CN112825959B - 一种基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法 - Google Patents
一种基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112825959B CN112825959B CN202110149015.4A CN202110149015A CN112825959B CN 112825959 B CN112825959 B CN 112825959B CN 202110149015 A CN202110149015 A CN 202110149015A CN 112825959 B CN112825959 B CN 112825959B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- protein
- eutectic solvent
- extraction efficiency
- reagent
- soybean powder
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000002904 solvent Substances 0.000 title claims abstract description 74
- 230000005496 eutectics Effects 0.000 title claims abstract description 73
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 title claims abstract description 68
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 title claims abstract description 67
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 67
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims abstract description 67
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 25
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 43
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 27
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 23
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 12
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 44
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 31
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 30
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 27
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 27
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 27
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 22
- 239000001763 2-hydroxyethyl(trimethyl)azanium Substances 0.000 claims description 15
- 235000019743 Choline chloride Nutrition 0.000 claims description 15
- SGMZJAMFUVOLNK-UHFFFAOYSA-M choline chloride Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)CCO SGMZJAMFUVOLNK-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 15
- 229960003178 choline chloride Drugs 0.000 claims description 15
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 3
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 abstract description 63
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 37
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 abstract description 7
- 235000019710 soybean protein Nutrition 0.000 abstract description 7
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 abstract 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 abstract 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 abstract 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 20
