CN112931207B - 一种脱毒试管芋的育苗方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种脱毒试管芋的育苗方法，包括以下步骤，S1：脱毒试管芋诱导；S2：育苗基质准备；所述育苗基质的配方为草炭：蛭石∶沙∶土＝2∶1∶1∶1，拌均时加入适量自来水；S3：将准备好的育苗基质分装在营养钵中；所述营养钵的规格为8厘米*8厘米；每个所述营养钵中装入2/3基质；S4：脱毒试管芋清洗；定值当天，将脱毒试管芋从培养基中取出，洗净培养基，拔除根系，去除弱小及形状不规整的；S5：定植与管理；2月下旬～3月上旬，在防虫网纱棚内进行试管芋定值育苗，试管芋定植完成后浇水，第一次浇透水，以后每隔3～5天浇一次水，棚内温度保持15℃～20℃。本发明中的育苗方法能够使试管芋的成活率达到100％，且植株生长健壮，根系发达。

Description

一种脱毒试管芋的育苗方法

技术领域

本发明涉及芋育苗技术领域，尤其涉及一种脱毒试管芋的育苗方法。

背景技术

芋(Colocasia escultenta(L.)Schott.)为天南星科(Araceae)芋属(Colocasia)多年生宿根草本植物，芋球茎鲜重中含有淀粉69.6％～73.7％、蛋白质1.75％～2.3％、脂类0.47％～0.68％、钙0.059％～0.169％、磷0.113％～0.274％、铁0.0042％～0.0050％，还含有丝氨酸、天门冬氨酸、丙氨酸、精氨酸等18种氨基酸，K、Zn、Mn等19种微量元素，以及维生素B1、B2、D2、花青甙、甾醇、过氧化氢酶、胡萝卜素、水溶性多糖、杂多糖等，其球茎富含淀粉，即可鲜食，又可用来加工生产淀粉和酒精。芋的非淀粉多糖，能降低人们罹患直肠癌的机会，具不同程度地增强细胞免疫和体液免疫的功能。

芋是中国古老的作物之一。原产我国及印度马来半岛的热带沼泽地带。芋的球茎富含淀粉，是南太平洋许多国家的主要食物来源，在斐济、汤加、库克群岛等国家，芋不仅是基本食物，还是其外汇收入的稳定渠道。芋在我国栽培历史悠久，分布极广，南方地区以魁芋为主多种类型并存，长江流域以多子芋为主。芋既可鲜食，又可进行深加工。加工的产品出口日本、韩国及东南亚国家。2003年全世界芋的总出口量为12.03亿吨，主要出口国是中国，年出口量为11.45亿吨，占世界出口总量的95.18％。芋作为我国主要的土特产品，进一步发展其生产和出口业具有广阔的前景。

芋长期利用球茎进行营养繁殖，已普遍受到芋花叶病毒的侵染。据不完全统计，我国芋的种植面积约为200～300万亩，有70％左右的芋被芋花叶病毒感染。感染病毒的芋产量下降30％～70％。另外，常规芋用种量大，繁殖系数低，每亩需用种100～150kg，不利于芋新品种的推广。严重制约了芋的生产、出口及国际间种质资源的交流。进行脱毒试管芋诱导技术研究，是目前解决该问题的最好途径。

20世纪70年代未，日本、美国、哥斯达黎加、菲律宾等国的科学家先后研究了芋花叶病毒对芋产量的影响，并采用茎尖离体培养、种子营救培养以及茎尖离体培养和热疗法相结合来生产芋脱毒苗。我国90年代初，上海的曹欢欢、烟台的毕可华等先后获得了脱毒试管苗。试管苗移栽成活率低，栽培技术要求高，不能直接应用于实际生产。脱毒试管芋诱导技术的发明及应用，解决了芋生产中存在的问题，主要表现在：第一，脱毒试管芋是由芋茎尖生长点组培快繁而来，脱除了严重危害芋生产的芋花叶病毒，解决了芋因病毒病而引起的退化问题，提高了芋的品质及产量；第二，脱毒试管芋体积小，繁殖速度快，可工厂化生产；第三，与芋试管苗相比，试管芋育苗简单，成活率高且试管芋更耐贮存，为芋组培技术应用于生产实际提供了更为有效的方法；第四，脱毒试管芋成功消除芋头花叶病毒等病害，为国际和地区间芋种质资源交流。

