CN112822999A

CN112822999A - Csf-1r抗体制剂

Info

Publication number: CN112822999A
Application number: CN201980067033.9A
Authority: CN
Inventors: S·K·K·拉瓦里; 杨可伟
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 2018-09-13
Filing date: 2019-09-12
Publication date: 2021-05-18
Also published as: KR20210062027A; US20210205453A1; CA3111858A1; AU2019339740A1; WO2020053321A1; MX2021002935A; AU2019339740A8; BR112021004649A2; JP2022500386A; EP3849518A1; IL281255A

Abstract

本发明涉及一种稳定的液体药物制剂，所述液体药物制剂包含40mg/mL至200mg/mL抗CSF‑1R的抗体、0.01％(w/v)至0.1％(w/v)表面活性剂、5mM至100mM缓冲剂以及10mM至500mM至少一种稳定剂；pH值在4.5至7.0的范围内。

Description

CSF-1R抗体制剂

技术领域

本发明涉及抗CSF-1R的抗体分子的制剂、制备所述制剂的方法以及该制剂的用途。

背景技术

人CSF-1受体(CSF-1R；集落刺激因子1受体；别名：M-CSF受体；巨噬细胞集落刺激因子1受体，Fms原癌基因，c-fms，SEQ ID NO：13)自1986年起为人们所知(Coussens，L.，等人，Nature 320(1986)277-280)。CSF-1R是CSF-1(集落刺激因子1，也称为M-CSF，巨噬细胞集落刺激因子)的受体，并且介导该细胞因子的生物学效应(Sherr，C.J.等人，Cell 41(1985)665-676)。Roussel，M.F.等人(Nature 325(1987)549-552)首次报道了集落刺激因子-1受体(CSF-1R)(也称为c-fms)的克隆。该论文表明，CSF-1R具有转化潜能，具体取决于蛋白质C端尾部的变化，包括与Cbl结合的抑制性酪氨酸969磷酸化的丧失，从而调节受体的下调(Lee，P.S.等人，Embo J.18(1999)3616-3628)。研究人员还鉴定出称为白细胞介素-34(IL-34)的CSF-1R的第二种配体(Lin，H.等人，Science 320(2008)807-811)。

集落刺激因子1(CSF-1)及其受体CSF-1R调节巨噬细胞及其前体的迁移、分化和存活。CSF-1R是生长因子受体的受体蛋白酪氨酸激酶(rPTK)家族的成员，其中包括多种已知的原癌基因。软组织的弥漫型腱鞘巨细胞肿瘤(TGCT)(又称色素沉着绒毛结节性滑膜炎[PVNS])是一种罕见的影响大关节的增生性疾病，其特征在于CSF-1的过表达。在大多数TGCT患者中，涉及CSF-1编码基因的染色体易位导致滑膜内层细胞过表达该细胞因子。这导致表达CSF-1R的细胞的大量募集，这些细胞主要是形成主体肿瘤性肿块的非恶性单核和多核细胞。边缘切除或完全滑膜切除术仍然是TGCT的治疗选择，但是由于局部破坏性和复发性肿瘤的生长，该病症有时需要进行肢体切除手术。Emactuzumab是抗CSF-1R的抗体，已被证明可成功治疗该罕见病(Cassier，P.等人，Lancet Oncol.16(2015)949-956)。

CSF-1R信号传导的主要生物学效应是造血前体细胞向巨噬细胞谱系(包括破骨细胞)的分化、增殖、迁移和存活。CSF-1R的活化由其配体CSF-1(M-CSF)和IL-34介导。CSF-1(M-CSF)与CSF-1R的结合通过酪氨酸磷酸化诱导同型二聚体的形成和激酶的活化(Li，W.等人，EMBO Journal.10(1991)277-288；Stanley，E.R.等人，Mol.Reprod.Dev.46(1997)4-10)。

生物活性同型二聚体CSF-1在CSF-1受体(CSF-1R-ECD)的细胞外结构域的亚结构域D1至D3内与CSF-1R结合。CSF-1R-ECD包含五个免疫球蛋白样亚结构域(指定为D1至D5)。细胞外结构域(CSF-1R-ECD)的亚结构域D4至D5不参与CSF-1结合(Wang，Z.等人，Molecularand Cellular Biology 13(1993)5348-5359)。亚结构域D4参与二聚化(Yeung，Y-G.等人，Molecular&Cellular Proteomics 2(2003)1143-1155；Pixley，F.J.等人，Trends CellBiol 14(2004)628-638)。WO 2011/070024 A1中描述了与SEQ ID NO：11的人CSF-1R片段delD4(一种人CSF-1R片段，其中缺失人CSF-1R-ECD的D4亚结构域)结合的抗体。这些抗体通过其位于D4和D5内的表位阻断受体二聚化界面，因此是唯一的。其中一种抗体是Emactuzumab或RG7155。该抗体的CDR和VH/VL序列如本文所公开。

抗体分子作为蛋白质药物组的一部分，非常容易受到物理和化学降解的影响。化学降解包括涉及通过键形成或裂解来修饰蛋白质以得到新化学实体的任何过程。已知多种化学反应影响蛋白质。这些反应可能涉及水解(包括肽键的裂解)以及脱酰胺、异构化、氧化和分解。物理降解是指较高阶结构的变化，并且包括变性、表面吸附、聚集和沉淀。蛋白质稳定性受蛋白质本身的特征(例如氨基酸序列、糖基化模式)以及外部影响因素(诸如温度、溶剂pH、赋形剂、界面或剪切速率)的影响。因此，确定最佳制剂条件对于保护蛋白质在生产、储存和施用过程中免于发生降解反应很重要。(Manning，M.C.等人(1989)，″Stability ofprotein pharmaceuticals″，Pharm Res 6(11)，903-918；Zheng，J.Y.，Janis，L.J.(2005)，″Influence of pH，buffer species，and storage temperature onphysicochemical stability of a humanized monoclonal antibody LA298″，Int.J.Pharmaceutics 308，46-51)。当制剂中应包含高浓度抗体时，特别难以获得稳定的治疗抗体液体制剂。

因此，本发明的一个目的是提供一种抗CSF-1R抗体的稳定制剂，其中需要尽可能少的赋形剂，能够实现所需的给药，并且方便地将抗体施用于患者。

本发明的制剂在预期的2℃至8℃的储存温度储存24个月后表现出良好的稳定性，未形成可见颗粒，从而可以在无需使用在线过滤器的情况下进行i.v.内施用，具有更高的施用便利性。将振摇和多个冻-融步骤应用于液体制剂，以模拟药品生产或运输过程中可能发生的物理应力条件。在施加振摇和冻-融应力后，本发明的制剂表现出良好的稳定性。

发明内容

本发明涉及一种与CSF-1R结合的抗体的稳定的高剂量药物制剂、制备该制剂的方法以及该制剂的用途。

在一个方面，本发明涉及一种药物制剂，该药物制剂包含：

40mg/mL至200mg/mL抗CSF-1R的抗体；

0.01％(w/v)至0.1％(w/v)表面活性剂；

5mM至100mM缓冲剂；

10mM至500mM至少一种稳定剂；

pH值在4.5至7.0的范围内。

在一个特定方面，抗CSF-1R的抗体包含：重链可变区，该重链可变区包含SEQ IDNO：1的重链CDR1(CDR-H1)、SEQ ID NO：2的CDR-H2和SEQ ID NO：3的CDR-H3；以及轻链可变区，该轻链可变区包含SEQ ID NO：4的轻链CDR1(CDR-L1)、SEQ ID NO：5的CDR-L2和SEQ IDNO：6的CDR-L3。更特别地，抗CSF-1R的抗体包含：重链可变区，该重链可变区包含SEQ IDNO：7的氨基酸序列；以及轻链可变区，该轻链可变区包含SEQ ID NO：8的氨基酸序列。

根据本发明所述的制剂可提供为液体形式、冻干形式由冻干形式重构的液体形式。

在根据本发明所述的药物制剂中可用的抗CSF-1R的抗体如下文所详述。

在一个优选的方面，根据本发明所述的制剂中包含的抗CSF-1R的抗体的浓度在40mg/mL至100mg/mL的范围内，优选地在40mg/mL至75mg/mL的范围内，更优选地在40mg/mL至60mg/mL的范围内。特别优选的浓度为50mg/mL。

在另一方面，药物制剂包含浓度范围为0.01％(w/v)至0.1％(w/v)的表面活性剂。在本发明的制剂中，表面活性剂的浓度以百分比描述，表示为重量/体积(w/v)。优选地，药物制剂包含浓度范围为0.02％至约0.05％(w/v)并且最优选0.04％(w/v)的表面活性剂。根据权利要求1或2所述的药物制剂，其中表面活性剂为聚山梨酯。在本发明中使用的优选表面活性剂为聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯(即，聚山梨酯)，优选聚山梨酯20或聚山梨酯80。在一个特定方面，表面活性剂为聚山梨酯20。