- 238000000751 protein extraction Methods 0.000 description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 13
- 239000000370 acceptor Substances 0.000 description 11
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical group CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 238000003916 acid precipitation Methods 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- WERYXYBDKMZEQL-UHFFFAOYSA-N butane-1,4-diol Chemical compound OCCCCO WERYXYBDKMZEQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- 229940083957 1,2-butanediol Drugs 0.000 description 1
- 108010082495 Dietary Plant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010064851 Plant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- CDQSJQSWAWPGKG-UHFFFAOYSA-N butane-1,1-diol Chemical compound CCCC(O)O CDQSJQSWAWPGKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMRWNKZVCUKKSR-UHFFFAOYSA-N butane-1,2-diol Chemical compound CCC(O)CO BMRWNKZVCUKKSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 235000021118 plant-derived protein Nutrition 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000006920 protein precipitation Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/14—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from leguminous or other vegetable seeds; from press-cake or oil-bearing seeds
- A23J1/142—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from leguminous or other vegetable seeds; from press-cake or oil-bearing seeds by extracting with organic solvents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/54—Improvements relating to the production of bulk chemicals using solvents, e.g. supercritical solvents or ionic liquids
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
本发明公开了一种基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法，包括以下步骤：（1）制备大豆粉末；（2）制备低共熔溶剂；（3）将低共熔溶剂与大豆粉末混合；（4）离心取上清液；（5）加入试剂使蛋白质析出；（6）离心取下层蛋白质。通过低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法在环保、降解等领域有着很高的研究前景，同时该方法操作简单、成本低、提取效率高，为之后提取大豆蛋白提供新的思路。
Description
技术领域
本发明属于大豆蛋白提取优化领域，具体涉及一种基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法。
背景技术
大豆蛋白作为一种植物性蛋白，其蛋白质的组成种类和我们日常食用的蛋白类产品相近，其中所含的必须氨基酸种类丰富。大豆蛋白中不含有胆固醇，对于补充氨基酸来说，大豆蛋白是目前报道的唯一含有人体所需的9种必需氨基酸且含量满足人体需求的一种植物蛋白。大豆的蛋白质含量几乎是肉类和蛋类的2倍，因而可以在食品行业中发挥重要的作用，基于这样的优势，激发着越来越多的人去研究如何尽量多、尽量高效地获得我们所需要的蛋白。
传统的提取方式主要是利用碱提酸沉淀法提取大豆中的蛋白质，即利用蛋白质在碱性溶液中生成易溶物，在酸性溶液中生成沉淀的性质，用碱提取，酸沉淀达到提纯或分离的目的，但是这种提取方法有着提取效率低、污染严重、所需试剂量大、不易控制条件等缺点。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法，具有提取效率高、可回收、可降解、可控制、易于操作、成本低等优点，是一种新型高效绿色的方法，为之后提取大豆中蛋白质提供新的方法和思路。
