CN112945869B - 智慧医院液体试样检测试剂盒用膜载体、试剂盒及膜载体制造方法 - Google Patents

智慧医院液体试样检测试剂盒用膜载体、试剂盒及膜载体制造方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及智慧医院液体试样检测试剂盒用膜载体、试剂盒、膜载体制备方法及液体试样检测方法。该膜载体具有至少一个能输送所述液体试样的流路；流路形成有产生用于输送液体试样的能够产生毛细管作用的毛细管网；毛细管网使加入的液体试样循环流动或分离至其具有的多个分支毛细管；膜载体还包括存在于每一分支毛细管壁的探针，探针用于将液体试样中的被检测物质进行可逆地保留；其中，流路之中设置有沿流路长度方向设置且向流路中心凸起高度不断变化的至少一个脊条。通过在流路中设置呈螺旋形并且其凸部高度不断变化的脊条，可以促进被检测物质混匀并提供检测的灵敏度。

Description

智慧医院液体试样检测试剂盒用膜载体、试剂盒及膜载体制 造方法
技术领域
本发明涉及检测试剂盒技术领域，尤其涉及智慧医院液体试样检测试剂盒用膜载体、试剂盒、膜载体制备方法及液体试样检测方法。
背景技术
“智慧医院”这个概念自诞生之日起已有十来年的时间，各个医院都进行了不同探索，把互联网技术、智能技术，包括现在人工智能的一些技术都用在医疗服务的领域。数字医院包括医院信息系统（即Hospital Information System，HIS）、实验室信息管理系统（Laboratory Information Management System，LIS）、医学影像信息的存储系统（PictureArchiving and Communication Systems，PACS）和传输系统以及医生工作站四个部分，实现病人诊疗信息和行政管理信息的收集、存储、处理、提取及数据交换。
而实现实时检测是进行PACS检测的重要一环。近年通过利用抗原抗体反应等来测定对感染症的发病、妊娠、血糖值等的即时检测(POCT、Point of Care Test、临床现场即时检测)试剂受到关注。POCT试剂具有短时间内能够辨别结果、使用方法简便、廉价这种特征。POCT试剂由于这些特征而大多用于症状为轻度的阶段的诊察、定期诊察等，在预想今后增加的居家医疗中，也成为重要的诊察工具。
对于大多的POCT试剂而言，将血液等液体试样导入到检测试剂盒，对其中含有的特定的被检测物质进行检测，由此进行判定。作为由液体试样检测特定的被检测物质的方法，经常使用免疫色谱法。免疫色谱法指的是被加入到检测试剂盒的膜载体上的液体在膜载体上移动的过程中，被检测物质与标记物结合，进而它们与被固定化于检测试剂盒中的物质(以下称为检测物质)特异性结合，检测其结果所产生的颜色、质量的变化等这种方法。检测物质也可以换言称为试剂(reagent)。
作为对被检测物质进行检测的方法，已知对于通过使用着色胶乳颗粒、荧光胶乳颗粒、金属胶体颗粒等作为标记物而产生的颜色变化，借由吸光度测定器等光学测定机器进行检测的方法。
作为光学上判定上述颜色变化的POCT试剂，经常利用使用了硝基纤维素膜的侧向流动型的试剂盒(日本特开2014-062820号公报)。硝基纤维素膜具有很多直径数μm程度的微细的孔，液体试样在该孔之中通过毛细管力而移动。
但是，硝基纤维素膜源自天然物，孔径、孔彼此的连接方式并非同样，因此对于各膜，液体样品流动的流速产生差异。作为控制流速的方法，示出有国际公开第2016/051974号，但是该专利公开的流路为多孔体。另外，该专利文献由于使用硝基纤维素膜，因此存在孔径、孔彼此的连接方式并非同样的这种问题。若流速产生差异则为了对被检测物质进行检测而花费的时间也变化，其结果，有可能在被检测物质产生结合之前错误判断为未检测出。
为了解决上述问题，设想人工制作微细流路这种方法(日本专利第4597664号、日本特表2012-524894号公报、日本专利第5609648号日本特开2016-011943号公报和日本特开2013-113633号公报)。若利用该方法则可以制作具有均匀结构的膜载体，因此可以降低在被检测物质产生结合之前错误判断为未检测出的可能性。
