CN112779187B - 一株五大连池芽孢杆菌及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一株五大连池芽孢杆菌及其应用。所述五大连池芽孢杆菌BS39菌株于2021年01月06日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO：61421，保藏地址为：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。该五大连池芽孢杆菌BS39菌株兼具高产生长素(IAA)，解钾，耐重金属胁迫的能力，能够促进小白菜和玉米等植株的生长，为微生物肥料提供了一株新的菌株资源。

Description

一株五大连池芽孢杆菌及其应用

技术领域

本发明属于微生物菌种领域，更具体地，涉及一株五大连池芽孢杆菌及其应用。

背景技术

植物根际分布着大量的微生物，其中多数微生物可以通过分泌生长素直接促进植物根系的发育和根系对营养物质的吸收，进而加强植物根系分泌物的释放，吸引更多的微生物定殖于植物根际。研究表明，作为植物根际的信号分子，微生物合成的生长素不仅能够调节细菌和植物之间的协同互作效应(Spaepen等，2007)，还可以帮助宿主植物和微生物自身克服非生物胁迫(Bashan等人，2010；Bianco等人，2010)，引发诱导系统耐受力机制，间接促进植物的生长(Yang等人，2009)。

芽孢杆菌属(Bacillus)是目前应用于植物促生方面最多的菌属之一，研究中也多见对芽孢杆菌产生长素能力的报道，但多以枯草、巨大芽孢杆菌等为主，新型芽孢杆菌的菌种资源不足。狄义宁(2020)从甘蔗根部分离出一株具有产生长素能力的内生枯草芽孢杆菌，并将菌悬液接种到玉米种子和甘蔗单芽茎，在1.0×106cfu·ml-1的浓度下，表现出对玉米种子最佳促生作用，而同等浓度下对甘蔗单芽茎的株高、根长、叶绿素含量、气孔导度、根系活力等指标均有显著促进作用。Whang等(2016)对巨大芽孢杆菌BM5进行了发酵条件的优化，将吲哚乙酸产量提高至320mg·l-1，并进行根促进实验验证了效果。同时，产吲哚乙酸类巨大芽孢杆菌ZH5被验证对花生的株高、鲜重、根长、根体积的促进效果分别为54.0％，49.8％，64.2％和68.7％(郑文波等，2015)。

另外，由于化肥、工业污染排放等原因引起的土壤肥力下降，重金属含量持续增加等问题持续受到关注，此类非生物胁迫给植物的生长和有益微生物的生存带来了一定威胁。兼具高产生长素分泌能力、养分活化能力和重金属抗性的芽孢杆菌在一定程度上可以有效减轻此类非生物胁迫的影响，增强自身及植物对恶劣环境的胁迫抗性(Bianco等人，2009；Scott等人，2013)，同时芽孢杆菌自身形成芽孢的能力，使其具备了更强的抗逆性。专利CN105925507B提供了一种具有重金属钝化和促进植物生长功能的蜡样芽孢杆菌，该菌株具有重金属钝化和促进植物生长功能，适合用于分解难溶性磷，具有产生长素，耐盐，耐受重金属，促进植物种子发芽，增加土壤有效磷、微生物碳氮，以及降低土壤有效态重金属的功效。因此挖掘更多具有产生长素能力，减轻环境胁迫的微生物对于促进植物生长具有重要的意义。五大连池芽孢杆菌(Bacillus wudalianchiensis)由2017年Bo Liu等从中国黑龙江省五大连池采集的草地土壤分离筛选得到，具有革兰氏阳性，需氧，杆状等特征。作为一株新型的菌种资源，五大连池芽孢杆菌的产生长素、耐重金属胁迫抗性、活化土壤养分等功能特性均未见报道，其在促进植物生长方面的应用更是从未被研究。因此，研究其应用潜力对农业生产具有重大的意义。

发明内容

本发明旨在提供一株五大连池芽孢杆菌(Bacillus wudalianchiensis)BS39菌株及其在促进植物生长方面的应用。本发明从生菜种植地中分离纯化得到一株五大连池芽孢杆菌BS39菌株，该菌株具有高产生长素(IAA)的功能，还可溶解难溶性钾长石，该菌株对铜、锰、镍、锌、钴等重金属胁迫具有显著抗性；且该菌株繁殖速度快，抗逆性强，且具有溶血阴性的生物安全性；将该菌株施加于植物根际能够有效促进小白菜和玉米植株的生长，在促进植物生长、改善土壤养分和拮抗重金属胁迫等方面应用前景广阔。

