CN112931317A - 一种提高刀鲚育苗成活率的方法 - Google Patents

一种提高刀鲚育苗成活率的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种提高刀鲚育苗成活率的方法；其步骤包括：选用刀鲚育苗池塘，选取规格整齐，体表银白色，游动敏捷，无病无伤的刀鲚种鱼进行投放，同时投喂糠虾、鲮鱼苗生物饵料；待刀鲚孵化受精后得到刀鲚幼苗；向池塘中投放所述刀鲚幼苗，然后加入脂质复合物与刀鲚育苗用营养物质，进行培育，待刀鲚鱼苗至5～7cm，即可拉网转池分养或销售。其中脂质复合物由异麦芽酮糖醇与蔗糖脂肪酸酯复合制得；上述刀鲚育苗用营养物质包括粗蛋白、葡萄糖、维生素；本发明培育的刀鲚具有较高的成活率与生长率，同时具有较好抗氧化酶活性与肥满度。

Description

一种提高刀鲚育苗成活率的方法
技术领域
本发明属于水产养殖技术领域，特别涉及一种提高刀鲚育苗成活率的方法。
背景技术
长江刀鲚，俗称“江刀”，隶属鲱形目、鳀科、鲚属，属于江海洄游性鱼类，味道鲜美，被誉为“长江三鲜”之首。由于其重要的生态效应和可观的经济价值，刀鲚开发性保护利用成为了热点，许多研究院所和养殖企业对刀鲚的人工繁育养殖技术进行了诸多研究，取得了一定的进展，但出苗率及鱼苗成活率还很低，苗种品质差，限制了该品种的推广养殖。
现有技术如申请公布号CN 103081837 A公开了一种刀鲚苗种池塘培育中敌害防治的方法；在刀鲚人工授精的前1-2天，采用生石灰和漂白粉混合组成的消毒药物进行彻底消毒清塘；对注入刀鲚育苗池的水源进行水质调控及过滤处理；在刀鲚育苗池的四周及上方装设敌害生物防护装置；敌害生物防护装置由钢管桩体、主线、钢丝绳及胶丝网构成，该方法通过药物彻底消毒清塘、进水严格过滤及敌害生物防护装置的设置、优化，最大限度地减少了敌害生物的滋扰，提高了育苗成活率。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有较高成活率与生长率，同时具有较好抗氧化酶活性与肥满度的提高刀鲚育苗成活率的方法。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：
一种脂质复合物由异麦芽酮糖醇与蔗糖脂肪酸酯复合制备得到。
本发明采用由异麦芽酮糖醇与蔗糖脂肪酸酯复合制得的脂质复合物作为用于培育刀鲚育苗的营养物质的成分，其与营养物质中的其他成分起协同作用，为刀鲚鱼生长提供必需养分，进而促进其生长，同时增强了刀鲚的非特异性免疫力，提高了刀鲚的成活率，使其具有较高的生长率与肥满度，原因可能是异麦芽酮糖醇与蔗糖脂肪酸酯相互作用，蔗糖脂肪酸酯能黏附在异麦芽酮糖醇颗粒表面，形成脂质复合物；然后与营养物质中的粗蛋白、葡萄糖、维生素共同作用，为刀鲚生长提供必需养分与微量元素，以维持刀鲚的正常生理机能，对刀鲚体内的氧化还原反应具有调节作用，提高刀鲚体内抗氧化酶的活性，即超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性得到了提升，增强了刀鲚的非特异性免疫力，促进其生长，进而提高了刀鲚鱼的成活率与生长率，同时具有优良的肥满度。
优选地，脂质复合物的制备方法为：按重量份计，将100～200重量份异麦芽酮糖醇溶于35～55重量份浓度为0.1～0.25mol/L的氢氧化钾溶液中，在80～90℃搅拌18～24h，形成A液；将55～75重量份蔗糖脂肪酸酯溶于50～70重量份浓度为0.1～0.25mol/L的氢氧化钾溶液中，在80～90℃下混合均匀，形成B液，然后将A液与B液混合均匀，调节温度至35～65℃时继续反应1～3h，加入酸溶液进行中和，冷却至室温，得到脂质复合物。
本发明还提供了一种提高刀鲚育苗成活率的方法。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：
一种提高刀鲚育苗成活率的方法，包括以下步骤：
