温度为100℃。待产品温度达到50℃即得到酿酒酵母菌安琪1.34的活性干酵母。
实施例：发酵菌剂的制备
实施例1
称取木霉纤维素酶10g、地衣芽孢杆菌蛋白酶60g、酿酒酵母活性干酵母0.1g、枯草芽孢杆菌0.1g、干酪乳杆菌10g，酵母细胞壁19.8g，投入混合机内混合3min，制备得到发酵菌剂A。
实施例2
称取曲霉纤维素酶20g、曲霉蛋白酶50g、酿酒酵母活性干酵母0.5g、枯草芽孢杆菌0.5g、干酪乳杆菌5g，酵母细胞壁24g，投入混合机内混合3min，制备得到发酵菌剂B。
实施例3
称取木霉纤维素酶30g、地衣芽孢杆菌蛋白酶40g、酿酒酵母活性干酵母1g、枯草芽孢杆菌1g、干酪乳杆菌2g，酵母细胞壁26g，投入混合机内混合3min，制备得到发酵菌剂C。
实施例4
称取木霉纤维素酶40g、地衣芽孢杆菌蛋白酶30g、酿酒酵母活性干酵母2g、地衣芽孢杆菌2g、嗜酸乳杆菌1g，酵母细胞壁25g，投入混合机内混合3min，制备得到发酵菌剂D。
实施例5
称取木霉纤维素酶50g、地衣芽孢杆菌蛋白酶20g、酿酒酵母活性干酵母5g、枯草芽孢杆菌5g、干酪乳杆菌0.5g，酵母细胞壁19.5g，投入混合机内混合3min，制备得到发酵菌剂E。
实施例6
称取木霉纤维素酶60g、地衣芽孢杆菌蛋白酶10g、酿酒酵母活性干酵母10g、凝结芽孢杆菌10g、植物乳杆菌0.1g，酵母细胞壁9.9g，投入混合机内混合3min，制备得到发酵菌剂F。
对比例1
称取地衣芽孢杆菌蛋白酶40g、酿酒酵母活性干酵母1g、枯草芽孢杆菌1g、干酪乳杆菌2g，酵母细胞壁56g，投入混合机内混合3min，制备得到发酵菌剂d1。
对比例2
称取木霉纤维素酶30g、酿酒酵母活性干酵母1g、枯草芽孢杆菌1g、干酪乳杆菌2g，酵母细胞壁66g，投入混合机内混合3min，制备得到发酵菌剂d2。
对比例3
称取木霉纤维素酶30g、地衣芽孢杆菌蛋白酶40g、枯草芽孢杆菌1g、干酪乳杆菌2g，酵母细胞壁27g，投入混合机内混合3min，制备得到发酵菌剂d3。
对比例4
称取木霉纤维素酶30g、地衣芽孢杆菌蛋白酶40g、酿酒酵母活性干酵母1g、干酪乳杆菌2g，酵母细胞壁27g，投入混合机内混合3min，制备得到发酵菌剂d4。
对比例5
称取木霉纤维素酶30g、地衣芽孢杆菌蛋白酶40g、酿酒酵母活性干酵母1g、枯草芽孢杆菌1g，酵母细胞壁28g，投入混合机内混合3min，制备得到发酵菌剂d5。
应用例：发酵豆粕的制备工艺
应用例1
步骤1：发酵菌剂活化：配制1％糖水(10g蔗糖加水溶解，稀释至1L)100mL，将3g发酵菌剂A添加在配制好的糖水中溶解活化，活化温度为35℃，活化时间为30min；
步骤2：接种混合：将步骤1得到的活化好的菌剂(是步骤1中1g发酵菌剂与100mL糖水的混合液)与3kg豆粕混合，加入1L水，混合后物料水分为32.5％，测量方法为GB/T 6435：饲料中水分和其他挥发性物质含量的测定。
步骤3：豆粕发酵：将步骤2中所述的混合物料持续发酵，发酵温度35℃，发酵时间72h。
步骤4：干燥粉碎：发酵结束后物料烘箱干燥，干燥温度为55℃，粉碎过60目筛，即得到发酵豆粕成品1。
应用例2
步骤1：发酵菌剂活化：配制1％糖水(10g蔗糖加水溶解，稀释至1L)100mL，将3g发酵菌剂B添加在配制好的糖水中溶解活化，活化温度为35℃，活化时间为30min；
步骤2：接种混合：将步骤1得到的活化好的菌剂(是步骤1中3g发酵菌剂与100mL糖水的混合液)与3kg豆粕混合，加入1.5L水，混合后物料水分为40％。
步骤3：豆粕发酵：将步骤2中所述的混合物料持续发酵，发酵温度35℃，发酵时间72h。
步骤4：干燥粉碎：发酵结束后物料烘箱干燥，干燥温度为55℃，粉碎过60目筛，即得到发酵豆粕成品2。
应用例3
步骤1：发酵菌剂活化：配制1％糖水(10g蔗糖加水溶解，稀释至1L)100mL，将4g发酵菌剂C添加在配制好的糖水中溶解活化，活化温度为35℃，活化时间为30min；
步骤2：接种混合：将步骤1得到的活化好的菌剂(是步骤1中4g发酵菌剂与100mL糖水的混合液)与4kg豆粕混合，加入3L水，混合后物料水分为48.5％。
步骤3：豆粕发酵：将步骤2中所述的混合物料持续发酵，发酵温度35℃，发酵时间72h。
步骤4：干燥粉碎：发酵结束后物料烘箱干燥，干燥温度为55℃，粉碎过60目筛，即得到发酵豆粕成品3。
应用例4
步骤1：发酵菌剂活化：配制1％糖水(10g蔗糖加水溶解，稀释至1L)100mL，将3g发酵菌剂D添加在配制好的糖水中溶解活化，活化温度为35℃，活化时间为30min；
步骤2：接种混合：将步骤1得到的活化好的菌剂(是步骤1中3g发酵菌剂与100mL糖水的混合液)与3kg豆粕混合，加入1L水，混合后物料水分为32.5％。