本发明的首要目的是提供一株五大连池芽孢杆菌(Bacillus wudalianchiensis)BS39菌株。

本发明的另一个目的是提供一种微生物制剂。

本发明的另一个目的是提供五大连池芽孢杆菌在促进植物生长中的应用。

本发明的另一个目的是提供上述五大连池芽孢杆菌BS39菌株在促进植物生长中的应用。

本发明的再一目的是提供一种促进植物生长的方法。

本发明的上述目的是通过以下技术方案实现的：

本发明提供了一株五大连池芽孢杆菌(Bacillus wudalianchiensis)BS39菌株，所述五大连池芽孢杆菌BS39菌株于2021年01月06日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO：61421，保藏地址为：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。

该BS39菌是在广州天河生菜种植地中分离纯化所得，属革兰氏阳性菌，有芽孢，杆状，好氧，在LB固体培养基上培养24h后形成的菌落为淡棕色圆形或不规则形，表面光滑湿润。采用16S rDNA基因序列进行比对，用Mega 7.0软件构建进化系统树，将BS39鉴定为五大连池芽孢杆菌(Bacillus wudalianchiensis)，菌株的16S rDNA基因序列测定结果如SEQID NO：1所示。

本发明还提供一种含有上述五大连池芽孢杆菌BS39菌株和/或其发酵液的微生物制剂。

优选地，所述发酵液中五大连池芽孢杆菌BS39的数量为6.6×10⁸～8×10⁸cfu/mL。

作为一种优选的可实施方法，所述所述发酵液的制备方法为：挑取BS39菌株划线在NA培养基上，37℃过夜培养；挑取单菌落至LB液体培养基，180rpm，37℃摇床培养8h，得到种子液；按1％接种量，将获得的种子液接入发酵培养基中，37℃摇床培养10～14h，转速180r/min，得到菌株BS39的发酵液。

本发明首次研究发现五大连池芽孢杆菌在高产生长素、耐重金属胁迫抗性、活化土壤养分等方面的功能特性，以及其在促进植物生长方面的作用。

因此，五大连池芽孢杆菌在促进植物生长中的应用，以及五大连池芽孢杆菌BS39菌株在促进植物生长中的应用都应在发明的保护范围内。

所述促进植物生长为通过合成生长素，将难溶性钾转化成植物可以吸收利用的速效钾，从而提高植物对钾离子的吸收，拮抗重金属胁迫，增强植物的耐受性，保护植物免受非生物胁迫的影响以促进植物的生长。

本发明通过对小白菜根际施加BS39菌剂，与不施加BS39相比，株高、叶长、叶宽、叶片数、根长、叶绿素含量、地上部鲜重、地下部鲜重、地上部干重、地下部干重分别增长了7.09％、6.51％、14.06％、12.90％、32.22％、1.96％、43.82％、78.38％、57.26％、40.00％，表明BS39能够显著促进小白菜植株及根系生长。

通过对玉米植株施加BS39菌，与不施加BS39相比，株高、叶长、叶宽、茎粗、叶片数、根长、地上部鲜重、地下部鲜重、地上部干重、地下部干重分别增长了10.85％、14.08％、6.63％、12.17％、8.82％、8.40％、11.09％、34.62％、10.70％和13.28％，表明BS39菌株能够显著促进玉米植株的生长。

本发明还请求保护所述五大连池芽孢杆菌BS39菌株在制备微生物肥料中的应用。

本发明还提供了一种促进植物生长的方法，是将上述五大连池芽孢杆菌BS39菌株和/或其发酵液接种至植物根际。

优选地，所述菌的接种量为10⁶cfu/g土壤，接种次数为2～3次。

优选地，所述植物为玉米或小白菜。

本发明具有以下有益效果：

本发明提供的五大连池芽孢杆菌(Bacillus wudalianchiensis)BS39，兼具高产生长素(IAA)，解钾，耐重金属胁迫的能力，能够促进小白菜和玉米等植株的生长，为微生物肥料提供了一株新的菌株资源。