上述专利文献中，系统内的流路结构均匀，因此检测性能受限。日本专利第5821430号中，作为改善使用人工的微细流路时的检测性能的方法，示出了将以流速控制作为目标的槽型流路和以灵敏度改善作为目标的柱型流路组合的方法。
发明内容
然而，这些专利文献中记载的方法而言，仅注重检测物质，没有注重被检测物质、标记物的流动。在使用了人工的微细流路的系统中，流动容易形成单纯的层流，其结果，被检测物质和标记物的搅拌难以充分进行，因此成为检测性能降低的主要原因。特别是利用侧向流动型的免疫色谱法时，检测系统简单，流路结构的影响容易反映到检测结果。
国际公开第2016/098740号记载了一种液体试样检测试剂盒用膜载体，其为对液体试样中的被检测物质进行检测的检测试剂盒用的膜载体，设置有能够输送前述液体试样的至少一个流路，在前述流路的底面设置有产生用于输送前述液体试样的毛细管作用的微细结构。但是，该专利文献并未对微细结构的内壁进行记载。
本发明鉴于上述问题，其目的在于，提供例如在利用光学的方法能够确认被检测物质被检测出的免疫色谱法中、能够实现高灵敏度的判定的检测试剂盒。
用于解决上述问题的技术方案如下：
本发明提供一种智慧医院液体试样检测试剂盒用膜载体，其是通过检查液体试样中的被检测物质的检测试剂盒用的膜载体；
所述膜载体具有至少一个能输送所述液体试样的流路；
所述流路形成有产生用于输送所述液体试样的能够产生毛细管作用的毛细管网；
所述毛细管网使加入的所述液体试样循环流动或分离至其具有的多个分支毛细管；
所述膜载体还包括存在于每一所述分支毛细管壁的探针，所述探针用于将所述液体试样中的被检测物质进行可逆地保留；
其中，所述流路之中设置有沿所述流路长度方向设置且向所述流路中心凸起高度不断变化的至少一个脊条。
具体的，所述脊条设置于所述分支毛细管壁上，所述脊条沿所述分支毛细管网的长度方向呈螺旋设置。
更具体的，所述脊条以促使所述分支毛细管内所述液体试样以螺旋方向流动，并且促使所述液体试样在所述分支毛细管内部的流速发生变化的方式流动。
进一步的，所述毛细管网还具有母毛细管，所述母毛细管内所述液体试样的流速小于所述分支毛细管内所述液体试样的流速，所述分支毛细管内设置有所述探针处的所述液体流速均一。
进一步的，所述膜载体还具有受挤压部，所述受挤压部受压促使所述液体试样在所述毛细管网内流动。
具体的，所述探针是在着色颗粒、荧光颗粒或量子点微球上结合有所述抗体或所述抗原结合片段的颗粒。
本发明还提供一种智慧医院液体试样检测试剂盒用膜载体的制造方法，为所述的膜载体的制造方法，
所述制造方法包括采用热塑性塑料形成所述毛细管网结构的工序及在所述分支毛细管网内固定所述探针的工序。
本发明还提供一种液体试样检测试剂盒，用以检测所述液体试样中的被检测物质，所述液体试样检测试剂盒包括所述膜载体，
所述试剂盒在对应的所述膜载体结合有所述探针的部位设置检测区；
在所述检测区中，在检测出所述被检测物质时产生光学变化信息。
具体的，所述液体试样检测试剂盒以能与探测所述膜载体的设置有探针的部位，在所述液体试样检测试剂盒的至少一个部分设置所述检测区；
所述光学变化是由所述被检测物质与所述探针结合或解除结合过程中产生的；
所述检测区是通过光学信息收集机构来实现将光学信息转换数字信息来进行检测的。
本发明还提供一种液体试样的检测方法，使用所述的液体试样检测试剂盒，所述检测方法包括如下工序：
S1、所述检测方法包括如下工序：
S2、将所述液体试样及与所述液体试样中的被检测物质特异性配合的标记物混合来制备混合液体试样，使所述被检测物质与所述标记物相互结合的工序；
S3、将所述混合液体试样加入至设置于所述膜载体的加样区的工序；
S4、通过所述毛细管网，将所述混合液体试样从所述加样区向所述检测区输送的工序；
S5、检测所述检测区中的光学变化的工序。
有益效果：