(1)选用刀鲚育苗池塘，选取规格整齐，体表银白色，游动敏捷，无病无伤的刀鲚种鱼进行投放，同时投喂糠虾、鲮鱼苗生物饵料；待刀鲚孵化受精后得到刀鲚幼苗；
(2)向池塘中投放上述刀鲚幼苗，然后加入脂质复合物与刀鲚育苗用营养物质，进行培育，待刀鲚鱼苗至5～7cm，即可拉网转池分养或销售。
优选地，刀鲚种鱼按照1:2的雌雄比例投入池塘，投放密度为200～500/667m2。
优选地，生物饵料中，糠虾的用量为25～40kg/667m2、鲮鱼苗的用量为35～55kg/667m2。
优选地，刀鲚幼苗的投放密度为200～300/667m2。
优选地，刀鲚育苗用营养物质包括粗蛋白、葡萄糖、维生素。
更优选地，脂质复合物用量为1～2.5kg/667m2、粗蛋白用量为3～8kg/667m2、葡萄糖用量为0.5～1.5kg/667m2、维生素用量为0.02～0.08kg/667m2。
更优选地，维生素为维生素C与维生素E混合物，其中维生素C与维生素E的重量比1～2:1。
优选地，刀鲚育苗成活率高于97.5％。
本发明还公开了脂质复合物在提高刀鲚幼苗非特异性免疫功能中的用途。
本发明还公开了乙酰基升麻醇木糖苷在提高刀鲚育苗成活率中的用途。
为了进一步提高刀鲚育苗的成活率与非特异性免疫功能，采取的优选措施还包括：
在营养物质中添加0.005～0.01kg/667m2的乙酰基升麻醇木糖苷，该乙酰基升麻醇木糖苷与脂质复合物、粗蛋白、葡萄糖、维生素相互作用，投放至池塘中，进一步提高了刀鲚育苗的成活率，可能是因为乙酰基升麻醇木糖苷为刀鲚生长提高了碳水化合物，即生长所需的营养物质，其与其他成分起协同作用，提高了超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性，进而提高了刀鲚育苗的成活率与非特异性免疫功能。
本发明由于采用由异麦芽酮糖醇与蔗糖脂肪酸酯复合制得的脂质复合物作为用于培育刀鲚育苗的营养物质的成分，因而具有如下有益效果：该脂质复合物与营养物质中的其他成分起协同作用，为刀鲚鱼生长提供必需养分，进而促进其生长，同时增强了刀鲚的非特异性免疫力，提高了刀鲚鱼的成活率，使其具有较高的生长率与肥满度，原因可能是异麦芽酮糖醇与蔗糖脂肪酸酯相互作用，蔗糖脂肪酸酯能黏附在异麦芽酮糖醇颗粒表面，形成脂质复合物；然后与粗蛋白、葡萄糖、维生素共同作用，为刀鲚生长提供必需养分与微量元素，以维持刀鲚的正常生理机能，对刀鲚体内的氧化还原反应具有调节作用，提高刀鲚体内抗氧化酶的活性，即超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性得到了提升，增强了刀鲚的非特异性免疫力，促进其生长，进而提高了刀鲚鱼的成活率与生长率，同时具有优良的肥满度。因此，本发明是一种具有较高成活率与生长率，同时具有较好抗氧化酶活性与肥满度的提高刀鲚育苗成活率的方法。
附图说明
图1为实施例1中脂质复合物的SEM图；
图2为刀鲚的成活率；
图3为刀鲚的体质量特定生长率；
图4为刀鲚的肥满度。
具体实施方式
本发明中的实施例中，池塘处理与刀鲚种鱼培育方法为：
选取刀鲚育苗池塘，用生石灰与漂白粉混合使用清塘，其中生石灰与漂白粉混合物的用量为75kg/667m2，并曝晒10d，用双层60目筛网过滤注入河水，水温为18℃；选取规格整齐，体表银白色，游动敏捷，无病无伤的刀鲚种鱼，按照1:2的雌雄比例投入至上述刀鲚育苗池塘中，投放密度为300尾/667m2，同时投喂糠虾、鲮鱼苗生物饵料，其中糠虾的用量为30kg/667m2、鲮鱼苗的用量为40kg/667m2；1～2个月后，开启刀鲚种鱼培育池水车增氧机形成水流，同时用浓度为1.0mg/cm3的敌百虫杀灭浮游动物；1～2个月后，刀鲚种鱼孵化受精后得到刀鲚幼苗；
选用面积为2800m2的室外池塘，长宽比为3:1，坡比为1:2，深度为1.8m，然后将其分成7个试验区域，编号分别为①、②、③、④、⑤、⑥、⑦，每个区域均采用生石灰与漂白粉混合使用清塘，水温为17℃，然后进行刀鲚育苗的试验。