本发明首次研究发现五大连池芽孢杆菌在根际促生、土壤养分活化和重金属修复方面的功能，为五大连池芽孢杆菌提供了新的应用方向。

附图说明

图1是Bacillus wudalianchiensis BS39菌株产IAA定性、定量结果(图1的A图为定性结果，图1的B图为定量结果)；

图2是Bacillus wudalianchiensis BS39菌株革兰氏染色和产芽孢染色照片(图2的A图为革兰氏染色照片，图2的B图为芽孢染色照片)；

图3是Bacillus wudalianchiensis BS39菌株16S rDNA系统发育树；

图4是Bacillus wudalianchiensis BS39菌株溶血试验的结果图；

图5是Bacillus wudalianchiensis BS39菌株解钾能力，注：图中数值为平均值±标准误(n＝3)；

图6是Bacillus wudalianchiensis BS39对重金属胁迫的抗性效果，注：图中数值为平均值±标准误(n＝3)；

图7是Bacillus wudalianchiensis BS39促进小白菜植株生长效果图(图7的A图为小白菜盆栽效果图，图7的B图小白菜盆栽实验数据统计柱状图)，注：图中数值为平均值±标准误(n＝20)，星号(*)表示组间具有显著差异(Duncan法，p<0.05)；

图8是Bacillus wudalianchiensis BS39促进玉米植株生长效果图，(图8A中的a)为玉米盆栽植株7d效果图，图8A中的b)和c)为玉米盆栽21d效果图，图8的B图为玉米盆栽试验结果数据统计图)，注：图中数值为平均值±标准误(n＝18)，星号(*)表示组间具有显著差异(Duncan法，p<0.05)。

具体实施方式

以下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。

除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。

LB液体培养基：蛋白胨10.0g，酵母提取粉5.0g，氯化钠10.0g，蒸馏水1L，pH7.0～7.2。

实施例1菌株的分离、纯化和保藏

1、菌株的分离、纯化

以广东省广州市天河区生菜种植地根际土壤为筛选土样，称取10g土样，放入装有90mL无菌水的三角瓶中，以180rpm/min的转速摇床振荡30min，分散土样，取出静置2min，取1mL上清液于试管中，90℃水浴加热10min；取100μL加入含有900μL无菌水的离心管中，并连续稀释得到10-2-10-6浓度的溶液，滴加100μL10-5和10-6的稀释溶液于NA培养基平板涂布，吹干后置于37℃生化培养箱中培养8～10h。

将分离到的菌接种至含有L-色氨酸(100mg/L)的4mL LB液体培养基中，30℃、180r/mim培养摇床培养24h，进行定性与定量。取200μL菌悬液滴于白色陶瓷板上，同时加入200μL现配的Salkowski比色液(500mL 35％HClO₄+10mL0.5mol/L FeCl₃)。200μL IAA标准液(100mg/L)作为阳性对照，200μL未接菌的含有L-色氨酸的LB液体培养基做空白对照。室温、避光条件下放置30min后观察，记录颜色变红的菌株(图1A)。

对上述菌株的菌悬液进行IAA定量，分光光度法测定菌液的OD600值，然后将菌液10000rpm/min离心5min，取上清液加入等体积Salkowski比色液，避光静置30min，测定其OD530值。根据IAA梯度稀释测定方法绘制标准曲线，计算单位体积发酵液中IAA的含量。筛选出产IAA量高的菌株，即为本发明的菌株BS39，其产IAA能力较高，分泌IAA达48.94mg/L(图1B)。

2、菌株的鉴定

(1)于NA培养基划线活化BS39菌株，37℃生化培养箱中培养3～4d，吸取10uL无菌水于载玻片上，用无菌枪头挑取少量BS39菌体于无菌水中，混匀，自然干燥。过火焰2～3次进行固定；结晶紫初染1min，水洗，自然晾干；碘液媒染1min，水洗，晾干；95％的乙醇脱色20s，水洗，晾干；番红复染1min，水洗，晾干，在100倍油镜下镜检观察，菌体呈蓝紫色(图2A)，BS39为革兰氏阳性菌。