该根据本发明，能够提供在能够利用光学的方法确认被检测物质被检测出的免疫色谱法中、能够实现高灵敏度的判定的检测试剂盒。且该发明提供的液体试样检测试剂盒用膜载体，通过在流路中设置呈螺旋形并且其凸部高度不断变化的脊条，可以促进被检测物质混匀并提供检测的灵敏度。
附图说明
图1为本发明实施例提供的智慧医院液体试样检测试剂盒的平面结构示意图。
图2为本发明实施例提供可选的智慧医院液体试样检测试剂盒用膜载体的平面结构示意图。
图3为本发明实施例提供的智慧医院液体试样检测试剂盒用膜载体的立体结构示意图。
图4为本发明实施例提供可选的智慧医院液体试样检测试剂盒用膜载体的平面结构示意图。
图5为本发明实施例提供的分支毛细管立体结构示意图。
图6为本发明实施例提供的被保留区平面结构示意图。
图7为本发明实施例提供可选的智慧医院液体试样检测试剂盒的平面结构示意图。
图8为本发明实施例提供可选的智慧医院液体试样检测试剂盒的立体结构示意图。
图9为本发明实施例提供的液体试样的检测方法流程示意图。
1膜载体、100加样区、101被保留区、1010隔网、11毛细管网、110分支毛细管、111母毛细管、探针13、14脊条、140凸部、141平坦部、15受挤压部、
2试剂盒、20检测区。
具体实施方案
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
本实施方式的液体试样检测试剂盒用膜载体例如指的是对液体试样中的被检测物质进行检测的液体试样检测试剂盒用的膜载体。
在此，对于被检测物质没有任何限定，可以为各种病原体、各种临床标记物等能够与抗体进行抗原抗体反应的任何物质。作为被检测物质的具体例，可例示出流感病毒、诺如病毒、腺病毒、RS病毒、HAV、HBs、HIV、SARS、SARS-Cov-2、MERS等的病毒抗原、MRSA、A组溶血性链锁球菌、B组溶血性链锁球菌、军团菌属菌等的细菌抗原、细菌等所产生的毒素、支原体属、沙眼衣原体、人绒毛膜促性腺激素等激素、C反应蛋白、肌红蛋白、心肌肌钙蛋白、各种肿瘤标记物、农药和环境激素等，但是不限于它们。被检测物质特别是为SARS、SARS-Cov-2、MERS\流感病毒、诺如病毒、C反应蛋白、肌红蛋白和心肌肌钙蛋白等需要紧急检测出和治疗措施的物质的情况下，本实施方式的液体试样检测试剂盒和膜载体的有用性特别大。被检测物质可以为能单独诱发免疫响应的抗原，也可以为虽然不能单独诱发免疫响应、但是通过抗原抗体反应与抗体结合的情况下能诱发免疫响应的半抗原。被检测物质通常处于在液体试样中悬浮或溶解的状态。液体试样例如也可以为将上述被检测物质悬浮或溶解于缓冲液而成的试样。
本发明实施例提供一种智慧医院液体试样检测试剂盒用膜载体。例如图1-8所示，其是通过检查液体试样中的被检测物质的检测试剂盒用的膜载体1；膜载体1具有至少一个能输送液体试样的流路；流路形成有产生用于输送液体试样的能够产生毛细管作用的毛细管网11；毛细管网11使加入的液体试样循环流动或分离至其具有的多个分支毛细管110；膜载体1还包括存在于每一分支毛细管110壁的探针13，探针13用于将液体试样中的被检测物质进行可逆地保留。其中，流路之中设置有沿流路长度方向设置且向流路中心凸起高度不断变化的至少一个脊条14。
具体的，膜载体1在其表面具有加入液体试样的加样区100、和用于可逆性保留液体试样中的被检测物质的被保留区101，也即上述设置有探针13的分支毛细管的部分。
如图2为膜载体1的示意性的顶视图。如图2所示，膜载体1具有输送液体的至少一个流路。流路优选地通过一体成型来制作。而流路是通过上述的毛细管网11来形成的。毛细管网11至少位于加样区100和被保留区101之间，也可以是膜载体1的全部位置分布毛细管网11，优选后者。毛细管网11内产生毛细管作业。通过这种毛细管作用，将液体试样借由毛细管网11、从加样区100向被保留区101(沿着输送方向A)输送。若液体试样中的被检测物质在被保留区101能够被可逆性的保留一定时间，并能被外部检查装置检查到这种保留过程中产生光学变化信息。
