CN112839957A - Il-36抗体及其用途 - Google Patents

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CN112839957A CN201980063095.2A CN201980063095A CN112839957A CN 112839957 A CN112839957 A CN 112839957A CN 201980063095 A CN201980063095 A CN 201980063095A CN 112839957 A CN112839957 A CN 112839957A
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A·J·麦克奈特
R·索洛夫·努根特
J·L·劳登斯拉格尔
G·德斯蒂托
D·M·扎伊翁茨
A·比特拉
山田武直
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Abstract

本申请提供了与IL‑36结合的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段与IL‑36α和IL‑36γ均结合，并且所述抗体是IL‑36α和IL‑36γ的拮抗剂。

Description

IL-36抗体及其用途
相关申请的交叉引用
本申请要求于2018年9月28日提交的美国临时申请US62/739,074的优先权，其内容通过引用全部并入本文。
序列表
本说明书与序列表的计算机可读形式(CRF)副本一起提交。CRF文件名为14233-005-228_SEQ_LISTING.TXT，于2019年9月16日创建，大小为162,628字节，也用作序列表的纸质副本，其内容通过引用全部并入本文。
1.技术领域
本文提供了抗IL-36抗体及其药物组合物、方法和用途。
2.技术背景
细胞因子参与各种生物学过程，如免疫应答，包括但不限于：炎症应答、病毒免疫、细胞内寄生虫免疫、同种异体移植排斥、体液应答、蠕虫免疫和变态反应。
白介素36(IL-36)细胞因子家族由被称为天然拮抗剂的IL-36受体拮抗剂(IL-36Ra)、IL-36α、IL-36β和IL-36γ组成(参见Dinarello,C.,et al.,Nat Immunol,2010,11(11):973)。IL-36家族的细胞因子及其受体与多种炎性病症和疾病有关。例如，在患有全身脓疱性牛皮癣(GPP)以及其他类型的牛皮癣(如斑块状牛皮癣、掌跖脓疱性牛皮癣以及掌跖脓疱病)的患者皮肤中，已在病灶皮肤中检测到IL-36(尤其是IL-36γ和IL-36α)表达增加(参见Liang,Y.,et al.,J Allergy Clin Immunol,2017.139(4):1217-1227；Bissonnette,R.,et al.,PLoS One,2016.11(5):e0155215；Johnston,A.,et al.,JAllergy Clin Immunol,2017,140(1):109-120；D'Erme,A.M.,et al.,J InvestDermatol,2015,135(4):1025-1032；以及Carrier,Y.,et al.,J Invest Dermatol,2011.131(12):2428-37)。在盘状红斑狼疮和亚急性皮肤红斑狼疮患者的病灶皮肤中也可检测到IL-36γ水平升高(参见D'Erme,A.M.,et al.,J Invest Dermatol,2015.135(4):1025-1032；以及Jabbari,A.,et al.,J Invest Dermatol,2014.134(1):87-95)。再例如，已经从包括克罗恩氏病和溃疡性结肠炎在内的炎性肠病患者的受累组织中测量到IL-36α和IL-36γ的表达升高(参见Russell,S.E.,et al.,Mucosal Immunol,2016,9(5):1193-204；Nishida,A.,et al.,Inflamm Bowel Dis,2016.22(2):303-14；以及Boutet,M.A.,etal.,Clin Exp Immunol,2016,184(2):p.159-73)。
3.发明概述
一方面，本文提供结合IL-36的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段与IL-36α和IL-36γ两者均结合，且其中所述抗体是IL-36α和IL-36γ两者的拮抗剂。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段同时拮抗IL-36α和IL-36γ。
在一些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段结合选自以下的一个或多个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列的和/或SEQ IDNO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的第45个氨基酸残基至第100个氨基酸残基。在一些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段结合选自以下的一个或多个氨基酸残基：SEQID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列的Arg 45、His 46、Glu 48、Thr 49、Leu50、Lys 85、Asp 89、Asn 92、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro 96、Val 97、Lys 98和Phe 100，和/或选自以下的一个或多个氨基酸残基：SEQ ID NO:10所示的IL-36γ氨基酸序列的Tyr46、Glu 48、Ala 49、Leu 50、Gln 85、Gly 92、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro 96、Val 97、Lys98和Phe 100。在一些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段结合选自以下的一个或多个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α氨基酸序列的His 46、Glu48、Thr 49、Leu 50、Lys 85、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro 96、Val97和Lys 98；和/或选自以下的一个或多个氨基酸残基：SEQ ID NO:10所示的IL-36γ氨基酸序列的Ala 49、Leu 50、Gly 92、Gln 93、Pro94、Glu 95、Pro 96、Val 97和Lys 98。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段结合选自以下的至少一个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α氨基酸序列以及SEQ ID NO:10所示的IL-36γ氨基酸序列两者的Leu 50、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro 96、Val 97和Lys 98。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段结合选自以下的2、3、4、5、6或7个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α氨基酸序列以及SEQ ID NO:10所示的IL-36γ氨基酸序列两者的Leu 50、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro 96、Val 97和Lys 98。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段结合SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α氨基酸序列以及SEQ ID NO:10所示的IL-36γ氨基酸序列的第93至98位氨基酸残基。在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段结合SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列以及SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的第50位和第93至98位氨基酸残基。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段进一步结合选自以下的至少一个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α氨基酸序列的Arg 45、His 46、Glu48、Thr 49、Lys 85、Asp 89、Asn 92和Phe 100；和/或选自以下的至少一个氨基酸残基：SEQID NO:10所示的IL-36γ氨基酸序列的Tyr 46、Glu 48、Ala 49、Gln 85、Gly 92和Phe 100。在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段还结合选自以下的至少一个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α氨基酸序列的His 46、Glu 48、Thr 49和Lys 85；以及选自以下的至少一个IL-36γ氨基酸残基：SEQ ID NO:10所示的IL-36γ氨基酸序列的Ala 49和Gly 92。
在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段不结合IL-36β。
在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段不拮抗IL-36β。
在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段不结合IL-36Ra。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段不拮抗IL-36Ra。
在一些实施方案中，当与IL-36Ra组合使用时，IL-36Ra与本文提供的抗体或其抗原结合片段的组合拮抗IL-36α、IL-36β和IL-36γ。
在一些实施方案中，所述IL-36α和IL-36γ是人IL-36α和IL-36γ。在其他实施方案中，所述IL-36α和IL-36γ是食蟹猕猴IL-36α和IL-36γ。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段结合人和食蟹猕猴IL-36α和IL-36γ，并且其中所述抗体是人和食蟹猕猴IL-36α和IL-36γ的拮抗剂。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段不结合人或食蟹猕猴IL-36β。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段不结合人或食蟹猕猴IL-36Ra。
在一些实施方案中，通过表面等离振子共振法测定的所述抗体或其抗原结合片段结合人IL-36α的KD小于100nM，并且其中通过表面等离子体共振方法测定的所述抗体或其抗原结合片段结合人IL-36γ的KD小于100nM。在一些实施方案中，通过表面等离振子共振法测定的所述抗体或其抗原结合片段结合人IL-36α的KD小于10nM，并且其中通过表面等离子体共振方法测定的所述抗体或其抗原结合片段结合人IL-36γ的KD小于10nM。在其他实施方案中，通过表面等离振子共振法测定的所述抗体或抗原结合片段结合食蟹猕猴IL-36α的KD小于100nM，并且其中通过表面等离子体共振方法测定的所述抗体或其抗原结合片段结合食蟹猕猴IL-36γ的KD小于100nM。在其他实施方式中，通过表面等离振子共振法测定的所述抗体或抗原结合片段结合食蟹猕猴IL-36α的KD小于10nM，并且其中通过表面等离子体共振方法测定的所述抗体或抗原结合片段结合食蟹猕猴IL-36γ的KD小于10nM。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段减弱IL-36α介导的信号转导和/或IL-36γ介导的信号转导。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段减弱IL-36α与IL-36受体的结合和/或IL-36γ与IL-36受体的结合。在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段减弱IL-36受体介导的信号转导。在其他实施方式中，所述抗体或其抗原结合片段减弱了选自下组的一种或多种细胞因子和/或趋化因子的产生：IL-8、IL-6、IL-10、TNFα、IL-1β、CXCL1、CCL5、CCL20、CCL2、CCL3、CCL4、CXCL12、VEGF-A、IL-23、IL-36α、IL-36β和IL-36γ。
在一些实施方案中，其中所述抗体或其抗原结合片段拮抗IL-36α和IL-36γ针对任选地选自下组的IL-36受体表达细胞的活性：角质形成细胞、真皮成纤维细胞、单核细胞和PBMC。
在一些实施方案中，所述抗原结合片段选自下组：Fab、Fab'、F(ab')2、Fv、scFv、dsFv、双抗体、三抗体、四抗体以及由抗体片段形成的多特异性抗体。
在一些实施方案中，所述抗体是小鼠抗体。在其他实施方案中，所述抗体是完全人抗体。在其他实施方案中，所述抗体或抗原结合片段是人源化的抗体或其抗原结合片段。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段是重组产生的。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段是由杂交瘤产生的。
在一些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含：(a)重链可变区(VH)，其包含：(i)VH互补决定区1(CDR H1)，其包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:68、SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:75和SEQ ID NO:80；(ii)VH互补决定区2(CDR H2)，其包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:76、SEQ ID NO:78和SEQ IDNO:81；(iii)VH互补决定区3(CDR H3)，其包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:70、SEQID NO:72、SEQ ID NO:74、SEQ ID NO:77、SEQ ID NO:79和SEQ ID NO:82；以及(b)轻链可变区(VL)，其包含：(i)VL互补决定区1(CDR L1)，其包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:83和SEQ ID NO:86；(ii)VL互补决定区2(CDR L2)，其包含选自下组的氨基酸序列：SEQ IDNO:84、SEQ ID NO:87和SEQ ID NO:90；(iii)VL互补决定区3(CDR L3)，其包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:85、SEQ ID NO:88、SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:91和SEQ ID NO:92。
在一些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含：SEQ ID NO:68的CDRH1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:70的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDR L1、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:85的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:10的CDR L1:86、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:73的CDR H2、SEQ ID NO:74的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:76的CDR H2、SEQ ID NO:77的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:89的CDR L3。
在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:78的CDR H2、SEQ ID NO:79的CDR H3，SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:90的CDR L2和SEQ ID NO:91的CDR L3。
在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:81的CDR H2、SEQ ID NO:82的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:92的CDR L3。
在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：CDR H1，其包含SEQ ID NO:23中含有的CDR H1的氨基酸序列；CDR H2，其包含SEQ ID NO:23中含有的CDR H2的氨基酸序列；CDR H3，其包含SEQ ID NO:23中含有的CDR H3的氨基酸序列；CDR L1，其包含SEQ IDNO:51中含有的CDR L1的氨基酸序列；CDR L2，其包含SEQ ID NO:51中含有的CDR L2的氨基酸序列；CDR L3，其包含SEQ ID NO:51中含有的CDR L3的氨基酸序列。
在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：CDR H1，其包含SEQ ID NO:27中含有的CDR H1的氨基酸序列；CDR H2，其包含SEQ ID NO:27中含有的CDR H2的氨基酸序列；CDR H3，其包含SEQ ID NO:27中含有的CDR H3的氨基酸序列；CDR L1，其包含SEQ IDNO:55中含有的CDR L1的氨基酸序列；CDR L2，其包含SEQ ID NO:55中含有的CDR L2的氨基酸序列；CDR L3，其包含SEQ ID NO:55中含有的CDR L3的氨基酸序列。
在其他实施方案中，抗体或其抗原结合片段包含：CDR H1，其包含SEQ ID NO:31中含有的CDR H1的氨基酸序列；CDR H2，其包含SEQ ID NO:31中含有的CDR H2的氨基酸序列；CDR H3，其包含SEQ ID NO:31中含有的CDR H3的氨基酸序列；CDR L1，其包含SEQ ID NO:55中含有的CDR L1的氨基酸序列；CDR L2，其包含SEQ ID NO:55中含有的CDR L2的氨基酸序列；CDR L3，其包含SEQ ID NO:55中含有的CDR L3的氨基酸序列。
在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：CDR H1，其包含SEQ ID NO:35中含有的CDR H1的氨基酸序列；CDR H2，其包含SEQ ID NO:35中含有的CDR H2的氨基酸序列；CDR H3，其包含SEQ ID NO:35中含有的CDR H3的氨基酸序列；CDR L1，其包含SEQ IDNO:55中含有的CDR L1的氨基酸序列；CDR L2，其包含SEQ ID NO:55中含有的CDR L2的氨基酸序列；CDR L3，其包含SEQ ID NO:55中含有的CDR L3的氨基酸序列。
在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：CDR H1，其包含SEQ ID NO:39中含有的CDR H1的氨基酸序列；CDR H2，其包含SEQ ID NO:39中含有的CDR H2的氨基酸序列；CDR H3，其包含SEQ ID NO:39中含有的CDR H3的氨基酸序列；CDR L1，其包含SEQ IDNO:59中含有的CDR L1的氨基酸序列；CDR L2，其包含SEQ ID NO:59中含有的CDR L2的氨基酸序列；CDR L3，其包含SEQ ID NO:59中含有的CDR L3的氨基酸序列。
在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：CDR H1，其包含SEQ ID NO:43中含有的CDR H1的氨基酸序列；CDR H2，其包含SEQ ID NO:43中含有的CDR H2的氨基酸序列；CDR H3，其包含SEQ ID NO:43中含有的CDR H3的氨基酸序列；CDR L1，其包含SEQ IDNO:63中含有的CDR L1的氨基酸序列；CDR L2，其包含SEQ ID NO:63中含有的CDR L2的氨基酸序列；CDR L3，其包含SEQ ID NO:63中含有的CDR L3的氨基酸序列。
在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：CDR H1，其包含SEQ ID NO:47中含有的CDR H1的氨基酸序列；CDR H2，包含SEQ ID NO:47中含有的CDR H2的氨基酸序列；CDR H3，其包含SEQ ID NO:47中含有的CDR H3的氨基酸序列；CDR L1，其包含SEQ IDNO:67中含有的CDR L1的氨基酸序列；CDR L2，其包含SEQ ID NO:67中含有的CDR L2的氨基酸序列；CDR L3，其包含SEQ ID NO:67中含有的CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，根据Kabat编号确定CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3。在其他实施方案中，根据AbM编号确定CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3。在其他实施方案中，根据Chothia编号确定CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3。在其他实施方案中，根据Contact编号确定CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDRL2和CDR L3。在其他实施方式中，根据IMGT编号确定CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDRL2和CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:51的氨基酸序列的VL区。在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:27的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:55的氨基酸序列的VL区。在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:31的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:55的氨基酸序列的VL区。在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:35的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:55的氨基酸序列的VL区。在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:39的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:59的氨基酸序列的VL区。在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:43的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:63的氨基酸序列的VL区。在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ IDNO:47的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:67的氨基酸序列的VL区。
在一些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含：(i)VH区，其包含SEQID NO:115的氨基酸序列或在SEQ ID NO:115中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中至少一个氨基酸残基替换选自在以下氨基酸位置的替换：Gln 1、Lys 12、Val 20、Tyr 27、Thr 28、Phe 29、Thr 30、Arg 38、Met 48、Arg 67、Val 68、Ala 72、Ser 77、Ala 79、Met 81、Leu 83和Val 117；以及(ii)VL区，其包含SEQ ID NO:114的氨基酸序列或在SEQ IDNO:114中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中所述至少一个氨基酸残基替换选自在以下氨基酸位置的替换：Pro8、Val 12、Phe 38、Gln 40、Ala 45、Pro 46、Arg 47、Thr48、Ser 51、Trp 59、Thr 60、Leu 77和Asp 87。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：(i)VH区，其包含SEQ IDNO:115的氨基酸序列或在SEQ ID NO:115中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中至少一个氨基酸残基替换选自以下替换：Gln 1替换为Glu、Lys 12替换为Val、Val 20替换为Leu、Tyr 27替换为Phe、Thr 28替换为Asn、Phe 29替换为Ile、Thr 30替换为Lys、Arg38替换为Lys、Met 48替换为Ile、Arg 67替换为Lys、Val 68替换为Ala、Ala 72替换为Thr、Ser 77替换为Asp、Ala 79替换为Val、Met 81替换为Leu、Leu 83替换为Phe以及Val 117替换为Leu；以及(ii)VL区，其包含SEQ ID NO:114的氨基酸序列或在SEQ ID NO:114中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中所述至少一个氨基酸残基替换选自以下替换：Pro 8替换为Ser、Val12替换为Thr、Phe 38替换为Val、Gln 40替换为Glu、Ala 45替换为Leu、Pro 46替换为Phe、Arg 47替换为Ala、Thr 48替换为Gly、Ser 51替换为Gly、Trp 59替换为Gly、Thr60替换为Val、Leu77替换为Ile以及Asp87替换为Ile。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：(i)VH区，其包含SEQ IDNO:165的氨基酸序列或在SEQ ID NO:165中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中至少一个氨基酸残基替换选自在以下氨基酸位置的替换：Gln 1、Lys 12、Val 20、Tyr27、Thr 28、Phe 29、Thr 30、Arg 38、Met 48、Arg 67、Val 68、Ile 70、Ala72、Ser 77、Met81和Val 117；以及(ii)VL区，其包含SEQ ID NO:164的氨基酸序列或在SEQ ID NO:164中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中所述至少一个氨基酸残基替换选自在以下氨基酸位置的替换：Pro 8、Val 12、Phe 38、Gln 40、Ala 45、Pro 46、Arg 47、Thr 48、Ser51、Trp 59、Thr 60、Leu 77和Asp 87。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：(i)VH区，其包含SEQ IDNO:165的氨基酸序列或在SEQ ID NO:165含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中至少一个氨基酸残基替换选自以下替换：Gln 1替换为Glu、Lys 12替换为Val、Val 20替换为Leu、Tyr 27替换为Phe、Thr 28替换为Asn、Phe 29替换为Ile、Thr 30替换为Lys、Arg38替换为Lys、Met 48替换为Ile、Arg 67替换为Lys、Val 68替换为Ala、Ile 70替换为Leu、Ala 72替换为Thr、Ser 77替换为Asn、Met 81替换为Leu、Val 117替换为Leu；以及(ii)VL区，其包含SEQ ID NO:164的氨基酸序列或在SEQ ID NO:164中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中所述至少一个氨基酸残基替换选自以下替换：Pro 8替换为Ser、Val12替换为Thr、Phe 38替换为Val、Gln 40替换为Glu、Ala 45替换为Leu、Pro 46替换为Phe、Arg 47替换为Thr、Thr 48替换为Gly、Ser 51替换为Gly、Trp 59替换为Gly、Thr60替换为Val、Leu77替换为Ile，以及Asp87替换为Ile。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：(i)VH区，其包含选自以下的氨基酸序列：SEQ ID NOs:115、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148，149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162和163，以及(ii)VL区，其包含选自以下的氨基酸序列：SEQ ID NOs:114、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137和138。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：(i)VH区，其包含选自以下的氨基酸序列：SEQ ID NOs:165、171、172、173、174、175、176和177，以及(ii)VL区，其包含选自以下的氨基酸序列：SEQ ID NOs:164、166、167、168、169和170。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:161的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:130的氨基酸序列的VL区。在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有氨基酸序列SEQ ID NO:161的VH区和含有氨基酸序列SEQ IDNO:136的VL区。在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:161的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:137的氨基酸序列的VL区。在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有氨基酸序列SEQ ID NO:161的VH区和含有氨基酸序列SEQID NO:138的VL区。在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有氨基酸序列SEQ ID NO:176的VH区和含有氨基酸序列SEQ ID NO:166的VL区。在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:176的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:167的氨基酸序列的VL区。在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有氨基酸序列SEQ ID NO:174的VH区和含有氨基酸序列SEQ ID NO:167的VL区。在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:175的氨基酸序列的VH区和含有SEQID NO:167的氨基酸序列的VL区。在一些实施方案中，上述抗体是人源化抗体。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段与试剂缀合。在一些实施方案中，所述试剂选自：细胞毒性剂、放射性同位素、金属螯合剂、酶、荧光化合物、生物发光化合物和化学发光化合物。
在另一方面，本文提供了一种药物组合物，其包含本文提供的抗体或抗原结合片段和药学上可接受的赋形剂。
在另一方面，本文提供了一种治疗和/或预防疾病或病症的方法，其包括向受试者施用治疗有效量的本文提供的抗体或其抗原结合片段。
在一些实施方案中，所述疾病或病症是由IL-36α和/或IL-36γ介导的疾病或病症。在一些实施方案中，所述疾病或病症是炎性疾病或自身免疫疾病。在其他实施方案中，所述疾病或病症与皮肤组织、肠组织和/或肺组织有关。在一些实施方案中，所述疾病或病症选自下组：泛发性脓疱性牛皮癣、掌跖脓疱病、掌跖脓疱性牛皮癣、盘状红斑狼疮、红斑狼疮、特应性皮炎、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、哮喘、炎性肠病、寻常型牛皮癣、哈洛波(Hallopeau)持续性肢皮炎、急性泛发性发疹性脓疱病、化脓性汗腺炎、扁平苔藓、干燥综合征、类风湿性关节炎、银屑病关节炎、慢性鼻窦炎、寻常痤疮、疱疹样脓疱病、坏疽性脓皮病和多形性日光疹。在一些实施方案中，所述受试者是人受试者。
在另一方面，本文提供了一种多核苷酸，其包含编码本文提供的抗体或其抗原结合片段或其部分的核苷酸序列。
在一些实施方案中，所述多核苷酸包含选自以下的核苷酸序列：SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:40、SEQ ID NO:44、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:38、SEQ IDNO:42、SEQ ID NO:46、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:60、SEQ IDNO:64、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:NO:62和SEQ ID NO:66。
在一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:22的核苷酸序列和/或SEQ IDNO:50的核苷酸序列。在一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:26的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:54的核苷酸序列。在其他实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:30的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:54的核苷酸序列。在其他实施方案中，所述多核苷酸包含SEQID NO:34的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:54的核苷酸序列。在其他实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:38的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:58的核苷酸序列。在其他实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:42的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:62的核苷酸序列。在其他实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:46的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:66的核苷酸序列。在其他实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:20的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:48的核苷酸序列。在其他实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:24的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:52的核苷酸序列。在其他实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:28的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:52的核苷酸序列。在其他实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ IDNO:32的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:52的核苷酸序列。在其他实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:36的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:56的核苷酸序列。在其他实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:40的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:60的核苷酸序列。在其他实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:44的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:64的核苷酸序列。
在另一方面，本文提供了包含本文提供的多核苷酸的载体。
在另一方面，本文提供了包含本文提供的多核苷酸的细胞。在一些实施方案中，本文提供了包含本文提供的载体的细胞。在一些实施方案中，本文提供了用本文提供的载体转化的细胞。
在另一方面，本文提供一种杂交瘤，其产生本文提供的抗体或其抗体片段。
在另一方面，本文提供了制备抗体或其抗原结合片段的方法，其包括培养本文提供的细胞或杂交瘤以表达抗体或其抗原结合片段。
4.附图说明
图1A-1F描述了HaCaT功能测定的结果，表明IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体拮抗人IL-36α和IL-36γ。图1A描述了实施例1中描述的HaCaT测定的结果，其中在滴定的IL-36Ra或IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体的存在下，用10nM人IL-36α刺激细胞。图1B描述了实施例1中描述的HaCaT测定的结果，其中在滴定的IL-36Ra或IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体的存在下，用10nM人IL-36α刺激细胞。图1C描述了实施例1中描述的HaCaT测定的结果，其中在滴定的IL-36Ra或IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体的存在下，用10nM人IL-36α刺激细胞。图1D描述了实施例1中描述的HaCaT测定的结果，其中在滴定的IL-36Ra或IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体的存在下，用10nM人IL-36γ刺激细胞。图1E描述了实施例1中描述的HaCaT测定的结果，其中在滴定的IL-36Ra或IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体的存在下，用10nM人IL-36γ刺激细胞。图1F描述了实施例1中描述的HaCaT测定的结果，其中在滴定的IL-36Ra或IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体的存在下，用10nM人IL-36γ刺激细胞。
图2A-2D描述了HaCaT功能测定的结果，表明IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体可以拮抗食蟹猕猴IL-36α和食蟹猕猴IL-36γ。图2A描述了实施例1中描述的HaCaT测定的结果，其中在滴定的IL-36Ra或IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体的存在下，用10nM食蟹猕猴IL-36α刺激细胞。图2B描述了实施例1中描述的HaCaT测定的结果，其中在滴定的IL-36Ra或IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体的存在下，用10nM食蟹猕猴IL-36α刺激细胞。图2C描述了实施例1中描述的HaCaT测定的结果，其中在滴定的IL-36Ra或IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体的存在下，用10nM食蟹猕猴IL-36γ刺激细胞。图2D描述了实施例1中描述的HaCaT测定的结果，其中在滴定的IL-36Ra或IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体的存在下，用10nM食蟹猕猴IL-36γ刺激细胞。
图3描述了实施例1中描述的HaCaT功能测定的结果，表明IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体不拮抗人IL-36β，其中在滴定的人IL-36Ra或IL-36α和IL-36γ双拮抗剂抗体的存在下，用10nM人IL-36β刺激细胞。
图4A-4D描述了原代人角质形成细胞的功能测定的结果，表明IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体可以拮抗IL-36α和IL-36γ。图4A描述了实施例3中所述的原代人角质形成细胞测定的结果，其中在滴定的IL-36Ra或IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体的存在下，用6.25nM人IL-36α刺激细胞。图4B描述了实施例3中所述的原代人角质形成细胞测定的结果，其中在滴定的IL-36Ra或IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体的存在下，用8nM人IL-36α刺激细胞。图4C描述了实施例3中所述的原代人角质形成细胞测定的结果，其中在滴定的IL-36Ra或IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体的存在下，用8.4nM人IL-36γ刺激细胞。图4D描述了实施例3中所述的原代人角质形成细胞测定的结果，其中在滴定的IL-36Ra或IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体的存在下，用8.4nM人IL-36γ刺激细胞。
图5A-5D描述了原代人单核细胞功能测定的结果，表明IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体可以拮抗IL-36α和IL-36γ。图5A描述了实施例3中所述的原代人单核细胞测定的结果，其中在滴定的IL-36Ra或IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体的存在下，用20nM人IL-36α刺激细胞。图5B描述了实施例3中所述的原代人单核细胞测定的结果，其中在滴定的IL-36Ra或IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体的存在下，用40nM人IL-36α刺激细胞。图5C描述了实施例3中所述的原代人单核细胞测定的结果，其中在滴定的IL-36Ra或IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体的存在下，用6nM人IL-36γ刺激细胞。图5D描述了实施例3中所述的原代人单核细胞测定的结果，其中在滴定的IL-36Ra或IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体的存在下，用50nM人IL-36γ刺激细胞。
图6A-6B描述了原代食蟹猕猴角质形成细胞功能测定的结果，表明IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体可以拮抗IL-36α和IL-36γ。图6A描述了实施例3中所述的原代食蟹猕猴角质形成细胞试验的结果，其中在200nM IL-36Ra或200nMIL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体存在下，用滴定的食蟹猕猴IL-36α刺激细胞。图6B描述了实施例3中所述的原代食蟹猕猴角质形成细胞试验的结果，其中在200nM IL-36Ra或200nMIL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体存在下，用滴定的食蟹猕猴IL-36γ刺激细胞。
图7描述了实施例4中所述的HaCaT测定的结果，表明IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体可以同时拮抗IL-36α和IL-36γ。在各种量的IL-36Ra或嵌合的m/h 144D464A存在下，用滴定的人IL-36α和IL-36γ刺激细胞。通过ELISA测量分泌的IL-8，并且在灰度热图中描述OD值，其中较高的OD值(即，较高的IL-8水平)对应于较深的颜色。
图8A-8B描述了HaCaT测定的结果，表明单独的或与IL-36α或IL-36γ复合的IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体不影响IL-36β激动剂活性。图8A描述了在实施例4中所述的HaCaT测定中使用的实验对照的结果。图8B描述了实施例4中所述的HaCaT测定的结果，其中在IL-36Ra、嵌合m/h144D464A、用IL-36α预孵育的嵌合m/h 144D464A和用IL-36γ预孵育的嵌合m/h 144D464A的存在下，用滴定的人IL-36β刺激细胞。
图9A-9D描述了HaCaT测定的结果，表明IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体不干扰IL-36Ra拮抗剂活性，并且可以与IL-36Ra协同抑制IL-36α、IL-36β和IL-36γ。图9A描述了实施例4中所述的HaCaT测定的结果，其中在100nM IL-36Ra、100nM嵌合m/h 144D464A、或100nM IL-36Ra和100nM嵌合m/h 144D464A的混合物存在下，用滴定的人IL-36α刺激细胞。图9B描述了实施例4中所述的HaCaT测定的结果，其中在100nM IL-36Ra、100nM嵌合m/h144D464A、或100nM IL-36Ra和100nM嵌合m/h 144D464A的混合物存在下，用滴定的人IL-36β刺激细胞。图9C描述了实施例4中所述的HaCaT测定的结果，其中在100nM IL-36Ra、100nM嵌合m/h 144D464A、或100nM IL-36Ra和100nM嵌合m/h 144D464A的混合物存在下，用滴定的人IL-36γ刺激细胞。图9D描述了实施例4中所述的HaCaT测定的结果，其中在100nM IL-36Ra、100nM嵌合m/h 144D464A、或100nM IL-36Ra和100nM嵌合m/h 144D464A的混合物存在下，用组合滴定的人IL-36α、人IL-36β和人IL-36γ刺激细胞。
图10描述了小鼠抗体144D464A和人源化144D464A抗体的轻链可变区的氨基酸序列，其不包括信号序列。每个序列中被方框包围的区域显示CDR序列。
图11描述了小鼠抗体144D464A和人源化144D464A抗体的重链的可变区的氨基酸序列，其不包括信号序列。每个序列中被方框包围的区域显示CDR序列。
图12描述了小鼠抗体144L249B和人源化144L249B抗体的轻链可变区的氨基酸序列，其不包括信号序列。每个序列中被方框包围的区域显示CDR序列。
图13描述了小鼠抗体144L249B和人源化144L249B抗体的重链的可变区的氨基酸序列，其不包括信号序列。每个序列中被方框包围的区域显示CDR序列。
图14A和14B描述了HaCaT功能测定的结果，表明人源化的144D464A抗体拮抗人IL-36α和IL-36γ。图14A描述了HaCaT测定的结果，其中在滴定的人源化144D464A抗体LV7aHV10b存在下，用10nM人IL-36α或IL-36γ刺激细胞。图14B描述了HaCaT测定的结果，其中在滴定的小鼠抗体144D464A或人源化144D464A抗体LV9are HV10b存在下，用10nM人IL-36α或IL-36γ刺激细胞。
图15描述了HaCaT功能测定的结果，表明人源化的144L249B抗体拮抗人IL-36α和IL-36γ，其中在滴定的小鼠抗体144L249B或人源化144L249B抗体LV7a HV11、LV9 HV11、LV9 HV10b或LV9 HV10c的存在下，用10nM人IL-36α或IL-36γ刺激细胞。
图16描述了IL-36α-L249BFab复合物的晶体结构。A部分显示了IL-36α–L249B Fab复合物的卡通示意图(VH，重链可变区；CH，重链恒定区；VL，轻链可变区；CL，轻链恒定区)。B部分显示L249B Fab的CDR环(左)和IL-36α环(右)之间的界面中的特定相互作用残基。L249B Fab的CDR环和IL-36α的所有相互作用残基都用小棒表示。在每个图中，HC和LC的各自的CDR环都被标记。氢键和疏水接触显示为虚线。
图17描述了IL-36γ–L249B Fab复合物的晶体结构，并与IL-36α–L249BFab复合物进行了比较。A部分显示IL-36γ–L249B Fab复合物与IL-36α–L249B Fab复合物的叠加。L249B Fab、IL-36γ和IL-36α表示为卡通示意图(VH，重链可变区；CH，重链恒定区；VL，轻链可变区；CL，轻链恒定区)。B部分显示了IL-36γ和IL-36α与L249B Fab之间的相互作用界面的比较，代表了在L249B Fab的HC和LC(透明表面)的可变环形成的缝隙处的细胞因子结合。C部分显示了L249B Fab的CDR环(左)和IL-36γ(右)之间的相互作用。在所有图中，黑色虚线表示氢键和疏水接触。在每个图中标记L249B Fab的各个CDR环。最右边的图是IL-36γ–L249B Fab复合物的CDR环与IL-36α–L249B Fab复合物的相互作用的叠加，IL-36α–L249BFab复合物的IL-36α残基标记为*。
图18描述了L249B Fab在IL-36α(A部分)和IL-36γ(B部分)的表面上的结合足迹。与HC或LC CDR环相互作用的IL-36α和IL-36γ残基，在两个图中均标记为黑色。与L249B HC和LC相互作用的IL-36α和IL-36γ残基标记为白色。
图19描述了IL-36α-D464AFab复合物的晶体结构。A部分显示了IL-36α-D464A Fab复合物的卡通示意图(VH，重链可变区；CH，重链恒定区；VL，轻链可变区；CL，轻链恒定区。B部分显示了IL-36α(卡通图)与D464AFab(透明表面)之间的相互作用界面，表示在由D464AFab的重链和轻链区的可变环形成的缝隙中的IL-36α结合(VH，重链可变区；VL，轻链可变区)。C部分显示了D464A Fab(左)的重链CDR环H1(左图)和H2(右图)和IL-36α环(右)之间的界面中的特定相互作用残基。D部分显示了D464A重链CDR环H3与IL-36α(右图)和轻链CDR环(左)与IL-36α(右)(左图)的相互作用。D464A Fab的CDR环和IL-36α的所有相互作用残基均用小棒表示。在每个图中标记了重链和轻链的各个CDR环。氢键显示为虚线。
图20描述了IL-36γ-D464AFab复合物的晶体结构，以及与IL-36α-D464AFab复合物的比较。A部分显示了IL-36γ-D464AFab复合物与IL-36α-D464AFab复合物的叠加。两个复合物中D464A Fab的可变重链和轻链均显示为透明表面；IL-36γ和IL-36α为卡通图(VH，重链可变区；VL，轻链可变区)。B部分显示IL-36α和IL-36γ的结构叠加，两者均与D464AFab形成复合物，显示出相似的整体拓扑结构。标识出了N末端、C末端和十二个β链。标记了IL-36α-D464A Fab复合物中存在的三个残基His 46、Asp 89和Lys 85的极性相互作用，但在IL-36γ-D464A Fab复合物中却没有。C部分显示了IL-36γ(顶部)和IL-36α(底部)表面的D464A Fab足迹。标记了与D464A重链CDR环和轻链CDR环相互作用的IL-36γ和IL-36α残基。D部分左图显示了D464A Fab的H3环(左侧)和IL-36γ(右侧)之间的相互作用，以及与和IL-36α复合的D464A Fab的结构叠加。用*标记出IL-36α-D464A Fab复合物的IL-36α的Lys85和D464A Fab的Asn 104。D部分右图显示了D464A Fab的H2环(左侧)和IL-36γ(右侧)之间的相互作用，以及与和IL-36α复合的D464A Fab的结构叠加。用*标记出IL-36α-D464AFab复合物的IL-36α的His46和Glu 48以及D464A Fab的Arg 59。在两个图中，用黑色虚线表示氢键。
5.发明详述
本公开提供了新型的白介素36(IL-36)抗体、包含该抗体的药物组合物及其用途。更具体地，本公开提供了拮抗IL-36α和/或IL-36γ的抗体、包含这些抗体的药物组合物及其用途。
IL-36细胞因子家族由IL-36受体拮抗剂(IL-36Ra)、IL-36α、IL-36β和IL-36γ组成(以前分别称为IL-1F5、IL-1F6、IL-1F8和IL-1F9)(参见Dinarello,C.,et al.,NatImmunol,2010,11(11):973)。这些细胞因子是IL-36受体的配体，该受体是由IL-36R(也称为IL-1Rrp2)和IL-1RAcP(也称为IL-1受体辅助蛋白)组成的异二聚体。IL-36α、IL-36β和IL-36γ是此受体的激动剂，而IL-36Ra是拮抗剂(参见Towne,J.E.et al.,J Biol Chem,2004,279(14):13677-88；以及Blumberg,H.et al.,J Exp Med,2007,204(11):2603-14)。
为了使IL-36Ra、IL-36α、IL-36β和IL-36γ充分发挥活性，它们需要蛋白水解过程并去除一小段N末端氨基酸(参见Towne,J.E.et al.,J Biol Chem,2011,286(49):42594-602)。已经鉴别出许多能够将IL-36细胞因子加工成截短的完全活性形式的蛋白酶，包括弹性蛋白酶、组织蛋白酶G、组织蛋白酶S和蛋白酶3(参见Clancy,D.M.,et al.,FEBS J,2017,284(11):1712-1725；Henry,C.M.et al.,Cell Rep,2016.14(4):708-722；Ainscough,J.S.et al.,Proc Natl Acad Sci U S A,2017.114(13):E2748-E2757；Macleod,T.etal.,Sci Rep,2016,6:24880)。
IL-36α、IL-36β或IL-36γ与其受体的结合可诱导细胞内信号转导，从而激活丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)途径和核因子κB(NF-κB)依赖性转录，导致促炎性基因表达和细胞因子产生(Towne,J.E.et al.,J Biol Chem,2004,279(14):13677-88；以及Gabay,C.和J.E.Towne,J Leukoc Biol,2015,97(4):645-52)。
IL-36受体和细胞因子在多种组织中表达，并在多种细胞类型中表达，包括皮肤、肺和肠道以及免疫系统的细胞，如单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞和T细胞(参见Gabay,C.和J.E.J Leukoc Biol,2015,97(4):p.645-52；Bassoy,E.Y.,et al.,Immunol Rev,2018,281(1):169-178；Walsh,P.T.and P.G.Fallon,Ann N Y Acad Sci,2018,1417(1):23-34)。
IL-36家族的细胞因子及其受体与多种炎性病症和疾病有关。IL-36Ra中的降低其稳定性和功能性拮抗剂活性的突变，与泛发性脓疱性牛皮癣(GPP)的发展有关，GPP是牛皮癣的一种严重形式，并可能会危及生命(参见Marrakchi,S.et al.,N Engl J Med,2011,365(7):620-8；Onoufriadis,A.et al.,Am J Hum Genet,2011,89(3):432-7；以及Tauber,M.et al.,J Invest Dermatol,2016.136(9):1811-9)。
从GPP患者以及其他类型的牛皮癣(如斑块状牛皮癣、掌跖脓疱性牛皮癣和掌跖脓疱病)的病灶皮肤中发现IL-36(特别是IL-36γ和IL-36α)表达增加(参见Liang,Y.et al.,J Allergy Clin Immunol,2017.139(4):1217-1227；Bissonnette,R.et al.PLoS One,2016.11(5):e0155215；Johnston,A.et al.,J Allergy Clin Immunol,2017,140(1):109-120；D'Erme,A.M.et al.,J Invest Dermatol,2015,135(4):1025-1032；以及Carrier,Y.et al.,J Invest Dermatol,2011.131(12):2428-37)。在盘状红斑狼疮和亚急性皮肤性红斑狼疮患者的病灶皮肤中，也可检测到IL-36γ水平升高(参见D'Erme,A.M.et al.,JInvest Dermatol,2015.135(4):1025-1032；以及Jabbari,A.,et al.,J InvestDermatol,2014.134(1):87-95)。此外，在急性全身性皮疹性脓疱病以及诊断为化脓性汗腺炎的患者的病灶皮肤中已检测到IL-36细胞因子的表达增加(参见Liang,Y.et al.,JAllergy Clin Immunol,2017,139(4):1217-1227；Thomi,R.et al.,J Eur Acad DermatolVenereol,2017,31(12):2091-2096；以及Hessam,S.et al.,Br J Dermatol,2018,178(3):761-767)。
动物模型还支持IL-36细胞因子在炎症性皮肤病中的作用。经过工程改造以在角质形成细胞中过表达IL-36α的转基因小鼠出生时就具有炎症性皮肤表型，这取决于功能性IL-36受体。在也缺乏IL-36Ra的小鼠中，该表型病情加重(参见Blumberg,H.,et al.,J ExpMed,2007,204(11):2603-14)。过表达IL-36α的小鼠也对皮肤刺激性12-O-十四烷酰佛波醇13-乙酸酯更敏感(参见Blumberg,H.et al.,J Immunol,2010,185(7):4354-62)。此外，在基于咪喹莫特的银屑病小鼠模型中，与野生型小鼠相比，缺乏IL-36α表达的小鼠的皮肤病理学显著降低(参见Milora,K.A.et al.,J Invest Dermatol,2015,135(12):2992-3000)。
尽管有大量证据表明IL-36在炎症性皮肤病的发展中起重要作用，但也已观察到IL-36途径在其他疾病和组织中也很活跃。例如，已经从包括克罗恩氏病和溃疡性结肠炎的炎症性肠病患者的受累组织中测量到IL-36α和IL-36γ的表达升高(参见Russell,S.E.etal.,Mucosal Immunol,2016,9(5):1193-204；Nishida,A.et al.,Inflamm Bowel Dis,2016.22(2):303-14；以及Boutet,M.A.,et al.,Clin Exp Immunol,2016,184(2):p.159-73)。此外，在类风湿性关节炎患者的滑膜中检测到所有三种IL-36激动剂(即IL-36α、IL-36β、IL-36γ)(参见Boutet,M.A.et al.,Clin Exp Immunol,2016,184(2):159-73)。
尽管已证明IL-36β是抗微生物肽的强诱导剂，并且显出对HSV-1感染起保护作用(参见Johnston,A.,et al.,J Immunol,2011.186(4):2613-22；以及Milora,K.A.,et al.,Sci Rep,2017.7(1):5799)，IL-36α和IL-36γ在炎症性皮肤病中的作用最为明显。因此，需要能够特异性拮抗IL-36α和/或IL-36γ的新型治疗药剂。
另外，尽管针对IL-36α或IL-36γ的抗体是本领域已知的，诸如克隆4(目录号10607-MM04，Sino Biological，宾夕法尼亚州韦恩市)；克隆1E4(目录号LS-C139455，LifeSpan BioSciences，华盛顿州西雅图)；克隆278706(目录号MAB2320-SP，R&D Systems，明尼苏达州明尼阿波利斯)；克隆2P38(目录号MBS690041，MyBiosource，加利福尼亚州圣迭哥)；克隆2P38(cat#GTX52842，GeneTex，加利福尼亚州尔湾市)；克隆MM0388-2P38(目录号NBP2-11688，Novus Biologicals，科罗拉多州利托顿市)；克隆14L515(目录号216611，United States Biological，马萨诸塞州塞勒姆)；克隆8A11(目录号ABIN396796，Antibodies Online，乔治亚州亚特兰大)；克隆Y-12(目录号sc-80056，Santa CruzBiotechnology，得克萨斯州达拉斯)；克隆2A8(目录号LS-C139453，LifeSpanBioSciences，华盛顿州西雅图)，这些抗体都不是IL-36α和IL-36γ的双重拮抗剂。仍然需要能够特异性拮抗IL-36α和IL-36γ并且具有功能活性的新型治疗药剂。
如下文第6节所示，在某些实施方案中，本文提供的抗体是抗IL-36α和抗IL-36γ双重拮抗剂单克隆抗体。所述抗体以高亲和力(例如，对于IL-36α和IL-36γ各自的KD小于10nM)结合人类和食蟹猕猴IL-36α和IL-36γ。所述抗体拮抗通过IL-36受体的IL-36α和IL-36γ的信号转导，这经使用永生化的人角质形成细胞系、原代人角质形成细胞、原代人单核细胞、人外周单核细胞和原代食蟹猕猴角质形成细胞的体外功能测定法得到证实。如所示，本文提供的某些IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体同时拮抗IL-36α和IL-36γ，而不影响IL-36β信号转导或IL-36Ra的拮抗剂活性。上述和其他的特性使得本文提供的抗体成为治疗各种疾病或病症例(如炎性皮肤疾病)的有益候选物。
5.1.定义
本文描述或引用的技术和规程包括本领域技术人员通常使用常规方法普遍理解和/或常用的技术和规程，例如在下面的文献中所述的广泛使用的方法：Sambrook et al.,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,3rd ed.2001；Current Protocols inMolecular Biology,Ausubel et al.eds.,2003；Therapeutic Monoclonal Antibodies:From Bench to Clinic,An ed.2009；Monoclonal Antibodies:Methods and Protocols,Albitar ed.2010；以及Antibody Engineering,Vols 1and 2,Kontermann and Dübeleds.,2nd ed.2010。
除非本文另有定义，本说明书中使用的技术和科学术语具有本领域普通技术人员通常理解的含义。为了解释本说明书的目的，将应用以下定义，并且在适当时，单数形式使用的术语也将包括复数形式，反之亦然。在阐述的术语的任何描述与通过引用并入本文的任何文件相冲突的情况下，以下述术语的描述为准。
术语“抗体”、“免疫球蛋白”或“Ig”在本文可互换使用，并且在最广泛的意义上使用，并且特别涵盖例如单克隆抗体(包括激动剂、拮抗剂、中和抗体、全长或完整的单克隆抗体)，由至少两种完整抗体、单链抗体及其片段形成的具有多表位或单表位特异性的抗体组合物、多克隆或单价抗体、多价抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体，只要它们表现出所需的生物学活性)，如下文所述。抗体可以是人抗体、人源化抗体、嵌合抗体和/或亲和力成熟的抗体，也可以是其他物种(例如小鼠和兔子等)的抗体。术语“抗体”旨在包括B细胞的一种多肽产物，其属于多肽的免疫球蛋白类，所述多肽能够与特定分子抗原结合并由两对相同的多肽链组成，其中每对多肽链具有一条重链(约50-70kDa)和一条轻链(约25kDa)，每条链的每个氨基末端部分包含约100至约130个或更多氨基酸的可变区，每条链的每个羧基末端部分包含一个恒定区。参见例如，Antibody Engineering,Borrebaeck ed.,2d ed.1995；以及Kuby,Immunology,3rd ed.1997。在特定的实施方案中，特定的分子抗原可以与本文提供的抗体(包括多肽或表位)结合。抗体还包括但不限于：合成抗体、重组产生的抗体、骆驼化抗体或其人源化变体、胞内抗体、抗独特型(抗-Id)抗体，以及任何上述抗体的功能片段(例如，抗原结合片段)，是指抗体重链或轻链多肽的一部分，其保留了衍生该片段的抗体的部分或全部结合活性。功能片段(例如，抗原结合片段)的非限制性实例包括：单链Fv(scFv)(例如，包括单特异性、双特异性等)、Fab片段、F(ab')片段、F(ab)2片段、F(ab')2片段、二硫键连接的Fv(dsFv)、Fd片段、Fv片段、双抗体、三抗体、四抗体和微型抗体。具体地，本文提供的抗体包括免疫球蛋白分子和免疫球蛋白分子的免疫学活性部分，例如，抗原结合结构域或包含与抗原结合的抗原结合位点(例如，抗体的一个或多个CDR)的分子。这样的抗体片段可以参见，例如Harlow and Lane,Antibodies: A Laboratory Manual,1989；Mol. Biology and Biotechnology:A Comprehensive Desk Reference,Myers ed.,1995；Huston et al.,1993,Cell Biophysics 22:189-224；Plückthun and Skerra,1989,Meth.Enzymol.178:497-515；以及Day,Advanced Immunochemistry,2nd ed.1990。本文提供的抗体可以是免疫球蛋白分子的任何类别(例如，IgG、IgE、IgM、IgD和IgA)或任何亚类(例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2)。抗体可以是激动性抗体或拮抗性抗体。
“抗原”是抗体可以选择性结合的结构。靶抗原可以是多肽、碳水化合物、核酸、脂质、半抗原或其他天然存在或合成的化合物。在一些实施方案中，靶抗原是多肽。在某些实施方案中，抗原与细胞结合，例如存在于细胞上或细胞中。
“拮抗剂”抗体是抑制或降低其所结合的抗原的生物学活性的抗体。例如，拮抗剂抗体可以基本上或完全抑制抗原的生物学活性。如本文所用，IL-36α或IL-36γ的“拮抗剂”或“抑制剂”是指能够抑制或降低IL-36α或IL-36γ的一种或多种生物活性的分子，诸如在表达IL-36α或IL-36γ的细胞中，或在表达IL-36α或IL-36γ配体(如IL-36受体)的细胞中。例如，在某些实施方案中，本文提供的抗体是这样的拮抗剂抗体，当所述抗体暴露于细胞时抑制在表达IL-36受体的细胞上的IL-36α和/或IL-36γ活性。在一些实施方案中，IL-36α或IL-36γ的拮抗剂(例如本文提供的拮抗抗体)，可以例如通过抑制或减少表达IL-36的细胞的活化和/或细胞信号转导途径来起作用，从而相对于在不存在拮抗剂的情况下IL-36α或IL-36γ介导的生物活性，其抑制或限制了细胞中IL-36α或IL-36γ介导的生物活性。在某些实施方案中，本文提供的抗体是小鼠双重拮抗性抗IL-36α和抗IL-36γ抗体。在某些实施方案中，本文提供的抗体是完全人或人源化双重拮抗性抗IL-36α和抗IL-36γ抗体。
本文使用的拮抗剂抗体与“激动剂”抗体相反，“激动剂”抗体是触发应答的抗体，例如，其模拟目的多肽(例如，IL-36α或IL-36γ)的至少一种功能活性。激动剂抗体包括是配体模拟物的抗体，例如其中配体结合至细胞表面受体，并且所述结合通过细胞间细胞信号转导途径诱导细胞信号转导或活性，并且其中所述抗体诱导相似的细胞信号转导或活化。IL-36α和IL-36γ的“激动剂”是指能够激活或增强IL-36α或IL-36γ的一种或多种生物活性的分子，如针对通过其表达IL-36受体而对IL-36α或IL-36γ有反应的细胞。在一些实施方案中，IL-36α或IL-36γ的激动剂可以例如通过增加IL-36α或IL-36γ的活性来起作用，导致表达IL-36受体的细胞的活化和/或细胞信号转导途径的增加，从而相对于没有激动剂的IL-36α或IL-36γ介导的生物学活性，增加了细胞中的IL-36α或IL-36γ介导的生物学活性。
“完整的”抗体是包含抗原结合位点以及CL和至少重链恒定区CH1、CH2和CH3的抗体。所述恒定区可以包括人恒定区或其氨基酸序列变体。在某些实施方案中，完整抗体具有一种或多种效应子功能。
术语“抗原结合片段”、“抗原结合结构域”、“抗原结合区”和类似术语是指抗体的这样的部分，其包含与抗原相互作用并赋予结合药剂对抗原的特异性和亲和力的氨基酸残基(例如，CDR)。如本文所用，“抗原结合片段”包括“抗体片段”，其包含完整抗体的一部分，如完整抗体的抗原结合或可变区。抗体片段的实例，包括但不限于：Fab、Fab'、F(ab')2和Fv片段；双抗体和双-双抗体(参见例如Holliger et al.,1993,Proc.Natl.Acad.Sci.90:6444-48；Lu et al.,2005,J.Biol.Chem.280:19665-72；Hudson et al.,2003,Nat.Med.9:129-34；WO 93/11161；以及美国专利US5,837,242和US6,492,123)；单链抗体分子(参见，例如美国专利US4,946,778；US5,260,203；US5,482,858；和US5,476,786)；双重可变结构域抗体(参见，例如美国专利US7,612,181)；单可变域抗体(sdAbs)(参见，例如Woolven et al.,1999,Immunogenetics 50:98-101；以及Streltsov et al.,2004,Proc Natl Acad SciUSA.101:12444-49)；以及由抗体片段形成的多特异性抗体。
术语“结合(bind/binding)”是指分子之间的相互作用，包括例如形成复合物。相互作用可以是，例如非共价相互作用，包括氢键、离子键、疏水相互作用和/或范德华相互作用。复合物还可包括通过共价或非共价键、相互作用或作用力将两个或多个分子维持在一起的结合。抗体上的单个抗原结合位点和靶分子(如抗原)的单个表位之间的总非共价相互作用的强度，是抗体或功能片段对该表位的亲和力。结合分子(例如抗体)与单价抗原的解离速率(koff)与结合速率(kon)的比率(koff/kon)是解离常数KD，它与亲和力成反比。较低的KD值表示抗体的亲和力较高。抗体和抗原的不同复合物的KD值不同，并且取决于kon和koff两者。可以使用本文提供的任何方法或本领域技术人员熟知的任何其他方法来确定本文提供的抗体的解离常数KD。在一个结合位点的亲和力并不总是反映出抗体和抗原之间相互作用的真实强度。当包含多个重复抗原决定簇的复合抗原(如多价抗原)与包含多个结合位点的抗体接触时，抗体在一个位点与抗原的相互作用将增加第二个位点反应的可能性。多价抗体和抗原之间这种多重相互作用的强度称为亲合力。
关于本文所述的抗体或抗原结合片段，术语如“结合”、“特异性结合”和类似术语在本文中也可互换使用，并且是指与抗原(如多肽)特异性结合的抗体或抗原结合域。与抗原结合或特异性结合的抗体或抗原结合结构域可以与相关抗原交叉反应。在某些实施方案中，与抗原结合或特异性结合的抗体或抗原结合结构域不与其他抗原交叉反应。结合或特异性结合抗原的抗体或抗原结合结构域，可以例如通过免疫测定法
Figure BDA0002992427630000241
或本领域技术人员已知的其他技术来鉴别。在一些实施方案中，如使用实验技术如放射免疫测定法(RIA)和酶联免疫吸附法(ELISA)所测定，当抗体或抗原结合结构域以比任何交叉反应性抗原更高的亲和力结合抗原时，其结合或特异性结合所述抗原。典型地，特异性或选择性反应将是背景信号或噪声的至少两倍，并且可能是背景的十倍以上。关于结合特异性的讨论，参见例如，Fundamental Immunology 332-36,Paul ed.,2d ed.1989。在某些实施方案中，抗体或抗原结合结构域与“非靶标”蛋白的结合程度小于抗体或抗原结合结构域与其特定靶标抗原的结合程度的约10％，例如，如通过荧光激活细胞分选(FACS)分析法或RIA所确定的。关于术语如“特异性结合”、“特异性结合至”或“对…具有特异性”，是指可测量地不同于非特异性相互作用的结合。例如通过与对照分子的结合相比来确定分子的结合可以测量特异性结合，所述对照分子通常是不具有结合活性的具有相似结构的分子。例如，通过与和靶标相似的对照分子(例如过量的未标记靶标)竞争来可以确定特异性结合。在这种情况下，如果标记的靶标与探针的结合被过量的未标记的靶标竞争性抑制，则表明特异性结合。与抗原结合的抗体或抗原结合结构域包括能够以足够的亲和力结合抗原的抗体或抗原结合结构域，使得抗体或抗原结合片段可用作例如靶向抗原的诊断或治疗药剂。在某些实施方案中，与抗原结合的抗体或抗原结合结构域具有小于或等于下述的解离常数(KD)：1000nM、800nM、500nM、250nM、100nM、50nM、10nM、5nM、4nM、3nM、2nM、1nM、0.9nM、0.8nM、0.7nM、0.6nM、0.5nM、0.4nM、0.3nM、0.2nM或0.1nM。在某些实施方案中，抗体或抗原结合结构域与抗原的表位结合，所述抗原的表位在不同物种的抗原之间(例如，在人和食蟹猕猴物种之间)是保守的。
“结合亲和力”通常是指分子(例如，结合蛋白如抗体)的单个结合位点与其结合伴侣(例如，抗原)之间的非共价相互作用的总和的强度。除非另有说明，如本文所用，“结合亲和力”是指固有结合亲和力，其反映结合对的成员(例如抗体和抗原)之间的1:1相互作用。结合分子X对其结合伴侣Y的亲和力，通常可以用解离常数(KD)表示。亲和力可以通过本领域已知的常规方法来测量，包括本文所述的那些。低亲和力抗体通常会缓慢结合抗原并趋于轻易解离，而高亲和力抗体通常会更快地结合抗原并倾向于保持更长时间的结合。测量结合亲和力的多种方法是本领域已知的，任何一种方法均可用于本公开的目的。具体的说明性实施方案包括以下内容。在一个实施方案中，“KD”或“KD值”可以通过本领域已知的测定法，例如通过结合测定法来测量。可以在RIA中测量KD，例如，用目的抗体的Fab形式及其抗原进行(Chen et al.,1999,J.Mol Biol 293:865-81)。KD或KD值也可以使用如下方法测量：来自
Figure BDA0002992427630000251
的生物层干涉法(BLI)或表面等离振子共振(SPR)测定法，例如
Figure BDA0002992427630000252
系统，或通过
Figure BDA0002992427630000253
例如
Figure BDA0002992427630000254
或
Figure BDA0002992427630000255
还可以使用例如Octet
Figure BDA0002992427630000256
Figure BDA0002992427630000257
或
Figure BDA0002992427630000261
系统，采用与上述相同的生物层干涉术(BLI)或表面等离振子共振(SPR)技术确定“缔合的速率”或“结合的速率”或“结合速率”或“kon”，。
在某些实施方案中，抗体或抗原结合片段可以包含“嵌合”序列，其中重链和/或轻链的一部分与来源于特定物种或属于特定抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，而该链的其余部分与来自另一物种或属于另一抗体类别或亚类(以及此类抗体的片段)的抗体中的相应序列相同或同源，只要它们表现出所希望的生物学活性(参见美国专利US4,816,567；以及Morrison et al.,1984,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 81:6851-6855)。
在某些实施方案中，抗体或抗原结合片段可包含非人(例如鼠)抗体的“人源化”形式的部分，所述非人抗体是包含人免疫球蛋白(例如受体抗体)的嵌合抗体，其中天然CDR残基被这样的残基替代，该残基来自具有所需的特异性、亲和力和能力的非人类物种(例如，供体抗体)如小鼠、大鼠、兔子或非人类灵长类的相应CDR。在一些情况下，人免疫球蛋白的一个或多个FR区残基被相应的非人残基替代。此外，人源化抗体可包含在受体抗体或供体抗体中未发现的残基。进行这些修饰以进一步改善抗体性能。人源化抗体重链或轻链可包含基本上所有的至少一个或多个可变区，其中所有或基本上所有的CDR都对应于非人免疫球蛋白的那些，并且所有或基本上所有的FR都是人免疫球蛋白的那些。在某些实施方案中，人源化抗体将包含免疫球蛋白恒定区(Fc)的至少一部分，通常是人免疫球蛋白的恒定区。关于更多细节，参见Jones et al.,1986,Nature 321:522-25；Riechmann et al.,1988,Nature 332:323-29；Presta,1992,Curr.Op.Struct.Biol.2:593-96；Carter et al.,1992,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89:4285-89；美国专利US6,800,738；US6,719,971；US6,639,055；US6,407,213和US6,054,297。
在某些实施方案中，抗体或抗原结合片段可包含“完全人抗体”或“人抗体”的部分，其中所述术语在本文可互换使用，并且是指包含人可变区以及例如人类恒定区的抗体。在特定的实施方案中，该术语是指包含人来源的可变区和恒定区的抗体。在某些实施方案中，“完全人”抗体还可涵盖结合多肽并由核酸序列编码的抗体，所述核酸序列是人种系免疫球蛋白核酸序列的天然体细胞变体。术语“完全人抗体”包括具有对应于如Kabat et al.所述的人种系免疫球蛋白序列的可变区和恒定区的抗体(参见Kabat et al.(1991)Sequences of Proteins of Immunological Interest，第五版，美国卫生和公共服务部，NIH出版号91-3242)。“人抗体”是具有对应于由人产生的抗体的氨基酸序列的氨基酸序列和/或已经使用任何制备人抗体的技术制备的抗体。人抗体的该定义特别排除了包含非人抗原结合残基的人源化抗体。可以使用本领域已知的多种技术来生产人抗体，这些技术包括噬菌体展示文库(Hoogenboom and Winter,1991,J.Mol.Biol.227:381；Marks et al.,1991,J.Mol.Biol.222:581)和酵母展示文库(Chao et al.,2006,Nature Protocols1:755-68)。也可用于制备人单克隆抗体的方法描述于：Cole et al.,Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy 77(1985)；Boerner et al.,1991,J.Immunol.147(1):86-95；以及van Dijk and van de Winkel,2001,Curr.Opin.Pharmacol.5:368-74。人抗体可以通过将抗原施用于转基因动物(例如小鼠)来制备，该转基因动物已被修饰以响应抗原攻击而产生此类抗体但其内源基因座已失能(参见例如，Jakobovits,1995,Curr.Opin.Biotechnol.6(5):561-66；Brüggemann and Taussing,1997,Curr.Opin.Biotechnol.8(4):455-58，以及涉及XENOMOUSETM技术的美国专利US6,075,181和6,150,584)。关于通过人B细胞杂交瘤技术产生的人抗体，也参见例如，Li et al.,2006,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 103:3557-62。
在某些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段可包含“重组人抗体”的部分，其中该短语包括通过重组方式制备、表达、产生或分离的人抗体，诸如使用转染入宿主细胞的重组表达载体表达的抗体、从重组的组合人抗体文库分离的抗体、从人免疫球蛋白基因的转基因和/或转染色体动物(例如小鼠或牛)分离的抗体(参见例如Taylor,L.D.et al.(1992)Nucl.Acids Res.20:6287-6295)，或通过任何其他将人免疫球蛋白基因序列剪接至其他DNA序列的手段制备、表达、产生或分离的抗体。此类重组人抗体可以具有来源于人种系免疫球蛋白序列的可变区和恒定区(参见See Kabat,E.A.et al.(1991)Sequences of Proteins of Immunological Interest，第五版，美国卫生和公共服务部，NIH出版号91-3242)。然而，在某些实施方案中，将此类重组人抗体进行体外诱变(或，当使用针对人Ig序列转基因的动物时，进行体内体细胞诱变)，并且因此重组抗体的VH和VL区的氨基酸序列虽然是来源于人种系VH和VL序列并与之相关的序列，但其可能并不天然存在于体内人抗体种系库中。
在某些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段可以包含“单克隆抗体”的一部分，其中本文所用的术语是指从基本上均质的抗体群体中获得的抗体，例如，包含该群体的各个抗体是相同的(除了可能少量存在的可能自然发生的突变)，每种单克隆抗体通常会识别抗原上的单个表位。在特定的实施方案中，本文所用的“单克隆抗体”是由单个杂交瘤或其他细胞产生的抗体。术语“单克隆”不限于制备抗体的任何特定方法。例如，可用于本公开内容的单克隆抗体，可通过首先由Kohler et al.,1975,Nature 256：495描述的杂交瘤方法来制备，或者可以使用重组DNA方法在细菌或真核动物或植物细胞中制备(参见，例如美国专利US4,816,567)。还可以使用在下述文献中描述的技术从噬菌体抗体文库中分离“单克隆抗体”，例如Clackson et al.,1991,Nature 352:624-28，以及Marks et al.,1991,J.Mol.Biol.222：581-97。制备克隆细胞系和由此表达的单克隆抗体的其他方法是本领域众所周知的。参见，例如Short Protocols in Molecular Biology,Ausubel et al.eds.,5th ed.2002。
典型的4链抗体单元是由两条相同的轻(L)链和两条相同的重(H)链组成的异四聚体糖蛋白。就IgG而言，四链单元通常为约150,000道尔顿。每条L链通过一个共价二硫键与H链相连，而两条H链则根据H链的同种型通过一个或多个二硫键彼此相连。每个H和L链还具有规则间隔的链内二硫键。每条H链在N末端均具有一个可变域(VH)，其后是每个α和γ链的三个恒定域(CH)，以及对于μ和ε同种型的四个CH域。每个L链在N末端均具有可变域(VL)，其另一端具有恒定域(CL)。VL与VH对齐，CL与重链的第一个恒定域(CH1)对齐。据信特定的氨基酸残基在轻链和重链可变域之间形成界面。VH和VL的配对一起形成单个抗原结合位点。关于不同种类的抗体的结构和特性，参见例如，Basic and Clinical Immunology 71,Stites et al.eds.,8th ed.1994；以及Immunobiology,Janeway et al.eds.,5thed.2001。
术语“Fab”或“Fab区”是指与抗原结合的抗体区。常规的IgG通常包含两个Fab区，每个Fab区位于Y形IgG结构的两个臂之一上。每个Fab区通常由重链和轻链中的每个的一个可变区和一个恒定区组成。更具体地，Fab区域中的重链的可变区和恒定区是VH和CH1区域，而Fab区域中的轻链的可变区和恒定区是VL和CL区域。Fab区域中的VH、CH1、VL和CL，可以按照本发明以各种方式排列以赋予抗原结合能力。例如，类似于常规IgG的Fab区域，VH和CH1区域可以在一个多肽上，而VL和CL区域可以在分开的多肽上。可选地，VH、CH1、VL和CL区都可以在相同的多肽上，并且以不同的顺序取向，如下面的部分更详细地描述的。
术语“可变区”、“可变结构域”、“V区”或“V结构域”是指抗体轻链或重链的一部分，其通常位于轻链或重链的氨基末端，并且在重链中具有约120-130个氨基酸的长度，而在轻链中具有约100-110个氨基酸的长度，并且用于每种特定抗体对其特定抗原的结合以及特异性。重链的可变区可以称为“VH”。轻链的可变区可以称为“VL”。术语“可变的”是指可变区的某些片段在抗体之间的序列差异很大的事实。V区介导抗原结合，并定义特定抗体对其特定抗原的特异性。但是，可变性在可变区的110个氨基酸跨度中分布不均匀。反而，V区由称为框架区(FR的可变性较小(例如，相对不变)的片段组成，所述框架区为约15-30个氨基酸且其间被较大可变性(例如，极端可变性)的较短区域(称为“高变区”)隔开，所述高变区大约9-12个氨基酸长。重链和轻链的可变区各自包含四个FR，主要采用β折叠构型，并通过三个高变区连接，这三个高变区形成连接β折叠结构的环，并在某些情况下形成β折叠结构一部分。每条链中的高变区通过FR紧密结合在一起，并且与另一条链中的高变区一起，有助于抗体的抗原结合位点的形成(参见例如,Kabat et al.,Sequences of Proteins of Immunological Interest(5th ed.1991))。恒定区不直接参与抗体与抗原的结合，而是表现出各种效应子功能，诸如抗体参与抗体依赖性细胞毒性(ADCC)和补体依赖性细胞毒性(CDC)。所述可变区在不同抗体之间的序列差异很大。在特定的实施方案中，所述可变区是人可变区。
术语“根据Kabat编号的可变区残基”或“按照Kabat编号的氨基酸位置”及其变体，是指Kabat et al.(同上)采用的抗体汇编的重链可变区或轻链可变区的编号系统。使用该编号系统，实际的线性氨基酸序列可以含有较少或额外的氨基酸，其对应于可变域FR或CDR的缩短，或在可变域FR或CDR中的插入。例如，重链可变域可在残基52之后包括单个氨基酸插入物(根据Kabat的残基52a)和在残基82之后的三个插入的残基(例如，根据Kabat的残基82a、82b和82c等)。可以通过在抗体序列的同源性区域与“标准”Kabat编号的序列进行比对，来确定给定抗体的残基的Kabat编号。当提及可变域中的残基(大约轻链的残基1-107和重链的残基1-113)时，通常使用Kabat编号系统(例如，Kabat et al.，同上)。当提及免疫球蛋白重链恒定区中的残基时，通常使用“EU编号系统”或“EU索引”(例如，Kabat et al.(同上)所报道的EU索引)。“如Kabat中的EU索引”是指人IgG 1EU抗体的残基编号。其他编号系统，已描述于例如，AbM、Chothia、Contact、IMGT和AHon。
当用于提及抗体时，术语“重链”是指约50-70kDa的多肽链，其中氨基末端部分包括约120-130或更多个氨基酸的可变区，并在羧基末端部分包括恒定区。所述恒定区可以是下述五个不同类型之一(例如，同种型)，分别称为α、δ、ε、γ和μ，它们基于重链恒定区的氨基酸序列。不同的重链大小不同：α、δ和γ含有约450个氨基酸，而μ和ε含有约550个氨基酸。当与轻链组合时，这些不同类型的重链分别产生五种众所周知的抗体类别，例如IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，包括IgG的四个亚类，即IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。
当用于提及抗体时，术语“轻链”是指约25kDa的多肽链，其中氨基末端部分包括约100至约110或更多个氨基酸的可变区，而羧基末端部分包括一个恒定区。轻链长度约为211-217个氨基酸。基于恒定域的氨基酸序列，有两种不同的类型，称为κ或λ。
如本文所用，术语“高变区”、“HVR”、“互补决定区”和“CDR”可互换使用。“CDR”是指免疫球蛋白(Ig或抗体)VHβ-折叠框架的非框架区内的三个高变区(H1、H2或H3)之一，或在抗体VLβ-折叠框架的非框架区域内的三个高变区(L1、L2或L3)之一。因此，CDR是散布在框架区序列内的可变区序列。
CDR区是本领域技术人员众所周知的，并且已经由众所周知的编号系统定义。例如，Kabat互补决定区(CDR)基于序列可变性，并且是最常用的(参见例如,Kabat et al.,同上)。相对地，Chothia指结构环的位置(参见例如,Chothia and Lesk,1987,J.Mol.Biol.196:901-17)。当使用Kabat编号约定进行编码时，Chothia CDR-H1环的末端在H32和H34之间的变化，这取决于环的长度(这是因为Kabat编号方案将插入位置放在H35A和H35B上；如果35A和35B都不存在，则该环在32处结束；如果仅存在35A，则该环在33处结束；如果同时存在35A和35B，则该环在34处结束)。AbM高变区代表了Kabat CDR和Chothia结构环之间的折衷，并被牛津分子(Oxford Molecular)公司的AbM抗体建模软件采用(参见，例如Antibody Engineering Vol.2,Kontermann and Dübel eds.,2d ed.2010)。“Contact”高变区基于对可用复杂晶体结构的分析。已开发并广泛采用的另一种通用编号系统是ImMunoGeneTics(IMGT)
Figure BDA0002992427630000311
(Lafranc et al.,2003,Dev.Comp.Immunol.27(1)：55-77)。IMGT是一个集成的信息系统，其专门研究人类和其他脊椎动物的免疫球蛋白(IG)、T细胞受体(TCR)和主要组织相容性复合体(MHC)。在本文中，提及CDR涉及氨基酸序列和在轻链或重链内的位置。由于CDR在免疫球蛋白可变域结构内的“位置”在物种之间是保守的，并存在于称为环的结构中，通过使用根据结构特征比对可变域序列的编号系统，CDR和框架残基易于识别。此信息可用于将一种物种的免疫球蛋白的CDR残基嫁接和替换为通常来自人抗体的受体框架。已开发了另一种编号系统(AHon)，参见Honegger and Plückthun,2001,J.Mol.Biol.309:657-70。包括例如Kabat编号和IMGT独特编号系统在内的编号系统之间的对应关系，是本领域技术人员众所周知的(参见例如,Kabat,同上；Chothia andLesk,同上；Martin,同上；Lefranc et al.,同上)。这些高变区或CDR的每一个中的残基如下所示。
表27
Figure BDA0002992427630000312
给定CDR的边界可能会有所不同，具体取决于用于鉴别的方案。因此，除非另有说明，给定抗体的术语“CDR”和“互补决定区”或其区域如可变区，以及其抗体各个CDR(例如“CDR-H1、CDR-H2”)或其区域，应理解为涵盖由上文所述的任何已知方案定义的互补决定区。在某些情况下，指定了用于鉴别一个或多个特定CDR的方案，如由Kabat、Chothia或Contact方法定义的CDR。在其他情况下，给出了CDR的特定氨基酸序列。
高变区可包含以下“扩展高变区”：VL中的24-36或24-34(L1)、46-56或50-56(L2)和89-97或89-96(L3)，以及VH中的26-35或26-35A(H1)、50-65或49-65(H2)和93-102、94-102或95-102(H3)。
术语“恒定区”或“恒定结构域”是指轻链和重链的羧基末端部分，其不直接参与抗体与抗原的结合，但是表现出多种效应子功能，诸如与Fc受体的相互作用。所述术语是指免疫球蛋白分子的一部分，相对于免疫球蛋白的另一部分(即包含抗原结合位点的可变区)其具有更保守的氨基酸序列。所述恒定区可以含有重链的CH1、CH2和CH3区以及轻链的CL区。
术语“框架”或“FR”是指CDR侧翼的那些可变区残基。FR残基存在于例如嵌合的、人源化的、人的结构域抗体、双抗体、线性抗体和双特异性抗体中。FR残基是除高变区残基或CDR残基以外的那些可变结构域残基。
本文中的术语“Fc区”用于定义免疫球蛋白重链的C端区域，包括例如天然序列Fc区、重组Fc区和变体Fc区。尽管免疫球蛋白重链的Fc区的边界可以改变，但是人IgG重链的Fc区通常被定义为从Cys226或从Pro230位置的氨基酸残基延伸至其羧基末端。Fc区的C端赖氨酸(根据EU编号系统的残基447)可以例如在抗体的生产或纯化过程中被去除，或通过重组改造编码抗体重链的核酸而去除。因此，完整抗体的组合物可以包含去除了所有K447残基的抗体群体，没有去除K447残基的抗体群体，以及具有带有和不带有K447残基的抗体混合物的抗体群体。“功能性Fc区”具有天然序列Fc区的“效应子功能”。示例性的“效应子功能”包括C1q结合、CDC、Fc受体结合、ADCC、吞噬作用、细胞表面受体(例如B细胞受体)的下调等。此类效应子功能通常需要将Fc区与结合区或结合域(例如，抗体可变区或域)结合，并且可以使用本领域技术人员已知的各种测定法进行评估。“变体Fc区”包含由于至少一个氨基酸修饰(例如，替换、添加或缺失)而不同于天然序列Fc区的氨基酸序列。在某些实施方案中，与天然序列Fc区或亲本多肽的Fc区相比，变体Fc区具有至少一个氨基酸替换，例如，在天然序列的Fc区或亲本多肽的Fc区中的约1至约10个氨基酸替换，或约1至约5个氨基酸替换。本文的变体Fc区可与天然序列Fc区和/或亲本多肽的Fc区具有至少约80％的同源性，或与其具有至少约90％的同源性，例如，与其具有至少约95％的同源性。
当涉及与抗原或抗体有关的使用时，术语“变体”可以指与天然的或未经修饰的序列相比，包含一个或多个(诸如约1至约25、约1至约20、约1至约15、约1至约10、或约1至约5个)氨基酸序列替换、缺失和/或添加的肽或多肽。例如，IL-36α或IL-36γ变体可以由一个或多个(诸如例如约1至约25、约1至约20、约1至约15、约1至约10、或约1至约5个)针对天然IL-36α或IL-36γ的氨基酸序列的变化产生。同样以举例的方式，抗IL-36α和/或IL-36γ抗体的变体可以由一个或多个(诸如例如约1至约25、约1至约20、约1至约15、约1至约10、或约1至约5个)针对天然或先前未修饰的抗IL-36α和/或IL-36γ抗体的氨基酸序列的变化产生。变体可以是天然存在的，如等位基因或剪接变体，或者可以是人工构建的。多肽变体可以从编码变体的相应核酸分子制备。在具体的实施方案中，所述IL-36α或IL-36γ变体或抗IL-36α和/或IL-36γ抗体变体至少保留IL-36α或IL-36γ、或抗IL-36α和/或IL-36γ抗体的功能活性。在具体的实施方案中，抗IL-36α和/或IL-36γ抗体变体结合IL-36α和/或IL-36γ，和/或拮抗IL-36α和/或IL-36γ活性。在某些实施方案中，所述变体由编码IL-36α或IL-36γ、或抗IL-36α和/或IL-36γ抗体VH或VL区或亚区(如一个或多个CDR)的核酸分子的单核苷酸多态性(SNP)变体来编码。
术语“同一性”是指通过比对和比较序列确定的两个或更多个多肽分子的序列或两个或更多个核酸分子的序列之间的关系。相对于参考多肽序列的“百分比(％)氨基酸序列同一性”，被定义为为达到最大的序列同一性百分比，在比对序列并引入空位(如有必要)之后，候选序列中与参考多肽序列中的氨基酸残基相同的氨基酸残基的百分比，并且不考虑将任何保守替换作为序列同一性的一部分。用于确定氨基酸序列同一性百分比的比对，可以以本领域技术范围内的各种方式实现，例如使用公开可用的计算机软件，如BLAST、BLAST-2、ALIGN或MEGALIGN(DNAStar，Inc.)软件。本领域技术人员可以确定用于比对序列的合适参数，包括在所比较序列的全长上实现最大比对所需的任何算法。
氨基酸残基/位置的“修饰”是指与初始氨基酸序列相比，一级氨基酸序列的变化，其中该变化是由涉及所述氨基酸残基/位置的序列改变引起的。例如，典型的修饰包括用另一个氨基酸替换所述残基(例如，保守或非保守替换)，在所述残基/位置附近插入一个或多个(例如，通常少于5、4或3个)氨基酸，和/或缺失所述残基/位置。
如本文所用，本领域中的术语“表位”是指抗体或抗原结合片段可以特异性结合的抗原的局部区域。表位可以是线性表位，或构象的、非线性的或不连续的表位。在多肽抗原的情况下，例如，表位可以是多肽的连续氨基酸(“线性”表位)，或者表位可以包含来自多肽的两个或更多个非连续区域的氨基酸(“构象的”、“非线性”或“不连续”表位)。本领域技术人员将认识到，通常，线性表位可以依赖或可以不依赖于二级、三级或四级结构。例如，在一些实施方案中，抗体结合一组氨基酸，而不管它们是否以天然三维蛋白质结构折叠。在其他实施方案中，抗体需要构成表位的氨基酸残基以表现出特定构象(例如，弯曲、扭曲、转角或折叠)，以便识别并结合表位。
术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”在本文可互换使用，是指任何长度的氨基酸的聚合物。所述聚合物可以是直链或支链的，它可以包含经修饰的氨基酸，并且可以被非氨基酸中断。所述术语还涵盖天然地或人为干预地修饰的氨基酸聚合物；例如为二硫键形成、糖基化、脂化、乙酰化、磷酸化或任何其他操作或修饰。所述定义中还包括例如含有一种或多种氨基酸类似物的多肽，包括但不限于：非天然氨基酸以及本领域已知的其他修饰。应当理解，因为本公开内容的多肽可以基于抗体或免疫球蛋白超家族的其他成员，所以在某些实施方案中，“多肽”可以单链或两个或更多个缔合链的形式出现。
术语“载体”是指用于携带或包括核酸序列的物质，所述核酸序列包括例如编码如本文所述的抗体或抗原结合片段的核酸序列，以便将核酸序列引入宿主细胞中。适用的载体包括例如表达载体、质粒、噬菌体载体、病毒载体、附加体和人工染色体，其可包括选择序列或可用于稳定整合入宿主细胞染色体的标记物。另外，所述载体可以包括一种或多种可选择的标记物基因和合适的表达控制序列。可以包括的可选择标记物基因，例如提供抗生素或毒素抗性、补充营养缺陷型、或提供培养基中没有的关键营养素。表达控制序列可以包括本领域熟知的组成型和诱导型启动子、转录增强子、转录终止子等。当两个或多个核酸分子要共表达时(例如，抗体重链和轻链，或抗体VH和VL)，两个核酸分子都可以插入到例如单个表达载体或分开的表达载体。对于单个载体表达，可以将编码核酸可操作地连接至一个共同的表达控制序列或连接至不同的表达控制序列，如一个诱导型启动子和一个组成型启动子。可以使用本领域众所周知的方法确认已将核酸分子引入宿主细胞。此类方法包括，例如核酸分析法(诸如RNA印迹法或mRNA的聚合酶链反应(PCR)扩增)、用于基因产物表达的免疫印迹法或其他合适的分析方法，以测试导入的核酸序列的表达或其对应的基因产物。本领域技术人员应理解，所述核酸分子以足以产生所需产物的量得到表达，并且进一步应理解，可以使用本领域众所周知的方法来优化表达水平以获得足够的表达。
如本文所用，术语“宿主”是指动物，如哺乳动物(例如人)。
如本文所用，术语“宿主细胞”是指可以用核酸分子转染的特定受试者细胞，以及这种细胞的后代或潜在后代。由于可能在后续世代和将核酸分子整合入宿主细胞基因组时发生的突变或环境影响，这种细胞的后代可能与用核酸分子转染的亲本细胞不同。
“分离的核酸”是指这样的核酸，例如RNA、DNA或混合核酸，它与其他基因组DNA序列以及蛋白质或复合物(诸如核糖体和聚合酶，其天然地伴随天然序列)基本分离。“分离的”核酸分子是与存在于核酸分子的天然来源中的其他核酸分子分离的核酸分子。此外，当通过重组技术生产时，“分离的”核酸分子如cDNA分子，可以基本上不含其他细胞材料或培养基，或者当化学合成时可以基本上不含化学前体或其他化学品。在一个具体的实施方案中，分离或纯化了编码本文所述抗体的一种或多种核酸分子。所述术语包括已经从其天然存在的环境中除去的核酸序列，并且包括重组或克隆的DNA分离物和化学合成的类似物，或通过异源系统生物合成的类似物。基本上纯的分子可以包括分子的分离形式。
本文可互换使用的“多核苷酸”或“核酸”是指任何长度的核苷酸的聚合物，包括DNA和RNA。核苷酸可以是脱氧核糖核苷酸、核糖核苷酸、经修饰的核苷酸或碱基和/或它们的类似物、或者可以通过DNA或RNA聚合酶或通过合成反应掺入聚合物中的任何底物。多核苷酸可以包含经修饰的核苷酸，诸如甲基化的核苷酸及其类似物。如本文所用，“寡核苷酸”是指短的、通常为单链的合成多核苷酸，其长度通常为但非必须小于约200个核苷酸。术语“寡核苷酸”和“多核苷酸”不是互相排斥的。上面对多核苷酸的描述同样且完全适用于寡核苷酸。产生本公开的抗体或抗原结合片段的细胞，可以包括亲本杂交瘤细胞以及已经引入了编码抗体的核酸的细菌和真核宿主细胞。除非另有说明，本文公开的任何单链多核苷酸序列的左端是5'端；双链多核苷酸序列的左侧方向称为5'方向。新生RNA转录本的5'至3'添加方向称为转录方向；下述DNA链的序列区被称为“上游序列”：其具有与作为RNA转录本的5'至5'末端的RNA转录本相同的序列；下述DNA链的序列区被称为“下游序列”：其具有与作为RNA转录本的3'端至3'端的RNA转录本相同的序列。
如本文所用，术语“药学上可接受的”是指经美国联邦或州政府的监管机构批准，或在美国药典、欧洲药典或其他公认的药典中列出，可用于动物、尤其是人类。
“赋形剂”是指药学上可接受的材料、组合物或媒介物，如液体或固体填充剂、稀释剂、溶剂或包封材料。赋形剂包括，例如包封材料或添加剂，如吸收促进剂、抗氧化剂、粘合剂、缓冲剂、载体、包被剂、着色剂、稀释剂、崩解剂、乳化剂、增量剂、填充剂、调味剂、湿润剂、润滑剂、香料、防腐剂、推进剂、释放剂、灭菌剂、甜味剂、增溶剂、润湿剂及其混合物。术语“赋形剂”也可以指稀释剂、佐剂(例如弗氏佐剂(完全或不完全)或媒介物。
在一些实施方案中，赋形剂是药学上可接受的赋形剂。药学上可接受的赋形剂的实例包括：缓冲剂，如磷酸盐、柠檬酸盐和其他有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸；低分子量(例如少于约10个氨基酸残基)多肽；蛋白质，如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水聚合物，如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸，如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、精氨酸或赖氨酸；单糖、二糖和其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂，如EDTA；糖醇，如甘露醇或山梨糖醇；成盐的抗衡离子，如钠；和/或非离子表面活性剂，如TWEENTM、聚乙二醇(PEG)和PLURONICSTM。药学上可接受的赋形剂的其他实例，描述于Remington and Gennaro,Remington’s Pharmaceutical Sciences,18th ed.1990。
在一个实施方案中，每种组分在与药物制剂的其他成分相容的意义上是“药学上可接受的”，并且适合与人和动物的组织或器官接触而没有过度的毒性、刺激性、过敏反应、免疫原性或其他问题或并发症，与合理的获益/风险比相称。参见，例如LippincottWilliams&Wilkins:Philadelphia,PA,2005；Handbook of Pharmaceutical Excipients,6th ed.；Rowe et al.,Eds.；The Pharmaceutical Press and the AmericanPharmaceutical Association:2009；Handbook of Pharmaceutical Additives,3rd ed.；Ash and Ash Eds.；Gower Publishing Company:2007；Pharmaceutical Preformulationand Formulation,2nd ed.；Gibson Ed.；CRC Press LLC:Boca Raton,FL,2009。在一些实施方案中，药学上可接受的赋形剂在所采用的剂量和浓度下对暴露于它的细胞或哺乳动物是无毒的。在一些实施方案中，药学上可接受的赋形剂是pH缓冲水溶液。
在一些实施方案中，赋形剂是无菌液体，例如水和油，包括石油、动物、植物或合成来源的那些，如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。当组合物(例如，药物组合物)经静脉内施用时，水是示例性的赋形剂。盐溶液以及葡萄糖水溶液和甘油溶液也可以用作液体赋形剂，特别是用于注射溶液。赋形剂还可包括：淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、大米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石粉、氯化钠、脱脂奶粉、甘油、丙烯、乙二醇、水、乙醇等。如果需要，所述组合物还可包含少量的湿润剂或乳化剂或pH缓冲剂。组合物可以采取溶液剂、混悬剂、乳剂、片剂、丸剂、胶囊剂、散剂、缓释制剂等形式。口服组合物(包括制剂)可以包括标准赋形剂，例药用级的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁等。
包括药物化合物的组合物，可以包含例如分离或纯化形式的抗体或抗原结合片段，以及适量的赋形剂。
如本文所用，术语“有效量”或“治疗有效量”是指本文所提供的抗体或抗原结合片段或药物组合物的量，其足以导致期望的结果。
术语“受试者”和“患者”可以互换使用。如本文所用，在某些实施方案中，受试者是哺乳动物，如非灵长类动物(例如牛、猪、马、猫、狗、大鼠等)或灵长类动物(例如猴子和人)。在特定的实施方案中，所述受试者是人。在一个实施方案中，所述受试者是被诊断出患有病况或病症的哺乳动物，例如人。在另一实施方案中，所述受试者是处于发展病况或病症的风险中的哺乳动物，例如人。
“施用(administer)”或“施用(administration)”是指将存在于体外的物质注射或以其他方式物理递送到患者体内的行为，如通过粘膜、皮内、静脉内、肌肉内递送和/或本文描述的或本领域已知的任何其他物理递送方法。
如本文所用，术语“治疗(treat/treatment/treating)”是指由于施用一种或多种疗法而导致的疾病或病况的进展、严重程度和/或持续时间的减少或改善。可以通过评估是否存在与潜在病症有关的一种或多种症状的减轻、缓解和/或缓和，以使得观察到患者(尽管患者仍可能受困于该潜在病症)得到改善，从而确定治疗。术语“治疗”包括管控和减轻疾病。术语“管控(manage/managing/management)”是指受试者从疗法(其不一定能治愈所述疾病)中获得的有益效果。
术语“预防(prevent/preventing/prevention)”是指减少疾病、病症、病况或相关症状发作(或复发)的可能性。
术语“约”和“大约”是指在给定值或范围的20％以内、15％以内、10％以内、9％以内、8％以内、7％以内、6％以内、5％以内、4％以内、3％以内、2％内、1％以内或更少。
如本文所用，术语“与皮肤有关的疾病或病症”或“与皮肤组织有关的疾病或病症”，是指源自或影响哺乳动物皮肤(例如人皮肤)任何部分的任何疾病或病症。本文使用的术语“皮肤”包括外胚层组织的任何层，包括任何直接的下层肌肉、骨骼、韧带和内部器官，并且包括多毛的和光滑的皮肤(无毛的)。与皮肤组织有关的疾病或病症，可以是但不限于：源自或影响表皮、浅表动静脉神经丛、乳头真皮、真皮(包括网状真皮)、迈斯纳氏小体、汗管和皮下组织或真皮(包括深动静脉丛和皮下脂肪)的疾病或病症。如本文所用，术语“与肠组织有关的疾病或病症”是指源自或影响哺乳动物肠(例如人肠)任何部分的任何疾病或病症。如本文所用，术语“与肺组织有关的疾病或病症”是指源自或影响哺乳动物肺部(例如人肺)任何部分的任何疾病或病症。
如本公开和权利要求书中所使用的，单数形式“一个/种(a/an)”和“所述/该(the)”包括复数形式，除非上下文另外明确指出。
应当理解的是，除了用术语“包含”来描述实施方案，也提供根据“由...构成”和/或“基本上由...构成”来描述类似的实施方案。还应当理解的是，在本文中除了用短语“基本上由...组成”描述实施方案，还提供了用“由...组成”描述类似的实施方案。
在诸如“在A与B之间”或“在A-B之间”的短语中，使用的术语“在...之间”是指包括A和B两者的范围。
本文中在诸如“A和/或B”的短语中使用的术语“和/或”，旨在包括A和B；A或B；A(单独)；和B(单独)。同样地，在诸如“A、B和/或C”的短语中使用的术语“和/或”，旨在涵盖以下每个实施方案：A、B和C；A、B或C；A或C、A或B、B或C、A和C、A和B、B和C、A(单独)、B(单独)、和C(单独)。
5.2抗IL-36抗体和相关分子
5.2.1抗IL-36抗体
本文提供的抗体，包括但不限于：合成抗体、单克隆抗体、重组产生的抗体、多特异性抗体(包括双特异性抗体)、人抗体、人源化抗体、嵌合抗体、胞内抗体、单链Fv(scFv)(例如，包括单特异性、双特异性等)、骆驼化抗体、Fab片段、F(ab')片段、二硫键连接的Fv(sdFv)、抗独特型(anti-Id)抗体和上述任何的表位结合片段。
具体地，本文提供的抗体包括免疫球蛋白分子和免疫球蛋白分子的免疫学活性部分，即，含有免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ抗原的抗原结合位点的分子。本文提供的免疫球蛋白分子，可以是免疫球蛋白分子的任何类型(例如，IgG、IgE、IgM、IgD、IgA和IgY)、类别(例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2)或亚类。在一个具体的实施方案中，本文提供的抗体是IgG抗体，如IgG1、IgG2或IgG4抗体。
抗体的变体和衍生物，包括保留特异性结合表位的能力的抗体片段。示例性片段包括：Fab片段(包含抗原结合结构域并包含轻链和重链的一部分的抗体片段的抗体片段，所述重链由二硫键桥接)；Fab'(含有单个抗原结合结构域的抗体片段，该结构域包含Fab和穿过铰链区的重链的其他部分)；F(ab')2(通过重链的铰链区中的链间二硫键连接的两个Fab'分子；Fab'分子可指向相同或不同的表位)；双特异性Fab(具有两个抗原结合结构域的Fab分子，每个抗原结合结构域可以针对不同的表位)；包含可变区的单链Fab链，也称为scFv(通过10-25个氨基酸的链连接在一起的抗体的一条轻链和重链的可变抗原结合决定区)；二硫键连接的Fv或dsFv(通过二硫键连接在一起的抗体的一条轻链和重链的可变抗原结合决定区)；骆驼化的VH(抗体的一条重链的可变抗原结合决定性区域，其中VH界面上的某些氨基酸是在天然骆驼抗体的重链中发现的氨基酸)；双特异性scFv(具有两个抗原结合结构域的scFv或dsFv分子，每个结构域可以针对不同的表位)；双抗体(当第一scFv的VH结构域与第二scFv的VL结构域组装在一起，并且第一scFv的VL结构域与第二scFv的VH结构域组装在一起时，形成的二聚化scFv；双抗体的两个抗原结合结构域可以针对相同或不同的表位)；三抗体(三聚体scFv，以类似于双抗体的方式形成，但是其中在单个复合物中产生三个抗原结合结构域；三个抗原结合结构域可以针对相同或不同的表位)；四抗体(四聚体scFv，以与双抗体相似的方式形成，但其中在单个复合物中产生四个抗原结合结构域；四个抗原结合结构域可指向相同或不同的表位)。抗体的衍生物还包括抗体组合位点的一个或多个CDR序列。当存在两个或更多个CDR序列时，CDR序列可以在支架上连接在一起。在某些实施方案中，本文提供的抗体包含单链Fv(“scFv”)。scFv是包含抗体的VH和VL结构域的抗体片段，其中这些结构域存在于单个多肽链中。通常，scFv多肽在VH和VL结构域之间还包含多肽接头，其使scFv能够形成所需的抗原结合结构。有关scFv的综述，请参阅Pluckthun,The Pharmacology of Monoclonal Antibodies,vol.113,Rosenburg and Mooreeds.Springer-Verlag,New York,pp.269-315(1994)。
本文提供的抗体可以来自任何动物来源，包括鸟类和哺乳动物(例如，人、猴、鼠、驴、绵羊、兔、山羊、豚鼠、骆驼、马或鸡)。在某些实施方案中，本文提供的抗体是人或人源化单克隆抗体。如本文所用，“人”抗体包括具有人免疫球蛋白氨基酸序列的抗体，并且包括从人免疫球蛋白文库或表达人基因抗体的小鼠中分离的抗体。
在某些实施方案中，所述抗体是完全的小鼠抗体。在某些实施方案中，所述抗体是人源化抗体。在某些实施方案中，所述抗体是完全人抗体，例如免疫特异性结合IL-36α和/或IL-36γ多肽、IL-36α和/或IL-36γ多肽片段、或IL-36α和/或IL-36γ表位的完全人抗体。
本文提供的抗体可以是单特异性、双特异性、三特异性或更大的多特异性的。例如，在某些实施方案中，双特异性抗体对IL-36α和/或IL-36γ多肽的一个表位具有一种特异性，并对IL-36α和/或IL-36γ多肽的第二个表位具有第二种特异性。在其他实施方案中，双特异性抗体对IL-36α和/或IL-36γ多肽具有一种特异性，并对异源表位(如异源多肽或固体支持材料)具有第二种特异性。
在一些实施方案中，本文提供了结合IL-36α和/或IL-36γ的抗体。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ两者。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合人IL-36α和IL-36γ。在其他实施方案中，本文提供的抗体结合食蟹猕猴IL-36α和IL-36γ。在其他实施方案中，本文提供的抗体结合人IL-36α和IL-36γ以及食蟹猕猴IL-36α和IL-36γ。在一些实施方案中，本文提供的抗体不结合人或食蟹猕猴IL-36β。在一些实施方案中，本文提供的抗体不阻断IL-36β与IL-36受体的结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体不结合人或食蟹猕猴IL-36Ra。在一些实施方案中，本文提供的抗体不阻断IL-36Ra与IL-36受体的结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体不结合人或食蟹猕猴IL-36β和IL-36Ra。在一些实施方案中，本文提供的抗体不阻断IL-36β和IL-36Ra与IL-36受体的结合。
在其他实施方案中，本文提供的抗体是人源化抗体(例如，包含人恒定区和框架区)，其结合IL-36α和IL-36γ(包括IL-36α和/或IL-36γ多肽、IL-36α和/或IL-36γ多肽片段、IL-36α和/或IL-36γ肽、或IL-36α和/或IL-36γ表位)。
除非另有说明，术语“IL-36α”和“IL-36α多肽”涵盖来自任何脊椎动物来源的多肽(本文中“多肽”和“蛋白质”可互换使用)包括任何天然多肽，所述脊椎动物包括哺乳动物如灵长类动物(例如人和食蟹猕猴(cynomolgus macaque)、狗和啮齿动物(如小鼠和大鼠)。术语“IL-36α”还涵盖“全长”、未加工的IL-36α，以及由于在细胞内或细胞外加工而产生的任何形式的IL-36α。“相关的IL-36α多肽”包括等位基因变体(例如，SNP变体)、剪接变体、片段、衍生物、替换物、删除和插入变体、融合多肽、种间同系物以及种间嵌合体(它们能够保留IL-36α活性)。如本领域技术人员应理解的，本文提供的抗IL-36α抗体可以结合IL-36α多肽、IL-36α多肽片段、IL-36α抗原和/或IL-36α表位。“表位”可以是较大的IL-36α抗原的一部分，其可以是较大的IL-36α多肽片段的一部分，其又可以是较大的IL-36α多肽的一部分。IL-36α可以天然或变性形式存在。本文所述的IL-36α多肽可从多种来源分离，如从人类组织类型或另一种来源分离，或通过重组或合成方法制备。IL-36α多肽的直系同源物也是本领域众所周知的。
在一些实施方案中，人IL-36α具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列(GenBankTM登录号NP_055255.1)，如下所示：
MEKALKIDTPQQGSIQDINHRVWVLQDQTLIAVPRKDRMSPVTIALISCRHVETLEKDRGNPIYLGLNGLNLCLMCAKVGDQPTLQLKEKDIMDLYNQPEPVKSFLFYHSQSGRNSTFESVAFPGWFIAVSSEGGCPLILTQELGKANTTDFGLTMLF(SEQ ID NO:1)。
上述人IL-36α蛋白的相应编码核酸序列具有SEQ ID NO:99的多核苷酸序列，如下所示：ATGGAAAAAGCATTGAAAATTGACACACCTCAGCAGGGGAGCATTCAGGATATCAATCATCGGGTGTGGGTTCTTCAGGACCAGACGCTCATAGCAGTCCCGAGGAAGGACCGTATGTCTCCAGTCACTATTGCCTTAATCTCATGCCGACATGTGGAGACCCTTGAGAAAGACAGAGGGAACCCCATCTACCTGGGCCTGAATGGACTCAATCTCTGCCTGATGTGTGCTAAAGTCGGGGACCAGCCCACACTGCAGCTGAAGGAAAAGGATATAATGGATTTGTACAACCAACCCGAGCCTGTGAAGTCCTTTCTCTTCTACCACAGCCAGAGTGGCAGGAACTCCACCTTCGAGTCTGTGGCTTTCCCTGGCTGGTTCATCGCTGTCAGCTCTGAAGGAGGCTGTCCTCTCATCCTTACCCAAGAACTGGGGAAAGCCAACACTACTGACTTTGGGTTAACTATGCTGTTT(SEQ ID NO:99)。
在一些实施方案中，人IL-36α具有如下所示的SEQ ID NO:101的氨基酸序列：
MEKALKIDTPQRGSIQDINHRVWVLQDQTLIAVPRKDRMSPVTIALISCRHVETLEKDRGNPIYLGLNGLNLCLMCAKVGDQPTLQLKEKDIMDLYNQPEPVKSFLFYHSQSGRNSTFESVAFPGWFIAVSSEGGCPLILTQELGKANTTDFGLTMLF(SEQ ID NO:101)。
上述人IL-36α蛋白的相应编码核酸序列具有SEQ ID NO:100的多核苷酸序列，如下所示：
ATGGAAAAAGCATTGAAAATTGACACACCTCAGCGGGGGAGCATTCAGGATATCAATCATCGGGTGTGGGTTCTTCAGGACCAGACGCTCATAGCAGTCCCGAGGAAGGACCGTATGTCTCCAGTCACTATTGCCTTAATCTCATGCCGACATGTGGAGACCCTTGAGAAAGACAGAGGGAACCCCATCTACCTGGGCCTGAATGGACTCAATCTCTGCCTGATGTGTGCTAAAGTCGGGGACCAGCCCACACTGCAGCTGAAGGAAAAGGATATAATGGATTTGTACAACCAACCCGAGCCTGTGAAGTCCTTTCTCTTCTACCACAGCCAGAGTGGCAGGAACTCCACCTTCGAGTCTGTGGCTTTCCCTGGCTGGTTCATCGCTGTCAGCTCTGAAGGAGGCTGTCCTCTCATCCTTACCCAAGAACTGGGGAAAGCCAACACTACTGACTTTGGGTTAACTATGCTGTTT(SEQ ID NO:100)。
在一些实施方案中，人IL-36α(截短的变体)具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列(NCBIGenBankTM登录号NM_014440的dbSNP:rs895497的翻译)，如下所示：
KIDTPQRGSIQDINHRVWVLQDQTLIAVPRKDRMSPVTIALISCRHVETLEKDRGNPIYLGLNGLNLCLMCAKVGDQPTLQLKEKDIMDLYNQPEPVKSFLFYHSQSGRNSTFESVAFPGWFIAVSSEGGCPLILTQELGKANTTDFGLTMLF(SEQ ID NO:5)。
上述人IL-36α蛋白的相应编码核酸序列具有SEQ ID NO:4的多核苷酸序列(NCBIGenBankTM登记号NM_014440的dbSNP:rs895497)，如下所示：
AAAATTGACACACCTCAGCGGGGGAGCATTCAGGATATCAATCATCGGGTGTGGGTTCTTCAGGACCAGACGCTCATAGCAGTCCCGAGGAAGGACCGTATGTCTCCAGTCACTATTGCCTTAATCTCATGCCGACATGTGGAGACCCTTGAGAAAGACAGAGGGAACCCCATCTACCTGGGCCTGAATGGACTCAATCTCTGCCTGATGTGTGCTAAAGTCGGGGACCAGCCCACACTGCAGCTGAAGGAAAAGGATATAATGGATTTGTACAACCAACCCGAGCCTGTGAAGTCCTTTCTCTTCTACCACAGCCAGAGTGGCAGGAACTCCACCTTCGAGTCTGTGGCTTTCCCTGGCTGGTTCATCGCTGTCAGCTCTGAAGGAGGCTGTCCTCTCATCCTTACCCAAGAACTGGGGAAAGCCAACACTACTGACTTTGGGTTAACTATGCTGTTTTAA(SEQ ID NO:4)。
在其他实施方案中，人IL-36α(截短的变体)具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列(GenBankTM登录号NP_055255.1)，如下所示：
KIDTPQQGSIQDINHRVWVLQDQTLIAVPRKDRMSPVTIALISCRHVETLEKDRGNPIYLGLNGLNLCLMCAKVGDQPTLQLKEKDIMDLYNQPEPVKSFLFYHSQSGRNSTFESVAFPGWFIAVSSEGGCPLILTQELGKANTTDFGLTMLF(SEQ ID NO:7)。
上述人IL-36α蛋白的相应编码核酸序列具有SEQ ID NO:6的多核苷酸序列(GenBankTM登录号NM_014440.1)，如下所示：
AAAATTGACACACCTCAGCAGGGGAGCATTCAGGATATCAATCATCGGGTGTGGGTTCTTCAGGACCAGACGCTCATAGCAGTCCCGAGGAAGGACCGTATGTCTCCAGTCACTATTGCCTTAATCTCATGCCGACATGTGGAGACCCTTGAGAAAGACAGAGGGAACCCCATCTACCTGGGCCTGAATGGACTCAATCTCTGCCTGATGTGTGCTAAAGTCGGGGACCAGCCCACACTGCAGCTGAAGGAAAAGGATATAATGGATTTGTACAACCAACCCGAGCCTGTGAAGTCCTTTCTCTTCTACCACAGCCAGAGTGGCAGGAACTCCACCTTCGAGTCTGTGGCTTTCCCTGGCTGGTTCATCGCTGTCAGCTCTGAAGGAGGCTGTCCTCTCATCCTTACCCAAGAACTGGGGAAAGCCAACACTACTGACTTTGGGTTAACTATGCTGTTTTAA(SEQ ID NO:6)。
在某些实施方案中，食蟹猕猴IL-36α具有SEQ ID NO:109的氨基酸序列，如下所示：
MKKFIVVLYGKLRLCSWSLSELFSMSKSEMPQPVSIQDINHRVWVLQDQILIAVPRKDRVSPVTISLISCRHVETLEKDRGNPIYLGLNGLNLCLMCAKAGDQPTLQLKEKDIMDLYNQPEPVKSFLFYHSQSGRNSTFESVAFPGWFIAVSSEGGCPLILTQELGKANTTDFGLTMLF(SEQ ID NO:109)。
上述食蟹猕猴IL-36α蛋白的相应编码核酸序列具有SEQ ID NO:108的多核苷酸序列，如下所示：
ATGAAAAAATTCATTGTTGTACTATATGGAAAACTCAGGCTGTGTTCATGGTCTTTGAGTGAACTATTTTCAATGTCGAAAAGTGAAATGCCTCAGCCGGTGAGCATTCAGGATATCAATCATCGGGTGTGGGTTCTTCAGGACCAGATCCTCATAGCAGTCCCGAGGAAGGACCGTGTGTCTCCAGTCACTATTTCCTTAATCTCATGCCGACATGTGGAGACCCTTGAGAAAGACAGAGGGAACCCCATCTACCTGGGACTGAATGGGCTCAATCTCTGCTTGATGTGTGCTAAGGCCGGGGACCAGCCCACACTGCAGCTGAAGGAAAAGGATATAATGGATTTGTACAACCAACCTGAGCCTGTGAAGTCCTTTCTCTTCTACCACAGCCAGAGTGGCAGGAACTCCACCTTCGAGTCTGTGGCCTTCCCTGGCTGGTTCATTGCTGTCAGCTCTGAAGGAGGCTGTCCTCTCATCCTTACCCAAGAACTGGGGAAAGCCAACACTACTGACTTTGGGTTAACTATGCTGTTT(SEQ ID NO:108)。
在某些实施方案中，食蟹猕猴IL-36α(食蟹猕猴的截短变体)具有如下所示的SEQID NO:13(XP_015288898.1)的氨基酸序列：
KSEMPQPVSIQDINHRVWVLQDQILIAVPRKDRVSPVTISLISCRHVETLEKDRGNPIYLGLNGLNLCLMCAKAGDQPTLQLKEKDIMDLYNQPEPVKSFLFYHSQSGRNSTFESVAFPGWFIAVSSEGGCPLILTQELGKANTTDFGLTMLF(SEQ ID NO:13)
上述食蟹猕猴IL-36α蛋白的相应编码核酸序列具有SEQ ID NO:12(XM_015433412)的多核苷酸序列，如下所示：
AAAAGTGAAATGCCTCAGCCGGTGAGCATTCAGGATATCAATCATCGGGTGTGGGTTCTTCAGGACCAGATCCTCATAGCAGTCCCGAGGAAGGACCGTGTGTCTCCAGTCACTATTTCCTTAATCTCATGCCGACATGTGGAGACCCTTGAGAAAGACAGAGGGAACCCCATCTACCTGGGACTGAATGGGCTCAATCTCTGCTTGATGTGTGCTAAGGCCGGGGACCAGCCCACACTGCAGCTGAAGGAAAAGGATATAATGGATTTGTACAACCAACCTGAGCCTGTGAAGTCCTTTCTCTTCTACCACAGCCAGAGTGGCAGGAACTCCACCTTCGAGTCTGTGGCCTTCCCTGGCTGGTTCATTGCTGTCAGCTCTGAAGGAGGCTGTCCTCTCATCCTTACCCAAGAACTGGGGAAAGCCAACACTACTGACTTTGGGTTAACTATGCTGTTTTAA(SEQ ID NO:12)。
除非另有说明，术语“IL-36γ”和“IL-36γ多肽”涵盖来自任何脊椎动物来源的多肽(本文中“多肽”和“蛋白质”可互换使用)包括任何天然多肽，所述脊椎动物包括哺乳动物如灵长类动物(例如人和食蟹猕猴(cynomolgus macaque)、狗和啮齿动物(如小鼠和大鼠)。术语“IL-36γ”还涵盖“全长”、未加工的IL-36γ，以及在细胞内或细胞外加工产生的任何形式的IL-36γ。“相关的IL-36γ多肽”包括等位基因变体(例如，SNP变体)、剪接变体、片段、衍生物、替换物、删除和插入变体、融合多肽、种间同系物以及种间嵌合体(它们能够保留IL-36γ活性)。如本领域技术人员将理解的，本文提供的抗IL-36γ抗体，可以结合IL-36γ多肽、IL-36γ多肽片段、IL-36γ抗原和/或IL-36γ表位。“表位”可以是较大的IL-36γ抗原的一部分，其可以是较大的IL-36γ多肽片段的一部分，其又可以是较大的IL-36γ多肽的一部分。IL-36γ可以天然或变性形式存在。本文描述的IL-36γ多肽可以从多种来源分离，如从人类组织类型或另一种来源分离，或通过重组或合成方法制备。IL-36γ多肽的直系同源物也是本领域众所周知的。
在一些实施方案中，人IL-36γ具有SEQ ID NO:3(GenBankTM登录号NP_062564.1)的氨基酸序列，如下所示：
MRGTPGDADGGGRAVYQSMCKPITGTINDLNQQVWTLQGQNLVAVPRSDSVTPVTVAVITCKYPEALEQGRGDPIYLGIQNPEMCLYCEKVGEQPTLQLKEQKIMDLYGQPEPVKPFLFYRAKTGRTSTLESVAFPDWFIASSKRDQPIILTSELGKSYNTAFELNIND(SEQ ID NO:3)。
上述人IL-36γ蛋白的相应编码核酸序列具有如下所示的SEQ ID NO:103的多核苷酸序列：
ATGAGAGGCACTCCAGGAGACGCTGATGGTGGAGGAAGGGCCGTCTATCAATCAATGTGTAAACCTATTACTGGGACTATTAATGATTTGAATCAGCAAGTGTGGACCCTTCAGGGTCAGAACCTTGTGGCAGTTCCACGAAGTGACAGTGTGACCCCAGTCACTGTTGCTGTTATCACATGCAAGTATCCAGAGGCTCTTGAGCAAGGCAGAGGGGATCCCATTTATTTGGGAATCCAGAATCCAGAAATGTGTTTGTATTGTGAGAAGGTTGGAGAACAGCCCACATTGCAGCTAAAAGAGCAGAAGATCATGGATCTGTATGGCCAACCCGAGCCCGTGAAACCCTTCCTTTTCTACCGTGCCAAGACTGGTAGGACCTCCACCCTTGAGTCTGTGGCCTTCCCGGACTGGTTCATTGCCTCCTCCAAGAGAGACCAGCCCATCATTCTGACTTCAGAACTTGGGAAGTCATACAACACTGCCTTTGAATTAAATATAAATGAC(SEQ ID NO:103)。
在一些实施方案中，人IL-36γ(截短的变体)具有SEQ ID NO:10(GenBankTM登录号NP_062564.1的截短版本)的氨基酸序列，如下所示：
SMCKPITGTINDLNQQVWTLQGQNLVAVPRSDSVTPVTVAVITCKYPEALEQGRGDPIYLGIQNPEMCLYCEKVGEQPTLQLKEQKIMDLYGQPEPVKPFLFYRAKTGRTSTLESVAFPDWFIASSKRDQPIILTSELGKSYNTAFELNIND(SEQ ID NO:10)。
上述人IL-36γ蛋白的相应编码核酸序列具有如下所示的SEQ ID NO:104的多核苷酸序列：
TCAATGTGTAAACCTATTACTGGGACTATTAATGATTTGAATCAGCAAGTGTGGACCCTTCAGGGTCAGAACCTTGTGGCAGTTCCACGAAGTGACAGTGTGACCCCAGTCACTGTTGCTGTTATCACATGCAAGTATCCAGAGGCTCTTGAGCAAGGCAGAGGGGATCCCATTTATTTGGGAATCCAGAATCCAGAAATGTGTTTGTATTGTGAGAAGGTTGGAGAACAGCCCACATTGCAGCTAAAAGAGCAGAAGATCATGGATCTGTATGGCCAACCCGAGCCCGTGAAACCCTTCCTTTTCTACCGTGCCAAGACTGGTAGGACCTCCACCCTTGAGTCTGTGGCCTTCCCGGACTGGTTCATTGCCTCCTCCAAGAGAGACCAGCCCATCATTCTGACTTCAGAACTTGGGAAGTCATACAACACTGCCTTTGAATTAAATATAAATGAC(SEQ ID NO:104)。
在某些实施方案中，食蟹猕猴IL-36γ具有SEQ ID NO:113(XP_015288884)的氨基酸序列，如下所示：
MRGTPGNPAGGGRVVYQSMRTPITGTINDLNQQVWTLQGQILVAVPRSDSVTPVTVAVITCKYPEALDQSRGDPIYLGIRNPEMCLCCEEVGGQPTLQLKEQKIMDLYGQPEPVKPFLFYRVKTGRTSTLESVAFPNWFIASSTRDQPIILTSELGKSYNTAFELNIK(SEQ ID NO:113)。