在另一方面，根据本发明所述的药物制剂包含缓冲剂。优选地，缓冲剂为组氨酸缓冲液。组氨酸缓冲液是以组氨酸(通常为L-组氨酸)作为缓冲剂的缓冲液。最优选地为L-组氨酸/HCl缓冲液，其包含L-组氨酸或L-组氨酸与L-组氨酸盐酸盐的混合物，并且通过盐酸实现pH调节。除非另有说明，否则本文中用于描述缓冲剂的术语“组氨酸”是指L-组氨酸/HCl缓冲液，特别是组氨酸氯化物缓冲液。在一个方面，缓冲剂的浓度在10mM至30mM的范围内，更特别地为20mM。

优选地，制剂的pH在5.0至6.5的范围内，特别是约6.0。因此，制剂的pH优选为6.0。无论使用哪种缓冲剂，均可使用本领域中已知的酸或碱(例如盐酸、乙酸、磷酸、硫酸和柠檬酸、氢氧化钠和氢氧化钾)调节pH。

在另一方面，根据本发明所述的药物制剂包含至少一种稳定剂，所述至少一种稳定剂选自由盐、糖和氨基酸组成的组。在一个特定方面，所述至少一种稳定剂为糖，特别是选自由蔗糖、海藻糖、乳糖、麦芽糖和棉子糖组成在组的寡糖。更特别地，糖为蔗糖。在一个优选的方面，稳定剂或糖以在140mM至250mM的范围内、特别是在210mM至230mM的范围内的浓度存在。优选地，糖以220mM的浓度存在。

在另一方面，根据本发明所述的药物制剂包含选自由盐、糖和氨基酸组成的组的第一稳定剂以及作为第二稳定剂的蛋氨酸。在优选的方面，第一稳定剂以120mM至300mM的浓度存在，并且第二稳定剂蛋氨酸以5mM至25mM的浓度存在。更优选地，蛋氨酸以10mM的浓度存在。

本发明的制剂中包含的抗CSF-1R的抗体优选地为以1∶50或更低的比率与人CSF-1R片段delD4(SEQ ID NO：11)和与人CSF-1R细胞外结构域(SEQ ID NO：12)的抗体结合。

在一个特定方面，本发明涉及一种药物制剂，该药物制剂包含

40mg/mL至100mg/mL抗CSF-1R的抗体；

20mM L-组氨酸；

0.03％(w/v)至0.05％(w/v)聚山梨酯20；

210mM至230mM蔗糖；

任选地5mM至25mM蛋氨酸；

pH值为6.0±0.5。

在一个特定方面，根据本发明所述的药物制剂包含

50mg/mL抗CSF-1R的抗体；

20mM L-组氨酸；

0.04％(w/v)聚山梨酯20；

220mM蔗糖；

10mM蛋氨酸；

pH值为6.0±0.5。

在另一方面，本文提供了一种药物制剂，该药物制剂包含

50mg/mL抗CSF-1R的抗体；

20mM L-组氨酸；

0.04％(w/v)聚山梨酯20；

220mM蔗糖；

pH值为6.0±0.5。

在另一方面，本文提供了一种药物制剂，该药物制剂包含

50mg/mL抗CSF-1R的抗体；

20mM L-组氨酸；

0.04％(w/v)泊洛沙姆188；

220mM蔗糖；

pH值为6.0±0.5。

在另一方面，本文提供了一种药物制剂，该药物制剂包含

50mg/mL抗CSF-1R的抗体；

20mM L-组氨酸；

0.04％(w/v)聚山梨酯20；

130mM氯化钠；

pH值为6.0±0.5。

在另一方面，本文提供了一种药物制剂，该药物制剂包含

50mg/mL抗CSF-1R的抗体；

20mM L-组氨酸；

0.04％(w/v)聚山梨酯20；

130mM氯化钠；

10mM蛋氨酸；

pH值为6.0±0.5。

在另一方面，本文提供了一种药物制剂，该药物制剂包含

50mg/mL抗CSF-1R的抗体；

20mM L-组氨酸；

0.04％(w/v)泊洛沙姆188；

130mM氯化钠；

pH值为6.0±0.5。

在另一方面，根据本发明所述的药物制剂包含

50mg/mL抗CSF-1R的抗体；

20mM L-组氨酸；

0.04％(w/v)聚山梨酯20；

220mM蔗糖；

pH值为5.5±0.5。

在另一方面，根据本发明所述的药物制剂包含

50mg/mL抗CSF-1R的抗体；

20mM L-组氨酸；

0.04％(w/v)聚山梨酯20；

220mM蔗糖；

10mM蛋氨酸；

pH值为5.5±0.5。

在另一方面，根据本发明所述的药物制剂包含

50mg/mL抗CSF-1R的抗体；

20mM L-组氨酸；

0.04％(w/v)泊洛沙姆188；

220mM蔗糖；

pH值为5.5±0.5。

在另一方面，本文提供了一种药物制剂，该药物制剂包含

50mg/mL抗CSF-1R的抗体；

20mM L-组氨酸；

0.04％(w/v)聚山梨酯20；

130mM氯化钠；

pH值为5.5±0.5。

在另一方面，本文提供了一种药物制剂，该药物制剂包含

50mg/mL抗CSF-1R的抗体；

20mM L-组氨酸；

0.04％(w/v)聚山梨酯20；

130mM氯化钠；

10mM蛋氨酸；

pH值为5.5±0.5。

在另一方面，本文提供了一种药物制剂，该药物制剂包含

50mg/mL抗CSF-1R的抗体；

20mM L-组氨酸；

0.04％(w/v)泊洛沙姆188；

130mM氯化钠；

pH值为5.5±0.5。

在另一方面，根据本发明所述的药物制剂包含

50mg/mL抗CSF-1R的抗体；

20mM L-组氨酸；

0.04％(w/v)聚山梨酯20；

240mM海藻糖；

pH值为6.0±0.5。

在另一方面，根据本发明所述的药物制剂包含

50mg/mL抗CSF-1R的抗体；

20mM L-组氨酸；

0.04％(w/v)聚山梨酯20；

240 mM海藻糖；

10 mM蛋氨酸；

pH值为6.0±0.5。

在另一方面，根据本发明所述的药物制剂包含

50mg/mL抗CSF-1R的抗体；

20mM L-组氨酸；

0.04％(w/v)泊洛沙姆188；

240mM海藻糖；

pH值为6.0±0.5。

在另一方面，本发明涉及如前文所述的用于治疗癌症或转移的药物制剂。在另一方面，如前文所述的药物制剂用于治疗骨质流失。在另一方面，如前文所述的药物制剂用于治疗炎症性疾病诸如炎症性肠病。在一个优选的方面，如前文所述的药物制剂用于治疗色素沉着绒毛结节性滑膜炎(PVNS)或腱鞘巨细胞肿瘤(TGCT)。

在另一方面，如前文所述的药物制剂与另一种治疗剂特别是另一种免疫疗法联合使用。在一个特定方面，药物制剂与阻断PD-L1/PD-1相互作用的试剂联合使用。在另一方面，本发明涉及如前文所述的药物制剂用于制备治疗癌症或转移的药物的用途。在另一方面，提供了如前文所述的药物制剂用于制备治疗骨质流失的药物的用途。在另一方面，提供了如前文所述的药物制剂用于制备治疗炎症性疾病诸如炎症性肠病的药物的用途。在一个优选的方面，提供了如前文所述的药物制剂用于制备治疗色素沉着绒毛结节性滑膜炎(PVNS)或腱鞘巨细胞肿瘤(TGCT)的药物的用途。

具体实施方式

本发明涉及一种包含抗CSF-1R的抗体的稳定的药物制剂。

术语“药物制剂”或“药物组合物”是指处于允许活性成分的生物活性明确有效的形式，并且不含对于将被施用制剂的受试者有毒的另外组分的制备物。

如本文中与根据本发明所述的制剂结合使用的术语“液体”表示在大气压下和至少约2℃至约8℃的温度为液体的制剂。

如本文中与根据本发明所述的制剂结合使用的术语“冻干的”表示通过本领域本身已知的冷冻干燥方法生产的制剂。通过冷冻去除溶剂(例如水)，然后在真空下使冰升华，并且在高温下解吸残留的水。冻干物通常具有约0.1％(w/w)至5％(w/w)的残留水分，并且以粉末或物理稳定的饼状物形式存在。冻干物的特征在于在添加重构介质后迅速溶解。

如本文中与根据本发明所述的制剂结合使用的术语“重构介质”表示被冻干并且通过添加重构介质而重新溶解的制剂。合适的重构介质包括但不限于注射用水(WFI)、抑菌注射用水(BWFI)、氯化钠溶液(例如0.9％(w/v)NaCl)、葡萄糖溶液(例如5％葡萄糖)、含表面活性剂的溶液(例如0.01％聚山梨酯20)、pH缓冲溶液(例如磷酸盐缓冲溶液)。

根据本发明所述的制剂在生理上具有良好的耐受性，可能易于制备，可精确分配，并且在储存过程中、在反复冻融循环过程中以及机械应力下，在分解产物和聚集体方面保持稳定。

“稳定”制剂是其中蛋白质(例如抗体)在储存时基本上保持其物理和化学稳定性及其生物活性的制剂。

“稳定的液体药物抗体制剂”是在冷藏温度(2至8℃)储存至少12个月(特别是2年，更特别是3年)后未观察到明显变化的液体抗体制剂。稳定性标准如下：通过体积排阻色谱法(SEC-HPLC)测得，不超过10％(特别是5％)的抗体单体发生降解。此外，通过目视分析，溶液呈无色或澄清至微乳白色。制剂的蛋白质浓度变化不超过+/-10％。形成不超过10％(特别是5％)的聚集体。稳定性通过本领域中的已知的方法诸如UV光谱法、体积排阻色谱法(SEC-HPLC)、离子交换色谱法(IE-HPLC)、比浊法和目视检查来衡量。