对于膜载体1的整体形状没有特别限定，例如可以为四边形等多边形、圆形、或椭圆形。膜载体1为圆形的情况下，膜载体1的直径为(途中L1)例如可以为50mm以上且200mm以下、膜载体1的厚度(图中L2)L2例如可以为2mm以上且100mm以下。毛细管网11的高度除开的膜载体的厚度例如可以为0.5mm以上且10mm以下。
具体的，毛细管网11的截面可呈圆锥、多棱锥、圆锥台、多棱锥台、圆柱、多棱柱、半球、半椭圆体中的任意一种形成，优选圆形。毛细管网11包括母毛细管111和分支毛细管110，母毛细管111内液体试样的流速小于分支毛细管内液体试样的流速，分支毛细管110内设置有探针13处的液体流速均一。
而其中关键之处在于，如图5所示，分支毛细管110壁上设置有脊条14，脊条14沿分支毛细管110的长度方向呈螺旋设置，以使得每一个分支毛细管110的截面方向上具有凸起的多个凸部140和多个平坦部141，并且由于脊条14沿着分支毛细管110的长度方向不断螺旋。通过毛细管作用，多个凸部140之间的空间作为沿着分支毛细管110的管路中发挥输送液体试样的功能；而在凸部140和平坦部141的交截处产生径向的涡流，促使管路边缘部分液体在径向返流至其中央部位，实现不断返混的作用，保持液体试样传输过程中被检测物质能够均匀分布，并且由于脊条14沿分支毛细管110的长度方向不断螺旋，促使这种返混作用不断沿径向变化，进一步促进被检测物质的均匀分布。具体的，多个凸部140规则地或平移对称性地分布于每一分支毛细管110的截面四周。其中，上述凸部140向分支管路111的中央相对于平坦部141突出凸出的高度的变化量、也即凸部140的高度例如为30μm以上且200μm以下，优选30μm为以上且50μm以下，以促使所述流路内的所述液体试样流速均在0.1mm/s以上且5.0mm/s以下的方式设置。
例如图5所示，凸部140的形状可为光滑的三角形、方形、圆形或椭圆形。对于凸部140的形状无需为几何学上规则的形状。图8为从分别与分支毛细管110厚度方向和长度方向的输送方向垂直的方向观察台阶得到的图。如图7所示，而分支毛细管110的被保留区101可以设置倾斜或水平，优选为水平设置，使得其下游部位设置有的探针13，能够保持平稳，促使液体试样在通过时能够保持匀速进行，以便于被检测物质能够均匀地结合至探针13上，从而可逆性的结合和解除结合，以便于能够顺利地产生光学信息变化。
更具体的，脊条14以促使分支毛细管110内液体试样以螺旋方向流动，并且促使液体试样在分支毛细管110内部的流速发生变化的方式流动，以促使母毛细管111内液体试样的流速小于分支毛细管110内液体试样的流速。具体的，母毛细管111的截面最大宽度大于分支毛细管110的截面最大宽度，最好是不断变小，而分支毛细管路111在设置有探针13的部位的截面宽度保持一致，以便在其内部形成均一的液体试样流速。
而具体的，为保持这种均一的试样流速，在分支毛细管110的被保留区101处，也即设置有探针13的部位，其内部并未设置脊条14，而具体的，探针13是在着色颗粒、荧光颗粒或量子点微球上结合有所述抗体或所述抗原结合片段的颗粒。例如可以为在胶体颗粒、胶乳颗粒等颗粒上结合上述抗体或其抗原结合性片段而成。抗原结合性片段指的是，可以与被检测物质特异性结合的片段，例如指的是抗体的抗原结合性片段。探针可以借由抗体或其抗原结合性片段与被检测物质结合。颗粒可以具有磁性或荧光发光性。作为胶体颗粒，可列举出胶体金颗粒、胶体铂颗粒的金属胶体颗粒等。颗粒从粒径控制、分散稳定性和结合容易性的观点考虑优选为胶乳颗粒。作为胶乳颗粒的材料，没有特别限定，但是优选为聚苯乙烯。颗粒从可见性的观点考虑，优选为着色颗粒或荧光颗粒、更优选着色颗粒。着色颗粒若能够用目视检测出颜色即可。荧光颗粒含有荧光物质即可。颗粒可以为着色胶乳颗粒或荧光胶乳颗粒。颗粒为着色胶乳颗粒的情况下，上述颜色变化通过目视合适地判定。颗粒为荧光胶乳颗粒的情况下，上述颜色变化通过荧光强度的测定来合适地判定。