上述食蟹猕猴IL-36γ蛋白的相应编码核酸序列具有如下所示的SEQ ID NO:112(XM_015433398)的多核苷酸序列：
ATGAGAGGCACTCCAGGAAACCCTGCTGGTGGAGGAAGGGTCGTCTATCAGTCAATGCGTACACCTATTACTGGGACTATTAATGATTTGAATCAGCAAGTGTGGACCCTTCAGGGTCAGATCCTTGTGGCAGTTCCACGAAGTGACAGTGTGACCCCAGTCACTGTCGCTGTTATCACATGCAAGTATCCAGAGGCTCTTGACCAAAGCAGAGGGGATCCCATTTATTTGGGAATCCGGAATCCAGAAATGTGTTTGTGTTGTGAGGAGGTTGGAGGACAGCCCACGTTGCAGCTAAAAGAGCAGAAGATCATGGATTTGTATGGCCAGCCCGAGCCTGTGAAACCCTTCCTTTTCTACCGTGTCAAGACCGGTAGGACCTCCACCCTTGAGTCTGTGGCCTTCCCAAACTGGTTCATTGCCTCTTCCACGAGAGACCAGCCCATCATCCTGACTTCAGAACTTGGGAAGTCATACAACACTGCCTTTGAATTAAATATAAAA(SEQ ID NO:112)。
在某些实施方案中，所述食蟹猕猴IL-36γ(食蟹猕猴的截短变体)具有SEQ IDNO:17(XP_015288884)的氨基酸序列，如下所示：
SMRTPITGTINDLNQQVWTLQGQILVAVPRSDSVTPVTVAVITCKYPEALDQSRGDPIYLGIRNPEMCLCCEEVGGQPTLQLKEQKIMDLYGQPEPVKPFLFYRVKTGRTSTLESVAFPNWFIASSTRDQPIILTSELGKSYNTAFELNIK(SEQ ID NO:17)
上述食蟹猕猴IL-36γ蛋白的相应编码核酸序列具有SEQ ID NO:16(XM_015433398)的多核苷酸序列，如下所示：
TCAATGCGTACACCTATTACTGGGACTATTAATGATTTGAATCAGCAAGTGTGGACCCTTCAGGGTCAGATCCTTGTGGCAGTTCCACGAAGTGACAGTGTGACCCCAGTCACTGTCGCTGTTATCACATGCAAGTATCCAGAGGCTCTTGACCAAAGCAGAGGGGATCCCATTTATTTGGGAATCCGGAATCCAGAAATGTGTTTGTGTTGTGAGGAGGTTGGAGGACAGCCCACGTTGCAGCTAAAAGAGCAGAAGATCATGGATTTGTATGGCCAGCCCGAGCCTGTGAAACCCTTCCTTTTCTACCGTGTCAAGACCGGTAGGACCTCCACCCTTGAGTCTGTGGCCTTCCCAAACTGGTTCATTGCCTCTTCCACGAGAGACCAGCCCATCATCCTGACTTCAGAACTTGGGAAGTCATACAACACTGCCTTTGAATTAAATATAAAATAA(SEQ ID NO:16)。
除非另有说明，术语“IL-36β”和“IL-36β多肽”涵盖来自任何脊椎动物来源的多肽(本文中“多肽”和“蛋白质”可互换使用)包括任何天然多肽，所述脊椎动物包括哺乳动物，诸如灵长类动物(例如人和食蟹猕猴(cynomolgus macaque)、狗和啮齿动物(如小鼠和大鼠)。术语“IL-36β”还涵盖“全长”、未加工的IL-36β，以及由于在细胞内或细胞外加工而产生的任何形式的IL-36β。“相关的IL-36β多肽”包括等位基因变体(例如，SNP变体)、剪接变体、片段、衍生物、替换物、删除和插入变体、融合多肽、种间同系物和种间嵌合体(它们能够保留IL-36β活性)。IL-36β可以天然或变性形式存在。本文所述的IL-36β多肽可从多种来源分离，如从人类组织类型或另一种来源分离，或通过重组或合成方法制备。IL-36β多肽的直系同源物也是本领域众所周知的。
在一些实施方案中，所述人IL-36β具有SEQ ID NO:2(GenBankTM登录号NP_775270.1)的氨基酸序列，如下所示：
MNPQREAAPKSYAIRDSRQMVWVLSGNSLIAAPLSRSIKPVTLHLIACRDTEFSDKEKGNMVYLGIKGKDLCLFCAEIQGKPTLQLKEKNIMDLYVEKKAQKPFLFFHNKEGSTSVFQSVSYPGWFIATSTTSGQPIFLTKERGITNNTNFYLDSVE(SEQ ID NO:2)。
上述人IL-36β的相应的编码核酸序列具有SEQ ID NO:102的多核苷酸序列，如下所示：
ATGAACCCACAACGGGAGGCAGCACCCAAATCCTATGCTATTCGTGATTCTCGACAGATGGTGTGGGTCCTGAGTGGAAATTCTTTAATAGCAGCTCCTCTTAGCCGCAGCATTAAGCCTGTCACTCTTCATTTAATAGCCTGTAGAGACACAGAATTCAGTGACAAGGAAAAGGGTAATATGGTTTACCTGGGAATCAAGGGAAAAGATCTCTGTCTCTTCTGTGCAGAAATTCAGGGCAAGCCTACTTTGCAGCTTAAGGAAAAAAATATCATGGACCTGTATGTGGAGAAGAAAGCACAGAAGCCCTTTCTCTTTTTCCACAATAAAGAAGGCTCCACTTCTGTCTTTCAGTCAGTCTCTTACCCTGGCTGGTTCATAGCCACCTCCACCACATCAGGACAGCCCATCTTTCTCACCAAGGAGAGAGGCATAACTAATAACACTAACTTCTACTTAGATTCTGTGGAA(SEQ ID NO:102)。
在一些实施方案中，所述人IL-36β(截短的变体)具有SEQ ID NO:9(GenBankTM登录号NP_775270.1的截短形式)的氨基酸序列，如下所示：
REAAPKSYAIRDSRQMVWVLSGNSLIAAPLSRSIKPVTLHLIACRDTEFSDKEKGNMVYLGIKGKDLCLFCAEIQGKPTLQLKEKNIMDLYVEKKAQKPFLFFHNKEGSTSVFQSVSYPGWFIATSTTSGQPIFLTKERGITNNTNFYLDSVE(SEQ ID NO:9)。
上述人IL-36β蛋白的相应编码核酸序列具有SEQ ID NO:8的多核苷酸序列(GenBankTM登录号NM_173178的截短版本)，如下所示：
CGGGAGGCAGCACCCAAATCCTATGCTATTCGTGATTCTCGACAGATGGTGTGGGTCCTGAGTGGAAATTCTTTAATAGCAGCTCCTCTTAGCCGCAGCATTAAGCCTGTCACTCTTCATTTAATAGCCTGTAGAGACACAGAATTCAGTGACAAGGAAAAGGGTAATATGGTTTACCTGGGAATCAAGGGAAAAGATCTCTGTCTCTTCTGTGCAGAAATTCAGGGCAAGCCTACTTTGCAGCTTAAGGAAAAAAATATCATGGACCTGTATGTGGAGAAGAAAGCACAGAAGCCCTTTCTCTTTTTCCACAATAAAGAAGGCTCCACTTCTGTCTTTCAGTCAGTCTCTTACCCTGGCTGGTTCATAGCCACCTCCACCACATCAGGACAGCCCATCTTTCTCACCAAGGAGAGAGGCATAACTAATAACACTAACTTCTACTTAGATTCTGTGGAATAA(SEQ ID NO:8)。
在某些实施方案中，所述食蟹猕猴IL-36β具有SEQ ID NO:111的氨基酸序列，如下所示：
MNPQWQAAPKSYAIRDSRQMVWVLSGNSLIAAPLSNRVKPVTLHLITCRDTEFSDKKKGNLVYLGIRGKDLCLFCEEIQGKPTLQLKEKNIMDLYMEKKAQKPFLFFHNKEGSSSVFQSVSYPGWFIATSSTSGQPIFLTQERGITNNTNFYLDSVE(SEQ ID NO:111)。
上述食蟹猕猴IL-36β蛋白的相应编码核酸序列具有SEQ ID NO:110的多核苷酸序列，如下所示：
ATGAACCCACAATGGCAGGCAGCACCCAAATCCTATGCTATTCGTGATTCTCGACAGATGGTGTGGGTCCTGAGTGGAAATTCTTTAATAGCAGCTCCTCTTAGCAACCGTGTTAAGCCTGTCACTCTTCATTTAATAACCTGCAGAGACACAGAATTCAGTGATAAGAAAAAGGGTAATCTGGTTTACCTGGGAATCAGGGGAAAAGATCTCTGTCTCTTCTGTGAAGAAATTCAGGGCAAACCTACTTTGCAGCTTAAGGAGAAAAACATCATGGACCTGTACATGGAGAAGAAAGCACAGAAGCCCTTTCTCTTTTTCCACAATAAAGAAGGCTCCAGTTCTGTCTTTCAGTCAGTCTCTTACCCTGGCTGGTTCATAGCCACCTCCTCCACATCAGGACAGCCCATCTTTCTCACCCAGGAGAGGGGCATAACTAACAACACTAACTTCTACTTAGATTCTGTGGAA(SEQ ID NO:110)。
在某些实施方案中，所述食蟹猕猴IL-36β(食蟹猕猴的截短变体)具有SEQ ID NO:15(XP_005575353)的氨基酸序列，如下所示：
WQAAPKSYAIRDSRQMVWVLSGNSLIAAPLSNRVKPVTLHLITCRDTEFSDKKKGNLVYLGIRGKDLCLFCEEIQGKPTLQLKEKNIMDLYMEKKAQKPFLFFHNKEGSSSVFQSVSYPGWFIATSSTSGQPIFLTQERGITNNTNFYLDSDSVE(SEQ ID NO:15)。
上述食蟹猕猴IL-36β蛋白的相应编码核酸序列具有SEQ ID NO:14的多核苷酸序列(XM_005575296)，如下所示：
TGGCAGGCAGCACCCAAATCCTATGCTATTCGTGATTCTCGACAGATGGTGTGGGTCCTGAGTGGAAATTCTTTAATAGCAGCTCCTCTTAGCAACCGTGTTAAGCCTGTCACTCTTCATTTAATAACCTGCAGAGACACAGAATTCAGTGATAAGAAAAAGGGTAATCTGGTTTACCTGGGAATCAGGGGAAAAGATCTCTGTCTCTTCTGTGAAGAAATTCAGGGCAAACCTACTTTGCAGCTTAAGGAGAAAAACATCATGGACCTGTACATGGAGAAGAAAGCACAGAAGCCCTTTCTCTTTTTCCACAATAAAGAAGGCTCCAGTTCTGTCTTTCAGTCAGTCTCTTACCCTGGCTGGTTCATAGCCACCTCCTCCACATCAGGACAGCCCATCTTTCTCACCCAGGAGAGGGGCATAACTAACAACACTAACTTCTACTTAGATTCTGTGGAATAA(SEQ ID NO:14)。
除非另有说明，术语“IL-36Ra”和“IL-36Ra多肽”涵盖来自任何脊椎动物来源的多肽(本文中“多肽”和“蛋白质”可互换使用)包括任何天然多肽，所述脊椎动物包括哺乳动物，诸如灵长类动物(例如人和食蟹猕猴(cynomolgus macaque)、狗和啮齿动物(例如小鼠和大鼠)。术语“IL-36Ra”也涵盖“全长”、未加工的IL-36Ra，以及在细胞内或细胞外加工而产生的任何形式的IL-36Ra。“相关的IL-36Ra多肽”包括等位基因变体(例如，SNP变体)、剪接变体、片段、衍生物、替换物、删除和插入变体、融合多肽、种间同系物和种间嵌合体(它们能够保留IL-36活性)。IL-36Ra可以天然或变性形式存在。本文所述的IL-36Ra多肽可从多种来源分离，如从人类组织类型或另一种来源分离，或通过重组或合成方法制备。IL-36Ra多肽的直系同源物也是本领域众所周知的。
在一些实施方案中，所述人IL-36Ra具有如下所示的SEQ ID NO:106的氨基酸序列：
MVLSGALCFRMKDSALKVLYLHNNQLLAGGLHAGKVIKGEEISVVPNRWLDASLSPVILGVQGGSQCLSCGVGQEPTLTLEPVNIMELYLGAKESKSFTFYRRDMGLTSSFESAAYPGWFLCTVPEADQPVRLTQLPENGGWNAPITDFYFQQCD(SEQ ID NO:106)。
上述人IL-36Ra的相应编码核酸序列具有如下所示的SEQ ID NO:105的多核苷酸序列：
ATGGTCCTGAGTGGGGCGCTGTGCTTCCGAATGAAGGACTCGGCATTGAAGGTGCTTTATCTGCATAATAACCAGCTTCTAGCTGGAGGGCTGCATGCAGGGAAGGTCATTAAAGGTGAAGAGATCAGCGTGGTCCCCAATCGGTGGCTGGATGCCAGCCTGTCCCCCGTCATCCTGGGTGTCCAGGGTGGAAGCCAGTGCCTGTCATGTGGGGTGGGGCAGGAGCCGACTCTAACACTAGAGCCAGTGAACATCATGGAGCTCTATCTTGGTGCCAAGGAATCCAAGAGCTTCACCTTCTACCGGCGGGACATGGGGCTCACCTCCAGCTTCGAGTCGGCTGCCTACCCGGGCTGGTTCCTGTGCACGGTGCCTGAAGCCGATCAGCCTGTCAGACTCACCCAGCTTCCCGAGAATGGTGGCTGGAATGCCCCCATCACAGACTTCTACTTCCAGCAGTGTGAC(SEQ ID NO:105)。
在一些实施方案中，所述人IL-36Ra(截短的变体)具有SEQ ID NO:11的氨基酸序列(GenBankTM登录号NP_036407，UniProt登录号Q9UBH0)，如下所示：
VLSGALCFRMKDSALKVLYLHNNQLLAGGLHAGKVIKGEEISVVPNRWLDASLSPVILGVQGGSQCLSCGVGQEPTLTLEPVNIMELYLGAKESKSFTFYRRDMGLTSSFESAAYPGWFLCTVPEADQPVRLTQLPENGGWNAPITDFYFQQCD(SEQ ID NO:11)。
上述人IL-36Ra的相应编码核酸序列具有如下所示的SEQ ID NO:107的多核苷酸序列：
GTCCTGAGTGGGGCGCTGTGCTTCCGAATGAAGGACTCGGCATTGAAGGTGCTTTATCTGCATAATAACCAGCTTCTAGCTGGAGGGCTGCATGCAGGGAAGGTCATTAAAGGTGAAGAGATCAGCGTGGTCCCCAATCGGTGGCTGGATGCCAGCCTGTCCCCCGTCATCCTGGGTGTCCAGGGTGGAAGCCAGTGCCTGTCATGTGGGGTGGGGCAGGAGCCGACTCTAACACTAGAGCCAGTGAACATCATGGAGCTCTATCTTGGTGCCAAGGAATCCAAGAGCTTCACCTTCTACCGGCGGGACATGGGGCTCACCTCCAGCTTCGAGTCGGCTGCCTACCCGGGCTGGTTCCTGTGCACGGTGCCTGAAGCCGATCAGCCTGTCAGACTCACCCAGCTTCCCGAGAATGGTGGCTGGAATGCCCCCATCACAGACTTCTACTTCCAGCAGTGTGAC(SEQ ID NO:107)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体或其片段结合选自以下的一个或多个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列的第45个氨基酸残基至第100个氨基酸残基。在一些实施方案中，本文提供的抗体或其片段结合选自以下的一个或多个氨基酸残基：SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的第45个氨基酸残基至第100个氨基酸残基。在一些实施方案中，本文提供的抗体或其片段结合选自以下的2、3、4、5、6、7、8、9、10个或更多个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列和/或SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的第45个氨基酸残基至第100个氨基酸残基。在一些实施方案中，本文提供的抗体或其片段结合选自以下的多于10、15、20、25或30个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α氨基酸序列和/或SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的第45个氨基酸残基至第100个氨基酸残基。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段结合选自以下的一个或多个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列的Arg 45、His 46、Glu48、Thr 49、Leu 50、Lys 85、Asp 89、Asn 92、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro 96、Val 97、Lys98和Phe100。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段结合选自以下的2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列的Arg 45、His 46、Glu 48、Thr 49、Leu 50、Lys 85、Asp 89、Asn 92、Gln 93、Pro94、Glu 95、Pro 96、Val 97、Lys 98和Phe100。
在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段结合选自以下的一个或多个氨基酸残基：SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的Tyr 46、Glu 48、Ala 49、Leu 50、Gln85、Gly 92、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro96、Val 97、Lys 98和Phe100。在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段结合选自以下的2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或13个氨基酸残基：SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的Tyr 46、Glu 48、Ala49、Leu 50、Gln 85、Gly 92、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro 96、Val 97、Lys 98和Phe 100。
在其他实施方案中，抗体或其抗原结合片段结合选自以下的一个或多个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列的Arg 45、His 46、Glu 48、Thr49、Leu 50、Lys 85、Asp 89、Asn 92、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro 96、Val 97、Lys 98和Phe100；以及结合选自以下的一个或多个氨基酸残基：SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的Tyr 46、Glu 48、Ala 49、Leu 50、Gln 85、Gly 92、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro 96、Val 97、Lys 98和Phe 100。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段结合选自以下的一个或多个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列的His 46、Glu 48、Thr49、Leu 50、Lys 85、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro 96、Val 97和Lys 98。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段结合选自以下的2、3、4、5、6、7、8、9、10或11个氨基酸残基：SEQID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α氨基酸序列的His 46、Glu 48、Thr 49、Leu 50、Lys85、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro 96、Val 97和Lys 98。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段结合选自以下的一个或多个氨基酸残基：SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的Ala 49、Leu 50、Gly 92、Gln 93、Pro94、Glu 95、Pro 96、Val 97和Lys 98。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段结合选自以下的2、3、4、5、6、7、8或9个氨基酸残基：SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的Ala 49、Leu 50、Gly 92、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro 96、Val 97和Lys 98。
在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段结合选自以下的一个或多个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列的His 46、Glu 48、Thr49、Leu 50、Lys 85、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro 96、Val 97和Lys 98；并结合选自以下的一个或多个氨基酸残基：SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的Ala 49、Leu 50、Gly92、Gln 93、Pro 94、Glu95、Pro 96、Val 97和Lys 98。
在一些更具体的实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段结合选自以下的至少一个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列和SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列两者的Leu 50、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro 96、Val 97和Lys98。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段结合选自以下的2、3、4、5、6或7个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列和SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的Leu 50、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro96、Val 97和Lys98。
在一个具体的实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段结合SEQ ID NO:5或SEQID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列和SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的第93至98位氨基酸残基。在另一个具体的实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段结合SEQ IDNO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列和SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的第93至97位氨基酸残基。在另一个具体的实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段结合SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列和SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的第50和第93至98位氨基酸残基。在又一个具体的实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段结合SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列和SEQ IDNO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的第50和93至97位氨基酸残基。
在以上段落中描述的具体实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段可以进一步结合SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:10中的一个或多个氨基酸残基。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段进一步结合SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:10中的1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多个氨基酸残基。例如，在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段进一步结合选自以下的至少一个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列的Arg 45、His 46、Glu48、Thr 49、Lys 85、Asp 89、Asn 92和Phe100；和/或结合选自以下的至少一个氨基酸残基：SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的Tyr 46、Glu 48、Ala 49、Gln 85、Gly 92和Phe100。在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段进一步结合选自以下的至少一个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列的His 46、Glu 48、Thr 49和Lys 85；以及结合选自以下的至少一个氨基酸残基：SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的Ala 49和Gly 92。
在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于1000nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于100nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于50nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于40nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于30nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于20nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于10nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于9nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于8nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于7nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于6nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于5nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于4nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于3nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于2nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于1nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于0.1nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于0.01nM的KD与IL-36α结合。还可以通过本领域中任何已知的方法来测量KD或KD值，例如，使用来自
Figure BDA0002992427630000551
的生物层干涉测量(BLI)或表面等离振子共振(SPR)分析，例如采用
Figure BDA0002992427630000553
系统或来自
Figure BDA0002992427630000555
的例如
Figure BDA0002992427630000556
或
Figure BDA0002992427630000554
还可以使用以上描述的相同的生物层干涉术(BLI)或表面等离振子共振(SPR)技术，采用例如
Figure BDA0002992427630000557
或
Figure BDA0002992427630000558
系统，来确定“结合速率(on-rate)”或“缔合的速率”或“缔合速率”或“kon”。在一个具体的实施方案中，通过
Figure BDA0002992427630000552
测定来确定KD。在一些实施方案中，IL-36α是人IL-36α。在一些实施方案中，IL-36α是食蟹猕猴IL-36α。
在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于1000nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于100nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于50nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于40nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于30nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于20nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于10nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于9nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于8nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于7nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于6nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于5nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于4nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于3nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于2nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于1nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于0.1nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段以小于0.01nM的KD与IL-36γ结合。还可以通过本领域中任何已知的方法来测量KD或KD值，例如，使用来自
Figure BDA0002992427630000561
的生物层干涉测量(BLI)或表面等离振子共振(SPR)分析，例如采用
Figure BDA0002992427630000562
系统或来自
Figure BDA0002992427630000563
的例如BiacoreTM-2000或BiacoreTM-3000。还可以使用与上述相同的生物层干涉术(BLI)或表面等离振子共振(SPR)技术，采用例如
Figure BDA0002992427630000564
或
Figure BDA0002992427630000565
系统，来确定“结合速率”或“缔合的速率”或“缔合速率”或“kon”。在一个具体的实施方案中，通过
Figure BDA0002992427630000566
测定来确定KD。在一些实施方案中，IL-36γ是人IL-36γ。在一些实施方案中，IL-36γ是食蟹猕猴IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段结合IL-36α和IL-36γ。在一些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段通过
Figure BDA0002992427630000567
测定确定以小于1000nM的KD与IL-36α结合，并且通过
Figure BDA0002992427630000568
测定确定以小于1000nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA0002992427630000569
测定确定以小于100nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA00029924276300005610
测定确定以小于100nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005611
测定确定以小于90nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA00029924276300005612
测定确定以小于90nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005613
测定确定以小于80nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA00029924276300005614
测定确定以小于80nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005615
测定确定以小于70nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA00029924276300005616
测定确定以小于70nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005617
测定确定以小于60nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA00029924276300005618
测定确定以小于60nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005619
测定确定以小于50nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA00029924276300005620
测定确定以小于50nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005621
测定确定以小于40nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA00029924276300005622
测定确定以小于40nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA0002992427630000571
测定确定以小于30nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA0002992427630000572
测定确定以小于30nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA0002992427630000573
测定确定以小于20nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA0002992427630000574
测定确定以小于20nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA0002992427630000575
测定确定以小于10nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA0002992427630000576
测定确定以小于10nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA0002992427630000577
测定确定以小于1nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA0002992427630000578
测定确定以小于1nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA0002992427630000579
测定确定以小于0.1nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA00029924276300005710
测定确定以小于0.1nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005711
测定确定以小于0.01nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA00029924276300005712
测定确定以小于0.01nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，IL-36α是人IL-36α。在一些实施方案中，IL-36α是食蟹猕猴IL-36α。在一些实施方案中，IL-36γ是人IL-36γ。在一些实施方案中，IL-36γ是食蟹猕猴IL-36γ。
在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005713
测定确定以小于100nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA00029924276300005714
测定确定以小于90nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005715
测定确定以小于100nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA00029924276300005716
测定确定以小于80nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005717
测定确定以小于100nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA00029924276300005718
测定确定以小于70nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005719
测定确定以小于100nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA00029924276300005720
测定确定以小于60nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005721
测定确定以小于100nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA00029924276300005722
测定确定以小于50nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005723
测定确定以小于100nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA00029924276300005724
测定确定以小于40nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005725
测定确定以小于100nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA0002992427630000581
测定确定以小于30nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA0002992427630000582
测定确定以小于100nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA0002992427630000583
测定确定以小于20nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA0002992427630000584
测定确定以小于100nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA0002992427630000585
测定确定以小于10nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA0002992427630000586
测定确定以小于100nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA0002992427630000587
测定确定以小于1nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA0002992427630000588
测定确定以小于100nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA0002992427630000589
测定确定以小于0.1nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005810
测定确定以小于100nM的KD与IL-36α结合，并通过
Figure BDA00029924276300005811
测定确定以小于0.01nM的KD与IL-36γ结合。在一些实施方案中，IL-36α是人IL-36α。在一些实施方案中，IL-36α是食蟹猕猴IL-36α。在一些实施方案中，IL-36γ是人IL-36γ。在一些实施方案中，IL-36γ是食蟹猕猴IL-36γ。
在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005812
测定确定以小于100nM的KD与IL-36γ结合，并通过
Figure BDA00029924276300005813
测定确定以小于90nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005814
测定确定以小于100nM的KD与IL-36γ结合，并通过
Figure BDA00029924276300005815
测定确定以小于80nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005816
测定确定以小于100nM的KD与IL-36γ结合，并通过
Figure BDA00029924276300005817
测定确定以小于70nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005818
测定确定以小于100nM的KD与IL-36γ结合，并通过
Figure BDA00029924276300005819
测定确定以小于60nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005820
测定确定以小于100nM的KD与IL-36γ结合，并通过
Figure BDA00029924276300005821
测定确定以小于50nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005822
测定确定以小于100nM的KD与IL-36γ结合，并通过
Figure BDA00029924276300005823
测定确定以小于40nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005824
测定确定以小于100nM的KD与IL-36γ结合，并通过
Figure BDA0002992427630000591
测定确定以小于30nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA0002992427630000592
测定确定以小于100nM的KD与IL-36γ结合，并通过
Figure BDA0002992427630000593
测定确定以小于20nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA0002992427630000594
测定确定以小于100nM的KD与IL-36γ结合，并通过
Figure BDA0002992427630000595
测定确定以小于10nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA0002992427630000596
测定确定以小于100nM的KD与IL-36γ结合，并通过
Figure BDA0002992427630000597
测定确定以小于1nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA0002992427630000598
测定确定以小于100nM的KD与IL-36γ结合，并通过
Figure BDA0002992427630000599
测定确定以小于0.1nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段通过
Figure BDA00029924276300005910
测定确定以小于100nM的KD与IL-36γ结合，并通过
Figure BDA00029924276300005911
测定确定以小于0.01nM的KD与IL-36α结合。在一些实施方案中，IL-36α是人IL-36α。在一些实施方案中，IL-36α是食蟹猕猴IL-36α。在一些实施方案中，IL-36γ是人IL-36γ。在一些实施方案中，IL-36γ是食蟹猕猴IL-36γ。
在一个方面，本文提供了特异性结合IL-36α并且可以调节IL-36α活性和/或表达(例如，抑制IL-36α介导的信号转导)的抗体。在某些实施方案中，本文提供IL-36α拮抗剂，其是本文所述的特异性结合IL-36α并抑制(包括部分抑制)至少一种IL-36α活性的抗体。在一些实施方案中，本文提供的抗体抑制(包括部分抑制或减少)IL-36α与其受体的结合。
IL-36α活性可以涉及IL-36α的任何活性，诸如本领域已知的或描述的那些。在某些实施方案中，IL-36α活性和IL-36α信号转导(或IL-36α介导的信号转导)在本文可互换使用。在某些方面，IL-36α活性是由IL-36受体诱导的(例如，IL-36α与IL-36受体结合)。在某些实施方案中，本文提供了特异性结合IL-36α并抑制(或减少)细胞因子产生的抗体。在一些实施方案中，本文提供的抗体不抑制IL-36α与IL-36受体的结合，但是抑制或减少IL-36α介导的信号转导或IL-36受体介导的信号转导。
在某些实施方案中，本文所述的抗体减弱(例如部分减弱)IL-36α活性。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α活性减弱至少约10％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α活性减弱至少约20％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α活性减弱至少约30％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α活性减弱至少约40％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α活性减弱至少约50％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α活性减弱至少约60％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α活性减弱至少约70％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α活性减弱至少约80％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α活性减弱至少约90％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α活性减弱至少约95％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36α活性减弱(例如，部分减弱)至少约15％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36α活性减弱(例如，部分减弱)至少约20％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36α活性减弱(例如，部分减弱)至少约30％至约65％。
在特定的实施方案中，通过本文所述的方法评估IL-36α活性的减弱。在特定的实施方案中，通过本领域技术人员已知的方法评估IL-36α活性的减弱。在某些实施方案中，相对于在没有任何抗IL-36α抗体的刺激下的所述IL-36α活性，IL-36α活性减弱。在某些实施方案中，相对于在存在不相关抗体(例如，不特异性结合IL-36α的抗体)的刺激下的所述IL-36α活性，IL-36α活性减弱。
IL-36α活性的非限制性实例是IL-36α介导的信号转导。因此，在某些实施方案中，本文所述的抗体减弱(例如部分减弱)IL-36α介导的信号转导。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α介导的信号转导减弱至少约10％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α介导的信号转导减弱至少约20％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α介导的信号转导减弱至少约30％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α介导的信号转导减弱至少约40％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α介导的信号转导减弱至少约50％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α介导的信号转导减弱至少约60％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α介导的信号转导减弱至少约70％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α介导的信号转导减弱至少约80％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α介导的信号转导减弱至少约90％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α介导的信号转导减弱至少约95％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36α介导的信号转导减弱(例如，部分减弱)至少约15％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36α介导的信号转导减弱(例如，部分减弱)至少约20％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36α介导的信号转导减弱(例如部分减弱)至少约30％至约65％。
IL-36α活性的另一个非限制性实例是与IL-36受体结合。因此，在某些实施方案中，本文所述的抗体减弱(例如部分减弱)IL-36α与IL-36受体的结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α与IL-36受体的结合减弱至少约10％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α与IL-36受体的结合减弱至少约20％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α与IL-36受体的结合减弱至少约30％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α与IL-36受体的结合减弱至少约40％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α与IL-36受体的结合减弱至少约50％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α与IL-36受体的结合减弱至少约60％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α与IL-36受体的结合减弱至少约70％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α与IL-36受体的结合减弱至少约80％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α与IL-36受体的结合减弱至少约90％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α与IL-36受体的结合减弱至少约95％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36α与IL-36受体的结合减弱(例如，部分减弱)至少约15％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36α与IL-36受体的结合减弱(例如，部分减弱)至少约20％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36α与IL-36受体的结合减弱(例如部分减弱)至少约30％至约65％。
IL-36α活性的另一个非限制性实例是由IL-36受体介导的信号转导。因此，在某些实施方案中，本文所述的抗体减弱(例如部分减弱)IL-36受体介导的信号转导。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约10％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约20％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约30％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约40％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约50％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约60％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约70％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约80％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约90％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约95％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36受体介导的信号转导减弱(例如，部分减弱)至少约15％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36受体介导的信号转导减弱(例如，部分减弱)至少约20％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36受体介导的信号转导减弱(例如，部分减弱)至少约30％至约65％。
在特定的实施方案中，本文提供的抗体(例如，144D464A、144L249B、144L124B、144L133B、144L180A、144L472A、144D666C、144J171G、144D464A LV7a HV10b、144D464ALV9are HV10b、144D464A LV10re HV10b、144D464A LV11re HV10b、144L249B LV7a HV11、144L249B LV9HV11、144L249B LV9 HV10b和144L249B LV9 HV10c中任一抗体或其抗原结合片段，或包含144D464A、144L249B、144L124B、144L133B、144L180A、144L472A、144D666C、144J171G、144D464A LV7a HV10b、144D464A LV9are HV10b、144D464A LV10re HV10b、144D464A LV11re HV10b、144L249BLV7a HV11、144L249B LV9 HV11、144L249B LV9 HV10b和144L249B LV9HV10c中任一抗体的CDR的抗体)特异性结合IL-36α，并抑制由IL-36α诱导的一种或多种细胞因子和/或趋化因子的分泌。在一些实施方案中，一种或多种细胞因子和/或趋化因子选自：IL-8、IL-6、IL-10、TNFα、IL-1β、CXCL1、CCL5、CCL20、CCL2、CCL3、CCL4、CXCL12、VEGF-A、IL-23、IL-36α、IL-36β和IL-36γ。
例如，在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约5％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约10％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约15％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约20％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约25％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约30％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约35％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约40％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约45％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约50％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约55％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约60％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约65％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约70％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约75％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约80％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约85％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约90％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约95％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约96％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约97％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约98％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α并抑制IL-8分泌至少约99％。在一些实施方案中，通过本文描述的方法评估IL-8分泌的抑制。在其他实施方案中，通过本领域技术人员已知的方法评估IL-8分泌的抑制。在一个特定的实施方案中，相对于不存在抗IL-36α抗体的IL-8分泌，所述IL-8分泌被抑制。在其他实施方案中，相对于存在不相关抗体(例如，不特异性结合IL-36α的抗体)的IL-8分泌，所述IL-8分泌被抑制。
在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约100nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约90nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约80nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约70nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约60nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约50nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约40nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约30nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约20nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约10nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约1nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约0.1nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约0.05nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约0.001nM的IC50抑制IL-8分泌。
在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约100nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约90nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约80nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约70nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约60nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约50nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约40nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约30nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约20nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约10nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约1nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约0.1nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约0.05nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约0.001nM的IC50抑制IL-8分泌。在特定的实施方案中，IC50通过本文所述的方法例如在下文第6节中进行评估。在其他实施方案中，通过本领域技术人员已知的其他方法评估IC50。
在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并减弱(例如，部分减弱)IL-36受体二聚化(即，IL-36R(也称为IL-1Rrp2)与IL-1RAcP(也称为IL-1受体辅助蛋白)之间的异二聚化)。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将IL-36受体二聚化减弱至少约10％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将IL-36受体二聚化减弱至少约15％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将IL-36受体二聚化减弱至少约20％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将IL-36受体二聚化减弱至少约25％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将IL-36受体二聚化减弱至少约30％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将IL-36受体二聚化减弱至少约35％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将IL-36受体二聚化减弱至少约40％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将IL-36受体二聚化减弱至少约45％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将IL-36受体二聚化减弱至少约50％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将IL-36受体二聚化减弱至少约55％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将IL-36受体二聚化减弱至少约60％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将IL-36受体二聚化减弱至少约65％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将IL-36受体二聚化减弱至少约70％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将IL-36受体二聚化减弱至少约75％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将IL-36受体二聚化减弱至少约80％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将IL-36受体二聚化减弱至少约85％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将IL-36受体二聚化减弱至少约90％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将IL-36受体二聚化减弱至少约95％。
在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并减弱(例如，部分减弱)丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径和/或核因子κB(NF-κB)依赖性转录的活化。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约10％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约15％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约20％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约25％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约30％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约35％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约40％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约45％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约50％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约60％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约65％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约70％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约75％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约80％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约85％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约90％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约95％。
在另一方面，本文提供了特异性结合IL-36γ并且可以调节IL-36γ活性和/或表达(例如，抑制IL-36γ介导的信号转导)的抗体。在某些实施方案中，本文提供了IL-36γ拮抗剂，其是本文所述的特异性结合IL-36γ并抑制(包括部分抑制)至少一种IL-36γ活性的抗体。在一些实施方案中，本文提供的抗体抑制(包括部分抑制或减少)IL-36γ与其受体的结合。
IL-36γ活性可以涉及IL-36γ的任何活性，诸如本领域已知或描述的那些。在某些实施方案中，IL-36γ活性和IL-36γ信号转导(或IL-36γ介导的信号转导)在本文可互换使用。在某些方面，IL-36γ活性是由IL-36受体诱导的(例如，IL-36γ与IL-36受体结合)。在某些实施方案中，本文提供了特异性结合IL-36γ并抑制(或减少)细胞因子产生的抗体。在一些实施方案中，本文提供的抗体不抑制IL-36γ与IL-36受体的结合，但是抑制或减少IL-36γ介导的或IL-36受体介导的信号转导。
在某些实施方案中，本文所述的抗体减弱(例如部分减弱)IL-36γ活性。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ活性减弱至少约10％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ活性减弱至少约20％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ活性减弱至少约30％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ活性减弱至少约40％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将L-36γ活性减弱至少约50％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将L-36γ活性减弱至少约60％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ活性减弱至少约70％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ活性减弱至少约80％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ活性减弱至少约90％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ活性减弱至少约95％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36γ活性减弱(例如，部分减弱)至少约15％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36γ活性减弱(例如，部分减弱)至少约20％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36γ活性减弱(例如，部分减弱)至少约30％至约65％。
在特定的实施方案中，通过本文所述的方法评估IL-36γ活性的减弱。在特定的实施方案中，通过本领域技术人员已知的方法评估IL-36γ活性的减弱。在某些实施方案中，相对于在没有任何抗IL-36γ抗体的刺激下的所述IL-36γ活性，IL-36γ活性减弱。在某些实施方案中，相对于在存在不相关抗体(例如，不特异性结合IL-36γ的抗体)的刺激下的所述IL-36γ活性，IL-36γ活性减弱。
IL-36γ活性的一个非限制性实例是IL-36γ介导的信号转导。因此，在某些实施方案中，本文所述的抗体减弱(例如部分减弱)IL-36γ介导的信号转导。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ介导的信号转导减弱至少约10％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ介导的信号转导减弱至少约20％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ介导的信号转导减弱至少约30％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ介导的信号转导减弱至少约40％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ介导的信号转导减弱至少约50％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ介导的信号转导减弱至少约60％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ介导的信号转导减弱至少约70％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ介导的信号转导减弱至少约80％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ介导的信号转导减弱至少约90％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ介导的信号转导减弱至少约95％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36γ介导的信号转导减弱(例如，部分减弱)至少约15％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36γ介导的信号转导减弱(例如部分减弱)至少约20％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以使IL-36γ介导的信号转导减弱(例如，部分减弱)至少约30％至约65％。
IL-36γ活性的另一个非限制性实例是与IL-36受体结合。因此，在某些实施方案中，本文所述的抗体减弱(例如部分减弱)IL-36γ与IL-36受体的结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约10％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约20％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约30％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约40％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约50％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约60％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约70％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约80％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约90％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约95％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36γ与IL-36受体的结合减弱(例如部分减弱)至少约15％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36γ与IL-36受体的结合减弱(例如，部分减弱)至少约20％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36γ与IL-36受体的结合减弱(例如，部分减弱)至少约30％至约65％。
IL-36γ活性的另一个非限制性实例是由IL-36受体介导的信号转导。因此，在某些实施方案中，本文所述的抗体减弱(例如部分减弱)IL-36受体介导的信号转导。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约10％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约20％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约30％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约40％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约50％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约60％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约70％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约80％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约90％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约95％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36受体介导的信号转导减弱(例如，部分减弱)至少约15％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36受体介导的信号转导减弱(例如，部分减弱)至少约20％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36受体介导的信号转导减弱(例如，部分减弱)至少约30％至约65％。
在特定的实施方案中，本文提供的抗体(例如，144D464A、144L249B、144L124B、144L133B、144L180A、144L472A、144D666C、144J171G、144D464A LV7a HV10b、144D464ALV9are HV10b、144D464A LV10re HV10b、144D464A LV11re HV10b、144L249B LV7a HV11、144L249B LV9HV11、144L249B LV9 HV10b和144L249B LV9 HV10c中任一抗体或其抗原结合片段，或包含144D464A、144L249B、144L124B、144L133B、144L180A、144L472A、144D666C、144J171G、144D464A LV7a HV10b、144D464A LV9are HV10b、144D464A LV10re HV10b、144D464A LV11re HV10b、144L249BLV7a HV11、144L249B LV9 HV11、144L249B LV9 HV10b和144L249B LV9HV10c中任一抗体的CDR的抗体)特异性结合IL-36γ并抑制由IL-36γ诱导的一种或多种细胞因子和/或趋化因子的分泌。在一些实施方案中，一种或多种细胞因子和/或趋化因子选自：IL-8、IL-6、IL-10、TNFα、IL-1β、CXCL1、CCL5、CCL20、CCL2、CCL3、CCL4、CXCL12、VEGF-A、IL-23、IL-36α、IL-36β和IL-36γ。
例如，在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约5％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约10％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约15％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约20％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约25％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约30％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约35％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约40％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约45％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约50％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约55％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约60％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约65％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约70％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约75％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约80％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约85％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约90％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约95％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约96％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约97％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约98％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约99％。在一些实施方案中，通过本文描述的方法评估IL-8分泌的抑制。在其他实施方案中，通过本领域技术人员已知的方法评估IL-8分泌的抑制。在一个特定的实施方案中，相对于不存在抗IL-36γ抗体的IL-8分泌，所述IL-8分泌被抑制。在其他实施方案中，相对于在不相关抗体(例如，不特异性结合IL-36γ的抗体)存在下的IL-8分泌，所述IL-8分泌被抑制。
在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约100nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约90nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约80nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约70nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约60nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约50nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约40nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约30nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约20nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约10nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约1nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约0.1nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约0.05nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约0.001nM的IC50抑制IL-8分泌。
在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约100nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约90nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约80nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约70nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约60nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约50nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约40nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约30nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约20nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约10nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约1nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约0.1nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约0.05nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约0.001nM的IC50抑制IL-8分泌。在特定的实施方案中，通过本文所述的方法例如在下文第6节中评估IC50。在其他实施方案中，通过本领域技术人员已知的其他方法评估IC50。
在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并减弱(例如部分减弱)IL-36受体二聚化(即，IL-36R(也称为IL-1Rrp2)和IL-1RAcP(也称为IL-1受体辅助蛋白)之间的异二聚化)。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约10％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约15％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约20％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约25％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约30％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约35％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约40％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约45％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约50％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约55％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约60％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约65％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约70％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约75％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约80％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约85％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约90％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约95％。
在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并减弱(例如，部分减弱)丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径和/或核因子κB(NF-κB)依赖性转录的活化。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约10％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约15％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约20％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约25％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约30％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约35％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约40％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约45％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约50％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约60％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约65％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约70％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约75％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约80％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约85％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约90％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约95％。
在另一方面，本文提供了特异性结合IL-36α和IL-36γ并且可以调节IL-36α和/或IL-36γ的活性和/或表达(例如，抑制IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导)的抗体。在某些实施方案中，本文提供了针对IL-36α和IL-36γ的双重拮抗剂，其是本文所述的特异性结合IL-36α和IL-36γ并且抑制(包括部分抑制)至少一种IL-36α活性和/或至少一种IL-36γ活性的抗体。
IL-36α活性可以涉及IL-36α的任何活性，诸如本领域已知或描述的那些。在某些实施方案中，IL-36α活性和IL-36α信号转导(或IL-36α介导的信号转导)在本文可互换使用。在某些方面，IL-36α活性是由IL-36受体(例如，IL-36α与IL-36受体结合)诱导的。在某些实施方案中，本文提供了特异性结合IL-36α并抑制(或减少)细胞因子产生的抗体。在一些实施方案中，本文提供的抗体不抑制IL-36α与IL-36受体的结合，但是抑制或减少IL-36α介导的或IL-36受体介导的信号转导。类似地，IL-36γ活性可以涉及IL-36γ的任何活性，诸如本领域已知或描述的那些。在某些实施方案中，IL-36γ活性和IL-36γ信号转导(或IL-36γ介导的信号转导)在本文可互换使用。在某些方面，IL-36γ活性是由IL-36受体(例如，IL-36γ与IL-36受体结合)诱导的。在某些实施方案中，本文提供了特异性结合IL-36γ并抑制(或减少)细胞因子产生的抗体。在一些实施方案中，本文提供的抗体不抑制IL-36γ与IL-36受体的结合，但是抑制或减少IL-36γ介导的或IL-36受体介导的信号转导。
在某些实施方案中，本文所述的抗体减弱(例如部分减弱)IL-36α和/或IL-36γ的活性。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ的活性减弱至少约10％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ的活性减弱至少约20％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ的活性减弱至少约30％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ的活性减弱至少约40％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ的活性减弱至少约50％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ的活性减弱至少约60％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ的活性减弱至少约70％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ的活性减弱至少约80％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ的活性减弱至少约90％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ的活性减弱至少约95％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36α和/或IL-36γ的活性减弱(例如，部分减弱)至少约15％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36α和/或IL-36γ的活性减弱(例如，部分减弱)至少约20％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36α和/或IL-36γ的活性减弱(例如，部分减弱)至少约30％至约65％。
在特定的实施方案中，通过本文描述的方法评估IL-36α和/或IL-36γ的活性的减弱。在特定的实施方案中，通过本领域技术人员已知的方法评估IL-36α和/或IL-36γ的活性的减弱。在某些实施方案中，相对于在没有任何抗IL-36α抗体或抗IL-36γ抗体的刺激下的活性，活性减弱。在某些实施方案中，相对于在存在不相关抗体(例如，不特异性结合IL-36α和/或IL-36γ的抗体)的刺激下的活性，活性减弱。
IL-36α和/或IL-36γ的活性的一个非限制性实例是IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导。因此，在某些实施方案中，本文所述的抗体减弱(例如部分减弱)IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱至少约10％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱至少约20％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱至少约30％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱至少约40％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱至少约50％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱至少约60％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱至少约70％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱至少约80％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱至少约90％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱至少约95％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱(例如，部分减弱)至少约15％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱(例如部分减弱)至少约20％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱(例如，部分减弱)至少约30％至约65％。
IL-36α和/或IL-36γ活性的另一个非限制性实例是与IL-36受体结合。因此，在某些实施方案中，本文所述的抗体减弱(例如部分减弱)IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约10％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约20％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约30％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约40％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约50％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约60％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约70％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约80％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约90％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约95％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱(例如部分减弱)至少约15％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱(例如部分减弱)至少约20％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱(例如部分减弱)至少约30％至约65％。
IL-36α和/或IL-36γ活性的另一个非限制性实例是由IL-36受体介导的信号转导。因此，在某些实施方案中，本文所述的抗体减弱(例如部分减弱)IL-36受体介导的信号转导。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约10％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约20％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约30％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约40％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约50％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约60％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约70％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约80％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约90％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约95％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36受体介导的信号转导减弱(例如，部分减弱)至少约15％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36受体介导的信号转导减弱(例如，部分减弱)至少约20％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以将IL-36受体介导的信号转导减弱(例如，部分减弱)至少约30％至约65％。
在特定的实施方案中，本文提供的抗体(例如，144D464A、144L249B、144L124B、144L133B、144L180A、144L472A、144D666C、144J171G、144D464A LV7a HV10b、144D464ALV9are HV10b、144D464A LV10re HV10b、144D464A LV11re HV10b、144L249B LV7a HV11、144L249B LV9HV11、144L249B LV9 HV10b和144L249B LV9 HV10c中任一抗体或其抗原结合片段，或包含144D464A、144L249B、144L124B、144L133B、144L180A、144L472A、144D666C、144J171G、144D464A LV7a HV10b、144D464A LV9are HV10b、144D464A LV10re HV10b、144D464A LV11re HV10b、144L249B LV7a HV11、144L249B LV9 HV11、144L249B LV9 HV10b和144L249B LV9 HV10c中任一抗体的CDR的抗体)特异性结合IL-36α和IL-36γ，并抑制由IL-36α和IL-36γ诱导的一种或多种细胞因子和/或趋化因子。在一些实施方案中，一种或多种细胞因子和/或趋化因子选自：IL-8、IL-6、IL-10、TNFα、IL-1β、CXCL1、CCL5、CCL20、CCL2、CCL3、CCL4、CXCL12、VEGF-A、IL-23、IL-36α、IL-36β和IL-36γ。
在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约5％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约10％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约15％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约20％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约25％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约30％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约35％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约40％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约45％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约50％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约55％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约60％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约65％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约70％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约75％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约80％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约85％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约90％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约95％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约96％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约97％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约98％。在一个实施方案中，本文提供的抗体特异性结合IL-36α和IL-36γ并抑制IL-8分泌至少约99％。在一些实施方案中，通过本文描述的方法评估IL-8分泌的抑制。在其他实施方案中，通过本领域技术人员已知的方法评估IL-8分泌的抑制。在一个特定的实施方案中，相对于不存在抗IL-36α和抗IL-36γ抗体的IL-8分泌，所述IL-8分泌被抑制。在其他实施方案中，相对于在不相关抗体(例如，不特异性结合IL-36α和IL-36γ的抗体)存在下的IL-8分泌，所述IL-8分泌被抑制。
在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约100nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约90nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约80nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约70nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约60nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约50nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约40nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约30nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约20nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约10nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约1nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约0.1nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约0.05nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约0.001nM的IC50抑制IL-8分泌。
在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约100nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约90nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约80nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约70nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约60nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约50nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约40nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约30nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约20nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约10nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约1nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约0.1nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约0.05nM的IC50抑制IL-8分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约0.001nM的IC50抑制IL-8分泌。在特定的实施方案中，通过本文所述的方法例如下文第6节评估IC50。在其他实施方案中，通过本领域技术人员已知的其他方法评估IC50。
在某些实施方案中，本文提供的抗体与IL-36α和IL-36γ结合并减弱(例如部分减弱)IL-36受体二聚化(即，IL-36R(也称为IL-1Rrp2)和IL-1RAcP(也称为IL-1受体辅助蛋白)之间的异二聚化)。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约10％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约15％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约20％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约25％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约30％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约35％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约40％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约45％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约50％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约55％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约60％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约65％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约70％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约75％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约80％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约85％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约90％。在一些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将IL-36受体二聚化减弱至少约95％。
在某些实施方案中，本文提供的抗体与IL-36α和IL-36γ结合并减弱(例如，部分减弱)丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径和/或核因子κB(NF-κB)依赖性转录的活化。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并且将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约10％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约15％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约20％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约25％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约30％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约35％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约40％。在某些实施方案中，本文提供的抗体与IL-36α和IL-36γ结合并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约45％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约50％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约60％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约65％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约70％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约75％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约80％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约85％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约90％。在某些实施方案中，本文提供的抗体结合IL-36α和IL-36γ并将MAPK途径和/或NF-κB依赖性转录的活化减弱至少约95％。
在一些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段选自如下文第6节中所述的下述抗体及其抗原结合片段：144D464A、144L249B、144L124B、144L133B、144L180A、144L472A、144D666C、144J171G、144D464A LV7a HV10b、144D464A LV9are HV10b、144D464ALV10re HV10b、144D464A LV11re HV10b、144L249B LV7a HV11、144L249B LV9 HV11、144L249B LV9 HV10b和144L249B LV9 HV10c。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含来自抗体144D464A的一个或多个CDR区。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1，所述CDR H1具有SEQ ID NO:23含有的CDR H1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2，所述CDR H2具有SEQ IDNO:23含有的CDR H2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3，所述CDR H3具有SEQ ID NO:23含有的CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1，所述CDR L1具有SEQ ID NO:51含有的CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L2，所述CDR L2具有SEQ ID NO:51含有的CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L3，所述CDR L3具有SEQ ID NO:51含有的CDRL3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR H2，所述CDR H1和CDR H2具有SEQID NO:23含有的CDR H1的氨基酸序列和CDR H2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR H3，所述CDR H1和CDR H3具有SEQ ID NO:23含有的CDR H1的氨基酸序列和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR H3，所述CDR H2和CDR H3具有SEQ ID NO:23含有的CDR H2的氨基酸序列和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1和CDR L2，所述CDR L1和CDR L2具有SEQ ID NO:51含有的CDR L1的氨基酸序列和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1和CDR L3，所述CDR L1和CDR L3具有SEQ ID NO:51含有的CDR L1的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L2和CDR L3，所述CDR L2和CDR L3具有SEQ ID NO:51含有的CDR L2的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L1，所述CDR H1和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:1中的CDR H1的氨基酸序列和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L2，所述CDR H1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1的氨基酸序列和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L3，所述CDR H1和CDR L3具有分别包含在SEQ IDNO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L1，所述CDR H2和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H2的氨基酸序列和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L2，所述CDR H2和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ IDNO:51中的CDR H2的氨基酸序列和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L3，所述CDR H2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H2的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L1，所述CDR H3和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H3的氨基酸序列和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L2，所述CDR H3和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H3的氨基酸序列和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L3，所述CDR H3和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H3的氨基酸序列和CDRL3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR H3，所述CDR H1、CDR H2和CDR H3具有SEQ ID NO:23含有的CDR H1、CDR H2和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR L1、CDR L2和CDR L3具有SEQ IDNO:51含有的CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR L1，所述CDR H1、CDR H2和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR H2和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR L2，所述CDR H1、CDR H2和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR H2和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR H2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3和CDR L1，所述CDR H1、CDR H3和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3和CDR L2，所述CDR H1、CDR H3和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3和CDR L3，所述CDR H1、CDR H3和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR H3和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3和CDR L1，所述CDR H2、CDR H3和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H2、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3和CDR L2，所述CDR H2、CDR H3和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H2、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3和CDR L3，所述CDR H2、CDR H3和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H2、CDR H3和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1和CDR L2，所述CDR H1、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1和CDR L3，所述CDR H1、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1和CDR L2，所述CDR H2、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H2、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1和CDR L3，所述CDR H2、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H2、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L2和CDR L3，所述CDR H2、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H2、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1和CDR L2，所述CDR H3、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1和CDR L3，所述CDR H3、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L2和CDR L3，所述CDR H3、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H3、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H3、CDRL1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1、CDRL2和CDR L3，所述CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ IDNO:51中的CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1，CDR H2，CDR H3和CDR L3，所述CDR H1，CDR H2，CDR H3和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDRL3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L2，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDRH1、CDR H2、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDRH2、CDR H3和CDR L1，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3，所述CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H2、CDRH3、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDRL1和CDR L3，所述CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ IDNO:51中的CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2，所述CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H3、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR H3、CDR L2和CDRL3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L3，所述CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDRH1、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDRH3、CDR L1和CDR L2，所述CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR H2、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L2，所述CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDRL2的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDRL3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDRL3，所述CDR H1、CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ IDNO:51中的CDR H1、CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDRL3，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDRL2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDRL1和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2，所述CDR H1、CDR H2、CDRH3、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDRL3，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