步骤3：豆粕发酵：将步骤2中所述的混合物料持续发酵，发酵温度35℃，发酵时间72h。
步骤4：干燥粉碎：发酵结束后物料烘箱干燥，干燥温度为55℃，粉碎过60目筛，即得到发酵豆粕成品4。
应用例5
步骤1：发酵菌剂活化：配制1％糖水(10g蔗糖加水溶解，稀释至1L)100mL，将3g发酵菌剂E添加在配制好的糖水中溶解活化，活化温度为35℃，活化时间为30min；
步骤2：接种混合：将步骤1得到的活化好的菌剂(是步骤1中3g发酵菌剂与100mL糖水的混合液)与3kg豆粕混合，加入1.5L水，混合后物料水分为40％。
步骤3：豆粕发酵：将步骤2中所述的混合物料持续发酵，发酵温度35℃，发酵时间72h。
步骤4：干燥粉碎：发酵结束后物料烘箱干燥，干燥温度为55℃，粉碎过60目筛，即得到发酵豆粕成品5。
应用例6
步骤1：发酵菌剂活化：配制1％糖水(10g蔗糖加水溶解，稀释至1L)100mL，将4g发酵菌剂F添加在配制好的糖水中溶解活化，活化温度为35℃，活化时间为30min；
步骤2：接种混合：将步骤1得到的活化好的菌剂(是步骤1中4g发酵菌剂与100mL糖水的混合液)与4kg豆粕混合，加入3L水，混合后物料水分为48.5％。
步骤3：豆粕发酵：将步骤2中所述的混合物料持续发酵，发酵温度35℃，发酵时间72h。
步骤4：干燥粉碎：发酵结束后物料烘箱干燥，干燥温度为55℃，粉碎过60目筛，即得到发酵豆粕成品6。
应用例7
其余条件与应用例3相同，区别仅在于步骤1中使用的菌剂为对比例1的发酵菌剂d1，即得到发酵豆粕成品7。
应用例8
其余条件与应用例3相同，区别仅在于步骤1中使用的菌剂为对比例2的发酵菌剂d2，即得到发酵豆粕成品8。
应用例9
其余条件与应用例3相同，区别仅在于步骤1中使用的菌剂为对比例3的发酵菌剂d3，即得到发酵豆粕成品9。
应用例10
其余条件与应用例3相同，区别仅在于步骤1中使用的菌剂为对比例4的发酵菌剂d4，即得到发酵豆粕成品10。
应用例11
其余条件与应用例3相同，区别仅在于步骤1中使用的菌剂为对比例5的发酵菌剂d5，即得到发酵豆粕成品11。
对应用例1-11中制备得到的发酵豆粕成品1-11和未发酵的初始豆粕进行质量测定，测定其水分，粗蛋白，酸溶蛋白占粗蛋白比例，乳酸，大豆球蛋白，β-伴大豆球蛋白，胰蛋白酶抑制因子，水苏糖和棉籽糖，测定方法如下，测定结果如下表。
水分的测定方法为GB/T 6435：饲料中水分和其他挥发性物质含量的测定。
酸溶蛋白的检测方法为GB/T 22492-2008：大豆肽粉(附录中肽含量的检测)，根据酸溶蛋白与粗蛋白含量计算酸溶蛋蛋白占粗蛋白比例。
粗蛋白的检测方法为GB/T 6432-2018：饲料中粗蛋白的测定凯氏定氮法。
乳酸的检测方法为GB/T 23877-2009：饲料酸化剂中柠檬酸、富马酸和乳酸的测定高效液相色谱法。
大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白、胰蛋白酶抑制因子，采用试剂盒法测定，试剂盒购自北京龙科方舟有限公司。
水苏糖、棉籽糖的检测方法为GB/T 22491-2008：大豆低聚糖，包含水苏糖、棉籽糖的测定。
表2应用例的测量结果表
Figure BDA0002299443080000141
对初始豆粕、实施例及对比例制备得到的菌剂发酵得到的豆粕产品1-11进行比较分析，可以看出：本发明中实施例制备得到的发酵菌剂发酵后的豆粕(即应用例1-6)相对于对比例制备得到的发酵菌剂发酵后的豆粕(即应用例7-11)，酸溶蛋白占粗蛋白比例更高，蛋白溶解率优于原始豆粕和对比例的菌剂发酵得到的豆粕产品说明豆粕中大分子蛋白在发酵过程中被降解为小分子的多肽或氨基酸，更容易被动物吸收利用。通过对抗营养因子比较发现，实施例制备得到的发酵菌剂发酵后的豆粕(即应用例1-6)中大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白、水苏糖和棉籽糖的消除明显优于对比例的菌剂发酵得到的豆粕(即应用例7-11)产品，较初始豆粕有大幅下降。由于大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白是大分子蛋白，不容易被动物消化吸收，同时具备一定的免疫原性；水苏糖、棉籽糖由于存在半乳糖苷键，而动物机体不能分泌半乳糖苷酶，不能被动物直接消化利用，可能导致胀气等问题。因此，本发明中的发酵菌剂，可用于制备一种的抗营养因子的发酵豆粕，提高发酵豆粕的消化利用率，具有重要的开发意义。
以上所述，仅是本发明实施的较佳实施例，并非对本发明做任何形式上的限制，凡在本发明的精神和原则之内所做的修改、等同替换和改进等，均需要包含在本发明的保护范围之内。