芋的试管苗在育苗之前，需开瓶炼苗，这是因为芋试管苗生长在恒温、恒光照、无菌和有完全营养供应的与外界自然条件相差很大的环境中，未经充分炼苗就被移出极易死亡。

一般在实际应用中，试管芋较试管苗有优势，因试管芋是休眠器官，运输方便，耐贮藏，路途损耗小；试管苗则易失水枯萎，不便远途运输，短时间存放都会影响其成活率。因此，芋脱毒组培快繁以诱导成脱毒试管芋再进行育苗为最佳选择。

发明内容

针对上述存在的问题，本发明旨在提供一种脱毒试管芋的育苗方法，通过基质和营养钵的选择，能够使试管芋的成活率达到100％，且植株生长健壮，根系发达。

为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案如下：

一种脱毒试管芋的育苗方法，其特征在于，包括以下步骤，

S1：脱毒试管芋诱导；

S2：育苗基质准备；

S3：将准备好的育苗基质分装在营养钵中；

S4：脱毒试管芋清洗；

S5：定植与管理。

进一步的，步骤S1中脱毒试管芋诱导的具体操作包括以下步骤，

S101：芋脱毒再生植株的获得；将芋茎尖诱导生成丛生芽，从丛生芽中挑选切0.3-0.5㎜大小的茎尖分生组织进行培养，诱导形成具3-4片叶、4.5-5.0㎝高的再生植株；将再生植株进行芋花叶等病毒检测，留下脱除病毒的阴性材料进行增殖快繁，获得脱毒再生植株；

S102：将芋脱毒再生植株置于每瓶40ml的培养基中培养10d；所述培养基的成分包括：MS+ZT 1.0㎎/L+G31.0㎎/L+NAA 0.3㎎/L+蔗糖3％/L+琼脂6.0g/L；

S103：向培养瓶中再加入1/2～3/4MS+蔗糖6-8％/L的培养基30ml，继续培养15-20天，获得整齐度一致的脱毒试管芋。

进一步的，脱毒试管芋定植前15天，将经过消毒的育苗基质充分拌均，用塑料薄膜覆盖堆放。

进一步的，所述育苗基质的配方为草炭：蛭石∶沙∶土＝2∶1∶1∶1，拌均时加入适量自来水。

进一步的，步骤S3的具体操作包括，育苗基质堆放15天后即可装营养钵，所述营养钵的规格为8厘米*8厘米；每个所述营养钵中装入2/3基质，不能装满，也不要装实。

进一步的，定值当天，将脱毒试管芋从培养瓶中取出，洗净培养基，拔除根系，去除弱小及形状不规整的，拔除根系时不要损伤试管芋。

进一步的，步骤S5的具体操作包括，2月下旬～3月上旬，在防虫网纱棚内进行试管芋定值育苗，定值时，用竹签将营养钵中的育苗基质拨开1厘米～1.5厘米深的穴，将试管芋顶芽朝上放入营养钵中，用手轻轻压实育苗基质即可；

试管芋定植完成后浇水，第一次浇透水，以后每隔3～5天浇一次水，棚内温度保持15℃～20℃。

进一步的，用于定值的试管芋顶芽充实完整、大小一致，质量不小于0.6克。

本发明的有益效果是：

1、本发明的脱毒试管芋育苗方法无需炼苗，节约时间。脱毒试管苗在育苗之前，需炼苗一周，这是因为脱毒试管苗生长在恒温、恒光照、无菌和有完全营养供应的培养室里，与外界自然环境条件相差很大，未经充分炼苗就被移出极易死亡。而本发明中脱毒试管芋无需炼苗，育苗前直接从恒温、恒光照、无菌的培养室里取出，洗净培养基，定植于适宜的基质中，不影响其成活率，节约了一周的炼苗时间，降低了人力物力。

2、本发明的脱毒试管芋育苗方法管理简单，成活率高，节约成本。脱毒试管苗育苗前期需要盖膜盖遮阳网保温保湿防晒，其成活率高的可达95％，而脱毒试管芋定植后只需定期浇水，成活率可达100％。脱毒试管芋育苗管理操作简单，成活率高，节约生产成本，易于推广。