如上所述，CDR区是本领域技术人员众所周知的，并且已经由众所周知的编号系统定义。来自这些高变区或CDR的每一个中的残基在表27中列出。在一些实施方案中，CDR是根据Kabat编号。在一些实施方案中，CDR是根据AbM编号。在其他实施方案中，CDR是根据Chothia编号。在其他实施方案中，CDR是根据Contact编号。在一些实施方案中，CDR是根据IMGT编号。
在一些实施方案中，CDR是根据Kabat编号。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:68的CDR H1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:70的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ IDNO:83的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:84的CDR L2。在其他实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:85的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1和SEQ ID NO:69的CDRH2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1和SEQ ID NO:70的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2和SEQ ID NO:70的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:84的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:85的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1和SEQ ID NO:83的CDRL1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1和SEQ ID NO:84的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2和SEQ ID NO:83的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2和SEQ ID NO:84的CDR L2。在一些实施方案中，所述Ab包含SEQ ID NO:69的CDR H2和SEQ ID NO:85的CDRL3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:70的CDR H3和SEQ ID NO:83的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:70的CDR H3和SEQ ID NO:84的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:70的CDR H3和SEQ ID NO:85的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDRH2和SEQ ID NO:70的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:83的CDR L1、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:85的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDRH2和SEQ ID NO:83的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2和SEQ ID NO:84的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:70的CDR H3和SEQ ID NO:83的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:70的CDR H3和SEQID NO:84的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:70的CDR H3和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:70的CDR H3和SEQ ID NO:83的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:70的CDR H3和SEQ ID NO:84的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:70的CDR H3和SEQ ID NO:85的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:83的CDRL1和SEQ ID NO:84的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:84的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:70的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:84的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:70的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:70的CDR H3、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:85的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:70的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDRL1、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:83的CDR L1、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:83的CDRL1、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:70的CDR H3和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDRH2、SEQ ID NO:70的CDR H3和SEQ ID NO:84的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:70的CDR H3和SEQ ID NO:83的CDR L1。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:70的CDRH3、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:70的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:70的CDRH3、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:84的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:70的CDR H3、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:70的CDRH3、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:70的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:84的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDRH2、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDRH2、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:84的CDR L2。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDRH2、SEQ ID NO:70的CDR H3、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:70的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:70的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:84的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDRH2、SEQ ID NO:70的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDR L1、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:70的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDR L1、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:85的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:83的CDR L1、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:85的CDR L3。
在一个特定的实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:70的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDR L1、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQID NO:85的CDR L3。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含来自抗体144L249B的一个或多个CDR区。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1，所述CDR H1具有SEQ ID NO:27中含有的CDR H1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2，所述CDR H2具有SEQ IDNO:27中含有的CDR H2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3，所述CDRH3具有SEQ ID NO:27中含有的CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDRL1，所述CDR L1具有SEQ ID NO:55中含有的CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L2，所述CDR L2具有SEQ ID NO:55中含有的CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L3，所述CDR L3具有SEQ ID NO:55中含有的CDRL3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR H2，所述CDR H1和CDR H2具有SEQID NO:27中含有的CDR H1的氨基酸序列和CDR H2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR H3，所述CDR H1和CDR H3具有SEQ ID NO:27中含有的CDR H1的氨基酸序列和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR H3，所述CDR H2和CDR H3具有SEQ ID NO:27中含有的CDR H2的氨基酸序列和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1和CDR L2，所述CDR L1和CDR L2具有SEQ ID NO:55中含有的CDR L1的氨基酸序列和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1和CDR L3，所述CDR L1和CDR L3具有SEQ ID NO:55中含有的CDR L1的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L2和CDR L3，所述CDR L2和CDR L3具有SEQ ID NO:55中含有的CDR L2的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L1，所述CDR H1和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1的氨基酸序列和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L2，所述CDR H1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1的氨基酸序列和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L3，所述CDR H1和CDR L3具有分别包含在SEQ IDNO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L1，所述CDR H2和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H2的氨基酸序列和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L2，所述CDR H2和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ IDNO:55中的CDR H2的氨基酸序列和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L3，所述CDR H2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H2的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L1，所述CDR H3和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H3的氨基酸序列和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L2，所述CDR H3和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H3的氨基酸序列和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L3，所述CDR H3和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H3的氨基酸序列和CDRL3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR H3，所述CDR H1、CDR H2和CDR H3具有SEQ ID NO:27中含有的CDR H1、CDR H2和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR L1、CDR L2和CDR L3具有SEQ IDNO:55中含有的CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR L1，所述CDR H1、CDR H2和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR L2，所述CDR H1、CDR H2和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3和CDR L1，所述CDR H1、CDR H3和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3和CDR L2，所述CDR H1、CDR H3和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3和CDR L3，所述CDR H1、CDR H3和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H3和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3和CDR L1，所述CDR H2、CDR H3和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3和CDR L2，所述CDR H2、CDR H3和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3和CDR L3，所述CDR H2、CDR H3和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR H3和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1和CDR L2，所述CDR H1、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1和CDR L3，所述CDR H1、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1和CDR L2，所述CDR H2、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1和CDR L3，所述CDR H2、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L2和CDR L3，所述CDR H2、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1和CDR L2，所述CDR H3、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1和CDR L3，所述CDR H3、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L2和CDR L3，所述CDR H3、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H3、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H3、CDRL1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1、CDRL2和CDR L3，所述CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ IDNO:55中的CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDRL3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L2，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDRH1、CDR H2、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDRH2、CDR H3和CDR L1，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3，所述CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDRH3、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDRL1和CDR L3，所述CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ IDNO:55中的CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2，所述CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H3、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H3、CDR L2和CDRL3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L3，所述CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDRH1、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDRH3、CDR L1和CDR L2，所述CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L3，所述CDR H1、CDRH2、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L2，所述CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ IDNO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L1，CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H3、CDR L1，CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDRL3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDRL3，所述CDR H1、CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ IDNO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDRL3，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDRL2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDRL1和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2，所述CDR H1、CDR H2、CDRH3、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDRL3，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
表27中列出了来自这些CDR区中的每一个的残基。在一些实施方案中，CDR是根据Kabat编号。在一些实施方案中，CDR是根据AbM编号。在其他实施方案中，CDR是根据Chothia编号。在其他实施方案中，CDR是根据Contact编号。在一些实施方案中，CDR是根据IMGT编号。
在一些实施方案中，CDR是根据Kabat编号。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:71的CDR H1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:72的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ IDNO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:87的CDR L2。在其他实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1和SEQ ID NO:69的CDRH2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1和SEQ ID NO:72的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2和SEQ ID NO:72的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1和SEQ ID NO:86的CDRL1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，Ab包含SEQ ID NO:69的CDR H2和SEQ ID NO:88的CDRL3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDRH2和SEQ ID NO:72的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDRH2和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:86的CDRL1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDRL1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:86的CDRL1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDRH2、SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:86的CDR L1。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDRH3、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDRH3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:72的CDRH3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDRH2、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDRH2、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDRH2、SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:87的CDR L2和CDR SEQ ID NO:88的L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和CDR SEQ ID NO:88的L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和CDR SEQ ID NO:87的L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDRH2、SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和CDR SEQ IDNO:88的L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:72的CDRH3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一个特定的实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1、CDR SEQ ID NO:87的L2和SEQID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含来自抗体144L124B或抗体144L180A的一个或多个CDR区。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1，所述CDR H1具有SEQ ID NO:31中含有的CDR H1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2，所述CDR H2具有SEQ IDNO:31中含有的CDR H2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3，所述CDRH3具有SEQ ID NO:31中含有的CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDRL1，所述CDR L1具有SEQ ID NO:55中含有的CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L2，所述CDR L2具有SEQ ID NO:55中含有的CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L3，所述CDR L3具有SEQ ID NO:55中含有的CDRL3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR H2，所述CDR H1和CDR H2具有SEQID NO:31中含有的CDR H1的氨基酸序列和CDR H2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR H3，所述CDR H1和CDR H3具有SEQ ID NO:31中含有的CDR H1的氨基酸序列和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR H3，所述CDR H2和CDR H3具有SEQ ID NO:31中含有的CDR H2的氨基酸序列和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1和CDR L2，所述CDR L1和CDR L2具有SEQ ID NO:55中含有的CDR L1的氨基酸序列和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1和CDR L3，所述CDR L1和CDR L3具有SEQ ID NO:55中含有的CDR L1的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L2和CDR L3，所述CDR L2和CDR L3具有SEQ ID NO:55中含有的CDR L2的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L1，所述CDR H1和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中CDR H1的氨基酸序列和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L2，所述CDR H1和CDR L2具有分别包含在SEQID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1的氨基酸序列和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L3，所述CDR H1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L1，所述CDR H2和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ IDNO:55中的CDR H2的氨基酸序列和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L2，所述CDR H2和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H2的氨基酸序列和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L3，所述CDR H2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H2的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L1，所述CDR H3和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H3的氨基酸序列和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L2，所述CDR H3和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H3的氨基酸序列和CDRL2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L3，所述CDR H3和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H3的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR H3，所述CDR H1、CDR H2和CDR H3具有SEQ ID NO:31中含有的CDR H1、CDR H2和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR L1、CDR L2和CDR L3具有SEQ IDNO:55中含有的CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR L1，所述CDR H1、CDR H2和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR L2，所述CDR H1、CDR H2和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3和CDR L1，所述CDR H1、CDR H3和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3和CDR L2，所述CDR H1、CDR H3和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3和CDR L3，所述CDR H1、CDR H3和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H3和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3和CDR L1，所述CDR H2、CDR H3和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3和CDR L2，所述CDR H2、CDR H3和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3和CDR L3，所述CDR H2、CDR H3和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR H3和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1和CDR L2，所述CDR H1、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1和CDR L3，所述CDR H1、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1和CDR L2，所述CDR H2、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1和CDR L3，所述CDR H2、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L2和CDR L3，所述CDR H2、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1和CDR L2，所述CDR H3、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1和CDR L3，所述CDR H3、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L2和CDR L3，所述CDR H3、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H3、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H3、CDRL1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1、CDRL2和CDR L3，所述CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ IDNO:55中的CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDRL3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L2，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDRH1、CDR H2、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDRH2、CDR H3和CDR L1，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3，所述CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDRH3、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDRL1和CDR L3，所述CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ IDNO:55中的CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2，所述CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H3、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H3、CDR L2和CDRL3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L3，所述CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDRH1、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDRH3、CDR L1和CDR L2，所述CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L3，所述CDR H1、CDRH2、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L2，所述CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ IDNO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDRL3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDRL3，所述CDR H1、CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ IDNO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDRL2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDRL1和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2，所述CDR H1、CDR H2、CDRH3、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1，CDR H2，CDR H3，CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDRL3，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
表27中列出了来自每个CDR的残基。在一些实施方案中，CDR是根据Kabat编号。在一些实施方案中，CDR是根据AbM编号。在其他实施方案中，CDR是根据Chothia编号。在其他实施方案中，CDR是根据Contact编号。在一些实施方案中，CDR是根据IMGT编号。
在一些实施方案中，CDR是根据Kabat编号。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:71的CDR H1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:73的CDR H2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:74的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ IDNO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:87的CDR L2。在其他实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1和SEQ ID NO:73的CDRH2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1和SEQ ID NO:74的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:73的CDR H2和SEQ ID NO:74的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1和SEQ ID NO:86的CDRL1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:73的CDR H2和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:73的CDR H2和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，Ab包含SEQ ID NO:73的CDR H2和SEQ ID NO:88的CDRL3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:74的CDR H3和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:74的CDR H3和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:74的CDR H3和SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:73的CDRH2和SEQ ID NO:74的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:73的CDRH2和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:73的CDR H2和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:73的CDR H2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:74的CDR H3和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:74的CDR H3和SEQID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:74的CDR H3和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:73的CDR H2、SEQ ID NO:74的CDR H3和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:73的CDR H2、SEQ ID NO:74的CDR H3和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:73的CDR H2、SEQ ID NO:74的CDR H3和SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:86的CDRL1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:73的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:73的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:73的CDR H2、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:74的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:74的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:74的CDR H3、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:74的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDRL1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:73的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:86的CDRL1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:73的CDR H2、SEQ ID NO:74的CDR H3和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:73的CDRH2、SEQ ID NO:74的CDR H3和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:73的CDR H2、SEQ ID NO:74的CDR H3和SEQ ID NO:86的CDR L1。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:73的CDR H2、SEQ ID NO:74的CDRH3、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:73的CDR H2、SEQ ID NO:74的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:73的CDR H2、SEQ ID NO:74的CDRH3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:74的CDR H3、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:74的CDRH3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:74的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:73的CDRH2、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:73的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:73的CDRH2、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:73的CDRH2、SEQ ID NO:74的CDR H3、SEQ ID NO:87的CDR L2和CDR SEQ ID NO:88的L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:73的CDR H2、SEQ ID NO:74的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和CDR SEQ ID NO:88的L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:73的CDR H2、SEQ ID NO:74的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和CDR SEQ ID NO:87的L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:73的CDRH2、SEQ ID NO:74的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和CDR SEQ IDNO:88的L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:74的CDRH3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和CDR SEQ ID NO:88的L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:73的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和CDR SEQ ID NO:88的L3。
在一个特定的实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:73的CDR H2、SEQ ID NO:74的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含来自抗体144L133B的一个或多个CDR区。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1，所述CDR H1具有SEQ ID NO:35中含有的CDR H1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2，所述CDR H2具有SEQ IDNO:35中含有的CDR H2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3，所述CDRH3具有SEQ ID NO:35中含有的CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDRL1，所述CDR L1具有SEQ ID NO:55中含有的CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L2，所述CDR L2具有SEQ ID NO:55中含有的CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L3，所述CDR L3具有SEQ ID NO:55中含有的CDRL3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR H2，所述CDR H1和CDR H2具有SEQID NO:35中含有的CDR H1的氨基酸序列和CDR H2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR H3，所述CDR H1和CDR H3具有SEQ ID NO:35中含有的CDR H1的氨基酸序列和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR H3，所述CDR H2和CDR H3具有SEQ ID NO:35中含有的CDR H2的氨基酸序列和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1和CDR L2，所述CDR L1和CDR L2具有SEQ ID NO:55中含有的CDR L1的氨基酸序列和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1和CDR L3，所述CDR L1和CDR L3具有SEQ ID NO:55中含有的CDR L1的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L2和CDR L3，所述CDR L2和CDR L3具有SEQ ID NO:55中含有的CDR L2的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L1，所述CDR H1和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1的氨基酸序列和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L2，所述CDR H1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1的氨基酸序列和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L3，所述CDR H1和CDR L3具有分别包含在SEQ IDNO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L1，所述CDR H2和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H2的氨基酸序列和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L2，所述CDR H2和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ IDNO:55中的CDR H2的氨基酸序列和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L3，所述CDR H2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H2的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L1，所述CDR H3和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H3的氨基酸序列和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L2，所述CDR H3和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H3的氨基酸序列和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L3，所述CDR H3和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H3的氨基酸序列和CDRL3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR H3，所述CDR H1、CDR H2和CDR H3具有SEQ ID NO:35中含有的CDR H1、CDR H2和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR L1、CDR L2和CDR L3具有SEQ IDNO:55中含有的CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR L1，所述CDR H1、CDR H2和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR L2，所述CDR H1、CDR H2和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR L3具有分别包含在SEQID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3和CDR L1，所述CDR H1、CDR H3和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3和CDR L2，所述CDR H1、CDR H3和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3和CDR L3，所述CDR H1、CDR H3和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H3和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3和CDR L1，所述CDR H2、CDR H3和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3和CDR L2，所述CDR H2、CDR H3和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3和CDR L3，所述CDR H2、CDR H3和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR H3和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1和CDR L2，所述CDR H1、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1和CDR L3，所述CDR H1、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1和CDR L2，所述CDR H2、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1和CDR L3，所述CDR H2、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L2和CDR L3，所述CDR H2、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1和CDR L2，所述CDR H3、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1和CDR L3，所述CDR H3、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L2和CDR L3，所述CDR H3、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H3、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H3、CDRL1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1、CDRL2和CDR L3，所述CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ IDNO:55中的CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDRL3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L2，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDRH1、CDR H2、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDRH2、CDR H3和CDR L1，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3，所述CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDRH3、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDRL1和CDR L3，所述CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ IDNO:55中的CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2，所述CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H3、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H3、CDR L2和CDRL3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L3，所述CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDRH1、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDRH3、CDR L1和CDR L2，所述CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L3，所述CDR H1、CDRH2、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L2，所述CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ IDNO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDRL3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDRL3，所述CDR H1、CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ IDNO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDRL2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDRL1和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2，所述CDR H1、CDR H2、CDRH3、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDRL3，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
表27中列出了来自这些CDR中每一个的残基。在一些实施方案中，CDR是根据Kabat编号。在一些实施方案中，CDR是根据AbM编号。在其他实施方案中，CDR是根据Chothia编号。在其他实施方案中，CDR是根据Contact编号。在一些实施方案中，CDR是根据IMGT编号。
在一些实施方案中，CDR是根据Kabat编号。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:75的CDR H1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:72的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ IDNO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:87的CDR L2。在其他实施方案中，抗体包含SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1和SEQ ID NO:69的CDRH2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1和SEQ ID NO:72的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2和SEQ ID NO:72的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，抗体包含SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1和SEQ ID NO:86的CDRL1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDRH2和SEQ ID NO:72的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDRH2和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:86的CDRL1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，抗体包含SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDRL3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDRL1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:86的CDRL1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDRH2、SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3和SEQ ID NO:86的CDR L1。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDRH3、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDRH3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:72的CDRH3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDRH2、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:88的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDRH2、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDRH2、SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:87的CDR L2和CDR SEQ ID NO:88的L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和CDR SEQ ID NO:88的L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和CDR SEQ ID NO:87的L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:69的CDRH2、SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和CDR SEQ IDNO:88的L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:72的CDRH3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和CDR SEQ ID NO:88的L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1，SEQ ID NO:87的CDR L2和CDR SEQ ID NO:88的L3。
在一个特定的实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1、CDR SEQ ID NO:87的L2和SEQID NO:88的CDR L3。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含来自抗体144L472A的一个或多个CDR区。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1，所述CDR H1具有SEQ ID NO:39中含有的CDR H1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2，所述CDR H2具有SEQ IDNO:39中含有的CDR H2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3，所述CDRH3具有SEQ ID NO:39中含有的CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDRL1，所述CDR L1具有SEQ ID NO:59中含有的CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L2，所述CDR L2具有SEQ ID NO:59中含有的CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L3，所CDR L3具有SEQ ID NO:59中含有的CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR H2，所述CDR H1和CDR H2具有SEQID NO:39中含有的CDR H1的氨基酸序列和CDR H2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR H3，所述CDR H1和CDR H3具有SEQ ID NO:39中含有的CDR H1的氨基酸序列和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR H3，所述CDR H2和CDR H3具有SEQ ID NO:39中含有的CDR H2的氨基酸序列和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1和CDR L2，所述CDR L1和CDR L2具有SEQ ID NO:59中含有的CDR L1的氨基酸序列和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1和CDR L3，所述CDR L1和CDR L3具有SEQ ID NO:59中含有的CDR L1的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L2和CDR L3，所述CDR L2和CDR L3具有SEQ ID NO:59中含有的CDR L2的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L1，所述CDR H1和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1的氨基酸序列和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L2，所述CDR H1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1的氨基酸序列和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L3，所述CDR H1和CDR L3具有分别包含在SEQ IDNO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L1，所述CDR H2和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H2的氨基酸序列和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L2，所述CDR H2和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ IDNO:59中的CDR H2的氨基酸序列和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L3，所述CDR H2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H2的氨基酸序列和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L1，所述CDR H3和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H3的氨基酸序列和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L2，所述CDR H3和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H3的氨基酸序列和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L3，所述CDR H3和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H3的氨基酸序列和CDRL3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR H3，所述CDR H1、CDR H2和CDR H3具有包含在SEQ ID NO:39中的CDR H1、CDR H2和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR L1、CDR L2和CDR L3具有包含在SEQ ID NO:59中的CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR L1，所述CDR H1、CDR H2和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR H2和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR L2，所述CDR H1、CDR H2和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR H2和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR H2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3和CDR L1，所述CDR H1、CDR H3和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3和CDR L2，所述CDR H1、CDR H3和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3和CDR L3，所述CDR H1、CDR H3和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR H3和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3和CDR L1，所述CDR H2、CDR H3和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H2、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3和CDR L2具有分别包含在SEQID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H2、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3和CDR L3，所述CDR H2、CDR H3和CDR L3具有分别包含在SEQID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H2、CDR H3和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1和CDR L2，所述CDR H1、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1和CDR L3，所述CDR H1、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1和CDR L2，所述CDR H2、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H2、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1和CDR L3，所述CDR H2、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H2、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L2和CDR L3，所述CDR H2、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H2、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1和CDR L2，所述CDR H3、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1和CDR L3，所述CDR H3、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L2和CDR L3，所述CDR H3、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H3、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H3、CDRL1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1、CDRL2和CDR L3，所述CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ IDNO:59中的CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDRL3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L2，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDRH1、CDR H2、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDRH2、CDR H3和CDR L1，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L1具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3，所述CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H2、CDRH3、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDRL1和CDR L3，所述CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ IDNO:59中的CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2，所述CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H3、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR H3、CDR L2和CDRL3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L3，所述CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDRH1、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDRH3、CDR L1和CDR L2，所述CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR H2、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L3，所述CDR H1、CDRH2、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L2，所述CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ IDNO:59中的CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDRL3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDRL3，所述CDR H1、CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ IDNO:59中的CDR H1、CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDRL2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDRL1和CDR L3，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2，所述CDR H1、CDR H2、CDRH3、CDR L1和CDR L2具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDRL3，所述CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3具有分别包含在SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
表27中列出了来自每个CDR的残基。在一些实施方案中，CDR是根据Kabat编号。在一些实施方案中，CDR是根据AbM编号。在其他实施方案中，CDR是根据Chothia编号。在其他实施方案中，CDR是根据Contact编号。在一些实施方案中，CDR是根据IMGT编号。
在一些实施方案中，CDR是根据Kabat编号。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:75的CDR H1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:76的CDR H2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:77的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ IDNO:83的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:87的CDR L2。在其他实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:89的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1和SEQ ID NO:76的CDRH2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1和SEQ ID NO:77的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:76的CDR H2和SEQ ID NO:77的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:89的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:89的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1和SEQ ID NO:83的CDRL1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1和SEQ ID NO:89的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:76的CDR H2和SEQ ID NO:83的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:76的CDR H2和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，Ab包含SEQ ID NO:76的CDR H2和SEQ ID NO:89的CDRL3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:77的CDR H3和SEQ ID NO:83的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:77的CDR H3和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:77的CDR H3和SEQ ID NO:89的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:76的CDRH2和SEQ ID NO:77的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:83的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:89的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:76的CDRH2和SEQ ID NO:83的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:76的CDR H2和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:76的CDR H2和SEQ ID NO:89的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:77的CDR H3和SEQ ID NO:83的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:77的CDR H3和SEQID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:77的CDR H3和SEQ ID NO:89的CDR L3。在一些实施方案中，抗体包含SEQ ID NO:76的CDRH2、SEQ ID NO:77的CDR H3和SEQ ID NO:83的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:76的CDR H2、SEQ ID NO:77的CDR H3和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:76的CDR H2、SEQ ID NO:77的CDR H3和SEQ ID NO:89的CDRL3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:83的CDRL1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:89的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:89的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:76的CDR H2、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:76的CDR H2、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQID NO:89的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:76的CDR H2、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:89的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:77的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:77的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:89的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:77的CDR H3、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:89的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:77的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDRL1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:89的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:76的CDR H2、SEQ ID NO:83的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:89的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:83的CDRL1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:89的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:76的CDR H2、SEQ ID NO:77的CDR H3和SEQ ID NO:89的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:76的CDRH2、SEQ ID NO:77的CDR H3和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:76的CDR H2、SEQ ID NO:77的CDR H3和SEQ ID NO:83的CDR L1。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:76的CDR H2、SEQ ID NO:77的CDRH3、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:89的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:76的CDR H2、SEQ ID NO:77的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:89的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:76的CDR H2、SEQ ID NO:77的CDRH3、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:77的CDR H3、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:89的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:77的CDRH3、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:89的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:77的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:76的CDRH2、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:89的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:76的CDR H2、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:89的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:76的CDRH2、SEQ ID NO:83的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:76的CDRH2、SEQ ID NO:77的CDR H3、SEQ ID NO:87的CDR L2和CDR SEQ ID NO:89的L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:76的CDR H2、SEQ ID NO:77的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDR L1和CDR SEQ ID NO:89的L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:76的CDR H2、SEQ ID NO:77的CDR H3，、SEQ ID NO:83的CDR L1和CDR SEQ ID NO:87的L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:76的CDR H2、SEQ ID NO:77的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和CDRSEQ ID NO:89的L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:77的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和CDR SEQ ID NO:89的L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:76的CDR H2、SEQ IDNO:83的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:89的CDR L3。
在一个特定的实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:76的CDR H2、SEQ ID NO:77的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQID NO:89的CDR L3。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含来自抗体144D666C的一个或多个CDR区。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1，所述CDR H1具有SEQ ID NO:43中含有的CDR H1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2，所述CDR H2具有SEQ IDNO:43中含有的CDR H2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3，所述CDRH3具有SEQ ID NO:43中含有的CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDRL1，所述CDR L1具有SEQ ID NO:63中含有的CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L2，所述CDR L2具有SEQ ID NO:63中含有的CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L3，所述CDR L3具有SEQ ID NO:63中含有的CDRL3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR H2，其具有SEQ ID NO:43中含有的CDR H1和CDR H2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR H3，其具有SEQ ID NO:43中含有的CDR H1和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR H3，其具有SEQ ID NO:43中含有的CDR H2和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1和CDR L2，其具有SEQ ID NO:63中含有的CDR L1和CDRL2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1和CDR L3，其具有SEQ ID NO:63中含有的CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L2和CDRL3，其具有SEQ ID NO:63中含有的CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L1，其具有分别包含在SEQ IDNO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L3，其具有分别包含在SEQID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L1，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H2和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H2和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDRH2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L1，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H3和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR H3，其具有SEQ ID NO:43中含有的CDR H1、CDR H2和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDRL1、CDR L2和CDR L3，其具有SEQ ID NO:63中含有的CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR L1，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1、CDR H2和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ IDNO:63中的CDR H1、CDR H2和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDRH1、CDR H2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1、CDR H2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3和CDR L1，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ IDNO:63中的CDR H1、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDRH1、CDR H3和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1、CDR H3和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3和CDR L1，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H2、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ IDNO:63中的CDR H2、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDRH2、CDR H3和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H2、CDR H3和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ IDNO:63中的CDR H1、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDRH1、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H2、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ IDNO:63中的CDR H2、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDRH2、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H2、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ IDNO:63中的CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDRH3、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H3、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ IDNO:63中的CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L2，其具有SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1、CDRH2、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDRH3和CDR L1，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3，其具有分别包含在SEQID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ IDNO:63中的CDR H1、CDR H3、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1、CDR H2、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDRL3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1、CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDRL3，其具有分别包含在SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
表27中列出了来自这些CDR中每一个的残基。在一些实施方案中，所述CDR是根据Kabat编号确定的。在一些实施方案中，所述CDR是根据AbM编号确定的。在其它实施方案中，所述CDR是根据Chothia编号确定的。在其它实施方案中，所述CDR是根据Contact编号确定的。在一些实施方案中，所述CDR是根据IMGT编号确定的。
在一些实施方案中，所述CDR是根据Kabat编号确定的。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:78的CDR H2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:79的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:90的CDR L2。在其它实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:91的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1和SEQ ID NO:78的CDRH2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1和SEQ ID NO:79的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:78的CDR H2和SEQ ID NO:79的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:90的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:90的CDR L2和SEQ ID NO:91的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1和SEQ ID NO:86的CDRL1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1和SEQ ID NO:90的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:78的CDR H2和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:78的CDR H2和SEQ ID NO:90的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:78的CDR H2和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:79的CDR H3和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:79的CDR H3和SEQ ID NO:90的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:79的CDR H3和SEQ ID NO:91的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:78的CDRH2和SEQ ID NO:79的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:90的CDR L2和SEQ ID NO:91的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:78的CDRH2和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:78的CDR H2和SEQ ID NO:90的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:78的CDR H2和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:79的CDR H3和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:79的CDR H3和SEQID NO:90的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:79的CDR H3和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:78的CDR H2、SEQ ID NO:79的CDR H3和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:78的CDR H2、SEQ ID NO:79的CDR H3和SEQ ID NO:90的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:78的CDR H2、SEQ ID NO:79的CDR H3和SEQ ID NO:91的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:86的CDRL1和SEQ ID NO:90的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:90的CDR L2和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:78的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:90的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:78的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:78的CDR H2、SEQ ID NO:90的CDR L2和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:79的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:90的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:79的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:79的CDR H3、SEQ ID NO:90的CDR L2和SEQ ID NO:91的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:79的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDRL1、SEQ ID NO:90的CDR L2和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:78的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:90的CDR L2和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:86的CDRL1、SEQ ID NO:90的CDR L2和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:78的CDR H2、SEQ ID NO:79的CDR H3和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:78的CDRH2、SEQ ID NO:79的CDR H3和SEQ ID NO:90的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:78的CDR H2、SEQ ID NO:79的CDR H3和SEQ ID NO:86的CDR L1。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:78的CDR H2、SEQ ID NO:79的CDRH3、SEQ ID NO:90的CDR L2和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:78的CDR H2、SEQ ID NO:79的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:78的CDR H2、SEQ ID NO:79的CDRH3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:90的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:79的CDR H3、SEQ ID NO:90的CDR L2和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:79的CDRH3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:79的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:90的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:78的CDRH2、SEQ ID NO:90的CDR L2和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:78的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:78的CDRH2、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:90的CDR L2。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:78的CDRH2、SEQ ID NO:79的CDR H3、SEQ ID NO:90的CDR L2和CDR SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:78的CDR H2、SEQ ID NO:79的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:78的CDR H2、SEQ ID NO:79的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:90的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:78的CDR H2、SEQ ID NO:79的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:90的CDR L2和SEQ IDNO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:79的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:90的CDR L2和SEQ ID NO:91的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:78的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:90的CDR L2和SEQ ID NO:91的CDR L3。
在一个具体的实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:78的CDR H2、SEQ ID NO:79的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:90的CDR L2和SEQID NO:91的CDR L3。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含来自抗体144J171G的一个或多个CDR区。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1，其具有SEQ ID NO:47中含有的CDR H1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2，其具有SEQ ID NO:47中含有的CDR H2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3，其具有SEQ ID NO:47中含有的CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1，其具有SEQ ID NO:67中含有的CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L2，其具有SEQ IDNO:67中含有的CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L3，其具有SEQID NO:67中含有的CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR H2，其具有SEQ ID NO:47中含有的CDR H1和CDR H2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR H3，其具有SEQ ID NO:47中含有的CDR H1和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR H3，其具有SEQ ID NO:47中含有的CDR H2和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1和CDR L2，其具有SEQ ID NO:67中含有的CDR L1和CDRL2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L1和CDR L3，其具有SEQ ID NO:67中含有的CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR L2和CDRL3，其具有SEQ ID NO:67中含有的CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L1，其具有分别包含在SEQ IDNO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1和CDR L3，其具有分别包含在SEQID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L1，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H2和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H2和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDRH2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L1，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H3和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR H3，其具有SEQ ID NO:47中含有的CDR H1、CDR H2和CDR H3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDRL1、CDR L2和CDR L3，其具有SEQ ID NO:67中含有的CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR L1，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1、CDR H2和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ IDNO:67中的CDR H1、CDR H2和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDRH1、CDR H2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1、CDR H2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3和CDR L1，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ IDNO:67中的CDR H1、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDRH1、CDR H3和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1、CDR H3和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3和CDR L1，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H2、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ IDNO:67中的CDR H2、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDRH2、CDR H3和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H2、CDR H3和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ IDNO:67中的CDR H1、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDRH1、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H2、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ IDNO:67中的CDR H2、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDRH2、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H2、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ IDNO:67中的CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDRH3、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H3、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR L1、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ IDNO:67中的CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L1，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1、CDR H2、CDR H3和CDR L1的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3，其具有分别包含在SEQID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ IDNO:67中的CDR H1、CDR H3、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1、CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和分别为SEQ ID NO:67中的CDR H1、CDRH2、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDRL1和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDRL2，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1、CDR H2、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDRL3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1、CDR H2、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L3的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1和CDR L2的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDRL3，其具有分别包含在SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67中的CDR H1、CDR H2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列。
表27中列出了来自每个CDR的残基。在一些实施方案中，所述CDR是根据Kabat编号确定的。在一些实施方案中，所述CDR是根据AbM编号确定的。在其它实施方案中，所述CDR是根据Chothia编号确定的。在其它实施方案中，所述CDR是根据Contact编号确定的。在一些实施方案中，所述CDR是根据IMGT编号确定的。
在一些实施方案中，所述CDR是根据Kabat编号确定的。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:81的CDR H2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:82的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:87的CDR L2。在其它实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:92的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1和SEQ ID NO:81的CDRH2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1和SEQ ID NO:82的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:81的CDR H2和SEQ ID NO:82的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:92的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1和SEQ ID NO:86的CDRL1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:81的CDR H2和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:81的CDR H2和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:81的CDR H2和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:82的CDR H3和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:82的CDR H3和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:82的CDR H3和SEQ ID NO:92的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:81的CDRH2和SEQ ID NO:82的CDR H3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:92的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:81的CDRH2和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:81的CDR H2和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:81的CDR H2和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:82的CDR H3和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:82的CDR H3和SEQID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:82的CDR H3和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:81的CDR H2、SEQ ID NO:82的CDR H3和SEQ ID NO:86的CDR L1。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:81的CDR H2、SEQ ID NO:82的CDR H3和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:81的CDR H2、SEQ ID NO:82的CDR H3和SEQ ID NO:92的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:86的CDRL1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:81的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:81的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:81的CDR H2、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:82的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:82的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:82的CDR H3、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:92的CDR L3。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:82的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDRL1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:81的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:86的CDRL1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:81的CDR H2、SEQ ID NO:82的CDR H3和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:81的CDRH2、SEQ ID NO:82的CDR H3和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:81的CDR H2、SEQ ID NO:82的CDR H3和SEQ ID NO:86的CDR L1。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:81的CDR H2、SEQ ID NO:82的CDRH3、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:81的CDR H2、SEQ ID NO:82的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:81的CDR H2、SEQ ID NO:82的CDRH3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:82的CDR H3、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:82的CDRH3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:82的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:81的CDRH2、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:81的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:81的CDRH2、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。