术语“抗体”涵盖各种形式的抗体结构，包括但不限于完整抗体和抗体片段。根据本发明所述的抗体特别是人抗体、人源化抗体、嵌合抗体、抗体片段或进一步的经遗传工程改造的抗体，只要其保留根据本发明所述的特性即可。更特别地，抗体为人源化单克隆抗体，尤其是重组人源化抗体。在一个特定方面，人源化抗体为人IgG1同种型。

术语“人源化抗体”是指其中框架或“互补决定区”(CDR)经修饰以包含与亲本免疫球蛋白相比具有不同特异性的免疫球蛋白的CDR的抗体。在一个优选实施例中，将鼠CDR移植到人抗体的框架区以制备“人源化抗体”。参见例如以下文献：Riechmann，L.等人，Nature332(1988)323-327；和Neuberger，M.S.等人，Nature 314(1985)268-270。特别优选的CDR对应于那些代表识别上述嵌合抗体的抗原的序列。本发明涵盖的其他形式的“人源化抗体”是这样的抗体，相对于原始抗体，所述抗体中的恒定区已经经过了另外修饰或改变，以产生根据本发明的特性，特别是关于C1q结合和/或Fc受体(FcR)结合的特性。

“抗CSF-1R的抗体”是与人CSF-1R特异性结合的抗体。特别有用的抗CSF-1R的抗体为例如PCT公开WO 2011/070024 A1(其全文以引用方式并入本文)中描述的抗体。这些抗体的独特之处在于它们以1∶50或更低的比率结合至人CSF-1R片段delD4(包含细胞外亚结构域D1-D3和D5，SEQ ID NO：11)和人CSF-1R细胞外结构域(CSF-1R-ECD)(包含细胞外亚结构域D1-D5，SEQ ID NO：12)的抗体。借助其位于D4和D5内的表位，它们能够阻断受体二聚化界面。

“特异性结合”是指结合对于抗原具有选择性，并且可以与不需要的或非特异性的相互作用区分开。抗原结合部分与特定抗原决定簇结合的能力可以通过酶联免疫吸附测定(ELISA)或本领域技术人员熟悉的其他技术(例如表面等离子体共振(SPR)技术(在例如BIAcore仪器上分析)(Liljeblad等人，Glyco J 17，323-329(2000))以及传统的结合测定(Heeley，Endocr Res 28，217-229(2002))来测量。在一个实施例中，例如通过SPR所测得的，抗原结合部分与不相关蛋白的结合程度小于抗原结合部分与抗原的结合程度的约10％。在某些实施例中，与抗原结合的抗原结合部分或包含该抗原结合部分的抗体的解离常数(K_D)为≤1μM、≤100nM、≤10nM、≤1nM、≤0.1nM、≤0.01nM或≤0.001nM(例如10-8M或更低，例如10^-8M至10^-13M，例如10^-9M至10^-13M)。

在一个特定方面，抗CSF-1R的抗体包含：重链可变区，该重链可变区包含SEQ IDNO：1的重链CDR1(CDR-H1)、SEQ ID NO：2的CDR-H2和SEQ ID NO：3的CDR-H3；以及轻链可变区，该轻链可变区包含SEQ ID NO：4的轻链CDR1(CDR-L1)、SEQ ID NO：5的CDR-L2和SEQ IDNO：6的CDR-L3。更特别地，抗CSF-1R的抗体包含：重链可变区，该重链可变区包含SEQ IDNO：7的氨基酸序列；以及轻链可变区，该轻链可变区包含SEQ ID NO：8的氨基酸序列。在一个特别优选的方面，抗CSF-1R的抗体为人IgG1抗体并且包含重链和轻链，其中该重链包含SEQ ID NO：9的氨基酸序列，该轻链包含SEQ ID NO：10的氨基酸序列。该抗体称为Emactuzumab或RG7155。

术语“可变区”或“可变结构域”是指抗体重链或轻链的参与抗体与抗原结合的结构域。天然抗体的重链和轻链的可变结构域(分别为VH和VL)通常具有相似的结构，其中每个结构域包含四个保守框架区(FR)和三个互补决定区(CDR)。单个VH或VL结构域可足以赋予抗原结合特异性。如本文结合可变区序列所用，“Kabat编号”是指由Kabat等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest，第5版，Public Health Service，National Institutes of Health，Bethesda，MD(1991)提出的编号系统。

如本文所用的术语“高变区”或“HVR”是指抗体可变结构域中在序列上高变并确定抗原结合特异性的各个区域。HVR包含来自“互补决定区”(CDR)的氨基酸残基。通常，抗体包含六个CDR；三个在VH中(CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3)，并且三个在VL中(CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3)。本文中的示例性CDR包括：

(a)在氨基酸残基26-32(L1)、50-52(L2)、91-96(L3)、26-32(H1)、53-55(H2)和96-101(H3)处发生的高可变环(Chothia和Lesk，J.Mol.Biol.196：901-917(1987))；

(b)存在于氨基酸残基24-34(L1)、50-56(L2)、89-97(L3)、31-35b(H1)、50-65(H2)和95-102(H3)处的CDR(Kabat等人，Sequences of Proteins of ImmunologicalInterest，第5版，Public Health Service，National Institutes of Health，Bethesda，MD(1991))；以及

(c)存在于氨基酸残基27c-36(L1)、46-55(L2)、89-96(L3)、30-35b(H1)、47-58(H2)和93-101(H3)处的抗原接触点(MacCallum等人，J.Mol.Biol.262：732-745(1996))。

除非另有说明，否则CDR根据Kabat等人所述的方法(同上)确定。本领域的技术人员将理解，也可以根据Chothia(同上)、McCallum(同上)所述的方法或任何其他在科学上接受的命名系统来确定CDR名称。

“框架”或“FR”是指除互补决定区(CDR)之外的可变结构域残基。可变结构域的FR通常由以下四个FR结构域组成：FR1、FR2、FR3和FR4。因此，CDR和FR序列通常在VH(或VL)中以如下序列出现：FR1-CDR-H1(L1)-FR2-CDR-H2(L2)-FR3-CDR-H3(L3)-FR4。

术语“表位”包括能够与抗体特异性结合的任何多肽决定簇。在某些实施例中，表位决定簇包括分子诸如氨基酸的化学活性表面基团、糖侧链、磷酰基或磺酰基，并且在某些实施例中，可具有特定的三维结构特征和/或特定的电荷特征。表位是与抗体结合的抗原区域。

“恒定区”或“恒定结构域”不直接参与抗体与抗原的结合，但是表现出多种效应子功能。根据其重链的恒定区的氨基酸序列不同，可以将抗体或免疫球蛋白分为以下类别：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，并且它们中的一些可以进一步分为亚类(同种型)，例如IgG1、IgG2、IgG3以及IgG4、IgA1和IgA2。在本发明中使用的抗体特别地为IgG型抗体，更特别地为IgG1或IgG4人亚型抗体。

本文的术语“Fc区”用于定义免疫球蛋白重链的C-末端区域，该C-末端区域含有恒定区的至少一部分。该术语包括天然序列Fc区和变体Fc区。在一个方面，人IgG重链Fc区从Cys226或从Pro230延伸至重链的羧基末端。然而，由宿主细胞产生的抗体可以经历对来自重链的C末端的一个或多个，特别是一个或两个氨基酸的翻译后切割。因此，由宿主细胞通过表达编码全长重链的特定核酸分子产生的抗体可以包括全长重链，或者该抗体可以包括全长重链的切割变体。这可能是重链的最后两个C末端氨基酸为甘氨酸(G446)和赖氨酸(K447，根据Kabat EU索引)的情况。因此，Fc区的C末端赖氨酸(Lys447)或C末端甘氨酸(Gly446)和赖氨酸(Lys447)可以存在或可以不存在。如果没有另外指明，则包含Fc区的重链的氨基酸序列在本文中被表示为没有C末端甘氨酸-赖氨酸二肽。在一个方面，包括如本文所指定的Fc区的重链包含在根据本发明的抗体中，该重链包含另外的C末端甘氨酸-赖氨酸二肽(G446和K447，根据Kabat的EU索引编号)。在一个方面，包括如本文所指定的Fc区的重链包含在根据本发明的抗体中，该重链包含另外的C末端甘氨酸残基(G446，根据Kabat的EU索引编号)。除非本文另外规定，否则Fc区或恒定区中氨基酸残基的编号是根据EU编号系统，EU编号系统也称为EU索引，如在Kabat等人，Sequences of Proteins ofImmunological Interest，第5版，Public Health Service，National Institutes ofHealth，Bethesda，MD，1991中所述。

药物制剂中包含的抗CSF-1R的抗体的浓度在40mg/mL至200mg/mL的范围内，特别是在40mg/mL至100mg/mL的范围内，更特别是在40mg/mL至60mg/mL的范围内，并且最特别地为50mg/mL。