3、本发明的脱毒试管芋育苗方法中脱毒试管芋耐贮藏，便于运输，可在芋产区大面积推广，提高芋产品市场竞争力。因脱毒试管芋是营养休眠器官，方法得当可长期保存而不影响其成活率；而试管苗不论如何保存，都容易失水枯萎，降低其成活率，只能在附件地区进行推广种植，影响推广面积及效率。另外，脱毒试管芋因脱除了芋花叶等多种病毒，提高了芋产品的品质及产量，增强了产品市场竞争力，提高了单位面积的经济效益。

4、本发明的脱毒试管芋育苗方法大田移栽方便，成活率高。当脱毒试管芋育苗至10-15厘米移栽大田时，只需将用8*8厘米的营养钵撕破，带基质一起种植于大田，芋苗的根系没有损伤，无需缓苗，成活率高。如果是用穴盘育苗，则需将苗拔出，这样多少都会对苗的根系有所损伤，移栽后需要缓苗，影响成活率，且这种比例的混合基质在移栽时不易散落，利于苗的成活。

5、本发明中还公开了脱毒试管芋的诱导方法，该诱导方法中脱毒试管芋由芋茎尖生长点组培快繁而来，成功消除了严重危害芋生产的芋花叶病毒，解决了芋因病毒病而引起的芋种性退化问题，提高了芋的品质及产量；且脱毒试管芋的体积小，重量轻，便于运输，适用于本申请中脱毒试管芋的育苗方法。

附图说明

图1为本发明中芋脱毒再生植株在MS+ZT 1.0㎎/L+G31.0㎎/L+NAA 0.3㎎/L+蔗糖3％/L+琼脂6.0g/L培养基中培养第1天时的生长情况；

图2为本发明中芋脱毒再生植株在MS+ZT 1.0㎎/L+G31.0㎎/L+NAA 0.3㎎/L+蔗糖3％/L+琼脂6.0g/L培养基中培养第10天时的生长情况；

图3为本发明中在MS+ZT 1.0㎎/L+G31.0㎎/L+NAA 0.3㎎/L+蔗糖3％/L+琼脂6.0g/L培养基中加入1/2～3/4MS+蔗糖6-8％/L培养基第1天芋脱毒再生植株的生长情况；

图4为本发明中在MS+ZT 1.0㎎/L+G31.0㎎/L+NAA 0.3㎎/L+蔗糖3％/L+琼脂6.0g/L培养基中加入1/2～3/4MS+蔗糖6-8％/L培养基第15天时芋脱毒再生植株的生长情况；

图5为本发明中在MS+ZT 1.0㎎/L+G31.0㎎/L+NAA 0.3㎎/L+蔗糖3％/L+琼脂6.0g/L培养基中加入1/2～3/4MS+蔗糖6-8％/L培养基，与不加入1/2～3/4MS+蔗糖6-8％/L培养基在相同时间下芋脱毒再生植株的生长情况对比结果。

具体实施方式

为了使本领域的普通技术人员能更好的理解本发明的技术方案，下面结合附图和实施例对本发明的技术方案做进一步的描述。

实施例一：

本实施例中选用鄂芋1号的中号脱毒试管芋(不同大小试管芋的分级标准为：大试管芋重≥1g；0.5g≤中试管芋重＜1g；小试管芋重＜0.5g)进行育苗，具体的育苗步骤包括：

S1：脱毒试管芋诱导；

具体的，S101：芋脱毒再生植株的获得；将芋茎尖诱导生成丛生芽，从丛生芽中挑选切0.3-0.5㎜大小的茎尖分生组织进行培养，诱导形成具3-4片叶、4.5-5.0㎝高的再生植株；将再生植株进行芋花叶等病毒检测，留下脱除病毒的阴性材料进行增殖快繁，获得脱毒再生植株；

S102：将芋脱毒再生植株置于每瓶40ml的培养基中培养10d；所述培养基的成分包括：MS+ZT 1.0㎎/L+G31.0㎎/L+NAA 0.3㎎/L+蔗糖3％/L+琼脂6.0g/L；芋脱毒再生植株在该培养基中培养第1天时的生长情况如附图1所示，培养第10天时的生长情况如附图2所示。

S103：向培养瓶中再加入1/2～3/4MS+蔗糖6-8％/L的培养基30ml，继续培养15-20天，获得整齐度一致的脱毒试管芋。在培养瓶中刚加入1/2～3/4MS+蔗糖6-8％/L和加入后15天时芋脱毒再生植株的生长情况分别如附图3和附图4所示。

