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Abstract

本发明属于检测技术领域，具体涉及一种检测乳制品中8种甜味剂的方法。采用有机相和水相混合提取溶剂，用有机相初步沉淀蛋白，通过固相萃取柱净化脂肪等未除尽的杂质，方法简单，回收率高，易于操作，检测甜味剂种类多。在同一空白基质中加入不同浓度的甜味剂标准溶液，在同样的色谱质谱条件下对样品进行加标回收试验，所测回收率均在80.21%‑109.75%之间，证明该方法准确度高。并对该加标样品进行精密度分析，连续检测6次，相对标准偏差在1.34%‑7.30%之间，证明该方法精密度好。

Description

一种检测乳制品中8种甜味剂的方法
技术领域
本发明属于检测技术领域，具体涉及一种检测乳制品中8种甜味剂的方法。
背景技术
甜味剂是能改善食品口味的一类添加剂，广泛应用于食品行业。但是甜味剂过量使用，会对人体产生毒副作用，可能会导致高血糖、葡萄糖耐受不良等代谢系统性疾病，造成易怒、抑郁、记忆衰退等神经系统异常，甚至有报道，糖精钠、甜蜜素的过量使用会有致癌、致畸等不良反应。因此，必须对其使用量进行严格管控，国家标准 GB 2760-2014《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》中对甜味剂适用范围及添加限量都有明确规定。
甜味剂的最常用检测技术为气相色谱法、液相色谱法、液质联用法、气质联用法等。但是大部分检测方法或者标准只能单一的检测一种或两种甜味剂，耗时耗力；而且关于新型甜味剂爱德万甜的相关资料很少，尚未有其相关检测标准。液相色谱-串联质谱法分析效率高，兼具定性定量功能，能有效防止假阳性，尤其适用于复杂基质的定性和定量检测，因此适用于甜味剂的高通量分析。由于乳制品基质复杂，富含蛋白质和脂肪，处理不当会造成色谱柱及质谱的污染，对于甜味剂的检测造成一定的困难。
发明内容
针对上述检测甜味剂中存在的问题，及为了一种方法来检测更多种类的甜味剂，本发明提供了一种检测乳制品中8种甜味剂的方法，采用有机相和水相混合提取溶剂，用有机相初步沉淀蛋白，通过固相萃取柱净化脂肪等未除尽的杂质，方法简单，回收率高，易于操作，检测甜味剂种类多。
本发明的技术方案如下：
一种检测乳制品中8种甜味剂的方法，包括以下步骤：
（1）样品处理：采用甲醇、三氯甲烷的水溶液为提取液，离心，上清液过OasisPRiME HLB固相萃取柱，取净化液氮吹用水定容，混匀后经微孔滤膜过滤，得待检测溶液；
（2）色谱条件：流动相A：甲醇；流动相B：含0.1%甲酸的水；采用梯度洗脱法，时间为10 min，流速为0.3 mL/min，0 min流动相组成为10%A+90%B，1 min流动相组成为10%A+90%B，5 min时90%A+10%B，8 min时90%A+10%B，8.1 min时10%A+90 %B，10 min时10%A+90%B；
（3）质谱条件：电喷雾离子源ESI(-)ESI(+)，扫描模式：多反应监测模式MRM；
（4）定量工作曲线，采用步骤（2）、（3）的条件，检测步骤（1）的待测物质。
所述步骤（1）的甲醇、三氯甲烷和水的体积比为：7:2:1。
甜味剂易溶于极性溶剂中，因此用水和甲醇来提取目标物。但是由于乳制品基质复杂，处理不当会造成色谱柱堵塞及质谱的污染，对于甜味剂的检测造成一定的困难，因此本发明采用甲醇和三氯甲烷来初步沉淀蛋白，通过固相萃取柱净化未除尽的杂质。选用Oasis HLB柱、Oasis PRiME HLB柱两种色谱柱，发现Oasis HLB柱对安赛蜜、甜蜜素、糖精钠回收率较低，Oasis PRiME HLB柱可以采用过滤式样品制备流程，吸附样品中非极性干扰物质，收集滤液得到待检测样品，方法简单，且对8种甜味剂的回收均较好。
本发明的有益效果
1、结果精密度和准确度分析
在同一空白基质中加入不同浓度的甜味剂标准溶液，在同样的色谱质谱条件下对样品进行加标回收试验，所测回收率均在80.21%-109.75%之间，证明该方法准确度高。并对该加标样品进行精密度分析，连续检测6次，相对标准偏差在1.34%-7.30%之间，证明该方法精密度好。
2. 操作简单
本发明采用甲醇、三氯甲烷和水作为提取溶液，通过有机相甲醇和三氯甲烷初步沉淀蛋白，通过Oasis PRiME HLB固相萃取柱净化脂肪等未除尽的杂质，可以测定乳制品中8种甜味剂，方法简单高效，检测灵敏度及准确性高，易于操作。
附图说明
图1是甜味剂的总离子流图；
图2 为发酵乳中添加甜味剂的总离子流图；
图3为某品牌发酵乳提取总离子流图。
具体实施方式