具体的，为使得这些探针13作为检查物质形成的颗粒，以固定在分支管路111的被保留区101，可以通过表面处理的方法对这些颗粒进行固定，没有进行任何限定，例如可以使用UV照射、UV/臭氧处理、各种等离子体处理、利用3-氨基丙基三乙氧基硅烷(3-Aminopropyltriethoxysilane)、戊二醛(Glutaraldehyde)的表面修饰等各种方法。
对于被保留区101，为能够提高检测灵敏度和检测范围，其宽度略有增加，且其内部填满有上述的颗粒作为探针，而使得流经的液体试样能够被这些颗粒进行分散并被可逆性地保留在这种颗粒表面后，又从其表面解除这种特异性的结合作用。更多的，如图6所示，这些探针13形成的颗粒是被被保留区101端部的隔网1010阻隔在其中，以便使得其背部充满这些颗粒，从而能够充分地与被检测物质结合。而进一步的，经过被保留区101后的液体试样能够经过同样的分支毛细管110被循环驱动而回收或者废弃。
而更多的实施方式中，母毛细管111设置一个，分支毛细管110设置多个由母分支毛细管110分流出来。
而进一步的，为促使毛细管网11内的毛细作用能够加快或者快速形成，膜载体1还具有受挤压部15，受挤压部15受压促使液体试样在毛细管网11内流动。具体的，受挤压部15设置于在母毛细管111中央，且呈柔性，可以在受到挤压是产生形变，以压缩母毛细管111内部空间，促使液体试样由母毛细管111向分支毛细管110流动。
本实施方式的智慧医院液体试样检测试剂盒用膜载体1可以有热塑性塑料形成。也就是说，通过加工由热塑性塑料形成的基材，可以制作具有毛细管网11结构的膜载体1。作为加工方法，包括采用热塑性塑料形成所述毛细管网结构的工序及在所述分支毛细管网内固定所述探针的工序。具体的加工方法，可列举出例如3D打印、热压印、UV压印、注射成型、蚀刻、光刻、机械切削或激光加工等。其中，作为廉价地实施精密的加工的方法，对于热塑性塑料的热压印是合适的。作为热塑性塑料，可列举出聚酯系树脂、聚烯烃系树脂、聚苯乙烯系树脂、聚碳酸酯系树脂、氟系树脂和丙烯酸类树脂等，具体而言，可以使用聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、环烯烃聚合物(COP)、聚丙烯(PP)、聚苯乙烯(PS)、聚碳酸酯(PC)、聚偏二氟乙烯(PVDF)、聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)等各种热塑性塑料。
在压印、注塑成型等使用模具的加工方法的情况下，由于分支毛细管路111的宽度不断变化，因此与制作相同形状的柱体作为模具，再根据模具进行制作。
如以上说明那样，膜载体1为对液体试样中的被检测物质进行检测的液体试样检测试剂盒2用的膜载体1，具备：设置于膜载体1中、产生用于输送液体试样的毛细管作用的毛细管网11；和，通过毛细管网11形成的、输送液体试样的流路，在毛细管网11内壁上形成有脊条14。
而本发明实施例提供的一种液体试样检测试剂盒2，用以检测上述液体试样中的被检测物质，液体试样检测试剂盒2包括上述实施例所述的膜载体1。试剂盒2在对应的膜载体1结合有探针13的部位设置检测区20；检测区20用于检测出被检测物质时产生光学变化信息。液体试样检测试剂盒2以能与探测所述膜载体的设置有探针的部位，在所述液体试样检测试剂盒的至少一个部分设置检测区20。光学变化是由被检测物质与探针13结合或解除结合过程中产生的。检测区20是通过光学信息收集机构来实现将光学信息转换数字信息来进行检测的。具体的，试剂盒2形成一安装槽21，用于膜载体1的安装；并且，安装槽21的边缘部位即为检测区20，膜载体1的被保留区101安装后于检测区20配合，以便检测区20获取其光学信息。
为了更加清晰地得到这些光学变化信息，如图7、8，膜载体1具有结合有探针13的部位为被保留区101，该处设置为对光学变化产生最小影响的光学特性材料制成，如设置成透明，且其对于光线的折射和散射影响最小。而以便，检测区20对于被保留区101进行光学检测。而该检测区20可以是配套连接在检测区20外与被保留区101直接进行配合连接的，或者进行可拆卸式的配合连接的。