Claims (13)

1.一种低抗营养因子豆粕用发酵菌剂，其特征在于，按重量百分比计，其包含以下原料：纤维素酶10-60份，蛋白酶10-60份，活性干酵母0.1-10份，芽孢杆菌0.1-10份，乳酸菌0.1-10份。
2.根据权利要求1所述的发酵菌剂，其中，按重量百分比计，其包含以下原料：纤维素酶20-60份，蛋白酶20-60份，活性干酵母0.1-5份，芽孢杆菌0.1-5份，乳酸菌0.1-5份；优选为，纤维素酶30-60份，蛋白酶30-60份，活性干酵母0.1-2份，芽孢杆菌0.1-2份，乳酸菌0.1-2份。
3.根据权利要求1或2所述的发酵菌剂，其中，所述纤维素酶选自木霉来源的纤维素酶，曲霉来源的纤维素酶和芽孢杆菌来源的纤维素酶中的一种或两种以上；优选为木霉来源的纤维素酶。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的发酵菌剂，其中，所述蛋白酶为碱性蛋白酶；优选的，所述蛋白酶选自曲霉来源的蛋白酶和/或地衣芽孢杆菌来源的蛋白酶。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的发酵菌剂，其中，所述活性干酵母选自酿酒酵母和/或产朊假丝酵母的活性干酵母；优选为酿酒酵母活性干酵母；更优选为酿酒酵母菌安琪1.34的活性干酵母。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的发酵菌剂，其中，所述芽孢杆菌选自枯草芽孢杆菌，地衣芽孢杆菌，凝结芽孢杆菌，短小芽孢杆菌，迟缓芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌中的一种或两种以上，优选为枯草芽孢杆菌。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的发酵菌剂，其中，所述乳酸菌包括植物乳杆菌，干酪乳杆菌，副干酪乳杆菌，嗜酸乳杆菌，粪肠球菌和屎肠球菌中的一种或多种，优选为干酪乳杆菌。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的发酵菌剂，其中，所述菌剂还包括辅料，优选的，所述辅料为酵母细胞壁。
9.权利要求1-8所述的发酵菌剂的制备方法，其特征在于，将所述原料纤维素酶、蛋白酶、活性干酵母、芽孢杆菌和乳酸菌按所述重量比称取后，混合，即得到所述发酵菌剂。
10.权利要求1-9所述的发酵菌剂发酵豆粕的制备工艺，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：发酵菌剂活化：将所述发酵菌剂在1％的蔗糖中溶解活化，温度25-40℃，活化时间10-60min；
步骤2：接种混合：将所述活化的发酵菌剂与豆粕混合，发酵菌剂与豆粕的质量比为0.5-5‰，混合后物料水分为37.5％-48.5％；
步骤3：豆粕发酵：将步骤2中所述的混合物料持续发酵，发酵温度30-35℃，发酵时间72-94h；优选为发酵温度35℃，发酵时间72h；
步骤4：干燥粉碎：发酵结束后物料干燥，控制水分5-10％，即得到发酵豆粕成品。
11.根据权利要求10所述的制备工艺，其中，步骤1中还包括搅拌的过程，步骤4中还包括过筛的过程。
12.权利要求1-8所述的发酵菌剂在发酵豆粕中的应用，其中，发酵后的豆粕，粗蛋白≥50％，酸溶蛋白，占粗蛋白比例≥18％，蛋白溶解率≥80％，大豆球蛋白≤40000ppm，β伴大豆球蛋白≤60000ppm，胰蛋白酶抑制因子＜0.3mg/g，水苏糖≤1000ppm，棉籽糖≤1500ppm。
13.一种豆粕发酵产品，其特征在于，采用权利要求1-8的发酵菌剂发酵得到。
CN201911215711.XA 2019-12-02 2019-12-02 一种去除豆粕中抗营养因子的菌剂及发酵豆粕制备工艺 Pending CN112980707A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911215711.XA CN112980707A (zh) 2019-12-02 2019-12-02 一种去除豆粕中抗营养因子的菌剂及发酵豆粕制备工艺