(2)将保存在-80℃冰箱的BS39菌划线于NA培养基中培养3d，吸取4μL无菌水于载玻片上，刮取少量菌体于加好的无菌水中，混匀，然后自然干燥。过火焰2～3次进行固定。滴加孔雀绿染液已固定的涂片上，用镊子夹住载玻片在酒精灯火焰上加热，使染液在30s内冒蒸汽3～4次；水洗，晾干；用番红水溶液复染1min，水洗，晾干。用100倍油镜进行镜检，芽孢呈绿色，菌体呈红色(图2B)，BS39菌可产芽孢。

(3)BS39菌属革兰氏阳性菌，有芽孢，杆状，好氧；在LB固体培养基上培养24h后形成的菌落为淡棕色圆形或不规则形，表面光滑湿润。采用试剂盒法提取BS39菌的总DNA，PCR扩增BS39菌的16S rDNA，进行序列测定，核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；通用引物27F：5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'(核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示)；通用引物1492R：5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3'(核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示)。PCR反应总体系为25ul，包括PCR Mix(含10X PCR Buffer，dNTPs和Taq聚合酶)12.5ul,上下游引物各1ul(10umol/L)，25ng基因组DNA(50ng/ul)和10ul无菌超纯水。PCR扩增的程序条件如下：95℃3min，32个循环为95℃30s，58℃30s和72℃1min，最后在72℃延伸10min，最后，取3ulPCR产物在1.5％琼脂糖凝胶上进行电泳。NCBI比对其16S rDNA基因序列，采用neighbor-joining方法构建BS39菌的系统发育树(图3)。结合平板菌落特征和16S rDNA序列构建系统发育树的结果，初步鉴定该菌株为五大连池芽孢杆菌(Bacillus wudalianchiensis)，命名为五大连池芽孢杆菌(Bacillus wudalianchiensis)BS39。

(4)将BS39菌株挑取单菌落于液体LB中于37℃，180rpm过夜培养，转接于新鲜液体培养基，摇至OD600＝0.4，取3μL点至血琼脂平板上，于37℃培养24h，观察有无溶血环出现，以清水作为阴性对照，洗涤剂为阳性对照。结果表明Bacillus wudalianchiensis BS39菌株无溶血现象，为溶血阴性(图4)，具有溶血安全性。

3、菌株保藏

该五大连池芽孢杆菌Bacillus wudalianchiensis BS39菌株于2021年01月06日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO：61421，保藏地址为：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。

实施例2 BS39菌的解钾能力

采用火焰分光光度计测定接有BS39菌的解钾培养基中水溶性钾含量来确定BS39的解钾能力。挑取BS39单菌落于LB液体培养基，37℃，180r/min，过夜培养。将培养液按1％的接种量转接至新鲜的LB液体培养基中，在37℃，180r/min的摇床中摇至OD₆₀₀＝0.4。吸取菌液(接种量1％)接种至含有50mL液体解钾培养基的250mL三角瓶中，30℃，180r/min，摇床培养3天。将培养液在8000rpm离心5min，取上清液，采用火焰光度计测定水溶性钾含量，设不接菌为对照，每次处理重复3次。

结果表明BS39菌株培养液中水溶性钾含量达12.52mg/L(图5)，说明BS39具有较强的解钾能力。

实施例3 BS39菌对重金属毒性有显著抗性

采用平板斑点草坪法(spot-on-lawn assay)测定BS39对重金属铜、锰、镍、钴、锌胁迫的耐受能力。挑取BS39单菌落接入含有LB液体培养基的试管中，37℃，180r/min，过夜培养。按1％的接种量将培养液转接至新鲜的LB液体培养基中，在37℃，180r/min的摇床中摇至OD600＝0.4。取200μL菌液加入至50-60℃的6mL含0.7％琼脂的LB固体培养基中，颠倒混匀倒在含1.8％琼脂的NA培养基平板上，超净工作台吹风30min。将无菌滤纸片放于平板中央，分别在滤纸片上滴加10μL的400mM CuSO₄(aq)，1M MnSO₄(aq)，1M NiCl₂(aq)，1MCoCl₂(aq)，100mM ZnSO₄(aq)。吹干后放于37℃生化培养箱中培养24h。用枯草芽孢杆菌模式菌株NCIB3610作为对照，记录透明圈直径大小。