在脱毒试管芋诱导的过程中，芋脱毒再生植株培养10天后加入1/2～3/4MS+蔗糖6-8％/L的培养基与不加入1/2～3/4MS+蔗糖6-8％/L的培养基继续培养相同时间后，芋脱毒再生植株的生长情况对比如附图5所示，在附图5中，(a)瓶中没有加1/2～3/4MS+蔗糖6-8％/L培养基，(b)瓶中有加入1/2～3/4MS+蔗糖6-8％/L培养基。从附图5中可以看出，没有加1/2～3/4MS+蔗糖6-8％/L的培养基的再生植株生长势旺盛，试管芋膨大缓慢，而加入1/2～3/4MS+蔗糖6-8％/L的培养基的再生植株逐渐枯萎，试管芋膨大快速。一般不加1/2～3/4MS+蔗糖6-8％/L的培养基的再生植株需要40-50天才能获得可育苗的试管芋，而加入1/2～3/4MS+蔗糖6-8％/L的再生植株只需25-30天就能获得形状完整，大小一致且能进行育苗的试管芋。

S2：育苗基质准备；

具体的，脱毒试管芋定植前15天，将经过消毒的育苗基质充分拌均，用塑料薄膜覆盖堆放；所述育苗基质的配方为草炭：蛭石∶沙∶土＝2∶1∶1∶1，拌均时加入适量自来水。

S3：将准备好的基质分装在营养钵中；

具体的，育苗基质堆放15天后即可装营养钵，所述营养钵的规格为8厘米*8厘米；每个所述营养钵中装入2/3基质，不能装满，也不要装实。

S4：脱毒试管芋清洗；

具体的，定值当天，将脱毒试管芋从培养基中取出，洗净培养基，拔除根系，去除弱小及形状不规整的，拔除根系时不要损伤试管芋。

S5：定值与管理。

具体的，3月上旬，在防虫网纱棚内进行试管芋定值育苗，定值时，用竹签将营养钵中的育苗基质拨开1厘米～1.5厘米深的穴，将试管芋顶芽朝上放入营养钵中，用手轻轻压实育苗基质即可；

试管芋定植完成后浇水，第一次浇透水，以后每隔3～5天浇一次水，棚内温度保持15℃～20℃。

进一步的，用于定值的试管芋顶芽充实完整、大小一致，质量不小于0.6克。

进一步的，本实施例中还对5种不同的育苗基质进行了对比试验，5种不同的育苗基质分别为：①草炭：沙：土＝1：2：1；②草炭：沙：土＝1：1：1；③草炭：沙：土＝2：1：1；④草炭：珍珠岩：土＝2：1：1；⑤草炭：珍珠岩：沙：土＝2：1：1：1；每种基质种植试管芋47株。2月中下旬种植，4月上旬移栽时调查试管芋的成活率、株高、叶片长/宽、生根情况，结果如下表1所示。

表1试管芋不同基质育苗调查结果

从表1中可以看出，试管芋在②基质中的成活率达到100％，株高最高为4.7cm，其次是⑤基质，成活率和株高分别为92.9％、4.3cm，但是⑤基质中试管芋的叶片长/宽与生根情况都比②基质的大和多，即⑤基质中试管芋植株的生长势较②基质的好，因此综合多项因素，⑤基质用于试管芋的育苗较合适。

实施例二：

本实施例中选用鄂芋1号的中号脱毒试管芋(不同大小试管芋的分级标准为：大试管芋重≥1g；0.5g≤中试管芋重＜1g；小试管芋重＜0.5g)进行育苗，具体的育苗步骤包括：

S1：脱毒试管芋诱导；

该步骤的具体操作与实施例一中完全相同。

S2：育苗基质准备；

具体的，脱毒试管芋定植前15天，将经过消毒的育苗基质充分拌均，用塑料薄膜覆盖堆放；所述育苗基质的配方为草炭：蛭石∶沙∶土＝2∶1∶1∶1，拌均时加入适量自来水。

S3：将准备好的基质分装在营养钵中；

具体的，育苗基质堆放15天后即可装营养钵，所述营养钵的规格为8厘米*8厘米；每个所述营养钵中装入2/3基质，不能装满，也不要装实。

S4：脱毒试管芋清洗；

具体的，定值当天，将脱毒试管芋从培养基中取出，洗净培养基，拔除根系，去除弱小及形状不规整的，拔除根系时不要损伤试管芋。

S5：定值与管理。

具体的，3月上旬，在防虫网纱棚内进行试管芋定值育苗，定值时，用竹签将营养钵中的育苗基质拨开1厘米～1.5厘米深的穴，将试管芋顶芽朝上放入营养钵中，用手轻轻压实育苗基质即可；