以下结合具体实施方式和附图对本发明的技术方案作进一步详细描述：
实施例1
一种提高刀鲚育苗成活率的方法，包括以下步骤：
向①号池塘中投放刀鲚幼苗，投放密度为300尾/667m2，然后加入脂质复合物与刀鲚用营养物质，其中脂质复合物用量为1.8kg/667m2、粗蛋白用量为4.5kg/667m2、葡萄糖用量为0.8kg/667m2、维生素用量为0.04kg/667m2，其中维生素C与维生素E的重量比1.5:1，进行强化培育，待刀鲚鱼苗长至约6cm，即可拉网转池分养或销售。
进一步地，上述脂质复合物的制备方法为：按重量份计，将120重量份异麦芽酮糖醇溶于45重量份浓度为0.1mol/L的氢氧化钾溶液中，在90℃搅拌20h，形成A液；将60重量份蔗糖脂肪酸酯溶于65重量份浓度为0.1mol/L的氢氧化钾溶液中，在90℃下混合均匀，形成B液，然后将A液与B液混合均匀，调节温度至40℃时继续反应2h，加入浓度为0.1mol/L盐酸溶液进行中和，冷却至室温，得到脂质复合物。
实施例2
一种提高刀鲚育苗成活率的方法，包括以下步骤：
向②号池塘中投放刀鲚幼苗，投放密度为250尾/667m2，然后加入脂质复合物与刀鲚用营养物质，其中脂质复合物用量为2.1kg/667m2、粗蛋白用量为6.3kg/667m2、葡萄糖用量为1.1kg/667m2、维生素用量为0.04kg/667m2，其中维生素C与维生素E的重量比2:1，进行强化培育，待刀鲚鱼苗长至约7cm。
进一步地，上述脂质复合物的制备方法为：按重量份计，将150重量份异麦芽酮糖醇溶于55重量份浓度为0.1mol/L的氢氧化钾溶液中，在85℃搅拌24h，形成A液；将50重量份蔗糖脂肪酸酯溶于55重量份浓度为0.1mol/L的氢氧化钾溶液中，在85℃下混合均匀，形成B液，然后将A液与B液混合均匀，调节温度至35℃时继续反应2h，加入浓度为0.1mol/L盐酸溶液进行中和，冷却至室温，得到脂质复合物。
实施例3
一种提高刀鲚育苗成活率的方法，包括以下步骤：
向③号池塘中投放刀鲚幼苗，投放密度为250尾/667m2，然后加入脂质复合物与刀鲚用营养物质，其中脂质复合物用量为2.5kg/667m2、粗蛋白用量为4.5kg/667m2、葡萄糖用量为0.8kg/667m2、维生素用量为0.04kg/667m2，其中维生素C与维生素E的重量比1.5:1，进行强化培育，待刀鲚鱼苗长至约6cm；
进一步地，本实施中脂质复合物的制备方法同实施例1。
实施例4
一种提高刀鲚育苗成活率的方法，包括以下步骤：
向④号池塘中投放刀鲚幼苗，投放密度为300尾/667m2，然后加入脂质复合物与刀鲚用营养物质，其中脂质复合物用量为1.8kg/667m2、乙酰基升麻醇木糖苷用量为0.007kg/667m2、粗蛋白用量为4.5kg/667m2、葡萄糖用量为0.8kg/667m2、维生素用量为0.04kg/667m2、，其中维生素C与维生素E的重量比1.5:1，进行强化培育，待刀鲚鱼苗长至约6cm；
进一步地，本实施中脂质复合物的制备方法同实施例1。
实施例5
一种提高刀鲚育苗成活率的方法，包括以下步骤：
向⑤号池塘中投放刀鲚幼苗，投放密度为300尾/667m2，然后加入脂质复合物与刀鲚用营养物质，其中脂质复合物用量为1.8kg/667m2、乙酰基升麻醇木糖苷的用量为0.01kg/667m2、粗蛋白用量为4.5kg/667m2、葡萄糖用量为0.8kg/667m2、维生素用量为0.04kg/667m2、，其中维生素C与维生素E的重量比1.5:1，进行强化培育，待刀鲚鱼苗长至约6cm；
进一步地，本实施中脂质复合物的制备方法同实施例1。
对比例1
一种提高刀鲚育苗成活率的方法，其他步骤均与实施例1相同，与实施例1不同的是：⑥号池塘刀鲚育苗中将脂质复合物替换成异麦芽酮糖醇。
对比例2
一种提高刀鲚育苗成活率的方法，其他步骤均与实施例1相同，与实施例1不同的是：⑦号池塘刀鲚育苗中将脂质复合物替换成蔗糖脂肪酸酯。
试验例1
1.脂质复合物表面形貌的测定