如本文所用的术语“表面活性剂”表示药用表面活性试剂。优选地，使用非离子型表面活性剂。药用表面活性剂的实例包括但不限于聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯(Tween)、聚氧乙烯烷基醚(Brij)、烷基苯基聚氧乙烯醚(Triton X)、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物(泊洛沙姆，Pluronic)和十二烷基硫酸钠(SDS)。优选的聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯为聚山梨酯20(聚氧乙烯山梨醇酐单月桂酸酯，以商品名Tween 20^TM销售)和聚山梨酯80(聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯，以商品名Tween 80^TM销售)。优选的聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物是以商品名

F68或泊洛沙姆188^TM销售的那些。优选的聚氧乙烯烷基醚是以商品名Brij^TM销售的那些。优选的烷基苯基聚氧乙烯醚以商品名Triton X销售，最优选对叔辛基苯氧基聚乙氧基乙醇(以商品名Triton X-100^TM销售)。在本发明中使用的优选表面活性剂为聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯，优选聚山梨酯20或聚山梨酯80，最优选聚山梨酯20。另一种优选的表面活性剂为泊洛沙姆188^TM。

如本文所用的术语“缓冲剂”表示一种药用赋形剂，其用于稳定药物制剂的pH。合适的缓冲液是本领域中熟知的，并且可参见文献。优选的药用缓冲液包括但不限于组氨酸缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、琥珀酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、精氨酸缓冲液、磷酸盐缓冲剂或其混合物。因此，缓冲剂为组氨酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、醋酸盐、苹果酸盐、磷酸盐和乳酸盐。特别感兴趣的缓冲剂包括L-组氨酸或L-组氨酸与L-组氨酸盐酸盐或L-组氨酸醋酸盐的混合物，其pH通过本领域中已知的酸或碱进行调节。上述缓冲液通常以约5mM至约100mM、特别是10mM至约30mM并且更特别是约20mM的量使用。独立于所用的缓冲液，可以用本领域中已知的酸或碱(例如盐酸、乙酸、磷酸、硫酸和柠檬酸、氢氧化钠和氢氧化钾)将pH调节为在4.5至7.0的范围内的值，特别是调节为在5.0至6.0的范围内的值，并且最特别地调节为pH6.0±0.03。

术语“稳定剂”表示一种药用赋形剂，其用于保护活性药物成分和/或制剂免于在生产、储存和应用过程中发生化学和/或物理降解。稳定剂包括但不限于如下文所定义的糖、氨基酸、多元醇(例如甘露醇、山梨醇、木糖醇、葡聚糖、甘油、阿糖醇、丙二醇、聚乙二醇)、环糊精(例如羟丙基-β-环糊精、磺基丁基乙基-β-环糊精、β-环糊精)、聚乙二醇(例如PEG 3000、PEG 3350、PEG 4000、PEG 6000)，白蛋白(人血清白蛋白(HSA)、牛血清白蛋白(BSA))、盐(例如氯化钠(盐水)、氯化镁、氯化钙)、螯合剂(例如EDTA)。在本发明中特别使用的稳定剂选自由糖、多元醇和氨基酸组成的组。稳定剂在制剂中可以约10mM至约500mM的量存在，特别是以约140至约250mM的量存在，并且更特别地以约210mM至约240mM的量存在。更特别地，蔗糖或海藻糖以约220mM至约240mM的量用作稳定剂。

如本文所用的术语“糖”包括单糖和寡糖。单糖是不能被酸水解的单体碳水化合物，包括简单糖及其衍生物(例如氨基糖)。糖通常以其D构型使用。单糖的实例包括葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖、山梨糖、核糖、脱氧核糖、神经氨酸。寡糖是由多于一个单体糖单元组成的碳水化合物，这些单体糖单元通过支链或直链糖苷键连接。寡糖内的单体糖单位可以相同或不同。根据单体糖单元的数量不同，寡糖为二糖、三糖、四糖、五糖等。与多糖相比，单糖和寡糖溶于水。寡糖的实例包括蔗糖、海藻糖、乳糖、麦芽糖和棉子糖。在本发明中使用的优选的糖为蔗糖和海藻糖(即，α，α-D-海藻糖)，最优选地为蔗糖。可用的海藻糖为海藻糖二水合物。糖在制剂中可以约10mM至约500mM的量存在，优选地以约200mM至约300mM的量存在，更优选地以约220mM至约250mM的量存在，特别是以约220mM或约240mM的量存在，最优选地是以约220mM的量存在。

如本文所用的术语“氨基酸”表示具有位于羧基基团的α-位的氨基部分的药用有机分子。氨基酸的实例包括但不限于精氨酸、甘氨酸、鸟氨酸、赖氨酸、组氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、蛋氨酸、丝氨酸、脯氨酸。在各种情况下采用的氨基酸优选为L型氨基酸。碱性氨基酸诸如精氨酸、组氨酸或赖氨酸，优选以其无机盐的形式(有利地以盐酸盐形式，即作为氨基酸盐酸盐)使用。在本发明中使用的优选的氨基酸为蛋氨酸。所用蛋氨酸的浓度优选为约5mM至约25mM，并且最优选为约10mM。

稳定剂中的一个亚组为冻干保护剂。术语“冻干保护剂”表示一种药用赋形剂，其用于保护不稳定的活性成分(例如蛋白质)在冻干过程以及随后的储存和重构过程中免受不稳定条件的影响。冻干保护剂包括但不限于由糖、多元醇(诸如糖醇)和氨基酸组成的组。优选的冻干保护剂可选自下组，该组由以下各项组成：糖，诸如蔗糖、海藻糖、乳糖、葡萄糖、甘露糖、麦芽糖、半乳糖、果糖、山梨糖、棉子糖、神经氨酸；氨基糖，诸如葡糖胺、半乳糖胺、N-甲基葡糖胺(“葡甲胺”)；多元醇，诸如甘露醇和山梨醇；以及氨基酸，诸如精氨酸和甘氨酸；或它们的混合物。冻干保护剂通常以约10mM至500mM的量存在，优选是以约10mM至约300mM的量存在，并且更优选地以约100mM至约300mM的量存在。

稳定剂中的另一个亚组为抗氧化剂。术语“抗氧化剂”表示一种药用赋形剂，其用于防止活性药物成分发生氧化。抗氧化剂包括但不限于抗坏血酸、谷胱甘肽、半胱氨酸、蛋氨酸、柠檬酸、EDTA。抗氧化剂可以0.01mM至约100mM的量使用，优选以约5mM至约50mM的量使用，并且更优选地以约5mM至约25mM的量使用。

根据本发明所述的制剂还可包含一种或多种张度剂。术语“张度剂”表示用于调节制剂的张度的药用赋形剂。制剂可以是低渗、等渗或高渗制剂。等渗性通常与溶液的渗透压相关，其通常相对于人血清的渗透压(约250-350mOsmol/kg)而言。根据本发明所述的制剂可以是低渗、等渗或高渗制剂，但优选为等渗制剂。等渗制剂为液体或由固体形式(例如从冻干形式)重构得到的液体，并且表示与之相比的某种其他溶液诸如生理盐溶液和血清具有相同张度的溶液。合适的张度剂包括但不限于氯化钠、氯化钾、甘油以及选自氨基酸或糖类的组中的任意组分(特别是葡萄糖)。张度剂通常以约5mM至约500mM的量使用。在稳定剂和张度剂中，一组化合物可同时发挥两种作用，即它们同时用作稳定剂和张度剂。该化合物的实例可参见由糖类、氨基酸、多元醇、环糊精、聚乙二醇和盐组成的组。可同时用作稳定剂和张度剂的糖的一个实例为海藻糖。

如本文所用，术语“多元醇”表示指具有一个以上的羟基基团的药用醇。合适的多元醇包括但不限于甘露醇、山梨醇、甘油(丙三醇)、葡聚糖、阿糖醇、丙二醇、聚乙二醇以及它们的组合。多元醇可以10mM至约500mM的量使用，特别是以约10mM至约250mM的量使用，并且更特别地以约200mM至约250mM的量使用。

制剂还可包含佐剂，诸如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。可通过灭菌程序并且通过加入各种抗菌和抗真菌剂(例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸等)以确保无微生物存在。防腐剂通常以约0.001％(w/v)至约2％(w/v)的量使用。防腐剂包括但不限于乙醇、苯甲醇、苯酚、间甲酚、氯间甲酚、对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯、苯扎氯铵。

药物制剂还可包含佐剂，诸如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。可通过灭菌程序并且通过加入各种抗菌和抗真菌剂(例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸等)以确保无微生物存在。防腐剂通常以约0.001％(w/v)至约2％(w/v)的量使用。防腐剂包括但不限于乙醇、苯甲醇、苯酚、间甲酚、氯间甲酚、对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯、苯扎氯铵。

本发明的制剂可通过本领域中已知的多种方法来施用。如本领域的技术人员将认识到的，施用途径和/或模式将根据所需结果而变化。为通过某些施用途径施用本发明的制剂，可能需要用稀释剂稀释该制剂。药用稀释剂包括盐水、葡萄糖、林格氏溶液和水性缓冲溶液。