试管芋定植完成后浇水，第一次浇透水，以后每隔3～5天浇一次水，棚内温度保持15℃～20℃。

进一步的，用于定值的试管芋顶芽充实完整、大小一致，质量不小于0.6克。

进一步的，本实施例中还对6种不同的育苗容器进行了对比试验，6中不同的育苗容器分别为：穴盘：①54孔②63孔③70孔；营养钵：④8*8厘米⑤9*9厘米⑥10*8厘米；穴盘每处理3个，重复3次；营养钵每处理25个，重复3次。2月中下旬种植，4月上旬移栽时调查试管芋的成活率，结果如表2所示。

表2试管芋不同育苗容器调查结果

从表2中可以看出，试管芋在营养钵中的成活率较穴盘中的高，④号营养钵中的成活率达到100％，其次是⑤号营养钵。④⑤⑥营养钵中的植株生长健壮，根系发达，移栽大田时更容易，只需将营养钵撕开，连基质一起定植，不伤苗不伤根，易成活，操作方便；而穴盘中植株移栽时需将苗拔出来，这个过程有可能损伤苗和根系，影响苗的成活；另外④营养体较于⑤⑥营养钵体积小，节约基质，因此试管芋育苗用8*8厘米的营养钵较好。

以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

Claims (3)

1.一种脱毒试管芋的育苗方法，其特征在于，包括以下步骤，

S1：脱毒试管芋诱导；

S2：育苗基质准备；

S3：将准备好的育苗基质分装在营养钵中；

S4：脱毒试管芋清洗；

S5：定植与管理；

步骤S1中脱毒试管芋诱导的具体操作包括以下步骤，

S101：芋脱毒再生植株的获得；将芋茎尖诱导生成丛生芽，从丛生芽中挑选切0.3-0.5㎜大小的茎尖分生组织进行培养，诱导形成具3-4片叶、4.5-5.0㎝高的再生植株；将再生植株进行芋花叶等病毒检测，留下脱除病毒的阴性材料进行增殖快繁，获得脱毒再生植株；

S102：将芋脱毒再生植株置于每瓶40ml的培养基中培养10d；所述培养基的成分包括：MS+ZT 1.0㎎/L+G31.0㎎/L+NAA 0.3㎎/L+蔗糖3％/L+琼脂6.0g/L；

S103：向培养瓶中再加入1/2～3/4MS+蔗糖6-8％/L的培养基30ml，继续培养15-20天，获得整齐度一致的脱毒试管芋；

步骤S2的具体操作包括，脱毒试管芋定植前15天，将经过消毒的育苗基质充分拌均，用塑料薄膜覆盖堆放，所述育苗基质的配方为草炭：珍珠岩：沙：土＝2∶1∶1∶1，拌均时加入适量自来水；

步骤S3的具体操作包括，育苗基质堆放15天后即可装营养钵，所述营养钵的规格为8厘米*8厘米；每个所述营养钵中装入2/3基质，不能装满，也不要装实；

步骤S5的具体操作包括，2月下旬～3月上旬，在防虫网纱棚内进行试管芋定值育苗，定值时，用竹签将营养钵中的育苗基质拨开1厘米～1.5厘米深的穴，将试管芋顶芽朝上放入营养钵中，用手轻轻压实育苗基质即可；

试管芋定植完成后浇水，第一次浇透水，以后每隔3～5天浇一次水，棚内温度保持15℃～20℃。

2.根据权利要求1所述的一种脱毒试管芋的育苗方法，其特征在于：步骤S4的具体操作包括，定值当天，将脱毒试管芋从培养瓶中取出，洗净培养基，拔除根系，去除弱小及形状不规整的，拔除根系时不要损伤试管芋。

3.根据权利要求1所述的一种脱毒试管芋的育苗方法，其特征在于：用于定值的试管芋顶芽充实完整、大小一致，质量不小于0.6克。

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