本试验采用扫描电子显微镜对制得脂质复合物进行形貌表征。
图1为实施例1中脂质复合物的SEM图。由图1可以看出，在脂质复合物表面可以看到异麦芽酮糖醇和蔗糖脂肪酸酯粘连在一起形成类似微胶囊的形态；即异麦芽酮糖醇覆盖在蔗糖脂肪酸酯表面形成脂质复合物。
试验例2
1.刀鲚成活率的测定
本试验根据刀鲚的投放密度先计算出每个池塘区域投放的初始刀鲚幼苗数量，具体投放数量以实际为准，再计算出最后得到的刀鲚数量，其成活率计算公式如下：
成活率(SR)＝刀鲚最后数量/刀鲚初始数量×100％
图2为刀鲚的成活率。由图2可以看出，实施例1-3中刀鲚的成活率高于97.5％，实施例4-5中刀鲚的成活率高于99％，对比实施例1与对比例1、对比例2，实施例1中刀鲚的成活率高于对比例1、对比例2，这说明将异麦芽酮糖醇与蔗糖脂肪酸酯复合制得脂质复合物作为刀鲚育苗用营养物质的成分，提高了刀鲚的成活率，可能是因为该脂质复合物与其他营养物质复合为刀鲚鱼生长提供必需养分与微量元素，增强了刀鲚的非特异性免疫力，进而促进其生长，提高其成活率；对比实施例1与实施例4-5，实施例4-5中刀鲚的成活率高于实施例1，这说明在刀鲚育苗用营养物质中添加乙酰基升麻醇木糖苷，进一步提高了刀鲚的成活率。
2.刀鲚体质量特定生长率的测定
首先随机抽取初始投放的20尾刀鲚幼苗，对其称重，随机抽出每个池塘区域中的20尾刀鲚称重，计算刀鲚的体质量特定生长率，计算公式如下：
SGRm(％/d)＝100×[(lnm2-lnm1)/(t2-t1)]
式中：m1、m2分别为t1、t2时刀鲚的体质量。
图3为刀鲚的体质量特定生长率。由图3可以看出，实施例1-3的体质量特定生长率高于1.2％/d，对比实施例1与对比例1、对比例2，实施例1的体质量特定生长率高于对比例1、对比例2，这说明将异麦芽酮糖醇与蔗糖脂肪酸酯复合制得脂质复合物作为刀鲚育苗用营养物质的成分，提高了刀鲚的体质量特定生长率，可能是因为该脂质复合物与其他营养物质复合为刀鲚鱼生长提供必需养分与微量元素，进而促进其生长，即提高了刀鲚的体质量特定生长率；对比实施例1与实施例4-5，实施例4-5中刀鲚的体质量特定生长率与实施例1无明显差别，这说明在刀鲚育苗用营养物质中添加乙酰基升麻醇木糖苷，对刀鲚的体质量特定生长率无明显影响。
3.刀鲚非特异性免疫功能的测定
刀鲚育苗养殖结束后，每个池塘区域随机取10尾刀鲚，用蒸馏水将试验鱼洗净，擦干体表水分，去除鳞片，放在冰盘中解剖，取出试验鱼肝脏及大部分肌肉。由于刀鲚较小、肌间刺小而多，所以在肌肉样品中没有去除鱼皮和肌间刺。样品制备后置于-80℃冰箱内保存待测。肝脏样品测定时，先将其放在0～5℃冰箱中解冻，取约0.1g样品，加入10倍体积的生理盐水，冰浴匀浆，冷冻离心(0～5℃，3000r/min，10min)，取其上清液即刻测定各种酶活性平均值。
超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性测定所用的试剂盒均购自上海酶联生物科技有限公司，并按试剂盒说明书要求操作。
SOD活性测定(比活力)：采用分光光度计法，在37℃条件下，每毫克组织蛋白与1mL反应液作用4min后，SOD抑制率达50％时所对应的SOD量为一个SOD活力单位(U/mg)；
CAT活性测定：测定方法参考Aebi(1984)，在37℃条件下，每克组织蛋白中CAT每秒钟分解吸光度为0.50～0.55的底物中的CAT相对量为一个CAT的活力单位(U/mg)；
GSH-PX活性测定：采用分光光度计法，在37℃条件下，每毫克蛋白质，每分钟扣除非酶反应的作用，使反应体系中GSH浓度降低1μmol/L为一个酶活力单位(U/mg)。
表1刀鲚非特异性免疫功能中各种酶活性测定结果
Figure BDA0002988871220000061
Figure BDA0002988871220000071