结果表明，BS39在重金属Cu(Ⅱ)、Ni(Ⅱ)、Co(Ⅱ)、Mn(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)的胁迫下，产生的透明圈直径比枯草芽孢杆菌NCIB3610小(图6A、图6B)，说明BS39对这3种重金属均表现出明显抗性；且比NCIB3610的抗性强，对重金属镉、锌、铜有显著的修复功能。

实施例4 BS39菌促进植株生长

BS39发酵液的制备：挑取保存于-80℃甘油冻干管的BS39菌株在NA培养基上划线活化，37℃过夜培养。挑取单菌落至LB液体培养基，180rpm，37℃摇床培养8h，得到种子液；按1％接种量，将获得的种子液接入发酵培养基中(容器加液量为20％)，37℃摇床培养10～14h，转速180r/min，得到菌株BS39的发酵液，发酵液中五大连池芽孢杆菌BS39数量为6.6×10⁸～8×10⁸cfu/mL。

(1)BS39菌显著促进小白菜植株生长

采用小白菜盆栽实验评估BS39菌对小白菜植株生长的促进作用。盆栽土壤为由华南农业大学树木园土与启林北试验基地菜园土按1：1混合，盆栽试验共设置CK组(不加BS39)和加BS39菌液组两个处理组，每个处理20株生菜苗，每盆4株，共10盆。各处理组采用高7.9cm，长为22.9cm，宽为17cm的方形花盆，每盆装土1.3kg。白菜苗生长到两心一叶时挑选生长状态一致的进行移栽。加BS39菌液组在小白菜移栽时加入BS39菌悬液(10⁶cfu/g土壤)至小白菜的根部，CK组施加等量无菌生理盐水做对照。7d、14d后进行第二、三次施菌，施加等量的菌液和无菌生理盐水于小白菜盆栽土壤中。放置于人造气候室中，温度保持在18-22℃，相对湿度为65％至80％。7d后测定每个处理所有植株的株高、叶面积、叶片数，21d后测定每个处理所有植株的株高、叶面积、叶绿素含量、根长、鲜重(地上部+地下部)、干重(地上部+地下部)。(图7A、7B)，结果显示：施加BS39菌株的小白菜植株的株高、叶长、叶宽、叶片数、根长、叶绿素含量、地上部鲜重、地下部鲜重、地上部干重、地下部干重分别增长了7.09％、6.51％、14.06％、12.90％、32.22％、1.96％、43.82％、78.38％、57.26％、40.00％，结果表明BS39菌在植物根际有效定殖并通过分泌生长素参与促进生菜植株的生长。

(2)BS39菌显著促进玉米植株生长

采用玉米盆栽试验评估BS39菌对玉米植株生长的促进作用。盆栽土壤为由华南农业大学树木园土与启林北试验基地菜园土按1：1混合，盆栽试验共设置CK组(不加BS39)和加BS39菌液组两个处理组，每个处理18株玉米苗，每盆3株，共12盆。各处理组采用内径为12.5cm，高为11.5cm的花盆，每盆装土0.9kg。待玉米苗生长到3片叶子时，挑选长势一致的进行移栽。加BS39菌液组在玉米移栽时加入BS39菌悬液(10⁶cfu/g土壤)至玉米的根部，CK组施加等量无菌生理盐水做对照。7d后进行第二次施菌，施加同量的菌液和无菌生理盐水于玉米盆栽土壤中。移栽7d和21d后，进行收样和测量，测定每个处理所有植株的株高、叶长、根长、茎粗、叶宽、鲜重(地上部+地下部)、干重(地上部+地下部)，结果显示：施加BS39菌株的玉米植株的株高、叶长、叶宽、茎粗、叶片数、根长、地上部鲜重、地下部鲜重、地上部干重、地下部干重分别增长了10.85％、14.08％、6.63％、12.17％、8.82％、8.40％、11.09％、34.62％、10.70％和13.28％(图8A、8B)，结果表明BS39能够显著促进玉米植株的生长。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

序列表

<110> 华南农业大学

<120> 一株五大连池芽孢杆菌及其应用

<160> 3

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 1401

<212> DNA

<213> 芽孢杆菌（Bacillus wudalianchiensis）BS39菌株(2 Ambystoma laterale xAmbystoma jeffersonianum)