优选地，根据本发明所述的制剂通过静脉内(IV)、皮下(SC)或任何其他肠胃外施用方式(诸如药物领域中已知的那些施用方式)施用。在一个优选的方面，药物制剂通过IV输注施用。在通过静脉注射施用时，可作为推注或连续输注施用。例如，本发明的药物制剂可用无菌盐水溶液稀释，并且用临床环境中通常使用的输液泵施用。

如本文所用的短语“肠胃外施用”和“经肠胃外施用”意指肠内和局部施用以外的其他施用方式(通常通过注射进行施用)，并且包括但不限于静脉内、肌内、动脉内、鞘内、囊内、眶内、心内、皮内、腹膜内、气管内、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、椎管内、硬膜外以及胸骨内注射和输注。

根据本发明所述的药物制剂适合一次或在一系列治疗中施用于患者，并且可以从诊断开始的任意时间施用于患者；它可以作为单独治疗或与用于治疗上文所述病症的其他药物或疗法联合施用。

抗CSF-1R的抗体可以是液体药物组合物中唯一的活性成分。替代性地，抗CSF-1R的抗体可与一种或多种其他治疗性活性成分联合施用，例如同时、依次或分别施用。如本文所用的术语“活性成分”是指在相关剂量下具有药理作用诸如疗效的成分。因此，液体药物组合物中的抗CSF-1R的抗体可能伴有其他活性成分，这些活性组分包括其他抗体成分，例如CD40抗体、VEGF抗体或阻断PD-L1/PD-1相互作用的试剂。特别地，阻断PD-L1/PD-1相互作用的试剂为抗PD-L1抗体或抗PD1抗体。更特别地，阻断PD-L1/PD-1相互作用的试剂选自由阿特珠单抗、德瓦鲁单抗、派姆单抗和纳武单抗组成的组。在一个具体方面，阻断PD-L1/PD-1相互作用的试剂为阿特珠单抗。在一个特定方面，CD40抗体为Selicrelumab。在另一个优选的方面，VEGF抗体为贝伐单抗(Avastin)。

药物组合物适合包含治疗有效量的抗体。如本文所用的术语“治疗有效量”是指治疗、改善或预防目标疾病或病症或表现出可检测的治疗、药理或预防作用所需的治疗剂的量。对于任何抗体，最初可通过细胞培养测定或动物模型(通常在啮齿动物、兔、犬、猪或灵长类动物中)估计治疗有效量。动物模型还可用于确定适当的浓度范围和施用途径。然后可利用这些信息确定在人体内的有用剂量和施用途径。

对人类受试者而言，确切的治疗有效量将取决于疾病状态的严重程度、受试者的总体健康状况、受试者的年龄、体重和性别、饮食、施用时间和频率、药物组合、反应敏感性以及对疗法的耐受性/应答。该有效量可通过常规实验确定，并且由临床医师作出判断。在一个特定方面，抗CSF-1R的抗体以600-1200mg的(固定)剂量施用，特别是以750-1100mg的剂量施用，更特别是以750-1000mg的剂量施用，并且甚至更特别是以900-1000mg的剂量施用。在一个优选的方面，剂量为1000mg。

在本发明的一个优选的方面，药物制剂用于治疗周期中。特别地，治疗周期的长度在2周与4周之间，优选在18天与24天之间。更优选地，治疗周期的长度为(约)3周。

药物制剂可方便地以包含预定量的抗CSF-1R的抗体的单位剂型提供。在一个特定方面，药物制剂可提供于小瓶中，储存于2℃至8℃。在一个优选的方面，药物制剂将提供于规格为20mL的小瓶中。在另一个优选的方面，药物制剂将提供于尺寸为50mL的小瓶中。

待用于体内施用的稳定制剂必须为无菌的。这通过无菌过滤膜过滤很容易实现。制剂必须具有一定程度的流动性，以使其可以通过注射器或输注系统进行递送。除水以外，载体还可以是等渗缓冲盐水溶液、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液态聚乙二醇等)及其合适的混合物。考虑到它们的高稳定性，根据本发明所述的药物制剂可通过i.v.施用，而无需施用在线过滤器，因此比需要通过在线过滤器施用的常规制剂的处理方便得多。必须在i.v.药物的输液管线中安装在线过滤器诸如

以防止i.v.输注溶液或管线中存在任何颗粒、空气或微生物。5至20微米或更大的颗粒具有阻止血液通过肺毛细血管的能力，这可能导致并发症诸如肺栓塞。外来颗粒还可能引起注射部位发生静脉炎，并且过滤器可有助于降低静脉炎的发生率。

可通过本领域中已知的方法(例如超滤-渗滤、透析、添加与混合、冻干、重构以及它们的组合)来制备根据本发明所述的稳定药物制剂。根据本发明所述的制剂的制备实例可参见下文。

因此，本发明包括制备根据本发明所述的制剂的方法。所述方法包括对抗体与包含预期的缓冲液组合物的渗滤缓冲液进行缓冲液交换，并且在需要时通过渗滤浓缩抗体，然后向抗体溶液中加入作为储备液的赋形剂(例如蔗糖、氯化钠、蛋氨酸)，然后向抗体/赋形剂溶液中加入作为储备液的表面活性剂，最后使用缓冲溶液将抗体浓度调节至所需的最终浓度，从而达到最终的赋形剂和表面活性剂浓度。

替代性地，也可以将赋形剂作为固体添加到包含抗体的起始溶液中。如果抗体为固体形式，例如冻干物，则根据本发明所述的制剂可通过以下方法制备：首先将抗体溶于水或缓冲溶液(任选地包含赋形剂中的一种或多种)中，然后添加其他赋形剂为储备液或固体。还可有利地将抗体直接溶于包含所有其他赋形剂的溶液中。根据本发明所述的制剂中存在的赋形剂中的一种或多种可以在抗体的制备过程中或制备结束时添加，例如通过以下方式添加：在制备抗体后实施的最终纯化步骤中，将抗体直接溶于包含制剂的赋形剂中的一种、多于一种或优选全部的溶液中。如果包含抗体和赋形剂的溶液尚未达到所需的pH，则通过添加酸或碱进行调节，优选使用缓冲液体系中已经存在的酸或碱进行调节。然后进行除菌过滤。

根据本发明所述的稳定的液体药物制剂也可提供为冻干形式或由冻干形式重构的液体形式。“冻干形式”通过本领域中已知的冻干方法制得。冻干物通常具有约0.1％(w/w)至5％(w/w)的残留水分含量，并且以粉末或物理稳定的饼状物形式存在。“重构形式”可通过在添加重构介质后使冻干物快速溶解而获得。合适的重构介质包括但不限于注射用水(WFI)、抑菌注射用水(BWFI)、氯化钠溶液(例如0.9％(w/v)NaCl)、葡萄糖溶液(例如，5％(w/v)葡萄糖)、含表面活性剂的溶液(例如0.01％(w/v)聚山梨酯20)和pH缓冲溶液(例如磷酸盐缓冲溶液)。

本发明进一步包括用于治疗疾病的根据本发明所述的制剂，或根据本发明所述的制剂用于制备治疗疾病(特别是治疗癌症)的药物的用途，以及用于治疗色素沉着绒毛结节性滑膜炎(PVNS)或腱鞘巨细胞肿瘤(TGCT)的用途。

如本文所用的术语“癌症”可以是例如肺癌、非小细胞肺(NSCL)癌、支气管肺泡细胞肺癌、骨癌、胰腺癌、皮肤癌、头或颈癌、皮肤或眼内黑素瘤、子宫癌、卵巢癌、直肠癌、肛区癌、胃癌(stomach cancer)、胃癌(gastric cancer)、结肠癌、乳腺癌、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、阴道癌、外阴癌、霍奇金病、食管癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、前列腺癌、膀胱癌、肾癌或输尿管癌、肾细胞癌、肾盂癌、间皮瘤、肝细胞癌、胆管癌、中枢神经系统(CNS)肿瘤、脊椎轴肿瘤、脑干胶质瘤、多形性成胶质细胞瘤、星形细胞瘤、神经鞘瘤、室管膜瘤、成髓细胞瘤、脑膜瘤、鳞状细胞癌、垂体腺瘤、淋巴瘤、淋巴细胞性白血病，包括以上癌症中的任一种的难治性型式，或一种或多种以上癌症的组合。在一个优选的方面，癌症为乳腺癌、结直肠癌、黑素瘤、头颈癌、肺癌或前列腺癌。在另一个优选的方面，此类癌症为乳腺癌、肺癌、结肠癌、卵巢癌、黑素瘤、膀胱癌、肾癌(renal cancer)、肾癌(kidney cancer)、肝癌、头颈癌、结直肠癌、胰腺癌、胃癌、食道癌、间皮瘤、前列腺癌、白血病、淋巴瘤、骨髓瘤。在一个优选的方面，此类癌症的进一步特征在于CSF-1或CSF-IR表达或过表达。在另一方面，本发明的药物制剂用于同时治疗原发性肿瘤和新转移瘤。在另一方面，本发明的药物制剂用于治疗牙周炎、组织细胞增生症X、骨质疏松症、骨佩吉特氏病(PDB)、由癌症治疗引起的骨质流失、假体周围骨溶解、糖皮质激素诱导的骨质疏松症、类风湿性关节炎、银屑病关节炎、骨关节炎、炎症性关节炎和炎症。在另一个优选的方面，药物制剂用于黑素瘤、膀胱癌(UCB)或肺癌(例如非小细胞肺(NSCL)癌)。在另一个优选的方面，药物制剂用于肾细胞癌(RCC)或头颈鳞状细胞癌(HNSCC)。在一个特别优选的方面，本发明的药物制剂用于治疗色素沉着绒毛结节性滑膜炎(PVNS)或腱鞘巨细胞肿瘤(TGCT)。