本发明解决其技术问题采用的技术方案是：
一种基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法，包括以下步骤：
1）制备萃取液，加水稀释到所需倍数，即得低共熔溶剂的水溶液；
2）将大豆粉末加入低共熔溶剂的水溶液中，形成悬浊液；
3）将悬浊液进行加热搅拌，然后离心得到上清液；
4）向上清液中加入试剂，使蛋白质析出，离心得到蛋白质。
作为本申请的优选技术方案，所述步骤1）中制备萃取液，包括以下步骤：
1）将氢键受体与氢键供体混合；
2）将上述混合物于60~100℃加热搅拌30~150min成均一相，即得低共熔溶剂。
作为本申请的优选技术方案，所述氢键受体包括氯化胆碱、氨基酸中的一种，所述氢键供体为甘油、聚乙二醇、乙二醇、丁二醇中的至少一种，所述氢键受体与氢键供体的摩尔比为1:1-1:4。
作为本申请的优选技术方案，所述萃取液中，低共熔溶剂的体积分数为10-100%。
作为本申请的优选技术方案，步骤3）中，所述加热温度为20-100 ℃，所述搅拌转速为250-1250 rpm，所述搅拌时间为1-5 h。
作为本申请的优选技术方案，所述大豆粉末与步骤4）中试剂的固液比为1:30-110g/mL，所述试剂加入盐酸或NaOH调节pH至3-8。
作为本申请的优选技术方案，所述试剂为水，并加入饱和食盐水，其中饱和食盐水的体积分数为0-100%。
作为本申请的优选技术方案，所述饱和食盐水的体积分数为20-100%。
作为本申请的优选技术方案，所述试剂为乙醇。
作为本申请的优选技术方案，所述大豆粉末与低共熔溶剂的固液比为1:6~22g/mL。
有益效果：
本发明的大豆加工成粉末，以提高低共熔溶剂和大豆粉末之间的结合，提高低共熔溶剂提取大豆粉末中蛋白质的效率；低共熔溶剂由氢键受体和氢键供体组成，是一种新型溶剂，合成简单快速、绿色无污染、降解性好、价格低廉；将低共熔溶剂与大豆粉末混合，以加热搅拌为提取手段，蛋白质和低共熔溶剂通过氢键连接，将大豆粉末中的蛋白质溶解到溶剂中来，对大豆中的蛋白质进行提取，该方法拥有污染少、用量少、无废酸废碱产生、操作简单、提取效率高等优点。
附图说明
图1是本发明基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法的工艺流程图；
图2是氢键受体与氢键供体的摩尔比为1:1和1:3，低共熔溶剂的体积分数为20%、40%、60%、80%、100%的萃取液对大豆中蛋白质的提取率；
图3是氢键受体与氢键供体的摩尔比为1:1、1:2、1:3、1:4，低共熔溶剂的体积分数为10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%的萃取液对大豆中蛋白质的提取率；
图4是加热温度对蛋白质提取效率的影响；
图5是搅拌转速对蛋白质提取效率的影响；
图6是搅拌时间对蛋白质提取效率的影响；
图7是大豆粉末与低共熔溶剂的固液比对蛋白质提取效率的影响；
图8是试剂为水时，大豆粉末与试剂的固液比对蛋白质提取效率的影响；
图9是试剂pH对蛋白质提取效率的影响；
图10是试剂为水时，饱和食盐水的体积分数对蛋白质提取效率的影响。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明做进一步详细说明。所用试剂或者仪器设备未注明生产厂商的，均视为可以通过市场购买的常规产品。每一次试验大豆粉末的用量均为1g。
实施例1：初步考察氢键受体、氢键供体种类及其摩尔比、低共熔溶剂的体积分数对提取效率的影响。
一种基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法，包括以下步骤：
1）制备萃取液，即低共熔溶剂溶液：将氯化胆碱依次与甘油、聚乙二醇、乙二醇、1,2-丁二醇、1,4-丁二醇，分别以1:1、1:3的摩尔比混合，于60~100℃加热搅拌30~150min成均一相，即得低共熔溶剂，随后加水进行稀释，分别配制低共熔溶剂的体积分数为20%、40%、60%、80%、100%的萃取液；
2）将大豆粉末加入低共熔溶剂中，形成悬浊液，固液比为1:10g/mL；
3）将悬浊液于60℃加热搅拌2h，转速为1000 rpm，然后离心得到上清液；
4）用盐酸调节50mL水至pH为4，使得大豆粉末与水的固液比为1:50 g/mL，加入上清液中，使蛋白质析出，离心得到蛋白质。
如图2所示，氢键受体为氯化胆碱，氢键供体为甘油，两者的摩尔比为1:3，低共熔溶剂的体积分数为100%时提取效率最高，同时图2中还可以看出当低共熔溶剂的体积分数为20%时，提取效率较低。
实施例2：进一步考察氢键受体、氢键供体的摩尔比、低共熔溶剂的体积分数对提取效率的影响。
一种基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法，包括以下步骤：
1）制备萃取液，即低共熔溶剂溶液：将氯化胆碱与甘油，分别以1:1、1:2、1:3、1:4的摩尔比混合，于60~100℃加热搅拌30~150min成均一相，即得低共熔溶剂，随后加水进行稀释，分别配制低共熔溶剂的体积分数为10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%的萃取液；
2）将大豆粉末加入低共熔溶剂中，形成悬浊液，固液比为1:10g/mL；
3）将悬浊液于60℃加热搅拌2h，转速为1000 rpm，然后离心得到上清液；
4）用盐酸调节50mL水至pH为4，使得大豆粉末与水的固液比为1:50 g/mL，加入上清液中，使蛋白质析出，离心得到蛋白质。
如图3所示，氢键受体为氯化胆碱，氢键供体为甘油，两者的摩尔比为1:3，低共熔溶剂的体积分数为100%时提取效率最高。
实施例3：考察加热温度对蛋白质提取效率的影响。
一种基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法，包括以下步骤：