作为光学检测的方法，主要可列举出利用目视进行判定和测定荧光强度的方法这两种。利用目视进行判定的情况下，优选产生以CIE1976L*a*b*颜色空间的表色系测定检测前和检测后的颜色时的。两种颜色刺激之间的色差(JIS Z8781-4: 2013中记载的ΔE)为0.5以上的颜色变化，或者该色差为0.5以上则容易用目视确认颜色的不同。测定荧光强度来判定的情况下，优选产生检测区20中的荧光强度(Fl1)、与跟检测区20邻接的上游区域和下游区域中的荧光强度(Fl2)之比(Fl1/Fl2)＝10/1以上的颜色变化，若该比为10/1以上则容易分离信号和噪音。
本发明实施例还提供一种液体试样的检测方法，使用中上述实施例提供的液体试样检测试剂盒2进行，如图9所示，检测方法包括如下工序：
S1、将所述液体试样及与所述液体试样中的被检测物质特异性配合的标记物混合来制备混合液体试样，使所述被检测物质与所述标记物相互结合的工序；
S2、将所述混合液体试样加入至设置于所述膜载体的加样区的工序；
S3、通过所述毛细管网，将所述混合液体试样从所述加样区向所述检测区输送的工序；
S4、检测所述检测区中的光学变化的工序。
例如上述检测方法可以具备：将液体试样滴加到膜载体1的加样区100的工序；通过形成于膜载体1中形成毛细管网11所发挥的毛细管作用、借由毛细管网11、将液体试样从加样区100向被保留区101输送的工序；和在输送过程中、使液体试样中的被检测物质借由上述抗体或其抗原结合性片段而与标记物结合、进而使被检测物质与被固定于被保留区101的探针13进行可逆性地结合而保留在该区域，并产生光学变化信息，以及通过检测区20获取这些光学变化信息的工序。
以下对于本实施方式进行具体说明，但是本实施方式不被这些实验例所限定。
1、膜载体的制备
本实施例使用的3D打印设备为ARBURG freeformer200-3X。采用以下方法，进行膜载体产品（TPU9370AU塑料作为原材料）的制备：
(1)准备TPU9370AU塑料颗粒
通过将高聚物树脂与各种添加剂、助剂，经过计量、混合、塑化、切粒制成颗粒状的塑料，然后采用波前法进行三维模型修复，即可得到TPU9370AU塑料颗粒。本实施例所使用的TPU9370AU塑料颗粒为外购的标准TPU9370AU塑料颗粒。
(2)3D打印
本实施例采用以下方法，对TPU9370AU塑料颗粒进行3D打印，制备TPU9370AU产品测试样条；
通过计算机对目标产品（膜载体1）进行的三维CAD建模，并将模型分层并进行截面信息处理（这包括其毛细管网11结构的信息，脊条14的信息），然后将截面数据输入采用APF技术的3D打印机内，通过3D打印机根据截面数据逐层将TPU9370AU塑料颗粒融化产生的液滴进行堆积，从而获得设计结构形状的膜载体1产品测试样条。
其中，对于形成探针13的颗粒，在在建模信息中进行载入，以便在打印过程中，能够将这些颗粒进行堆积在受保留区101，在通过UV照射或者其他处理将其固定在受保留区101。
对于上述方法制作的膜载体1，其中的脊条14及其形成的凸部140的形状和尺寸进行不同配置，如设置脊条（实施例1）、设置沿流路方向螺旋的脊条（实施例2）和设置沿流路方向螺旋的脊条且凸部高度为30μm-50μm不断变化（实施例3）；不设脊条14（对比例1）、设置沿流路方向不呈螺旋的脊条且凸部高度为30μm-50μm不断变化（对比例2）、设置脊条且凸部高度为20μm不变化（对比例3）、设置脊条且凸部高度为30μm不变化（对比例4）、设置脊条且凸部高度为50μm不变化（对比例5）及设置脊条且凸部高度为210μm不变化（对比例6）。
2、检测评价
在如上所述制作的液体试样检测试剂盒用膜载体1端部的加样区加入液体试样100μL。液体样品采用使用DENKA SEIKEN CO.,LTD.制QuickNavi-Flu所附带的检样悬浮液作为稀释溶液，将甲型流感病毒A/Beijing/32/92(H3N2)(以下也有时称为甲型)稀释到4×104 倍而成的样品和将乙型流感病毒B/Shangdong/7/97(以下也有时称为乙型)稀释到4×103倍而成的样品这两种。