在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:81的CDRH2、SEQ ID NO:82的CDR H3、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:81的CDR H2、SEQ ID NO:82的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:81的CDR H2、SEQ ID NO:82的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1和SEQ ID NO:87的CDR L2。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:81的CDRH2、SEQ ID NO:82的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:82的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:92的CDR L3。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:81的CDR H2、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:92的CDR L3。
在一个具体的实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:81的CDR H2、SEQ ID NO:82的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQID NO:92的CDR L3。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含下文第6节中提供的人源化抗体的一个或多个CDR序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含图10-13所示的一个或多个CDR序列。在一个具体的实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDRH2、SEQ ID NO:72的CDR H3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。在另一个具体实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:70的CDR H3、SEQ ID NO:83的CDR L1、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:85的CDR L3。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段还包含来自抗体144D464A、144L249B、144L124B、144L133B、144L180A、144L472A、144D666C、144J171G、144D464A LV7a HV10b、144D464A LV9are HV10b、144D464A LV10re HV10b、144D464ALV11re HV10b、144L249B LV7a HV11、144L249B LV9 HV11、144L249B LV9 HV10b和144L249B LV9 HV10c的一个或多个FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段还包含SEQ ID NO:23、SEQ IDNO:27、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:35、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:43或SEQ ID NO:47中含有的重链FR区，和/或SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:55、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:63或SEQ IDNO:67中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含重链FR区和轻链FR区，其中重链FR区包含SEQ ID NO:23中含有的FR区的氨基酸序列，并且轻链FR区包含SEQ ID NO:51中含有的FR区的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含重链FR区和轻链FR区，其中重链FR区包含SEQ ID NO:27中含有的FR区的氨基酸序列，并且轻链FR区包含SEQ ID NO:55中含有的FR区的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含重链FR区和轻链FR区，其中重链FR区包含SEQ ID NO:31中含有的FR区的氨基酸序列，并且轻链FR区包含SEQ ID NO:55中含有的FR区的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含重链FR区和轻链FR区，其中重链FR区包含SEQ ID NO:35中含有的FR区的氨基酸序列，并且轻链FR区包含SEQ ID NO:55中含有的FR区的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含重链FR区和轻链FR区，其中重链FR区包含SEQ ID NO:39中含有的FR区的氨基酸序列，并且轻链FR区包含SEQ ID NO:59中含有的FR区的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含重链FR区和轻链FR区，其中重链FR区包含SEQ ID NO:43中含有的FR区的氨基酸序列，并且轻链FR区包含SEQ ID NO:63中含有的FR区的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含重链FR区和轻链FR区，其中重链FR区包含SEQ ID NO:47中含有的FR区的氨基酸序列，并且轻链FR区包含SEQ ID NO:67中含有的FR区的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体在144D464A的重链中还包含一个或多个FR区。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1，其具有SEQ ID NO:23中含有的FR1的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2，其具有SEQ ID NO:23中含有的FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR3，其具有SEQ IDNO:23中含有的FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR4，其具有SEQ ID NO:23中含有的FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR2，其具有SEQ ID NO:23中含有的FR1和FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR3，其具有SEQ ID NO:23中含有的FR1和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR4，其具有SEQ ID NO:23中含有的FR1和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2和重链FR3，其具有SEQ ID NO:23中含有的FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2和重链FR4，其具有SEQ ID NO:23中含有的FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:23中含有的FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2和重链FR3，其具有SEQID NO:23中含有的FR1、FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2和重链FR4，其具有SEQ ID NO:23中含有的FR1、FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:23中含有的FR1、FR3和FR4氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2、重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:23中含有的FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。在一个具体的实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2、重链FR3和重链FR4，其具有SEQID NO:23中含有的FR1、FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体还包含144D464A的轻链FR的一个或多个FR区。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1，其具有SEQ ID NO:51中含有的FR1的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2，其具有SEQ ID NO:51中含有的FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR3，其具有SEQ IDNO:51中含有的FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR4，其具有SEQ ID NO:51中含有的FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR2，其具有SEQ ID NO:51中含有的FR1和FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR3，其具有SEQ ID NO:51中含有的FR1和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:51中含有的FR1和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2和轻链FR3，其具有SEQ ID NO:51中含有的FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:51中含有的FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:51中含有的FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2和轻链FR3，其具有SEQID NO:51中含有的FR1、FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:51中含有的FR1、FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:51中含有的FR1、FR3和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:51中含有的FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。在一个具体的实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:51中含有的FR1、FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体在144L249B的重链中还包含一个或多个FR区。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1，其具有SEQ ID NO:27中含有的FR1的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2，其具有SEQ ID NO:27中含有的FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR3，其具有SEQ IDNO:27中含有的FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR4，其具有SEQ ID NO:27中含有的FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR2，其具有SEQ ID NO:27中含有的FR1和FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR3，其具有SEQ ID NO:27中含有的FR1和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR4，其具有SEQ ID NO:27中含有的FR1和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2和重链FR3，其具有SEQ ID NO:27中含有的FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2和重链FR4，其具有SEQ ID NO:27中含有的FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:27中含有的FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2和重链FR3，其具有SEQID NO:27中含有的FR1、FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2和重链FR4，其具有SEQ ID NO:27中含有的FR1、FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:27中含有的FR1、FR3和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2、重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:27中含有的FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。在一个具体的实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2、重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:27中含有的FR1、FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体还包含144L249B的轻链FR的一个或多个FR区。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR3，其具有SEQ IDNO:55中含有的FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR2，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1和FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR3，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2和轻链FR3，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2和轻链FR3，其具有SEQID NO:55中含有的FR1、FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1、FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1、FR3和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。在一个具体的实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1、FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体在144L124B或144L180A的重链中还包含一个或多个FR区。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1，其具有SEQ ID NO:31中含有的FR1的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2，其具有SEQ IDNO:31中含有的FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR3，其具有SEQ ID NO:31中含有的FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR4，其具有SEQ ID NO:31中含有的FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR2，其具有SEQ ID NO:31中含有的FR1和FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR3，其具有SEQ ID NO:31中含有的FR1和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR4，其具有SEQ ID NO:31中含有的FR1和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2和重链FR3，其具有SEQ ID NO:31中含有的FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2和重链FR4，其具有SEQ ID NO:31中含有的FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:31中含有的FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2和重链FR3，其具有SEQID NO:31中含有的FR1、FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2和重链FR4，其具有SEQ ID NO:31中含有的FR1、FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:31中含有的FR1、FR3和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2、重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:31中含有的FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。在一个具体的实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2、重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:31中含有的FR1、FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体还包含144L124B或144L180A的轻链FR的一个或多个FR区。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2，其具有SEQ IDNO:55中含有的FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR3，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR2，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1和FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR3，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2和轻链FR3，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2和轻链FR3，其具有SEQID NO:55中含有的FR1、FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1、FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1、FR3和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。在一个具体的实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1、FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体在144L133B的重链中还包含一个或多个FR区。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1，其具有SEQ ID NO:35中含有的FR1的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2，其具有SEQ ID NO:35中含有的FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR3，其具有SEQ IDNO:35中含有的FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR4，其具有SEQ ID NO:35中含有的FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR2，其具有SEQ ID NO:35中含有的FR1和FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR3，其具有SEQ ID NO:35中含有的FR1和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR4，其具有SEQ ID NO:35中含有的FR1和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2和重链FR3，其具有SEQ ID NO:35中含有的FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2和重链FR4，其具有SEQ ID NO:35中含有的FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:35中含有的FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2和重链FR3，其具有SEQID NO:35中含有的FR1、FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2和重链FR4，其具有SEQ ID NO:35中含有的FR1、FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:35中含有的FR1、FR3和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2、重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:35中含有的FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。在一个具体的实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2、重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:35中含有的FR1、FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体还包含144L133B的轻链FR的一个或多个FR区。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR3，其具有SEQ IDNO:55中含有的FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR2，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1和FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR3，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2和轻链FR3，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2和轻链FR3，其具有SEQID NO:55中含有的FR1、FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1、FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1、FR3和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。在一个具体的实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:55中含有的FR1、FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体在144L472A的重链中还包含一个或多个FR区。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1，其具有SEQ ID NO:39中含有的FR1的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2，其具有SEQ ID NO:39中含有的FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR3，其具有SEQ IDNO:39中含有的FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR4，其具有SEQ ID NO:39中含有的FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR2，其具有SEQ ID NO:39中含有的FR1和FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR3，其具有SEQ ID NO:39中含有的FR1和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR4，其具有SEQ ID NO:39中含有的FR1和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2和重链FR3，其具有SEQ ID NO:39中含有的FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2和重链FR4，其具有SEQ ID NO:39中含有的FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:39中含有的FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2和重链FR3、其具有SEQID NO:39中含有的FR1、FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2和重链FR4，其具有SEQ ID NO:39中含有的FR1、FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:39中含有的FR1、FR3和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2、重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:39中含有的FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。在一个具体的实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2、重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:39中含有的FR1、FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体还包含144L472A的轻链FR的一个或多个FR区。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1，其具有SEQ ID NO:59中含有的FR1的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2，其具有SEQ ID NO:59中含有的FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR3，其具有SEQ IDNO:59中含有的FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR4，其具有SEQ ID NO:59中含有的FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR2，其具有SEQ ID NO:59中含有的FR1和FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR3，其具有SEQ ID NO:59中含有的FR1和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:59中含有的FR1和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2和轻链FR3，其具有SEQ ID NO:59中含有的FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:59中含有的FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:59中含有的FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2和轻链FR3，其具有SEQID NO:59中含有的FR1、FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:59中含有的FR1、FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:59中含有的FR1、FR3和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:59中含有的FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。在一个具体的实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:59中含有的FR1、FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体在144D666C的重链中还包含一个或多个FR区。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1，其具有SEQ ID NO:43中含有的FR1的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2，其具有SEQ ID NO:43中含有的FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR3，其具有SEQ IDNO:43中含有的FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR4，其具有SEQ ID NO:43中含有的FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR2，其具有SEQ ID NO:43中含有的FR1和FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR3，其具有SEQ ID NO:43中含有的FR1和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR4，其具有SEQ ID NO:43中含有的FR1和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2和重链FR3，其具有SEQ ID NO:43中含有的FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2和重链FR4，其具有SEQ ID NO:43中含有的FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:43中含有的FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2和重链FR3，其具有SEQID NO:43中含有的FR1、FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2和重链FR4，其具有SEQ ID NO:43中含有的FR1、FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:43中含有的FR1、FR3和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2、重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:43中含有的FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。在一个具体的实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2、重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:43中含有的FR1、FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体还包含144D666C的轻链FR的一个或多个FR区。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1，其具有SEQ ID NO:63中含有的FR1的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2，其具有SEQ ID NO:63中含有的FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR3，其具有SEQ IDNO:63中含有的FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR4，其具有SEQ ID NO:63中含有的FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR2，其具有SEQ ID NO:63中含有的FR1和FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR3，其具有SEQ ID NO:63中含有的FR1和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:63中含有的FR1和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2和轻链FR3，其具有SEQ ID NO:63中含有的FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:63中含有的FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:63中含有的FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2和轻链FR3，其具有SEQID NO:63中含有的FR1、FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:63中含有的FR1、FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:63中含有的FR1、FR3和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:63中含有的FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。在一个具体的实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:63中含有的FR1、FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体在144J171G的重链中还包含一个或多个FR区。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1，其具有SEQ ID NO:47中含有的FR1的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2，其具有SEQ ID NO:47中含有的FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR3，其具有SEQ IDNO:47中含有的FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR4，其具有SEQ ID NO:47中含有的FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR2，其具有SEQ ID NO:47中含有的FR1和FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR3，其具有SEQ ID NO:47中含有的FR1和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1和重链FR4，其具有SEQ ID NO:47中含有的FR1和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2和重链FR3，其具有SEQ ID NO:47中含有的FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2和重链FR4，其具有SEQ ID NO:47中含有的FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:47中含有的FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2和重链FR3，其具有SEQID NO:47中含有的FR1、FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2和重链FR4，其具有SEQ ID NO:47中含有的FR1、FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:47中含有的FR1、FR3和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR2、重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:47中含有的FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。在一个具体的实施方案中，本文提供的抗体包含重链FR1、重链FR2、重链FR3和重链FR4，其具有SEQ ID NO:47中含有的FR1、FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体还包含144J171G的轻链FR的一个或多个FR区。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1，其具有SEQ ID NO:67中含有的FR1的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2，其具有SEQ ID NO:67中含有的FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR3，其具有SEQ IDNO:67中含有的FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR4，其具有SEQ ID NO:67中含有的FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR2，其具有SEQ ID NO:67中含有的FR1和FR2的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR3，其具有SEQ ID NO:67中含有的FR1和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:67中含有的FR1和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2和轻链FR3，其具有SEQ ID NO:67中含有的FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:67中含有的FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:67中含有的FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2和轻链FR3，其具有SEQID NO:67中含有的FR1、FR2和FR3的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:67中含有的FR1、FR2和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:67中含有的FR1、FR3和FR4的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR2、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:67中含有的FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。在一个具体的实施方案中，本文提供的抗体包含轻链FR1、轻链FR2、轻链FR3和轻链FR4，其具有SEQ ID NO:67中含有的FR1、FR2、FR3和FR4的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含在下文的第6节和/或图10-13中描述的人源化抗体的一个或多个FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NOs:115、139-163、165和171-177中含有的重链FR区和/或SEQ ID NOs:114、116-138、164和166-170中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NOs:115和139-163中含有的重链FR区和/或SEQ ID NOs:114和116-138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:114中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:116中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:117中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:118中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:119中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:120中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:121中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:122中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:123中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:124中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQID NO:125中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:126中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:127中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:128中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:129中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:130中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:131中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:132中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQID NO:133中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:134中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:135中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:136中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:137中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163中含有的重链FR区和SEQ ID NO:138中含有的轻链FR区。
在其他实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NOs:165和171-177中含有的重链FR区和/或SEQ ID NOs:164和166-170中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:165中含有的重链FR区和SEQ ID NO:164中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:165中含有的重链FR区和SEQ ID NO:166中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:165中含有的重链FR区和SEQ ID NO:167中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:165中含有的重链FR区和SEQ ID NO:168中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:165中含有的重链FR区和SEQ ID NO:169中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:165中含有的重链FR区和SEQ ID NO:170中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:171中含有的重链FR区和SEQ ID NO:164中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:171中含有的重链FR区和SEQ ID NO:166中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:171中含有的重链FR区和SEQ ID NO:167中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:171中含有的重链FR区和SEQ ID NO:168中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:171中含有的重链FR区和SEQ ID NO:169中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:171中含有的重链FR区和SEQ ID NO:170中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:172中含有的重链FR区和SEQ ID NO:164中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:172中含有的重链FR区和SEQ ID NO:166中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:172中含有的重链FR区和SEQ ID NO:167中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:172中含有的重链FR区和SEQ ID NO:168中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:172中含有的重链FR区和SEQ ID NO:169中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:172中含有的重链FR区和SEQ ID NO:170中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:173中含有的重链FR区和SEQ ID NO:164中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:173中含有的重链FR区和SEQ ID NO:166中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:173中含有的重链FR区和SEQ ID NO:167中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:173中含有的重链FR区和SEQ ID NO:168中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:173中含有的重链FR区和SEQ ID NO:169中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:173中含有的重链FR区和SEQ ID NO:170中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:174中含有的重链FR区和SEQ ID NO:164中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:174中含有的重链FR区和SEQ ID NO:166中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:174中含有的重链FR区和SEQ ID NO:167中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:174中含有的重链FR区和SEQ ID NO:168中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:174中含有的重链FR区和SEQ ID NO:169中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:174中含有的重链FR区和SEQ ID NO:170中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:175中含有的重链FR区和SEQ ID NO:164中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:175中含有的重链FR区和SEQ ID NO:166中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:175中含有的重链FR区和SEQ ID NO:167中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:175中含有的重链FR区和SEQ ID NO:168中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:175中含有的重链FR区和SEQ ID NO:169中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:175中含有的重链FR区和SEQ ID NO:170中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:176中含有的重链FR区和SEQ ID NO:164中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:176中含有的重链FR区和SEQ ID NO:166中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:176中含有的重链FR区和SEQ ID NO:167中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:176中含有的重链FR区和SEQ ID NO:168中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:176中含有的重链FR区和SEQ ID NO:169中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:176中含有的重链FR区和SEQ ID NO:170中含有的轻链FR区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:177中含有的重链FR区和SEQ ID NO:164中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:177中含有的重链FR区和SEQ ID NO:166中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:177中含有的重链FR区和SEQ ID NO:167中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:177中含有的重链FR区和SEQ ID NO:168中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:177中含有的重链FR区和SEQ ID NO:169中含有的轻链FR区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:177中含有的重链FR区和SEQ ID NO:170中含有的轻链FR区。
基于CDR编号系统的边界确定本文所述的框架区。换句话说，如果CDR是由例如Kabat、IMGT或Chothia确定的，则框架区是可变区中CDR周围的氨基酸残基，其格式为从N末端到C末端：FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4。例如，FR1定义为从N末端至CDR1氨基酸残基的氨基酸残基，如通过例如Kabat编号系统、IMGT编号系统或Chothia编号系统所定义，FR2定义为CDR1和CDR2氨基酸残基之间的氨基酸残基，如通过例如Kabat编号系统、IMGT编号系统或Chothia编号系统所定义，FR3定义为CDR2和CDR3氨基酸残基之间的氨基酸残基，如通过例如Kabat编号系统、IMGT编号系统或Chothia编号系统所定义，以及FR4定义为从C末端至CDR3氨基酸残基的氨基酸残基，如通过例如Kabat编号系统、IMGT编号系统或Chothia编号系统所定义。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段包含抗体144D464A、144L249B、144L124B、144L133B、144L180A、144L472A、144D666C、144J171G、144D464A LV7aHV10b、144D464A LV9are HV10b、144D464A LV10re HV10b、144D464A LV11re HV10b、144L249B LV7a HV11、144L249B LV9 HV11、144L249B LV9 HV10b和144L249B LV9 HV10c的VH和/VL区。
在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段包含表8中列出的VH区。在一些实施方案中，本文提供的抗体或抗原结合片段包含表10中列出的VH区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VH区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:51的氨基酸序列的VL区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:51的氨基酸序列的VL区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:27的氨基酸序列的VH区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:55的氨基酸序列的VL区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:27的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:55的氨基酸序列的VL区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:31的氨基酸序列的VH区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:55的氨基酸序列的VL区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:31的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:55的氨基酸序列的VL区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:35的氨基酸序列的VH区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:55的氨基酸序列的VL区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:35的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:55的氨基酸序列的VL区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:39的氨基酸序列的VH区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:59的氨基酸序列的VL区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:39的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:59的氨基酸序列的VL区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:43的氨基酸序列的VH区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:63的氨基酸序列的VL区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:43的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:63的氨基酸序列的VL区。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:47的氨基酸序列的VH区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO:67的氨基酸序列的VL区。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:47的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:67的氨基酸序列的VL区。
在其他实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含下文第6节和/或图10-13中所述的人源化抗体的VH和/或VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含具有选自SEQ ID NOs：115、139-163、165和171-177的序列的VH，和/或具有选自SEQ ID Nos:114、116-138、164和166-170的序列的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含具有选自SEQ ID NOs:115和139-163的序列的VH，和/或具有选自SEQ ID NO:114和116-138的序列的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:115的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:115的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:115的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:139的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:139的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:139的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:140的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:140的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:140的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:141的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:141的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:141的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:142的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:142的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:142的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:143的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:143的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:143的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:144的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:144的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:144的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:145的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:145的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:145的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:146的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:146的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:146的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:147的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:147的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:147的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:148的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:148的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:148的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:149的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:149的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:149的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:150的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:150的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:150的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:151的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:151的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:151的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:152的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:152的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:152的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:153的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:153的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:153的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:154的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:154的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:154的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:155的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:155的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:155的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:156的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:156的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:156的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:157的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:157的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:157的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:158的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:158的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:158的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:159的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:159的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:159的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:160的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:160的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:160的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:161的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:161的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:161的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:162的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:162的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:162的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQID NO:114的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQ ID NO:116的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQ ID NO:117的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:163的VH和SEQ ID NO:118的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQ ID NO:119的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQ ID NO:120的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQ ID NO:121的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQ ID NO:122的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQ ID NO:123的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQ ID NO:124的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQ ID NO:125的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQ ID NO:126的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQ ID NO:127的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQID NO:128的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQ ID NO:129的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQ ID NO:130的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:163的VH和SEQ ID NO:131的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQ ID NO:132的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQ ID NO:133的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQ ID NO:134的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQ ID NO:135的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQ ID NO:136的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQ ID NO:137的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:163的VH和SEQ ID NO:138的VL。
在其他实施方案中，抗体或其抗原结合片段包含具有选自SEQ ID NOs:165和171-177的序列的VH，和/或具有选自SEQ ID NOs:164和166-170的序列的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:165的VH和SEQID NO:164的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:165的VH和SEQ ID NO:166的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:165的VH和SEQ ID NO:167的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:165的VH和SEQ ID NO:168的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:165的VH和SEQ ID NO:169的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:165的VH和SEQ ID NO:170的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:171的VH和SEQID NO:164的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:171的VH和SEQ ID NO:166的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:171的VH和SEQ ID NO:167的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:171的VH和SEQ ID NO:168的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:171的VH和SEQ ID NO:169的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:171的VH和SEQ ID NO:170的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:172的VH和SEQID NO:164的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:172的VH和SEQ ID NO:166的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:172的VH和SEQ ID NO:167的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:172的VH和SEQ ID NO:168的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:172的VH和SEQ ID NO:169的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:172的VH和SEQ ID NO:170的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:173的VH和SEQID NO:164的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:173的VH和SEQ ID NO:166的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:173的VH和SEQ ID NO:167的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:173的VH和SEQ ID NO:168的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:173的VH和SEQ ID NO:169的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:173的VH和SEQ ID NO:170的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:174的VH和SEQID NO:164的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:174的VH和SEQ ID NO:166的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:174的VH和SEQ ID NO:167的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:174的VH和SEQ ID NO:168的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:174的VH和SEQ ID NO:169的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:174的VH和SEQ ID NO:170的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:175的VH和SEQID NO:164的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:175的VH和SEQ ID NO:166的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:175的VH和SEQ ID NO:167的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:175的VH和SEQ ID NO:168的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:175的VH和SEQ ID NO:169的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:175的VH和SEQ ID NO:170的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:176的VH和SEQID NO:164的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:176的VH和SEQ ID NO:166的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:176的VH和SEQ ID NO:167的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:176的VH和SEQ ID NO:168的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:176的VH和SEQ ID NO:169的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:176的VH和SEQ ID NO:170的VL。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:177的VH和SEQID NO:164的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:177的VH和SEQ ID NO:166的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:177的VH和SEQ ID NO:167的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQID NO:177的VH和SEQ ID NO:168的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:177的VH和SEQ ID NO:169的VL。在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:177的VH和SEQ ID NO:170的VL。
在一些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含：(i)VH区，其包含SEQID NO:115的氨基酸序列或在SEQ ID NO:115中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中所述至少一个氨基酸残基替换选自在以下氨基酸位置的替换：Gln 1、Lys 12、Val20、Tyr 27、Thr 28、Phe 29、Thr 30、Arg 38、Met 48、Arg 67、Val 68、Ala 72、Ser 77，Ala79，Met 81，Leu 83和Val 117；以及(ii)VL区，其包含SEQ ID NO:114的氨基酸序列或在SEQID NO:114中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中所述至少一个氨基酸残基替换选自在以下氨基酸位置的替换：Pro 8、Val 12、Phe 38、Gln40、Ala 45、Pro 46、Arg47、Thr 48、Ser 51、Trp 59、Thr 60、Leu 77和Asp87。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：(i)VH区，其包含SEQ IDNO:115的氨基酸序列或在SEQ ID NO:115中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中所述至少一个氨基酸残基替换选自以下替换：Gln 1替换为Glu、Lys 12替换为Val、Val20替换为Leu、Tyr 27替换为Phe、Thr28替换为Asn、Phe 29替换为Ile、Thr 30替换为Lys、Arg 38替换为Lys、Met 48替换为Ile、Arg 67替换为Lys、Val 68替换为Ala、Ala 72替换为Thr、Ser 77替换为Asp、Ala 79替换为Val、Met 81替换为Leu、Leu 83替换为Phe，以及Val117替换为Leu；以及(ii)VL区，其包含SEQ ID NO:114的氨基酸序列或在SEQ ID NO:114中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中所述至少一个氨基酸残基替换选自以下替换：Pro 8替换为Ser、Val 12替换为Thr、Phe 38替换为Val、Gln 40替换为Glu、Ala 45替换为Leu、Pro 46替换为Phe、Arg 47替换为Ala、Thr 48替换为Gly、Ser 51替换为Gly、Trp59替换为Gly、Thr 60替换为Val、Leu 77替换为Ile，以及Asp 87替换为Ile。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：(i)VH区，其包含SEQ IDNO:165的氨基酸序列或在SEQ ID NO:165中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中所述至少一个氨基酸残基替换选自在以下氨基酸位置的替换：Gln 1、Lys 12、Val 20、Tyr 27、Thr 28、Phe 29、Thr 30、Arg 38、Met 48、Arg 67、Val 68、Ile 70、Ala 72、Ser 77、Met 81和Val 117；以及(ii)VL区，其包含SEQ ID NO:164的氨基酸序列或在SEQ ID NO:164中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中所述至少一个氨基酸残基替换选自在以下氨基酸位置的替换：Pro 8、Val 12、Phe 38、Gln 40、Ala 45、Pro 46、Arg 47、Thr 48、Ser 51、Trp 59、Thr 60、Leu 77和Asp 87。
在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：(i)VH区，其包含SEQ IDNO:165的氨基酸序列或在SEQ ID NO:165中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中所述至少一个氨基酸残基替换选自以下替换：Gln 1替换为Glu、Lys 12替换为Val、Val20替换为Leu、Tyr 27替换为Phe、Thr 28替换为Asn、Phe 29替换为Ile、Thr 30替换为Lys、Arg 38替换为Lys、Met 48替换为Ile、Arg 67替换为Lys、Val 68替换为Ala、Ile 70替换为Leu、Ala72替换为Thr、Ser 77替换为Asn、Met 81替换为Leu，以及Val 117替换为Leu；以及(ii)VL区，其包含SEQ ID NO:164的氨基酸序列或在SEQ ID NO:164中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中所述至少一个氨基酸残基替换选自以下替换：Pro 8替换为Ser、Val 12替换为Thr、Phe 38替换为Val、Gln 40替换为Glu、Ala 45替换为Leu、Pro 46替换为Phe、Arg 47替换为Thr、Thr 48替换为Gly、Ser 51替换为Gly、Trp 59替换为Gly、Thr60替换为Val、Leu 77替换为Ile，以及Asp 87替换为Ile。
在另一方面，本文提供了与上述抗体或其抗原结合片段之一竞争的抗体。这样的抗体也可以结合与上述抗体之一相同的表位，或重叠的表位。与上述抗体竞争或结合相同表位的抗体和片段，预期显示相似的功能特性。示例的抗原结合蛋白和片段包括具有本文提供的VH区以及CDR的那些，包括表8、10和11-12以及图10-13中的那些。
在某些实施方案中，本文描述的抗体或其抗原结合片段包含相对于下文第6节中所描述的以下任一抗体具有一定百分比同一性的氨基酸序列：144D464A、144L249B、144L124B、144L133B、144L180A、144L472A、144D666C、144J171G、144D464A LV7a HV10b、144D464A LV9are HV10b、144D464A LV10re HV10b、144D464A LV11e HV10b、144L249BLV7a HV11、144L249B LV9 HV11、144L249B LV9 HV10b和144L249B LV9 HV10c。
可以使用数学算法来确定两个序列(例如，氨基酸序列或核酸序列)之间的同一性百分比。用于比较两个序列的数学算法的优选的非限制性实例是，Karlin and Altschul,1990,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.87:2264 2268的算法，如Karlin and Altschul,1993,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.90:5873 5877中修改的算法。此类算法被并入Altschul etal.,1990,J.Mol.Biol.215:403的NBLAST和XBLAST程序中。可以使用NBLAST核苷酸程序参数，设置为例如得分＝100，字长＝12，来执行BLAST核苷酸搜索，以获得与本文描述的核酸分子同源的核苷酸序列。可以使用XBLAST程序参数，设置为例如得分＝50，字长＝3，来执行BLAST蛋白搜索，以获得与本文所述蛋白分子同源的氨基酸序列。为了获得用于比较目的的带有空位的比对，可以利用Gapped BLAST，其描述于Altschul et al.,1997,NucleicAcids Res.25:3389 3402。或者，PSI BLAST可用于执行迭代搜索，以检测分子之间的距离关系(Id.)。当利用BLAST、Gapped BLAST和PSI Blast程序时，可以使用各个程序(例如XBLAST和NBLAST的程序)的默认参数(例如，参见全球网络ncbi.nlm.nih.gov上的美国国家生物技术信息中心(NCBI))。用于比较序列的数学算法的另一个优选的非限制性实例是，Myers and Miller,1988,CABIOS 4:11 17的算法。此类算法已并入ALIGN程序(2.0版)中，所述程序是GCG序列比对软件包的一部分。当利用ALIGN程序比较氨基酸序列时，可以使用PAM120权重残基表，空位长度罚分12和空位罚分4。
可以使用与上述类似的技术来确定两个序列之间的同一性百分比，允许或不允许存在空位。在计算同一性百分比时，通常只计算完全匹配。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含与SEQ ID NO:23的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含与SEQ ID NO:51的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VL区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含分别与SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH区和VL区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有与SEQ ID NO:23的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH框架区的VH区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有与SEQ ID NO:51的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VL框架区的VL区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有VH框架区和VL框架区的VH区和VL区，所述VH框架区和VL框架区分别与SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:51的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％的序列同一性，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。在具体实施方案中，这样的抗体包含与抗体144D464A的CDR(例如，VH CDRs 1-3、VL CDRs 1-3)相同的CDR(例如，VH CDRs 1-3、VL CDRs 1-3)。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含与SEQ ID NO:27的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含与SEQ ID NO:55的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VL区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含分别与SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH区和VL区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有与SEQ ID NO:27的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH框架区的VH区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有与SEQ ID NO:55的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VL框架区的VL区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有VH框架区和VL框架区的VH区和VL区，所述VH框架区和VL框架区分别与SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:55的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％的序列同一性，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。在具体实施方案中，这样的抗体包含与抗体144L249B的CDR(例如，VH CDRs 1-3、VL CDRs 1-3)相同的CDR(例如，VH CDRs 1-3、VL CDRs 1-3)。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含与SEQ ID NO:31的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含与SEQ ID NO:55的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VL区，其中所述抗体免疫特异性的结合IL-36α和/或IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含分别与SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH区和VL区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有与SEQ ID NO:31的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH框架区的VH区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有与SEQ ID NO:55的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VL框架区的VL区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有VH框架区和VL框架区的VH区和VL区，所述VH框架区和VL框架区分别与SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:55的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％的序列同一性，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。在具体实施方案中，这样的抗体包含与抗体144L124B或144L180A的CDR(例如，VHCDRs 1-3、VL CDRs 1-3)相同的CDR(例如，VH CDRs 1-3、VL CDRs 1-3)。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含与SEQ ID NO:35的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含与SEQ ID NO:55的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VL区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含分别与SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH区和VL区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有与SEQ ID NO:35的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH框架区的VH区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有与SEQ ID NO:55的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VL框架区的VL区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有VH框架区和VL框架区的VH区和VL区，所述VH框架区和VL框架区分别与SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:55的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％的序列同一性，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。在具体实施方案中，这样的抗体包含与抗体144L133B的CDR(例如，VH CDRs 1-3、VL CDRs 1-3)相同的CDR(例如，VH CDRs 1-3、VL CDRs 1-3)。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含与SEQ ID NO:39的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含与SEQ ID NO:59的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VL区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含分别与SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH区和VL区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有与SEQ ID NO:39的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH框架区的VH区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有与SEQ ID NO:59的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VL框架区的VL区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有VH框架区和VL框架区的VH区和VL区，所述VH框架区和VL框架区分别与SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:59的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％的序列同一性，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。在具体实施方案中，这样的抗体包含与抗体144L472A的CDR(例如，VH CDRs 1-3、VL CDRs 1-3)相同的CDR(例如，VH CDRs 1-3、VL CDRs 1-3)。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含与SEQ ID NO:43的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含与SEQ ID NO:63的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VL区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含分别与SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH区和VL区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有与SEQ ID NO:43的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH框架区的VH区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有与SEQ ID NO:63的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VL框架区的VL区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有VH框架区和VL框架区的VH区和VL区，所述VH框架区和VL框架区分别与SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:63的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％的序列同一性，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。在具体实施方案中，这样的抗体包含与抗体144D666C的CDR(例如，VH CDRs 1-3、VL CDRs 1-3)相同的CDR(例如，VH CDRs 1-3、VL CDRs 1-3)。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含与SEQ ID NO:47的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含与SEQ ID NO:67的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VL区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含分别与SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH区和VL区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有与SEQ ID NO:47的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VH框架区的VH区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有与SEQ ID NO:67的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性的VL框架区的VL区，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段包含含有VH框架区和VL框架区的VH区和VL区，所述VH框架区和VL框架区分别与SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:67的框架区氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％的序列同一性，其中所述抗体免疫特异性地结合IL-36α和/或IL-36γ。在具体实施方案中，这样的抗体包含与抗体144J171G的CDR(例如，VH CDRs 1-3、VL CDRs 1-3)相同的CDR(例如，VH CDRs 1-3、VL CDRs 1-3)。
5.2.2多克隆抗体
本公开的抗体可以包含多克隆抗体。制备多克隆抗体的方法是技术人员已知的。多克隆抗体可以在哺乳动物中产生，例如，通过一次或多次注射免疫剂和(如果需要)佐剂来产生。通常，免疫剂和/或佐剂通过多次皮下或腹膜内注射而注射到哺乳动物中。免疫剂可以包括IL-36α或IL-36γ多肽或其融合蛋白。将免疫剂与已知在被免疫哺乳动物中具有免疫原性的蛋白质缀合，或用所述蛋白质和一种或多种佐剂来免疫所述哺乳动物可能是有用的。此类免疫原性蛋白质的实例，包括但不限于：匙孔血蓝蛋白、血清白蛋白、牛甲状腺球蛋白和大豆胰蛋白酶抑制剂。可以使用的佐剂的实例包括：Ribi、CpG、Poly(I:C)、弗氏完全佐剂和MPL-TDM佐剂(单磷酰脂质A、合成海藻糖二棒杆霉菌酸酯(trehalosedicorynomycolate))。免疫方案可以由本领域技术人员选择而无需过度实验。然后可以将哺乳动物放血，并分析血清中的抗IL-36α或IL-36γ抗体滴度。如果需要，可以对哺乳动物进行加强免疫直至抗体滴度增加或稳定。另外地，或可替代地，可以从免疫的动物获得淋巴细胞，用于来自如下所描述的杂交瘤的单克隆抗体的融合和制备。
5.2.3单克隆抗体
本公开的抗体或者可以是单克隆抗体。单克隆抗体可以使用杂交瘤方法来制备，该方法首先描述于Kohler et al.,1975,Nature 256:495-97，或者可以通过重组DNA方法来制备(参见，例如美国专利US4,816,567)。
在杂交瘤方法中，按如上所描述免疫小鼠或其他合适的宿主动物(如仓鼠)，以引发产生或能够产生抗体的淋巴细胞，所述抗体将特异性结合用于免疫的蛋白质。或者，可以在体外免疫淋巴细胞。免疫后，分离淋巴细胞，然后使用合适的融合剂(如聚乙二醇)与骨髓瘤细胞系融合，以形成杂交瘤细胞(Goding，Monoclonal Antibodies：Principles andPractice 59-103(1986))。
将由此制备的杂交瘤细胞接种并在合适的培养基中生长，在某些实施方案中，所述培养基包含一种或多种抑制未融合的亲代骨髓瘤细胞(也称为融合伴侣)的生长或存活的物质。例如，如果亲代骨髓瘤细胞缺乏次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶(HGPRT或HPRT)，则杂交瘤的选择性培养基通常包括次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷(HAT培养基)，这会阻止HGPRT缺陷型细胞生长。
示例性的融合伴侣骨髓瘤细胞是这样的细胞，其有效融合、支持所选的抗体产生细胞稳定地高水平产生抗体，并且对针对未融合的亲代细胞进行选择的选择性培养基敏感。示例性骨髓瘤细胞系是鼠类骨髓瘤系，如SP-2及其衍生物，例如可从美国典型培养物保藏中心(Manassas，VA)获得的X63-Ag8-653细胞，以及衍生自可以从索尔克生物研究所(Salk Institute)细胞分配中心(加利福尼亚州圣地亚哥)获得的MOPC-21和MPC-1小鼠肿瘤的细胞。还已经描述了人骨髓瘤和小鼠-人异源骨髓瘤细胞系用于产生人单克隆抗体(Kozbor,1984,Immunol.133:3001-05；and Brodeur et al.,Monoclonal AntibodyProduction Techniques and Applications 51-63(1987))。
对杂交瘤细胞在其中生长的培养基测定针对抗原的单克隆抗体的产生。杂交瘤细胞产生的单克隆抗体的结合特异性，通过免疫沉淀或通过体外结合测定法如RIA或ELISA来确定。单克隆抗体的结合亲和力，可以例如通过Scatchard分析来确定，该分析描述于Munson et al.,1980,Anal.Biochem.107:220-39。
一旦鉴定出产生具有所需特异性、亲和力和/或活性的抗体的杂交瘤细胞，就可以通过有限的稀释程序将克隆进行亚克隆，并通过标准方法使其生长(Goding，同上)。用于该目的的合适的培养基，包括例如DMEM或RPMI-1640培养基。另外，杂交瘤细胞可以作为动物的腹水肿瘤在体内生长，例如通过腹腔注射将细胞注入小鼠体内。
通过常规抗体纯化方法，如亲和色谱法(例如，使用蛋白质A或蛋白质G-琼脂糖凝胶)或离子交换色谱、羟磷灰石色谱、凝胶电泳、透析等，将亚克隆分泌的单克隆抗体与培养基、腹水或血清适当地分离。
编码单克隆抗体的DNA易于使用常规程序(例如，通过使用能够与编码鼠抗体重链和轻链的基因特异性结合的寡核苷酸探针)进行分离和测序。杂交瘤细胞可以用作此类DNA的来源。一旦分离，可以将DNA放入表达载体中，然后将其转染到宿主细胞中，如大肠杆菌细胞、猿猴COS细胞、中国仓鼠卵巢(CHO)细胞或不产生抗体蛋白的骨髓瘤细胞，以在重组宿主细胞中合成单克隆抗体。关于编码抗体的DNA在细菌中的重组表达的综述文章，包括Skerraet al.,1993,Curr.Opinion in Immunol.5:256-62，以及Plückthun,1992,Immunol.Revs.130:151-88。
在一些实施方案中，结合IL-36α和/或IL-36γ表位的抗体包含由这样的核苷酸序列编码的VH结构域的氨基酸序列和/或VL结构域的氨基酸序列，所述核苷酸序列与编码本文所述的VH和/或VL结构域中任一个的核苷酸序列的互补序列在以下条件下杂交：严格条件(例如，在约45℃下于6X氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中与过滤器结合的DNA杂交，然后在约50-65℃下于0.2XSSC/0.1％SDS中进行一次或多次洗涤)；高度严格条件(例如，在约45℃下于6X SSC中与过滤器结合的核酸杂交，然后在约68℃下于0.1X SSC/0.2％SDS中进行一次或多次洗涤)；或本领域技术人员已知的其他严格杂交条件。参见，例如Current Protocolsin Molecular Biology Vol.I,6.3.1-6.3.6and 2.10.3(Ausubel et al.eds.,1989)。
在一些实施方案中，结合IL-36α和/或IL-36γ表位的抗体包含由这样的核苷酸序列编码的VH CDR的氨基酸序列或VL CDR的氨基酸序列，所述核苷酸序列与编码表11和表12中所示的任何VH CDR和/或VL CDR中任一个的核苷酸序列的互补序列在以下条件下杂交：严格条件(例如，在约45℃下于6XSSC中与过滤器结合的DNA杂交，然后在约50-65℃下于0.2X SSC/0.1％SDS中进行一次或多次洗涤)；高度严格条件(例如，在约45℃下于6X SSC中与过滤器结合的核酸杂交，然后在约68℃下于0.1X SSC/0.2％SDS中进行一次或多次洗涤)；或本领域技术人员已知的其他严格杂交条件(参见，例如Ausubel et al.,同上)。
在另一个实施方案中，单克隆抗体或抗体片段可以从使用描述于以下文献的技术产生的抗体噬菌体文库中分离，例如Antibody Phage Display:Methods and Protocols(O’Brien and Aitken eds.,2002)。在噬菌体展示方法中，功能性抗体结构域被展示在带有编码它们的多核苷酸序列的噬菌体颗粒的表面上。可用于制备本文所述抗体的噬菌体展示方法的实例，包括Brinkman et al.,1995,J.Immunol.Methods 182:41-50；Ames etal.,1995,J.Immunol.Methods 184:177-186；Kettleborough et al.,1994,Eur.J.Immunol.24:952-958；Persic et al.,1997,Gene 187:9-18；Burton et al.,1994,Advances in Immunology57:191-280；PCT申请PCT/GB91/O1 134；国际公开WO 90/02809、WO 91/10737、WO 92/01047、WO 92/18619、WO 93/1 1236、WO 95/15982、WO 95/20401和WO97/13844；以及美国专利US5,698,426、US5,223,409、US5,403,484、US5,580,717、US5,427,908、US5,750,753、US5,821,047、US5,571,698、US5,427,908、US5,516,637、US5,780,225、US5,658,727、US5,733,743和US5,969,108。
原则上，通过筛选包含这样的噬菌体的噬菌体文库来选择合成抗体克隆，所述噬菌体展示与噬菌体外壳蛋白融合的抗体可变区(Fv)的各种片段。针对所需抗原筛选此类噬菌体文库。表达能够结合所需抗原的Fv片段的克隆被吸附到抗原上，从而与文库中的非结合克隆分离。然后从抗原上洗脱结合克隆，并且可以通过抗原吸附/洗脱的额外循环进一步富集。
可变结构域可以在噬菌体上功能性展示，既可以是单链Fv(scFv)片段(其中VH和VL通过短的柔性肽共价连接)，也可以是Fab片段(其中它们各自与恒定域融合并非共价相互作用)，其描述于例如Winter et al.,1994,Ann.Rev.Immunol.12:433-55。
通过PCR可以将VH和VL基因的库分别克隆，并在噬菌体文库中随机重组，然后可以如上文Winter et al.中所描述搜索抗原结合克隆。来自免疫源的文库无需构建杂交瘤即可提供针对免疫原的高亲和力抗体。或者，无需任何免疫接种即可克隆纯天然库以提供针对多种非自身和自身抗原的人抗体的单一来源，其描述于Griffiths et al.,1993,EMBO J12:725-34。最后，还可以通过克隆来自干细胞的未重排的V基因片段，并使用含有随机序列的PCR引物来编码高度可变的CDR3区并在体外完成重排，来合成天然文库，其描述于例如Hoogenboom and Winter,1992,J.Mol.Biol.227:381-88。
文库的筛选可以通过本领域已知的各种技术来完成。例如，IL-36α和/或IL-36γ(例如，IL-36α和/或IL-36γ多肽、片段或表位)可用于包被吸附板的孔，在固定于吸附板上或用于细胞分选的宿主细胞上表达，与生物素缀合以被链霉亲和素包被的珠捕获，或用于淘选展示库的任何其他方法。通过使用长时间洗涤和单价噬菌体展示(其描述于Bass etal.,1990,Proteins 8:309-14和WO 92/09690)和通过使用较低的抗原包被密度(其描述于Marks et al.,1992,Biotechnol.10:779-83)，可以促进具有慢解离动力学(例如，良好的结合亲和力)的抗体的选择。
通过设计合适的抗原筛选程序以选择目标噬菌体克隆，然后使用来自目标噬菌体克隆的VH和/或VL序列(例如Fv序列)、或来自VH和VL序列的各种CDR序列和描述于如上Kabat et al.的合适的恒定区(例如，Fc)序列来构建全长抗体克隆，可以得到抗IL-36α和/或IL-36γ抗体。
本文所述的抗体还可以例如包括嵌合抗体。嵌合抗体是其中抗体的不同部分衍生自不同免疫球蛋白分子的分子。例如，嵌合抗体可包含与人抗体恒定区融合的小鼠或大鼠单克隆抗体的可变区。产生嵌合抗体的方法是本领域已知的。参见，例如Morrison,1985,Science 229:1202；Oi et al.,1986,BioTechniques 4:214；Gillies et al.,1989,J.Immunol.Methods 125:191-202；以及美国专利US5,807,715、US4,816,567、US4,816,397和US6,331,415。
可以使用标准的众所周知的技术分离使用诸如本文所述的技术产生的抗体或抗原结合片段。例如，可以通过常规的免疫球蛋白纯化方法(如蛋白A-琼脂糖凝胶、羟基磷灰石色谱、凝胶电泳、透析或亲和色谱)，从例如培养基、腹水、血清、细胞裂解物、合成反应材料等中适当地分离抗体或抗原结合片段。如本文所用，“分离的”或“纯化的”抗体基本上不含所述抗体来自细胞或组织来源的细胞材料或其他蛋白质，或当化学合成时基本上不含化学前体或其他化学物质。
5.2.4抗体片段
本公开提供结合IL-36α和/或IL-36γ的抗体和抗体片段。在某些情况下，使用抗体片段而不是完整抗体具有优势。片段的较小尺寸允许快速清除，并可以改善对细胞、组织或器官的接近。对于某些抗体片段的综述，参见Hudson et al.,2003,Nature Med.9:129-34。
已经开发了用于产生抗体片段的各种技术。传统上，这些片段是通过对完整抗体进行蛋白水解消化而衍生的(参见，例如Morimoto et al.,1992,J.Biochem.Biophys.Methods 24:107-17；以及Brennan et al.,1985,Science 229:81-83)。但是，这些片段现在可以直接由重组宿主细胞产生。Fab、Fv和scFv抗体片段均可在大肠杆菌或酵母细胞中表达并从中分泌，因此可轻松生产大量这些片段。可以从上述抗体噬菌体文库中分离抗体片段。或者，Fab’-SH片段可以直接从大肠杆菌中回收，并化学偶联以形成F(ab’)2片段(Carter et al.,1992,Bio/Technology 10:163-67)。根据另一种方法，可以直接从重组宿主细胞培养物中分离F(ab′)2片段。具有增加的体内半衰期的包含挽救受体结合表位残基的Fab和F(ab′)2片段，描述于例如美国专利US5,869,046。产生抗体片段的其他技术对熟练技术人员将是显而易见的。在某些实施方案中，抗体是单链Fv片段(scFv)(参见，例如WO 93/16185；美国专利US5,571,894和US5,587,458)。Fv和scFv具有完整的结合位点，其没有恒定区；因此，它们可能适合于在体内使用期间减少非特异性结合。可以构建scFv融合蛋白以在scFv的氨基或羧基末端产生效应蛋白的融合(参见，例如Borrebaeck ed.，同上)。抗体片段也可以是“线性抗体”，例如，如以上引用的参考文献中所描述。此类线性抗体可以是单特异性或多特异性的，如双特异性的。
较小的抗体衍生的结合结构是单独的可变结构域(V结构域)，也称为单可变结构域抗体(sdAb)。某些类型的生物(骆驼科动物和软骨鱼)拥有安置在Fc等效结构域结构上的高亲和力的单个V样结构域，作为其免疫系统的一部分(Woolven et al.,1999,Immunogenetics 50:98-101；以及Streltsov et al.,2004,Proc Natl Acad SciUSA.101:12444-49)。V样结构域(在骆驼科动物中称为VhH，在鲨鱼中称为V-NAR)通常显示出较长的表面环，从而允许穿透靶抗原的空洞。它们还通过掩盖疏水表面块来稳定分离的VH结构域。
这些VhH和V-NAR结构已用于设计sdAb。已经使用来自噬菌体文库的选择和其他产生稳定的、高结合性的VL衍生和VH衍生的结构域的方法设计了人V结构域变体。
本文提供的抗体包括但不限于免疫球蛋白分子和免疫球蛋白分子的免疫学活性部分，例如，包含与IL-36α和/或IE-36g表位结合的抗原结合位点的分子。本文提供的免疫球蛋白分子可以是免疫球蛋白分子的任何类别(例如，IgG、IgE、IgM、IgD和IgA)或任何亚类(例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2)。
抗体的变体和衍生物包括保留与IL-36α和/或IE-36g表位结合的能力的抗体功能片段。示例性功能片段包括：Fab片段(例如，包含抗原结合结构域并包含轻链和由二硫键桥接的重链一部分的抗体片段)；Fab’(例如，包含含有Fab和通过铰链区的重链其他部分的单个抗原结合结构域的抗体片段)；F(ab’)2(例如，两个Fab’分子通过重链铰链区中的链间二硫键连接；所述Fab’分子可能指向相同或不同的表位)；双特异性Fab(例如具有两个抗原结合结构域的Fab分子，每个抗原结合结构域可针对不同的表位)；包含可变区的单链，也称为scFv(例如，通过10-25个氨基酸的链连接在一起的抗体轻链和重链的可变抗原结合决定区)；二硫键连接的Fv或dsFv(例如通过二硫键连接在一起的抗体轻链和重链的可变抗原结合决定区)；骆驼化的VH(例如抗体单条重链的可变抗原结合决定区，其中VH界面上的某些氨基酸是在天然骆驼抗体的重链中发现的氨基酸)；双特异性scFv(例如具有两个抗原结合结构域的scFv或dsFv分子，每个结构域都可以针对不同的表位)；双抗体(例如，当第一scFv的VH结构域与第二scFv的VF结构域组装并且第一scFv的VF结构域与第二scFv的VH结构域组装时形成的二聚scFv；双抗体的两个抗原结合区可以针对相同或不同的表位)；三抗体(例如三聚scFv，其以类似于双抗体的方式形成，但是其中在单个复合物中创建了三个抗原结合结构域；这三个抗原结合结构域可以针对相同或不同的表位)；四抗体(例如，四聚scFv，其以类似于双抗体的方式形成，但是其中在单个复合物中形成四个抗原结合结构域；四个抗原结合结构域可以针对相同或不同的表位)。
5.2.5人源化抗体
本文所述的抗体可以，例如包括人源化抗体，如去免疫化或复合人抗体。
人源化抗体可包含人框架区和人恒定区序列。
例如，人源化抗体可包含人恒定区序列。在某些实施方案中，人源化抗体可以选自任何类别的免疫球蛋白，包括IgM、IgG、IgD、IgA和IgE，以及任何同种型，包括IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。在某些实施方案中，人源化抗体可包含κ或λ轻链恒定序列。
可以使用本领域中已知的多种技术来产生人源化抗体，包括但不限于：CDR移植(欧洲专利EP239,400；国际公开WO91/09967；以及美国专利US5,225,539、US5,530,101和US5,585,089)，镶饰(veneering)或表面重塑(resurfacing)(欧洲专利EP592,106和EP519,596；Padlan，1991，Molecular Immunology 28(4/5):489-498；Studnicka et al.,1994,Protein Engineering7(6):805-814；以及Roguska et al.,1994,PNAS 91:969-973)，链改组(chain shuffling)(美国专利US5,565,332)，以及公开于下述文件的技术：如美国专利US6,407,213、美国专利US5,766,886、WO93/17105；Tan et al.,J.Immunol.169:1119 25(2002)；Caldas et al.,Protein Eng.13(5):353-60(2000)；Morea et al.,Methods 20(3):267 79(2000)；Baca et al.,J.Biol.Chem.272(16):10678-84(1997)；Roguska etal.,Protein Eng.9(10):895 904(1996)；Couto et al.,Cancer Res.55(23Supp):5973s-5977s(1995)；Couto et al.,Cancer Res.55(8):1717-22(1995),Sandhu JS,Gene 150(2):409-10(1994)；以及Pedersen et al.,J.Mol.Biol.235(3):959-73(1994)；另参见美国专利公开US 2005/0042664 A1(2005年2月24日)，它们各自通过引用整体并入本文。
在一些实施方案中，本文提供的抗体可以是结合IL-36α和/或IL-36γ的人源化抗体，包括人和/或食蟹猕猴IL-36α和/或IL-36γ。例如，本公开的人源化抗体可以包含一个或多个如表11和表12所示的CDR。人源化非人抗体的各种方法是本领域已知的。例如，人源化抗体可以具有从非人源引入的一个或多个氨基酸残基。这些非人氨基酸残基通常被称为“导入(import)”残基，其通常取自“导入”可变结构域。人源化的方法例如可以按照Joneset al.,1986，Nature 321：522-25；Riechmann et al.,1988，Nature 332：323-27；以及Verhoeyen et al.,1988，Science 239：1534-36)，用高变区序列代替人抗体的相应序列。
在一些情况下，人源化抗体是通过CDR移植构建的，其中将亲本非人抗体(例如啮齿动物)的六个CDR的氨基酸序列移植到人抗体框架上。例如，Padlan等人鉴定出CDR中仅约三分之一的残基实际接触抗原，并将其称为“特异性决定残基”或SDR(Padlan et al.,1995，FASEB J.9：133-39)。在SDR移植技术中，仅将SDR残基移植到人抗体框架上(参见，例如Kashmiri et al.,2005，Methods 36：25-34)。
选择人(轻链和重链的)可变结构域用于制备人源化抗体，可对降低抗原性至关重要。例如，根据所谓的“最佳适配”方法，针对已知的人可变结构域序列的整个文库，筛选非人(例如啮齿类)抗体的可变结构域序列。可以选择与啮齿动物最接近的人序列作为人源化抗体的人框架(Sims et al.,1993，J.Immunol.151：2296-308；以及Chothia et al.,1987，J.Mol.Biol.196:901-17)。另一种方法使用源自轻链或重链特定亚组的所有人抗体共有序列的特定框架。相同的框架可用于多种不同的人源化抗体(Carter et al.,1992，Proc.Natl.Sci.USA 89:4285-89；以及Presta et al.,1993，J.Immunol.151:2623-32)。在一些情况下，所述框架源自量最大的人类亚类VL6亚组I(VL6I)和VH亚组III(VHIII)的共有序列。在另一种方法中，将人种系基因用作框架区的来源。
在基于CDR比较的可选范例(称为超人源化)中，FR同源性是不相关的。所述方法包括将非人序列与功能性人种系基因库进行比较。然后选择编码与鼠序列相同或紧密相关的典型结构的那些基因。接下来，在与非人抗体共有典型结构的基因中，选择在CDR中具有最高同源性的那些基因作为FR供体。最后，将非人CDR移植到这些FR上(参见，例如Tan etal.,2002，J.Immunol.169:1119-25)。
通常还期望抗体被人源化的同时保留它们对抗原的亲和力和其他有利的生物学特性。为了实现所述目的，根据一种方法，通过使用亲本和人源化序列的三维模型来分析亲本序列和各种概念性人源化产物的方法来制备人源化抗体。三维免疫球蛋白模型是普遍可获得的，并且为本领域技术人员所熟知。说明并显示所选候选免疫球蛋白序列可能的三维构象结构的计算机程序是可获得的。这些包括，例如WAM(Whitelegg and Rees，2000，Protein Eng.13:819-24)、Modeller(Sali and Blundell，1993，J.Mol.Biol.234:779-815)，以及Swiss PDB Viewer(Guex and Peitsch，1997，Electrophoresis 18:2714-23)。检视这些显示，可分析残基在候选免疫球蛋白序列功能中的可能作用，例如，分析影响候选免疫球蛋白结合其抗原的能力的残基。以这种方式，可以从受体和导入序列中选择FR残基并结合，从而获得所需的抗体特性，如增加的靶抗原亲和力。通常，抗原结合直接且最主要地受高变区残基影响。
用于抗体人源化的另一种方法是基于抗体的人类性量度标准，称为人字符串含量(HSC)。所述方法将小鼠序列与人类种系基因库进行比较，并将用HSC标记差异性。然后通过最大化其HSC来人源化靶标序列，而非使用整体同一性量表来生成多种多样的人源化变体(Lazar et al.,2007，Mol.Immunol.44:1986-98).