序列表：

实例

根据本发明所述的用于静脉内(i.v.)施用的液体药物制剂的开发如下。

实例1：用于初步制剂筛选的液体制剂的制备

制备蛋白质浓度为50mg/mL的表1所列的huMAb CSF-1R液体制剂F1至F16。

抗CSF-1R抗体(emactuzumab)通过重组蛋白生产中通常已知的技术以及WO 2011/070024所述的方法进行生产。为制备根据实例所述的药物制剂，在pH为约5.5的20mM组氨酸缓冲液(L-组氨酸/HCl缓冲液)中提供浓度为约20mg/mL的抗体。在实例中使用的CSF-1R抗体为人源化抗体，该人源化抗体包含重链和轻链，其中该重链包含SEQ ID NO：9所示的氨基酸序列，该轻链包含SEQ ID NO：10所示的氨基酸序列。

根据本发明所述的制剂的赋形剂在实践中广泛使用，并且是本领域的技术人员已知的。因此，本文无需详细解释这些赋形剂。

为制备液体制剂，对抗CSF-1R抗体与包含预期缓冲液组合物的渗滤缓冲液进行缓冲液交换，并且通过超滤将抗体浓度浓缩至约80mg/mL。完成超滤操作后，将作为储备液的赋形剂(例如蔗糖、蛋氨酸)加入抗体溶液中。然后加入作为125倍储备液的表面活性剂。最后，用缓冲液调节蛋白质浓度，使抗CSF-1R抗体的最终浓度达到约50mg/mL。

所有制剂均通过0.22μm低蛋白结合过滤器进行除菌过滤，并且无菌灌装至6mL无菌玻璃瓶中，该玻璃小瓶用带有ETFE(乙烯与四氟乙烯的共聚物)涂层的橡胶塞和铝质钳口盖密封。灌装体积为约2.4mL。将这些制剂在不同的ICH气候条件(5℃、25℃和40℃)下储存不同的时间间隔，并且通过振摇(在5℃和25℃以200min-的振摇频率振摇1周)和冻融应激方法(在-80℃/+5℃经过五次冻融循环)进行应激。

表1-不同制剂概述

在实施应激测试前后，利用以下分析方法对样品进行分析

·紫外分光光度法

·体积排阻色谱法(SEC)

·离子交换色谱(IEC)

·溶液澄清度和乳浊度

·分析型蛋白A色谱

·目视检查

用于测定蛋白质含量的UV光谱法采用Perkin Elmerλ35紫外分光光度计，波长范围为240nm至400nm。用相应的制剂缓冲液将纯蛋白质样品稀释至约0.5mg/mL。根据公式1计算蛋白质浓度。

公式1：蛋白质含量

针对320nm处的光散射对280nm处的紫外光吸收进行校正，并且乘以稀释因子，该稀释因子根据纯样品与稀释缓冲液的重量和密度确定。将分子除以比色皿的光程d与消光系数ε的乘积。

体积排阻色谱法(SEC)用于检测制剂中的可溶性高分子量物质(聚集体)和低分子量(LMW)水解产物。该方法采用配备Waters W2487双吸光度检测器和Waters BioSuite 250色谱柱的Waters Alliance 2695HPLC仪器。使用0.2M K2HPO4/0.25M KCl(pH 7.0)作为流动相，通过等度洗脱曲线分离完整单体、聚集体和水解产物，并且在280nm的波长处进行检测。

离子交换色谱法(IEC)用于检测改变制剂中抗体的净电荷的化学降解产物。该方法采用配备Waters W2487双吸光度检测器(检测波长280nm)和MabPac SCX-10色谱柱(4mm×150mm)的Waters Alliance 2695HPLC仪器。分别使用5mM MES和15mM NaCl(pH 6.5)；5mMBICINE和30mM NaCl(pH 8.5)以及5mM BICINE和1M NaCl(pH 8.5)作为流动相A、B和C，流速为0.5mL/min。

梯度程序：

时间	％A	％B	％C
				0.0	100	0	0
5.0	100	0	0
				50.0	0	100	0
54.0	0	100	0
				55.0	100	0	0
65.0	100	0	0
				80.0	0	0	100
85.0	0	0	100
				86.0	100	0	0
96.0	100	0	0

澄清度和乳浊度通过浊度测定法以福尔马肼浊度单位(FTU)进行衡量。将纯样品转移到直径为11mm的透明玻璃管中，并且放入HACH 2100AN浊度计中。

分析型蛋白A色谱法用于监测抗CSF-1R抗体的Fc部分的四个保守蛋氨酸侧链的氧化状态。该方法采用配备Waters W2487双吸光度检测器(检测波长280nm)和Poros A7204.6mm×50mm色谱柱(来自Applied Biosystems，USA)的Waters Alliance 2695HPLC仪器。分别使用PBS(来自Gibco，Invitrogen)和0.1M乙酸、0.15M氯化钠(pH 2.8)作为流动相A和B，流速为2.0mL/min：

梯度程序：

	时间(min)	％流动相A	％流动相B
				1	0.01	100	0
2	10	100	0
				3	40	40	60
4	41	0	100
				5	51	0	100
6	52	100	0
				7	62	100	0

使用Simplex安瓿测试装置OPTIMA I检查样品中是否存在可见颗粒。

制剂F1至F16的稳定性测试结果列于下表中。经测定，制剂F2最有利于获得最高的抗体稳定性以及不含颗粒的抗体制剂。

序列表

<110> 豪夫迈·罗氏有限公司（F. Hoffmann-La Roche AG）

<120> CSF-1R 抗体制剂

<130> P35018-WO

<150> EP18194145.1

<151> 2018-09-13

<160> 13

<170> PatentIn 版本 3.5

<210> 1

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CSF-1R CDR-H1

<400> 1

Ser Tyr Asp Ile Ser

1 5

<210> 2

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CSF-1R CDR-H2

<400> 2

Val Ile Trp Thr Asp Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu Gln Gly

1 5 10 15

<210> 3

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CSF-1R CDR-H3

<400> 3

Asp Gln Arg Leu Tyr Phe Asp Val

1 5

<210> 4

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CSF-1R CDR-L1

<400> 4

Arg Ala Ser Glu Asp Val Asn Thr Tyr Val Ser

1 5 10

<210> 5

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CSF-1R CDR-L2

<400> 5

Ala Ala Ser Asn Arg Tyr Thr

1 5

<210> 6

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CSF-1R CDR-L3

<400> 6

Gln Gln Ser Phe Ser Tyr Pro Thr

1 5

<210> 7

<211> 116

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CSF-1R VH

<400> 7

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asp Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Val Ile Trp Thr Asp Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu Gln

50 55 60

Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met

65 70 75 80

Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asp Gln Arg Leu Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val

100 105 110

Thr Val Ser Ser

115

<210> 8

<211> 106

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CSF-1R VL

<400> 8

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asp Val Asn Thr Tyr

20 25 30

Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Phe Ser Tyr Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 9

<211> 444

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CSF-1R 重链

<400> 9

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asp Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Val Ile Trp Thr Asp Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu Gln

50 55 60

Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met

65 70 75 80

Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asp Gln Arg Leu Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val

100 105 110

Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala

115 120 125

Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu

130 135 140

Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly

145 150 155 160

Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser

165 170 175

Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu

180 185 190

Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr

195 200 205

Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr

210 215 220

Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe

225 230 235 240

Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro

245 250 255

Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val

260 265 270

Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr

275 280 285

Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val

290 295 300

Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys

305 310 315 320

Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser

325 330 335

Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro

340 345 350

Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val

355 360 365

Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly

370 375 380

Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp

385 390 395 400

Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp

405 410 415

Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His

420 425 430

Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

435 440

<210> 10

<211> 213

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CSF-1R 轻链

<400> 10

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asp Val Asn Thr Tyr

20 25 30

Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Phe Ser Tyr Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 11