由表1可以看出，实施例1-3中SOD活性高于36U/mg、CAT活性高于18.3U/mg、GSH-PX活性高于17.3U/mg，对比实施例1与对比例、对比例2，实施例1的SOD活性、CAT活性与GSH-PX活性均高于对比例1、对比例2，这说明相比于异麦芽酮糖醇、蔗糖脂肪酸酯的单独使用，将异麦芽酮糖醇与蔗糖脂肪酸酯复合制得脂质复合物作为刀鲚育苗用营养物质的成分，提高了刀鲚的抗氧化酶活性，进而提高刀鲚的抗氧化能力，增强其非特异性免疫功能；对比实施例1与实时汇率4-5，实施例4-5的SOD活性高于实施例1，CAT活性与实施例1无明显区别，GSH-PX活性高于实施例1，这说明在刀鲚育苗用营养物质中添加乙酰基升麻醇木糖苷，进一步提高了刀鲚体内SOD活性与GSH-PX活性，而对刀鲚的CAT活性无明显影响。
4.刀鲚肥满度的测定
刀鲚育苗养殖结束后，每个池塘区域随机取20尾刀鲚，测定刀鲚的体长与质量；肥满度的计算公式如下：
F(g/cm3)＝100×m/L3
式中：F为刀鲚的肥满度；m为刀鲚的质量；L为刀鲚的体长。
图4为刀鲚的肥满度。由图4可以看出，实施例1-3的肥满度高于0.75g/cm3，对比实施例1与对比例1、对比例2，实施例1的肥满度高于对比例1、对比例2，这说明将异麦芽酮糖醇与蔗糖脂肪酸酯复合制得脂质复合物作为刀鲚育苗用营养物质的成分，提高了刀鲚的成活率，可能是因为该脂质复合物与其他营养物质复合为刀鲚鱼生长提供必需养分与微量元素，提高刀鲚的肥满度；对比实施例1与实施例4-5，实施例4-5中刀鲚的肥满度与实施例1几乎无区别，这说明在刀鲚育苗用营养物质中添加乙酰基升麻醇木糖苷，对刀鲚的肥满度几乎无影响。
本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。
以上实施方式仅用于说明本发明，而并非对本发明的限制，本领域的普通技术人员，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，还可以做出各种变化和变型。因此，所有等同的技术方案、也属于本发明的范畴，本发明的专利保护范围应由权利要求限定。

Claims (10)

1.一种脂质复合物，由异麦芽酮糖醇与蔗糖脂肪酸酯复合制备得到。
2.根据权利要求1所述的一种脂质复合物，其特征在于：所述脂质复合物的制备方法为：将异麦芽酮糖醇与蔗糖脂肪酸酯分别溶于碱液中，并在80～90℃下混合均匀，调节温度至35～65℃时继续进行反应，加入酸溶液进行中和，冷却至室温，得到脂质复合物。
3.一种提高刀鲚育苗成活率的方法，包括以下步骤：
(1)选用刀鲚育苗池塘，选取规格整齐，体表银白色，游动敏捷，无病无伤的刀鲚种鱼进行投放，同时投喂糠虾、鲮鱼苗生物饵料；待刀鲚孵化受精后得到刀鲚幼苗；
(2)向池塘中投放所述刀鲚幼苗，然后加入权利要求1所述的脂质复合物与刀鲚育苗用营养物质，进行培育，待刀鲚鱼苗至5～7cm，即可拉网转池分养或销售。
4.根据权利要求3所述的一种提高刀鲚育苗成活率的方法，其特征在于：所述刀鲚种鱼按照1:2的雌雄比例投入池塘，投放密度为200～500/667m2。
5.根据权利要求3所述的一种提高刀鲚育苗成活率的方法，其特征在于：所述刀鲚育苗用营养物质包括粗蛋白、葡萄糖、维生素。
6.根据权利要求3所述的一种提高刀鲚育苗成活率的方法，其特征在于：所述生物饵料中，糠虾的用量为25～40kg/667m2、鲮鱼苗的用量为35～55kg/667m2。
7.根据权利要求5所述的一种提高刀鲚育苗成活率的方法，其特征在于：所述脂质复合物用量为1～2.5kg/667m2、粗蛋白用量为3～8kg/667m2、葡萄糖用量为0.5～1.5kg/667m2、维生素用量为0.02～0.08kg/667m2。
8.根据权利要求3所述的一种提高刀鲚育苗成活率的方法，其特征在于：所述刀鲚育苗成活率高于97.5％。
9.权利要求1所述的脂质复合物在提高刀鲚幼苗非特异性免疫功能中的用途。
10.乙酰基升麻醇木糖苷在提高刀鲚育苗成活率中的用途。
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