下面通过具体的实施例对本发明的技术方案作进一步的解释和说明。
实施例1
（1）样品处理
准确称取待测样品2 g于50 mL离心管中，用甲醇：水：三氯甲烷体积比为7:2:1的混合提取溶液定容至25 mL，涡旋振荡2 min，超声提取10 min，6000 r/min离心5 min，取上清液3-4 mL，直接过Oasis PRiME HLB固相萃取柱，取净化液2 mL氮吹至0.5 mL左右，用水定容至2 mL，混匀，取上清液经0.22 μm微孔滤膜过滤，得待检测溶液。
（2）流动相的选择
分别用甲醇和乙腈作为有机相测定8种甜味剂，发现甲醇的分离效果较好，信号响应较高；分别在在水相中添加0.1%的甲酸及0.5 mM的乙酸铵，发现乙酸铵能抑制大部分甜味剂的离子化效率，导致响应信号降低，因此最终选择甲醇-0.1%甲酸水作为流动相。
（3）色谱条件
色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEH C18，2.1 mm×100 mm，1.7 μm；流动相：甲醇（A）和水（B，含0.1%甲酸），进样体积为5 µL，柱温40℃，采用梯度洗脱法，时间为10 min，流速为0.3 mL/min，0 min流动相组成为10%A+90%B，1 min流动相组成为10%A+90%B，5 min时90%A+10%B，8 min时90%A+10%B，8.1 min时10%A+90 %B，10 min时10%A+90%B。
（4）质谱条件
电喷雾离子源ESI(-)ESI(+)，扫描模式：多反应监测模式MRM；离子源温度（TEM）：500℃；雾化气（Gas1）：55 psi；辅助气（Gas2）：55 psi；气帘气（CUR）：30 psi；电喷雾电压（IS）：5500V[ESI(+) ]/-4500V[ESI(-)]；碰撞气（CAD）：8 psi；8种甜味剂的总离子流图如图1所示。
（4）标准工作曲线制作及定量限测定
配制不同浓度的混合标准工作溶液，其中甜蜜素、纽甜、阿斯巴甜、安赛蜜、糖精钠的浓度分别为0.5、1、5、10、50、100、500 ng/mL；三氯蔗糖的浓度分别为1、2、10、20、100、200、1000 ng/mL；爱德万甜、阿力甜的浓度分别为0.2、0.4、2、4、20、40、200 ng/mL，按照上述的方法进行测定，结果表明在线性范围内，8种甜味剂均可以保持良好线性关系，相关系数均大于0.997。用空白基质添加标准物质提取进样以计算检出限，3倍检出限为定量限，在称样量为2 g时，8种甜味剂的线性关系和定量限见表1。
表1 8种甜味剂标准曲线线性关系与定量限
甜味剂 线性关系 相关系数R 线性范围（ng/mL） 定量限（μg/kg）
甜蜜素 Y=200347x-17230 0.9997 0.5-500 6
纽甜 Y=26915x-2037 0.9976 0.5-500 6
阿斯巴甜 Y=13146x-1138 0.9998 0.5-500 6
三氯蔗糖 Y=1218x-391 0.9984 1-1000 12
安赛蜜 Y=53176x-2747 0.9995 0.5-500 6
糖精钠 Y=22944x-2389 0.9997 0.5-500 6
爱德万甜 Y=110422x-3183 0.9977 0.2-200 3
阿力甜 Y=27142x-1168 0.9997 0.2-200 3
（5）回收率和精密度
以不含此8种甜味剂实际样品为空白基质，分别对添加低中高三个浓度的样品进行测定，以考察方法的精密度（RSD）和回收率。结果表明：8种甜味剂的回收率在80.21%-109.75%之间，精密度在1.34%-7.30%，均具有较好的回收率和精密度，具体结果见表2。
表2 8种甜味剂低、中、高三个浓度加标样品回收率及精密度结果
Figure 858624DEST_PATH_IMAGE002
（5）实际样品的测定
采集市场上不同种类的乳制品样品用上述方法进行分析。其中一批次发酵乳中检出甜蜜素含量为93.60 mg/kg，阿斯巴甜含量为53.75 mg/kg，见图3，未超过国家标准 GB2760-2014《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》中对发酵乳中甜味剂的限量要求。将本发明检测方法与国标方法进行比较，检测含量变化见表3。
表3 不同检测方法测定发酵乳中甜味剂含量
检测方法 甜蜜素（mg/kg） 阿斯巴甜（mg/kg）
本发明方法 93.60 53.75
GB 5009.97-2016 96.58 /
GB 5009.263-2016 / 50.21