<211> 387

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人 CSF-1R 片段 delD4

<400> 11

Ile Pro Val Ile Glu Pro Ser Val Pro Glu Leu Val Val Lys Pro Gly

1 5 10 15

Ala Thr Val Thr Leu Arg Cys Val Gly Asn Gly Ser Val Glu Trp Asp

20 25 30

Gly Pro Pro Ser Pro His Trp Thr Leu Tyr Ser Asp Gly Ser Ser Ser

35 40 45

Ile Leu Ser Thr Asn Asn Ala Thr Phe Gln Asn Thr Gly Thr Tyr Arg

50 55 60

Cys Thr Glu Pro Gly Asp Pro Leu Gly Gly Ser Ala Ala Ile His Leu

65 70 75 80

Tyr Val Lys Asp Pro Ala Arg Pro Trp Asn Val Leu Ala Gln Glu Val

85 90 95

Val Val Phe Glu Asp Gln Asp Ala Leu Leu Pro Cys Leu Leu Thr Asp

100 105 110

Pro Val Leu Glu Ala Gly Val Ser Leu Val Arg Val Arg Gly Arg Pro

115 120 125

Leu Met Arg His Thr Asn Tyr Ser Phe Ser Pro Trp His Gly Phe Thr

130 135 140

Ile His Arg Ala Lys Phe Ile Gln Ser Gln Asp Tyr Gln Cys Ser Ala

145 150 155 160

Leu Met Gly Gly Arg Lys Val Met Ser Ile Ser Ile Arg Leu Lys Val

165 170 175

Gln Lys Val Ile Pro Gly Pro Pro Ala Leu Thr Leu Val Pro Ala Glu

180 185 190

Leu Val Arg Ile Arg Gly Glu Ala Ala Gln Ile Val Cys Ser Ala Ser

195 200 205

Ser Val Asp Val Asn Phe Asp Val Phe Leu Gln His Asn Asn Thr Lys

210 215 220

Leu Ala Ile Pro Gln Gln Ser Asp Phe His Asn Asn Arg Tyr Gln Lys

225 230 235 240

Val Leu Thr Leu Asn Leu Asp Gln Val Asp Phe Gln His Ala Gly Asn

245 250 255

Tyr Ser Cys Val Ala Ser Asn Val Gln Gly Lys His Ser Thr Ser Met

260 265 270

Phe Phe Arg Tyr Pro Pro Glu Val Ser Val Ile Trp Thr Phe Ile Asn

275 280 285

Gly Ser Gly Thr Leu Leu Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Pro Gln Pro Asn

290 295 300

Val Thr Trp Leu Gln Cys Ser Gly His Thr Asp Arg Cys Asp Glu Ala

305 310 315 320

Gln Val Leu Gln Val Trp Asp Asp Pro Tyr Pro Glu Val Leu Ser Gln

325 330 335

Glu Pro Phe His Lys Thr Val Gln Ser Leu Leu Thr Val Glu Thr Leu

340 345 350

Glu His Asn Gln Thr Tyr Glu Cys Arg Ala His Asn Ser Val Gly Ser

355 360 365

Gly Ser Trp Ala Phe Ile Pro Ile Ser Ala Gly Ala His Thr His Pro

370 375 380

Pro Asp Glu

385

<210> 12

<211> 493

<212> PRT

<213> 智人

<400> 12

Ile Pro Val Ile Glu Pro Ser Val Pro Glu Leu Val Val Lys Pro Gly

1 5 10 15

Ala Thr Val Thr Leu Arg Cys Val Gly Asn Gly Ser Val Glu Trp Asp

20 25 30

Gly Pro Pro Ser Pro His Trp Thr Leu Tyr Ser Asp Gly Ser Ser Ser

35 40 45

Ile Leu Ser Thr Asn Asn Ala Thr Phe Gln Asn Thr Gly Thr Tyr Arg

50 55 60

Cys Thr Glu Pro Gly Asp Pro Leu Gly Gly Ser Ala Ala Ile His Leu

65 70 75 80

Tyr Val Lys Asp Pro Ala Arg Pro Trp Asn Val Leu Ala Gln Glu Val

85 90 95

Val Val Phe Glu Asp Gln Asp Ala Leu Leu Pro Cys Leu Leu Thr Asp

100 105 110

Pro Val Leu Glu Ala Gly Val Ser Leu Val Arg Val Arg Gly Arg Pro

115 120 125

Leu Met Arg His Thr Asn Tyr Ser Phe Ser Pro Trp His Gly Phe Thr

130 135 140

Ile His Arg Ala Lys Phe Ile Gln Ser Gln Asp Tyr Gln Cys Ser Ala

145 150 155 160

Leu Met Gly Gly Arg Lys Val Met Ser Ile Ser Ile Arg Leu Lys Val

165 170 175

Gln Lys Val Ile Pro Gly Pro Pro Ala Leu Thr Leu Val Pro Ala Glu

180 185 190

Leu Val Arg Ile Arg Gly Glu Ala Ala Gln Ile Val Cys Ser Ala Ser

195 200 205

Ser Val Asp Val Asn Phe Asp Val Phe Leu Gln His Asn Asn Thr Lys

210 215 220

Leu Ala Ile Pro Gln Gln Ser Asp Phe His Asn Asn Arg Tyr Gln Lys

225 230 235 240

Val Leu Thr Leu Asn Leu Asp Gln Val Asp Phe Gln His Ala Gly Asn

245 250 255

Tyr Ser Cys Val Ala Ser Asn Val Gln Gly Lys His Ser Thr Ser Met

260 265 270

Phe Phe Arg Val Val Glu Ser Ala Tyr Leu Asn Leu Ser Ser Glu Gln

275 280 285

Asn Leu Ile Gln Glu Val Thr Val Gly Glu Gly Leu Asn Leu Lys Val

290 295 300

Met Val Glu Ala Tyr Pro Gly Leu Gln Gly Phe Asn Trp Thr Tyr Leu

305 310 315 320

Gly Pro Phe Ser Asp His Gln Pro Glu Pro Lys Leu Ala Asn Ala Thr

325 330 335

Thr Lys Asp Thr Tyr Arg His Thr Phe Thr Leu Ser Leu Pro Arg Leu

340 345 350

Lys Pro Ser Glu Ala Gly Arg Tyr Ser Phe Leu Ala Arg Asn Pro Gly

355 360 365

Gly Trp Arg Ala Leu Thr Phe Glu Leu Thr Leu Arg Tyr Pro Pro Glu

370 375 380

Val Ser Val Ile Trp Thr Phe Ile Asn Gly Ser Gly Thr Leu Leu Cys

385 390 395 400

Ala Ala Ser Gly Tyr Pro Gln Pro Asn Val Thr Trp Leu Gln Cys Ser

405 410 415

Gly His Thr Asp Arg Cys Asp Glu Ala Gln Val Leu Gln Val Trp Asp

420 425 430

Asp Pro Tyr Pro Glu Val Leu Ser Gln Glu Pro Phe His Lys Val Thr

435 440 445

Val Gln Ser Leu Leu Thr Val Glu Thr Leu Glu His Asn Gln Thr Tyr

450 455 460

Glu Cys Arg Ala His Asn Ser Val Gly Ser Gly Ser Trp Ala Phe Ile

465 470 475 480

Pro Ile Ser Ala Gly Ala His Thr His Pro Pro Asp Glu

485 490

<210> 13

<211> 972

<212> PRT

<213> 智人

<400> 13

Met Gly Pro Gly Val Leu Leu Leu Leu Leu Val Ala Thr Ala Trp His

1 5 10 15

Gly Gln Gly Ile Pro Val Ile Glu Pro Ser Val Pro Glu Leu Val Val

20 25 30

Lys Pro Gly Ala Thr Val Thr Leu Arg Cys Val Gly Asn Gly Ser Val

35 40 45

Glu Trp Asp Gly Pro Pro Ser Pro His Trp Thr Leu Tyr Ser Asp Gly

50 55 60

Ser Ser Ser Ile Leu Ser Thr Asn Asn Ala Thr Phe Gln Asn Thr Gly

65 70 75 80

Thr Tyr Arg Cys Thr Glu Pro Gly Asp Pro Leu Gly Gly Ser Ala Ala

85 90 95

Ile His Leu Tyr Val Lys Asp Pro Ala Arg Pro Trp Asn Val Leu Ala

100 105 110

Gln Glu Val Val Val Phe Glu Asp Gln Asp Ala Leu Leu Pro Cys Leu

115 120 125

Leu Thr Asp Pro Val Leu Glu Ala Gly Val Ser Leu Val Arg Val Arg

130 135 140

Gly Arg Pro Leu Met Arg His Thr Asn Tyr Ser Phe Ser Pro Trp His

145 150 155 160

Gly Phe Thr Ile His Arg Ala Lys Phe Ile Gln Ser Gln Asp Tyr Gln

165 170 175

Cys Ser Ala Leu Met Gly Gly Arg Lys Val Met Ser Ile Ser Ile Arg

180 185 190

Leu Lys Val Gln Lys Val Ile Pro Gly Pro Pro Ala Leu Thr Leu Val

195 200 205

Pro Ala Glu Leu Val Arg Ile Arg Gly Glu Ala Ala Gln Ile Val Cys

210 215 220

Ser Ala Ser Ser Val Asp Val Asn Phe Asp Val Phe Leu Gln His Asn

225 230 235 240

Asn Thr Lys Leu Ala Ile Pro Gln Gln Ser Asp Phe His Asn Asn Arg

245 250 255

Tyr Gln Lys Val Leu Thr Leu Asn Leu Asp Gln Val Asp Phe Gln His

260 265 270

Ala Gly Asn Tyr Ser Cys Val Ala Ser Asn Val Gln Gly Lys His Ser

275 280 285

Thr Ser Met Phe Phe Arg Val Val Glu Ser Ala Tyr Leu Asn Leu Ser

290 295 300

Ser Glu Gln Asn Leu Ile Gln Glu Val Thr Val Gly Glu Gly Leu Asn

305 310 315 320

Leu Lys Val Met Val Glu Ala Tyr Pro Gly Leu Gln Gly Phe Asn Trp

325 330 335

Thr Tyr Leu Gly Pro Phe Ser Asp His Gln Pro Glu Pro Lys Leu Ala

340 345 350

Asn Ala Thr Thr Lys Asp Thr Tyr Arg His Thr Phe Thr Leu Ser Leu

355 360 365

Pro Arg Leu Lys Pro Ser Glu Ala Gly Arg Tyr Ser Phe Leu Ala Arg

370 375 380

Asn Pro Gly Gly Trp Arg Ala Leu Thr Phe Glu Leu Thr Leu Arg Tyr

385 390 395 400

Pro Pro Glu Val Ser Val Ile Trp Thr Phe Ile Asn Gly Ser Gly Thr

405 410 415

Leu Leu Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Pro Gln Pro Asn Val Thr Trp Leu

420 425 430

Gln Cys Ser Gly His Thr Asp Arg Cys Asp Glu Ala Gln Val Leu Gln

435 440 445

Val Trp Asp Asp Pro Tyr Pro Glu Val Leu Ser Gln Glu Pro Phe His

450 455 460

Lys Val Thr Val Gln Ser Leu Leu Thr Val Glu Thr Leu Glu His Asn

465 470 475 480

Gln Thr Tyr Glu Cys Arg Ala His Asn Ser Val Gly Ser Gly Ser Trp

485 490 495

Ala Phe Ile Pro Ile Ser Ala Gly Ala His Thr His Pro Pro Asp Glu

500 505 510

Phe Leu Phe Thr Pro Val Val Val Ala Cys Met Ser Ile Met Ala Leu

515 520 525

Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Tyr Lys Tyr Lys Gln Lys Pro

530 535 540

Lys Tyr Gln Val Arg Trp Lys Ile Ile Glu Ser Tyr Glu Gly Asn Ser

545 550 555 560

Tyr Thr Phe Ile Asp Pro Thr Gln Leu Pro Tyr Asn Glu Lys Trp Glu

565 570 575

Phe Pro Arg Asn Asn Leu Gln Phe Gly Lys Thr Leu Gly Ala Gly Ala

580 585 590

Phe Gly Lys Val Val Glu Ala Thr Ala Phe Gly Leu Gly Lys Glu Asp

595 600 605

Ala Val Leu Lys Val Ala Val Lys Met Leu Lys Ser Thr Ala His Ala

610 615 620

Asp Glu Lys Glu Ala Leu Met Ser Glu Leu Lys Ile Met Ser His Leu

625 630 635 640

Gly Gln His Glu Asn Ile Val Asn Leu Leu Gly Ala Cys Thr His Gly

645 650 655

Gly Pro Val Leu Val Ile Thr Glu Tyr Cys Cys Tyr Gly Asp Leu Leu

660 665 670

Asn Phe Leu Arg Arg Lys Ala Glu Ala Met Leu Gly Pro Ser Leu Ser

675 680 685

Pro Gly Gln Asp Pro Glu Gly Gly Val Asp Tyr Lys Asn Ile His Leu

690 695 700

Glu Lys Lys Tyr Val Arg Arg Asp Ser Gly Phe Ser Ser Gln Gly Val

705 710 715 720

Asp Thr Tyr Val Glu Met Arg Pro Val Ser Thr Ser Ser Asn Asp Ser

725 730 735

Phe Ser Glu Gln Asp Leu Asp Lys Glu Asp Gly Arg Pro Leu Glu Leu

740 745 750

Arg Asp Leu Leu His Phe Ser Ser Gln Val Ala Gln Gly Met Ala Phe

755 760 765

Leu Ala Ser Lys Asn Cys Ile His Arg Asp Val Ala Ala Arg Asn Val

770 775 780

Leu Leu Thr Asn Gly His Val Ala Lys Ile Gly Asp Phe Gly Leu Ala

785 790 795 800

Arg Asp Ile Met Asn Asp Ser Asn Tyr Ile Val Lys Gly Asn Ala Arg

805 810 815

Leu Pro Val Lys Trp Met Ala Pro Glu Ser Ile Phe Asp Cys Val Tyr

820 825 830

Thr Val Gln Ser Asp Val Trp Ser Tyr Gly Ile Leu Leu Trp Glu Ile

835 840 845

Phe Ser Leu Gly Leu Asn Pro Tyr Pro Gly Ile Leu Val Asn Ser Lys

850 855 860

Phe Tyr Lys Leu Val Lys Asp Gly Tyr Gln Met Ala Gln Pro Ala Phe

865 870 875 880

Ala Pro Lys Asn Ile Tyr Ser Ile Met Gln Ala Cys Trp Ala Leu Glu

885 890 895

Pro Thr His Arg Pro Thr Phe Gln Gln Ile Cys Ser Phe Leu Gln Glu

900 905 910

Gln Ala Gln Glu Asp Arg Arg Glu Arg Asp Tyr Thr Asn Leu Pro Ser

915 920 925

Ser Ser Arg Ser Gly Gly Ser Gly Ser Ser Ser Ser Glu Leu Glu Glu

930 935 940

Glu Ser Ser Ser Glu His Leu Thr Cys Cys Glu Gln Gly Asp Ile Ala

945 950 955 960

Gln Pro Leu Leu Gln Pro Asn Asn Tyr Gln Phe Cys

965 970

Claims

1.一种药物制剂，其包含：

40mg/mL至200mg/mL抗CSF-1R的抗体；

0.01％(w/v)至0.1％(w/v)表面活性剂；

5mM至100mM缓冲剂；

10mM至500mM至少一种稳定剂；

pH值在4.5至7.0的范围内。

2.根据权利要求1所述的药物制剂，其中所述抗CSF-1R的抗体包含：重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:1的重链CDR1(CDR-H1)、SEQ ID NO:2的CDR-H2和SEQ ID NO:3的CDR-H3；以及轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:4的轻链CDR1(CDR-L1)、SEQID NO:5的CDR-L2和SEQ ID NO:6的CDR-L3。

3.根据权利要求1或2所述的药物制剂，其中所述抗CSF-1R的抗体包含：重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:7的氨基酸序列；以及轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQID NO:8的氨基酸序列。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的药物制剂，其中所述抗CSF-1R的抗体的浓度在40mg/mL至100mg/mL的范围内，特别是50mg/mL。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的药物制剂，其中所述表面活性剂为聚山梨酯。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的药物制剂，其中所述聚山梨酯以在0.01％(w/v)至0.1％(w/v)范围内、特别是0.04％(w/v)的浓度存在。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的药物制剂，其中所述缓冲剂为组氨酸缓冲液，特别是组氨酸氯化物缓冲液。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的药物制剂，其中所述缓冲剂的浓度在10mM至30mM的范围内，特别是20mM。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的药物制剂，其中所述制剂的pH在5.0至6.5的范围内，特别是6.0。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的药物制剂，其中所述至少一种稳定剂选自由盐、糖和氨基酸组成的组。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的药物制剂，其中所述至少一种稳定剂为糖，特别是蔗糖。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的药物制剂，其中所述至少一种稳定剂以在140mM至250mM的范围内、特别是在210mM至230mM的范围内的浓度存在。

13.根据权利要求10所述的药物制剂，其包含选自由盐、糖和氨基酸组成的组的第一稳定剂以及作为第二稳定剂的蛋氨酸。

14.根据权利要求13所述的药物制剂，其中所述第一稳定剂以120mM至300mM的浓度存在，并且所述第二稳定剂蛋氨酸以5mM至25mM的浓度存在。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的药物制剂，其中所述抗CSF-1R的抗体以1:50或更低的比率与人CSF-1R片段delD4(SEQ ID NO:11)和与人CSF-1R细胞外结构域(SEQ IDNO:12)结合。

16.根据权利要求1至12中任一项所述的药物制剂，其包含

40mg/mL至100mg/mL抗CSF-1R的抗体；

20mM L-组氨酸；

0.03％(w/v)至0.05％(w/v)聚山梨酯20；

210mM至230mM蔗糖；

任选地5mM至25mM蛋氨酸；

pH值为6.0±0.5。

17.根据权利要求1至16中任一项所述的药物制剂，其包含

50mg/mL抗CSF-1R的抗体；

20mM L-组氨酸；

0.04％(w/v)聚山梨酯20；

220mM蔗糖；

10mM蛋氨酸；

pH值为6.0±0.5。

18.根据权利要求1至17中任一项所述的药物制剂，其为液体形式、冻干形式或由冻干形式重构的液体形式。

19.根据权利要求1至18中任一项所述的药物制剂，其用于治疗癌症。

20.根据权利要求1至19中任一项所述的药物制剂，其用于与另一种治疗剂、特别是阻断PD-L1/PD-1相互作用的试剂联合使用。

21.根据权利要求1至18中任一项所述的药物制剂，其用于治疗色素沉着绒毛结节性滑膜炎(PVNS)或腱鞘巨细胞肿瘤(TGCT)。

22.根据权利要求1至18中任一项所述的制剂用于制备对于治疗癌症或治疗色素沉着绒毛结节性滑膜炎(PVNS)或腱鞘巨细胞肿瘤(TGCT)有用的药物的用途。