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911215711.XA CN112980707A (zh) 2019-12-02 2019-12-02 一种去除豆粕中抗营养因子的菌剂及发酵豆粕制备工艺

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN112980707A true CN112980707A (zh) 2021-06-18

Family

ID=76331485

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911215711.XA Pending CN112980707A (zh) 2019-12-02 2019-12-02 一种去除豆粕中抗营养因子的菌剂及发酵豆粕制备工艺

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112980707A (zh)

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114097926A (zh) * 2021-11-29 2022-03-01 播恩集团股份有限公司 一种快速降解植物蛋白的生物酶制剂及其制备方法
CN114403295A (zh) * 2021-11-15 2022-04-29 源耀生物科技(盐城)股份有限公司 一种高抑菌性发酵豆粕及其制备方法
CN114403285A (zh) * 2021-12-29 2022-04-29 宜昌安琪生物农业科技有限公司 提高蛋白消化率的饲用发酵花生粕、发酵菌剂和制法应用
CN114540250A (zh) * 2022-03-28 2022-05-27 乐山恒峰华邦生物科技有限公司 一种菜粕用发酵菌剂及制备方法
CN114831211A (zh) * 2022-05-17 2022-08-02 广西富鹏农牧有限公司 用于豆粕饲料的发酵剂
CN115181704A (zh) * 2022-07-25 2022-10-14 河北农业大学 一株地衣芽孢杆菌Bacillus LicheniformisY5-39及其应用
CN115804421A (zh) * 2021-09-14 2023-03-17 安琪酵母股份有限公司 豆粕用发酵菌剂、饲用发酵豆粕的制备方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1911066A (zh) * 2006-08-24 2007-02-14 武汉邦之德牧业科技有限公司 一种复合酶强化豆粕发酵深度的工艺
CN104431320A (zh) * 2014-11-18 2015-03-25 安佑生物科技集团股份有限公司 一种制备发酵豆粕用功能性复合菌剂及其应用
CN105614023A (zh) * 2015-12-31 2016-06-01 湖州环农微生物技术研究所 一种用于豆粕发酵的发酵酶解剂及其应用
CN106387311A (zh) * 2016-09-06 2017-02-15 青岛农业大学 一种发酵豆粕及其生产方法
CN110037164A (zh) * 2018-10-09 2019-07-23 江门市澳保生物科技有限公司 一种菌-酶协同发酵生产高小肽发酵豆粕的工艺