1）制备萃取液，即低共熔溶剂溶液：将氯化胆碱与甘油，以1:3的摩尔比混合，于60~100℃加热搅拌30~150min成均一相，即得低共熔溶剂的体积分数为100%的萃取液；
2）将大豆粉末加入低共熔溶剂中，形成悬浊液，固液比为1:10g/mL；
3）将悬浊液分别于20℃、40℃、60℃、80℃、100℃加热搅拌2h，转速为1000 rpm，然后离心得到上清液；
4）用盐酸调节50mL水至pH为4，使得大豆粉末与水的固液比为1:50 g/mL，加入上清液中，使蛋白质析出，离心得到蛋白质。
如图4所示，在100℃时拥有最高的提取效率，但是由于大豆蛋白质主要由7S和11S两种蛋白组成，两种蛋白的变性温度分别是75℃和90℃，所想要获得的是没有变性的蛋白，所以根据图4中所示，选择60℃为最佳加热温度。
实施例4：考察搅拌转速对蛋白质提取效率的影响。
一种基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法，包括以下步骤：
1）制备萃取液，即低共熔溶剂溶液：将氯化胆碱与甘油，以1:3的摩尔比混合，于60~100℃加热搅拌30~150min成均一相，即得低共熔溶剂的体积分数为100%的萃取液；
2）将大豆粉末加入低共熔溶剂中，形成悬浊液，固液比为1:10g/mL；
3）将悬浊液于60℃加热搅拌2h，转速分别为250rpm、500rpm、750rpm、1000 rpm、1250rpm，然后离心得到上清液；
4）用盐酸调节50mL水至pH为4，使得大豆粉末与水的固液比为1:50 g/mL，加入上清液中，使蛋白质析出，离心得到蛋白质。
如图5所示，在1250rpm时提取效率最高，随着转速的提升，提取效率越来越高，可能是因为，低共熔溶剂拥有较高的粘性，在低转速下与大豆蛋白粉末接触比高转速下接触概率小，提取效率因此不高。
实施例5：考察搅拌时间对蛋白质提取效率的影响。
一种基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法，包括以下步骤：
1）制备萃取液，即低共熔溶剂溶液：将氯化胆碱与甘油，以1:3的摩尔比混合，于60~100℃加热搅拌30~150min成均一相，即得低共熔溶剂的体积分数为100%的萃取液；
2）将大豆粉末加入低共熔溶剂中，形成悬浊液，固液比为1:10g/mL；
3）将悬浊液于60℃加热，分别搅拌1h、2h、3h、4h、5h，转速为1250rpm，然后离心得到上清液；
4）用盐酸调节50mL水至pH为4，使得大豆粉末与水的固液比为1:50 g/mL，加入上清液中，使蛋白质析出，离心得到蛋白质。
如图6所示，在1-4h这个时间段内，蛋白质的提取效率随时间增加而变高，在4h之后，提取效率开始降低。搅拌时间太短使低共熔溶剂无法充分和大豆粉末进行混合，即提取效率相对偏低，而搅拌时间过长可能会造成蛋白质的破坏，使提取的蛋白质偏少，因此选择4h作为最佳搅拌时间。
实施例6：考察大豆粉末与低共熔溶剂的固液比对蛋白质提取效率的影响。
一种基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法，包括以下步骤：
1）制备萃取液，即低共熔溶剂溶液：将氯化胆碱与甘油，以1:3的摩尔比混合，于60~100℃加热搅拌30~150min成均一相，即得低共熔溶剂的体积分数为100%的萃取液；
2）将大豆粉末加入低共熔溶剂中，形成悬浊液，固液比分别为1:6g/mL、1:10g/mL、1:14g/mL、1:18g/mL、1:22g/mL；
3）将悬浊液于60℃加热搅拌4h，转速为1250rpm，然后离心得到上清液；
4）用盐酸调节50mL水至pH为4，使得大豆粉末与水的固液比为1:50 g/mL，加入上清液中，使蛋白质析出，离心得到蛋白质。
如图7所示，在1:6-14g/mL范围内，提取效率随固液比增加而上升，之后继续提高固液比则提取效率降低，可以看出，提取效率先增高后降低，在1:14g/mL时，蛋白质提取效率最高。
实施例7：考察试剂为水时，大豆粉末与试剂的固液比对蛋白质提取效率的影响。
一种基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法，包括以下步骤：
1）制备萃取液，即低共熔溶剂溶液：将氯化胆碱与甘油，以1:3的摩尔比混合，于60~100℃加热搅拌30~150min成均一相，即得低共熔溶剂的体积分数为100%的萃取液；
2）将大豆粉末加入低共熔溶剂中，形成悬浊液，固液比为1:14g/mL；
3）将悬浊液于60℃加热搅拌4h，转速为1250rpm，然后离心得到上清液；
4）用盐酸分别调节30 mL、40 mL、50mL、60 mL、70 mL、80 mL、90 mL、100 mL、110mL水至pH为4，使得大豆粉末与水的固液比分别为1:30 g/mL、1:40 g/mL、1:50 g/mL、1:60g/mL、1:70 g/mL、1:80 g/mL、1:90 g/mL、1:100 g/mL、1:110 g/mL，加入上清液中，使蛋白质析出，离心得到蛋白质。
如图8所示，在30-50mL的区间段，随着试剂量的增加，蛋白质的提取效率也随着提高，但是继续提高加水量则蛋白质的提取效率几乎没有什么变化。可能原因是，在50mL时，已经有足够的水使低共熔溶剂变性，使蛋白质析出，之后继续加水并没有效果。
实施例8：考察试剂pH对蛋白质提取效率的影响。
一种基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法，包括以下步骤：
1）制备萃取液，即低共熔溶剂溶液：将氯化胆碱与甘油，以1:3的摩尔比混合，于60~100℃加热搅拌30~150min成均一相，即得低共熔溶剂的体积分数为100%的萃取液；
2）将大豆粉末加入低共熔溶剂中，形成悬浊液，固液比为1:14g/mL；
3）将悬浊液于60℃加热搅拌4h，转速为1250rpm，然后离心得到上清液；
4）用盐酸或NaOH调节50mL水至pH分别为3、4、5、6、7、8，使得大豆粉末与水的固液比为1:50 g/mL，加入上清液中，使蛋白质析出，离心得到蛋白质。