1) 对于检测的判定，通过在15分钟后目视检测区(甲型流感病毒检测部以及乙型流感病毒检测部)的着色线的有无进行观察来进行。
判定的结果，使用将A/Beijing/32/92(H3N2)稀释到4×104 倍而成的样品的情况下，仅甲型检测区可以确认颜色变化，使用将B/Shangdong/7/97稀释到4×103 倍而成的样品的情况下，仅在乙型检测区可以确认颜色的变化。
计算将甲型流感病毒A/Beijing/32/92(H3N2)的稀释倍率由4×104增大时、在试验开始后15分钟后不能目视着色线的有无的稀释倍率(能够目视判定甲型的极限倍率)。计算以该稀释倍率的1/2的稀释倍率进行检查时、由试验开始直至着色线的颜色浓度稳定为止的时间(直至甲型的浓度稳定为止的时间)。其结果如表1所示。
计算将乙型流感病毒B/Shangdong/7/97的稀释倍率由4×103 增大时、不能目视着色线的有无的稀释倍率(能够目视判定乙型的极限倍率)。求出以该稀释倍率的1/2的稀释倍率进行检查时、从试验开始直至着色线的颜色浓度稳定为止的时间(直至乙型的浓度稳定为止的时间)。其结果如表1所示。
其中，对于直至浓度稳定为止的时间为，使用甲型的直至浓度稳定为止的时间和乙型的直至浓度稳定为止的时间的平均值作为直至浓度稳定为止的时间。
A：在判定时间(直至浓度稳定为止的时间)6分钟以内对于甲型而言能够以7×104 以上的稀释倍率进行判定、对于乙型而言能够以7×103以上的稀释倍率进行判定的情况，或者对于甲型而言能够以8×104以上的稀释倍率进行判定、对于乙型而言能够以8×103以上的稀释倍率进行判定的情况。
B：综合评价不适于A、C中的任意一种的情况。
C：判定时间为8分钟以上且10分钟以下的情况。
D：判定时间超过10分钟的情况、或者能够判定的稀释倍率对于甲型而言为4×104以下、或对于乙型而言为4×103以下的情况。
表1
实施例 能够目视判定甲型的极限倍率 能够目视判定乙型的极限倍率 至浓度温度的时间(min) 综合评价
实施例1 7×10<sup>4</sup> 7×10<sup>3</sup> 4min A
实施例2 8×10<sup>4</sup> 8×10<sup>3</sup> 3min A
实施例3 9×10<sup>4</sup> 9×10<sup>3</sup> 2min A
对比例1 液体试样持续残留于分支毛细管网中 液体试样持续残留于分支毛细管网中 液体试样并未达到检测区而不能检测 D
对比例2 7×10<sup>4</sup> 5×10<sup>3</sup> 6min B
对比例3 6×10<sup>4</sup> 4×10<sup>3</sup> 8min C
对比例4 6×10<sup>4</sup> 4×10<sup>3</sup> 7min C
对比例5 6×10<sup>4</sup> 4×10<sup>3</sup> 7min C
对比例6 5×10<sup>4</sup> 4×10<sup>3</sup> 6min C
2) 对于检测的判断，所使用的颗粒由着色胶乳颗粒变更为荧光胶乳颗粒(micromer-F荧光胶乳颗粒材料聚苯乙烯Corefront Corporation制)，求出试验开始后4分钟后不能用免疫色谱读取器(C11787 Hamamatsu Photonics K.K.制)读取着色线的有无的倍率(能够进行荧光判定的极限倍率)，结果如表2所示。
A：在试验开始后4分钟能够进行荧光判定的极限倍率对于甲型而言为1×10 6 以上、对于乙型而言为1×10 5 以上的情况。
B：综合评价不适于A、C中的任意一种的情况。
C：在试验开始后4分钟能够进行荧光判定的极限倍率对于甲型而言为不足7×10 5 、对于乙型而言不足7×10 4 的情况。
表2
实施例 检测开始后4min能进行荧光判定甲型的极限倍率 检测开始后4min能进行荧光判定甲型的极限倍率 综合评价