除上述方法外，还可使用已经证实的方法产生和选择人源化抗体。这些方法包括那些基于大型人源化变体文库的产生以及使用富集技术或高通量筛选技术选择最佳克隆的方法。可以从噬菌体、核糖体和酵母展示文库以及通过细菌菌落筛选来分离抗体变体(参见例如Hoogenboom,2005,Nat.Biotechnol.23:1105-16；Dufner et al.,2006,TrendsBiotechnol.24:523-29；Feldhaus et al.,2003,Nat.Biotechnol.21:163-70；以及Schlapschy et al.,2004,Protein Eng.Des.Sel.17:847-60)。
在FR文库方法中，将一系列残基变体引入FR中的特定位置，然后筛选文库以选择最能支持移植CDR的FR。要被替换的残基可以包括一些或全部被鉴定为可能有助于CDR结构的“游标(Vernier)”残基(参见，例如Foote and Winter，1992，J.Mol.Biol.215：403-10)，或来自Baca et al.,1997,J.Biol.Chem.272:I 0678-84鉴定的更受限制的目标残基集合。
在FR改组中，整个FR与非人类CDR结合在一起，而不创建所选残基变体的组合文库(例如，参见Dall’Acqua et al.,2005，Methods 36：43-60)。可以针对在两步法中结合来对文库进行筛选，首先是人源化VL，然后是人源化VH。可选地，可以使用一步FR改组法。这种方法已显示出相较于两步筛选法更高效，因为所得抗体表现出改善的生化和物理化学特性，包括增强的表达、增加的亲和力和热稳定性(参见例如Damschroder et al.,2007，Mol.Immunol.44:3049-60)。
“人化(humaneering)”方法基于对基本最低特异性决定簇(MSD)的实验鉴定，并且基于将非人类片段依序替换到人FR文库中并对结合进行评估。它从非人VH和VL链的CDR3区域开始，将非人抗体的其他区域逐渐替换到人FR中，包括VH和VL的CDR1和CDR2。所述方法通常导致表位的保留并鉴定来自具有不同的人V段CDR的多个亚类的抗体。人化技术可分离出与人类种系基因抗体91-96％同源的抗体(参见例如，Alfenito,Cambridge HealthtechInstitute’s Third Annual PEGS,The Protein Engineering Summit,2007)。
“人工程化(human engineering)”方法涉及通过对抗体的氨基酸序列进行特异性改变来改变非人抗体或抗体片段(如小鼠或嵌合抗体或抗体片段)，从而产生修饰的抗体，其在人体内免疫原性降低而仍然保留期望的原始非人抗体的结合特性。通常，所述技术涉及将非人(例如，小鼠)抗体的氨基酸残基分类为“低风险”、“中风险”或“高风险”残基。使用全局风险/回报计算进行分类，所述计算可评估进行特定替换的预期益处(例如，针对人的免疫原性)与所述替换将影响所得抗体折叠的风险。通过将来自非人抗体可变区的氨基酸序列与特定或共有的人抗体序列的相应区域进行比对，可选择在非人(例如小鼠)抗体序列的给定位置(例如低或中风险位置)待替换的特定人氨基酸残基。根据比对，可以将非人序列中低或中风险位置的氨基酸残基，替换为人抗体序列中的相应残基。制备人类工程化蛋白的技术，更详细地描述于Studnicka et al.,1994，Protein Engineering 7：805-14；美国专利US5,766,886、US5,770,196、US5,821,123和US5,869,619；以及PCT公开WO93/11794。
可以使用例如“复合人抗体(Composite Human AntibodyTM)”技术(AntitopeLtd.,Cambridge,United Kingdom)来产生复合人抗体。为了产生复合人抗体，以避免T细胞表位的方式从多个人抗体可变区序列的片段设计可变区序列，从而使所得抗体的免疫原性最小。此类抗体可包含人恒定区序列，例如人轻链和/或重链恒定区。
去免疫化抗体是去除了T细胞表位的抗体。已经描述了制备去免疫化抗体的方法，参见例如，Jones et al.,Methods Mol Biol.2009；525:405-23,xiv；以及De Groot etal.,Cell.Immunol.244:148-153(2006))。去免疫化抗体包含T细胞表位耗竭的可变区和人恒定区。简而言之，克隆了抗体的VH和VL，并随后通过在T细胞增殖测定中测试源自抗体的VH和VL的重叠肽来鉴定T细胞表位。通过计算机模拟方法鉴定T细胞表位，以鉴定与人MHCII类结合的肽。将突变引入VH和VL中，以消除与II类人MHC的结合。然后，利用突变的VH和VL来产生去免疫化抗体。
在一个特定的实施方案中，本文提供的人源化抗体是使用下文第6节所述的方法产生的。
5.2.6人抗体
在特定的实施方案中，所述抗体是完全人抗人抗体。完全人抗体可以通过本领域已知的任何方法产生。本文提供的人抗IL-36抗体，例如与IL-36α和IL-36γ结合的双重拮抗剂抗体，可以通过将从人源噬菌体展示文库中选择的Fv克隆可变结构域序列与已知人恒定结构域结合而构建。可选地，可以通过杂交瘤方法制备本公开的人单克隆抗体。用于生产人单克隆抗体的人骨髓瘤和小鼠-人异源骨髓瘤细胞系，已经描述于例如Kozbor，1984，J.Immunol.133:3001-05；Brodeur et al.,Monoclonal Antibody ProductionTechniques and Applications 51-63(1987)；以及Boerner et al.,1991,J.Immunol.147:86-95。
还可能在无内源性免疫球蛋白产生的情况下，产生转基因动物(例如小鼠)，所述转基因动物可在免疫后产生人抗体的完整库。表达人抗体库的转基因小鼠已被用来产生针对多种潜在药物靶标的高亲和力人序列单克隆抗体(参见例如Jakobovits,A.,1995,Curr.Opin.Biotechnol.6(5):56l-66；Bruggemann and Taussing,1997,Curr.Opin.Biotechnol.8(4):455-58；美国专利US6,075,181和US6,150,584；以及Lonberget al.,2005,Nature Biotechnol.23:1117-25)。
可选地，可以通过使产生针对靶抗原的抗体的人B淋巴细胞永生化来制备人抗体(例如，此类B淋巴细胞可以从个体中回收，或可以在体外进行免疫)(参见，例如Cole etal.,Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy(1985)；Boerner et al.,1991，J.Immunol.147(1):86-95，以及美国专利US5,750,373)。
基因改组也可以用于从非人抗体例如啮齿动物抗体衍生人抗体，其中人抗体具有与起始非人抗体相似的亲和力和特异性。根据所述方法(也称为“表位印迹”或“指导选择”)，用人V结构域基因库替换通过本文所述的噬菌体展示技术获得的非人抗体片段的重链或轻链可变区，以产生非人链/人链scFv或Fab嵌合体群体。用抗原进行选择导致了非人链/人链嵌合scFv或Fab的分离，其中所述人链恢复了在去除初级噬菌体展示克隆中相应的非人链时被破坏的抗原结合位点(例如，表位指导(印记)人链伴侣的选择)。当重复所述过程以替换剩余的非人链时，则获得人抗体(参见，例如PCT WO93/06213；以及Osbourn etal.,2005，Methods 36：61-68)。与传统的通过CDR移植的非人抗体人源化不同，所述技术提供了完全的人抗体，所述人抗体不具有非人类来源的FR或CDR残基。针对细胞表面抗原的人源化小鼠抗体的指导选择的实例，包括存在于卵巢癌细胞上的叶酸结合蛋白(参见，例如Figini et al.,1998，Cancer Res.58:991-96)和肝细胞癌中高表达的CD147(参见例如Baoet al.,2005,Cancer Biol.Ther.4:1374-80)。
指导选择方法的潜在缺点是，一条抗体链改组而保持另一条抗体不变可能会导致表位漂移。为了维持被非人抗体识别的表位，可以应用CDR保留(参见，例如Klimka et al.,2000,Br.J.Cancer.83:252-60；以及Beiboer et al.,2000,J.Mol.Biol.296:833-49)。在这种方法中，通常保留非人VH CDR3，因为该CDR可能位于抗原结合位点的中心，并且可能是抗体进行抗原识别的最重要区域。然而，在某些情况下，也可以保留非人抗体的VH CDR3和VL CDR3以及VH CDR2、VL CDR2和VL CDR1。
5.2.7多特异性抗体
多特异性抗体如双特异性抗体，是对至少两种不同抗原具有结合特异性的单克隆抗体。在某些实施方案中，可以基于本文提供的抗体的序列，例如表11和表12中列出的CDR序列，构建多特异性抗体。在某些实施方案中，本文提供的多特异性抗体是双特异性抗体。在某些实施方案中，所述双特异性抗体是人抗体或人源化抗体。在某些实施方案中，结合特异性之一是针对IL-36α和/或IL-36γ的，而另一种结合特异性是针对任何其他抗原的。在某些实施方案中，结合特异性之一是针对IL-36α和IL-36γ的，而另一种结合特异性是针对任何其他抗原的。在一些实施方案中，结合特异性之一是针对IL-36α和/或IL-36γ，另一种结合特异性是针对另一种抗原如细胞因子或趋化因子。在一些实施方案中，结合特异性之一是针对IL-36α和IL-36γ，而另一种结合特异性是针对另一种抗原如细胞因子或趋化因子。在某些实施方案中，双特异性抗体可以结合IL-36α和/或IL-36γ的两个不同表位。可以将双特异性抗体制成全长抗体或抗体片段(例如F(ab')2双特异性抗体)。
制备多特异性抗体的方法是本领域已知的，如通过两个免疫球蛋白重链-轻链对的共表达，其中两个重链具有不同的特异性(参见例如，Milstein and Cuello，1983，Nature 305：537-40)。有关产生多特异性抗体(例如，双特异性抗体)的更多细节，参见例如，Bispecific Antibodies,Kontermann ed.,2011。
5.2.8多价抗体
多价抗体可以比二价抗体更快地被表达与抗体结合的抗原的细胞内化(和/或分解代谢)。本公开的抗体可以是具有三个或更多个抗原结合位点的多价抗体(除了IgM类以外，例如四价抗体)，其易于通过重组表达编码抗体多肽链的核酸而产生。多价抗体可包含二聚化结构域和三个或更多个抗原结合位点。在某些实施方案中，二聚化结构域包含Fc区或铰链区(或由其组成)。在这种情况下，抗体将包含Fc区和在Fc区氨基末端的三个或更多个抗原结合位点。在某些实施方案中，多价抗体包含三个至约八个抗原结合位点(或由其组成)。在一个这样的实施方案中，多价抗体包含四个抗原结合位点(或由其组成)。所述多价抗体包含至少一条多肽链(例如，两条多肽链)，其中所述多肽链包含两个或更多个可变结构域。例如，所述多肽链可包含VD1-(XI)n-VD2-(X2)n-Fc，其中VD1是第一可变结构域，VD2是第二可变结构域，Fc是Fc区的一条多肽，X1和X2代表氨基酸或多肽，n为0或1。例如，所述多肽链可包含：VH-CH1-柔性接头-VH-CH1-Fc区链；或VH-CH1-VH-CH1-Fc区链。本文中的多价抗体可还包含至少两个(例如四个)轻链可变结构域多肽。本文的多价抗体可以包含例如约2至约8条轻链可变结构域多肽。本文考虑的轻链可变结构域多肽包含轻链可变结构域，并且任选地，还包含CL结构域。
5.2.9Fc工程化
可能期望通过Fc工程化来修饰本文中提供的抗体。在某些实施方案中，对抗体Fc区的修饰导致抗体的效应子功能降低或消除。在某些实施方案中，所述效应子功能是ADCC、ADCP和/或CDC。在一些实施方案中，所述效应子功能是ADCC。在其他实施方案中，所述效应子功能是ADCP。在其他实施方案中，所述效应子功能是CDC。在一个实施方案中，所述效应子功能是ADCC和ADCP。在一个实施方案中，所述效应子功能是ADCC和CDC。在一个实施方案中，所述效应子功能是ADCP和CDC。在一个实施方案中，所述效应子功能是ADCC、ADCP和CDC。这可以通过在抗体的Fc区中引入一个或多个氨基酸替换来实现。
为了增加抗体的血清半衰期，例如，如美国专利US5,739,277所述，可以将挽救受体结合表位整合入抗体(特别是抗体片段)中。术语“挽救(salvage)受体结合表位”是指负责增加IgG分子体内血清半衰期的IgG分子(例如，IgG1、IgG2、IgG3或IgG4)Fc区的表位。
5.2.10替代性结合剂
本公开内容涵盖与本文公开的抗体特异性结合相同表位的非免疫球蛋白结合剂。在一些实施方案中，非免疫球蛋白结合剂经鉴定是在竞争性结合测定中替换本公开的抗体或被本公开的抗体替换的试剂。这些替代性结合剂可包括例如本领域已知的任何工程化的蛋白支架。此类支架可包含表11-12中所示的一个或多个CDR。这样的支架包括，例如，抗运载蛋白(anticalin)，其基于脂质运载蛋白支架，该蛋白结构的特征在于刚性的β-筒(beta-barrel)，其支撑着形成配体结合位点的四个高变环。新的结合特异性可以通过在环区中的靶向随机诱变，并结合功能展示和指导选择来工程化(参见，例如Skerra，2008，FEBSJ.275：2677-83)。其他合适的支架可包括，例如Adnectin或单抗，其基于人纤连蛋白III的第10个胞外结构域(参见，例如Koide and Koide，2007，Methods Mol.Biol.352:95-109)；亲和体(affibodies)，其基于葡萄球菌蛋白A的Z结构域(参见，例如Nygren et al.,2008，FEBS J.275：2668-76)；重复蛋白(DARPin)，其基于锚蛋白重复蛋白(参见，例如Stumpp etal.,2008，Discov.Today 13:695-701)；Fynomer，其基于人Fyn蛋白激酶的SH3结构域(参见，例如Grabulovski et al.,2007,J.Biol.Chem.282:3196-204)；Affitin，其基于来自Sulfolobus acidolarius的Sac7d(参见，例如Krehenbrink et al.,2008，J.Mol.Biol.383:1058-68)；Affilin，其基于人y-B-结晶蛋白(参见，例如Ebersbach etal.,2007,J.Mol.Biol.372:172-85)；Avimer，其基于膜受体蛋白的A结构域(参见，例如Silverman et al.,2005，Biotechnol.23:1556-61)；富含半胱氨酸的扭结菌素(knottin)肽(参见，例如Kolmar,2008,FEBS J.275:2684-90)；以及工程化的Kunitz型抑制剂(参见，例如Nixon and Wood，2006,Curr.Opin.Drug.Discov.Dev.9:261-68)。有关综述参见，例如Gebauer and Skerra，2009，Curr.Opin.Chem.13:245-55。
5.2.11抗体变体
在一些实施方案中，考虑了与本文提供的IL-36α和/或IL-36γ结合的抗体或抗原结合片段的氨基酸序列修饰。例如，可能期望改善抗体的结合亲和力和/或其他生物学特性，包括但不限于：特异性、热稳定性、表达水平、效应子功能、糖基化、降低的免疫原性或溶解性。因此，除了本文所述的抗体之外，还考虑了可制备的抗体变体。例如，可以通过向编码DNA引入适当的核苷酸改变，和/或通过合成所需抗体或多肽来制备抗体变体。本领域技术人员应当理解，氨基酸改变可改变抗体的翻译后过程，如改变糖基化位点的数目或位置，或改变膜锚定特性。
在一些实施方案中，本文提供的抗体是化学修饰的，例如，通过任何类型的分子与抗体共价连接。抗体衍生物可以包括例如通过糖基化、乙酰化、聚乙二醇化、磷酸化、酰胺化、通过已知的保护/封闭基团的衍生化、蛋白水解切割、与细胞配体或其他蛋白连接等，经化学修饰的抗体。可以通过已知技术进行多种化学修饰中的任何一种，包括但不限于：特定的化学切割、乙酰化、制剂、衣霉素的代谢合成等。另外，抗体可以含有一种或多种非经典氨基酸。
变异可以是编码抗体或多肽的一个或多个密码子的替换、缺失或插入，其导致与天然序列抗体或多肽相比氨基酸序列的变化。氨基酸替换可以是用具有相似结构和/或化学性质的一个氨基酸替换另一个氨基酸的结果，例如用丝氨酸替换亮氨酸，例如保守氨基酸替换。本领域技术人员已知的标准技术，可用于在编码本文提供的分子的核苷酸序列中引入突变，包括例如定点诱变和PCR介导的诱变，其导致氨基酸替换。插入或缺失可以任选地在约1-5个氨基酸的范围内。在某些实施方案中，替换、缺失或插入包括相对于原始分子，少于25个氨基酸替换、少于20个氨基酸替换、少于15个氨基酸替换、少于10个氨基酸替换、少于5个氨基酸替换、少于4个氨基酸替换、少于3个氨基酸替换、或少于2个氨基酸替换。在一个特定的实施方案中，所述替换是在一个或多个预测的非必需氨基酸残基上进行的保守氨基酸替换。可以通过系统地在序列中进行氨基酸的插入、缺失或替换，并测试所得变体的全长或成熟天然序列所表现出的活性，从而确定允许的变异。
氨基酸序列的插入包括氨基和/或羧基末端融合，其长度范围从一个残基到包含一百个或更多个残基的多肽，以及单个或多个氨基酸残基的序列内插入。末端插入的实例，包括具有N端甲硫氨酰基残基的抗体。抗体分子的其他插入变体，包括将抗体的N-或C-端与酶(例如，用于抗体导向的酶前药疗法)或增加抗体血清半衰期的多肽相融合。
“保守氨基酸替换”是其中氨基酸残基被侧链具有相似电荷的氨基酸残基替换的替换。本领域中界定了具有类似电荷的侧链的氨基酸残基家族。这些家族包括具有碱性侧链的氨基酸(例如赖氨酸、精氨酸、组氨酸)，具有酸性侧链的氨基酸(例如天冬氨酸、谷氨酸)，具有不带电荷的极性侧链的氨基酸(例如甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸)，具有非极性侧链的氨基酸(例如丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、色氨酸)，具有β支链侧链的氨基酸(例如苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸)和具有芳香族侧链的氨基酸(例如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸)。可选地，可以沿着全部或部分的编码序列随机引入突变，如通过饱和诱变，且可以针对生物学活性筛选所得突变体以鉴定保有活性的突变体。诱变后，可表达被编码的蛋白，并可以确定蛋白的活性。
对抗体生物学特性的实质性修饰通过选择这样的替换来完成，所述替换在维持以下特征的作用方面显著不同：(a)所述替换的区域中的多肽主链结构(例如折叠或螺旋构象)，(b)在靶位点的分子的电荷或疏水性，或(c)侧链的主体部分。或者，可以进行保守的替换(例如，在具有相似性质和/或侧链的氨基酸基团内)，以维持或不显著改变性质。可以根据氨基酸的侧链性质的相似性将其分组(参见，例如Biochemistrv 73-75(2d ed.1975))为：(1)非极性的：Ala(A)、Val(V)、Leu(L)、Ile(I)、Pro(P)、Phe(F)、Trp(W)、Met(M)；(2)无电荷的极性：Gly(G)、Ser(S)、Thr(T)、Cys(C)、Tyr(Y)、Asn(N)、Gln(Q)；(3)酸性的：Asp(D)、Glu(E)；(4)碱性的：Lys(K)、Arg(R)、His(H)。
可选地，可以基于共同的侧链性质将天然残基分类：(1)疏水的：正亮氨酸、Met、Ala、Val、Leu、Ile；(2)中性亲水性：Cys、Ser、Thr、Asn、Gln；(3)酸性的：Asp、Glu；(4)碱性的：His、Lys、Arg；(5)影响链方向性的残基：Gly、Pro；和(6)芳香族的：Trp、Tyr、Phe。
非保守替换需要将其中一个类别的成员交换为另一个类别。也可将此类替换的残基引入保守替换位点或引入其余(非保守)位点。因此，在一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段，包含与本文所述抗体的氨基酸序列具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性的氨基酸序列，例如，下文第6节中所述的抗体144D464A、144L249B、144L124B、144L133B、144L180A、144L472A、144D666C、144J171G、144D464A LV7a HV10b、144D464A LV9are HV10b、144D464A LV10re HV10b、144D464A LVI11re HV10b、144L249BLV7a HV11、144L249B LV9HV11、144L249B LV9 HV10b和144L249B LV9HV10c。
在一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段，包含与本文所述抗体的氨基酸序列具有至少35％同一性的氨基酸序列。在一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段，包含与本文所述抗体的氨基酸序列具有至少40％同一性的氨基酸序列。在一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段，包含与本文所述抗体的氨基酸序列具有至少45％同一性的氨基酸序列。在一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段，包含与本文所述抗体的氨基酸序列具有至少50％同一性的氨基酸序列。在一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段，包含与本文所述抗体的氨基酸序列具有至少55％同一性的氨基酸序列。在一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段，包含与本文所述抗体的氨基酸序列具有至少60％同一性的氨基酸序列。在一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段，包含与本文所述抗体的氨基酸序列具有至少65％同一性的氨基酸序列。在一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段，包含与本文所述抗体的氨基酸序列具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段，包含与本文所述抗体的氨基酸序列具有至少75％同一性的氨基酸序列。在一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段，包含与本文所述抗体的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段，包含与本文所述抗体的氨基酸序列具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段，包含与本文所述抗体的氨基酸序列具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段，包含与本文所述抗体的氨基酸序列具有至少99％同一性的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供了抗体或其抗原结合片段，其结合IL-36α和/或IL-36γ表位且包含：VH区，所述VH包含与表8中所述的氨基酸序列具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性的氨基酸序列，和/或VL区，所述VL区包含与表10中所述的氨基酸序列具有至少35％、至少40％、至少45％的氨基酸序列至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或99％同一性的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供了抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VH区，所述VH区包含与如表8中所述氨基酸序列具有至少35％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供了抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VH区，所述VH区包含与如表8中所述氨基酸序列具有至少40％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供了抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VH区，所述VH区包含与如表8中所述氨基酸序列具有至少45％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供了抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VH区，所述VH区包含与如表8中所述氨基酸序列具有至少50％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供了抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VH区，所述VH区包含与如表8中所述氨基酸序列具有至少55％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供了抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VH区，所述VH区包含与如表8中所述氨基酸序列具有至少60％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供了抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VH区，所述VH区包含与如表8中所述氨基酸序列具有至少65％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供了抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VH区，所述VH区包含与如表8中所述氨基酸序列具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供了抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VH区，所述VH区包含与如表8中所述氨基酸序列具有至少75％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供了抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VH区，所述VH区包含与如表8中所述氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供了抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VH区，所述VH区包含与如表8中所述氨基酸序列具有至少85％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供了抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VH区，所述VH区包含与如表8中所述氨基酸序列具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供了抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VH区，所述VH区包含与如表8中所述氨基酸序列具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供了抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VH区，所述VH区包含与如表8中所述氨基酸序列具有至少99％同一性的氨基酸序列。
在一些实施方案中，本文提供抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VL区，所述VL区包含与如表10中所述氨基酸序列具有至少35％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VL区，所述VL区包含与如表10中所述氨基酸序列具有至少40％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VL区，所述VL区包含与如表10中所述氨基酸序列具有至少45％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VL区，所述VL区包含与如表10中所述氨基酸序列具有至少50％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VL区，所述VL区包含与如表10中所述氨基酸序列具有至少55％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VL区，所述VL区包含与如表10中所述氨基酸序列具有至少60％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VL区，所述VL区包含与如表10中所述氨基酸序列具有至少65％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VL区，所述VL区包含与如表10中所述氨基酸序列具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VL区，所述VL区包含与如表10中所述氨基酸序列具有至少75％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VL区，所述VL区包含与如表10中所述氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VL区，所述VL区包含与如表10中所述氨基酸序列具有至少85％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VL区，所述VL区包含与如表10中所述氨基酸序列具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VL区，所述VL区包含与如表10中所述氨基酸序列具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文提供抗体或其抗原结合片段，其与IL-36α和/或IL-36γ表位结合且包含VL区，所述VL区包含与如表10中所述氨基酸序列具有至少99％同一性的氨基酸序列。
在又一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段包含VH CD和/或VL CDR氨基酸序列，所述氨基酸序列与表11中所述的VH CDR氨基酸序列和/或表12中所述的VL CDR氨基酸序列具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。
在又一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段包含VH CDR和/或VL CDR氨基酸序列，所述氨基酸序列与如表11所述的VH CDR氨基酸序列和/或如表12所述的VL CDR氨基酸序列具有至少35％同一性。在又一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段包含VH CDR和/或VL CDR氨基酸序列，所述氨基酸序列与如表11所述的VH CDR氨基酸序列和/或如表12所述的VL CDR氨基酸序列具有至少40％同一性。在又一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段包含VH CDR和/或VL CDR氨基酸序列，所述氨基酸序列与如表11所述的VHCDR氨基酸序列和/或如表12所述的VL CDR氨基酸序列具有至少45％同一性。在又一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段包含VH CDR和/或VLCDR氨基酸序列，所述氨基酸序列与如表11所述的VH CDR氨基酸序列和/或如表12所述的VLCDR氨基酸序列具有至少50％同一性。在又一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段包含VH CDR和/或VL CDR氨基酸序列，所述氨基酸序列与如表11所述的VH CDR氨基酸序列和/或如表12所述的VL CDR氨基酸序列具有至少55％同一性。在又一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段包含VHCDR和/或VL CDR氨基酸序列，所述氨基酸序列与如表11所述的VH CDR氨基酸序列和/或如表12所述的VL CDR氨基酸序列具有至少60％同一性。在又一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段包含VH CDR和/或VL CDR氨基酸序列，所述氨基酸序列与如表11所述的VH CDR氨基酸序列和/或如表12所述的VL CDR氨基酸序列具有至少65％同一性。在又一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段包含VH CDR和/或VL CDR氨基酸序列，所述氨基酸序列与如表11所述的VH CDR氨基酸序列和/或如表12所述的VL CDR氨基酸序列具有至少70％同一性。在又一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段包含VH CDR和/或VL CDR氨基酸序列，所述氨基酸序列与如表11所述的VH CDR氨基酸序列和/或如表12所述的VL CDR氨基酸序列具有至少75％同一性。在又一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段包含VH CDR和/或VL CDR氨基酸序列，所述氨基酸序列与如表11所述的VH CDR氨基酸序列和/或如表12所述的VL CDR氨基酸序列具有至少80％同一性。在又一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段包含VH CDR和/或VL CDR氨基酸序列，所述氨基酸序列与如表11所述的VH CDR氨基酸序列和/或如表12所述的VL CDR氨基酸序列具有至少85％同一性。在又一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段包含VH CDR和/或VL CDR氨基酸序列，所述氨基酸序列与如表11所述的VH CDR氨基酸序列和/或如表12所述的VL CDR氨基酸序列具有至少90％同一性。在又一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段包含VH CDR和/或VL CDR氨基酸序列，所述氨基酸序列与如表11所述的VH CDR氨基酸序列和/或如表12所述的VL CDR氨基酸序列具有至少95％同一性。在又一个实施方案中，与IL-36α和/或IL-36γ表位结合的抗体或其抗原结合片段包含VH CDR和/或VL CDR氨基酸序列，所述氨基酸序列与如表11所述的VH CDR氨基酸序列和/或如表12所述的VL CDR氨基酸序列具有至少99％同一性。
可以使用本领域已知的方法制造变异，如寡核苷酸介导的(定点)诱变、丙氨酸扫描和PCR诱变。定点诱变(参见例如Carter，1986，Biochem J.237：1-7；以及Zoller et al.,1982，Nucl.Acids Res.10:6487-500)、盒式诱变(参见例如Wells et al.,1985，Gene 34：315-23)，或其他已知可施用于克隆DNA以产生抗IL-36α和/或IL-36γ抗体变体DNA的技术。
不涉及维持本文提供的抗体的合适构象的任何半胱氨酸残基也可以被替换，例如被另一种氨基酸(如丙氨酸或丝氨酸)替换，以改善分子的氧化稳定性并防止异常交联。相反，(例如，当所述抗体是抗体片段如Fv片段时)可将半胱氨酸键添加至抗体以改善其稳定性。
在一些实施方案中，本公开的抗体分子是“去免疫化”抗体。“去免疫化”抗体是衍生自人源化或嵌合抗体的抗体，与其各自的原始非去免疫化抗体相比，其氨基酸序列具有一个或多个改变，导致所述抗体的免疫原性降低。产生这种抗体突变体的方法之一，涉及鉴定和去除抗体分子的T细胞表位。第一步，可以通过几种方法来确定抗体分子的免疫原性，例如，如本领域已知的，通过体外确定T细胞表位或计算机预测这些表位。一旦确定了T细胞表位功能的关键残基，就可以进行突变去除免疫原性并保留抗体活性。对于综述，参见例如，Jones et al.,2009，Methods in Molecular Biology 525：405-23。
5.2.12体外亲和力成熟
在一些实施方案中，可以通过体外亲和力成熟来制备与亲本抗体相比具有改善的性质(如亲和力、稳定性或表达水平)的抗体变体。像天然原型一样，体外亲和力成熟基于突变和选择的原理。抗体文库展示在生物体(例如噬菌体、细菌、酵母或哺乳动物细胞)的表面上，或与其编码的mRNA或DNA结合(例如共价或非共价)。所展示抗体的亲和力选择，可使携带编码抗体遗传信息的生物或复合体被分离。使用展示方法(如噬菌体展示)进行两轮或三轮突变和选择，通常会导致抗体片段亲和力处于低纳摩尔范围内。亲和力成熟的抗体可具有对靶标抗原的纳摩尔或甚至皮摩尔的亲和力。
噬菌体展示是展示和选择抗体广泛使用方法。抗体作为与噬菌体外壳蛋白的融合物展示在Fd或M13噬菌体表面上。选择涉及将其暴露于抗原，从而使噬菌体展示的抗体可与其靶标结合，该过程称为“淘选(panning)”。回收与抗原结合的噬菌体，并将其用于感染细菌以产生噬菌体，以进行进更多轮的选择。对于综述，参见例如，Hoogenboom，2002，MethodsMol.Biol.178:1-37；以及Bradbury and Marks，2004，J.Immunol.Methods 290:29-49。
在酵母展示系统中(参见，例如Boder et al.,1997,Nat.Biotech.15:553-57；以及Chao et al.,2006,Nat.Protocols 1:755-68)，可以将抗体融合到酵母凝集素蛋白Aga2p的粘附亚基上，所述粘附亚基通过与Aga1p的二硫键附着在酵母细胞壁上。通过Aga2p展示蛋白可以使蛋白远离细胞表面，从而最大程度地减少与酵母细胞壁上其他分子的潜在相互作用。将磁分离和流式细胞仪用于筛选文库，以选择具有改善的亲和力或稳定性的抗体。通过用生物素化的抗原和与荧光团缀合的第二种试剂(如链霉亲和素)标记酵母，以确定与目标可溶性抗原的结合。抗体的表面表达的变化，可以通过对scFv两侧的血凝素或c-Myc表位标签进行免疫荧光标记来测量。已经表明表达与所展示的蛋白的稳定性相关，因此可以选择抗体以提高稳定性和亲和力(参见，例如Shusta et al.,1999，J.Mol.Biol.292:949-56)。酵母展示的另一个优点是，利用内质网伴侣和质量控制机制，可以将展示的蛋白折叠在真核酵母细胞的内质网中。一旦完成成熟，当在酵母表面上展示时，抗体亲和力就可以被方便地“滴定”，而无需表达和纯化每个克隆。酵母表面展示理论上的限制是，该功能文库的大小可能比其他展示方法的要小。但是，最近的一种方法使用酵母细胞的杂交系统来创建组合多样性，所述组合多样性的大小估计为1014(参见，例如美国专利公开US2003/0186374；和Blaise et al.,2004,Gene 342:211-18)。
在核糖体展示中，会生成抗体-核糖体-mRNA(ARM)复合物，以便在无细胞系统中进行选择。将编码特定抗体文库的DNA文库与缺少终止密码子的间隔子序列遗传融合。当翻译时，所述间隔子序列仍连接于肽基tRNA，并占据核糖体通道，因此可使目的蛋白突出于核糖体外并折叠。所得的mRNA、核糖体和蛋白的复合物可结合表面结合配体，使得通过与配体的亲和力捕获同时分离抗体及其编码mRNA。然后将核糖体结合的mRNA反转录回cDNA，然后可以将其进行诱变，并用于下一轮选择(参见，例如Fukuda et al.,2006，Nucleic AcidsRes.34:el27)。在mRNA展示中，使用嘌呤霉素作为衔接子分子可在抗体和mRNA之间建立共价连接(Wilson et al.,2001,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 98:3750-55)。
由于这些方法完全在体外进行，因此与其他选择技术相比，它们具有两个主要优点。首先，文库的多样性不受细菌细胞转化效率的限制，而仅受试管中核糖体和不同mRNA分子数量的限制。其次，由于在任何多样化步骤后都无需转化文库，因此在每轮选择后都可以例如通过非校对聚合酶，轻松引入随机突变。
在一些实施方案中，可以使用哺乳动物展示系统。
也可以用靶向的方式或通过随机引入，向抗体文库的CDR中引入多样性。前一种方法包括通过高水平或低水平的诱变依序靶向抗体的所有CDR，或靶向体细胞超突变的分离的热点(参见，例如Ho et al.,2005,J.Biol.Chem.280:607-17)或基于实验或结构的原因疑似影响亲和力的残基。还可以通过DNA改组或类似技术替换天然不同的区域来引入多样性(参见，例如Lu et al.,2003,J.Biol.Chem.278:43496-507；美国专利US5,565,332和US6,989,250)。可选的靶向延伸到骨架区残基的高变环的技术(参见，例如Bond et al.,2005，J.Mol.Biol.348:699-709)在CDR中采用环缺失和插入，或使用基于杂交的多样化(参见，例如美国专利公开US2004/0005709)。其他在CDR中产生多样性的方法，公开于例如美国专利US7,985,840。可用于产生抗体文库和/或抗体亲和力成熟的更多方法，公开于例如美国专利US8,685,897和US8,603,930，以及美国公开US2014/0170705、US2014/0094392、US2012/0028301、US2011/0183855和US2009/0075378号，其各自通过引用并入本文。
文库的筛选可以通过本领域已知的各种技术来完成。例如，可以将抗体固定在固相支持物、柱子、针或纤维素/聚(偏二氟乙烯)膜/其他滤膜上，表达于固定在吸附板的宿主细胞上，或用于细胞分选，或缀合于生物素以捕获链霉亲和素包被的珠子，或用于淘选展示库的任何其他方法。
有关体外亲和力成熟方法的综述，参见例如Hoogenboom，2005，NatureBiotechnology 23:1105-16；Quiroz and Sinclair,2010,Revista Ingeneria Biomedia4:39-51；以及其中的参考文献。
5.2.13抗体的修饰
本文提供的与IL-36α和/或IL-36γ结合的抗体的共价修饰包括在本公开的范围内。共价修饰包括使抗体中被靶向的氨基酸残基与有机衍生剂反应，所述有机衍生剂可与所述抗体中所选侧链或N-或C-端残基反应。其他修饰包括分别将谷氨酰胺基和天冬酰胺基残基脱酰胺基化为相应的谷氨酰基和天冬氨酰残基，将脯氨酸和赖氨酸羟基化，将丝氨酸或苏氨酸残基的羟基磷酸化，将赖氨酸、精氨酸和组氨酸侧链的α-氨基甲基化(参见，例如Creighton，Proteins: Structure and Molecular Prooerties 79-86(1983))，将N-端胺乙酰化和将任意C-端羧基酰胺化。
本文提供的抗体的其他类型共价修饰包括在本公开的范围内，其包括改变抗体或多肽的天然糖基化模式(参见，例如Beck et al.,2008,Curr.Pharm.Biotechnol.9:482-501；以及Walsh，2010,Drug Discov.Today 15:773-80)，以及将抗体与多种非蛋白质聚合物之一(例如，聚乙二醇(PEG)、聚丙二醇或聚氧化烯)以下述文献中所述的方式连接，例如美国专利US4,640,835；US4,496,689；US4,301,144；US4,670,417；US4,791,192；或US4,179,337。
本公开的抗体也可以被修饰以形成嵌合分子，所述嵌合分子包含与另一种抗体、异源多肽或氨基酸序列(例如表位标签)融合的抗体(参见，例如Terpe，2003,Appl.Microbiol.Biotechnol.60:523-33)，或IgG分子的Fc区(参见，例如Aruffo,Antibody Fusion Proteins 221-42,Chamow and Ashkenazi eds.,1999)。
本文还提供了融合蛋白，其包含本文提供的与IF-36α和/或IR-36γ结合的抗体和异源多肽。
本文还提供了与IF-36α和/或IR-36γ抗原结合的抗体组。在具体实施方案中，所述抗体组对IF-36α和/或IR-36γ抗原具有不同的缔合速率、不同的解离速率、不同的亲和力，和/或对IF-36α和/或IR-36γ抗原具有不同的特异性。在一些实施方案中，所述组包含约10、约25、约50、约75、约100、约125、约150、约175、约200、约250、约300、约350、约400、约450、约500、约550、约600、约650、约700、约750、约800、约850、约900、约950或约1000个或更多个抗体，或者由其组成。所述抗体组可用于例如96孔板或384孔板中，以进行诸如ELISA的测定。
5.2.14免疫缀合物
本公开还提供了缀合物，其包含本公开中通过合成接头与一种或多种非抗体试剂共价结合的任一种抗体。
在一些实施方案中，本文提供的抗体与例如治疗剂(例如细胞毒剂)、或诊断或可检测分子缀合或重组融合。所述缀合或重组融合的抗体可用于例如治疗或预防疾病或病症，如IL-36介导的疾病。所述缀合或重组融合的抗体可用于，例如，监测或预后IL-36介导的疾病发作、发展、进程和/或严重性。
这些诊断和检测的完成可以，例如，通过将抗体与可检测的物质偶联，所述可检测的物质包括但不限于各种酶，诸如但不限于：辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶或乙酰胆碱酯酶；辅基，诸如但不限于：链霉亲和素/生物素或亲和素/生物素；荧光物质，诸如但不限于：伞形酮、荧光素、异硫氰酸荧光素、若丹明、二氯三嗪胺荧光素、丹磺酰氯或藻红蛋白；发光材料，诸如但不限于：鲁米诺；生物发光材料，诸如但不限于：萤光素酶、萤光素或水母发光蛋白；化学发光材料，诸如但不限于：基于吖啶的化合物或HALOTAG；放射性材料，诸如但不限于：碘(131I、125I、123I和121I)、碳(14C)、硫(35S)、氚(3H)、铟(115In、113In、112In和11l In)、锝(99Tc)、铊(201Ti)、镓(68Ga和67Ga)、钯(103Pd)、钼(99Mo)、氙(133Xe)、氟(18F)、153Sm、177Lu、159Gd、149Pm、140La、175Yb、166Ho、90Y、47Sc、186Re、188Re、142Pr、105Rh、97Ru、68Ge、57Co、65Zn、85Sr、32P、153Gd、169Yb、51Cr、54Mn、75Se、113Sn或117Sn；使用各种正电子发射断层扫描技术的正电子发射金属；和非放射性顺磁性金属离子。
本文还提供了与异源蛋白或多肽(或其片段，例如约10、约20、约30、约40、约50、约60、约70、约80、约90或约100个氨基酸的多肽)重组融合或化学缀合(共价或非共价缀合)以产生融合蛋白的抗体及其用途。具体地，本文提供了融合蛋白，其包含本文提供的抗体的抗原结合片段(例如，CDR1、CDR2和/或CDR3)和异源蛋白、多肽或肽。在一个实施方案中，与抗体融合的异源蛋白、多肽或肽可用于使抗体靶向特定细胞类型。
此外，本文提供的抗体可以与标志物或“标签”序列(如肽)融合，以利于纯化。在特定实施方案中，所述标志物或标签氨基酸序列是六组氨酸肽，如pQE载体中提供的标签(参见，例如QIAGEN，Inc.)，其中许多是可商购的。例如，如Gentz et al.,1989,Proc.Natl.Acad.Sci.USA86:821-24所述，六组氨酸为融合蛋白的纯化提供了便利。可用于纯化的其他肽标签包括但不限于血凝素(“HA”)标签，其对应于衍生自流感血凝素蛋白的表位(Wilson et al.,1984,Cell 37:767-78)，以及“FLAG”标签。
将基团(moieties)(包括多肽)与抗体融合或缀合的方法是已知的(参见，例如Arnon et al.,Monoclonal Antibodies for Immunotargeting of Drugs in CancerTherapy,in Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy 243-56(Reisfeld etal.eds.,1985)；Hellstrom et al.,Antibodies for Drug Delivery,in ControlledDrug Delivery 623-53(Robinson et al.eds.,2d ed.1987)；Thorpe，Antibody Carriersof Cytotoxic Agents in Cancer Therapy:A Review,in Monoclonal Antibodies:Biological and Clinical Applications 475-506(Pinchera et al.eds.,1985)；Analysis,Results,and Future Prospective of the Therapeutic Use of Radiolabeled Antibody in Cancer Therapy,in Monoclonal Antibodies for CancerDetection and Therapy 303-16(Baldwin et al.eds.,1985)；Thorpe et al.,1982,Immunol.Rev.62:119-58；美国专利US5,336,603；US5,622,929；US5,359,046；US5,349,053；US5,447,851；US5,723,125；US5,783,181；US5,908,626；US5,844,095和US5,112,946；EP307,434；EP367,166；EP394,827；PCT公开WO91/06570、WO96/04388、WO96/22024、WO97/34631和WO99/04813；Ashkenazi et al.,1991,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,88:10535-39；Traunecker et al.,1988，Nature，331:84-86；Zheng et al.,1995，J.Immunol.154:5590-600；以及Vil et al.,1992,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89:11337-41)。
融合蛋白可以通过，例如基因改组、基序改组、外显子改组和/或密码子改组(统称为“DNA改组”)技术产生。DNA改组可以用于改变本文提供的抗体的活性，包括例如具有更高亲和力和更低解离速率的抗体(参见，例如美国专利US5,605,793、US5,811,238、US5,830,721、US5,834,252、US5,837,458；Patten et al.,1997,Curr.Opinion Biotechnol.8:724-33；Harayama,1998,Trends Biotechnol.16(2):76-82；Hansson et al.,1999，J.Mol.Biol.287:265-76；及Lorenzo and Blasco，1998，Biotechniques 24(2):308-11-3)。抗体或经编码的抗体可以在重组前通过易错PCR、随机核苷酸插入或其他方法进行随机诱变来改变。可以将本文提供的编码抗体的多核苷酸与一种或多种异源分子的一种或多种组分、基序、节段、部分、结构域、片段等重组。
还可以将本文提供的抗体与第二抗体缀合以形成抗体异源缀合物，其描述于例如美国专利US676,980。
本文提供的抗体也可以附着于固体支持物，其对于靶标抗原的免疫测定或纯化尤其有用。这样的固体载体，包括但不限于：玻璃、纤维素、聚丙烯酰胺、尼龙、聚苯乙烯、聚氯乙烯或聚丙烯。
接头可以是便于缀合的试剂在细胞中释放的“可剪切接头”，但是本文也考虑了不可剪切接头。用于本公开的缀合物的接头，包括但不限于：对酸不稳定的接头(例如，腙接头)、含二硫键的接头、对肽酶敏感的接头(例如，包含氨基酸例如缬氨酸和/或瓜氨酸如瓜氨酸-缬氨酸或苯丙氨酸-赖氨酸的肽接头)、对光不稳定的接头、二甲基接头(参见，例如Chari et al.,11992,Cancer Res.52:127-31；和美国专利US5,208,020)、硫醚接头，或设计用于逃避多药转运蛋白介导的抗性的亲水性接头(参见，例如Kovtun et al.,2010,Cancer Res.70:2528-37)。
可以使用多种双功能蛋白偶联剂(如BMPS、EMCS、GMBS、HBVS、LC-SMCC、MBS、MPBH、SBAP、SIA、SIAB、SMCC、SMPB、SMPH、磺基EMCS、磺基GMBS、磺基KMUS、磺基MBS、磺基SIAB、磺基SMCC、磺基SMPB和SVSB(琥珀酰亚胺基-(4-乙烯基砜)苯甲酸盐)制造所述抗体与试剂的缀合物。本公开还考虑了，可以使用本领域中公开的任何合适的方法来制备抗体和试剂的缀合物(参见，例如Bioconjugate Techniques(Hermanson ed.,2d ed.2008))。
抗体和试剂的常规缀合策略，基于涉及Lys残基的ε-氨基或Cys残基的硫醇基的随机缀合化学反应，其导致了异质缀合物。最近开发的技术使得可与抗体进行位点特异性缀合，从而使加载均一并避免了抗原结合或药代动力学改变的缀合物亚群。这些包括对重链和轻链位置上包含半胱氨酸替换的“Thiomab抗体”的工程化，其提供反应性硫醇基团，并且不破坏免疫球蛋白的折叠和组装或改变抗原的结合(参见，例如Junutula et al.,2J.Immunol.Meth.332:41-52；以及Junutula et al.,2008,Nature Biotechnol.26:925-32)。在另一种方法中，通过将终止密码子UGA从终止重编码为硒代半胱氨酸的插入，使硒代半胱氨酸共翻译地插入到抗体序列中，从而允许在其他氨基酸存在的情况下，在硒代半胱氨酸亲核硒醇基团的位置进行特异性共价缀合(参见，例如Hofer et al.2008,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 105:12451-56；以及Hofer et al.,2009,Biochemistry 48(50):12047-57)。
5.3多核苷酸
在某些实施方案中，本公开涵盖编码本文所述抗体的多核苷酸。术语“编码多肽的多核苷酸”涵盖仅包含所述多肽的编码序列的多核苷酸以及包含其他编码和/或非编码序列的多核苷酸。本发明的多核苷酸可以是RNA形式或DNA形式。DNA包括cDNA、基因组DNA和合成DNA；并且可以是双链或单链的，且如果是单链的，则可以是编码链或非编码(反义)链。
在某些实施方案中，多核苷酸包含在相同阅读框中与有助于例如从宿主细胞中表达和分泌多肽的多核苷酸融合的多肽编码序列(例如，起分泌序列作用的前导序列，其控制多肽的转运)。所述多肽可具有的前导序列可被宿主细胞切割，以形成多肽的“成熟”形式。
在某些实施方案中，多核苷酸包含在相同阅读框中与标志物或标签序列融合的多肽编码序列。例如，在一些实施方案中，标志物序列是由载体提供的六组氨酸标签，其在宿主为细菌的情况下可使与标志物融合的多肽有效纯化。在一些实施方案中，标志物与其他亲和标签结合使用。
在某些实施方案中，本文提供的多核苷酸选自下表3-6中所列的多核苷酸或其任意组合。在某些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:20的核苷酸序列。在某些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:24的核苷酸序列。在一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:28的核苷酸序列。在另一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:32的核苷酸序列。在又一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:36的核苷酸序列。在又一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:40的核苷酸序列。在又一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:44的核苷酸序列。在又一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQID NO:22的核苷酸序列。在又一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:26的核苷酸序列。在又一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:30的核苷酸序列。在又一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:34的核苷酸序列。在又一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:38的核苷酸序列。在又一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:42的核苷酸序列。在又一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:46的核苷酸序列。在又一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:48的核苷酸序列。在又一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:52的核苷酸序列。在又一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:56的核苷酸序列。在又一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:60的核苷酸序列。在又一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:64的核苷酸序列。在又一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:50的核苷酸序列。在又一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:54的核苷酸序列。在又一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ IDNO:58的核苷酸序列。在又一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:62的核苷酸序列。在又一些实施方案中，所述多核苷酸包含SEQ ID NO:66的核苷酸序列。
在一些实施方案中，本文所述的多核苷酸编码本文提供的任何多肽，包括例如在下文第6节和图10至图13中所述那些。
本公开还涉及本文所述的多核苷酸变体，其中所述变体编码，例如，多肽的片段、类似物和/或衍生物。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含以下的多核苷酸：其核苷酸序列与编码包含本文所述抗体或其抗原结合片段的多核苷酸具有至少约80％同一性、至少约85％同一性、至少约90％同一性、至少约95％同一性；并且在一些实施方案中，至少约96％、97％、98％或99％同一性。
如本文所用，短语“具有与参考核苷酸序列至少例如95％“相同”的核苷酸序列的多核苷酸”，意指所述多核苷酸的核苷酸序列相对于所述参考核苷酸，除了每100个核苷酸可包含至多五个点突变以外，所述多核苷酸的核苷酸序列与参考序列相同。换句话说，为获得具有与参考核苷酸序列至少95％相同的核苷酸序列的多核苷酸，可以删除或用另一核苷酸替换参考序列中至多5％的核苷酸，或可以将至多相当于参考序列总核苷酸5％的数量的核苷酸插入参考序列。参考序列的这些突变可发生在参考核苷酸序列的5'或3'端位置，或在那些末端位置之间的任何地方，或者单独地散布在参考序列的核苷酸之间或以一个或多个连续基团散布在参考序列内。
多核苷酸变体可以在编码区、非编码区或二者中含有改变。在一些实施方案中，多核苷酸变体含有产生沉默替换、添加或缺失但不改变编码的多肽的性质或活性的改变。在一些实施方案中，多核苷酸变体包含沉默替换，其使得多肽的氨基酸序列不改变(由于遗传密码的简并性)。可以出于多种原因产生多核苷酸变体，例如，用以优化特定宿主的密码子表达(即，将人mRNA中的密码子变为细菌宿主如大肠杆菌所优选的那些)。在一些实施方案中，多核苷酸变体在序列的非编码或编码区中包含至少一个沉默突变。
在一些实施方案中，产生多核苷酸变体用以调节或改变编码的多肽的表达(或表达水平)。在一些实施方案中，产生多核苷酸变体用以增加编码的多肽的表达。在一些实施方案中，产生多核苷酸变体用以减少编码的多肽的表达。在一些实施方案中，与亲本多核苷酸序列相比，多核苷酸变体具有增加的编码多肽表达。在一些实施方案中，与亲本多核苷酸序列相比，多核苷酸变体具有减少的编码多肽表达。
在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与下表3-6中所列的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。
在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ ID NO:20的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ ID NO:24的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ ID NO:28的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ ID NO:32的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ ID NO:36的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQID NO:40的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ ID NO:44的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ IDNO:22的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ ID NO:26的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ ID NO:30的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ ID NO:34的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ ID NO:38的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ ID NO:42的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ ID NO:46的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ ID NO:48的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ ID NO:52的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQID NO:56的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ ID NO:60的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ IDNO:64的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ ID NO:50的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ ID NO:54的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ ID NO:58的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ ID NO:62的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。在某些实施方案中，本公开提供的多核苷酸包含与SEQ ID NO:66的多核苷酸至少约80％相同、至少约85％相同、至少约90％相同、至少约95％相同，并且在一些实施方案中至少约96％、97％、98％或99％相同的核酸序列。
在某些实施方案中，多核苷酸是分离的。在某些实施方案中，多核苷酸是基本纯的。
还提供了包含本文所述的多核苷酸的载体和细胞。在一些实施方案中，表达载体包含多核苷酸分子。在一些实施方案中，宿主细胞包含含有多核苷酸分子的表达载体。在一些实施方案中，宿主细胞包含一种或多种含有多核苷酸分子的表达载体。在一些实施方案中，宿主细胞包含多核苷酸分子。在一些实施方案中，宿主细胞包含一个或多个多核苷酸分子。下文第6节对本文提供的载体构建进行了示例。
5.4制备抗体的方法
在又一个方面，本文提供了制备本文提供的各种抗体或抗原结合片段的方法。
本文提供的免疫特异性结合IL-36抗原(例如IL-36α和/或IL-36γ)的抗体(例如，本文提供的全长抗体、抗体的重链和/或轻链、或单链抗体)的重组表达，需要构建包含编码所述抗体的多核苷酸的表达载体。一旦获得了本文提供的编码抗体分子、抗体的重链或轻链或其片段(诸如但非必须含有重链和/或轻链的可变结构域)的多核苷酸，就可以使用本领域熟知的方法通过重组DNA技术产生用于生产抗体分子的载体。因此，本文描述了通过表达含有抗体编码核苷酸序列的多核苷酸来制备蛋白的方法。可以使用本领域技术人员熟知的方法，来构建含有抗体编码序列以及适当的转录和翻译控制信号的表达载体。这些方法包括，例如，体外重组DNA技术、合成技术和体内遗传重组。还提供了可复制的载体，其包含编码本文提供的抗体分子、抗体的重链或轻链、抗体的重或轻链的可变结构域或其片段、或重链或轻链CDR的核苷酸序列，所述核苷酸序列与启动子可操作地连接。这样的载体可以包括编码抗体分子恒定区的核苷酸序列(参见，例如国际公开WO86/05807和WO89/01036；以及美国专利US5,122,464)，且所述抗体的可变结构域可以被克隆到这样的载体中，用于表达整个重链、整个轻链或整个重链和轻链。
通过常规技术将表达载体转移至宿主细胞，然后通过常规技术培养转染的细胞以产生本文提供的抗体。因此，本文还提供了宿主细胞，其含有与异源启动子可操作连接的多核苷酸，所述多核苷酸编码本文提供的抗体或其片段、或其重链或轻链或其片段、或本文提供的单链抗体。在用于表达双链抗体的某些实施方案中，编码重链和轻链的载体可以在宿主细胞中共表达以表达整个免疫球蛋白分子，如下文所详述。
可以利用多种宿主表达载体系统表达本文提供的抗体分子(参见，例如美国专利US5,807,715)。这样的宿主表达系统代表这样的的运载体，通过其可以产生目的编码序列，并且所述编码序列随后可被纯化，但是也代表这样的细胞，当用合适的核苷酸编码序列转化或转染时，其可以原位表达本文提供的抗体分子。这些细胞包括但不限于微生物，诸如，用含有抗体编码序列的重组噬菌体DNA、质粒DNA或粘粒DNA表达载体转化的细菌(例如，大肠杆菌(E.coli)和枯草芽孢杆菌(B.subtilis))；用含有抗体编码序列的重组酵母表达载体转化的酵母菌(例如，毕赤酵母(Saccharomyces Pichia))；用含有抗体编码序列的重组病毒表达载体(例如杆状病毒)感染的昆虫细胞系统；用重组病毒表达载体(例如花椰菜花叶病毒CaMV、烟草花叶病毒TMV)感染或用含有抗体编码序列的重组质粒表达载体(例如Ti质粒)转化的植物细胞系统；或含重组表达构建体的哺乳动物细胞系统(例如COS、CHO、BHK、293、NSO和3T3细胞)，所述构建体含有源自哺乳动物细胞基因组(例如金属硫蛋白启动子)或源自哺乳动物病毒(例如晚期腺病毒；牛痘病毒7.5K启动子)的启动子。诸如大肠杆菌的细菌细胞，或真核细胞，尤其是用于表达完整重组抗体分子的那些，可以用于表达重组抗体分子。例如，哺乳动物细胞如中国仓鼠卵巢细胞(CHO)，当与载体(如来自人类巨细胞病毒的主要立早基因启动子元件)联用时，是一种有效的抗体表达系统(Foecking et al.,1986，Gene 45:101；和Cockett et al.,1990,Bio/Technology 8:2)。在一些实施方案中，本文提供的抗体在CHO细胞中产生。在特定的实施方案中，编码本文提供的与IL-36抗原免疫特异性结合的抗体的核苷酸序列的表达，由组成型启动子、诱导型启动子或组织特异性启动子调节。
在细菌系统中，多种表达载体可基于所表达的抗体分子的预期用途方便地进行选择。例如，当要生产大量这样的抗体，用于生产抗体分子的药物组合物时，指导表达易于纯化的高水平融合蛋白产物的载体可能是理想的。这样的载体包括但不限于：大肠杆菌表达载体pUR278(Ruther et al.,1983，EMBO 12：1791)，其中抗体编码序列可以独立连接至载体中以与lac Z编码区位于同一阅读框，从而产生融合蛋白；pIN载体(Inouye&Inouye，1985，Nucleic Acids Res.13:3101-3109；Van Heeke&Schuster，1989，J.Biol.Chem.24:5503-5509)等。pGEX载体也可用于表达外源多肽，作为与谷胱甘肽5-转移酶(GST)的融合蛋白。通常，这样的融合蛋白是可溶的，并且可以通过以下方法容易地从裂解的细胞中纯化：吸附并结合到基质谷胱甘肽琼脂糖珠上，然后在游离谷胱甘肽的存在下洗脱。设计pGEX以使其包含凝血酶或Xa因子蛋白酶切割位点，从而可以从GST部分释放克隆的靶标基因产物。
在昆虫系统中，苜蓿银纹夜蛾(Autographa californica)核多角体病毒(AcNPV)被用作表达外源基因的载体。所述病毒在草地贪夜蛾细胞(Spodoptera Frugiperda)中生长。可以将抗体编码序列单独克隆到病毒的非必要区域(例如多角体蛋白基因)中，并置于AcNPV启动子(例如多角体蛋白启动子)的控制下。
在哺乳动物宿主细胞中，可以利用多种基于病毒的表达系统。在将腺病毒用作表达载体的情况下，可以将目的抗体编码序列连接至腺病毒转录/翻译控制复合体，例如晚期启动子和三联体前导序列。然后可以通过体外或体内重组将所述嵌合基因插入腺病毒基因组。插入病毒基因组的非必需区域(例如，区域E1或E3)将产生重组病毒，所述重组病毒可存活并且能够在被感染的宿主中表达抗体分子(例如，参见Logan&Shenk，1984，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 8 1:355-359)。可能还需要特定的起始信号以便有效地翻译插入的抗体编码序列。这些信号包括ATG起始密码子和相邻序列。此外，起始密码子必须与所需编码序列的阅读框同相，以确保整个插入片段的翻译。这些外源翻译控制信号和起始密码子可以有多种来源，可以是天然和合成的。可以通过包含入适当的转录增强子元件、转录终止子等来增强表达的效率(参见，例如Bittner et al.,1987,Methods in Enzymol.153:51-544)。
另外，可以选择宿主细胞株，其调节插入序列的表达，或以所需的特定方式修饰和加工基因产物。蛋白产物的此类修饰(例如，糖基化)和加工(例如，切割)，对于蛋白的功能可能是重要的。对于蛋白和基因产物的翻译后加工和修饰，不同的宿主细胞具有各自的特性和特定机制。可以选择适当的细胞系或宿主系统，以确保表达的外源蛋白的正确修饰和加工。为此，可以使用具备正确处理初级转录本、糖基化以及磷酸化基因产物的细胞机制的真核宿主细胞。此类哺乳动物宿主细胞，包括但不限于：CHO、VERY、BHK、Hela、COS、MDCK、293、3T3、W138、BT483、Hs578T、HTB2、BT2O和T47D、NS0(不产生任何内源性免疫球蛋白链的鼠骨髓瘤细胞系)、CRL7O3O和HsS78Bst细胞。在一些实施方案中，本文提供的完全人单克隆抗体在哺乳动物细胞如CHO细胞中产生。
为了长期、高产量地生产重组蛋白，可以利用稳定表达。例如，可以将稳定表达抗体分子的细胞系工程化。不使用包含病毒性复制起点的表达载体，而可以用合适的表达控制元件(例如启动子、增强子、序列、转录终止子、聚腺苷酸化位点等)和选择性标志物控制的DNA来转化宿主细胞。导入外源DNA后，可以使工程化的细胞在富集培养基中生长1-2天，然后切换至选择性培养基。重组质粒中的选择性标志物赋予细胞对选择的抗性，并可使细胞将质粒稳定整合到其染色体中并生长成团，然后可以将其克隆并扩增成细胞系。使用所述方法可以有助于工程化表达抗体分子的细胞系。这样的工程化细胞系在筛选和评估与抗体分子直接或间接相互作用的组合物时可能尤其有用。
可以使用许多选择系统，包括但不限于可分别应用于tk-、hgprt-、或aprt-细胞的单纯疱疹病毒胸苷激酶(Wigler et al.,1977,Cell 11:223)、次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶(Szybalska&Szybalski，1992,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 48:202)和腺嘌呤磷酸核糖基转移酶(Fowy et al.,1980,Cell 22:8-17)基因。同样，抗代谢物抗性也可以用作以下基因的选择基础：dhfr，其赋予对氨甲蝶呤的抗性(Wigler et al.,1980,Natl.Acad.Sci.USA 77:357；O’Hare et al.,1981,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 78:1527)；gpt，其赋予对霉酚酸的抗性(Mulligan&Berg，1981，Pro.Natl.Acad.Sci.USA 78:2072)；neo，其赋予对氨基糖苷G-418的抗性(Wu and Wu,1991,Biotherapy 3:87-95；Tolstoshev,1993,Ann.Rev.Pharmacol.Toxicol.32:573-596；Mulligan，1993，Science 260:926-932；以及Morgan and Anderson,1993,Ann.Rev.Biochem.62:191-217；May,1993,TIB TECH 11(5):155-215)；以及hygro，其赋予对潮霉素的抗性(Santerre et al.,1984，Gene 30：147)。重组DNA技术领域中通常已知的方法，可以常规地用于选择所需的重组克隆，并且这些方法描述于，例如Ausubel et al.(eds.),Current Protocols in Molecular Biology,John Wiley&Sons,NY(1993)；Kriegler,Gene Transfer and Expression,A LaboratoryManual,Stockton Press,NY(1990)，以及Current Protocols in Human Genetics,Chapters 12-13,Dracopoli et al.(eds.),John Wiley&Sons,NY(1994)；Colberre-Garapin et al.,1981,J.Mol.Biol.150:1，其通过引用整体并入本文。
可以通过载体扩增来提高抗体分子的表达水平(有关综述，参见Bebbington andHentschel,The use of vectors based on gene amplification for the expressionof cloned genes in mammalian cells in DNA cloning,Vol.3,Academic Press,NewYork,1987)。当表达抗体的载体系统中标志物可扩增时，宿主细胞培养物中存在的抑制剂水平增加将增加标志物基因的拷贝数。由于扩增区域与抗体基因相关，因此抗体的产生也将增加(Crouse et al.,1983,Mol.Cell.Biol.3:257)。
宿主细胞可以与本文提供的两个表达载体共转染，编码重链来源的多肽的第一载体，以及编码轻链来源的多肽的第二载体。这两个载体可以包含相同的选择标志物，其使得重链和轻链多肽能够等量表达。或者，可以使用单个载体，其编码并且能够表达重链和轻链多肽。在这种情况下，应将轻链放在重链之前，以避免过量的无毒重链(Proudfoot,1986,Nature 322:52；and Kohler,1980,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 77:2197-2199)。重链和轻链的编码序列可以包含cDNA或基因组DNA。
一旦通过重组表达产生了本文提供的抗体分子，就可以通过本领域已知的用于纯化免疫球蛋白分子的任何方法进行纯化。例如，通过色谱法(例如离子交换；亲和力，尤其是通过对蛋白A后特定抗原的亲和力；和尺寸柱色谱法)、离心、差异溶解性、或通过其他任何蛋白纯化的标准技术。此外，本文提供的抗体可以与本文描述或本领域已知的异源多肽序列融合以促进纯化。
5.5药物组合物
一方面，本公开还提供了包含本公开的至少一种抗体或其抗原结合片段的药物组合物。在一些实施方案中，药物组合物包含治疗有效量的本文提供的抗体或其抗原结合片段和药学上可接受的赋形剂。
通过将具有所需纯度的融合蛋白与任选的生理学上可接受的赋形剂以水溶液或冻干或其他干燥形式混合，来制备用于储存的包含抗体或其抗原结合片段的药物组合物(参见，例如Remington,Remington’s Pharmaceutical Sciences,18th ed.1980)。
本公开的抗体或其抗原结合片段可以制成用于递送至靶细胞/组织的任何合适形式，例如，制成微胶囊或粗乳状液(Remington，同上，Park et al.,2005,Molecules 10:146-61；Malik et al.,2007,Curr.Drug.Deliv.4:141-51)，制成缓释制剂(Putney andBurke，1998，Nature Biotechnol.16：153-57)，或装入脂质体中(Maclean et al.,1997，Int.J.Oncol.11:325-32；Kontermann,2006,Curr.Opin.Mol.Ther.8:39-45)。
本文提供的抗体或其抗原结合片段也可以通过例如凝聚技术或通过界面聚合包埋在制备的微胶囊中，例如，在胶体药物递送系统(例如脂质体、白蛋白微球、微乳剂、纳米颗粒和纳米胶囊)中，或在粗乳状液中，分别为脱氧甲基纤维素或明胶微胶囊和聚(甲基丙烯酸甲酯)微胶囊。此类技术公开于例如上文Remington的文献中。
各种组合物和递送系统是已知的，并且可以与本文所述的抗体或其抗原结合片段一起使用，包括但不限于：封装在脂质体、微粒、微胶囊、能够表达抗体或其抗原结合片段的重组细胞、受体介导的内吞作用(参见例如Wu and Wu，1987,J.Biol.Chem.262:4429-32)，构建作为逆转录病毒或其他载体一部分的核酸等。在另一个实施方案中，可以将组合物以控释或缓释系统的方式进行提供。在一个实施方案中，可以使用泵来实现控释或缓释(参见，例如Langer，同上；Sefton，1987,Crit.Ref.Biomed.Eng.14:201-40；Buchwald et al.,1980,Surgery 88:507-16；以及Saudek et al.,1989,N.Engl.J.Med.321:569-74)。在另一个实施方案中，聚合材料可用于实现对预防性或治疗性制剂(例如，如本文所述的抗体或其抗原结合片段)的控释或缓释，或本文提供的组合物的控制或缓释(参见，例如Medical Applications of Controlled Release,Langer and Wise eds.,1974；Controlled Drug Bioavailability,Drug Product Design and Performance,Smolen and Ball eds.,1984；Ranger and Peppas,1983,J.Macromol.Sci.Rev.Macromol.Chem.23:61-126；Levyet al.,1985,Science 228:190-92；During et al.,1989,Ann.Neurol.25:351-56；Howardet al.,1989,J.Neurosurg.71:105-12；美国专利US5,679,377、US5,916,597、US5,912,015、US5,989,463和US5,128,326；PCT公开WO99/15154和WO99/20253)。用于缓释制剂的聚合物实例，包括但不限于：聚(甲基丙烯酸-2-羟基乙酯)、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(丙烯酸)、聚(乙烯-乙酸乙烯酯)、聚(甲基丙烯酸)、聚乙交酯(PLG)、聚酸酐、聚(N-乙烯基吡咯烷酮)、聚(乙烯醇)、聚丙烯酰胺、聚(乙二醇)、聚丙交酯(PLA)、聚(丙交酯-共-乙交酯)(PLGA)和聚原酸酯。在一个实施方案中，用于缓释制剂的聚合物是惰性的、不含可浸出的杂质、在储存时稳定、无菌且可生物降解的。
在又一个实施方案中，可将控释或缓释系统置于特定靶组织例如鼻道或肺部附近，因此仅需要全身剂量的一小部分(参见例如Goodson,Medical Applications ofControlled Release Vol.2,115-38(1984))。控释系统讨论于，例如Langer,1990,Science249:1527-33。可以使用本领域技术人员已知的任何技术，来产生包含一种或多种本文所述的抗体或其抗原结合片段的缓释制剂(参见，例如美国专利US4,526,938、PCT公开WO91/05548和WO96/20698，Ning et al.,1996，Radiotherapy&Oncology 39：179-89；WO91/05548和WO96/20698；Ning et al.,1996.Radiotherapy&Oncology 39:179-89；Song et al.,1995,PDA J.of Pharma.Sci.&Tech.50:372-97；Cleek et al.,1997,Pro.Int’l.Symp.Control.Rel.Bioact.Mater.24:853-54；以及Lam et al.,1997,Proc.Int’l.Symp.ControlRel.Bioact.Mater.24:759-60)。
5.6抗体和药物组合物的使用方法
在一个方面，本文提供一种减弱IL-36α和/或IL-36γ对细胞的活性的方法，其包括将细胞暴露于有效量的本文提供的抗体或其抗原结合片段。
在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ活性减弱至少约10％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ活性减弱至少约20％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ活性减弱至少约30％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ活性减弱至少约40％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ活性减弱至少约50％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ活性减弱至少约60％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ活性减弱至少约70％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ活性减弱至少约80％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ活性减弱至少约90％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ活性减弱至少约95％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以使IL-36α和/或IL-36γ活性减弱(例如，部分减弱)至少约15％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以使IL-36α和/或IL-36γ活性减弱(例如，部分减弱)至少约20％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以使IL-36α和/或IL-36γ活性减弱(例如，部分减弱)至少约30％至约65％。
IL-36α和/或IL-36γ活性的非限制性实例，是IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导。因此，在某些实施方案中，本文提供了减弱(例如部分减弱)细胞中IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导的方法，其包括使细胞暴露于有效量的本文提供的抗体或其抗原结合片段。
在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱至少约10％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱至少约20％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱至少约30％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱至少约40％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱至少约50％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱至少约60％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱至少约70％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱至少约80％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱至少约90％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱至少约95％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以使IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱(例如，部分减弱)至少约15％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以使IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱(例如部分减弱)至少约20％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以使IL-36α和/或IL-36γ介导的信号转导减弱(例如，部分减弱)至少约30％至约65％。
IL-36α和/或IL-36γ活性的另一个非限制性实例，是结合IL-36受体。因此，在某些实施方案中，本文提供了减弱(例如，部分减弱)IL-36α和/或IL-36γ与细胞上IL-36受体结合的方法，包括使细胞暴露于有效量的本文提供的抗体或其抗原结合片段。
在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约10％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约20％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约30％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约40％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约50％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约60％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约70％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约80％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约90％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱至少约95％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以使IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱(例如部分减弱)至少约15％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以使IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱(例如部分减弱)至少约20％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可使IL-36α和/或IL-36γ与IL-36受体的结合减弱(例如部分减弱)至少约30％至约65％。
IL-36α和/或IL-36γ活性的另一个非限制性实例，是由IL-36受体介导的信号转导。因此，在某些实施方案中，本文提供了减弱(例如，部分减弱)IL-36受体介导的细胞内信号转导的方法，其包括将细胞暴露于有效量的本文提供的抗体或其抗原结合片段。
在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体介导的信号转导减弱至少约10％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约20％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导至少约30％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体介导的信号转导减弱至少约40％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导至少约50％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约60％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体介导的信号转导减弱至少约70％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约80％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约90％。在一些实施方案中，本文提供的抗体将IL-36受体介导的信号转导减弱至少约95％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以使IL-36受体介导的信号转导减弱(例如，部分减弱)至少约15％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以使IL-36受体介导的信号转导减弱(例如，部分减弱)至少约20％至约65％。在某些实施方案中，本文所述的抗体可以使IL-36受体介导的信号转导减弱(例如，部分减弱)至少约30％至约65％。
IL-36α和/或IL-36γ活性的另一个非限制性实例，与IL-36诱导的细胞因子和/或趋化因子的水平有关。在一些实施方案中，一种或多种细胞因子和/或趋化因子选自：IL-8、IL-6、IL-10、TNFα、IL-1β、CXCL1、CCL5、CCL20、CCL2、CCL3、CCL4、CXCL12、VEGF-A、IL-23、IL-36α、IL-36β和IL-36γ。
在一个实施方案中，所述IL-36α和/或IL-36γ活性与IL-8的分泌有关。因此，在某些实施方案中，本文提供抑制细胞中IL-8分泌的方法，包括将细胞暴露于有效量的本文提供的抗体或其抗原结合片段。
在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约5％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约10％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约15％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约20％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约25％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约30％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约35％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约40％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约45％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约50％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约55％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约60％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约65％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约70％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约75％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约80％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约85％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约90％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约95％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约96％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约97％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约98％。在一个实施方案中，本文提供的抗体将IL-8的分泌抑制至少约99％。
在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约100nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约90nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约80nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约70nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约60nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约50nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约40nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约30nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约20nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约10nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约1nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约0.1nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约0.05nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至多约0.001nM的IC50抑制IL-8的分泌。
在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约100nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约90nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约80nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约70nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约60nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约50nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约40nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约30nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约20nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约10nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约1nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约0.1nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约0.05nM的IC50抑制IL-8的分泌。在一个实施方案中，本文提供的抗体以至少约0.001nM的IC50抑制IL-8的分泌。在特定的实施方案中，通过本文所述的方法，例如在下文第6节中的方法，评估IC50。在其他实施方案中，通过本领域技术人员已知的其他方法评估IC50。
IL-36α和/或IL-36γ活性的又一个非限制性实例，与IL-36受体二聚化(即，IL-36R和IL-1RAcP之间的异二聚化)有关。因此，在某些实施方案中，本文提供了减弱细胞中IL-36受体二聚化的方法，其包括将所述细胞暴露于有效量的本文提供的抗体或其抗原结合片段。
在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体二聚化减弱至少约10％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体二聚化减弱至少约15％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体二聚化减弱至少约20％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体二聚化减弱至少约25％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体二聚化减弱至少约30％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体二聚化减弱至少约35％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体二聚化减弱至少约40％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体二聚化减弱至少约45％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体二聚化减弱至少约50％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体二聚化减弱至少约55％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体二聚化减弱至少约60％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体二聚化减弱至少约65％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体二聚化减弱至少约70％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体二聚化减弱至少约75％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体二聚化减弱至少约80％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体二聚化减弱至少约85％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体二聚化减弱至少约90％。在一些实施方案中，本文提供的抗体使IL-36受体二聚化减弱至少约95％。
IL-36α和/或IL-36γ活性的另一个非限制性实例，与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的激活和/或核因子κB(NF-κB)依赖性转录有关。因此，在某些实施方案中，本文提供了减弱细胞中MAPK通路的激活和/或NF-κB依赖性转录的方法，其包括将细胞暴露于有效量的本文提供的抗体或其抗原结合片段。
在某些实施方案中，本文提供的抗体使MAPK通路的激活和/或NF-κB依赖性转录减弱至少约10％。在某些实施方案中，本文提供的抗体使MAPK通路的激活和/或NF-κB依赖性转录减弱至少约15％。在某些实施方案中，本文提供的抗体使MAPK通路的激活和/或NF-κB依赖性转录减弱至少约20％。在某些实施方案中，本文提供的抗体使MAPK通路的激活和/或NF-κB依赖性转录减弱至少约25％。在某些实施方案中，本文提供的抗体使MAPK通路的激活和/或NF-κB依赖性转录减弱至少约30％。在某些实施方案中，本文提供的抗体使MAPK通路的激活和/或NF-κB依赖性转录减弱至少约35％。在某些实施方案中，本文提供的抗体使MAPK通路的激活和/或NF-κB依赖性转录减弱至少约40％。在某些实施方案中，本文提供的抗体使MAPK通路的激活和/或NF-κB依赖性转录减弱至少约45％。在某些实施方案中，本文提供的抗体使MAPK通路的激活和/或NF-κB依赖性转录减弱至少约50％。在某些实施方案中，本文提供的抗体使MAPK通路的激活和/或NF-κB依赖性转录减弱至少约60％。在某些实施方案中，本文提供的抗体使MAPK通路的激活和/或NF-κB依赖性转录减弱至少约65％。在某些实施方案中，本文提供的抗体使MAPK通路的激活和/或NF-κB依赖性转录减弱至少约70％。在某些实施方案中，本文提供的抗体使MAPK通路的激活和/或NF-κB依赖性转录减弱至少约75％。在某些实施方案中，本文提供的抗体使MAPK通路的激活和/或NF-κB依赖性转录减弱至少约80％。在某些实施方案中，本文提供的抗体使MAPK通路的激活和/或NF-κB依赖性转录减弱至少约85％。在某些实施方案中，本文提供的抗体使MAPK通路的激活和/或NF-κB依赖性转录减弱至少约90％。在某些实施方案中，本文提供的抗体使MAPK通路的激活和/或NF-κB依赖性转录减弱至少约95％。
在另一方面，本文提供了一种治疗受试者的疾病或病症的方法，其包括向受试者施用有效量的本文提供的抗体或其抗原结合片段。在一个实施方案中，所述疾病或病症是IL-36介导的疾病或病症。在一个实施方案中，所述疾病或病症是IL-36受体介导的疾病或病症。在一些实施方案中，所述疾病或病症与皮肤、肠和/或肺组织有关。本文还提供了治疗疾病或病症的方法，其中向受试者施用一种或多种治疗剂以及本文提供的抗体或其抗原结合片段。施用和给药方法在下文5.7节中有更详细的描述。
在另一方面，本文提供了本文提供的抗体或其抗原结合片段在制备治疗受试者的疾病或病症的药物中的用途。
在另一方面，本文提供了本文提供的药物组合物在制备治疗受试者的疾病或病症的药物中的用途。