如图9所示，在pH值为4时达到最高的提取效率，当加入的试剂酸性越来越弱、碱性越来越强时，蛋白质的提取效率下降，可能的原因是此条件下蛋白质溶解。而酸性原来越强时，蛋白质的提取效率同样下降，可能原因也是，酸性条件下蛋白质发生了溶解，使得提取效率降低。
实施例9：考察试剂为水时，饱和食盐水的体积分数对蛋白质提取效率的影响。
一种基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法，包括以下步骤：
1）制备萃取液，即低共熔溶剂溶液：将氯化胆碱与甘油，以1:3的摩尔比混合，于60~100℃加热搅拌30~150min成均一相，即得低共熔溶剂的体积分数为100%的萃取液；
2）将大豆粉末加入低共熔溶剂中，形成悬浊液，固液比为1:14g/mL；
3）将悬浊液于60℃加热搅拌4h，转速为1250rpm，然后离心得到上清液；
4）用盐酸调节试剂至pH为4，使得大豆粉末与试剂的固液比为1:50 g/mL，其中饱和食盐水的体积分数分别为20%、40%、60%、80%、100%，加入上清液中，使蛋白质析出，离心得到蛋白质。
如图10所示，随着饱和食盐水的体积分数提高，蛋白质的提取效率也随之提高，原因可能是蛋白质在盐水中的溶解度相比于纯水中较低。
由上述实施例可知，当氢键受体为氯化胆碱、氢键供体为甘油、两者摩尔比为1:3、低共熔溶剂的体积分数为100%、固液比为1:14g/mL、加热温度为60℃、搅拌时间为4h、转速为1250rpm、大豆粉末与试剂的固液比为1:50 g/mL、试剂pH为4、饱和食盐水体积分数为100%时，对大豆中蛋白质的提取效率最高，提取率为33.5%，相比于传统的蛋白质提取效率30%，提高了约3.5%。
以上所述仅针对本发明的优选实施例进行举例说明，并非对本发明做任何形式上的限制。本发明的基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法，氢键受体还包括但不限于氨基酸，添加的试剂为乙醇，也能实现对大豆中蛋白质的提取。
本发明的保护内容不局限于以上实施例。在不背离发明构思的精神和范围下，本领域技术人员能够想到的变化和优点都被包括在本发明中，并且以所附的权利要求为保护范围。
Claims (1)
1.一种基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法，其特征在于：包括以下步骤：
1）制备低共熔溶剂：将氢键受体氯化胆碱与氢键供体甘油混合，所述氢键受体氯化胆碱与氢键供体甘油的摩尔比为1:3，将混合物于60~100℃加热搅拌30~150min成均一相；
2）将大豆粉末加入低共熔溶剂中，形成悬浊液，固液比为1:14g/mL；
3）将悬浊液于60℃加热搅拌4h，转速为1250rpm，然后离心得到上清液；
4）使用饱和食盐水作为试剂，用盐酸调节试剂至pH为4，加入上清液中，使蛋白质析出，离心得到蛋白质，大豆粉末与试剂的固液比为1:50 g/mL。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110149015.4A CN112825959B (zh) | 2021-02-03 | 2021-02-03 | 一种基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110149015.4A CN112825959B (zh) | 2021-02-03 | 2021-02-03 | 一种基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112825959A CN112825959A (zh) | 2021-05-25 |
| CN112825959B true CN112825959B (zh) | 2023-05-16 |
Family
ID=75931850
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110149015.4A Active CN112825959B (zh) | 2021-02-03 | 2021-02-03 | 一种基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112825959B (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2024080933A1 (en) * | 2022-10-13 | 2024-04-18 | Agency For Science, Technology And Research | A method of separating protein fractions |
| CN116355583A (zh) * | 2023-03-15 | 2023-06-30 | 江苏大学 | 一种改性生物基胶黏剂及其制备方法和应用 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2017089655A1 (en) * | 2015-11-27 | 2017-06-01 | Teknologian Tutkimuskeskus Vtt Oy | Process for separating proteins from biomass materials |
| CN106939043A (zh) * | 2017-05-12 | 2017-07-11 | 甘肃凯源生物技术开发中心 | 一种低共熔溶剂‑盐双水相萃取螺旋藻中藻蓝蛋白的方法 |
| CN110183510A (zh) * | 2019-05-28 | 2019-08-30 | 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所 | 天然低共熔溶剂一步分离昆虫蛋白质、油脂和甲壳素的方法及其应用 |