Claims (3)

1.一种检测乳制品中8种甜味剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）样品处理：采用甲醇、三氯甲烷的水溶液为提取液，离心，上清液过Oasis PRiMEHLB固相萃取柱，取净化液氮吹用水定容，混匀后经微孔滤膜过滤，得待检测溶液；
（2）色谱条件：流动相A：甲醇；流动相B：含0.1%甲酸的水；采用梯度洗脱法，时间为10min，流速为0.3 mL/min；
（3）质谱条件：电喷雾离子源ESI(-)ESI(+)，扫描模式：多反应监测模式MRM；
（4）定量工作曲线，采用步骤（2）、（3）的条件，检测步骤（1）的待测物质。
2.根据权利要求1所述的检测乳制品中8种甜味剂的方法，其特征在于，所述步骤（1）的甲醇、三氯甲烷和水的体积比为：7:2:1。
3. 根据权利要求1所述的检测乳制品中8种甜味剂的方法，其特征在于，所述步骤（2）的梯度淋洗条件为：0 min流动相组成为10%A+90%B，1 min流动相组成为10%A+90%B，5 min时90%A+10%B，8 min时90%A+10%B，8.1 min时10%A+90 %B，10 min时10%A+90%B。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113686986A (zh) * 2021-08-19 2021-11-23 北京工业大学 超声-固相萃取-液质联用同时检测市政污泥中6种人工甜味剂的方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016124087A1 (zh) * 2015-02-04 2016-08-11 北京北大维信生物科技有限公司 化合物、其分离方法、合成方法及用途
WO2018124143A1 (ja) * 2016-12-27 2018-07-05 サントリーホールディングス株式会社 新規ステビオール配糖体およびその製造方法、ならびにそれを含む甘味料組成物
CN109490452A (zh) * 2018-10-31 2019-03-19 中国农业科学院茶叶研究所 一种同时检测茶叶中6种合成甜味剂的方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016124087A1 (zh) * 2015-02-04 2016-08-11 北京北大维信生物科技有限公司 化合物、其分离方法、合成方法及用途
WO2018124143A1 (ja) * 2016-12-27 2018-07-05 サントリーホールディングス株式会社 新規ステビオール配糖体およびその製造方法、ならびにそれを含む甘味料組成物
CN109490452A (zh) * 2018-10-31 2019-03-19 中国农业科学院茶叶研究所 一种同时检测茶叶中6种合成甜味剂的方法

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHANG CS 等: "Detection of 10 sweeteners in various foods by liquid chromatography/tandem mass spectrometry", 《JOURNAL OF FOOD AND DRUG ANALYSIS》 *
公丕学 等: "固相萃取-超高效液相色谱质谱法测定液体乳中爱德万甜", 《中国调味品》 *
周艳华 等: "高效液相色谱法同时检测食用槟榔中常见甜味剂和防腐剂的方法研究", 《中国食品添加剂》 *
官咏仪 等: "液相色谱-质谱法快速测定乳制品中六种人工合成甜味剂", 《中国乳品工业》 *
王成华 等: "酸奶中6种合成甜味剂的测定方法", 《食品研究与开发》 *
王栩冬 等: "食品甜味剂测定中样品前处理技术研究进展", 《中国卫生检验杂志》 *
童兰艳 等: "液相色谱-串联质谱法同时测定食品中9种甜味剂", 《食品科学技术学报》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113686986A (zh) * 2021-08-19 2021-11-23 北京工业大学 超声-固相萃取-液质联用同时检测市政污泥中6种人工甜味剂的方法

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