在另一方面，本文提供了本文提供的抗体或其抗原结合片段在制备药物中的用途，其中所述药物被用于检测生物样品中IL-36蛋白(例如IL-36a和/或IL-36γ)的存在的方法；所述方法包括在允许抗体与IL-36蛋白结合的条件下使生物样品与抗体接触，并检测抗体和IL-36蛋白之间是否形成复合物。
在其他方面，本公开的抗体及其片段可用于检测生物样品中IL-36蛋白(例如，IL-36α和/或IL-36γ)的存在。如本文所用，术语“检测”涵盖定量或定性检测。在某些实施方案中，生物样品包含体液、细胞或组织。诊断测定和方法详细描述于下文第5.9节中。
5.7施用和给药方法
在一个特定的实施方案中，本文提供了用于预防和/或治疗疾病或病况的组合物，其包含本文提供的抗体或其抗原结合片段。在一个实施方案中，本文提供了用于预防疾病或病况的组合物，其中所述组合物包含本文提供的抗体或其抗原结合片段。在一个实施方案中，本文提供了用于治疗疾病或病况的组合物，其中所述组合物包含本文提供的抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，所述疾病或病况是IL-36介导的疾病。在一些实施方案中，所述疾病或病症是IL-36介导的疾病。在一些实施方案中，所述疾病或病况与皮肤、肠和/或肺组织有关。在某些实施方案中，所述受试者是有此需要的受试者。在一些实施方案中，所述受试者患有所述疾病或病况。在其他实施方案中，所述受试者处于罹患所述疾病或病况的风险中。在一些实施方案中，所述施用导致所述疾病或病况的预防、管控、治疗或改善。
在一个实施方案中，本文提供用于预防和/或治疗疾病或病况的症状的组合物，其中所述组合物包含本文提供的抗体或其抗原结合片段。在一个实施方案中，本文提供了用于预防疾病或病况的症状的组合物，其中所述组合物包含本文提供的抗体或其抗原结合片段。在一个实施方案中，本文提供了用于治疗疾病或病况的症状的组合物，其中所述组合物包含本文提供的抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，所述疾病或病况是IL-36介导的疾病。在一个实施方案中，所述疾病与皮肤、肠和/或肺组织有关。在某些实施方案中，所述受试者是有此需要的受试者。在一些实施方案中，所述受试者患有所述疾病或病况。在其他实施方案中，所述受试者处于罹患所述疾病或病况的风险中。在一些实施方案中，所述施用导致疾病或病况的症状的预防或治疗。
在另一个实施方案中，本文提供了预防和/或治疗受试者的疾病或病况的方法，其包括施用有效量的本文提供的抗体或其抗原结合片段。在一个实施方案中，本文提供了一种预防受试者的疾病或病况的方法，其包括施用有效量的本文提供的抗体或其抗原结合片段。在一个实施方案中，本文提供了一种治疗受试者的疾病或病况的方法，其包括施用有效量的本文提供的抗体或其抗原结合片段。
在一些实施方案中，所述疾病或病症是由IL-36α和/或IL-36γ介导的疾病或病症。在一些实施方案中，所述疾病或病症是炎性的自身免疫性疾病或病症。在一些实施方案中，所述炎性自身免疫疾病或病症与皮肤组织、肠组织和/或肺组织有关。在一些实施方案中，所述疾病或病症选自：
泛发性脓疱性牛皮癣、掌跖脓疱病、掌跖脓疱性牛皮癣、盘状红斑狼疮、红斑狼疮、特应性皮炎、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、哮喘、炎性肠病、寻常型牛皮癣、哈洛波(Hallopeau)持续性肢端皮炎、急性泛发性发疹性脓疱病、化脓性汗腺炎、扁平苔藓、干燥综合征、类风湿性关节炎、银屑病性关节炎、慢性鼻窦炎、寻常痤疮、疱疹样脓疱病、坏疽性脓皮病和多形性日光疹。在一些实施方案中，所述疾病或病况是IL-36受体介导的疾病。在某些实施方案中，所述受试者是有此需要的受试者。在一些实施方案中，所述受试者患有所述疾病或病况。在其他实施方案中，所述受试者处于罹患所述疾病或病况的风险中。在一些实施方案中，所述施用导致疾病或病况的预防或治疗。
在另一个实施方案中，本文提供了预防和/或治疗受试者的疾病或病况的症状的方法，其包括施用有效量的本文提供的抗体或其抗原结合片段。在一个实施方案中，本文提供了一种预防受试者的疾病或病况的症状的方法，其包括施用有效量的本文提供的抗体或其抗原结合片段。在一个实施方案中，本文提供了一种治疗受试者的疾病或病况的症状的方法，其包括施用有效量的本文提供的抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，所述疾病或病况是IL-36介导的疾病。在一个实施方案中，所述疾病或病况与皮肤、肠和/或肺组织有关。在某些实施方案中，所述受试者是有此需要的受试者。在一些实施方案中，受试者患有疾病或病况。在其他实施方案中，所述受试者处于罹患所述疾病或病况的风险中。在一些实施方案中，所述施用导致所述疾病或病况的症状的预防或治疗。
本文还提供了通过向受试者施用有效量的本文提供的抗体或其抗原结合片段或包含本文提供的抗体或其抗原结合片段的药物组合物来预防和/或治疗疾病或病况的方法。一方面，所述抗体或其抗原结合片段是基本上经纯化的(即，基本上不含限制其作用或产生不良副作用的物质)。接受治疗的受试者可以是哺乳动物，如非灵长类动物(例如，牛、猪、马、猫、狗、大鼠等)或灵长类动物(例如，猴子如食蟹猕猴，或人类)。在一个实施方案中，所述受试者是人。在另一个实施方案中，所述受试者是患有疾病或病况的人。
各种递送系统是已知的，并且可以用于施用预防剂或治疗剂(例如，本文提供的抗体或其抗原结合片段)，包括但不限于：在脂质体、微粒、微胶囊中的封装；能够表达所述抗体或其抗原结合片段的重组细胞；受体介导的内吞作用(参见，例如Wu and Wu，J.Biol.Chem.262:4429-4432,1987)；作为逆转录病毒或其他载体一部分的核酸构建等。施用预防或治疗剂(例如，本文提供的抗体或其抗原结合片段)或药物组合物的方法，包括但不限于：肠胃外施用(例如，皮内、肌肉内、腹膜内、静脉内和皮下)、硬膜外和粘膜(例如鼻内和口腔途径)。在特定的实施方案中，预防或治疗剂(例如，本文提供的抗体或其抗原结合片段)或药物组合物是经鼻内、肌内、静脉内或皮下施用的。所述预防剂或治疗剂或组合物可以通过任何方便的途径施用，例如通过输液或团注，通过上皮或粘膜皮肤层(例如，口腔粘膜、鼻内粘膜、直肠和肠粘膜等)吸收，并且可以与其他生物活性剂一起施用。可以全身或局部施用。另外，还可以通过例如使用吸入器或雾化器以及与雾化剂一起配制来进行肺部施用。参见，例如美国专利US6,019,968、US5,985,320、US5,985,309、US5,934,272、US5,874,064、US5,855,913、US5,290,540和US4,880,078；以及PCT公开WO92/19244、WO97/32572、WO97/44013、WO98/31346和WO99/66903，其各自通过引用整体并入本文。
在一个特定的实施方案中，可能需要向需要治疗的区域局部施用本文所提供的预防剂或治疗剂或药物组合物。这可以通过例如但不限于以下方式来实现：局部输注，通过局部施用(例如通过鼻内喷雾)、通过注射或通过植入物，所述植入物是渗透性的、非渗透性的、或凝胶状材料，其包括膜如硅胶膜或纤维。在一些实施方案中，当施用本文提供的抗体或其抗原结合片段时，必须注意使用所述抗体或其抗原结合片段不吸收的材料。
在另一个实施方案中，本文提供的预防或治疗剂或组合物可以经囊泡，尤其是脂质体递送(参见Langer，1990，Science249:1527-1533；Treat et al.,in Liposomes inthe Therapy of Infectious Disease and Cancer,Lopez-Berestein和Fidler(eds.),Liss,New York,pp.353-365(1989)；Lopez-Berestein,同前所述，pp.317-327；参阅同上)。
在另一个实施方案中，本文提供的预防或治疗剂或组合物可以通过控释或缓释系统递送。在一个实施方案中，可以使用泵来实现控释或缓释(参见Langer，同上；Sefton,1987,CRC Crit.Ref.Biomed.Eng.14:20；Buchwald et al.,1980,Surgery 88:507；Saudeket al.,1989,N.Engl.J.Med.321:574)。在另一个实施方案中，可以使用聚合材料实现对预防剂或治疗剂(例如，本文提供的抗体)或本文提供的组合物的控释或缓释(参见例如，Medical Applications of Controlled Release,Langer和Wise(eds.),CRC Pres.,BocaRaton,Florida(1974)；Controlled Drug Bioavailability,Drug Product Design andPerformance,Smolen and Ball(eds.),Wiley,New York(1984)；Ranger and Peppas,1983,J.,Macromol.Sci.Rev.Macromol.Chem.23:61；又见Levy et al.,1985,Science228:190；During et al.,1989,Ann.Neurol.25:351；Howard et al.,1989,J.Neurosurg.71:105)；美国专利US5,679,377；美国专利US5,916,597；美国专利US5,912,015；美国专利US5,989,463；美国专利US5,128,326；PCT公开WO99/15154和PCT公开WO99/20253。用于缓释制剂的聚合物实例，包括但不限于：聚(甲基丙烯酸-2-羟基乙酯)、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(丙烯酸)、聚(乙烯-乙酸乙烯酯)、聚(甲基丙烯酸)、聚乙交酯(PLG)、聚酸酐、聚(N-乙烯基吡咯烷酮)、聚(乙烯醇)、聚丙烯酰胺、聚(乙二醇)、聚丙交酯(PLA)、聚(丙交酯-共-乙交酯)(PLGA)和聚原酸酯。在一个实施方案中，所述用于缓释制剂的聚合物是惰性的、不含可浸出的杂质、在储存时稳定、无菌且可生物降解的。在又一个实施方案中，可将控释或缓释系统置于治疗的靶组织，即鼻道或肺部附近；这样，则仅需要全身剂量的一小部分(参见，例如Goodson,in Medical Applications of Controlled Release，同上,vol.2,pp.115-138(1984))。Langer的综述(1990,Science 249:1527-1533)讨论了控释系统。可以使用本领域技术人员已知的任何技术，来产生包含一种或多种本文所述的抗体或其抗原结合片段的缓释制剂。参见，例如美国专利US4,526,938、PCT公开WO91/05548和WO96/20698；Ning etal.,1996，Radiotherapy&Oncology 39:179-89；WO91/05548和WO96/20698；Ning et al.,1996，“Intratumoral Radioimmunotherapy of a Human Colon Cancer Xenograft Usinga Sustained-Release Gel,”Radiotherapy&Oncology 39:179-189；Song et al.,1995,“Antibody Mediated Lung Targeting of Long-Circulating Emulsions,”PDA Journalof Pharmaceutical Science&Technology 50:372-397；Cleek et al.,1997,“Biodegradable Polymeric Carriers for a bFGF Antibody for CardiovascularApplication,”Pro.Int’l.Symp.Control.Rel.Bioact.Mater.24:853-854；以及Lam etal.,1997,“Microencapsulation of Recombinant Humanized Monoclonal Antibody forLocal Delivery,”Proc.Int’l.Symp.Control Rel.Bioact.Mater.24:759-760，其各自通过引用整体并入本文。
在一个特定的实施方案中，当本文提供的组合物是编码预防剂或治疗剂(例如本文提供的抗体或其抗原结合片段)的核酸时，可以体内施用核酸以促进其编码的预防剂或治疗剂的表达，通过将其构建为合适的核酸表达载体的一部分，并以使其进入细胞内的方式施用，例如通过使用逆转录病毒载体(参见美国专利US4,980,286)，或通过直接注射，或通过使用微粒轰击(例如基因枪；Biolistic，Dupont)，或用脂质或细胞表面受体或转染试剂包被，或通过与已知进入细胞核的同源异型盒(homeobox)样肽连接施用(参见，例如Joliot et al.,1991，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 88:1864-1868)等。或者，可将核酸导入细胞内且并入宿主细胞DNA中以通过同源重组表达。
在一个特定的实施方案中，本文提供的组合物包含本文提供的一种、两种或更多种抗体或其抗原结合片段。在另一个实施方案中，本文提供的组合物包含一种、两种或更多种本文提供的抗体或其抗原结合片段，以及除本文提供的抗体或其抗原结合片段以外的预防剂或治疗剂。在一个实施方案中，已知所述试剂可用于或已经或正在用于预防、管控、治疗和/或改善疾病或病况。除预防剂或治疗剂外，本文提供的组合物还可包含赋形剂。
本文提供的组合物包括可用于制造药物组合物(例如，适于向受试者或患者施用的组合物)的原料药(bulk drug)组合物，所述药物组合物可用于制备单位剂型。在一个实施方案中，本文提供的组合物是药物组合物。此类组合物包含预防或治疗有效量的一种或多种预防或治疗剂(例如，本文提供的抗体或其抗原结合片段或其他预防或治疗剂)和药学上可接受的赋形剂。可以制备药物组合物以适合于受试者施用途径。
在一个特定的实施方案中，术语“赋形剂”也可以指稀释剂、佐剂(例如(完全或不完全)弗氏(Freunds)佐剂或溶剂。药物赋形剂可以是无菌液体如水和油，包括石油、动物、植物或合成来源的油，诸如花生油、豆油、矿物油、芝麻油等。当药物组合物静脉内施用时，水是示例性赋形剂。盐溶液以及葡萄糖水溶液和甘油溶液也可以用作液体赋形剂，尤其是用于注射溶液。合适的药物赋形剂包括：淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、大米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸钠、甘油单硬脂酸酯、滑石粉、氯化钠、脱脂乳粉、甘油、丙烯、乙二醇、水、乙醇等。如果需要，所述组合物还可包含少量的湿润剂或乳化剂或pH缓冲剂。这些组合物可以采取以下形式：溶液剂、混悬剂、乳状剂、片剂、丸剂、胶囊剂、散剂、缓释剂等。口服制剂可包括标准赋形剂，如药用级的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁等。合适的药物赋形剂的实例，描述于Remington’s Pharmaceutical Sciences(1990)MackPublishing Co.,Easton,PA。这样的组合物将含有预防或治疗有效量的本文提供的(如纯化形式的)抗体或其抗原结合片段，以及适量的赋形剂，以提供用于适当施用于患者的形式。所述制剂应与施用模式相适应。
在一个实施方案中，根据常规程序将所述组合物配制成适于对人进行静脉内施用的药物组合物。通常，用于静脉内施用的组合物是在无菌等渗水性缓冲液中的溶液。必要时，所述组合物还可包含增溶剂和诸如利多卡因的局部麻醉剂，以减轻注射部位的疼痛。然而，此类组合物可以通过静脉以外的途径施用。
通常，本文提供的组合物的成分以分开的或以混合的单位剂型的形式提供，例如制成干燥的冻干粉或无水浓缩物，装在气密容器如安瓿或小药囊中并指示活性剂的量。当组合物要通过输注施用时，其可被分配至含有无菌药物级水或盐水的输液瓶中。当通过注射施用组合物时，则可以提供一安瓿瓶无菌注射用水或盐水，以便可以在施用之前将成分混合。
本文提供的抗体或其抗原结合片段可以包装在气密容器如指示抗体量的安瓿或小药囊中。在一个实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段以装在气密容器中的干燥无菌冻干粉末或无水浓缩物的形式提供，并且可以例如用水或盐水重构为合适的浓度以施用于受试者。重构后，所述冻干的抗体或其抗原结合片段可以在其原始容器中储存于2-8℃，并且所述抗体或其抗原结合片段可以在12小时内如6小时内、5小时内、3小时内、或1小时内施用。在可选的实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段以液体形式提供，装于指示抗体的量和浓度的气密容器中。
本文提供的组合物可以配制成中性或盐的形式。药学上可接受的盐包括：与阴离子形成的盐如衍生自盐酸、磷酸、乙酸、草酸、酒石酸等的阴离子，以及与阳离子形成的盐如衍生自钠、钾、铵、钙、氢氧化铁、异丙胺、三乙胺、2-乙基氨基乙醇、组氨酸、普鲁卡因等的阳离子。
可以通过标准临床技术，确定在预防和/或治疗疾病中有效的预防或治疗剂(例如，本文提供的抗体或其抗原结合片段)或本文提供的组合物的量。此外，可任选地采用体外测定法以帮助鉴定最佳剂量范围。制剂中使用的确切剂量还取决于给药途径，以及疾病或病况的严重性，并且应根据执业医生的判断和每个患者的情况来决定。
有效剂量可以从源自体外或动物模型测试系统的剂量反应曲线中推断出来。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段给药至患者的施用途径是鼻内、肌内、静脉内或其组合，但是本文所述的其他途径也是可接受的。每次给药可以或可以不通过相同的施用途径来施用。在一些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段可以经由多种施用途径与本文提供的相同或不同抗体或其抗原结合片段的其他给药同时或相继施用。
在某些实施方案中，本文提供的抗体或其抗原结合片段被预防性或治疗性地施用于受试者。本文提供的抗体或其抗原结合片段可以被预防性或治疗性地施用于受试者，以预防、减轻或改善疾病或其症状。
5.8基因疗法
在一个特定的实施方案中，将包含编码抗体或其功能衍生物的序列的核酸施用于受试者以用于本文提供的方法，例如，以通过基因疗法预防、管控、治疗和/或改善IL-36介导的疾病、病症或病况。此类疗法包括由向受试者施用表达的或可表达的核酸。在一个实施方案中，所述核酸产生其编码的抗体，并且所述抗体介导预防或治疗作用。
可以使用本领域中可得的用于重组基因表达(或基因疗法)的任何方法。
对于基因治疗方法的一般综述，参见Goldspiel et al.,1993,ClinicalPharmacy 12:488-505；Wu and Wu,1991,Biotherapy 3:87-95；Tolstoshev,1993,Ann.Rev.Pharmacol.Toxicol.32:573-596；Mulligan,1993,Science 260:926-932；以及Morgan and Anderson,1993,Ann.Rev.Biochem.62:191-217；May,1993,TIBTECH 11(5):155-215。可以使用的重组DNA技术领域中公知的方法，描述于Ausubel et al.(eds.),Current Protocols in Molecular Biology,John Wiley&Sons,NY(1993)；以及Kriegler,Gene Transfer and Expression,A Laboratory Manual,Stockton Press,NY(1990)。
在一个特定的实施方案中，组合物包含编码本文提供的抗体的核酸，所述核酸是在合适的宿主中表达抗体或嵌合蛋白或其重链或轻链的表达载体的一部分。特别地，此类核酸具有可操作地连接至抗体编码区的启动子如异源启动子，所述启动子是可诱导的或组成性的，并且任选地是组织特异性的。在另一个特定的实施方案中，使用这样的核酸分子，其中抗体编码序列和任何其他所需序列的两侧是促进基因组中在所需位点进行同源重组的区域，从而提供了编码抗体的核酸的染色体内表达(Koller and Smithies,1989,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 86:8932-8935；Zijlstra et al.,1989,Nature 342:435-438)。在一些实施方案中，表达的抗体分子是单链抗体；或者，所述核酸序列包括编码所述抗体的重链或轻链或其片段的序列。
可以将核酸直接递送至受试者，在这种情况下，受试者直接暴露于核酸或载有核酸的载体，或者，间接递送至受试者，在这种情况下，首先在体外将细胞用核酸转化，然后移植到受试者中。这两种方法分别称为体内或体外基因疗法。
在一个特定的实施方案中，将核酸序列直接体内施用，所述序列被表达以产生编码产物。这可以通过本领域已知的许多方法中的任一种来完成，例如，通过将它们构建为适当的核酸表达载体的一部分，并施用所述载体，使得所述序列进入细胞内，例如，通过使用有缺陷的或减毒的逆转录病毒或其他病毒载体进行感染(参见US美国专利4,980,286)，或通过直接注射裸DNA，或通过使用微粒轰击(例如基因枪；Biolistic，Dupont)，或用脂质或细胞表面受体或转染剂包被，封装于脂质体、微粒或微胶囊中，或与已知进入细胞核的肽连接施用，与受体介导的内吞作用的配体连接施用(参见，例如Wu and Wu，1987,J.Biol.Chem.262:4429-4432)(其可用于靶向特异性表达受体的细胞类型)等。在另一个实施方案中，可以形成核酸-配体复合物，其中所述配体包含基因融合病毒肽以破坏核内体，从而使核酸可避免溶酶体降解。在又一个实施方案中，可以通过靶向特异性受体，使该核酸在体内靶向性地被细胞特异性摄取和表达(参见，例如PCT公开WO92/06180；WO92/22635；WO92/20316；WO93/14188和WO93/20221)。或者，可以通过同源重组将核酸导入细胞内，并将其并入宿主细胞DNA中以进行表达(Koller and Smithies，1989,Proc.Natl.Acad.Sci.USA86:8932-8935；以及Zijlstra et al.,1989,Nature 342:435-438)。
在一个特定的实施方案中，使用了包含编码抗体的核酸序列的病毒载体。例如，可以使用逆转录病毒载体(参见Miller et al.,1993,Meth.Enzymol.217:581-599)。这些逆转录病毒载体包含正确包装病毒基因组并将其整合入宿主细胞DNA所需的组分。可以将用于基因疗法的编码抗体的核酸序列克隆到一种或多种载体中，其有利于将基因递送至受试者。关于逆转录病毒载体的更多细节，可以参见Boesen et al.,1994，Biotherapy 6:291-302，其描述了使用逆转录病毒载体将mdr 1基因递送至造血干细胞，以提升干细胞对化学疗法的耐受力。阐释逆转录病毒载体在基因治疗中的用途的其他参考文献有：Clowes etal.,1994,J.Clin.Invest.93:644-651；Klein et al.,1994,Blood 83:1467-1473；Salmons and Gunzberg,1993,Human Gene Therapy 4:129-141；以及Grossman andWilson,1993,Curr.Opin.in Genetics and Devel.3:110-114。
腺病毒是可用于重组生产抗体的其他病毒载体。对于将基因递送至呼吸道上皮细胞中，腺病毒是特别有吸引力的载体。腺病毒自然地感染呼吸道上皮，在其中引起轻度疾病。基于腺病毒的递送系统的其他靶标有肝脏、中枢神经系统、内皮细胞和肌肉。腺病毒具有能够感染非分裂细胞的优势。基于腺病毒的基因疗法的综述，参见Kozarsky andWilson,Current Opinion in Genetics and Development 3:499-503。Bout et al.,1994,Human Gene Therapy5:3-10，证实了用腺病毒载体将基因转移到恒河猴呼吸道上皮的用途。在基因治疗中使用腺病毒的其他实例，可参见Rosenfeld et al.,1991,Science252:431-434；Rosenfeld et al.,1992,Cell 68:143-155；Mastrangeli et al.,1993,J.Clin.Invest.91:225-234；PCT公开WO94/12649；以及Wang et al.,1995,Gene Therapy2:775-783。在特定的实施方案中，使用腺病毒载体。
也可以使用腺相关病毒(AAV)(Walsh et al.,1993,Proc.Soc.Exp.Biol.Med.204:289-300；以及美国专利US5,436,146)。在一个特定的实施方案中，AAV载体用于表达本文提供的抗IL-36抗体。在某些实施方案中，AAV包含编码VH结构域的核酸。在另一些实施方案中，AAV包含编码VL结构域的核酸。在某些实施方案中，AAV包含编码VH结构域和VL结构域的核酸。在本文提供的方法的一些实施方案中，向受试者施用包含编码VH结构域的核酸的AAV和包含编码VL结构域的核酸的AAV。在其他实施方案中，向受试者施用包含编码VH结构域和VL结构域的核酸的AAV。在某些实施方案中，VH和VL结构域过表达。
基因疗法的另一种方法，涉及通过诸如电穿孔、脂质转染、磷酸钙介导的转染或病毒感染的方法，将基因转移至组织培养物中的细胞。通常，转移方法包括将选择性标记转移至细胞。然后对细胞进行选择以分离已摄取并表达被转移基因的那些细胞。然后将那些细胞递送给受试者。
在该实施方案中，将核酸导入细胞，然后在体内施用所获得的重组细胞。可以通过本领域已知的任何方法进行这种导入，包括但不限于：转染、电穿孔、显微注射、用含有核酸序列的病毒或噬菌体载体感染、细胞融合、染色体介导的基因转移、微细胞介导的基因转移、原生质球融合等。用于将外源基因导入细胞的许多技术在本领域中是已知的(参见，例如Loeffler and Behr,1993,Meth.Enzymol.217:599-618；Cohen et al.,1993,Meth.Enzymol.217:618-644；Clin.Pharma.Ther.29:69-92(1985))，并且可以根据本文提供的方法使用，条件是不破坏受体细胞的必要发育和生理功能。所述技术应提供核酸向细胞的稳定转移，以使核酸可被细胞表达，诸如可遗传且可被其细胞后代表达。
所得重组细胞可以通过本领域已知的各种方法递送至受试者。重组血细胞(例如造血干细胞或祖细胞)可以静脉内施用。预期使用的细胞数量取决于所需的效果、患者状态等，并且可以由本领域技术人员确定。
为了基因治疗的目的而将核酸导入其中的细胞，涵盖任何所需的可用细胞类型，包括但不限于：上皮细胞、内皮细胞、角质形成细胞、成纤维细胞、肌肉细胞、肝细胞；血细胞，诸如T淋巴细胞、B淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、巨核细胞、粒细胞；各种干细胞或祖细胞，尤其是造血干细胞或祖细胞，例如获取自骨髓、脐带血、外周血、胎儿肝脏等的细胞。
在一个特定的实施方案中，用于基因治疗的细胞对受试者来说是自体的。
在将重组细胞用于基因治疗的实施方案中，将编码抗体的核酸序列导入细胞中，使得它们可被细胞或其后代表达，然后在体内施用该重组细胞以达到治疗效果。在特定的实施方案中，使用干细胞或祖细胞。任何可分离并在体外维持的干细胞和/或祖细胞，均有潜力被用于本文提供的方法的所述实施方案。(参见，例如PCT公开WO94/08598；Stempleand Anderson，1992,Cell 7 1:973-985；Rheinwald,1980,Meth.Cell Bio.21A:229；以及Pittelkow and Scott,1986,Mayo Clinic Proc.61:771)。
在特定的实施方案中，为了基因治疗目的而导入的核酸，包含可操作地连接至编码区的可诱导启动子，从而可通过控制适当的转录诱导剂的存在与否来控制核酸的表达。
5.9诊断测定和方法
免疫特异性地结合IL-36抗原(例如IL-36α和/或IL-36γ抗原)的标记抗体及其衍生物和类似物，可用于诊断目的以检测、诊断或监测IL-36-介导的疾病。因此，本文提供了用于检测IL-36介导的疾病的方法，所述方法包括：(a)使用本文提供的免疫特异性地结合IL-36抗原的一种或多种抗体，测定受试者的细胞或组织样品中IL-36抗原的表达；以及(b)将IL-36抗原的水平与对照水平，例如正常组织样品(例如，来自没有IL-36介导的疾病的患者、或疾病发作之前的同一患者)中的水平进行比较，由此与IL-36抗原的对照水平相比，测定的IL-36抗原水平的增加则指示IL-36介导的疾病。
本文还提供了用于诊断IL-36介导的疾病的诊断测定法，包括：(a)使用本文提供的免疫特异性地结合IL-36抗原的一种或多种抗体，测定个体的细胞或组织样品中IL-36抗原的水平；(b)将IL-36抗原的水平与对照水平，例如正常组织样品中的水平进行比较，由此与IL-36抗原的对照水平相比，测定的IL-36抗原水平的增加则指示IL-36介导的疾病。在某些实施方案中，本文提供了一种治疗受试者中IL-36介导的疾病的方法，其包括：(a)使用本文提供的免疫特异性地结合IL-36抗原的一种或多种抗体，测定个体的细胞或组织样品中IL-36抗原的水平；(b)将IL-36抗原的水平与对照水平，例如正常组织样品中的水平进行比较，由此与IL-36抗原的对照水平相比，测定的IL-36抗原水平的增加则指示IL-36介导的疾病。在一些实施方案中，所述方法还包括(c)向鉴定为患有IL-36介导的疾病的受试者施用有效量的本文提供的抗体。对IL-36介导的疾病的更明确的诊断，可以使卫生专业人员更早地采取预防措施或积极治疗，从而防止IL-36介导的疾病的发展或进一步进展。
使用本文所述或本领域技术人员已知的经典免疫组织学方法，本文提供的抗体可用于测定生物学样品中的IL-36抗原水平(例如，参见Jalkanen et al.,1985,J.Cell.Biol.101:976-985；以及Jalkanen et al.,1987,J.Cell.Biol.105:3087-3096)。可用于检测蛋白基因表达的其他基于抗体的方法包括免疫测定，如酶联免疫吸附测定(ELISA)和放射免疫测定(RIA)。合适的抗体测定标记是本领域已知的，并且包括酶标记，如葡萄糖氧化酶；放射性同位素，如碘(125I、121I)、碳(14C)、硫(35S)、氚(3H)、铟(112In)和锝(99Tc)；发光标记，如鲁米诺；以及荧光标记，如荧光素和若丹明，以及生物素。
本文提供的一方面是对人的IL-36介导的疾病进行检测和诊断。在一个实施方案中，诊断包括：a)向受试者(例如，经肠外、皮下或腹膜内)施用有效量的免疫特异性地结合IL-36抗原的标记抗体；b)在该施用后等待一个时间间隔，以使标记的抗体可以集中在受试者表达IL-36抗原的位点上(并且将未结合的标记分子清除至背景水平)；c)确定背景水平；d)在受试者中检测标记的抗体，这样，在背景水平以上检测到标记的抗体则表明受试者患有IL-36介导的疾病。可以通过各种方法确定背景水平，包括将检测到的标记分子的量与先前为特定系统确定的标准值进行比较。
可以理解，在本领域中对象的大小和所使用的成像系统将确定产生诊断图像所需的成像部分的量。在放射性同位素部分的情况下，对于人类受试者，注入的放射性的量范围通常将是约5-20毫居里的99Tc。然后，标记的抗体将聚集在细胞中含有特定蛋白的位置。体内肿瘤成像，描述于S.W.Burchiel et al.,“Immunopharmacokinetics of RadiolabeledAntibodies and Their Fragments”,Chapter 13in Tumor Imaging:The RadiochemicalDetection of Cancer,S.W.Burchiel and B.A.Rhodes,eds.,Masson Publishing Inc.,1982。
基于几个变量，包括所用标记的类型和施用模式，施用后用于标记的抗体在受试者部位集中以及清除未结合的标记抗体至背景水平的时间间隔为6-48小时、或6-24小时、或6-12小时。在另一个实施方案中，施用后的时间间隔是5-20天、或5-10天。
在一个实施方案中，通过重复用于诊断IL-36介导的疾病的方法(例如，在初次诊断后一个月、初次诊断后六个月、初次诊断后一年等)，来监测IL-36介导的疾病。
使用本领域已知的体内扫描方法，可以在受试者中检测标记分子的存在。这些方法基于所用标签的类型。技术人员将能够确定用于检测特定标签的适当方法。可以在本文提供的诊断方法中使用的方法和设备，包括但不限于：计算机断层扫描(CT)、全身扫描如正电子发射扫描(PET)、磁共振成像(MRI)和超声扫描。
在一个特定的实施方案中，所述分子用放射性同位素标记，并使用辐射响应性外科器械在患者中进行检测(Thurston et al.,美国专利US5,441,050)。在另一个实施方案中，所述分子用荧光复合物标记，并使用荧光响应性扫描仪在患者中进行检测。在另一个实施方案中，所述分子用正电子发射金属标记，并使用正电子发射断层扫描术在患者中进行检测。在又一个实施方案中，所述分子用顺磁性标记物标记，并且使用磁共振成像(MRI)在患者中进行检测。
5.10试剂盒
本文还提供了试剂盒，其包含本文提供的抗体(例如，抗IL-36抗体)或其组合物(例如，药物组合物)，所述抗体或其组合物被包装至合适的包装材料中的。试剂盒任选地包括标签或包装插页，所述标签或包装插页包括对组件的描述或对在体外、体内或离体使用所述组件的说明。
术语“包装材料”是指容纳试剂盒组件的物理结构。包装材料可以保持组件无菌，并且可以由通常用于这种目的的材料(例如，纸、波纹纤维、玻璃、塑料、箔、安瓿、小瓶、管等)制成。
本文提供的试剂盒可包括标签或插页。标签或插页包括“印刷品”，例如纸或纸板，可独立或粘贴在组件、试剂盒或包装材料(例如，盒子)上，或附着在例如装有试剂盒组件的安瓿瓶、试管或小瓶上。标签或插页可以进一步包括计算机可读介质，如磁盘(例如硬盘、卡、存储磁盘)、光盘(如CD-或DVD-ROM/RAM、DVD)、MP3、磁带，或电子存储介质(如RAM和ROM)，或它们的混合体(如磁/光存储介质、FLASH介质或存储类型卡)。标签或插页可包括标识制造商信息、批号、制造商地址和日期的信息。
本文提供的试剂盒可进一步包括其他组件。试剂盒的各个组件都可以封装在一个单独的容器中，各种容器都可以存在于同一包装中。也可以设计试剂盒以用于冷藏。可以进一步设计试剂盒使其包含本文提供的抗体、或包含含有编码本文提供的抗体的核酸的细胞。试剂盒中的细胞可以在适当的储存条件下维持，直至可以使用为止。
本文还提供了与IL-36抗原免疫特异性结合的抗体组。在特定实施方案中，本文提供了具有不同缔合速率常数、不同解离速率常数、对IL-36抗原(例如，IL-36α和/或IL-36γ)具有不同亲和力和/或对IL-36抗原具有不同特异性的抗体组。在某些实施方案中，本文提供的是约10个抗体的组，优选地约25个、约50个、约75个、约100个、约125个、约150个、约175个、约200个、约250个、约300个、约350个、约400个、约450、约500、约550、约600、约650、约700、约750、约800、约850、约900、约950或约1000或更多个抗体的组。抗体组可用于例如96孔或384孔板，例如用于诸如ELISA的测定。
除非另有定义，本文所用的所有技术和科学术语具有的含义与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的含义相同。尽管与本文所述的那些方法和材料类似或等同的方法或材料可以用于本发明的实施或测试中，但是本文描述了合适的方法和材料。
如本文所用，本文档通篇的数值通常都以范围的形式表示。范围形式的使用仅是为了方便和简洁，不应理解为对本发明范围的严格限制，上下文另有明确说明的除外。因此，对范围的使用明确包括所有可能的子范围、该范围内的所有单独数值和该范围内的所有数值或数值范围(包括整数)以及该范围内数值的分数或整数，上下文另有明确说明的除外。无论范围多宽，这种解释适用于本专利文件的所有上下文。因此，例如，提及范围90-100％，则包括91-99％、92-98％、93-95％、91-98％、91-97％、91-96％、91-95％、91-94％、91-93％，依此类推。提及范围90-100％，则也包括91％、92％、93％、94％、95％、95％、97％等，以及91.1％、91.2％、91.3％、91.4％、91.5％等，92.1％、92.2％、92.3％、92.4％、92.5％等，依此类推。
此外，提及范围1-3、3-5、5-10、10-20、20-30、30-40、40-50、50-60、60-70、70-80、80-90、90-100、100-110、110-120、120-130、130-140、140-150、150-160、160-170、170-180、180-190、190-200、200-225、225-250，则包括1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20等。在另一实例中，提及范围25-250、250-500、500-1,000、1,000-2,500、2,500-5,000、5,000-25,000、25,000-50,000，则包括位于其内或涵盖此类值的任何数值或范围，例如，25、26、27、28、29...250、251、252、253、254...500、501、502、503、504...等。
又如本文所用，在整个文件中公开了一系列范围。一系列范围的使用包括上限和下限的组合以提供另一个范围。无论范围有多宽，在本专利文件中的所有上下文中这种解释都适用。因此，例如，提及一系列范围，诸如5-10、10-20、20-30、30-40、40-50、50-75、75-100、100-150，则包括范围5-20、5-30、5-40、5-50、5-75、5-100、5-150，和10-30、10-40、10-50、10-75、10-100、10-150，以及20-40、20-50、20-75、20-100、20-150，以此类推。
为了简洁起见，本文使用某些缩写。一个实例是代表氨基酸残基的单字母缩写。氨基酸及其相应的三字母和单个字母缩写如下：
丙氨酸 Ala (A)
精氨酸 Arg (R)
天冬酰胺 Asn (N)
天冬氨酸 Asp (D)
半胱氨酸 Cys (C)
谷氨酸 Glu (E)
谷氨酰胺 Gln (Q)
甘氨酸 Gly (G)
组氨酸 His (H)
异亮氨酸 Ile (I)
亮氨酸 Leu (L)
赖氨酸 Lys (K)
蛋氨酸 Met (M)
苯丙氨酸 Phe (F)
脯氨酸 Pro (P)
丝氨酸 Ser (S)
苏氨酸 Thr (T)
色氨酸 Trp (W)
酪氨酸 Tyr (Y)
缬氨酸 Val (V)
在氨基酸序列中，可以通过序列中氨基酸残基的位置和氨基酸类型来识别各个氨基酸残基。例如，假设序列中的第一个氨基酸残基是甘氨酸，则所述甘氨酸可以表示为第一Gly、Gly1或G1。又例如，这句话“由SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7代表的IL-36α的氨基酸序列的第45位Arg”，是指SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7中的第45个氨基酸残基，其为Arg。
本文通常使用肯定性语言来公开本发明，以描述众多实施方案。本发明还具体包括其中全部或部分排除了特定主题的实施方案，所述主题诸如物质或材料、方法步骤和条件、方案、程序、测定或分析。因此，即使就本发明不包括的内容而言，尽管本发明在本文中通常未表达，但是仍在本文中公开了未明确包括在本发明中的方面。
这里描述了本发明的多个实施方案。然而应理解，在不脱离本发明的精神和范围的情况下可进行各种修改。因此，以下实施例旨在说明而非限制权利要求中描述的发明范围。
6.实施例
以下是对本研究中使用的多种方法和材料的描述，并被提出以向本领域普通技术人员提供关于如何产生和使用本发明的完整公开和描述，并且既不意图限制发明人认为的发明范围，也不意图表示进行了以下实验并且是可以进行的所有实验。应当理解的是，以现在时态书写的示例性描述并不一定执行过，而是可以执行该描述以生成与本发明的教导相关的数据等。已经尽力确保关于所使用的数字(例如，数量、百分比等)的准确性，但是应当考虑一些实验误差和偏差。
6.1实施例1：生成与食蟹猕猴IL-36α和IL-36γ具有交叉反应性的小鼠抗人IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体
该实施例示例说明了用于生成本文提供的示例性小鼠抗人IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体的方法。应当理解的是，在该实施例中描述的示例性抗IL-36抗体并不意图代表本发明的全部范围。
制备了用于产生重组人和食蟹猕猴(cynomolgus macaque)IL-36蛋白的原核表达载体，以产生在氨基末端与His-SUMO标签融合的高活性、“截短的”IL-36蛋白。
具体地，购买了编码人IL-36α(R12)(在第12位具有谷氨酰胺至精氨酸替换(Q12R)的蛋白变体)的DNA序列(GenBankTM登录号NM_014440的dbSNP：rs895497)，以及编码人IL-36β(GenBankTM登录号NM_173178)的DNA序列(目录号分别为RC219328和RC211037，Origene,Rockville,Maryland)。编码人IL-36α(R12)的DNA具有SEQ ID NO:4的多核苷酸序列，以及编码的人IL-36α(R12)具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列。编码截短的人IL-36β的DNA具有SEQID NO:8的多核苷酸序列，以及编码的截短的人IL-36β具有SEQ ID NO:9的氨基酸序列。
根据制造商的手册，使用
Figure BDA0002992427630002941
SUMO克隆和表达系统(目录号49013-1，Lucigen,Middleton,Wisconsin)生成了氨基末端加标签的、截短的IL-36细胞因子的原核表达载体。简而言之，通过PCR扩增了编码高活性“截短的”形式的人IL-36α(R12)(氨基酸Lys6-Phe158)的序列(SEQ ID NO:4的核苷酸序列，SEQ ID NO:5的氨基酸序列)，或编码截短的人IL-36β(氨基酸Arg5-Glu157)的序列(SEQ ID NO:8的核苷酸序列，SEQ ID NO:9的氨基酸序列)，并将其连接到pETite原核表达载体(目录号4901-3-1，Lucigen,Middleton,Wisconsin)，与编码氨基末端6x组氨酸标签然后是SUMO蛋白标签的DNA同框。SUMO蛋白标签的多核苷酸序列如下：
ATGCATCATCACCACCATCACGGGTCCCTGCAGGACTCAGAAGTCAATCAAGAAGCTAAGCCAGAGGTCAAGCCAGAAGTCAAGCCTGAGACTCACATCAATTTAAAGGTGTCCGATGGATCTTCAGAGATCTTCTTCAAGATCAAAAAGACCACTCCTTTAAGAAGGCTGATGGAAGCGTTCGCTAAAAGACAGGGTAAGGAAATGGACTCCTTAACGTTCTTGTACGACGGTATTGAAATTCAAGCTGATCAGACCCCTGAAGATTTGGACATGGAGGATAACGATATTATTGAGGCTCACCGCGAACAGATTGGAGGT(SEQ ID NO:18)。
SUMO蛋白标签的氨基酸序列如下：
MHHHHHHGSLQDSEVNQEAKPEVKPEVKPETHINLKVSDGSSEIFFKIKKTTPLRRLMEAFAKRQGKEMDSLTFLYDGIEIQADQTPEDLDMEDNDIIEAHREQIGG(SEQ ID NO:19)。
以与IL-36α(R12)相同的方法，生成用于截短的人IL-36α(Q12)(GenBankTM登录号NM_014440)(氨基酸Lys6-Phe158)(SEQ ID NO:6的核苷酸序列，SEQ ID NO:7的氨基酸序列)的表达载体，但使用的是含有谷氨酰胺-12(Q12)密码子而不是精氨酸-12(R12)密码子的核苷酸序列的正向PCR引物。通过Sanger测序证实完整的载体序列。进行相同的过程以生成同源截短的食蟹猕猴(Macaca fascicularis)IL-36表达载体。合成了编码下述蛋白的DNA：截短的食蟹猕猴IL-36α(氨基酸Lys6-Phe158)(登录号XP_015288898.1)(SEQ ID NO:12的核苷酸序列，SEQ ID NO:13的氨基酸序列)，截短的食蟹猕猴IL-36β(氨基酸序列Trp5-Glu157)(登录号XP_005575353)(SEQ ID NO:14的核苷酸序列，SEQ ID NO:15的氨基酸序列)，以及截短的食蟹猕猴IL-36γ(氨基酸Ser18-Lys168)(登录号XP_015288884)(SEQ IDNO:16的核苷酸序列，SEQ ID NO:17的氨基酸序列)(Thermo Fisher Scientific GeneArt,Regensberg,德国)，并将其用作PCR模板用于扩增和载体克隆。通过Sanger测序验证所有完成的载体序列。
重组的截短的人IL-36γ(氨基酸Ser18-Asp169)(GenBankTM登录号NP_062564.1)(SEQ ID NO:10)蛋白，以及重组的截短的人IL-36Ra(氨基酸Val2-Asp155)(GenBankTM登录号NP_036407，UniProt登录号Q9UBH0)(SEQ ID NO:11)蛋白，购自R&D Systems(Minneapolis,Minnesota)(目录号分别为6835-IL/CF和1275-IL-025/CF)。
在大肠杆菌(E.coli)中产生了重组的His-SUMO标签的、截短的IL-36细胞因子蛋白。为此，将含有编码His-SUMO标签的、截短的人或食蟹猕猴IL-36蛋白的DNA的pETite原核表达载体(上述制备)，引入HI-Control BL21(DE3)细菌细胞(目录号60110，Lucigen,Middleton,Wisconsin)。其各自的单个卡那霉素抗性细菌菌落，在含有卡那霉素的溶源性肉汤(LB)液体培养物中于37℃、摇动250rpm的条件生长，并在OD600测量的细胞密度达到～0.5-1时，通过添加IPTG(异丙基β-D-硫代吡喃半乳糖苷)(目录号#C0012，BioPioneer,SanDiego,California)进行诱导以产生蛋白质。4-6小时后，通过离心收集细胞，并处理其用于蛋白纯化。
His-标签的SUMO-IL36α或β重组蛋白在大肠杆菌中表达，并按如以下简要描述的进行纯化。将含有目标诱导蛋白的细菌沉淀，重悬于冰上的20mM Tris-HCl pH 8.0、0.5MNaCl、10％甘油裂解缓冲液(补充有蛋白酶抑制剂混合物无EDTA片剂)(目录号5056489001,Sigma Aldrich,St.Louis,Missouri)，然后在冰上以60％Amp超声处理15秒，以70％Amp超声处理15秒，并以80％Amp超声处理3x 15秒。通过在20000xg、4℃离心30min澄清样品。收集的上清液用20mM Tris-HCl pH 8.0、0.5M NaCl缓冲液稀释，并用0.22μm真空过滤器设备(Millipore,Bedford,Massachusetts)过滤，然后使用固定的金属离子亲和色谱法(IMAC)纯化(HisTrap HP目录号17524701,GE Healthcare Life Sciences,Pittsburgh,PA)。纯化前，立即添加20mM咪唑和1mM DTT(终浓度)。将样品上样到用20mM Tris-HCl pH 8.0、0.5MNaCl、20mM咪唑平衡的5mL HisTrap HP柱上。上样后，将柱用6个柱体积(CV)的20mM Tris-HCl pH 8.0、0.5M NaCl、20mM咪唑彻底洗涤。蛋白质在25CV上用20-600mM咪唑梯度洗脱，并用5mM EDTA和5mM DTT(终浓度)中和。通过SDS-PAGE分析级分，并且合并阳性级分，并针对PBS pH 7.4(目录号P3813,Sigma Aldrich,St.Louis,Missouri)将其透析。透析后，蛋白质样品用离心过滤浓缩器(Vivaspin 30,000MWCO目录号VS2022,Sartorius,Goettingen,德国)浓缩。最后，蛋白质使用0.22μm孔径的注射器式过滤器过滤灭菌，并使用Lowry方法确定蛋白质浓度。
根据制造商规程(目录号30801-2,Lucigen,Middleton,Wisconsin)，通过用SUMOExpress蛋白酶进行酶处理His-SUMO-IL36，来获得切割的、未标签的人IL-36蛋白。切割后，将混合物施加至IMAC柱，并在流通物中回收游离的靶蛋白；His-SUMO标签和SUMO Express蛋白酶仍与IMAC基质结合。通过SDS-PAGE分析级分，并且合并阳性级分，并针对PBS pH 7.4(目录号P3813,Sigma Aldrich,St.Louis,Missouri)将其透析。使用FDA许可的Endosafe-PTS鲎阿米巴样细胞溶解物(Limulus Amebocyte Lysate，LAL)，测定(Charles River实验室,San Diego,California)确定热原含量。该测定的检测限为1-0.01EU/mL内毒素。如果测试为阴性，则认为样品无内毒素。
在从每个截短的IL-36蛋白切割并去除His-SUMO标签后，高纯度、无标签的、高活性截短形式的每种各自的IL-36细胞因子蛋白仍然存在：人IL-36α(R12)(SEQ ID NO:5)，人IL-36α(Q12)(SEQ ID NO:7)，人IL-36β(SEQ ID NO:9)，食蟹猕猴IL-36α(SEQ ID NO:13)，食蟹猕猴IL-36β(SEQ ID NO:15)和食蟹猕猴IL-36γ(SEQ ID NO:17)。除非另有说明，否则涉及人IL-36α的测定均使用IL-36α(R12)。
用重组人IL-36α、IL-36β或IL-36γ免疫购自Charles River并在无病原体条件下保持在拉霍亚研究所(La Jolla Institute)动物设施中的CD2F1小鼠。应用了几种免疫策略。将1.5-10μg的重组IL-36α、IL-36β和IL-36γ用作免疫原，并分别地以混合物，或顺序地施用于动物。使用的佐剂，包括首次免疫的TiterMax Gold(目录号2684,Sigma,St.Louis,Missouri)，氢氧化铝凝胶(目录号vac-alu-250,InvivoGen,San Diego,California)，以及Toll样受体激动剂CpG(目录号tlrl-1826,InvivoGen,San Diego,California)，进行后续加强。每周或每两周一次，皮下进行初次免疫和加强。CD40作为激活B细胞的共刺激分子起作用，在某些情况下，第一次免疫后七天，每只小鼠经由100μg的IP注射施用针对小鼠CD40的激动剂抗体(目录号BP0016-2,BioXCell,West Lebanon,New Hampshire)。
由用重组人IL-36α、IL-36β或IL-36γ免疫的小鼠生成杂交瘤。当达到显著的抗原特异性血清效价时，在最后一次加强后3至4天处死小鼠。收集引流的淋巴结和脾脏，并匀浆以制作单细胞悬液。为了生成杂交瘤，将细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag14(目录号CRL-1581,ATCC,Manassas,Virginia)以2:1至5:1范围的可变比率进行融合。经由聚乙二醇(目录号10783641001,Sigma,St.Louis,Missouri)或电融合(目录号450012，450012,HarvardApparatus,Holliston,Massachusetts)诱导融合。通过在含有HAT的培养基(目录号H0262,Sigma,St.Louis,Missouri)中培养，来选择成功融合的杂交瘤细胞。
在某些情况下，将融合的细胞以每孔5,000个细胞的密度接种到96孔板中，并在一周后使用ELISA结合测定筛选与人和食蟹猕猴IL-36α、IL-36β或IL-36γ的结合。在其他情况下，将融合的细胞接种到含有HAT的半固体培养基(目录号03803,StemCellTechnologies,Tukwila,Washington)中，并于一周后用ClonePix2仪器(MolecularDevices,Sunnyvale,California)挑选出单克隆杂交瘤。一周后，通过ELISA结合测定针对人和食蟹猕猴IL-36α、IL-36β或IL-36γ来筛选挑选的杂交瘤。如果需要，将通过ELISA显示阳性结合的杂交瘤进行亚克隆，并重新筛选结合。在IL-36ELISA结合测定中，用重组人或食蟹猕猴IL-36α、IL-36β或IL-36γ蛋白包被96孔ELISA板(目录号07-200-37,FisherScientific,Hanover Park,Illinois)，并在4℃孵育过夜。洗涤板(含0.05％Tween20的PBS)，并在室温用含2％牛血清白蛋白的PBS封闭1小时。洗涤板，并将杂交瘤上清液添加至板，并在室温孵育1小时。洗涤板，并用山羊抗小鼠IgG-HRP(目录号109-036-098，JacksonImmunoResearch，West Grove，Pennsylvania)，检测抗体与包被的IL-36抗原的结合。然后洗涤板，并添加TMB底物(目录号1721067,Jackson ImmunoResearch,West Grove,Pennsylvania)。充分显色后，反应用H2SO4终止，在450nM用酶标仪测量光密度。
利用HaCaT细胞(目录号T0020001,AddexBio,San Diego,California)，一种人角化细胞系，在高通量筛选测定中针对拮抗剂活性筛选产生与IL-36细胞因子结合的单克隆抗体的杂交瘤。
将HaCaT细胞培养于DMEM(目录号10313-021,Life Technologies,Carlsbad,California)，10％热灭活的FBS(目录号SH30071.03,Thermo Fisher Scientific,Asheville,North Carolina)，和1％PenStrep(Missouri目录号P0781,Sigma,St.Louis)。为了高通量筛选，将10μL的杂交瘤细胞培养上清液添加到384孔测定平板(目录号3701,Fisher Scientific,Hanover Park,Illinois)中，然后在HaCaT培养基中以30nM的浓度添加10μL的人IL-36α、IL-36β或IL-36γ细胞因子。添加10μL的3000nM的IL-36Ra(目录号1275-IL/CF,R&D Systems,Minneapolis,Minnesota)，作为IL-36受体信号转导的拮抗作用的阳性对照。添加10μL的HaCaT细胞，浓度为1x106个细胞/ml。最终测定条件为：每孔含有10,000个HaCaT细胞，10nM的IL-36α、IL-36β或IL-36γ细胞因子，以及1000nM IL-36Ra。将测定平板在5％CO2、37℃孵育20小时。然后收集测定培养物上清液，并按照制造商的说明使用IL-8Ready-SET-Go！ELISA试剂盒测量分泌的IL-8(目录号88-8086-88,LifeTechnologies,Carlsbad,CA)。为了适应384孔筛选格式，以15μL体积使用ELISA试剂盒试剂。将测定培养上清液稀释5倍至ELISA试剂盒试剂稀释液中，并在IL-8ELISA中评估25μL的样品。在IL-8ELISA中O.D.450值的减少，用于鉴定IL-36拮抗剂单克隆抗体。
从表现出拮抗剂活性的杂交瘤中纯化单克隆抗体，并在HaCaT测定中评估IC50效能。为了评价IL-36单克隆抗体拮抗人IL-36α、IL-36β和IL-36γ的IC50效能，将纯化的单克隆抗体稀释到HaCaT培养基中至600nM浓度，然后2倍系列稀释。将10μL的稀释的抗体转移到测定平板，以达到以200nM开始的最终测定浓度，然后2倍系列稀释。IL-36Ra用作IL-36受体拮抗作用的阳性对照，并且以与IL-36单克隆抗体相似的方式处理，尽管最终测定浓度通常始于1000nM，然后是2倍系列稀释。将来自IL-8ELISA的O.D.450值作图，并且使用GraphPadPRISMTM软件计算IC50值。为了评估IL-36单克隆抗体拮抗食蟹猕猴IL-36α、IL-36β和IL-36γ的IC50效能，采用了相似的方案，其中使用食蟹猕猴IL-36细胞因子代替人IL-36细胞因子。
鉴定了针对人和食蟹猕猴IL-36α和IL-36γ具有结合和拮抗活性的8种单克隆抗体。当将选择的单克隆抗体转化为小鼠/人(m/h)嵌合抗体时，功能活性被维持(参见图1A-1F和图2A-2D)。表1和表2总结了在HaCaT功能测定中拮抗人和食蟹猕猴IL-36α(参见下表1)和IL-36γ(参见下表2)的抗体和IL-36Ra的IC50值。这些抗体既不结合IL-36Ra也不结合或拮抗IL-36β(参见图3)。与IL-36Ra相比，许多经评价的抗体在拮抗IL-36α或IL-36γ方面表现出更大的效能。
表1.在HaCaT功能测定中拮抗人和食蟹猕猴IL-36α的抗体和IL-36Ra的IC50值
Figure BDA0002992427630002991
Figure BDA0002992427630003001
注意：n.t.意指未经测试
表2.在HaCaT功能测定中拮抗人和食蟹猕猴IL-36γ的抗体和IL-36Ra的IC50值
Figure BDA0002992427630003002
注意：n.t.意指未经测试
6.2实施例2：抗体制备
6.2.1从杂交瘤细胞中克隆编码抗IL-36抗体的VH和VL的基因
通过测序VH和VL基因来确定抗体可变区的核苷酸序列，所述VH和VL基因是通过5’RACE-PCR扩增从自克隆的杂交瘤细胞提取的RNA中分离的。使用RNeasy迷你试剂盒(目录号74104,QIAGEN,Hilden,德国)和QIA撕碎机(目录号79654,QIAGEN,Hilden,德国)，从1×106个杂交瘤细胞中分离总RNA，这些杂交瘤细胞产生144D464A、144D666C、144J171G、144L124B、144L133B、144L180A、144L249B或144L472A抗体。采用
Figure BDA0002992427630003003
RACE cDNA扩增试剂盒(目录号634858,TaKaRa Bio USA,Mountain View,California)，使用每个杂交瘤的1μg的总RNA合成第一链cDNA。每个独特的VH和VL的cDNA序列，使用第一链cDNA作为模板获得。使用对小鼠IgG特异性的引物(GATTACGCCAAGCTTGTCACTGGCTCAGGGAAATAA(SEQ IDNO:97))和通用引物A(
Figure BDA0002992427630003012
RACE cDNA扩增试剂盒中提供的)进行PCR，以扩增每种抗体的VH cDNA片段。另外，使用对小鼠Igλ(GATTACGCCAAGCTTCTCYTCAGRGGAAGGTGGRAACA(SEQ ID NO:98)，其中“R”代表A或G，且“Y”代表C或T)特异性的引物和通用引物A进行PCR，以扩增每种抗体的VL cDNA片段。随后，每个PCR反应经历凝胶电泳，并且使用QIAquick凝胶提取试剂盒(目录号28704,QIAGEN,Hilden,德国)纯化扩增的片段。使用用于测序的零钝(Zero Blunt)TOPO PCR克隆试剂盒(目录号K280020,Life Technologies,Carlsbad,California)，将获得的每个基因片段插入到线性化的pRACE载体(由
Figure BDA0002992427630003013
RACE试剂盒提供)或线性化的pCR4载体。
将所得的含有扩增的可变基因核苷酸序列的质粒引入到感受态大肠杆菌DH5α或TOP10(目录号18265017或C404003,Life Technologies,Carlsbad,California)，并选择使用在LB-琼脂平板上适当的抗生素。随后在抗生素选择下，通过在液体LB培养物中生长单个细菌克隆来扩增DNA质粒，然后使用QIAprep Spin Miniprep试剂盒(目录号27104,QIAGEN,Hilden,德国)通过提取来分离。
通过对来自每个克隆的多个质粒的由PCR获得的插入片段进行Sanger测序，并使用Sequencher 5.4.6(Gene Codes Corporation,Ann Arbor,Michigan)比对结果，来确定每个抗体克隆的VH和VL的完整序列。确定每个序列的共有核苷酸序列为全长VH或VL cDNA(包括推定的在5’-末端的ATG起始密码子)。由此推断出各自的VH和VL氨基酸序列。
已鉴定的8种抗体的VH和VL区的核苷酸和氨基酸序列(有或没有信号序列)，在下表中列出。
表3.VH核酸序列，包括信号序列
Figure BDA0002992427630003011
Figure BDA0002992427630003021
Figure BDA0002992427630003031
表4.VH核酸序列，不包括信号序列
Figure BDA0002992427630003032
Figure BDA0002992427630003041
Figure BDA0002992427630003051
表5.VL核酸序列，包括信号序列
Figure BDA0002992427630003052
Figure BDA0002992427630003061
Figure BDA0002992427630003071
表6.VL核酸序列，不包括信号序列
Figure BDA0002992427630003072
Figure BDA0002992427630003081
Figure BDA0002992427630003091
表7.VH氨基酸序列，包括信号序列
Figure BDA0002992427630003092
Figure BDA0002992427630003101
表8.VH氨基酸序列，不包括信号序列
Figure BDA0002992427630003102
表9.VL氨基酸序列，包括信号序列
Figure BDA0002992427630003111
表10.VL氨基酸序列，不包括信号序列
Figure BDA0002992427630003112
Figure BDA0002992427630003121
根据Kabat编号，已鉴定的8种抗体的CDR区的氨基酸序列，在以下表11和表12中列出。
表11.VH CDR氨基酸序列
Figure BDA0002992427630003122
Figure BDA0002992427630003131
表12.VL CDR氨基酸序列
Figure BDA0002992427630003132
6.2.2构建用于产生重组抗体的表达载体
通过将PCR扩增的编码特异性抗体克隆的VH或VL的DNA连接到分离的线性化真核表达载体，其在编码小鼠IgG信号肽的5’cDNA和分别编码人IgG1或人Igλ恒定结构域的3’cDNA之间，生成用于嵌合小鼠/人抗体的哺乳动物表达的载体。根据产品手册，使用GeneArt无缝克隆和组装试剂盒(目录号A13288,Invitrogen,Carlsbad,California)进行连接。如前所述扩增DNA质粒，并且通过Sanger测序验证整个重或轻链cDNA序列。分别通过将克隆的VH核苷酸或氨基酸序列与人IgG1恒定核苷酸序列(SEQ ID NO:93)或氨基酸序列(SEQ IDNO:94)连接来表示嵌合的小鼠/人IgG1重链序列，并且分别通过将克隆的VL核苷酸或氨基酸序列连接到人Igλ(IGLC2)恒定核苷酸序列(SEQ ID NO:95)或氨基酸序列(SEQ ID NO:96)来表示完整的嵌合小鼠/人λ轻链序列。
SEQ ID NO:93、SEQ ID NO:94、SEQ ID NO:95和SEQ ID NO:96的序列如以下所列：
人IgG1恒定核苷酸序列(SEQ ID NO: 93)
GCTAGCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAAAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACAAAACTCACACATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAACTCCTGGGGGGACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACATGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTGAGGTCAAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTACAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAATGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGCCCTCCCAGCCCCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCGGGATGAGCTGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTATCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTACAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCCGGGTAAATGA(SEQ ID NO:93)。
人IgG1恒定氨基酸序列(SEQ ID NO: 94)
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:94)
人Igλ(IGLC2)恒定核苷酸序列(SEQ ID NO: 95)
GGTCAGCCCAAGGCTGCCCCCTCGGTCACTCTGTTCCCGCCCTCCTCTGAGGAGCTTCAAGCCAACAAGGCCACACTGGTGTGTCTCATAAGTGACTTCTACCCGGGAGCCGTGACAGTGGCCTGGAAGGCAGATAGCAGCCCCGTCAAGGCGGGAGTGGAGACCACCACACCCTCCAAACAAAGCAACAACAAGTACGCGGCCAGCAGCTACCTGAGCCTGACGCCTGAGCAGTGGAAGTCCCACAGAAGCTACAGCTGCCAGGTCACGCATGAAGGGAGCACCGTGGAGAAGACAGTGGCCCCTACAGAATGTTCATGA(SEQ ID NO:95)
人Igλ(IGLC2)恒定氨基酸序列(SEQ ID NO: 96)
GQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS(SEQ ID NO:96)。
6.2.3抗体生产
在补充有超低Ig胎儿牛血清(目录号16250078,Life Technologies,Carlsbad,California)的培养基中，通过将产生抗体的杂交瘤细胞系扩增至50ml–200ml培养物，来进行由杂交瘤获得的抗体的产生。
使用Expi293表达系统(目录号A14524,Life Technologies,Carlsbad,California)，通过用抗体表达载体瞬时转染Expi293F细胞(目录号A14528,LifeTechnologies,Carlsbad,California)，进行从哺乳动物细胞产生重组抗体。简而言之，将抗体重链和抗体轻链的单独哺乳动物表达载体，以重链与轻链1:1或1:3比例组合，并使用制造商手册中所述的方法进行转染。转染后5-7天，收集培养基，并通过离心使其澄清，然后0.22微米过滤(
Figure BDA0002992427630003151
过滤器设备，目录号SCGPU05RE,EMD Millipore,Temecula,California)将其澄清。
6.2.4抗体的纯化
使用重组的MabSelect SuRe蛋白A亲和树脂(目录号28408253,GE HealthcareLife Sciences,Pittsburgh,Pennsylvania)，从培养基中纯化由杂交瘤获得的或重组单克隆抗体。条件培养基用0.22μm真空过滤器设备(Millipore,Bedford,ΜΑ)过滤，并上样到合适容量的HiTrap MabSelect SuRe柱(目录号28408253,GE Healthcare Life Sciences,Pittsburgh,PA)上，以匹配培养基中抗体的量。柱用6倍柱体积的PBS彻底清洗，抗体用0.1ΜGly-HCl、0.15M NaCl pH 3.7(10CV)，然后0.1ΜGly-HCl、0.15M NaCl pH 2.5(6CV)洗脱，并用1ΜTris-HCl、pH 8.0中和。通过SDS-PAGE分析级分，并且合并阳性级分，并针对PBSpH 7.4(目录号P3813,Sigma Aldrich,St.Louis,Missouri)将其透析。透析后，抗体样品用离心过滤浓缩器(Vivaspin,30,000MWCO,目录号VS2022,Sartorius,Goettingen,德国)浓缩。最后，抗体使用0.22μm孔径的注射器式过滤器过滤灭菌，并通过Lowry法确定抗体浓度。使用FDA许可的Endosafe-PTS Limulus Amebocyte Lysate(LAL)测定(Charles River实验室,San Diego,California)确定热原含量。该测定的检测限为1-0.01EU/mL的内毒素。如果测试为阴性，则认为样品无内毒素。
6.2.5Fab产生
根据制造商的说明书，使用Fab制备试剂盒(目录号44985,Thermo Fisher,Waltham,Massachusetts)酶促地制备IL36α和IL36γ双重拮抗剂抗体144D464A的Fab片段。木瓜蛋白酶消化后，将样品上样到HiTrap MabSelect SuRe柱(目录号28408253,GEHealthcare Life Sciences,Pittsburgh,Pennsylvania)上，以除去未消化的抗体和Fc片段。通过SDS-PAGE分析含有Fab片段的流通级分，并且合并阳性级分，并针对PBS pH 7.4(目录号P3813,Sigma Aldrich,St.Louis,Missouri)将其透析。透析后，蛋白质样品用离心过滤浓缩器(Vivaspin 3,000MWCO,目录号VS2091,Sartorius,Goettingen,德国)浓缩。通过尺寸排阻色谱法进一步纯化Fab片段，以除去任何污染物或降解产物。通过SDS-PAGE分析级分，并且合并阳性级分，并针对PBS pH 7.4(目录号P3813,Sigma Aldrich,St.Louis,Missouri)将其透析。
6.3实施例3：在原代细胞测定中分析效能
在原代人角化细胞测定中，评价了鉴定为IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂的单克隆抗体的功能效能。将人新生儿角化细胞(目录号102-05n,Cell Applications,San Diego,California)培养于角化细胞生长培养基(目录号141-500,Cell Applications,SanDiego,California)。为了评价IL-36单克隆抗体拮抗人IL-36α、IL-36β和IL-36γ的IC50效能，将纯化的单克隆抗体稀释到HaCaT培养基中至600nM浓度，然后2倍系列稀释。将10μL的稀释的抗体转移到测定平板，以达到以200nM开始的最终测定浓度，然后2倍系列稀释。将IL-36Ra用作IL-36受体拮抗作用的阳性对照，并且以与IL-36单克隆抗体相似的方式处理，尽管最终测定浓度通常始于1000nM，然后是2倍系列稀释。对于给定的实验，将测定培养物上清液稀释2倍或5倍以测量分泌的IL-8(目录号88-8086-88,Life Technologies,Carlsbad,CA)。将来自IL-8ELISA的O.D.450值作图，并且使用GraphPad PRISMTM软件计算IC50值。
在原代人角化细胞测定中，此处测试的抗体显示出拮抗IL-36α和IL-36γ，并且该活性的效能通常大于对IL-36Ra观察到的效能(参见图4A-4D，表13)。
表13.在原代人角化细胞功能测定中，拮抗人IL-36α和IL-36γ的抗体和IL-36Ra的IC50值
Figure BDA0002992427630003171
注意：n.t.意指未经测试
在原代人单核细胞测定中，还评价了IL-36拮抗剂单克隆抗体的功能效能。通过常规的Ficoll梯度(GE Healthcare,目录号17144003,Marlborough,Massachusetts)，从健康人供体的新鲜全血中分离人外周血单核细胞。采用阴性选择使用EasySep单核细胞富集试剂盒(目录号19059,STEMCELL Technologies,Tukwila,Washington)富集单核细胞，并以2.5x106个细胞/ml的浓度重悬于单核细胞培养基[RPMI(目录号21870-016,LifeTechnologies,Carlsbad,CA)，5％FCS(目录号SH30071.03,Hyclone,Logan,UT)，1mM丙酮酸钠(目录号13-115E,Lonza,Walkersville,MD)，100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素(目录号P0781,Sigma,St.Louis,MO)，1x Glutamax(目录号35050-061,Life Technologies,Carlsbad,CA)和1x非必需氨基酸(目录号13-114E,Lonza,Walkersville,MD)]。将在单核细胞培养基中稀释的10μL的IL-36α或IL-36γ细胞因子，添加到384孔测定平板中。IL-36细胞因子的最终测定浓度范围为6.25-50nM。将纯化的单克隆抗体稀释至单核细胞培养基中至600nM浓度，然后2倍系列稀释。将10μL的稀释的抗体转移到测定平板中，以达到以200nM开始的最终测定浓度，然后2倍系列稀释。将IL-36Ra用作IL-36受体拮抗作用的阳性对照，并且以与IL-36单克隆抗体相似的方式处理，尽管最终测定浓度通常始于1000nM，然后是2倍系列稀释。将10μL的单核细胞悬浮液添加到平板，最终细胞数为25,000个细胞/孔。将测定平板在5％CO2、37℃孵育20小时。对于给定的实验，将测定培养物上清液稀释2倍、2.5倍或5倍以测量分泌的IL-8(目录号88-8086-88,Life Technologies,Carlsbad,CA)。将来自IL-8ELISA的O.D.450值作图，并且使用GraphPad PRISMTM软件计算IC50值。
被测试的抗体拮抗IL-36α和IL-36γ两者，并且该活性的效能通常大于对IL-36Ra所观察到的效能(参见图5A至5D，表14)。
表14.在原代人单核细胞功能测定中，拮抗人IL-36α和IL-36γ的抗体和IL-36Ra的IC50值
Figure BDA0002992427630003181
注意：n.t.意指未经测试。
将原代食蟹猕猴角化细胞测定用于评价所选抗体的拮抗剂活性。将原代食蟹猕猴角化细胞(目录号CM-C-KRT,Zen-Bio,Research Triangle Park,NC)培养于CellnTec培养基(目录号CnT-07,CellnTec,Bern,瑞士)。用从200nM开始的食蟹猕猴IL-36α或食蟹猕猴IL-36γ的滴定刺激细胞，然后稀释2倍。在某些条件，这是在200nM m/h 144D464A、200nMm/h 144L124B、200nM m/h144L249B、或200nM的人IL-36Ra的存在下进行。将测定平板在5％CO2、37℃孵育20小时。然后收获培养物上清液并稀释10倍，用于按照制造商的说明使用R&DDuoSet IL-8ELISA试剂盒(目录号DY208,R&D Systems,Minneapolis,Minnesota)测量IL-8。为适应384孔筛选形式，ELISA试剂盒试剂以15μL体积使用。将来自IL-8ELISA的O.D.450值，使用GraphPad PRISMTM软件作图。O.D.450值的降低被解释为拮抗剂活性的例证。使用食蟹猕猴IL-36α或食蟹猕猴IL-36γ的滴定刺激的食蟹猕猴角化细胞，以剂量依赖性方式分泌IL-8，如通过IL-8ELISA中的O.D 450值所测量的。当在IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂单克隆抗体或人IL-36Ra的存在下进行刺激时，分泌的IL-8的量显著减少(参见图6A-6B)。
该数据证实，IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体可拮抗原代食蟹猕猴细胞的食蟹猕猴IL-36α和食蟹猕猴IL-36γ刺激。
6.4实施例4：IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂单克隆抗体的作用机理研究
6.4.1同时抑制人IL-36α和IL-36γ
利用改良的HaCaT测定法来证明IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂单克隆抗体同时拮抗IL-36α和IL-36γ的能力。用从左至右或从上至下分别滴定2倍的IL-36α和IL-36γ浓度的基质刺激HaCaT细胞。给定细胞因子的浓度范围为50nM至0.39nM，共8种不同的浓度。在一系列嵌合小鼠/人(m/h)144D464A抗体(150nM、100nM、50nM、25nM、1nM、0nM)或IL-36Ra(500nM、250nM、100nM、50nM、10nM、0nM)的存在下，用细胞因子的这种基质刺激HaCaT细胞。将测定平板在5％CO2、37℃孵育20小时。然后收集测定培养物上清液，稀释5倍，并测量分泌的IL-8。O.D.450值的降低被解释为拮抗剂活性的例证。在对应于较深颜色的具有较高O.D值(即，较高的IL-8水平)的灰度热图中描述了O.D.值。
嵌合单克隆抗体m/h 144D464A被用作代表性的IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂单克隆抗体。通过这种测定，我们可以观察到m/h 144D464A抑制从用IL-36α和IL-36γ同时刺激的细胞中分泌IL-8的能力。IL-36Ra还可以抑制用IL-36α和IL-36γ同时刺激的细胞中的IL-8分泌，尽管需要更高浓度的IL-36Ra以表现出与针对m/h 144D464A观察到的相似的拮抗剂活性(参见图7)。
6.4.2 IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂单克隆抗体不干扰IL-36β信号转导
利用改良的HaCaT测定法来确定单独的或与IL-36α或IL-36γ预复合的IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体是否影响IL-36β信号转导活性。HaCaT细胞用始于200nM的滴定人IL-36β刺激，然后稀释2倍。在一些条件下，这是在300nM的m/h 144D464A、已与25nM的IL-36α预先孵育的300nM的m/h144D464A、已与50nM的IL-36γ预先孵育的300nM的m/h 144D464A、或300nM的IL-36Ra的存在下进行的。对照包括在25nM IL-36α、25nM IL-36α加300nM m/h144D464A、50nM IL-36γ或50nM的IL-36γ加300nM m/h 144D464A的存在下培养的HaCaT细胞。将测定平板在5％CO2、37℃孵育20小时。然后收集测定培养物上清液，稀释5倍，并测量分泌的IL-8。O.D.450值的降低被解释为拮抗剂活性的例证。
在该测定中，嵌合单克隆抗体m/h 144D464A用作代表性的IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂单克隆抗体。实验对照表明，25nM的IL-36α或50nM的IL-36γ可以刺激HaCaT细胞中的IL-8产生。当将IL-36α和IL-36γ与300nM的m/h 144D464A预先孵育时，IL-8分泌被抑制。这表明，这些预先形成的抗体-细胞因子复合物不活化IL-36受体(图8A)。当用IL-36β的滴定刺激HaCaT细胞时，以剂量依赖方式分泌IL-8。向培养条件添加300nM的IL-36Ra，可以抑制分泌的IL-8的量。然而，m/h 144D464A、与IL-36α预复合的m/h 144D464A、与IL-36γ预复合的m/h 144D464A，均不能抑制由IL-36β诱导的IL-8分泌。这些结果指示，单独的或与IL-36α或IL-36γ预复合的IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体不影响IL-36β信号转导活性(图8B)。
6.4.3 IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂单克隆抗体可以与IL-36Ra协同抑制IL-36α、IL-36β和IL-36γ的活性
利用改良的HaCaT测定来证明IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂mAb不干扰IL-36Ra拮抗剂活性，并且它们可与IL-36Ra协同抑制IL-36α、IL-36β和IL-36γ。用人IL-36α、IL-36β和IL-36γ的单独滴定，或全部3种的组合，来刺激HaCaT细胞。IL-36α滴定始于7.5nM，然后2倍系列稀释。IL-36β滴定始于1.875nM，然后2倍系列稀释。IL-36γ滴定始于30nM，然后2倍系列稀释。在一些情况下，该滴定是在100nM的m/h 144D464A、100nM的IL-36Ra、或100nM m/h144D464A和100nM IL-36Ra的组合的存在下完成的。将测定平板在5％CO2、37℃孵育20小时。然后收集测定培养物上清液，并稀释5倍，并测量分泌的IL-8。O.D.450值的降低被解释为拮抗剂活性的例证。
在该测定中，嵌合单克隆抗体m/h 144D464A用作代表性的IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂单克隆抗体。当用滴定的IL-36α刺激HaCaT细胞时，以剂量依赖方式分泌IL-8。当在IL-36Ra、m/h 144D464A、或IL-36Ra和144D464A的混合物的存在下完成刺激时，IL-8分泌被抑制。抑制活性可以如下排序：IL-36Ra+m/h 144D464A>m/h 144D464A>IL-36Ra(图9A)。当用滴定的IL-36β刺激HaCaT细胞时，以剂量依赖方式分泌IL-8。当在m/h 144D464A的存在下完成刺激时，未观察到IL-8的抑制。当在IL-36Ra或IL-36Ra+m/h144D464A的存在下完成刺激时，IL-8分泌被抑制，并且两种条件之间的抑制程度相等(图9B)。该数据指示，仅IL-36Ra可抑制IL-36β活性，并且m/h144D464A不干扰IL-36Ra的拮抗剂活性。
当用滴定的IL-36γ刺激HaCaT细胞时，以剂量依赖方式分泌IL-8。当在IL-36Ra、m/h 144D464A、或IL-36Ra和m/h 144D464A的混合物的存在下完成刺激时，IL-8分泌被抑制。抑制活性可以如下排序：IL-36Ra+m/h 144D464A >m/h 144D464A >>IL-36Ra(图9C)。当用组合滴定的IL-36α+IL-36β+IL-36γ刺激HaCaT细胞时，以剂量依赖方式分泌IL-8。当在IL-36Ra、m/h 144D464A、或IL-36Ra和m/h 144D464A的混合物的存在下完成刺激时，IL-8分泌被抑制。抑制活性可以如下排序：IL-36Ra+m/h 144D464A>>m/h 144D464A＝IL-36Ra(图9D)。这指示IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂单克隆抗体可与IL-36Ra协同作用，以更有效力地抑制所有IL-36受体激动剂。
6.5实施例5：抗体亲和力测定
在Biacore测定中进一步测试了抗体与重组人或食蟹猕猴IL36α、IL-36γ的结合。为了动力学分析IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体的结合活性，通过表面等离子体共振法(SPR)测量了与人和食蟹猕猴IL-36α和IL-36γ的结合活性。使用Biacore T200(GEHealthcare Life Sciences,Pittsburgh,Pennsylvania)进行所有以下操作。
为了确定对人和食蟹猕猴IL36的抗体亲和力，通过胺偶联化学将重组抗体固定在CM5传感器芯片(目录号BR100012,GE Healthcare Life Sciences,Pittsburgh,Pennsylvania)上。具体地，通过将大约2000RU的重组抗体固定在芯片上来进行动力学测定。此后，从高浓度连续稀释的重组人或食蟹猕猴IL36蛋白，以30μL/min的流动速率在芯片上运行420秒。解离时间为3600秒，并且在25℃测量结合曲线。用10mM甘氨酸pH 1.5进行再生持续30秒。或者，使用称为“单循环动力学”的方法，在单个循环中以增加的浓度注射分析物，在两次注射之间没有再生表面。具体地，通过胺偶联化学将抗人或抗小鼠Fc特异性抗体固定在CM5传感器芯片(目录号BR100012,GE Healthcare Life Sciences,Pittsburgh,Pennsylvania)上。此后，以约200RUs捕获IL-36α和IL-36γ双重拮抗小鼠/人嵌合或小鼠抗体，然后注射浓度增加的重组人和食蟹猕猴IL36蛋白。缔合时间为300秒，最终解离时间为1200秒。在分析物注射结束时，用3M MgCl2(抗人Fc捕获抗体)再生表面30秒，或用10mM甘氨酸-HCl pH 1.7再生表面180秒(抗小鼠IgG捕获抗体)。
通过减去来自没有固定的配体和缓冲液空白的参考流动池的信号，来双重参考原始数据。获得对应于每个浓度的传感图。使用设备随附的分析软件Biacore T200评价软件，采用1:1Langmuir拟合模型进行分析，从而计算重组IL36蛋白的缔合速率常数ka[M-1s-1]和解离速率常数kd[s-1]。
作为使用1:1Langmuir拟合模型的结果，确定了示例性抗体的平衡解离常数KD(kd/ka)(参见下表15-16)。
表15.IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体与人和食蟹猕猴IL-36α的结合动力学
Figure BDA0002992427630003221
Figure BDA0002992427630003231
注意：n.t.意指未经测试
表16.IL-36α和IL-36γ双重拮抗剂抗体与人和食蟹猕猴IL-36γ的结合动力学
Figure BDA0002992427630003232
注意：n.t.意指未经测试
6.6实施例6：人源化抗体的制备
6.6.1人源化144D464A抗体的VL和VH的设计
首先，按以下方式选择适合于移植144D464A VL的CDR的人抗体的VL的FR氨基酸序列。
使用由美国国家生物技术信息中心(The National Center for BiotechnologyInformation)提供的BLASTP数据库，搜索与144D464A的VL具有高度同源性的人抗体序列。作为结果，GeneBank ID AAA59034.1的人抗体序列显示出与144D464A的最高同源性，并且因此选择了该抗体的FR。通过将144D464A的CDR L1、CDR L2和CDR L3的氨基酸序列(分别为SEQ ID NOs:83、84和85)移植到人抗体FR序列的合适位置来设计LV0(SEQ ID NO:114)。
接下来，以相同方式选择适合于移植144D464A VH的CDR的人抗体的VH的FR氨基酸序列，使用BLASTP数据库搜索与144D464A的VH具有高度同源性的人抗体序列。GeneBank IDCAB45243.1的人抗体序列表现出与144D464A的最高同源性，因此选择了该抗体的FR。通过将144D464A的CDR H1、CDR H2和CDR H3的氨基酸序列(分别为SEQ ID NOs:68、69和70)移植到人抗体FR序列的合适位置来设计HV0(SEQ ID NO:115)。
为了避免由人源化引起的结合活性的减小，可以替换FR中这样的氨基酸残基，其在人抗体和由啮齿动物获得的抗体之间不同并且被认为影响结合活性。
选择与144D464A的氨基酸残基不同的LV0和HV0中的氨基酸残基。另外，通过使用MOE(MOLSIS)比较三维结构来鉴定预期会影响结合活性的氨基酸。作为结果，可影响结合活性的氨基酸选自下组：其包括LV0的氨基酸序列中的Pro 8、Val 12、Phe 38、Gln 40、Ala45、Pro 46、Arg 47、Thr 48、Ser 51、Trp 59、Thr 60、Leu 77和Asp 87，以及HV0的氨基酸序列中的Gln 1、Lys 12、Val 20、Tyr 27、Thr 28、Phe 29、Thr 30、Arg 38、Met 48、Arg 67、Val 68、Ala 72、Ser 77、Ala 79、Met 81、Leu 83和Val 117。
设计了包含多种修饰的人源化抗体的VL和VH，其中上述选择的氨基酸残基中的至少一个氨基酸残基被存在于144D464A抗体的相同位置的一个氨基酸残基替换。具体而言，在VL的情况下，引入选自以下的至少一个替换：Pro 8替换为Ser、Val 12替换为Thr、Phe 38替换为Val、Gln 40替换为Glu、Ala 45替换为Leu、Pro 46替换为Phe、Arg 47替换为Ala、Thr48替换为Gly、Ser 51替换为Gly、Trp 59替换为Gly、Thr 60替换为Val、Leu 77替换为Ile和Asp 87替换为Ile。在VH的情况下，引入选自以下的至少一个替换：Gln 1替换为Glu、Lys 12替换为Val、Val 20替换为Leu、Tyr 27替换为Phe、Thr 28替换为Asn、Phe 29替换为Ile、Thr30替换为Lys、Arg 38替换为Lys、Met 48替换为Ile、Arg 67替换为Lys、Val 68替换为Ala、Ala 72替换为Thr、Ser 77替换为Asp、Ala 79替换为Val、Met 81替换为Leu、Leu 83替换为Phe和Val 117替换为Leu。
通过以上述方法修饰LV0(SEQ ID NO:114)，设计了以下VL区：LV3a(SEQ ID NO:116)、LV3b(SEQ ID NO:117)、LV4a(SEQ ID NO:118)、LV4b(SEQ ID NO:119)、LV5a(SEQ IDNO:120)、LV5b(SEQ ID NO:121)、LV5c(SEQ ID NO:122)、LV5d(SEQ ID NO:123)、LV5e(SEQID NO:124)、LV6a(SEQ ID NO:125)、LV6b(SEQ ID NO:126)、LV6c(SEQ ID NO:127)、LV6d(SEQ ID NO:128)、LV6e(SEQ ID NO:129)、LV7a(SEQ ID NO:130)、LV7b(SEQ ID NO:131)、LV8(SEQ ID NO:132)、LV9(SEQ ID NO:133)、LV11(SEQ ID NO:134)、LV12(+1)(SEQ ID NO:135)、LV9are(SEQ ID NO:136)、LV10re(SEQ ID NO:137)和LV11re(SEQ ID NO:138)(参见图10)。
通过以上述方法修饰HV0(SEQ ID NO:115)，设计了以下VH区：HV1(SEQ ID NO:139)、HV4a(SEQ ID NO:140)、HV4b(SEQ ID NO:141)、HV4c(SEQ ID NO:142)、HV5a(SEQ IDNO:143)、HV5b(SEQ ID NO:144)、HV5c(SEQ ID NO:145)、HV5d(SEQ ID NO:146)、HV5e(SEQID NO:147)、HV5f(SEQ ID NO:148)、HV5g(SEQ ID NO:149)、HV6a(SEQ ID NO:150)、HV6b(SEQ ID NO:151)、HV6c(SEQ ID NO:152)、HV6d(SEQ ID NO:153)、HV6e(SEQ ID NO:154)、HV7a(SEQ ID NO:155)、HV7b(SEQ ID NO:156)、HV7c(SEQ ID NO:157)、HV8d(SEQ ID NO:158)、HV8e(SEQ ID NO:159)、HV10a(SEQ ID NO:160)、HV10b(SEQ ID NO:161)、HV12(SEQID NO:162)和HV17(SEQ ID NO:163)(参见图11)。
包含上述可变区的人源化144D464A抗体，由VL和VH名称的组合表示。例如，包含LV7a和HV10b、LV9are和HV10b、LV10re和HV10b以及LV11re和HV10b的人源化144D464A抗体，分别称为144D464A LV7a HV10b、144D464ALV9are HV10b、144D464A LV10re HV10b和144D464A LV11re HV10b。
6.6.2人源化144L249B的VL和VH的设计
使用6.6.1节中上述方法，通过将144L249B的CDR L1和CDR L3的氨基酸序列(分别为SEQ ID NOs:86和88)以及144D464A的CDR L2的氨基酸序列(SEQ ID NO:84)(其中一个氨基酸残基与144L249B的CDR L2的氨基酸序列(SEQ ID NO:87)不同)，移植到GeneBank IDAAA59034.1的人抗体序列的FR氨基酸序列中，来设计人源化144L249B抗体的VL的氨基酸序列。使用144D464A的CDRL2代替144L249B的CDRL2，以降低免疫原性。相似地，通过将144L249B的CDR H1、CDR H2和CDR H3的氨基酸序列(分别为SEQ ID NOs:71、69和72)，移植到GeneBank ID CAB45243.1的人抗体序列的FR氨基酸序列中，来设计人源化144L249B抗体的VH的氨基酸序列。所得的人源化VL和VH分别命名为LV0(SEQ ID NO:164)和HV0(SEQ IDNO:165)。
包含多种氨基酸修饰的人源化抗体的VL和VH，以与6.6.1节相同的方式设计。具体而言，在VL的情况下，引入选自以下的至少一个替换：Pro 8替换为Ser、Val 12替换为Thr、Phe 38替换为Val、Gln 40替换为Glu、Ala 45替换为Leu、Pro 46替换为Phe、Arg 47替换为Thr、Thr 48替换为Gly、Ser 51替换为Gly、Trp 59替换为Gly、Thr 60替换为Val、Leu 77替换为Ile和Asp 87替换为Ile。在VH的情况下，引入选自以下的至少一个替换：Gln 1替换为Glu、Lys 12替换为Val、Val 20替换为Leu、Tyr 27替换为Phe、Thr 28替换为Asn、Phe 29替换为Ile、Thr 30替换为Lys、Arg 38替换为Lys、Met 48替换为Ile、Arg 67替换为Lys、Val68替换为Ala、Ile 70替换为Leu、Ala 72替换为Thr、Ser 77替换为Asn、Met 81替换为Leu和Val 117替换为Leu。
通过修饰LV0(SEQ ID NO:164)，设计了以下VL区：LV7a(SEQ ID NO:166)、LV9(SEQID NO:167)、LV10(SEQ ID NO:168)、LV11(SEQ ID NO:169)和LV13(SEQ ID NO:170)(参见图12)。
通过修饰HV0(SEQ ID NO:165)，设计了以下VH区：HV9a(SEQ ID NO:171)、HV9b(SEQ ID NO:172)、HV10a(SEQ ID NO:173)、HV10b(SEQ ID NO:174)、HV10c(SEQ ID NO:175)、HV11(SEQ ID NO:176)和HV15(SEQ ID NO:177)(参见图13)。
包含上述可变区的人源化144L249B抗体，由VL和VH名称的组合表示。例如，包含LV7a和HV11、LV9和HV11、LV9和HV10b以及LV9和HV10c的人源化144L249B抗体，分别称为144L249B LV7a HV11、144L249B LV9 HV11、144L249B LV9 HV10b和144L249B LV9 HV10c。
6.6.3人源化抗体的核酸序列的设计
使用动物细胞中高度频繁使用的密码子，来设计编码人源化抗体的氨基酸序列的核酸序列。使用这些序列，来构建下述人源化抗体表达载体的以及进行相应抗体的表达。
6.6.4人源化144D464A和人源化144L249B表达载体的构建
可变区的DNA片段被全部合成。将每个VL的DNA片段插入基于pCI的瞬时表达载体，该载体具有编码人λ轻链恒定区的基因。将每个VH的DNA片段插入基于pCI的瞬时表达载体，该载体具有编码人重链恒定区的基因。使用制备的载体转化大肠杆菌DH5a感受态细胞(Takara)，然后制备大量的质粒用于进一步的实验。
6.6.5人源化144D464A和人源化144L249B抗体的瞬时表达
以与上述相同的方式，使用Expi293F表达系统(ThermoScientific)进行人源化抗体的瞬时表达。用于抗体轻链和抗体重链的哺乳动物表达载体，以1:2的比例相互混合。
6.6.6人源化144D464A和人源化144L249B抗体的纯化
使用MabSelect SuRe(GE Healthcare)，通过亲和纯化来纯化人源化抗体。用PBS平衡树脂后，将培养物上清液上样，并用PBS洗涤两次。
洗涤后，使用洗脱缓冲液(20mM柠檬酸,50mM NaCl,pH 3.4)洗脱抗体，并且添加中和缓冲液总量的十分之一(1mol/L磷酸，pH 7.0)。接下来，通过NAP25(GE Healthcare)用PBS进行缓冲液取代。使用Amicon超离心过滤设备(Millipore)通过超滤来浓缩所得物，并使用Nanodrop8000测量280nm处的吸光度以进行浓度确定。
6.7实施例7：人源化抗体的亲和力和中和活性
在Biacore测定中，测试了实施例6中获得的人源化抗体与重组人或食蟹猕猴IL36α和IL-36γ的结合。缔合时间设定为60秒，最终解离时间设定为600秒。使用1:1Langmuir拟合模型，确定示例性抗体的平衡解离常数KD(kd/ka)(参见下表17-18)。
表17.人源化144D464A与人和食蟹猕猴IL-36α和IL-36γ的结合动力学
Figure BDA0002992427630003271
Figure BDA0002992427630003281
表18.人源化144L249B与人和食蟹猕猴IL-36α和IL-36γ的结合动力学
Figure BDA0002992427630003282
分析了在实施例6中获得的人源化144D464A和人源化144L249B抗体的中和活性。在HaCaT测定中，针对人源化抗体的拮抗剂活性评价人源化抗体。将35μL稀释在HaCaT培养基[DMEM(目录号10313-021,Gibco))，10％FBS(目录号15140-163,Gibco)，2mM L-谷氨酰胺(目录号25030-081,Gibco)和1％PenStrep(目录号15140-160,Gibco)]中的每种抗体添加到96孔平底板(目录号167008,Nunc)中，以达到以300nM开始的最终测定浓度，然后2倍系列稀释。将35μL稀释在HaCaT培养基中的IL-36α(目录号6995-IL-010/CF,R&DSystems)或IL-36γ(目录号6835-IL-010/CF,R&D Systems)添加至测定平板，以达到10nM的最终测定浓度。将测定平板在室温下放置15分钟，然后将35μL悬浮在HaCaT培养基中的HaCaT细胞(目录号TT0020001,AddexBio)添加至测定平板，以达到35,000个细胞/孔的最终细胞数。将测定平板在5％CO2、37℃孵育24小时。然后收获培养物上清液，并通过AlphaLISA(目录号AL224C,PerkinElmer)测量上清液中分泌的IL-8的量，并且使用Excel XLFit软件计算IC50值。
人源化的144D464A抗体和人源化的144L249B抗体拮抗人IL-36α和IL-36γ(参见图14A、14B和15，以及表19和20)。
表19.HaCaT功能测定中拮抗人IL-36α和IL-36γ的人源化144D464A的IC50值
IC<sub>50</sub>(nM) 人IL-36α 人IL-36γ
LV7a HV10b 3.90 7.83
LV9are HV10b 4.51 12.52
表20.HaCaT功能测定中拮抗人IL-36α和IL-36γ的人源化144L249B的IC50值
IC<sub>50</sub>(nM) 人IL-36α 人IL-36γ
LV7a HV11 9.20 25.84
LV9 HV10b 6.61 20.68
LV9 HV10c 5.13 11.47
LV9 HV11 7.68 16.54
6.8实施例8：IL-36α-144L249BLV9HV10C FAB复合物和IL-36γ-144L249BLV9HV10C FAB复合物的结晶
为了进行结晶研究，将纯化的人源化144L249BLV9HV10c(L249B)Fab和轻微的摩尔过量的IL-36α和IL-36γ蛋白分别混合，并在室温下孵育1小时。然后将复合物浓缩至3mg/ml，并经历结晶。初始结晶轨迹在22℃和4℃下进行，并使用纳升分配液体处理机器人(ArtRobbins Phenix)，通过96孔形式的坐滴(sitting drop)蒸气扩散法，在800种不同的结晶条件(JCSG core+，1-4，Wizard，MB套件(suite)和PEG离子筛)上进行了测试。通过悬滴(hanging drop)法和坐滴法，通过在4℃平衡1.2μl的蛋白质(50mM HEPES，pH 7.0和150mMNaCl)和0.8μl的储液，手动进行结晶条件的优化。
IL-36α–L249B Fab复合物的晶体在多种条件下生长超过7天，但使用沉淀剂2M硫酸铵、0.2M硫酸锂和0.1M CAPS,pH 10.5，并且在添加剂30％蔗糖存在下，晶体通过悬滴法在4℃生长超过15天并生成高质量衍射。将所有晶体在液氮中于含有20％甘油的结晶缓冲液中进行快速冷却，以进行后续数据收集。
IL-36γ–L249B Fab复合物的晶体在具有PEG作为共同沉淀剂的多种条件下生长超过3天。在由0.2M柠檬酸钾三碱一水合物和20％W/V PEG 3350组成的孔溶液中，通过坐滴法在4℃生成的晶体并生成了高质量衍射。在衍射之前，通过将这些晶体浸入Paratone油和石蜡油(1:1比例)的混合物中，冷冻保护晶体，并在液氮中进行快速冷却，以进行后续数据收集。
IL-36α–L249B Fab复合物的晶体的天然X射线衍射数据，在
Figure BDA0002992427630003304
的波长、100K温度，使用Dectris EIGER 16M检测器，在斯坦福(Stanford)同步加速器辐射光源(SSRL)光束线14-1处远程收集。以0.1°振幅和5秒曝光时间收集衍射数据图像。数据图像在HKL 3000程序包中被索引、积分和缩放至整体分辨率为
Figure BDA0002992427630003301
(参见Kabsch,W.(2010)Integration,scaling,space-group assignment and post-refinement.Acta CrystallographicaSection D:Biological Crystallography 66,133-144)。IL-36α–L249B Fab复合物属于H32空间群，其晶胞尺寸为：
Figure BDA0002992427630003302
α＝90°,β＝90°,γ＝90°。
IL-36γ–L249B Fab复合物的衍射数据，在
Figure BDA0002992427630003303
的波长、100K的温度，使用PILATUS 6M PAD检测器，在SSRL光束线9-2处，远程收集。以0.15°振荡和1-3秒曝光时间，收集不同晶体的数据图像。通过合并AUTOPROC(Vonrhein,C.,Flensburg,C.,Keller,P.,Sharff,A.,Smart,O.,Paciorek,W.,Womack,T.,&Bricogne,G.(2011),Data processingand analysis with the autoPROC toolbox.Acta Crystallographica Section D 67,293-302)和STARANISO(Tickle,I.J.,Flensburg,C.,Keller,P.,Paciorek,W.,Sharff,A.,and Vonrhein,C.,Bricogne,G.(2018),STARANISO.Cambridge,United Kingdom:GlobalPhasing Ltd.)中的四个单独的本机数据集，生成多晶体数据集。数据处理后的总分辨率为
Figure BDA0002992427630003311
IL-36γ–L249B Fab复合物属于空间群P 64 2 2，晶胞尺寸为：
Figure BDA0002992427630003312
α＝90°,β＝90°,γ＝120°。