实施例1 1×10<sup> 6</sup> 1×10<sup>5</sup> A
实施例2 1×10<sup> 6</sup> 1×10<sup>5</sup> A
实施例3 2×10<sup> 6</sup> 2×10<sup>5</sup> A
对比例1 液体试样持续残留于分支毛细管网中 液体试样持续残留于分支毛细管网中 C
对比例2 8×10<sup> 5</sup> 7×10<sup>4</sup> B
对比例3 1×10<sup> 5</sup> 1×10<sup>4</sup> C
对比例4 1×10<sup> 5</sup> 1×10<sup>4</sup> C
对比例5 1×10<sup> 5</sup> 1×10<sup>4</sup> C
对比例6 2×10<sup> 5</sup> 2×10<sup>4</sup> C
由表1、2的结果可知，本实施方式的液体试样检测试剂盒用膜载体，通过在流路中设置呈螺旋形并且其凸部高度不断变化的脊条2，可以促进被检测物质混匀并提供检测的灵敏度。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种智慧医院液体试样检测试剂盒用膜载体，其特征在于，其是通过检查液体试样中的被检测物质的检测试剂盒用的膜载体，所述膜载体具有至少一个能输送所述液体试样的流路，所述流路形成有产生用于输送所述液体试样的能够产生毛细管作用的毛细管网；
所述毛细管网包括母毛细管和分支毛细管，所述毛细管网产生毛细作用促使所述液体试样由所述母毛细管循环流动或分离至分支毛细管；
所述膜载体还具有用于加入液体试样的设置于所述母毛细管处的加样区和用于可逆性保留液体试样中被检测物质的设置于所述分支毛细管一端的被保留区，液体试样藉由毛细作用从所述加样区向所述被保留区输送；
所述膜载体还包括存在于所述被保留区的探针和隔网，所述探针用于将所述液体试样中的被检测物质进行可逆地保留，所述探针是在着色颗粒、荧光颗粒或量子点微球上结合有抗体或抗原结合片段的颗粒，所述探针形成的颗粒是被所述隔网阻隔在所述被保留区；
所述毛细管网的高度除开膜载体的厚度为0.5~10mm，所述母毛细管的截面最大宽度大于所述分支毛细管的截面最大宽度；沿所述母毛细管至所述分支毛细管的方向，所述毛细管网的截面最大宽度逐渐变小，所述分支毛细管路在设置有所述探针的部位的截面宽度保持一致；
所述分支毛细管壁上设置有脊条，所述脊条沿所述分支毛细管的长度方向呈螺旋设置，以使得每一个所述分支毛细管的截面方向上具有凸起的多个凸部和多个平坦部，并且由于所述脊条沿着所述分支毛细管的长度方向不断螺旋，通过毛细管作用，多个所述凸部之间的空间作为沿着所述分支毛细管的管路中发挥输送液体试样的功能；而在所述凸部和所述平坦部的交截处产生径向的涡流，促使管路边缘部分液体在径向返流至其中央部位，实现不断返混的作用，保持液体试样传输过程中被检测物质能够均匀分布。
2.根据权利要求1所述的膜载体，其特征在于，还具有受挤压部，所述受挤压部受压促使所述液体试样在所述毛细管网内流动。
3.一种智慧医院液体试样检测试剂盒用膜载体的制造方法，其特征在于，为权利要求1所述的膜载体的制造方法，所述制造方法包括采用热塑性塑料形成所述毛细管网结构的工序及在所述分支毛细管网内固定所述探针的工序。
4.一种液体试样检测试剂盒，用以检测所述液体试样中的被检测物质，其特征在于，所述液体试样检测试剂盒包括权利要求1所述的膜载体；所述试剂盒在对应的所述膜载体结合有所述探针的部位设置检测区，所述检测区用于检测出所述被检测物质时产生光学变化信息。
5.根据权利要求4所述的液体试样检测试剂盒，其特征在于，以能与探测所述膜载体的设置有探针的部位，在所述液体试样检测试剂盒的至少一个部分设置所述检测区，所述光学变化是由所述被检测物质与所述探针结合或解除结合过程中产生的，所述检测区是通过光学信息收集机构来实现将光学信息转换数字信息来进行检测的。
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