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1911066A (zh) * 2006-08-24 2007-02-14 武汉邦之德牧业科技有限公司 一种复合酶强化豆粕发酵深度的工艺
CN104431320A (zh) * 2014-11-18 2015-03-25 安佑生物科技集团股份有限公司 一种制备发酵豆粕用功能性复合菌剂及其应用
CN105614023A (zh) * 2015-12-31 2016-06-01 湖州环农微生物技术研究所 一种用于豆粕发酵的发酵酶解剂及其应用
CN106387311A (zh) * 2016-09-06 2017-02-15 青岛农业大学 一种发酵豆粕及其生产方法
CN110037164A (zh) * 2018-10-09 2019-07-23 江门市澳保生物科技有限公司 一种菌-酶协同发酵生产高小肽发酵豆粕的工艺

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
刘唤明等: "加酶提高发酵豆粕蛋白质水解度的研究", 《安徽农业科学》 *
朱长生等: "发酵豆粕营养价值及其在猪生产中的应用", 《饲料研究》 *

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115804421A (zh) * 2021-09-14 2023-03-17 安琪酵母股份有限公司 豆粕用发酵菌剂、饲用发酵豆粕的制备方法
CN114403295A (zh) * 2021-11-15 2022-04-29 源耀生物科技(盐城)股份有限公司 一种高抑菌性发酵豆粕及其制备方法
CN114097926A (zh) * 2021-11-29 2022-03-01 播恩集团股份有限公司 一种快速降解植物蛋白的生物酶制剂及其制备方法
CN114097926B (zh) * 2021-11-29 2023-02-28 播恩集团股份有限公司 一种快速降解植物蛋白的生物酶制剂及其制备方法
CN114403285A (zh) * 2021-12-29 2022-04-29 宜昌安琪生物农业科技有限公司 提高蛋白消化率的饲用发酵花生粕、发酵菌剂和制法应用
CN114540250A (zh) * 2022-03-28 2022-05-27 乐山恒峰华邦生物科技有限公司 一种菜粕用发酵菌剂及制备方法
CN114831211A (zh) * 2022-05-17 2022-08-02 广西富鹏农牧有限公司 用于豆粕饲料的发酵剂
CN115181704A (zh) * 2022-07-25 2022-10-14 河北农业大学 一株地衣芽孢杆菌Bacillus LicheniformisY5-39及其应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN112980707A (zh) 一种去除豆粕中抗营养因子的菌剂及发酵豆粕制备工艺
AU2020100252A4 (en) Method for producing wet-base fermented soybean meal by using movable platform, and use thereof in feed
CN110934238A (zh) 对虾养殖用的发酵软颗粒饲料及其制备方法
CN101904432B (zh) 增强仔猪抗病力使仔猪快速生长的饲料及其制备方法
CN104171759A (zh) 一种食用菌菌糠饲料制备工艺
CN110591943B (zh) 一株产复合酶枯草芽孢杆菌,组合物及其应用
CN106689786A (zh) 一种促进肉鸡肌胃发育的配合饲料及其制备方法
TWI706036B (zh) 穀物粉中濃縮蛋白質的方法
CN109563472A (zh) 芽孢杆菌属组合物及用于反刍动物的方法
CN113508867B (zh) 一种提高玉米蛋白粉营养价值的方法
CN113215018A (zh) 一株植物乳杆菌植物亚种及其在豆粕和北艾混合发酵中的应用
CN110607251A (zh) 一种降解呕吐毒素的耐盐海杆菌及其应用
Zhang et al. A study on the reduction of gossypol levels by mixed culture solid substrate fermentation of cottonseed meal
CN107279464A (zh) 一种工程化发酵生物质饲料的工艺
CN104872379B (zh) 一种在玉米-豆粕型日粮中添加鱼溶浆的发酵物及其发酵方法
CN113151032A (zh) 一株具有高效降解棉酚能力的枯草芽孢杆菌及其应用
CN115197875B (zh) 一种枯草芽孢杆菌fnfh_bs06及其应用
Claver et al. The effect of soaking with wooden ash and malting upon some nutritional properties of sorghum flour used for impeke, a traditional Burundian malt-based sorghum beverage
CN114831211A (zh) 用于豆粕饲料的发酵剂
CN108260708A (zh) 一种反刍动物专用的无抗发酵复配饲料及其制备方法
IE43997B1 (en) Improvements in or relating to soy products
JP3885084B2 (ja) 速成発酵飼料とその製造方法並びに用途
CN115651859B (zh) 枯草芽孢杆菌dp-3及其应用
CN115005341B (zh) 一种混合菌株发酵蚕豆粉的制备方法
Yanti et al. Organic acids production of rice straw fermented with several types of microorganism at different temperatures

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20210618