| CN111345392A (zh) * | 2020-02-24 | 2020-06-30 | 天津科技大学 | 一种低共熔溶剂及其制备方法和在提取植物蛋白中的用途 |
| CN112125949A (zh) * | 2020-09-17 | 2020-12-25 | 上海应用技术大学 | 一种利用低共熔溶剂提取酵母多肽的方法 |
-
2021
- 2021-02-03 CN CN202110149015.4A patent/CN112825959B/zh active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2017089655A1 (en) * | 2015-11-27 | 2017-06-01 | Teknologian Tutkimuskeskus Vtt Oy | Process for separating proteins from biomass materials |
| CN106939043A (zh) * | 2017-05-12 | 2017-07-11 | 甘肃凯源生物技术开发中心 | 一种低共熔溶剂‑盐双水相萃取螺旋藻中藻蓝蛋白的方法 |
| CN110183510A (zh) * | 2019-05-28 | 2019-08-30 | 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所 | 天然低共熔溶剂一步分离昆虫蛋白质、油脂和甲壳素的方法及其应用 |
| CN111345392A (zh) * | 2020-02-24 | 2020-06-30 | 天津科技大学 | 一种低共熔溶剂及其制备方法和在提取植物蛋白中的用途 |
| CN112125949A (zh) * | 2020-09-17 | 2020-12-25 | 上海应用技术大学 | 一种利用低共熔溶剂提取酵母多肽的方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 郝利平,郝林.黑大豆与扁豆活性蛋白质提取工艺的研究.农业工程学报.2002,(03),117-119. * |
| 陈青松.基于低共熔溶剂大分子提取体系的构建及应用研究.《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技Ⅰ辑》.2022,(第1期),B016-1209. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN112825959A (zh) | 2021-05-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN112825959B (zh) | 一种基于低共熔溶剂提取大豆中蛋白质的方法 | |
| CN101429467B (zh) | 一种从微藻中同时提取油脂和蛋白质的方法 | |
| CN101928742B (zh) | 一种具有抗氧化性活性的乳清蛋白活性肽及其制备方法 | |
| CN102229973B (zh) | 油松花粉小肽的提取方法 | |
| CN107858393B (zh) | 一种从核桃粕中提取蛋白多肽的方法 | |
| CN101401658A (zh) | 一种水酶法从花生中提取油与水解蛋白的中试方法 | |
| CN102088866A (zh) | 可溶性卡诺拉蛋白质分离物的生产 | |
| JP2017521084A (ja) | 微細藻類バイオマスから可溶性タンパク質を抽出する方法 | |
| WO2001060180A1 (en) | Enzymatic processing of rice bran to produce edible products | |
| CN113698506B (zh) | 一种温度响应型低共熔溶剂及提取枸杞多糖的方法 | |
| CN111838400A (zh) | 一种提高双重疏水性蛋白质溶解度的方法 | |
| CN111345392A (zh) | 一种低共熔溶剂及其制备方法和在提取植物蛋白中的用途 | |
| CN1765921A (zh) | 大豆分离蛋白的制备工艺及制备的大豆小肽和工艺 | |
| CN106035980B (zh) | 一种利用酶解法肝素吸附残液生产肠膜蛋白粉的方法 | |
| CN107653055A (zh) | 一种超声辅助水酶法提取茶叶籽油的方法 | |
| CN109527196B (zh) | 一种提高大豆蛋白酶解效率和产率的方法 | |
| JP2017521451A (ja) | 微細藻類バイオマスから可溶性タンパク質を抽出するための方法 | |
| CN104041655A (zh) | 一种大豆分离蛋白的生产方法 | |
| CN101220387B (zh) | 一种小麦草蛋白多肽提取工艺 | |
| JP4662846B2 (ja) | 酒類のオリ下げ剤 | |
| CN115368486A (zh) | 一种三元低共熔溶剂及其在克氏原螯虾壳甲壳素提取中的应用 | |
| CN115553374A (zh) | 一种亚麻籽蛋白-多糖天然共混物的提取与多场景化利用方法 | |
| CN1579538A (zh) | 一种大蒜蛋白酶解物系列产品及其制备方法和用途 | |
| CN114939084A (zh) | 一种芦菇提取物及其制备方法和应用 | |
| CN116076699A (zh) | 一种植物原料粕酶解处理品及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Chen Qingsong Inventor after: Lin Jun Inventor after: Bi Wentao Inventor before: Chen Qingsong Inventor before: Lin Jun |
|
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |