CN112798717B - 一种加热不燃烧卷烟中杀菌剂农药迁移率的测定方法 - Google Patents

一种加热不燃烧卷烟中杀菌剂农药迁移率的测定方法 Download PDF

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Abstract

一种加热不燃烧卷烟中杀菌剂农药迁移率的测定方法，其特征在于：以不同的抽吸模式抽吸完加热不燃烧卷烟后，通过分析加热不燃烧卷烟不同部位中的杀菌剂农药残留，来确定杀菌剂在加热不燃烧卷烟中的迁移率。本发明的方法填补了加热不燃烧卷烟中农残迁移测定的空白。本发明方法具有如下优良效果：本发明方法样品前处理过程简单、快速，具有操作准确、灵敏度高及重复性好的优点。

Description

一种加热不燃烧卷烟中杀菌剂农药迁移率的测定方法
技术领域
本发明属于农药残留的理化检验技术领域，主要涉及烟丝、滤嘴、滤片等不同材料中的杀菌剂农药残留量的测定技术，具体说是以不同的抽吸模式抽吸完加热不燃烧卷烟后，通过分析加热不燃烧卷烟不同部位中的杀菌剂残留，来确定在抽吸过程中加热不燃烧卷烟中杀的菌剂的迁移行为。
背景技术
近年来，加热非燃烧烟草制品（HNB）在市场上的占有率逐年上升，而对于加热非燃烧烟草制品的研究也逐渐成为当前的热点。加热不燃烧烟草制品是利用特殊热源对由烟丝或其它烟草材料制备的烟芯进行加热( 150～500℃ ) ，产生可吸入气溶胶。其加热温度远低于传统卷烟的燃烧温度( 700～800℃ ) 。加热非燃烧的卷烟因其无需高温燃烧烟草，仅在相对低温下对烟草原料进行加热，减少了烟草高温燃烧裂解产生的有害成分，但同时增加了农药残留随气溶胶迁移至人体内的风险。在已报道的研究中，大多为农药在传统卷烟燃吸过程中向主流烟气的迁移行为研究。如熊巍等人【农药学学报，2017，19（5）：597-602】研究了传统卷烟中主流烟气粒相物、气相物和烟灰中5种农药的迁移行为；万毅伦等【贵州农业科学，2015，43(5):101-106】研究了卷烟中126种农药在燃吸过程中的迁移行为；申请号CN101915813A的中国发明专利建立了卷烟滤嘴对烟气中拟除虫菊酯类农药截留量的检测方法；CN105891361A的中国发明专利建立了卷烟主流烟气粒相物中拟除虫菊酯类农药残留量的检测方法。因为加热不燃烧卷烟没有燃烧过程，因此加热不燃烧卷烟其烟芯中农药残留的迁移行为与传统卷烟必然有着较大的不同，且加热不燃烧卷烟的烟芯、滤嘴等材料与传统卷烟截然不同，不同部位的农残萃取溶剂必然有所不同。因此，现有的传统卷烟燃吸过程中农药迁移行为的测定方法不能够适用于加热不燃烧型卷烟。目前未见关于加热不燃烧卷烟在抽吸过程中杀菌剂残留的迁移行为的报道。
发明内容：
本发明的目的旨提供一种加热不燃烧卷烟在抽吸过程中杀菌剂农药的迁移率测定方法，以烟草薄片为基质，通过式固相萃取技术净化、过滤后，以液相色谱-串联质谱测定不同部位中的杀菌剂残留量，该方法能快速、准确检测加热不燃烧卷烟在抽吸完成后不同部位中的杀菌剂残留量，测定结果准确、测定干扰少。其中烟芯的净化采用通过式固相萃取。PRiME(process, robustness, improvements, matrix effects, ease of use) HLB柱是一种新型亲水亲脂平衡萃取柱，其特有的亲脂基团可以有效地吸附烟草中的色素和磷脂类物质。与传统的固相萃取柱相比，PRiME HLB固相萃取柱是一种通过式固相萃取柱，不需要活化/平衡、清洗或洗脱步骤，样品提取液依靠重力通过PRiME HLB柱并收集，杂质被吸附在固相萃取柱上。PRiME HLB通过式固相萃取具有简单、高效、环保且易于操作的优势，尤其适用于复杂样品中分析物的高通量分析。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：
一种加热不燃烧卷烟中杀菌剂农药迁移率的测定方法，以不同的抽吸模式抽吸完加热不燃烧卷烟后，通过分析加热不燃烧卷烟不同部位中的杀菌剂残留，来确定不同的杀菌剂在加热不燃烧卷烟中的迁移率，具体包括以下步骤：
a、样品准备：用微量注射器分别向加热不燃烧卷烟中均匀添加杀菌剂混合标准溶液，添加量为2.0-0.5μg/支。将加标的卷烟置于温度为（22±1）℃，湿度为（50±2）％的环境中平衡48小时备用。
b、样品抽吸：使用加热不燃烧卷烟抽吸装置，按照ISO标准抽吸模式或加拿大深度抽吸模式进行卷烟抽吸，每轮抽吸五支或三支烟支。用剑桥滤片收集主流烟气粒相物，捕集阱内加入10 mL乙醇，收集主流烟气气相物。
c、样品处理
c-1、烟芯处理：抽吸完成后，剥离五支或三支烟支的烟芯，碾磨均匀，置于50ml离心管中。加入3-5 mL水，让水充分浸润样品。移取10 mL乙腈至离心管中，并加入100 μL内标工作溶液（10 μg/mL的d4-三唑酮），然后将离心管置于涡漩混合振荡仪上以2000 rpm的速率振荡3 min。随后向离心管中加入4 g无水硫酸镁和1 g氯化钠，立即于漩涡混合振荡仪上以2000 rpm振荡3 min。移取1.0 mL的提取液到PRiME HLB柱中，且在重力作用下让其自然通过小柱，并收集滤液。滤液经0.22 μm有机相滤膜过滤后进LC-MS/MS检测。
c-2、烟气处理：抽吸完成后，把捕集有粒相成分的滤片及擦拭捕集器用的滤片一起放入50 mL萃取瓶中。同时将捕集阱内的10 mL乙醇倒入50 mL萃取瓶中，另用5 ml乙醇洗涤捕集阱，合并转入放置滤片的50 mL萃取瓶中，加入150μL内标工作溶液（10 μg/mL的d4-三唑酮），然后将离心管置于涡漩混合振荡仪上以2000 rpm的速率振荡3 min。取上清液1mL在氮吹浓缩仪上浓缩近干，再加入1 mL空白烟草薄片基质溶液，搅拌复溶经0.22 μm有机相滤膜过滤后进LC-MS/MS检测。
c-3、滤嘴处理：抽吸完成后，将剥离的五支或三支烟支滤嘴材料剪碎，加入10 mL甲醇丙酮混合溶液（甲醇：丙酮=8:2，v/v）至离心管中（加热不燃烧卷烟滤嘴除了醋酸纤维丝束以外，还可能含有其它功能材料，比如用于烟气降温的聚乳酸薄膜等，甲醇-丙酮混合溶液有较好的溶解性），并加入100 μL内标工作溶液（10 μg/mL的d4-三唑酮），然后将离心管置于涡漩混合振荡仪上以2000 rpm的速率振荡3 min。取上清液1 mL在氮吹浓缩仪上浓缩近干，再加入1 mL空白烟草薄片基质溶液，搅拌复溶经0.22 μm有机相滤膜过滤后进LC-MS/MS检测。
d、混合标准工作溶液制备：移取1.0 mL的混合标准溶液（100 μg/mL）于10 mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，制得的质量浓度为10 μg/mL的混合标准储备液。分别移取混合标准储备液500、200、100、50、20 μL至5个10 mL容量瓶中，并加入100 μL内标工作溶液（10 μg/mL的d4-三唑酮），用乙腈定容，制得质量浓度分别为500、200、100、50及20 ng/mL的混合标准工作溶液。
e、基质混合标准工作溶液制备：分别取5份空白烟草薄片基质溶液各1 mL，置于氮吹浓缩仪适用的试管中，在氮吹浓缩仪上浓缩近干，再分别加入1 mL不同浓度的混合标准工作溶液，搅拌复溶，即得到基质匹配系列标准工作溶液，配置的各基质混合标准工作溶液浓度分别为500、200、100、50及20 ng/mL。该标准工作溶液用于烟芯、烟气和滤嘴中杀菌剂的定量。
空白基质溶液的制备方法如下：准确称取2.0g研磨后的烟草薄片于50 mL具盖离心管中，加入5 mL水；移取10 mL乙腈至三角瓶中，将离心管置于涡漩混合振荡仪上以2000rpm的速率振荡3 min。然后向离心管中加入4 g无水硫酸镁和1 g氯化钠，立即于漩涡混合振荡仪上以2000 rpm振荡3 min。移取1.0 mL的提取液到PRiME HLB柱中，且在重力作用下让其自然通过小柱，并收集滤液。滤液经0.22 μm有机相滤膜过滤后进LC-MS/MS检测。所得滤液即空白烟草薄片基质溶液。
a、液相色谱-串联质谱测定:吸取以上配制好的不同浓度的基质混合标准工作溶液注入液相色谱-串联质谱仪；
采用的检测条件为：ACQUITY UPLC BEH C18柱（100 mm×2.1 mm, 1.7 μm）；柱温：40 ℃；进样量：2 μL；流速：0.3 mL/min；流动相：A相为乙腈，B相为0.1%（体积分数）甲酸水溶液；梯度洗脱程序：0~0.50 min为10% A，0.50~9.00 min为10% A~100% A，9.00~12.25min为100% A，12.25~12.35 min为100% A~10% A，12.35~15.00 min为10% A。质谱扫描方式：正离子扫描；离子源：电喷雾电离源（ESI）；离子源温度：150℃；脱溶剂气温度：350℃；脱溶剂气流量：800 L/h；锥孔气流量：60 L/h；毛细管电压：2.6 KV；采集模式：多反应监测(MRM)；质谱参数见表1：
表1质谱条件
编号 农药名称 英文名称 定量离子对 定性离子对 去簇电压/V 碰撞能量/V
1 烯酰吗啉 Dimethomorph 388.2/301.2 388.2/165.1 41;41 30;20
2 甲霜灵 Metalaxyl 280.3/220.2 280.3/192.2 26;26 17;13
3 腈菌唑 Myclobutanil 288.8/70 288.8/125 34;34 18;32
4 戊菌唑 Penconazole 284/70.1 284/159 50;50 22;18
5 三唑酮 Triadimefon 294.3/197.1 294.3/225 31;31 20;15
6 三唑醇 Triadimenol 296.1/70.1 296.1/227 21;21 10;15
内标 <i>d</i>4-三唑酮 <i>d</i>4-Triadimefon 298.3/201 298.3/229 31;31 20;15
g、杀菌剂残留量测定结果的计算
以内标法进行杀菌剂残留量的定量分析，即以杀菌剂的色谱峰面积与对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线，相关系数大于等于0.997,对提取后的样品进行测定，测得检出杀菌剂的色谱峰面积，代入标准曲线，求得样品中杀菌剂的残留量。
h.某部位杀菌剂迁移率（%）=某部位杀菌剂检出量（μg）×100/杀菌剂添加量（μg）。
本发明的方法克服了现有技术样品处理方法的不足，针对新型加热不燃烧卷烟样品优化了样品前处理方法和仪器检测条件，与现有技术相比具有如下优良效果：
(1)本发明首次提供了新型加热不燃烧卷烟抽吸过程中杀菌剂残留的迁移率测定方法。
(2)本发明方法针对加热不燃烧卷烟不同部位进行了不同的样品前处理过程，根据不同部位材料的差异和操作的安全性考虑，采用了不同的有机溶剂。前处理过程简单，大大缩短了每个样品的萃取及净化时间。
针对烟芯部分，选择性的采用了RiME HLB柱，其特有的亲脂基团可以有效地吸附烟草中的色素和磷脂类物质。与传统的固相萃取柱相比，PRiME HLB固相萃取柱是不需要活化/平衡、清洗或洗脱步骤，样品提取液依靠重力通过PRiME HLB柱并收集。操作具有简单、高效，尤其适用于复杂样品中分析物的高通量分析。
(3)尤其是本发明烟芯、烟气和滤嘴三个不同部位，其材料完全不同，但都统一采用了烟草薄片的基质标准工作溶液进行定量，简化了定量过程，为后续不同部位迁移率的计算提供了便利。
(4)本发明方法具有操作准确、灵敏度高及重复性好的优点。
①本发明方法的检测限：
分别在烟芯、滤嘴和剑桥滤片中加入不同浓度的杀菌剂标准工作溶液，并经样品净化处理后注入LC-MS/MS，以3倍信噪比（S/N = 3）计算检测限（LOD），检测限在1.34-3.48μg/kg之间，以10倍信噪比（S/N = 10）计算定量限（LOQ），定量限在4.97-8.15 μg/kg，结果见表2。
②本发明方法的重复性和加标回收率：
在烟芯、滤嘴和剑桥滤片中加入杀菌剂的标准溶液，然后进行样品前处理和LC－MS/MS分析，并按照加标量和测定值计算其回收率，结果见表2。由表2可以看出，所有杀菌剂的回收率在90.8％－103.6％之间，平均相对标准偏差（RSD）小于5.0%，说明本发明方法的回收率高，重复性好。
表2方法的回收率和重复性（n=6）
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附图说明
图1为本发明的测定方法流程图。
具体实施方式
下面结合具体实施例具体说明本发明所述方法的应用。特别需要指出的是，本发明说明书所举实施例只是为了帮助理解本发明，它们不具任何限制作用，即本发明除说明书所举实施例外，还可以有其他实施方式。因此，凡是采用等同替换或等效变换形式形成的任何技术方案，均落在本发明要求的保护范围中。
实施例中涉及的仪器与试剂规格/型号如下：
6种杀菌剂的混合标准溶液（100 μg/mL）；内标d4-三唑酮（1mg，纯度大于98.0%）；乙腈、乙醇、丙酮和甲醇（色谱纯）；水为超纯水；PRiME HLB通过式固相萃取柱（30 mg，1mL）；ACQUITY I class超高效液相色谱仪； Xevo-TQS四极杆串联质谱仪；Turbo Vap氮吹仪(美国Biotage公司)；VX200涡旋振荡仪；SG3-30K高速离心机；Milli-Q超纯水系统；CP224S电子天平（感量：0.0001 g）。
一、实施例
本实施例的加热不燃烧卷烟中杀菌剂迁移率的测定方法，本实施例选择的样品滤嘴为中空型的，测定流程如图1所示，具体包括以下步骤：
1.样品准备：挑选重量和吸阻合适的样品，用微量注射器分别向样品卷烟中均匀添加杀菌剂混合标准溶液，添加量为1μg/支。将加标的样品置于温度为（22±1）℃，湿度为（50±2）％的环境中平衡48小时备用。
2.样品抽吸：使用加热不燃烧卷烟抽吸装置，按照ISO标准抽吸模式进行卷烟抽吸，每轮抽吸五支。用剑桥滤片收集主流烟气粒相物。捕集阱内装有10 mL乙醇用于收集主流烟气气相物。
3.烟芯处理：抽吸完成后，剥离五支加热不燃烧卷烟的烟芯，碾磨均匀，置于50ml离心管中。加入5 mL水，让水充分浸润样品。移取10 mL乙腈至离心管中，并加入100 μL内标工作溶液（10 μg/mL的d4-三唑酮），然后将离心管置于涡漩混合振荡仪上以2000 rpm的速率振荡3 min。随后向离心管中加入4 g无水硫酸镁和1 g氯化钠，立即于漩涡混合振荡仪上以2000 rpm振荡3 min。移取1.0 mL的提取液到PRiME HLB柱中，且在重力作用下让其自然通过小柱，并收集滤液。滤液经0.22 μm有机相滤膜过滤后进LC-MS/MS检测。
4.烟气处理：抽吸完成后，把捕集有粒相成分的滤片及擦拭捕集器用的滤片一起放入50 mL萃取瓶中。同时将捕集阱内的10 mL乙醇倒入50 mL萃取瓶中，另用5 ml乙醇洗涤捕集阱，合并转入放置滤片的50 mL萃取瓶中，加入150μL内标工作溶液（10 μg/mL的d4-三唑酮），然后将离心管置于涡漩混合振荡仪上以2000 rpm的速率振荡3 min。取上清液1 mL在氮吹浓缩仪上浓缩近干，再加入1 mL空白烟草薄片基质溶液溶液，搅拌复溶经0.22 μm有机相滤膜过滤后进LC-MS/MS检测。
5.滤嘴处理：抽吸完成后，将剥离的五支加热不燃烧卷烟滤嘴材料剪碎，加入10mL甲醇丙酮混合溶液（甲醇：丙酮=8：2，v/v）至离心管中，并加入100 μL内标工作溶液（10 μg/mL的d4-三唑酮），然后将离心管置于涡漩混合振荡仪上以2000 rpm的速率振荡3 min。取上清液1 mL在氮吹浓缩仪上浓缩近干，再加入1 mL空白烟草薄片基质溶液溶液，搅拌复溶经0.22 μm有机相滤膜过滤后进LC-MS/MS检测。
6.混合标准工作溶液制备：移取1.0 mL的混合标准溶液（100 μg/mL）于10 mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，制得的质量浓度为10 μg/mL的混合标准储备液。分别移取混合标准储备液500、200、100、50、20 μL至5个10 mL容量瓶中，并加入100 μL内标工作液（10 μg/mL的d4-三唑酮），用乙腈定容，制得质量浓度分别为500、200、100、50及20 ng/mL的混合标准工作溶液。
7.基质混合标准工作溶液制备：分别取5份空白烟草薄片基质溶液各1 mL，置于氮吹浓缩仪适用的试管中，在氮吹浓缩仪上浓缩近干，再分别加入1 mL不同浓度的混合标准工作溶液，搅拌复溶，即得到基质匹配系列标准工作溶液，配置的各基质混合标准工作溶液浓度分别为500、200、100、50及20 ng/mL。该标准工作溶液用于烟芯、烟气和滤嘴中农残的定量。
8. 空白烟草薄片基质溶液的制备方法如下：准确称取2.0g研磨后的烟草薄片于50 mL具盖离心管中，加入5 mL水；移取10 mL乙腈至三角瓶中，将离心管置于涡漩混合振荡仪上以2000 rpm的速率振荡3 min。然后向离心管中加入4 g无水硫酸镁和1 g氯化钠，立即于漩涡混合振荡仪上以2000 rpm振荡3 min。移取1.0 mL的提取液到PRiME HLB柱中，且在重力作用下让其自然通过小柱，并收集滤液。滤液经0.22 μm有机相滤膜过滤后进LC-MS/MS检测。所得滤液即空白烟草薄片基质溶液。
9.液相色谱-串联质谱测定:吸取以上配制好的不同浓度的基质混合标准工作溶液注入液相色谱-串联质谱仪，以内标法进行杀菌剂残留量的定量分析，即以杀菌剂的色谱峰面积与对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线；对提取后的样品待测液进行测定，测得杀菌剂的色谱峰面积，代入标准曲线，求得加热不燃烧卷烟中各部位中杀菌剂的残留量，并计算各部位的迁移率，结果见表3。
采用的检测条件为：ACQUITY UPLC BEH C18柱（100 mm×2.1 mm, 1.7 μm）；柱温：40 ℃；进样量：2 μL；流速：0.3 mL/min；流动相：A相为乙腈，B相为0.1%（体积分数）甲酸水溶液；梯度洗脱程序：0~0.50 min为10% A，0.50~9.00 min为10% A~100% A，9.00~12.25min为100% A，12.25~12.35 min为100% A~10% A，12.35~15.00 min为10% A。质谱扫描方式：正离子扫描；离子源：电喷雾电离源（ESI）；离子源温度：150℃；脱溶剂气温度：350℃；脱溶剂气流量：800 L/h；锥孔气流量：60 L/h；毛细管电压：2.6 KV；采集模式：多反应监测(MRM)；质谱参数见表1。内标法定量，内标为d4-三唑酮。
表3 加标样品中杀菌剂向主流烟气、滤嘴和烟丝中的迁移率（%）
农药 烟气 滤嘴 烟丝
烯酰吗啉 3.8 19.6 68.8
甲霜灵 3.5 25.6 55.8
腈菌唑 4.1 22.1 69.4
戊菌唑 3.4 26.0 63.5
三唑酮 3.8 24.6 60.5
三唑醇 3.2 21.3 65.9

Claims (7)

1.一种加热不燃烧卷烟中杀菌剂农药迁移率的测定方法，所述杀菌剂为烯酰吗啉、甲霜灵、腈菌唑、戊菌唑、三唑酮和三唑醇，其特征在于：以不同的抽吸模式抽吸完加热不燃烧卷烟后，通过分析加热不燃烧卷烟不同部位中的杀菌剂残留，来确定不同的杀菌剂在加热不燃烧卷烟中的迁移率，加热不燃烧卷烟不同部位包括烟芯、烟气和滤嘴；具体步骤如下：
a、样品准备：用微量注射器分别向加热不燃烧卷烟中均匀添加杀菌剂混合标准溶液，添加量为2.0-0.5μg/支,将加标的卷烟置于温度为22±1℃，湿度为50±2％的环境中平衡48小时备用；
b、样品抽吸：使用加热不燃烧卷烟抽吸装置，按照ISO标准抽吸模式或加拿大深度抽吸模式进行卷烟抽吸，每轮抽吸五支或三支卷烟，用剑桥滤片收集主流烟气粒相物，捕集阱内加入10 mL乙醇，收集主流烟气气相物；
c、样品处理：
c-1、烟芯处理：抽吸完成后，剥离五支或三支烟支的烟芯，碾磨均匀，置于50ml离心管中，加入3-5 mL水，让水充分浸润样品，移取10 mL乙腈至离心管中，并加入100 μL内标工作溶液，然后将离心管置于涡漩混合振荡仪上以2000 rpm的速率振荡3 min；随后向离心管中加入4 g无水硫酸镁和1 g氯化钠，立即于漩涡混合振荡仪上以2000 rpm振荡3 min；移取1.0 mL的提取液到PRiME HLB柱中，且在重力作用下让其自然通过小柱，并收集滤液，滤液经0.22 μm有机相滤膜过滤后进LC-MS/MS检测；
c-2、烟气处理：抽吸完成后，把捕集有粒相成分的滤片及擦拭捕集器用的滤片一起放入50 mL萃取瓶中；同时将捕集阱内的10 mL乙醇倒入50 mL萃取瓶中，另用5 ml乙醇洗涤捕集阱，合并转入放置滤片的50 mL萃取瓶中，加入150μL内标工作溶液，然后将离心管置于涡漩混合振荡仪上以2000 rpm的速率振荡3 min，取上清液1 mL在氮吹浓缩仪上浓缩近干，再加入1 mL空白烟草薄片基质溶液，搅拌复溶经0.22 μm有机相滤膜过滤后进LC-MS/MS检测；
c-3、滤嘴处理：抽吸完成后，将剥离的五支或三支烟支滤嘴材料剪碎，加入10 mL甲醇丙酮混合溶液至离心管中，并加入100 μL内标工作溶液，然后将离心管置于涡漩混合振荡仪上以2000 rpm的速率振荡3 min；取上清液1 mL在氮吹浓缩仪上浓缩近干，再加入1 mL空白烟草薄片基质溶液，搅拌复溶经0.22 μm有机相滤膜过滤后进LC-MS/MS检测；
d、混合标准工作溶液制备：移取1.0 mL、浓度100 μg/mL的混合标准溶液于10 mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，制得的质量浓度为10 μg/mL的混合标准储备液；分别移取混合标准储备液500、200、100、50、20 μL至5个10 mL容量瓶中，并加入100 μL内标工作溶液，用乙腈定容，制得质量浓度分别为500、200、100、50及20 ng/mL的混合标准工作溶液；
e、基质混合标准工作溶液制备：分别取5份空白烟草薄片基质溶液各1 mL，置于氮吹浓缩仪适用的试管中，在氮吹浓缩仪上浓缩近干，再分别加入1 mL不同浓度的混合标准工作溶液，搅拌复溶，即得到基质匹配系列标准工作溶液，配制的各基质混合标准工作溶液浓度分别为500、200、100、50及20 ng/mL，该标准工作溶液用于烟芯、烟气和滤嘴中农残的定量；
f、液相色谱-串联质谱测定:吸取以上配制好的不同浓度的基质混合标准工作溶液注入液相色谱-串联质谱仪；
g、农药残留量测定结果的计算
以内标法进行农药残留量的定量分析，即以农药的色谱峰面积与对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线，相关系数大于等于0.998,对提取后的样品进行测定，测得检出农药的色谱峰面积，代入标准曲线，求得样品中农药的残留量；
h、某部位迁移率，% =某部位检出量，μg×100/添加量，μg。
2.根据权利要求1所述的加热不燃烧卷烟中杀菌剂农药迁移率的测定方法，其特征在于：所述步骤e中的空白烟草薄片基质溶液的制备方法如下：准确称取2.0研磨后的烟草薄片于50 mL具盖离心管中，加入5 mL水；移取10 mL乙腈至三角瓶中，将离心管置于涡漩混合振荡仪上以2000 rpm的速率振荡3 min；然后向离心管中加入4 g无水硫酸镁和1 g氯化钠，立即于漩涡混合振荡仪上以2000 rpm振荡3 min；移取1.0 mL的提取液到PRiME HLB柱中，且在重力作用下让其自然通过小柱，并收集滤液，滤液经0.22 μm有机相滤膜过滤后所得滤液即空白烟草薄片基质溶液。
3.根据权利要求1所述的加热不燃烧卷烟中杀菌剂农药迁移率的测定方法，其特征在于：在LC-MS/MS检测中的具体条件如下：ACQUITY UPLC BEH C18柱，规格100 mm×2.1 mm,1.7 μm；柱温：40 ℃；进样量：2 μL；流速：0.3 mL/min；流动相：A相为乙腈，B相为0.1%甲酸水溶液；梯度洗脱程序：0~0.50 min为10% A，0.50~9.00 min为10% A~100% A，9.00~12.25min为100% A，12.25~12.35 min为100% A~10% A，12.35~15.00 min为10% A；质谱扫描方式：正离子扫描；离子源：电喷雾电离源（ESI）；离子源温度：150℃；脱溶剂气温度：350℃；脱溶剂气流量：800 L/h；锥孔气流量：60 L/h；毛细管电压：2.6 KV；采集模式：多反应监测(MRM)。
4.根据权利要求1或3所述的加热不燃烧卷烟中杀菌剂农药迁移率的测定方法，其特征在于：在LC-MS/MS检测中的质谱条件中MRM参数如表1所示：
Figure DEST_PATH_IMAGE001
。
5.根据权利要求1所述的加热不燃烧卷烟中杀菌剂农药迁移率的测定方法，其特征在于：所述内标工作溶液为浓度10 μg/mL的d4-三唑酮。
6.根据权利要求1所述的加热不燃烧卷烟中杀菌剂农药迁移率的测定方法，其特征在于：所述甲醇丙酮混合溶液具体配比为：甲醇：丙酮=8：2，v/v。
7.根据权利要求1所述的加热不燃烧卷烟中杀菌剂农药迁移率的测定方法，其特征在于：所述混合标准溶液为市售商品，含有6种杀菌剂农药，浓度均为100 μg/mL，具体为：烯酰吗啉、甲霜灵、腈菌唑、戊菌唑、三唑酮、三唑醇。
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