使用先前报道的IL-36γ结构(PDB 4IZE)作为搜索模型，通过分子置换方法PHASER-MR(参见Rossmann,M.G.(1972)The Molecular Replacement Method,Gordon&Breach,New York；Vagin,A.A.,and Teplyakov,A.(1997),MOLREP:an automatedprogramm for molecular replacement.J.Appl.Cryst.30,1022-1025)，确定IL-36α在不对称单元中的位置。相似地，也可以分别使用小鼠IgG1 Fab F124(抗乙型肝炎表面抗原MAb，PDB ID 1F11)的L链和H链作为起始搜索模型，通过分子置换(molecularreplacement)方法来鉴定L249BFab的位置。从通过MR获得的初始阶段开始，通过迭代模型建立的周期逐步建立L249B Fab模型和IL-36α，并使用COOT函数(参见Emsley,P.,andCowtan,K.(2004)Coot:model-building tools for molecular graphics.ActaCrystallogr DBiol Crystallogr 60,2126-2132；Emsley,P.,Lohkamp,B.,Scott,W.G.,and Cowtan,K.(2010)Features and development of Coot.Actacrystallographica.Section D,Biological crystallography 66,486-501)作为CCP4套件的一部分(参见Potterton,E.,Briggs,P.,Turkenburg,M.,and Dodson,E.(2003),Agraphical user interface to the CCP4 program suite.Acta Crystallogr.D59,1131-1137；以及Winn,M.D.,Ballard,C.C.,Cowtan,K.D.,Dodson,E.J.,Emsley,P.,Evans,P.R.,Keegan,R.M.,Krissinel,E.B.,Leslie,A.G.,McCoy,A.,McNicholas,S.J.,Murshudov,G.N.,Pannu,N.S.,Potterton,E.A.,Powell,H.R.,Read,R.J.,Vagin,A.,and Wilson,K.S.(2011),Overview of the CCP4 suite and current developments.Actacrystallographica.Section D,Biological crystallography 67,235-242)，手动将其构建到Fo-Fc电子密度图中。使用具有严格非晶体对称约束的PHENIX/REFMAC(参见Murshudov,G.N.,Vagin,A.A.,and Dodson,E.J.(1997)Refinement of macromolecularstructures by the maximum likelihood method.Acta Crystallogr.D53,240-255)进一步精修模型，并进行TLS精修。在精修的最后阶段，添加了水分子。将IL-36α–L249B Fab复合物的最终结构精修为残差因子R/Rfree＝22.0/26.7。
相应地，也可使用IL-36γ结构(PDB 4IZE)和小鼠IgG1 Fab F124(抗乙型肝炎表面抗原MAb，PDB ID 1F11)作为搜索模型，在PHASER-MR中通过分子置换来确定IL-36γ–L249B Fab复合物的结构。使用具有严格非晶体对称约束和基本TLS精修的PHENIX/REFMAC和BUSTER(参见Bricogne G.,B.E.,Brandl M.,Flensburg C.,Keller P.,Paciorek W.，和Roversi P,S.A.,Smart O.S.,Vonrhein C.,Womack T.O..(2017)BUSTER版本XYZ)，进一步精修MR输出。通过具有程序COOT和ARP/wARP函数(参见Morris,R.J.,Perrakis,A.,andLamzin,V.S.(2003)ARP/wARP and automatic interpretation of protein electrondensity maps.Methods Enzymol 374,229-244)作为CCP4套件的一部分的迭代手动模型建立的周期，逐渐在Fo-Fc电子密度图中建立IL-36γ–L249B Fab复合物中IL-36γ的表面暴露环和L249B Fab的恒定区。添加水分子，并将最终结构精修为残差因子R/Rfree＝23.5/27.8。
两种复杂结构均具有良好的几何形状，有4个残基(0.89％)为离群值，而97.6％残基在拉氏(Ramachandran)图的有利区域中。数据收集和精修统计汇总在表21中。所有图片均在PyMOL中制作(参见DeLano,W.(2002)The PyMOL Molecular Graphics System)。
为了理解人源化L249B Fab对IL-36α和IL-36γ的结合方式，分别确定了IL-36α-L249B Fab复合物和IL-36γ-L249B Fab复合物的晶体结构。通过分子置换法确定结构，并将其分别精修至2.7和
Figure BDA0002992427630003321
的分辨率。在两种复合物中，Fab可变结构域和细胞因子之间的相互作用在电子密度中均清晰可见。
晶体中的不对称单元含有两个拷贝的IL-36α-L249B Fab复合物，并且在每个拷贝中一个IL-36α分子与一个Fab结合，导致1:1排列(图16，A部分)。在这两个拷贝中，IL-36α(1-153氨基酸)和Fab可变结构域(重链的1-120氨基酸和轻链的1-110氨基酸)的结构排列良好，而Fab恒定结构域的一些表面暴露环及其C末端区域(重链的136-143、194-197、223-228残基和轻链的151-154、210-215残基)是无序的，这可能是由于其更大的柔韧性。在该复合物中，IL-36α的β-三叶折叠是由12个通过环连接的β链保守的。IL-36α利用连接β4–β5链和β7–β8链的环中的残基与Fab的重链(HC)和轻链(LC)的可变结构域的互补决定区(CDR)环相互作用。L249B Fab的可变区与总共14个不连续的IL-36α残基结合。结合界面主要由HC残基形成，其总掩埋表面积为
Figure BDA0002992427630003322
界面面积为
Figure BDA0002992427630003323
而LC掩埋了总共
Figure BDA0002992427630003324
而界面面积减小
Figure BDA0002992427630003325
HC还支配了所有相互作用，并结合12个IL-36α残基(His 46、Glu 48、Thr49、Leu 50、Lys 85、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro 96、Val 97、Lys 98和Phe 100)，而LC仅接触4个IL-36α残基(Arg 45、Asn 92、Gln 93和Pro 94)。在结合界面上，Gln 93和Pro 94是与L249B Fab的重链和轻链都相互作用的IL-36α的两个残基(图18，A部分)。
详细检查显示，在整个结合界面形成极性、静电(盐桥)和疏水性接触，并且在复合物形成中起主要作用。在整个界面，IL-36α和L249B Fab残基都主要利用其侧链原子彼此相互作用。另外，还观察到细胞因子的主链羰基和酰胺基与抗体之间几乎没有氢键合接触。该界面可分为四个主要结合位点，其中，3个位点由HC CDR环H1、H2和H3形成，而第4个结合位点由LC CDR环L1和L3介导(图16，B部分)。L2是不与IL-36α的任何残基相互作用的唯一L249B Fab的CDR环。
所有三个HC CDR参与IL-36α和L249B Fab之间的复合物形成，形成11个H键和6个盐桥的错综复杂H键网络。位点1含有一小片相互作用界面，其中，H1环残基Tyr 33和Tyr 35募集其羟基(OH)基团，以促进与IL-36α的Pro 96的主链羰基和Glu 95的侧链羧基各自的氢键合接触。位点2是保持细胞因子和Fab分子之间关键的盐桥接触的主要相互作用区域。在该区域，H2环的Arg 50和Arg 59与IL-36α的Glu 95形成盐桥，而Asp 52与Lys 98(IL-36α)形成盐桥接触。另外，Arg 59还介导与IL-36α的Pro 94的主链羰基和His 46的侧链咪唑环的氢键合接触。另外，在该位点，Thr 57与IL-36α的Thr 49和Glu 48具有氢键合距离，而Ile55经由疏水接触与Leu 50(IL-36α)相关联。位点3还涵盖了广泛的界面，其中与极性相互作用一起，鉴定了H3环残基和IL-36α之间的疏水接触。在该位点，L249B Fab的Gly 103和Ser104的主链羰基分别与IL-36α的Lys 85和Gln 93的侧链原子形成氢键合接触。Lys 85还与Tyr 101的羟基(H3环)形成多于一次的极性接触。除这些极性接触外，我们还发现了H3环残基Tyr 99、Tyr 101和Phe 106与IL-36α残基Pro 94、Val 97和Phe 100之间的一片疏水相互作用。
与在HC和IL-36α之间观察到的扩展界面相反，由位点4处的LC残基介导的相互作用界面相对较小，仅在该区域检测到三个极性接触。首先，L1环的Tyr 34利用其羟基基团与IL-36α的Asn 92和Gln 93形成氢键。另外，L3环的Ser95的主链羰基与IL-36α的Arg 45的酰胺氮具有氢键合距离。在该区域，IL-36α残基Pro 94介导与(L3)的Tyr 34(L1)和Trp 93的疏水接触。
总而言之，IL-36α残基Glu 95和Lys 98对于促进关键的静电相互作用以及促进多种疏水接触的Pro 94和Val 97至关重要；完全牢固地稳定了IL-36α-L249BFab复合物的形成。
晶体的不对称单元含有一个拷贝的IL-36γ–L249B Fab复合物。在最终结构中，除了一些柔性环和C末端(HC的138-141氨基酸；HC的224-228氨基酸；和LC的210-215氨基酸)以外，大多数L249B Fab结构都排列良好。但是，我们尚未观察到明显的电子密度，该密度对应于远离抗体结合位点的IL-36γ(20-29氨基酸；136-144氨基酸)的一些表面暴露环，这可能是由于晶体堆积所致。与L249B Fab复合的IL-36γ的整体结构类似于未结合的IL-36γ(PDB 4IZE)，在其表面暴露的环中具有最小的结构适应性(来自两个分子的115个Cα原子之间的均方根偏差值(RMSD)为
Figure BDA0002992427630003341
)。这建议，抗体结合在细胞因子的整个结构中不引起任何主要的构象变化。同样地，与L249B Fab复合的IL-36α和IL-36γ的结构叠加也导致在具有相同拓扑结构和相似抗体结合区的110个CA原子之间的总RMSD值小于0.7。
通过比对结构相似的细胞因子分子，将IL-36α–L249B Fab复合物的结构与IL-36γ–L249B复合物比较。结构叠加表明，两种复合物在419个Cα原子之间的RMSD值均约为
Figure BDA0002992427630003342
其中两种细胞因子和L249B Fab的可变区均完美重叠。然而，在两种复合物中，恒定区在其相对于可变结构域的相对取向方面都有一定程度的偏离(图17A)。与IL-36α相似，IL-36γ也结合由来自Fab的HC和LC的CDR环形成的深缝(图17B)。HC(10个残基)与IL-36γ(9个残基)之间的相互作用界面面积为
Figure BDA0002992427630003343
而IL-36γ与LC之间的界面涉及4个残基，每个的总相互作用面积为
Figure BDA0002992427630003344
表示HC在稳定IL-36γ–L249B复合物形成中具有较高的贡献(图18，B部分)。
我们的结构比对揭示了，IL-36α和IL-36γ在识别相似的表位方面具有类似的Fab结合界面，大多数Fab相互作用残基在它们之间保守。相应地，L249BFab也利用相似的残基结合这两种细胞因子(图17，C部分)。IL-36α–L249BFab复合物的位点1和位点2区域可见的大多数相互作用，都在IL-36γ–L249BFab复合物中得到很好的维持，除了位点2的两个不同。首先，Arg 59和His 46之间的氢键合接触在IL-36γ–L249B Fab复合物中缺失，因为IL-36γ具有Tyr46，而Tyr 46的羟基太远以至于无法与Arg 59接触。其次，在IL-36γ中，由于由于环跨越残基Glu 48和Ala 49的轻微结构适应，Thr 57(H2环)和Glu 48之间的氢键合缺失。相反，在该区域Ala 49与Thr 57(H2)形成额外的疏水接触。同样地，在位点3保留关键相互作用的同时，Gln 93(IL-36γ)的侧链采用了不同的旋转异构体，以防止与周围残基的空间冲突，为此IL-36γ缺乏与H3环的Ser 104的相互作用。另外，IL-36γ–L249B Fab复合物的H3环的构象变化，防止Tyr 99(H3)与Pro 94(IL-36γ)之间的疏水相互作用。
总的来说，在IL-36α和IL-36γ中HC结合界面都是可比较的，但在用于形成单个接触的特定氨基酸的上下文中，两种细胞因子在LC结合方面存在相当大的变化。L249B Fab的LC保留了与在IL-36α–L249B Fab复合物中未观察到的IL-36γ残基Gln 93和Tyr 46的独特相互作用，从而与IL-36α相比，形成了更多与IL-36γ的氢键合接触。首先，IL-36γ的Gln93的侧链的独特取向使其更接近L1环的Tyr 34的羟基以形成氢键合接触。其次，IL-36γ的Tyr 46的羟基(IL-36α中的His 46)与L3环的Ser 95和Asn 96形成氢键。
在此，在IL-36γ–L249B Fab复合物中缺失在IL-36α的Arg 45和L3的Ser95之间可见的氢键，因为IL-36γ具有Lys 45并且赖氨酰基团太短以至于无法与L249B Fab残基接触。尽管在IL-36α–L249B Fab复合物和IL-36γ–L249BFab复合物中LC区域处的极性界面不同，但LC残基和细胞因子之间的疏水网络在两种复合物中都是保守的。
总而言之，与IL-36α–L249B Fab复合物相比，IL-36γ–L249B Fab复合物中LC区域的贡献明显更高。表22和表23总结了IL-36α或IL-36γ与L249BFab的重链/轻链区之间的相互作用。
表21.IL-36α–L249B Fab复合物和IL-36γ–L249B Fab复合物的数据收集和精修统计
Figure BDA0002992427630003351
Figure BDA0002992427630003361
表22.IL-36α与L249B Fab的重链/轻链区之间的相互作用(IL-36α与L249B Fab之间的表面接触使用PISA服务器计算)
Figure BDA0002992427630003362
Figure BDA0002992427630003371
Figure BDA0002992427630003381
*S.B表示盐桥接触。
表23.IL-36γ与L249B Fab的重链/轻链区之间的相互作用(IL-36γ与L249B Fab之间的表面接触使用PISA服务器计算)
Figure BDA0002992427630003382
Figure BDA0002992427630003391
6.9实施例9：IL-36α-144D464A FAB复合物和IL-36γ-144D464A FAB复合物的结晶
将纯化的嵌合小鼠/人144D464A Fab(D464A)与IL-36α和IL-36γ蛋白分别以1:1化学计量比混合，浓缩至3.2mg/ml，然后经历结晶。两种复合物的初始结晶试验，使用纳米升分配液体处理机器人(Phenix,Art Robbins Ltd.)在96孔格式进行。在4℃和22℃通过坐滴蒸气扩散法测试了超过600种不同的可商购的结晶筛选(JCSG core+,JCSG core 1-4screens,Sigma)。通过悬滴法和坐滴法手动进行所有结晶条件的优化。IL-36α-464Fab的晶体在具有PEG 6000作为共同沉淀剂的多种条件中生长超过7天。在4℃和22℃，通过平衡1.2μl的蛋白质(含3.6mg/ml IL-36α-D464A Fab复合物的50mM HEPES，pH 7.0和150mMNaCl)和0.8μl的储液，进一步改善所有这些结晶条件。在所有条件中，在4℃通过坐滴法在由20％W/V PEG 6000、0.1M HEPES和1.0M氯化锂组成的孔溶液中生成的晶体，产生了高质量的衍射。在另一方面，通过平衡含有1.5μl的蛋白复合物(含3.2mg/ml IL-36γ-D464AFab复合物的50mM HEPES，pH 7.0和150mM NaCl)和1μl的储液(含有20％(w/v)PEG 3000、0.1M咪唑(pH 8.0)和0.2M乙酸锌，相对于1ml的储液)，在4℃通过悬滴蒸气扩散法生长用于X射线衍射实验的IL-36γ-D464A Fab复合物的晶体。衍射之前，所有晶体通过在含有20％甘油的母液中浸渍冷冻保护，并在液氮中快速冷却用于随后的数据收集。
与上述实施例8相似地进行数据收集和精修。更具体地，所有晶体的原始X射线衍射数据，在
Figure BDA0002992427630003401
的波长和100K温度，使用PILATUS 6M PAD检测器，在斯坦福同步加速器辐射光源光束线9-2(Stanford Synchrotron Radiation Light Source beamline 9-2)处远程收集。两种复合物的衍射数据图像，以0.15度振荡和1秒曝光时间收集。对于IL-36α-D464A Fab复合物和IL-36γ-D464A Fab复合物，数据图像在HKL 2000程序包中索引、积分和缩放至
Figure BDA0002992427630003402
的总分辨率。两种复合物均属于空间群P21，晶胞尺寸分别为：
Figure BDA0002992427630003403
α＝90°,β＝92.49°,γ＝90°；以及
Figure BDA0002992427630003404
Figure BDA0002992427630003405
α＝90°,β＝99.12°,γ＝90°。使用先前报道的IL-36γ结构(PDB4IZE)作为搜索模型，通过分子置换方法PHASER-MR，确定IL-36α在不对称单元中的位置。相似地，还通过分子替换方法，分别使用小鼠IgG1Fab F124(抗乙型肝炎表面抗原MAb，PDB ID1F11)的L和H链作为起始搜索模型，鉴定D464A Fab的位置。从MR获得的初始阶段开始，首先通过迭代模型构建的周期逐步构建D464A Fab模型，然后使用COOT函数作为CCP4套件的一部分，将IL-36α的某些区域手动构建到Fo-Fc电子密度图中。使用具有严格非晶体对称性约束的PHENIX/REFMAC进一步精修模型。在精修的最后阶段，添加了水分子。将IL-36α-D464AFab复合物的最终结构精修至残差因子R/Rfree＝20.7/25.1。相应地，还使用从IL-36α-D464A Fab复合物获得的相信息，通过分子置换来确定IL-36γ-D464A Fab复合物的结构，并且该结构用残差因子R/Rfree＝20.3/25.2精修至
Figure BDA0002992427630003406
两种复杂的结构均具有良好的几何形状，有4个残基(0.89％)为离群值，在拉氏(Ramachandran)图的有利区域中残基为97.6％。数据收集和精修统计汇总在表24中。所有图片均在PyMOL中制作。
晶体的不对称单元含有两个拷贝的IL-36α-D464A Fab复合物。细胞因子的每个分子都与一个分子的D464A Fab结合，导致1:1排列为最小的生物单位。(图19，A部分)。在最终结构中，除了少数柔性环以外，大多数的IL-36α和D464A Fab结构均排列良好。最终模型由每个分子中D464A Fab轻链残基1-211和重链残基1-222组成。同样地，对于IL-36α残基2–151观察到适当的电子密度，并且该细胞因子表现出典型的β-三叶折叠，其由通过环连接的12条β链组成，这与所有其他IL-1家族白介素相似。在复杂结构中，IL-36α利用其环区域的残基结合在由来自重链和轻链的互补决定区(CDR)环形成的缝隙中(图19，B部分)。在该复合物中，IL-36α与D464A Fab的重链区以约
Figure BDA0002992427630003411
的界面面积广泛相互作用，而它与轻链区共享约
Figure BDA0002992427630003412
大大减少的界面面积(图19，C部分和D部分)。因此，与轻链相比，重链在与IL-36α接触中具有更高的贡献。在该界面处，来自细胞因子的总共11个残基、来自重链的10个残基和来自轻链的3个残基，参与稳定IL-36α-D464A Fab复合物。详细检查显示，极性和疏水接触分布在相互作用界面中。另外，我们还观察到Fab的重链区与IL-36α之间的关键静电相互作用(盐桥)，这些相互作用在复合物的形成中起主要作用。来自细胞因子和Fab的大部分极性残基都募集其侧链原子以参与氢键合接触，同时还观察到来自主链羰基和酰胺基团的微小贡献。通过极性和电荷相互作用主要促进IL-36α与Fab重链区(H1、H2和H3)的三个CDR环之间的结合。相反，IL-36α与轻链之间的相互作用主要经由疏水性接触发生，并且与轻链CDR1仅发现单个氢键相互作用，而与D464A Fab的L2和L3则没有。我们将结合界面分为四个主要结合位点。位点1对应于IL-36α与H1环的相互作用；位点2，IL-36α与H2环的相互作用；位点3，IL-36α与H3环的相互作用，位点4，IL-36α与D464A Fab的轻链区的相互作用。总之，IL-36α与抗体形成20个极性接触，包括9个盐桥(表25)。
位点1含有一个相对小的接触面积，其中IL-36α的Glu 95与H1环的His 35形成氢键合接触，而Pro 96的主链羰基与H1环的Tyr 33的羟基接触(图19，C部分，左图)。位点2由一个延长的界面面积组成，并且该区域通过在细胞因子和Fab分子之间形成盐桥接触来稳定IL-36α-D464A Fab复合物。首先，H2环的Arg 50和Arg 59与IL-36α的Glu 95形成盐桥，而后者也与IL-36α的Glu 48形成另一个盐桥接触。其次，H2环的Asp 52经由盐桥形成与IL-36α的Lys 98相互作用。另外，我们也已经观察到H2环的Arg 59和Thr 57与IL-36α的Pro 94、His 46、Glu 48和Thr 49之间的氢键合相互作用(图19，C部分，右图)。进一步地，在该区域中，IL-36α的Leu 50与H2环的Ile 55形成疏水接触。在位点3，H3环的Asn 104与IL-36α残基Gln 93、Asp 89和Lys 85具有氢键合距离。相似地，Lys 85也与重链CDR3环的Gly 103和Tyr101相互作用。在位点3，除极性接触外，在Tyr 101和Phe 106的芳香环与IL-36α的Val 97和Pro 94之间还存在范德华相互作用(图19，C部分，右图)。与重链区的所有三个结合位点相反，位点4的相互作用界面较小，且主要由疏水接触介导。在该区域，IL-36α的Gln 93的酰胺基氮原子与轻链CDR1环的Tyr 34的羟基基团形成氢键合接触。另外，IL-36α的Pro 94通过疏水相互作用与D464A Fab的L1和L3环的Tyr 34和Trp 93的芳香族侧链接触(图19，D部分，左图)。L2是不与任何IL-36α残基相互作用的唯一CDR。总而言之，IL-36α-D464A Fab复合物的结合界面显示，IL-36α的Glu 95是使大多数盐桥与D464A Fab接触的关键残基。进一步地，IL-36α的另外两个残基Pro 94和Gln 93与Fab的重链和轻链区相互作用，其中Pro 94负责与重链和轻链残基形成范德华相互作用。相似地，Gln 93的主链羰基与轻链相互作用，而其侧链负责与重链残基Tyr 101进行氢键合。
IL-36γ-D464A Fab复合物的晶体在不对称单元中也含有2个单独的复合物，两种拷贝彼此完美地叠加。在最终模型中，在两种复合物中重链残基1-225、轻链残基2-212和IL-36γ残基3-151是有序的。与Fab复合的IL-36γ的晶体结构几乎与先前报道的未结合的IL-36γ(PDB 4IZE)相同，并且D464A Fab的结合未引起细胞因子结构的任何构象变化。与IL-36α-D464A Fab复合物结构相似，IL-36γ也结合在由D464A Fab的重链和轻链区的CDR环形成的缝隙中(图20，A部分)。在该复合物中，IL-36γ主要经由极性和静电相互作用与D464A Fab的重链环相互作用，而很少通过极性和疏水接触与轻链CDR L1和L3相互作用(表26)。IL-36γ-D464A Fab复合物的整体结构看起来与IL-36α-D464A Fab复合物的晶体结构相似，来自两种复合物的481个CA原子之间的总均方根偏差(RMSD)值小于
Figure BDA0002992427630003421
IL-36α和IL-36γ以相同的拓扑结构共享约55％的序列相似性。IL-36α和IL-36γ的结构叠加(均与D464A Fab复合)显示，它们之间的抗体结合区是相似的。然而，连接链β3-β4、β5-β6、β6-β7和β10-β11的环显示了在两种细胞因子之间的构象变化(图20，部分B)。两种细胞因子之间的这些结构适应性是否可普遍存在或由抗体的结合诱导，仍然不确定。
两种复合物之间的结合界面的比较公开了，大多数D464A Fab相互作用残基在IL-36α和IL-36γ之间是保守的。在IL-36α和IL-36γ上的D464A Fab结合足迹显示，IL-36γ中缺少由IL-36α的His 46、Lys 85和Asp 89介导的氢键合接触，因为后者细胞因子在该区域缺乏相互作用残基(图20，C部分)。结果，尽管D464A Fab的H1环相互作用在IL-36α和IL-36γ之间是保守的，但H2环和IL-36γ之间缺少了一些极性接触，而其还存在于IL-36α-D464AFab复合物中。替换了IL-36α的His 46，IL-36γ具有酪氨酸残基(Tyr 46)，并且由于Tyr 46的芳香环的较大体积性质，随后的残基Glu 48获得与IL-36α中的取向相比完全不同的取向。此取向将Glu 48的侧链重新定位为远离H2环的Arg 59，因此，在IL-36γ-D464A Fab复合物中Glu 48和Arg 59之间的盐桥接触，在IL-36α-D464A Fab复合物中则缺失了(图20，D部分，右图)。同样地，尽管大多数H3环相互作用在两种细胞因子之间是保守的，但与Lys 85中存在的较长的赖氨酰基基团相比，IL-36γ的Gln 85的侧链(IL-36α中的Lys 85)更短。由于该替换，IL-36γ缺乏与H3环的Asn 104、Gly 103和Tyr 101的极性接触。另外，在该区域，Asn 104侧链的轻微重新取向还防止它与IL-36γ的Asp 89相互作用(图20，D部分，左图)。与重链结合相似，与D464A Fab的轻链结合区的极性和疏水性接触也保持在IL-36α和IL-36γ之间。然而，在IL-36γ-D464A Fab复合物中，轻链CDR1环的Tyr 34的羟基基团除了保持与Gln 93的保守相互作用外，还与Gly 92形成氢键合接触。
晶体学数据显示了，由IL-36α和IL-36γ共享的保守的接触残基被144L249B和144D464A结合。注意，这些残基中的几个在IL-36α(SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7)和IL-36γ(SEQ ID NO:10)之间是保守的，但与IL-36β(SEQ ID NO:9)不是保守的；这表明它们在144L249B和144D464A单克隆抗体的双重特异性中起作用。IL-36α和IL-36γ中保守的接触残基，包括Leu 50、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro 96、Val 97和Lys 98。
表24.IL-36α-D464A Fab复合物和IL-36γ-D464A Fab复合物的数据收集和精修统计
Figure BDA0002992427630003431
Figure BDA0002992427630003441
表25.IL-36α与D464A Fab的重链/轻链区之间的相互作用(IL-36α与D464A Fab之间的表面接触使用PISA服务器计算)
Figure BDA0002992427630003451
Figure BDA0002992427630003461
*S.B表示盐桥接触。
表26.IL-36γ与D464A Fab的重链/轻链区之间的相互作用(IL-36γ与D464A Fab之间的表面接触使用PISA服务器计算)
Figure BDA0002992427630003462
Figure BDA0002992427630003471
根据前述内容，应理解的是，尽管出于示例说明目的已在本文中描述了具体的实施方案，但在不脱离本文所提供内容的精神和范围的情况下可以进行多种修改。以上引用的所有参考文献均通过引用整体并入本文。
序列表
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<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> hIL36a(Q12) (全长)
<400> 1
Met Glu Lys Ala Leu Lys Ile Asp Thr Pro Gln Gln Gly Ser Ile Gln
1 5 10 15
Asp Ile Asn His Arg Val Trp Val Leu Gln Asp Gln Thr Leu Ile Ala
20 25 30
Val Pro Arg Lys Asp Arg Met Ser Pro Val Thr Ile Ala Leu Ile Ser
35 40 45
Cys Arg His Val Glu Thr Leu Glu Lys Asp Arg Gly Asn Pro Ile Tyr
50 55 60
Leu Gly Leu Asn Gly Leu Asn Leu Cys Leu Met Cys Ala Lys Val Gly
65 70 75 80
Asp Gln Pro Thr Leu Gln Leu Lys Glu Lys Asp Ile Met Asp Leu Tyr
85 90 95
Asn Gln Pro Glu Pro Val Lys Ser Phe Leu Phe Tyr His Ser Gln Ser
100 105 110
Gly Arg Asn Ser Thr Phe Glu Ser Val Ala Phe Pro Gly Trp Phe Ile
115 120 125
Ala Val Ser Ser Glu Gly Gly Cys Pro Leu Ile Leu Thr Gln Glu Leu
130 135 140
Gly Lys Ala Asn Thr Thr Asp Phe Gly Leu Thr Met Leu Phe
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<210> 2
<211> 157
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> hIL36b (全长)
<400> 2
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1 5 10 15
Ser Arg Gln Met Val Trp Val Leu Ser Gly Asn Ser Leu Ile Ala Ala
20 25 30
Pro Leu Ser Arg Ser Ile Lys Pro Val Thr Leu His Leu Ile Ala Cys
35 40 45
Arg Asp Thr Glu Phe Ser Asp Lys Glu Lys Gly Asn Met Val Tyr Leu
50 55 60
Gly Ile Lys Gly Lys Asp Leu Cys Leu Phe Cys Ala Glu Ile Gln Gly
65 70 75 80
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85 90 95
Glu Lys Lys Ala Gln Lys Pro Phe Leu Phe Phe His Asn Lys Glu Gly
100 105 110
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115 120 125
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Ile Thr Asn Asn Thr Asn Phe Tyr Leu Asp Ser Val Glu
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<211> 169
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> hIL36g (全长)
<400> 3
Met Arg Gly Thr Pro Gly Asp Ala Asp Gly Gly Gly Arg Ala Val Tyr
1 5 10 15
Gln Ser Met Cys Lys Pro Ile Thr Gly Thr Ile Asn Asp Leu Asn Gln
20 25 30
Gln Val Trp Thr Leu Gln Gly Gln Asn Leu Val Ala Val Pro Arg Ser
35 40 45
Asp Ser Val Thr Pro Val Thr Val Ala Val Ile Thr Cys Lys Tyr Pro
50 55 60
Glu Ala Leu Glu Gln Gly Arg Gly Asp Pro Ile Tyr Leu Gly Ile Gln
65 70 75 80
Asn Pro Glu Met Cys Leu Tyr Cys Glu Lys Val Gly Glu Gln Pro Thr
85 90 95
Leu Gln Leu Lys Glu Gln Lys Ile Met Asp Leu Tyr Gly Gln Pro Glu
100 105 110
Pro Val Lys Pro Phe Leu Phe Tyr Arg Ala Lys Thr Gly Arg Thr Ser
115 120 125
Thr Leu Glu Ser Val Ala Phe Pro Asp Trp Phe Ile Ala Ser Ser Lys
130 135 140
Arg Asp Gln Pro Ile Ile Leu Thr Ser Glu Leu Gly Lys Ser Tyr Asn
145 150 155 160
Thr Ala Phe Glu Leu Asn Ile Asn Asp
165
<210> 4
<211> 462
<212> DNA
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> hIL36a(R12) (截短的)
<400> 4
aaaattgaca cacctcagcg ggggagcatt caggatatca atcatcgggt gtgggttctt 60
caggaccaga cgctcatagc agtcccgagg aaggaccgta tgtctccagt cactattgcc 120
ttaatctcat gccgacatgt ggagaccctt gagaaagaca gagggaaccc catctacctg 180
ggcctgaatg gactcaatct ctgcctgatg tgtgctaaag tcggggacca gcccacactg 240
cagctgaagg aaaaggatat aatggatttg tacaaccaac ccgagcctgt gaagtccttt 300
ctcttctacc acagccagag tggcaggaac tccaccttcg agtctgtggc tttccctggc 360
tggttcatcg ctgtcagctc tgaaggaggc tgtcctctca tccttaccca agaactgggg 420
aaagccaaca ctactgactt tgggttaact atgctgtttt aa 462
<210> 5
<211> 153
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> hIL36a(R12) (截短的)
<400> 5
Lys Ile Asp Thr Pro Gln Arg Gly Ser Ile Gln Asp Ile Asn His Arg
1 5 10 15
Val Trp Val Leu Gln Asp Gln Thr Leu Ile Ala Val Pro Arg Lys Asp
20 25 30
Arg Met Ser Pro Val Thr Ile Ala Leu Ile Ser Cys Arg His Val Glu
35 40 45
Thr Leu Glu Lys Asp Arg Gly Asn Pro Ile Tyr Leu Gly Leu Asn Gly
50 55 60
Leu Asn Leu Cys Leu Met Cys Ala Lys Val Gly Asp Gln Pro Thr Leu
65 70 75 80
Gln Leu Lys Glu Lys Asp Ile Met Asp Leu Tyr Asn Gln Pro Glu Pro
85 90 95
Val Lys Ser Phe Leu Phe Tyr His Ser Gln Ser Gly Arg Asn Ser Thr
100 105 110
Phe Glu Ser Val Ala Phe Pro Gly Trp Phe Ile Ala Val Ser Ser Glu
115 120 125
Gly Gly Cys Pro Leu Ile Leu Thr Gln Glu Leu Gly Lys Ala Asn Thr
130 135 140
Thr Asp Phe Gly Leu Thr Met Leu Phe
145 150
<210> 6
<211> 462
<212> DNA
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> hIL36a(Q12) (截短的)
<400> 6
aaaattgaca cacctcagca ggggagcatt caggatatca atcatcgggt gtgggttctt 60
caggaccaga cgctcatagc agtcccgagg aaggaccgta tgtctccagt cactattgcc 120
ttaatctcat gccgacatgt ggagaccctt gagaaagaca gagggaaccc catctacctg 180
ggcctgaatg gactcaatct ctgcctgatg tgtgctaaag tcggggacca gcccacactg 240
cagctgaagg aaaaggatat aatggatttg tacaaccaac ccgagcctgt gaagtccttt 300
ctcttctacc acagccagag tggcaggaac tccaccttcg agtctgtggc tttccctggc 360
tggttcatcg ctgtcagctc tgaaggaggc tgtcctctca tccttaccca agaactgggg 420
aaagccaaca ctactgactt tgggttaact atgctgtttt aa 462
<210> 7
<211> 153
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> hIL36a(Q12) (截短的)
<400> 7
Lys Ile Asp Thr Pro Gln Gln Gly Ser Ile Gln Asp Ile Asn His Arg
1 5 10 15
Val Trp Val Leu Gln Asp Gln Thr Leu Ile Ala Val Pro Arg Lys Asp
20 25 30
Arg Met Ser Pro Val Thr Ile Ala Leu Ile Ser Cys Arg His Val Glu
35 40 45
Thr Leu Glu Lys Asp Arg Gly Asn Pro Ile Tyr Leu Gly Leu Asn Gly
50 55 60
Leu Asn Leu Cys Leu Met Cys Ala Lys Val Gly Asp Gln Pro Thr Leu
65 70 75 80
Gln Leu Lys Glu Lys Asp Ile Met Asp Leu Tyr Asn Gln Pro Glu Pro
85 90 95
Val Lys Ser Phe Leu Phe Tyr His Ser Gln Ser Gly Arg Asn Ser Thr
100 105 110
Phe Glu Ser Val Ala Phe Pro Gly Trp Phe Ile Ala Val Ser Ser Glu
115 120 125
Gly Gly Cys Pro Leu Ile Leu Thr Gln Glu Leu Gly Lys Ala Asn Thr
130 135 140
Thr Asp Phe Gly Leu Thr Met Leu Phe
145 150
<210> 8
<211> 462
<212> DNA
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> hIL36b (截短的)
<400> 8
cgggaggcag cacccaaatc ctatgctatt cgtgattctc gacagatggt gtgggtcctg 60
agtggaaatt ctttaatagc agctcctctt agccgcagca ttaagcctgt cactcttcat 120
ttaatagcct gtagagacac agaattcagt gacaaggaaa agggtaatat ggtttacctg 180
ggaatcaagg gaaaagatct ctgtctcttc tgtgcagaaa ttcagggcaa gcctactttg 240
cagcttaagg aaaaaaatat catggacctg tatgtggaga agaaagcaca gaagcccttt 300
ctctttttcc acaataaaga aggctccact tctgtctttc agtcagtctc ttaccctggc 360
tggttcatag ccacctccac cacatcagga cagcccatct ttctcaccaa ggagagaggc 420
ataactaata acactaactt ctacttagat tctgtggaat aa 462
<210> 9
<211> 153
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> hIL36b (截短的)
<400> 9
Arg Glu Ala Ala Pro Lys Ser Tyr Ala Ile Arg Asp Ser Arg Gln Met
1 5 10 15
Val Trp Val Leu Ser Gly Asn Ser Leu Ile Ala Ala Pro Leu Ser Arg
20 25 30
Ser Ile Lys Pro Val Thr Leu His Leu Ile Ala Cys Arg Asp Thr Glu
35 40 45
Phe Ser Asp Lys Glu Lys Gly Asn Met Val Tyr Leu Gly Ile Lys Gly
50 55 60
Lys Asp Leu Cys Leu Phe Cys Ala Glu Ile Gln Gly Lys Pro Thr Leu
65 70 75 80
Gln Leu Lys Glu Lys Asn Ile Met Asp Leu Tyr Val Glu Lys Lys Ala
85 90 95
Gln Lys Pro Phe Leu Phe Phe His Asn Lys Glu Gly Ser Thr Ser Val
100 105 110
Phe Gln Ser Val Ser Tyr Pro Gly Trp Phe Ile Ala Thr Ser Thr Thr
115 120 125
Ser Gly Gln Pro Ile Phe Leu Thr Lys Glu Arg Gly Ile Thr Asn Asn
130 135 140
Thr Asn Phe Tyr Leu Asp Ser Val Glu
145 150
<210> 10
<211> 152
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> hIL36g (截短的)
<400> 10
Ser Met Cys Lys Pro Ile Thr Gly Thr Ile Asn Asp Leu Asn Gln Gln
1 5 10 15
Val Trp Thr Leu Gln Gly Gln Asn Leu Val Ala Val Pro Arg Ser Asp
20 25 30
Ser Val Thr Pro Val Thr Val Ala Val Ile Thr Cys Lys Tyr Pro Glu
35 40 45
Ala Leu Glu Gln Gly Arg Gly Asp Pro Ile Tyr Leu Gly Ile Gln Asn
50 55 60
Pro Glu Met Cys Leu Tyr Cys Glu Lys Val Gly Glu Gln Pro Thr Leu
65 70 75 80
Gln Leu Lys Glu Gln Lys Ile Met Asp Leu Tyr Gly Gln Pro Glu Pro
85 90 95
Val Lys Pro Phe Leu Phe Tyr Arg Ala Lys Thr Gly Arg Thr Ser Thr
100 105 110
Leu Glu Ser Val Ala Phe Pro Asp Trp Phe Ile Ala Ser Ser Lys Arg
115 120 125
Asp Gln Pro Ile Ile Leu Thr Ser Glu Leu Gly Lys Ser Tyr Asn Thr
130 135 140
Ala Phe Glu Leu Asn Ile Asn Asp
145 150
<210> 11
<211> 154
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> hIL36Ra (截短的)
<400> 11
Val Leu Ser Gly Ala Leu Cys Phe Arg Met Lys Asp Ser Ala Leu Lys
1 5 10 15
Val Leu Tyr Leu His Asn Asn Gln Leu Leu Ala Gly Gly Leu His Ala
20 25 30
Gly Lys Val Ile Lys Gly Glu Glu Ile Ser Val Val Pro Asn Arg Trp
35 40 45
Leu Asp Ala Ser Leu Ser Pro Val Ile Leu Gly Val Gln Gly Gly Ser
50 55 60
Gln Cys Leu Ser Cys Gly Val Gly Gln Glu Pro Thr Leu Thr Leu Glu
65 70 75 80
Pro Val Asn Ile Met Glu Leu Tyr Leu Gly Ala Lys Glu Ser Lys Ser
85 90 95
Phe Thr Phe Tyr Arg Arg Asp Met Gly Leu Thr Ser Ser Phe Glu Ser
100 105 110
Ala Ala Tyr Pro Gly Trp Phe Leu Cys Thr Val Pro Glu Ala Asp Gln
115 120 125
Pro Val Arg Leu Thr Gln Leu Pro Glu Asn Gly Gly Trp Asn Ala Pro
130 135 140
Ile Thr Asp Phe Tyr Phe Gln Gln Cys Asp
145 150
<210> 12
<211> 462
<212> DNA
<213> 食蟹猕猴(Macaca fascicularis)
<220>
<223> cyIL36a (截短的)
<400> 12
aaaagtgaaa tgcctcagcc ggtgagcatt caggatatca atcatcgggt gtgggttctt 60
caggaccaga tcctcatagc agtcccgagg aaggaccgtg tgtctccagt cactatttcc 120
ttaatctcat gccgacatgt ggagaccctt gagaaagaca gagggaaccc catctacctg 180
ggactgaatg ggctcaatct ctgcttgatg tgtgctaagg ccggggacca gcccacactg 240
cagctgaagg aaaaggatat aatggatttg tacaaccaac ctgagcctgt gaagtccttt 300
ctcttctacc acagccagag tggcaggaac tccaccttcg agtctgtggc cttccctggc 360
tggttcattg ctgtcagctc tgaaggaggc tgtcctctca tccttaccca agaactgggg 420
aaagccaaca ctactgactt tgggttaact atgctgtttt aa 462
<210> 13
<211> 153
<212> PRT
<213> 食蟹猕猴(Macaca fascicularis)
<220>
<223> cyIL36a (截短的)
<400> 13
Lys Ser Glu Met Pro Gln Pro Val Ser Ile Gln Asp Ile Asn His Arg
1 5 10 15
Val Trp Val Leu Gln Asp Gln Ile Leu Ile Ala Val Pro Arg Lys Asp
20 25 30
Arg Val Ser Pro Val Thr Ile Ser Leu Ile Ser Cys Arg His Val Glu
35 40 45
Thr Leu Glu Lys Asp Arg Gly Asn Pro Ile Tyr Leu Gly Leu Asn Gly
50 55 60
Leu Asn Leu Cys Leu Met Cys Ala Lys Ala Gly Asp Gln Pro Thr Leu
65 70 75 80
Gln Leu Lys Glu Lys Asp Ile Met Asp Leu Tyr Asn Gln Pro Glu Pro
85 90 95
Val Lys Ser Phe Leu Phe Tyr His Ser Gln Ser Gly Arg Asn Ser Thr
100 105 110
Phe Glu Ser Val Ala Phe Pro Gly Trp Phe Ile Ala Val Ser Ser Glu
115 120 125
Gly Gly Cys Pro Leu Ile Leu Thr Gln Glu Leu Gly Lys Ala Asn Thr
130 135 140
Thr Asp Phe Gly Leu Thr Met Leu Phe
145 150
<210> 14
<211> 462
<212> DNA
<213> 食蟹猕猴(Macaca fascicularis)
<220>
<223> cyIL36b (截短的)
<400> 14
tggcaggcag cacccaaatc ctatgctatt cgtgattctc gacagatggt gtgggtcctg 60
agtggaaatt ctttaatagc agctcctctt agcaaccgtg ttaagcctgt cactcttcat 120
ttaataacct gcagagacac agaattcagt gataagaaaa agggtaatct ggtttacctg 180
ggaatcaggg gaaaagatct ctgtctcttc tgtgaagaaa ttcagggcaa acctactttg 240
cagcttaagg agaaaaacat catggacctg tacatggaga agaaagcaca gaagcccttt 300
ctctttttcc acaataaaga aggctccagt tctgtctttc agtcagtctc ttaccctggc 360
tggttcatag ccacctcctc cacatcagga cagcccatct ttctcaccca ggagaggggc 420
ataactaaca acactaactt ctacttagat tctgtggaat aa 462
<210> 15
<211> 153
<212> PRT
<213> 食蟹猕猴(Macaca fascicularis)
<220>
<223> cyIL36b (截短的)
<400> 15
Trp Gln Ala Ala Pro Lys Ser Tyr Ala Ile Arg Asp Ser Arg Gln Met
1 5 10 15
Val Trp Val Leu Ser Gly Asn Ser Leu Ile Ala Ala Pro Leu Ser Asn
20 25 30
Arg Val Lys Pro Val Thr Leu His Leu Ile Thr Cys Arg Asp Thr Glu
35 40 45
Phe Ser Asp Lys Lys Lys Gly Asn Leu Val Tyr Leu Gly Ile Arg Gly
50 55 60
Lys Asp Leu Cys Leu Phe Cys Glu Glu Ile Gln Gly Lys Pro Thr Leu
65 70 75 80
Gln Leu Lys Glu Lys Asn Ile Met Asp Leu Tyr Met Glu Lys Lys Ala
85 90 95
Gln Lys Pro Phe Leu Phe Phe His Asn Lys Glu Gly Ser Ser Ser Val
100 105 110
Phe Gln Ser Val Ser Tyr Pro Gly Trp Phe Ile Ala Thr Ser Ser Thr
115 120 125
Ser Gly Gln Pro Ile Phe Leu Thr Gln Glu Arg Gly Ile Thr Asn Asn
130 135 140
Thr Asn Phe Tyr Leu Asp Ser Val Glu
145 150
<210> 16
<211> 456
<212> DNA
<213> 食蟹猕猴(Macaca fascicularis)
<220>
<223> cyIL36g (截短的)
<400> 16
tcaatgcgta cacctattac tgggactatt aatgatttga atcagcaagt gtggaccctt 60
cagggtcaga tccttgtggc agttccacga agtgacagtg tgaccccagt cactgtcgct 120
gttatcacat gcaagtatcc agaggctctt gaccaaagca gaggggatcc catttatttg 180
ggaatccgga atccagaaat gtgtttgtgt tgtgaggagg ttggaggaca gcccacgttg 240
cagctaaaag agcagaagat catggatttg tatggccagc ccgagcctgt gaaacccttc 300
cttttctacc gtgtcaagac cggtaggacc tccacccttg agtctgtggc cttcccaaac 360
tggttcattg cctcttccac gagagaccag cccatcatcc tgacttcaga acttgggaag 420
tcatacaaca ctgcctttga attaaatata aaataa 456
<210> 17
<211> 151
<212> PRT
<213> 食蟹猕猴(Macaca fascicularis)
<220>
<223> cyIL36g (截短的)
<400> 17
Ser Met Arg Thr Pro Ile Thr Gly Thr Ile Asn Asp Leu Asn Gln Gln
1 5 10 15
Val Trp Thr Leu Gln Gly Gln Ile Leu Val Ala Val Pro Arg Ser Asp
20 25 30
Ser Val Thr Pro Val Thr Val Ala Val Ile Thr Cys Lys Tyr Pro Glu
35 40 45
Ala Leu Asp Gln Ser Arg Gly Asp Pro Ile Tyr Leu Gly Ile Arg Asn
50 55 60
Pro Glu Met Cys Leu Cys Cys Glu Glu Val Gly Gly Gln Pro Thr Leu
65 70 75 80
Gln Leu Lys Glu Gln Lys Ile Met Asp Leu Tyr Gly Gln Pro Glu Pro
85 90 95
Val Lys Pro Phe Leu Phe Tyr Arg Val Lys Thr Gly Arg Thr Ser Thr
100 105 110
Leu Glu Ser Val Ala Phe Pro Asn Trp Phe Ile Ala Ser Ser Thr Arg
115 120 125
Asp Gln Pro Ile Ile Leu Thr Ser Glu Leu Gly Lys Ser Tyr Asn Thr
130 135 140
Ala Phe Glu Leu Asn Ile Lys
145 150
<210> 18
<211> 321
<212> DNA
<213> 合成的
<220>
<223> His-SUMO标签
<400> 18
atgcatcatc accaccatca cgggtccctg caggactcag aagtcaatca agaagctaag 60
ccagaggtca agccagaagt caagcctgag actcacatca atttaaaggt gtccgatgga 120
tcttcagaga tcttcttcaa gatcaaaaag accactcctt taagaaggct gatggaagcg 180
ttcgctaaaa gacagggtaa ggaaatggac tccttaacgt tcttgtacga cggtattgaa 240
attcaagctg atcagacccc tgaagatttg gacatggagg ataacgatat tattgaggct 300
caccgcgaac agattggagg t 321
<210> 19
<211> 107
<212> PRT
<213> 合成的
<220>
<223> His-SUMO标签
<400> 19
Met His His His His His His Gly Ser Leu Gln Asp Ser Glu Val Asn
1 5 10 15
Gln Glu Ala Lys Pro Glu Val Lys Pro Glu Val Lys Pro Glu Thr His
20 25 30
Ile Asn Leu Lys Val Ser Asp Gly Ser Ser Glu Ile Phe Phe Lys Ile
35 40 45
Lys Lys Thr Thr Pro Leu Arg Arg Leu Met Glu Ala Phe Ala Lys Arg
50 55 60
Gln Gly Lys Glu Met Asp Ser Leu Thr Phe Leu Tyr Asp Gly Ile Glu
65 70 75 80
Ile Gln Ala Asp Gln Thr Pro Glu Asp Leu Asp Met Glu Asp Asn Asp
85 90 95
Ile Ile Glu Ala His Arg Glu Gln Ile Gly Gly
100 105
<210> 20
<211> 420
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144D464A-VH
<400> 20
atgaaatgca gctgggttat cttcttcctg atggcagtgg ttacaggggt caattctgag 60
gttcagctgc agcagtctgg ggcagagctt gtgaagccag gggcctcagt caggttgtcc 120
tgcacagctt ctggcttcaa cattaaagac acctatatac actgggtgaa gcagaggcct 180
gaacagggcc tggagtggat tggaaggatt gatcctgcga ttggtactac tagatatgac 240
ccgaagttcc agggcaaggc cactataaca acagacacat cctccgacac agtccacctg 300
cagttcagca gcctgacatc tgaggacact gccgtctatt actgtgctag attgcactac 360
ttcggtaata acttcttctt tgactactgg ggccaaggca ccactctcac agtctcctca 420
<210> 21
<211> 140
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144D464A-VH
<400> 21
Met Lys Cys Ser Trp Val Ile Phe Phe Leu Met Ala Val Val Thr Gly
1 5 10 15
Val Asn Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Ile
35 40 45
Lys Asp Thr Tyr Ile His Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Gly Arg Ile Asp Pro Ala Ile Gly Thr Thr Arg Tyr Asp
65 70 75 80
Pro Lys Phe Gln Gly Lys Ala Thr Ile Thr Thr Asp Thr Ser Ser Asp
85 90 95
Thr Val His Leu Gln Phe Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Leu His Tyr Phe Gly Asn Asn Phe Phe Phe Asp
115 120 125
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 22
<211> 363
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144D464A-VH
<400> 22
gaggttcagc tgcagcagtc tggggcagag cttgtgaagc caggggcctc agtcaggttg 60
tcctgcacag cttctggctt caacattaaa gacacctata tacactgggt gaagcagagg 120
cctgaacagg gcctggagtg gattggaagg attgatcctg cgattggtac tactagatat 180
gacccgaagt tccagggcaa ggccactata acaacagaca catcctccga cacagtccac 240
ctgcagttca gcagcctgac atctgaggac actgccgtct attactgtgc tagattgcac 300
tacttcggta ataacttctt ctttgactac tggggccaag gcaccactct cacagtctcc 360
tca 363
<210> 23
<211> 121
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144D464A-VH
<400> 23
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Ala Ile Gly Thr Thr Arg Tyr Asp Pro Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Lys Ala Thr Ile Thr Thr Asp Thr Ser Ser Asp Thr Val His
65 70 75 80
Leu Gln Phe Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Leu His Tyr Phe Gly Asn Asn Phe Phe Phe Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 24
<211> 420
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144L249B-VH
<400> 24
atgaaatgca gcggggttat cttcttcctg atggcagtgg ttacaggggt caactcagag 60
gttcagctgc agcagtctgg ggcagagctt gtgaagccag gggcctcagt caagttgtcc 120
tgcacagctt ctggcttcaa cattaaagac acctatatat actgggtgaa gcagaggcct 180
gaacagggcc tggagtggat tggaaggatt gatcctgcga ttggtactac tagatatgac 240
ccgaagttcc agggcaaggc cactctaaca gcagacacat cctccaacac agccttcctg 300
cagctcagca gcctgacatc tgaggacact gccgtctatt actgtgctag atatgactac 360
tccggtagta gcttctactt tgactactgg ggccgaggca ccactctcac agtctcctca 420
<210> 25
<211> 140
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144L249B-VH
<400> 25
Met Lys Cys Ser Gly Val Ile Phe Phe Leu Met Ala Val Val Thr Gly
1 5 10 15
Val Asn Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Ile
35 40 45
Lys Asp Thr Tyr Ile Tyr Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Gly Arg Ile Asp Pro Ala Ile Gly Thr Thr Arg Tyr Asp
65 70 75 80
Pro Lys Phe Gln Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn
85 90 95
Thr Ala Phe Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Asp Tyr Ser Gly Ser Ser Phe Tyr Phe Asp
115 120 125
Tyr Trp Gly Arg Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 26
<211> 363
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144L249B-VH
<400> 26
gaggttcagc tgcagcagtc tggggcagag cttgtgaagc caggggcctc agtcaagttg 60
tcctgcacag cttctggctt caacattaaa gacacctata tatactgggt gaagcagagg 120
cctgaacagg gcctggagtg gattggaagg attgatcctg cgattggtac tactagatat 180
gacccgaagt tccagggcaa ggccactcta acagcagaca catcctccaa cacagccttc 240
ctgcagctca gcagcctgac atctgaggac actgccgtct attactgtgc tagatatgac 300
tactccggta gtagcttcta ctttgactac tggggccgag gcaccactct cacagtctcc 360
tca 363
<210> 27
<211> 121
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144L249B-VH
<400> 27
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile Tyr Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Ala Ile Gly Thr Thr Arg Tyr Asp Pro Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Phe
65 70 75 80
Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Asp Tyr Ser Gly Ser Ser Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Arg Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 28
<211> 420
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144L124B, 144L180A-VH
<400> 28
atgaaatgca gctgggttat cttcttcctg atggcagtgg ttacaggggt caattcagag 60
gttcagctgc agcagtctgg ggcagagctt gtgaagccag gggcctcagt caagttgtcc 120
tgcacagctt ctggcttcaa cattaaagac acctatattt actgggtgaa gcagaggcct 180
gaacagggcc tggaatggat tggaaggatt gatcctgcga atggttatac tagatatgac 240
ccgaagttcc agggcaaggc cactatgaca gcagacacat cctccaacac agcctacctg 300
cagctcagca gcctgacatc tgaggacact gccgtctatt actgtgctag atatgaatac 360
tacgatagta gcttctactt tgactactgg ggccaaggca ccactctcac agtctcctca 420
<210> 29
<211> 140
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144L124B, 144L180A-VH
<400> 29
Met Lys Cys Ser Trp Val Ile Phe Phe Leu Met Ala Val Val Thr Gly
1 5 10 15
Val Asn Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Ile
35 40 45
Lys Asp Thr Tyr Ile Tyr Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Asp
65 70 75 80
Pro Lys Phe Gln Gly Lys Ala Thr Met Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn
85 90 95
Thr Ala Tyr Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Glu Tyr Tyr Asp Ser Ser Phe Tyr Phe Asp
115 120 125
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 30
<211> 363
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144L124B, 144L180A-VH
<400> 30
gaggttcagc tgcagcagtc tggggcagag cttgtgaagc caggggcctc agtcaagttg 60
tcctgcacag cttctggctt caacattaaa gacacctata tttactgggt gaagcagagg 120
cctgaacagg gcctggaatg gattggaagg attgatcctg cgaatggtta tactagatat 180
gacccgaagt tccagggcaa ggccactatg acagcagaca catcctccaa cacagcctac 240
ctgcagctca gcagcctgac atctgaggac actgccgtct attactgtgc tagatatgaa 300
tactacgata gtagcttcta ctttgactac tggggccaag gcaccactct cacagtctcc 360
tca 363
<210> 31
<211> 121
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144L124B, 144L180A-VH
<400> 31
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile Tyr Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Asp Pro Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Lys Ala Thr Met Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Glu Tyr Tyr Asp Ser Ser Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 32
<211> 420
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144L133B-VH
<400> 32
atgaagtgca gcggggttat cttcttcctg atggcagtgg ttacaggggt caactcagag 60
gttcagctgc agcagtctgg ggcagagctt gtgaagccag gggcctcagt caagttgtcc 120
tgcacagctt ctggcttcaa cattaaagac acctatatgt actgggtgaa gcagaggcct 180
gaacagggcc tggagtggat tggaaggatt gatcctgcga ttggtactac tagatatgac 240
ccgaagttcc agggcaaggc cactctaaca gcagacacat cctccaacac agccttcctg 300
cagctcagca gcctgacatc tgaggacact gccgtctatt actgtgctag atatgactac 360
tccggtagta gcttctactt tgactactgg ggccgaggca ccactctcac agtctcctca 420
<210> 33
<211> 140
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144L133B-VH
<400> 33
Met Lys Cys Ser Gly Val Ile Phe Phe Leu Met Ala Val Val Thr Gly
1 5 10 15
Val Asn Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Ile
35 40 45
Lys Asp Thr Tyr Met Tyr Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Gly Arg Ile Asp Pro Ala Ile Gly Thr Thr Arg Tyr Asp
65 70 75 80
Pro Lys Phe Gln Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn
85 90 95
Thr Ala Phe Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Asp Tyr Ser Gly Ser Ser Phe Tyr Phe Asp
115 120 125
Tyr Trp Gly Arg Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 34
<211> 363
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144L133B-VH
<400> 34
gaggttcagc tgcagcagtc tggggcagag cttgtgaagc caggggcctc agtcaagttg 60
tcctgcacag cttctggctt caacattaaa gacacctata tgtactgggt gaagcagagg 120
cctgaacagg gcctggagtg gattggaagg attgatcctg cgattggtac tactagatat 180
gacccgaagt tccagggcaa ggccactcta acagcagaca catcctccaa cacagccttc 240
ctgcagctca gcagcctgac atctgaggac actgccgtct attactgtgc tagatatgac 300
tactccggta gtagcttcta ctttgactac tggggccgag gcaccactct cacagtctcc 360
tca 363
<210> 35
<211> 121
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144L133B-VH
<400> 35
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Met Tyr Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Ala Ile Gly Thr Thr Arg Tyr Asp Pro Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Phe
65 70 75 80
Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Asp Tyr Ser Gly Ser Ser Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Arg Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 36
<211> 420
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144L472A-VH
<400> 36
atgaaatgca gctgggttat cttcttcctg atggcagtgg ttacaggggt caattcagag 60
gttcagctgc agcagtctgg ggcagagctt gtgaagccag gggcctcagt caagttgtcc 120
tgcacagttt ctggcttcaa cattaaagac acctatatgt actgggtgaa gcagaggcct 180
gaacagggcc tggagtggat tggaaggatt gatcctgcga atggttatgc taaatatgac 240
ccgaagttcc agggcaaggc cactttaaca gcagacacat cttccaatac agcctacctg 300
cagctcagca gcctgacatc tgaggacact gccgtctatt tctgtgctag atttcattgg 360
tacgacagtg ccttctactt tgacttctgg ggccaaggca ccactctcac agtctcctca 420
<210> 37
<211> 140
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144L472A-VH
<400> 37
Met Lys Cys Ser Trp Val Ile Phe Phe Leu Met Ala Val Val Thr Gly
1 5 10 15
Val Asn Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys Thr Val Ser Gly Phe Asn Ile
35 40 45
Lys Asp Thr Tyr Met Tyr Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Tyr Ala Lys Tyr Asp
65 70 75 80
Pro Lys Phe Gln Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn
85 90 95
Thr Ala Tyr Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Phe Cys Ala Arg Phe His Trp Tyr Asp Ser Ala Phe Tyr Phe Asp
115 120 125
Phe Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 38
<211> 363
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144L472A-VH
<400> 38
gaggttcagc tgcagcagtc tggggcagag cttgtgaagc caggggcctc agtcaagttg 60
tcctgcacag tttctggctt caacattaaa gacacctata tgtactgggt gaagcagagg 120
cctgaacagg gcctggagtg gattggaagg attgatcctg cgaatggtta tgctaaatat 180
gacccgaagt tccagggcaa ggccacttta acagcagaca catcttccaa tacagcctac 240
ctgcagctca gcagcctgac atctgaggac actgccgtct atttctgtgc tagatttcat 300
tggtacgaca gtgccttcta ctttgacttc tggggccaag gcaccactct cacagtctcc 360
tca 363
<210> 39
<211> 121
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144L472A-VH
<400> 39
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Thr Val Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Met Tyr Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Tyr Ala Lys Tyr Asp Pro Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Phe His Trp Tyr Asp Ser Ala Phe Tyr Phe Asp Phe Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 40
<211> 420
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144D666C-VH
<400> 40
atgaaatgca gctgggttat cttcttcctg atggcagtgg ttacaggggt caattcagag 60
gttcagctgc agcagtctgg ggcagagctt gtgaagccag gggcctcagt caagttgacc 120
tgcacagctt ctggcttcaa cattaaagac acctatatat actgggtgaa acagaggcct 180
gcacagggcc tggagtggat tggaaggatt gatcctgcga atgcttatac taaatttgac 240
ccgaagttcc agggcaaggc cactttaaca gcagacacat cctccaacac agcctacctg 300
cagctcagca gcctgacatc tgaggacact gccgtctatt actgtactag atttcattgg 360
tacggtagta gcttcttctt tgactactgg ggccaaggca ccactctcac agtctcctca 420
<210> 41
<211> 140
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144D666C-VH
<400> 41
Met Lys Cys Ser Trp Val Ile Phe Phe Leu Met Ala Val Val Thr Gly
1 5 10 15
Val Asn Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Ile
35 40 45
Lys Asp Thr Tyr Ile Tyr Trp Val Lys Gln Arg Pro Ala Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Ala Tyr Thr Lys Phe Asp
65 70 75 80
Pro Lys Phe Gln Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn
85 90 95
Thr Ala Tyr Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Thr Arg Phe His Trp Tyr Gly Ser Ser Phe Phe Phe Asp
115 120 125
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 42
<211> 363
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144D666C-VH
<400> 42
gaggttcagc tgcagcagtc tggggcagag cttgtgaagc caggggcctc agtcaagttg 60
acctgcacag cttctggctt caacattaaa gacacctata tatactgggt gaaacagagg 120
cctgcacagg gcctggagtg gattggaagg attgatcctg cgaatgctta tactaaattt 180
gacccgaagt tccagggcaa ggccacttta acagcagaca catcctccaa cacagcctac 240
ctgcagctca gcagcctgac atctgaggac actgccgtct attactgtac tagatttcat 300
tggtacggta gtagcttctt ctttgactac tggggccaag gcaccactct cacagtctcc 360
tca 363
<210> 43
<211> 121
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144D666C-VH
<400> 43
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile Tyr Trp Val Lys Gln Arg Pro Ala Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Ala Tyr Thr Lys Phe Asp Pro Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Phe His Trp Tyr Gly Ser Ser Phe Phe Phe Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 44
<211> 420
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144J171G-VH
<400> 44
atgaaatgca gctgggttat cttcttcctg atggcagtgg ttacaggggt ctattctgag 60
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tgcacagctt ctggcttcaa cattaaagac acctacataa actgggtgaa gcagaggcct 180
gaacagggcc tggagtggat tggaaggatt gatcctgcga atggttatac tagatatgcc 240
ccgaagttcc agggcaaggc cactataaca tcagacacat cctccaacac agcctacctg 300
cagctcagca gcctgacatc tgaggacgct gccgtctatt cctgttctac attaaattac 360
tacggtagta gctttttctt tgacttctgg ggccaaggca ccactctcac agtctcctca 420
<210> 45
<211> 140
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144J171G-VH
<400> 45
Met Lys Cys Ser Trp Val Ile Phe Phe Leu Met Ala Val Val Thr Gly
1 5 10 15
Val Tyr Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Glu
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Ile
35 40 45
Lys Asp Thr Tyr Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala
65 70 75 80
Pro Lys Phe Gln Gly Lys Ala Thr Ile Thr Ser Asp Thr Ser Ser Asn
85 90 95
Thr Ala Tyr Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ala Ala Val
100 105 110
Tyr Ser Cys Ser Thr Leu Asn Tyr Tyr Gly Ser Ser Phe Phe Phe Asp
115 120 125
Phe Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 46
<211> 363
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144J171G-VH
<400> 46
gaggttcagc tgcagcagtc tggggcagag cttgtggagc caggggcctc agtcaagttg 60
tcctgcacag cttctggctt caacattaaa gacacctaca taaactgggt gaagcagagg 120
cctgaacagg gcctggagtg gattggaagg attgatcctg cgaatggtta tactagatat 180
gccccgaagt tccagggcaa ggccactata acatcagaca catcctccaa cacagcctac 240
ctgcagctca gcagcctgac atctgaggac gctgccgtct attcctgttc tacattaaat 300
tactacggta gtagcttttt ctttgacttc tggggccaag gcaccactct cacagtctcc 360
tca 363
<210> 47
<211> 121
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144J171G-VH
<400> 47
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Glu Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Ile
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Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Pro Lys Phe
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Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ala Ala Val Tyr Ser Cys
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100 105 110
Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 48
<211> 384
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144D464A-VL
<400> 48
atggcctgga tttcacttat actctctctc ctggctctca gctcaggggc catttcccag 60
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tgtcgctcaa gttctggggc tgttacaact agtaactatg ccaactgggt ccaagaaaaa 180
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gccagattct caggctccct gattggagac aaggctgccc tcaccatcac aggggcacag 300
actgaggatg aggcaatata tttctgtgct ctatggttca gcaaccattg ggtgttcggt 360
ggaggaacca aactgactgt ccta 384
<210> 49
<211> 128
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144D464A-VL
<400> 49
Met Ala Trp Ile Ser Leu Ile Leu Ser Leu Leu Ala Leu Ser Ser Gly
1 5 10 15
Ala Ile Ser Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser
20 25 30
Pro Gly Glu Ala Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Ser Gly Ala Val
35 40 45
Thr Thr Ser Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu
50 55 60
Phe Ala Gly Leu Ile Gly Gly Thr Asn Asp Arg Ala Pro Gly Val Pro
65 70 75 80
Ala Arg Phe Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile
85 90 95
Thr Gly Ala Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp
100 105 110
Phe Ser Asn His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
115 120 125
<210> 50
<211> 327
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144D464A-VL
<400> 50
caggctgttg tgactcagga atctgcactc accacatcac ctggtgaagc agtcacactc 60
acttgtcgct caagttctgg ggctgttaca actagtaact atgccaactg ggtccaagaa 120
aaaccagatc atttattcgc tggtctaata ggtggtacca acgaccgagc tccaggtgtt 180
cctgccagat tctcaggctc cctgattgga gacaaggctg ccctcaccat cacaggggca 240
cagactgagg atgaggcaat atatttctgt gctctatggt tcagcaacca ttgggtgttc 300
ggtggaggaa ccaaactgac tgtccta 327
<210> 51
<211> 109
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144D464A-VL
<400> 51
Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ala Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Ser Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Ala Gly
35 40 45
Leu Ile Gly Gly Thr Asn Asp Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala
65 70 75 80
Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Phe Ser Asn
85 90 95
His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 52
<211> 384
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144L249B, 144L124B, 144L180A, 144L133B-VL
<400> 52
atggcctgga tttcacttat actctctctc ctggctctca gctcaggggc catttcccag 60
gctgttgtga ctcaggaatc tgcactcacc acatcacctg gtgaaacagt cacactcact 120
tgtcgctcaa gtactggggc tgttacaact agtaactatg ccaactgggt ccaagaaaaa 180
ccagatcatt tattcactgg tctaataggt ggtaccaaca accgagctcc aggtgttcct 240
gccagattct caggctccct gattggagac aaggctgccc tcaccatcac aggggcacag 300
actgaggatg aggcaatata tttctgtgct ctatggtaca gcaaccattt ggtgttcggt 360
ggaggaacca aactgactgt ccta 384
<210> 53
<211> 128
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144L249B, 144L124B, 144L180A, 144L133B-VL
<400> 53
Met Ala Trp Ile Ser Leu Ile Leu Ser Leu Leu Ala Leu Ser Ser Gly
1 5 10 15
Ala Ile Ser Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser
20 25 30
Pro Gly Glu Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val
35 40 45
Thr Thr Ser Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu
50 55 60
Phe Thr Gly Leu Ile Gly Gly Thr Asn Asn Arg Ala Pro Gly Val Pro
65 70 75 80
Ala Arg Phe Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile
85 90 95
Thr Gly Ala Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp
100 105 110
Tyr Ser Asn His Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
115 120 125
<210> 54
<211> 327
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144L249B, 144L124B, 144L180A, 144L133B-VL
<400> 54
caggctgttg tgactcagga atctgcactc accacatcac ctggtgaaac agtcacactc 60
acttgtcgct caagtactgg ggctgttaca actagtaact atgccaactg ggtccaagaa 120
aaaccagatc atttattcac tggtctaata ggtggtacca acaaccgagc tccaggtgtt 180
cctgccagat tctcaggctc cctgattgga gacaaggctg ccctcaccat cacaggggca 240
cagactgagg atgaggcaat atatttctgt gctctatggt acagcaacca tttggtgttc 300
ggtggaggaa ccaaactgac tgtccta 327
<210> 55
<211> 109
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144L249B, 144L124B, 144L180A, 144L133B-VL
<400> 55
Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly
35 40 45
Leu Ile Gly Gly Thr Asn Asn Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala
65 70 75 80
Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Ser Asn
85 90 95
His Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 56
<211> 384
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144L472A-VL
<400> 56
atggcctgga tttcacttat actctctctc ctggctctca gctcaggggc catttcccag 60
gctgttgtga ctcaggaatc tgcactcacc acatcacctg gtgaaacagt cacactcact 120
tgtcgctcaa gtagtggggc tgttacaact agtaactatg ccaactgggt ccaagaaaaa 180
ccagatcatt tattcactgg tctaataggt ggtaccaaca accgagctcc aggtgttcct 240
gccagattct caggctccct gattggagac aaggctgccc tcaccatcac aggggcacag 300
actgaggatg aggcaatata tttctgtggt ctatggtaca gcaaccattg ggtgttcggt 360
ggaggaacca aactgactgt ccta 384
<210> 57
<211> 128
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144L472A-VL
<400> 57
Met Ala Trp Ile Ser Leu Ile Leu Ser Leu Leu Ala Leu Ser Ser Gly
1 5 10 15
Ala Ile Ser Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser
20 25 30
Pro Gly Glu Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Ser Gly Ala Val
35 40 45
Thr Thr Ser Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu
50 55 60
Phe Thr Gly Leu Ile Gly Gly Thr Asn Asn Arg Ala Pro Gly Val Pro
65 70 75 80
Ala Arg Phe Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile
85 90 95
Thr Gly Ala Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Gly Leu Trp
100 105 110
Tyr Ser Asn His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
115 120 125
<210> 58
<211> 327
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144L472A-VL
<400> 58
caggctgttg tgactcagga atctgcactc accacatcac ctggtgaaac agtcacactc 60
acttgtcgct caagtagtgg ggctgttaca actagtaact atgccaactg ggtccaagaa 120
aaaccagatc atttattcac tggtctaata ggtggtacca acaaccgagc tccaggtgtt 180
cctgccagat tctcaggctc cctgattgga gacaaggctg ccctcaccat cacaggggca 240
cagactgagg atgaggcaat atatttctgt ggtctatggt acagcaacca ttgggtgttc 300
ggtggaggaa ccaaactgac tgtccta 327
<210> 59
<211> 109
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144L472A-VL
<400> 59
Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Ser Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly
35 40 45
Leu Ile Gly Gly Thr Asn Asn Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala
65 70 75 80
Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Gly Leu Trp Tyr Ser Asn
85 90 95
His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 60
<211> 384
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144D666C-VL
<400> 60
atggcctgga tttcacttat actctctctc ctggctctca gctcaggggc catttcccag 60
gctgttgtga ctcaggaatc tgcactcacc acatcacctg gtgaaacagt cacactcact 120
tgtcgctcaa gtactggggc tgttacaact agtaactatg ccaactgggt ccaagaaaaa 180
ccagatcatt tgttcactgg tctaataggt ggtaccgaca accgacctcc aggtgttcct 240
gccagattct caggctccct gattggagac aaggctgccc tcaccatcac aggggcacag 300
actgaggatg aggcaattta tttctgtgct ctatggtaca gcaacctctg ggtgttcggt 360
ggaggaacca aactgactgt ccta 384
<210> 61
<211> 128
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144D666C-VL
<400> 61
Met Ala Trp Ile Ser Leu Ile Leu Ser Leu Leu Ala Leu Ser Ser Gly
1 5 10 15
Ala Ile Ser Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser
20 25 30
Pro Gly Glu Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val
35 40 45
Thr Thr Ser Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu
50 55 60
Phe Thr Gly Leu Ile Gly Gly Thr Asp Asn Arg Pro Pro Gly Val Pro
65 70 75 80
Ala Arg Phe Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile
85 90 95
Thr Gly Ala Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp
100 105 110
Tyr Ser Asn Leu Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
115 120 125
<210> 62
<211> 327
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144D666C-VL
<400> 62
caggctgttg tgactcagga atctgcactc accacatcac ctggtgaaac agtcacactc 60
acttgtcgct caagtactgg ggctgttaca actagtaact atgccaactg ggtccaagaa 120
aaaccagatc atttgttcac tggtctaata ggtggtaccg acaaccgacc tccaggtgtt 180
cctgccagat tctcaggctc cctgattgga gacaaggctg ccctcaccat cacaggggca 240
cagactgagg atgaggcaat ttatttctgt gctctatggt acagcaacct ctgggtgttc 300
ggtggaggaa ccaaactgac tgtccta 327
<210> 63
<211> 109
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144D666C-VL
<400> 63
Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly
35 40 45
Leu Ile Gly Gly Thr Asp Asn Arg Pro Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala
65 70 75 80
Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Ser Asn
85 90 95
Leu Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 64
<211> 384
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144J171G-VL
<400> 64
atggcctgga tttcacttat actctctctc ctggctctca gctcaggggc catttcccag 60
gctgttgtga ctcaggaatc tgcactcacc acatcacctg gtgaaacagt cacactcact 120
tgtcgctcaa gtactggggc tgttacaact agtaactatg ccaactgggt ccaagaaaaa 180
ccagatcatt tattcactgg tctaataggt ggtaccaaca accgagctcc aggtgttcct 240
gccagattct caggctccct gattggagac aaggctgccc tcaccatcac aggggcacag 300
actgaggatg aggcaatata tttctgtgct ctatggtaca gcaaccattg ggtgttcggt 360
ggaggaacca aactgactgt ccta 384
<210> 65
<211> 128
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 具有信号肽的144J171G-VL
<400> 65
Met Ala Trp Ile Ser Leu Ile Leu Ser Leu Leu Ala Leu Ser Ser Gly
1 5 10 15
Ala Ile Ser Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser
20 25 30
Pro Gly Glu Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val
35 40 45
Thr Thr Ser Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu
50 55 60
Phe Thr Gly Leu Ile Gly Gly Thr Asn Asn Arg Ala Pro Gly Val Pro
65 70 75 80
Ala Arg Phe Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile
85 90 95
Thr Gly Ala Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp
100 105 110
Tyr Ser Asn His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
115 120 125
<210> 66
<211> 327
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144J171G-VL
<400> 66
caggctgttg tgactcagga atctgcactc accacatcac ctggtgaaac agtcacactc 60
acttgtcgct caagtactgg ggctgttaca actagtaact atgccaactg ggtccaagaa 120
aaaccagatc atttattcac tggtctaata ggtggtacca acaaccgagc tccaggtgtt 180
cctgccagat tctcaggctc cctgattgga gacaaggctg ccctcaccat cacaggggca 240
cagactgagg atgaggcaat atatttctgt gctctatggt acagcaacca ttgggtgttc 300
ggtggaggaa ccaaactgac tgtccta 327
<210> 67
<211> 109
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 没有信号肽的144J171G-VL
<400> 67
Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly
35 40 45
Leu Ile Gly Gly Thr Asn Asn Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala
65 70 75 80
Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Ser Asn
85 90 95
His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 68
<211> 5
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144D464A CDRH1
<400> 68
Asp Thr Tyr Ile His
1 5
<210> 69
<211> 17
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144D464A, 144L249B, 144L133B CDRH2
<400> 69
Arg Ile Asp Pro Ala Ile Gly Thr Thr Arg Tyr Asp Pro Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 70
<211> 12
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144D464A CDRH3
<400> 70
Leu His Tyr Phe Gly Asn Asn Phe Phe Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 71
<211> 5
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144L249B, 144L124B, 144L180A, 144D666C CDRH1
<400> 71
Asp Thr Tyr Ile Tyr
1 5
<210> 72
<211> 12
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144L249B, 144L133B CDRH3
<400> 72
Tyr Asp Tyr Ser Gly Ser Ser Phe Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 73
<211> 17
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144L124B, 144L180A CDRH2
<400> 73
Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Asp Pro Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 74
<211> 12
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144L124B, 144L180A CDRH3
<400> 74
Tyr Glu Tyr Tyr Asp Ser Ser Phe Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 75
<211> 5
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144L133B, 144L472A CDRH1
<400> 75
Asp Thr Tyr Met Tyr
1 5
<210> 76
<211> 17
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144L472A CDRH2
<400> 76
Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Tyr Ala Lys Tyr Asp Pro Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 77
<211> 12
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144L472A CDRH3
<400> 77
Phe His Trp Tyr Asp Ser Ala Phe Tyr Phe Asp Phe
1 5 10
<210> 78
<211> 17
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144D666C CDRH2
<400> 78
Arg Ile Asp Pro Ala Asn Ala Tyr Thr Lys Phe Asp Pro Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 79
<211> 12
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144D666C CDRH3
<400> 79
Phe His Trp Tyr Gly Ser Ser Phe Phe Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 80
<211> 5
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144J171G CDRH1
<400> 80
Asp Thr Tyr Ile Asn
1 5
<210> 81
<211> 17
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144J171G CDRH2
<400> 81
Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Pro Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 82
<211> 12
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144J171G CDRH3
<400> 82
Leu Asn Tyr Tyr Gly Ser Ser Phe Phe Phe Asp Phe
1 5 10
<210> 83
<211> 14
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144D464A, 144L472A CDRL1
<400> 83
Arg Ser Ser Ser Gly Ala Val Thr Thr Ser Asn Tyr Ala Asn
1 5 10
<210> 84
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144D464A CDRL2
<400> 84
Gly Thr Asn Asp Arg Ala Pro
1 5
<210> 85
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144D464A CDRL3
<400> 85
Ala Leu Trp Phe Ser Asn His Trp Val
1 5
<210> 86
<211> 14
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144L249B, 144L124B, 144L180A, 144L133B, 144D666C, 144J171G CDRL1
<400> 86
Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser Asn Tyr Ala Asn
1 5 10
<210> 87
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144L249B, 144L124B, 144L180A, 144L133B, 144L472A, 144J171G CDRL2
<400> 87
Gly Thr Asn Asn Arg Ala Pro
1 5
<210> 88
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144L249B, 144L124B, 144L180A, 144L133B CDRL3
<400> 88
Ala Leu Trp Tyr Ser Asn His Leu Val
1 5
<210> 89
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144L472A CDRL3
<400> 89
Gly Leu Trp Tyr Ser Asn His Trp Val
1 5
<210> 90
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144D666C CDRL2
<400> 90
Gly Thr Asp Asn Arg Pro Pro
1 5
<210> 91
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144D666C CDRL3
<400> 91
Ala Leu Trp Tyr Ser Asn Leu Trp Val
1 5
<210> 92
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠
<220>
<223> 144J171G CDRL3
<400> 92
Ala Leu Trp Tyr Ser Asn His Trp Val
1 5
<210> 93
<211> 993
<212> DNA
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> IgG1恒定区(人)
<400> 93
gctagcacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 60
ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 240
tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagaa agttgagccc 300
aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga 360
ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 420
gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 480
tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac 540
agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 600
gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 660
aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggatgag 720
ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 780
gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 840
ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 900
cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 960
cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa tga 993
<210> 94
<211> 330
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> IgG1恒定区(人)
<400> 94
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 95
<211> 321
<212> DNA
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> Igλ恒定区(人) IGLC2
<400> 95
ggtcagccca aggctgcccc ctcggtcact ctgttcccgc cctcctctga ggagcttcaa 60
gccaacaagg ccacactggt gtgtctcata agtgacttct acccgggagc cgtgacagtg 120
gcctggaagg cagatagcag ccccgtcaag gcgggagtgg agaccaccac accctccaaa 180
caaagcaaca acaagtacgc ggccagcagc tacctgagcc tgacgcctga gcagtggaag 240
tcccacagaa gctacagctg ccaggtcacg catgaaggga gcaccgtgga gaagacagtg 300
gcccctacag aatgttcatg a 321
<210> 96
<211> 106
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> Igλ恒定区(人) IGLC2
<400> 96
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 97
<211> 36
<212> DNA
<213> 合成的
<220>
<223> 引物_1262
<400> 97
gattacgcca agcttgtcac tggctcaggg aaataa 36
<210> 98
<211> 38
<212> DNA
<213> 合成的
<220>
<223> 引物_1267
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> n为c或t
<220>
<221> misc_feature
<222> (24)..(24)
<223> n为a或g
<220>
<221> misc_feature
<222> (34)..(34)
<223> n为a或g
<400> 98
gattacgcca agcttctcnt cagnggaagg tggnaaca 38
<210> 99
<211> 474
<212> DNA
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> hIL-36a(Q12) 全长
<400> 99
atggaaaaag cattgaaaat tgacacacct cagcagggga gcattcagga tatcaatcat 60
cgggtgtggg ttcttcagga ccagacgctc atagcagtcc cgaggaagga ccgtatgtct 120
ccagtcacta ttgccttaat ctcatgccga catgtggaga cccttgagaa agacagaggg 180
aaccccatct acctgggcct gaatggactc aatctctgcc tgatgtgtgc taaagtcggg 240
gaccagccca cactgcagct gaaggaaaag gatataatgg atttgtacaa ccaacccgag 300
cctgtgaagt cctttctctt ctaccacagc cagagtggca ggaactccac cttcgagtct 360
gtggctttcc ctggctggtt catcgctgtc agctctgaag gaggctgtcc tctcatcctt 420
acccaagaac tggggaaagc caacactact gactttgggt taactatgct gttt 474
<210> 100
<211> 474
<212> DNA
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> hIL-36a(R12) 全长
<400> 100
atggaaaaag cattgaaaat tgacacacct cagcggggga gcattcagga tatcaatcat 60
cgggtgtggg ttcttcagga ccagacgctc atagcagtcc cgaggaagga ccgtatgtct 120
ccagtcacta ttgccttaat ctcatgccga catgtggaga cccttgagaa agacagaggg 180
aaccccatct acctgggcct gaatggactc aatctctgcc tgatgtgtgc taaagtcggg 240
gaccagccca cactgcagct gaaggaaaag gatataatgg atttgtacaa ccaacccgag 300
cctgtgaagt cctttctctt ctaccacagc cagagtggca ggaactccac cttcgagtct 360
gtggctttcc ctggctggtt catcgctgtc agctctgaag gaggctgtcc tctcatcctt 420
acccaagaac tggggaaagc caacactact gactttgggt taactatgct gttt 474
<210> 101
<211> 158
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> hIL-36a(R12) 全长
<400> 101
Met Glu Lys Ala Leu Lys Ile Asp Thr Pro Gln Arg Gly Ser Ile Gln
1 5 10 15
Asp Ile Asn His Arg Val Trp Val Leu Gln Asp Gln Thr Leu Ile Ala
20 25 30
Val Pro Arg Lys Asp Arg Met Ser Pro Val Thr Ile Ala Leu Ile Ser
35 40 45
Cys Arg His Val Glu Thr Leu Glu Lys Asp Arg Gly Asn Pro Ile Tyr
50 55 60
Leu Gly Leu Asn Gly Leu Asn Leu Cys Leu Met Cys Ala Lys Val Gly
65 70 75 80
Asp Gln Pro Thr Leu Gln Leu Lys Glu Lys Asp Ile Met Asp Leu Tyr
85 90 95
Asn Gln Pro Glu Pro Val Lys Ser Phe Leu Phe Tyr His Ser Gln Ser
100 105 110
Gly Arg Asn Ser Thr Phe Glu Ser Val Ala Phe Pro Gly Trp Phe Ile
115 120 125
Ala Val Ser Ser Glu Gly Gly Cys Pro Leu Ile Leu Thr Gln Glu Leu
130 135 140
Gly Lys Ala Asn Thr Thr Asp Phe Gly Leu Thr Met Leu Phe
145 150 155
<210> 102
<211> 471
<212> DNA
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> hIL-36b 全长
<400> 102
atgaacccac aacgggaggc agcacccaaa tcctatgcta ttcgtgattc tcgacagatg 60
gtgtgggtcc tgagtggaaa ttctttaata gcagctcctc ttagccgcag cattaagcct 120
gtcactcttc atttaatagc ctgtagagac acagaattca gtgacaagga aaagggtaat 180
atggtttacc tgggaatcaa gggaaaagat ctctgtctct tctgtgcaga aattcagggc 240
aagcctactt tgcagcttaa ggaaaaaaat atcatggacc tgtatgtgga gaagaaagca 300
cagaagccct ttctcttttt ccacaataaa gaaggctcca cttctgtctt tcagtcagtc 360
tcttaccctg gctggttcat agccacctcc accacatcag gacagcccat ctttctcacc 420
aaggagagag gcataactaa taacactaac ttctacttag attctgtgga a 471
<210> 103
<211> 507
<212> DNA
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> hIL-36g 全长
<400> 103
atgagaggca ctccaggaga cgctgatggt ggaggaaggg ccgtctatca atcaatgtgt 60
aaacctatta ctgggactat taatgatttg aatcagcaag tgtggaccct tcagggtcag 120
aaccttgtgg cagttccacg aagtgacagt gtgaccccag tcactgttgc tgttatcaca 180
tgcaagtatc cagaggctct tgagcaaggc agaggggatc ccatttattt gggaatccag 240
aatccagaaa tgtgtttgta ttgtgagaag gttggagaac agcccacatt gcagctaaaa 300
gagcagaaga tcatggatct gtatggccaa cccgagcccg tgaaaccctt ccttttctac 360
cgtgccaaga ctggtaggac ctccaccctt gagtctgtgg ccttcccgga ctggttcatt 420
gcctcctcca agagagacca gcccatcatt ctgacttcag aacttgggaa gtcatacaac 480
actgcctttg aattaaatat aaatgac 507
<210> 104
<211> 456
<212> DNA
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> hIL-36g 截短的
<400> 104
tcaatgtgta aacctattac tgggactatt aatgatttga atcagcaagt gtggaccctt 60
cagggtcaga accttgtggc agttccacga agtgacagtg tgaccccagt cactgttgct 120
gttatcacat gcaagtatcc agaggctctt gagcaaggca gaggggatcc catttatttg 180
ggaatccaga atccagaaat gtgtttgtat tgtgagaagg ttggagaaca gcccacattg 240
cagctaaaag agcagaagat catggatctg tatggccaac ccgagcccgt gaaacccttc 300
cttttctacc gtgccaagac tggtaggacc tccacccttg agtctgtggc cttcccggac 360
tggttcattg cctcctccaa gagagaccag cccatcattc tgacttcaga acttgggaag 420
tcatacaaca ctgcctttga attaaatata aatgac 456
<210> 105
<211> 465
<212> DNA
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> hIL-36Ra 全长
<400> 105
atggtcctga gtggggcgct gtgcttccga atgaaggact cggcattgaa ggtgctttat 60
ctgcataata accagcttct agctggaggg ctgcatgcag ggaaggtcat taaaggtgaa 120
gagatcagcg tggtccccaa tcggtggctg gatgccagcc tgtcccccgt catcctgggt 180
gtccagggtg gaagccagtg cctgtcatgt ggggtggggc aggagccgac tctaacacta 240
gagccagtga acatcatgga gctctatctt ggtgccaagg aatccaagag cttcaccttc 300
taccggcggg acatggggct cacctccagc ttcgagtcgg ctgcctaccc gggctggttc 360
ctgtgcacgg tgcctgaagc cgatcagcct gtcagactca cccagcttcc cgagaatggt 420
ggctggaatg cccccatcac agacttctac ttccagcagt gtgac 465
<210> 106
<211> 155
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> hIL-36Ra 全长
<400> 106
Met Val Leu Ser Gly Ala Leu Cys Phe Arg Met Lys Asp Ser Ala Leu
1 5 10 15
Lys Val Leu Tyr Leu His Asn Asn Gln Leu Leu Ala Gly Gly Leu His
20 25 30
Ala Gly Lys Val Ile Lys Gly Glu Glu Ile Ser Val Val Pro Asn Arg
35 40 45
Trp Leu Asp Ala Ser Leu Ser Pro Val Ile Leu Gly Val Gln Gly Gly
50 55 60
Ser Gln Cys Leu Ser Cys Gly Val Gly Gln Glu Pro Thr Leu Thr Leu
65 70 75 80
Glu Pro Val Asn Ile Met Glu Leu Tyr Leu Gly Ala Lys Glu Ser Lys
85 90 95
Ser Phe Thr Phe Tyr Arg Arg Asp Met Gly Leu Thr Ser Ser Phe Glu
100 105 110
Ser Ala Ala Tyr Pro Gly Trp Phe Leu Cys Thr Val Pro Glu Ala Asp
115 120 125
Gln Pro Val Arg Leu Thr Gln Leu Pro Glu Asn Gly Gly Trp Asn Ala
130 135 140
Pro Ile Thr Asp Phe Tyr Phe Gln Gln Cys Asp
145 150 155
<210> 107
<211> 462
<212> DNA
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> hIL-36Ra 截短的
<400> 107
gtcctgagtg gggcgctgtg cttccgaatg aaggactcgg cattgaaggt gctttatctg 60
cataataacc agcttctagc tggagggctg catgcaggga aggtcattaa aggtgaagag 120
atcagcgtgg tccccaatcg gtggctggat gccagcctgt cccccgtcat cctgggtgtc 180
cagggtggaa gccagtgcct gtcatgtggg gtggggcagg agccgactct aacactagag 240
ccagtgaaca tcatggagct ctatcttggt gccaaggaat ccaagagctt caccttctac 300
cggcgggaca tggggctcac ctccagcttc gagtcggctg cctacccggg ctggttcctg 360
tgcacggtgc ctgaagccga tcagcctgtc agactcaccc agcttcccga gaatggtggc 420
tggaatgccc ccatcacaga cttctacttc cagcagtgtg ac 462
<210> 108
<211> 537
<212> DNA
<213> 食蟹猕猴(Macaca fascicularis)
<220>
<223> cyIL-36a 全长
<400> 108
atgaaaaaat tcattgttgt actatatgga aaactcaggc tgtgttcatg gtctttgagt 60
gaactatttt caatgtcgaa aagtgaaatg cctcagccgg tgagcattca ggatatcaat 120
catcgggtgt gggttcttca ggaccagatc ctcatagcag tcccgaggaa ggaccgtgtg 180
tctccagtca ctatttcctt aatctcatgc cgacatgtgg agacccttga gaaagacaga 240
gggaacccca tctacctggg actgaatggg ctcaatctct gcttgatgtg tgctaaggcc 300
ggggaccagc ccacactgca gctgaaggaa aaggatataa tggatttgta caaccaacct 360
gagcctgtga agtcctttct cttctaccac agccagagtg gcaggaactc caccttcgag 420
tctgtggcct tccctggctg gttcattgct gtcagctctg aaggaggctg tcctctcatc 480
cttacccaag aactggggaa agccaacact actgactttg ggttaactat gctgttt 537
<210> 109
<211> 179
<212> PRT
<213> 食蟹猕猴(Macaca fascicularis)
<220>
<223> cyIL-36a 全长
<400> 109
Met Lys Lys Phe Ile Val Val Leu Tyr Gly Lys Leu Arg Leu Cys Ser
1 5 10 15
Trp Ser Leu Ser Glu Leu Phe Ser Met Ser Lys Ser Glu Met Pro Gln
20 25 30
Pro Val Ser Ile Gln Asp Ile Asn His Arg Val Trp Val Leu Gln Asp
35 40 45
Gln Ile Leu Ile Ala Val Pro Arg Lys Asp Arg Val Ser Pro Val Thr
50 55 60
Ile Ser Leu Ile Ser Cys Arg His Val Glu Thr Leu Glu Lys Asp Arg
65 70 75 80
Gly Asn Pro Ile Tyr Leu Gly Leu Asn Gly Leu Asn Leu Cys Leu Met
85 90 95
Cys Ala Lys Ala Gly Asp Gln Pro Thr Leu Gln Leu Lys Glu Lys Asp
100 105 110
Ile Met Asp Leu Tyr Asn Gln Pro Glu Pro Val Lys Ser Phe Leu Phe
115 120 125
Tyr His Ser Gln Ser Gly Arg Asn Ser Thr Phe Glu Ser Val Ala Phe
130 135 140
Pro Gly Trp Phe Ile Ala Val Ser Ser Glu Gly Gly Cys Pro Leu Ile
145 150 155 160
Leu Thr Gln Glu Leu Gly Lys Ala Asn Thr Thr Asp Phe Gly Leu Thr
165 170 175
Met Leu Phe
<210> 110
<211> 471
<212> DNA
<213> 食蟹猕猴(Macaca fascicularis)
<220>
<223> cyIL-36b 全长
<400> 110
atgaacccac aatggcaggc agcacccaaa tcctatgcta ttcgtgattc tcgacagatg 60
gtgtgggtcc tgagtggaaa ttctttaata gcagctcctc ttagcaaccg tgttaagcct 120
gtcactcttc atttaataac ctgcagagac acagaattca gtgataagaa aaagggtaat 180
ctggtttacc tgggaatcag gggaaaagat ctctgtctct tctgtgaaga aattcagggc 240
aaacctactt tgcagcttaa ggagaaaaac atcatggacc tgtacatgga gaagaaagca 300
cagaagccct ttctcttttt ccacaataaa gaaggctcca gttctgtctt tcagtcagtc 360
tcttaccctg gctggttcat agccacctcc tccacatcag gacagcccat ctttctcacc 420
caggagaggg gcataactaa caacactaac ttctacttag attctgtgga a 471
<210> 111
<211> 157
<212> PRT
<213> 食蟹猕猴(Macaca fascicularis)
<220>
<223> cyIL-36b 全长
<400> 111
Met Asn Pro Gln Trp Gln Ala Ala Pro Lys Ser Tyr Ala Ile Arg Asp
1 5 10 15
Ser Arg Gln Met Val Trp Val Leu Ser Gly Asn Ser Leu Ile Ala Ala
20 25 30
Pro Leu Ser Asn Arg Val Lys Pro Val Thr Leu His Leu Ile Thr Cys
35 40 45
Arg Asp Thr Glu Phe Ser Asp Lys Lys Lys Gly Asn Leu Val Tyr Leu
50 55 60
Gly Ile Arg Gly Lys Asp Leu Cys Leu Phe Cys Glu Glu Ile Gln Gly
65 70 75 80
Lys Pro Thr Leu Gln Leu Lys Glu Lys Asn Ile Met Asp Leu Tyr Met
85 90 95
Glu Lys Lys Ala Gln Lys Pro Phe Leu Phe Phe His Asn Lys Glu Gly
100 105 110
Ser Ser Ser Val Phe Gln Ser Val Ser Tyr Pro Gly Trp Phe Ile Ala
115 120 125
Thr Ser Ser Thr Ser Gly Gln Pro Ile Phe Leu Thr Gln Glu Arg Gly
130 135 140
Ile Thr Asn Asn Thr Asn Phe Tyr Leu Asp Ser Val Glu
145 150 155
<210> 112
<211> 504
<212> DNA
<213> 食蟹猕猴(Macaca fascicularis)
<220>
<223> cyIL-36g 全长
<400> 112
atgagaggca ctccaggaaa ccctgctggt ggaggaaggg tcgtctatca gtcaatgcgt 60
acacctatta ctgggactat taatgatttg aatcagcaag tgtggaccct tcagggtcag 120
atccttgtgg cagttccacg aagtgacagt gtgaccccag tcactgtcgc tgttatcaca 180
tgcaagtatc cagaggctct tgaccaaagc agaggggatc ccatttattt gggaatccgg 240
aatccagaaa tgtgtttgtg ttgtgaggag gttggaggac agcccacgtt gcagctaaaa 300
gagcagaaga tcatggattt gtatggccag cccgagcctg tgaaaccctt ccttttctac 360
cgtgtcaaga ccggtaggac ctccaccctt gagtctgtgg ccttcccaaa ctggttcatt 420
gcctcttcca cgagagacca gcccatcatc ctgacttcag aacttgggaa gtcatacaac 480
actgcctttg aattaaatat aaaa 504
<210> 113
<211> 168
<212> PRT
<213> 食蟹猕猴(Macaca fascicularis)
<220>
<223> cyIL-36g 全长
<400> 113
Met Arg Gly Thr Pro Gly Asn Pro Ala Gly Gly Gly Arg Val Val Tyr
1 5 10 15
Gln Ser Met Arg Thr Pro Ile Thr Gly Thr Ile Asn Asp Leu Asn Gln
20 25 30
Gln Val Trp Thr Leu Gln Gly Gln Ile Leu Val Ala Val Pro Arg Ser
35 40 45
Asp Ser Val Thr Pro Val Thr Val Ala Val Ile Thr Cys Lys Tyr Pro
50 55 60
Glu Ala Leu Asp Gln Ser Arg Gly Asp Pro Ile Tyr Leu Gly Ile Arg
65 70 75 80
Asn Pro Glu Met Cys Leu Cys Cys Glu Glu Val Gly Gly Gln Pro Thr
85 90 95
Leu Gln Leu Lys Glu Gln Lys Ile Met Asp Leu Tyr Gly Gln Pro Glu
100 105 110
Pro Val Lys Pro Phe Leu Phe Tyr Arg Val Lys Thr Gly Arg Thr Ser
115 120 125
Thr Leu Glu Ser Val Ala Phe Pro Asn Trp Phe Ile Ala Ser Ser Thr
130 135 140
Arg Asp Gln Pro Ile Ile Leu Thr Ser Glu Leu Gly Lys Ser Tyr Asn
145 150 155 160
Thr Ala Phe Glu Leu Asn Ile Lys
165
<210> 114
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 144D464A LV0
<400> 114
Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Pro Ser Leu Thr Val Ser Pro Gly Gly
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Ser Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Thr
35 40 45
Leu Ile Ser Gly Thr Asn Asp Arg Ala Pro Trp Thr Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Leu Gly Gly Lys Ala Ala Leu Thr Leu Ser Gly Ala
65 70 75 80
Gln Pro Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Phe Ser Asn
85 90 95
His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 115
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 144D464A HV0
<400> 115
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Ala Ile Gly Thr Thr Arg Tyr Asp Pro Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Leu His Tyr Phe Gly Asn Asn Phe Phe Phe Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 116
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 144D464A LV3a
<400> 116
Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Pro Ser Leu Thr Val Ser Pro Gly Gly
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Ser Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Gly
35 40 45
Leu Ile Ser Gly Thr Asn Asp Arg Ala Pro Trp Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Leu Gly Gly Lys Ala Ala Leu Thr Ile Ser Gly Ala
65 70 75 80
Gln Pro Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Phe Ser Asn
85 90 95
His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 117
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 144D464A LV3b
<400> 117
Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Pro Ser Leu Thr Val Ser Pro Gly Gly
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Ser Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Gly
35 40 45
Leu Ile Ser Gly Thr Asn Asp Arg Ala Pro Trp Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Leu Gly Gly Lys Ala Ala Leu Thr Leu Ser Gly Ala
65 70 75 80
Gln Pro Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Phe Ser Asn
85 90 95
His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 118
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 144D464A LV4a
<400> 118
Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Pro Ser Leu Thr Val Ser Pro Gly Gly
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Ser Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Gly
35 40 45
Leu Ile Ser Gly Thr Asn Asp Arg Ala Pro Trp Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Leu Gly Gly Lys Ala Ala Leu Thr Ile Ser Gly Ala
65 70 75 80
Gln Pro Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Phe Ser Asn
85 90 95
His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 119
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 144D464A LV4b
<400> 119
Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Pro Ser Leu Thr Val Ser Pro Gly Gly
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Ser Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Gly
35 40 45
Leu Ile Gly Gly Thr Asn Asp Arg Ala Pro Trp Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Leu Gly Gly Lys Ala Ala Leu Thr Leu Ser Gly Ala
65 70 75 80
Gln Pro Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Phe Ser Asn
85 90 95
His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 120
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 144D464A LV5a
<400> 120
Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Pro Ser Leu Thr Val Ser Pro Gly Gly
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Ser Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Ala Gly
35 40 45
Leu Ile Gly Gly Thr Asn Asp Arg Ala Pro Trp Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Leu Gly Gly Lys Ala Ala Leu Thr Leu Ser Gly Ala
65 70 75 80
Gln Pro Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Phe Ser Asn
85 90 95
His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 121
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
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Ser Gly Ser Leu Leu Gly Gly Lys Ala Ala Leu Thr Leu Ser Gly Ala
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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100 105 110
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 144D464A HV5c
<400> 145
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<220>
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<220>
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<400> 147
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<220>
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20 25 30
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<220>
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<223> 144L249B HV11
<400> 176
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Ala Ile Gly Thr Thr Arg Tyr Asp Pro Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Lys Ala Thr Leu Thr Thr Asp Thr Ser Thr Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Asp Tyr Ser Gly Ser Ser Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 177
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 144L249B HV15
<400> 177
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile Tyr Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Ala Ile Gly Thr Thr Arg Tyr Asp Pro Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Thr Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Asp Tyr Ser Gly Ser Ser Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Leu Thr Val Ser Ser
115 120

Claims (107)

1.与IL-36结合的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段与IL-36α和IL-36γ两者均结合，并且其中所述抗体是IL-36α和IL-36γ的拮抗剂。
2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段同时拮抗IL-36α和IL-36γ。
3.根据权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段，其中
(i)所述抗体或其抗原结合片段结合选自以下的一个或多个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列和/或SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的第45个氨基酸残基至第100个氨基酸残基；
(ii)所述抗体或其抗原结合片段结合选自以下的一个或多个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列的Arg 45、His 46、Glu 48、Thr 49、Leu 50、Lys 85、Asp 89、Asn 92、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro 96、Val 97、Lys 98和Phe 100，和/或选自以下的一个或多个氨基酸残基：SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的Tyr 46、Glu 48、Ala 49、Leu 50、Gln 85、Gly 92、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro 96、Val 97、Lys 98和Phe 100；和/或
(iii)所述抗体或其抗原结合片段结合选自以下的一个或多个氨基酸残基：SEQ IDNO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列的His 46、Glu 48、Thr 49、Leu 50、Lys85、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro 96、Val 97和Lys 98，和/或选自以下的一个或多个氨基酸残基：SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的Ala 49、Leu 50、Gly 92、Gln 93、Pro94、Glu 95、Pro 96、Val 97和Lys 98。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段结合选自以下的至少一个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列和SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的Leu 50、Gln 93、Pro 94、Glu95、Pro 96、Val 97和Lys 98。
5.根据权利要求4所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段结合选自以下的2、3、4、5、6或7个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列和SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的Leu 50、Gln 93、Pro 94、Glu 95、Pro 96、Val 97和Lys 98。
6.根据权利要求5所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段结合SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列和SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的第93位至第98位的氨基酸残基，或其中所述抗体或其抗原结合片段结合SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列和SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的第50位和第93至98位的氨基酸残基。
7.根据权利要求4-6中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段结合选自以下的至少一个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列的Arg 45、His 46、Glu 48、Thr 49、Lys 85、Asp 89、Asn 92和Phe 100，和/或选自以下的至少一个氨基酸残基：SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的Tyr 46、Glu 48、Ala 49、Gln 85、Gly 92和Phe 100。
8.根据权利要求4-6中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段还结合选自以下的至少一个氨基酸残基：SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7所示的IL-36α的氨基酸序列的His 46、Glu 48、Thr 49和Lys 85，和选自以下的至少一个IL-36γ氨基酸残基：SEQ ID NO:10所示的IL-36γ的氨基酸序列的Ala 49和Gly 92。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段不结合IL-36β。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段不拮抗IL-36β。
11.根据权利要求1-10中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段不结合IL-36Ra。
12.根据权利要求1-11中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段不拮抗IL-36Ra。
13.根据权利要求1-12中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中当与IL-36Ra组合使用时，IL-36Ra和所述抗体或其抗原结合片段的组合拮抗IL-36α、IL-36β和IL-36γ。
14.根据权利要求1-13中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述IL-36α和IL-36γ是人IL-36α和IL-36γ。
15.根据权利要求1-13中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述IL-36α和IL-36γ是食蟹猕猴IL-36α和IL-36γ。
16.根据权利要求1-13中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段结合人和食蟹猕猴IL-36α和IL-36γ，并且所述抗体是人和食蟹猕猴IL-36α和IL-36γ的拮抗剂。
17.根据权利要求1-13中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段不结合人或食蟹猕猴IL-36β。
18.根据权利要求1-13中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段不结合人或食蟹猕猴IL-36Ra。
19.根据权利要求1-13中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中通过表面等离振子共振法测定所述抗体或其抗原结合片段结合人IL-36α的KD小于100nM，并且其中通过表面等离振子共振法测定所述抗体或其抗原结合片段结合人IL-36γ的KD小于100nM。
20.根据权利要求1-13中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中通过表面等离振子共振法测定所述抗体或其抗原结合片段结合人IL-36α的KD小于10nM，并且其中通过表面等离振子共振法测定所述抗体或其抗原结合片段结合人IL-36γ的KD小于10nM。
21.根据权利要求1-13中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中通过表面等离振子共振法测定所述抗体或其抗原结合片段结合食蟹猕猴IL-36α的KD小于100nM，并且其中通过表面等离振子共振法测定所述抗体或其抗原结合片段结合食蟹猕猴IL-36γ的KD小于100nM。
22.根据权利要求1-13中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中通过表面等离振子共振法测定所述抗体或其抗原结合片段结合食蟹猕猴IL-36α的KD小于10nM，并且其中通过表面等离振子共振法测定所述抗体或其抗原结合片段结合食蟹猕猴IL-36γ的KD小于10nM。
23.根据权利要求1-13中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段减弱IL-36α介导的信号转导和/或IL-36γ介导的信号转导。
24.根据权利要求1-13中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段减弱IL-36α与IL-36受体的结合和/或IL-36γ与IL-36受体的结合。
25.根据权利要求1-13中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段减弱IL-36受体介导的信号转导。
26.根据权利要求1-13中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段减弱了选自下组的一种或多种细胞因子和/或趋化因子的产生：IL-8、IL-6、IL-10、TNFα、IL-1β、CXCL1、CCL5、CCL20、CCL2、CCL3、CCL4、CXCL12、VEGF-A、IL-23、IL-36α、IL-36β和IL-36γ。
27.根据权利要求1-26中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段拮抗IL-36α和IL-36γ针对任选地选自下组的IL-36受体表达细胞的活性：角质形成细胞、真皮成纤维细胞、单核细胞和PBMC。
28.根据权利要求1-27中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗原结合片段选自下组：Fab、Fab'、F(ab')2、Fv、scFv、dsFv、双抗体、三抗体、四抗体和由抗体片段形成的多特异性抗体。
29.根据权利要求1-28中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是小鼠抗体。
30.根据权利要求1-28中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是完全人抗体。
31.根据权利要求1-28中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是人源化抗体或其抗原结合片段。
32.根据权利要求1-31中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是重组产生的。
33.根据权利要求1-31中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是由杂交瘤产生的。
34.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：
(a)重链可变区(VH)，其包含
(i)VH互补决定区1(CDR H1)，其包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:68、SEQ IDNO:71、SEQ ID NO:75和SEQ ID NO:80；
(ii)VH互补决定区2(CDR H2)，其包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:69、SEQ IDNO:73、SEQ ID NO:76、SEQ ID NO:78和SEQ ID NO:81；和
(iii)VH互补决定区3(CDR H3)，其包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:70、SEQ IDNO:72、SEQ ID NO:74、SEQ ID NO:77、SEQ ID NO:79和SEQ ID NO:82；和
(b)轻链可变区(VL)，其包含
(i)VL互补决定区1(CDR L1)，其包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:83和SEQ IDNO:86；
(ii)VL互补决定区2(CDR L2)，其包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:84、SEQ IDNO:87和SEQ ID NO:90；和
(iii)VL互补决定区3(CDR L3)，其包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:85、SEQ IDNO:88、SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:91和SEQ ID NO:92。
35.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：SEQ ID NO:68的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:70的CDRH3、SEQ ID NO:83的CDR L1、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:85的CDR L3。
36.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDRH3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。
37.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:73的CDR H2、SEQ ID NO:74的CDRH3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。
38.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDRH3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。
39.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：SEQ ID NO:75的CDR H1、SEQ ID NO:76的CDR H2、SEQ ID NO:77的CDRH3、SEQ ID NO:83的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:89的CDR L3。
40.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:78的CDR H2、SEQ ID NO:79的CDRH3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:90的CDR L2和SEQ ID NO:91的CDR L3。
41.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：SEQ ID NO:80的CDR H1、SEQ ID NO:81的CDR H2、SEQ ID NO:82的CDRH3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:87的CDR L2和SEQ ID NO:92的CDR L3。
42.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：SEQ ID NO:71的CDR H1、SEQ ID NO:69的CDR H2、SEQ ID NO:72的CDRH3、SEQ ID NO:86的CDR L1、SEQ ID NO:84的CDR L2和SEQ ID NO:88的CDR L3。
43.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：CDR H1，其包含SEQ ID NO:23中含有的CDR H1的氨基酸序列；CDR H2，其包含SEQ ID NO:23中含有的CDR H2的氨基酸序列；CDR H3，其包含SEQ ID NO:23中含有的CDR H3的氨基酸序列；CDR L1，其包含SEQ ID NO:51中含有的CDR L1的氨基酸序列；CDRL2，其包含SEQ ID NO:51中含有的CDR L2的氨基酸序列；CDR L3，其包含SEQ ID NO:51中含有的CDR L3的氨基酸序列。
44.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：CDR H1，其包含SEQ ID NO:27中含有的CDR H1的氨基酸序列；CDR H2，其包含SEQ ID NO:27中含有的CDR H2的氨基酸序列；CDR H3，其包含SEQ ID NO:27中含有的CDR H3的氨基酸序列；CDR L1，其包含SEQ ID NO:55中含有的CDR L1的氨基酸序列；CDRL2，其包含SEQ ID NO:55中含有的CDR L2的氨基酸序列；CDR L3，其包含SEQ ID NO:55中含有的CDR L3的氨基酸序列。
45.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：CDR H1，其包含SEQ ID NO:31中含有的CDR H1的氨基酸序列；CDR H2，其包含SEQ ID NO:31中含有的CDR H2的氨基酸序列；CDR H3，其包含SEQ ID NO:31中含有的CDR H3的氨基酸序列；CDR L1，其包含SEQ ID NO:55中含有的CDR L1的氨基酸序列；CDRL2，其包含SEQ ID NO:55中含有的CDR L2的氨基酸序列；CDR L3，其包含SEQ ID NO:55中含有的CDR L3的氨基酸序列。
46.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：CDR H1，其包含SEQ ID NO:35中含有的CDR H1的氨基酸序列；CDR H2，其包含SEQ ID NO:35中含有的CDR H2的氨基酸序列；CDR H3，其包含SEQ ID NO:35中含有的CDR H3的氨基酸序列；CDR L1，其包含SEQ ID NO:55中含有的CDR L1的氨基酸序列；CDRL2，其包含SEQ ID NO:55中含有的CDR L2的氨基酸序列；CDR L3，其包含SEQ ID NO:55中含有的CDR L3的氨基酸序列。
47.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：CDR H1，其包含SEQ ID NO:39中含有的CDR H1的氨基酸序列；CDR H2，其包含SEQ ID NO:39中含有的CDR H2的氨基酸序列；CDR H3，其包含SEQ ID NO:39中含有的CDR H3的氨基酸序列；CDR L1，其包含SEQ ID NO:59中含有的CDR L1的氨基酸序列；CDRL2，其包含SEQ ID NO:59中含有的CDR L2的氨基酸序列；CDR L3，其包含SEQ ID NO:59中含有的CDR L3的氨基酸序列。
48.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：CDR H1，其包含SEQ ID NO:43中含有的CDR H1的氨基酸序列；CDR H2，其包含SEQ ID NO:43中含有的CDR H2的氨基酸序列；CDR H3，其包含SEQ ID NO:43中含有的CDR H3的氨基酸序列；CDR L1，其包含SEQ ID NO:63中含有的CDR L1的氨基酸序列；CDRL2，其包含SEQ ID NO:63中含有的CDR L2的氨基酸序列；CDR L3，其包含SEQ ID NO:63中含有的CDR L3的氨基酸序列。
49.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：CDR H1，其包含SEQ ID NO:47中含有的CDR H1的氨基酸序列；CDR H2，其包含SEQ ID NO:47中含有的CDR H2的氨基酸序列；CDR H3，其包含SEQ ID NO:47中含有的CDR H3的氨基酸序列；CDR L1，其包含SEQ ID NO:67中含有的CDR L1的氨基酸序列；CDRL2，其包含SEQ ID NO:67中含有的CDR L2的氨基酸序列；CDR L3，其包含SEQ ID NO:67中含有的CDR L3的氨基酸序列。
50.根据权利要求43-49中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述CDR H1、CDRH2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3是根据Kabat编号确定的。
51.根据权利要求43-49中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述CDR H1、CDRH2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3是根据AbM编号确定的。
52.根据权利要求43-49中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述CDR H1、CDRH2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3是根据Chothia编号来确定的。
53.根据权利要求43-49中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述CDR H1、CDRH2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3是根据Contact编号来确定的。
54.根据权利要求43-49中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述CDR H1、CDRH2、CDR H3、CDR L1、CDR L2和CDR L3是根据IMGT编号确定的。
55.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:23的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:51的氨基酸序列的VL区。
56.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:27的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:55的氨基酸序列的VL区。
57.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:31的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:55的氨基酸序列的VL区。
58.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:35的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:55的氨基酸序列的VL区。
59.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:39的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:59的氨基酸序列的VL区。
60.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:43的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:63的氨基酸序列的VL区。
61.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:47的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:67的氨基酸序列的VL区。
62.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：
(i)VH区，其包含SEQ ID NO:115的氨基酸序列或在SEQ ID NO:115中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中所述至少一个氨基酸残基替换选自在以下氨基酸位置的替换：Gln 1、Lys 12、Val 20、Tyr 27、Thr 28、Phe 29、Thr 30、Arg 38、Met 48、Arg 67、Val68、Ala 72、Ser 77、Ala 79、Met 81、Leu 83和Val 117；和
(ii)VL区，其包含SEQ ID NO:114的氨基酸序列或在SEQ ID NO:114中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中所述至少一个氨基酸残基替换选自在以下氨基酸位置的替换：Pro 8、Val 12、Phe 38、Gln 40、Ala 45、Pro 46、Arg 47、Thr 48、Ser 51、Trp 59、Thr60、Leu 77和Asp 87。
63.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：
(i)VH区，其包含SEQ ID NO:115的氨基酸序列或在SEQ ID NO:115中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中所述至少一个氨基酸残基替换选自以下替换：Gln 1替换为Glu、Lys 12替换为Val、Val 20替换为Leu、Tyr 27替换为Phe、Thr 28替换为Asn、Phe 29替换为Ile、Thr 30替换为Lys、Arg 38替换为Lys、Met 48替换为Ile、Arg 67替换为Lys、Val68替换为Ala、Ala 72替换为Thr、Ser 77替换为Asp、Ala 79替换为Val、Met 81替换为Leu、Leu 83替换为Phe，以及Val 117替换为Leu；和
(ii)VL区，其包含SEQ ID NO:114的氨基酸序列或在SEQ ID NO:114中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中所述至少一个氨基酸残基替换选自以下替换：Pro 8替换为Ser、Val 12替换为Thr、Phe 38替换为Val、Gln 40替换为Glu、Ala 45替换为Leu、Pro 46替换为Phe、Arg 47替换为Ala、Thr 48替换为Gly、Ser 51替换为Gly、Trp 59替换为Gly、Thr60替换为Val、Leu 77替换为Ile，以及Asp 87替换为Ile。
64.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：
(i)VH区，其包含SEQ ID NO:165的氨基酸序列或在SEQ ID NO:165中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中所述至少一个氨基酸残基替换选自在以下氨基酸位置的替换：Gln l、Lys 12、Val 20、Tyr 27、Thr 28、Phe 29、Thr 30、Arg 38、Met 48、Arg 67、Val68、Ile 70、Ala 72、Ser 77、Met 81和Val 117；和
(ii)VL区，其包含SEQ ID NO:164的氨基酸序列或在SEQ ID NO:164中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中所述至少一个氨基酸残基替换选自在以下氨基酸位置的替换：Pro 8、Val 12、Phe 38、Gln 40、Ala 45、Pro 46、Arg 47、Thr 48、Ser 51、Trp 59、Thr60、Leu 77和Asp 87。
65.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：
(i)VH区，其包含SEQ ID NO:165的氨基酸序列或在SEQ ID NO:165中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中所述至少一个氨基酸残基替换选自以下替换：Gln 1替换为Glu、Lys 12替换为Val、Val 20替换为Leu、Tyr 27替换为Phe、Thr 28替换为Asn、Phe 29替换为Ile、Thr 30替换为Lys、Arg 38替换为Lys、Met 48替换为Ile、Arg 67替换为Lys、Val68替换为Ala、Ile 70替换为Leu、Ala 72替换为Thr、Ser 77替换为Asn、Met 81替换为Leu，以及Val 117替换为Leu；和
(ii)VL区，其包含SEQ ID NO:164的氨基酸序列或在SEQ ID NO:164中含有至少一个氨基酸残基替换的氨基酸序列，其中所述至少一个氨基酸残基替换选自以下替换：Pro 8替换为Ser、Val 12替换为Thr、Phe 38替换为Val、Gln 40替换为Glu、Ala 45替换为Leu、Pro 46替换为Phe、Arg 47替换为Thr、Thr 48替换为Gly、Ser 51替换为Gly、Trp 59替换为Gly、Thr60替换为Val、Leu 77替换为Ile，以及Asp 87替换为Ile。
66.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：
(i)VH区，其包含选自以下的氨基酸序列：SEQ ID NOs：115、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154，155、156、157、158、159、160、161、162和163，以及
(ii)VL区，其包含选自以下的氨基酸序列：SEQ ID NOs：114、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137和138。
67.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：
(i)VH区，其包含选自以下的氨基酸序列：SEQ ID NOs:165、171、172、173、174、175、176和177，以及
(ii)VL区，其包含选自以下的氨基酸序列：SEQ ID NOs：164、166、167、168、169和170。
68.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:161的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:130的氨基酸序列的VL区。
69.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:161的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:136的氨基酸序列的VL区。
70.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:161的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:137的氨基酸序列的VL区。
71.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:161的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:138的氨基酸序列的VL区。
72.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:176的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:166的氨基酸序列的VL区。
73.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:176的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:167的氨基酸序列的VL区。
74.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:174的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:167的氨基酸序列的VL区。
75.根据权利要求1-33中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:175的氨基酸序列的VH区和含有SEQ ID NO:167的氨基酸序列的VL区。
76.根据权利要求62-75中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是人源化抗体。
77.根据权利要求1-76中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段与试剂缀合。
78.根据权利要求76所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述试剂选自：细胞毒性剂、放射性同位素、金属螯合剂、酶、荧光化合物、生物发光化合物和化学发光化合物。
79.一种药物组合物，其包含权利要求1-78中任一项所述的抗体或其抗原结合片段和药学上可接受的赋形剂。
80.一种治疗和/或预防疾病或病症的方法，其包括向受试者施用治疗有效量的权利要求1-78中任一项所述的抗体或其抗原结合片段。
81.根据权利要求80所述的方法，其中所述疾病或病症是由IL-36α和/或IL-36γ介导的疾病或病症。
82.根据权利要求80所述的方法，其中所述疾病或病症是炎性疾病或自身免疫疾病。
83.根据权利要求80所述的方法，其中所述疾病或病症与皮肤组织、肠组织和/或肺组织有关。
84.根据权利要求80所述的方法，其中所述疾病或病症选自：
泛发性脓疱性牛皮癣、掌跖脓疱病、掌跖脓疱性牛皮癣、盘状红斑狼疮、红斑狼疮、特应性皮炎、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、哮喘、炎性肠病、寻常型牛皮癣、哈洛波(Hallopeau)持续性肢皮炎、急性泛发性发疹性脓疱病、化脓性汗腺炎、扁平苔藓、干燥综合征、类风湿性关节炎、银屑病关节炎、慢性鼻窦炎、寻常痤疮、疱疹样脓疱病、坏疽性脓皮病和多形性日光疹。
85.根据权利要求80所述的方法，其中所述受试者是人受试者。
86.一种多核苷酸，其包含编码权利要求1-76中任一项所述的抗体或其抗原结合片段或其部分的核苷酸序列。
87.根据权利要求86所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含选自以下的核苷酸序列：SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:40、SEQ ID NO:44、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:34、SEQ IDNO:38、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:46、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:56、SEQ IDNO:60、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:62和SEQID NO:66。
88.根据权利要求86所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含SEQ ID NO:22的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:50的核苷酸序列。
89.根据权利要求86所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含SEQ ID NO:26的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:54的核苷酸序列。
90.根据权利要求86所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含SEQ ID NO:30的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:54的核苷酸序列。
91.根据权利要求86所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含SEQ ID NO:34的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:54的核苷酸序列。
92.根据权利要求86所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含SEQ ID NO:38的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:58的核苷酸序列。
93.根据权利要求86所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含SEQ ID NO:42的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:62的核苷酸序列。
94.根据权利要求86所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含SEQ ID NO:46的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:66的核苷酸序列。
95.根据权利要求86所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含SEQ ID NO:20的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:48的核苷酸序列。
96.根据权利要求86所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含SEQ ID NO:24的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:52的核苷酸序列。
97.根据权利要求86所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含SEQ ID NO:28的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:52的核苷酸序列。
98.根据权利要求86所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含SEQ ID NO:32的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:52的核苷酸序列。
99.根据权利要求86所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含SEQ ID NO:36的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:56的核苷酸序列。
100.根据权利要求86所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含SEQ ID NO:40的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:60的核苷酸序列。
101.根据权利要求86所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含SEQ ID NO:44的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:64的核苷酸序列。
102.一种载体，其包含权利要求86-101中任一项所述的多核苷酸。
103.一种细胞，其包含权利要求86-101中任一项所述的多核苷酸。
104.一种细胞，其包含权利要求102所述的载体。
105.一种细胞，其是由权利要求102所述载体转化的。
106.一种杂交瘤，其产生权利要求1-76中任一项所述的抗体或其抗体片段。
107.一种制备抗体或其抗原结合片段的方法，其包括培养权利要求103-105中任一项所述的细胞或权利要求106所述的杂交瘤，以表达所述抗体或其抗原结合片段。
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