<400> 1

gcggacttga cgggagcttg ctcctgttca agttagcggc ggacgggtga gtaacacgtg 60

ggtaacctgc ctgtaagact gggataactc cgggaaaccg gggctaatac cggatatgct 120

ttttcctccg catggaggaa gacggaaagg cggcttttag ctgtcactta cagatggacc 180

cgcggcgcat tagctagttg gtgaggtaac ggctcaccaa ggcgacgatg cgtagccgac 240

ctgagagggt gatcggccac actgggactg agacacggcc cagactccta cgggaggcag 300

cagtagggaa tcttccgcaa tggacgaaag tctgacggag caacgccgcg tgagtgaaga 360

aggttttcgg atcgtaaagc tctgttgtta gggaagaaca agtacggnag taactgtccg 420

taccttgacg gtacctaacc agaaagccac ggctaactac gtgccagcag ccgcggtaat 480

acgtaggtgg caagcgttgt ccggaattat tgggcgtaaa gcgcgcgcag gcggcttctt 540

aagtctgatg tgaaagccca cggctcaacc gtggagggtc attggaaact gggaggcttg 600

agtgcagaag aggagagcgg aattccacgt gtagcggtga aatgcgtaga gatgtggagg 660

aacaccagtg gcgaaggcgg ctctctggtc tgtaactgac gctgaggcgc gaaagcgtgg 720

ggagcgaaca ggattagata ccctggtagt ccacgccgta aacgatgagt gctaagtgtt 780

ggagggtttc cgcccttcag tgctgcagct aacgcattaa gcactccgcc tggggagtac 840

ggtcgcaaga ctgaaactca aaggaattga cgggggcccg cacaagcggt ggagcatgtg 900

gtttaattcg aagcaacgcg aagaacctta ccaggtcttg acatcccgct gaccggtctg 960

gagacagatc tttcccttcg gggacagcgg tgacaggtgg tgcatggttg tcgtcagctc 1020

gtgtcgtgag atgttgggtt aagtcccgca acgagcgcaa cccttgatct tagttgccag 1080

catttagttg ggcactctaa ggtgactgcc ggtgacaaac cggaggaagg tggggatgac 1140

gtcaaatcat catgcccctt atgacctggg ctacacacgt gctacaatgg atggtacaaa 1200

gggctgcaag accgcaaggt ttagccaatc ccataaaacc attctcagtt cggattgcag 1260

gctgcaactc gcctgcatga agccggaatc gctagtaatc gcggatcagc atgccgcggt 1320

gaatacgttc ccgggccttg tacacaccgc ccgtcacacc acgagagttt gcaacacccg 1380

aagtcggtgg ggtaacccat t 1401

<210> 2

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 2

agagtttgat cctggctcag 20

<210> 3

<211> 19

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 3

ggttaccttg ttacgactt 19

Claims (9)

1.一株五大连池芽孢杆菌(Bacillus wudalianchiensis)BS39菌株，其特征在于，所述五大连池芽孢杆菌BS39菌株于2021年01月06日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO：61421。

2.根据权利要求1所述五大连池芽孢杆菌(Bacillus wudalianchiensis)BS39菌株，其特征在于，所述菌株的16S rDNA核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

3.一种微生物制剂，其特征在于，所述微生物制剂含有权利要求1所述五大连池芽孢杆菌BS39菌株和/或其发酵液。

4.根据权利要求3所述微生物制剂，其特征在于，所述发酵液的制备方法为：挑取BS39菌株划线在NA培养基上，37℃过夜培养；挑取单菌落至LB液体培养基，180rpm，37℃摇床培养8h，得到种子液；按1％接种量，将获得的种子液接入发酵培养基中，37℃摇床培养10～14h，转速180r/min，得到菌株BS39的发酵液。

5.权利要求1所述五大连池芽孢杆菌BS39菌株在促进植物生长中的应用。

6.根据权利要求5所述应用，其特征在于，所述促进植物生长为通过合成生长素促进植物生长。

7.根据权利要求5所述应用，其特征在于，所述促进植物生长为将难溶性钾转化成植物可以吸收利用的速效钾，从而提高植物对钾离子的吸收；拮抗重金属胁迫，增强植物的耐受性，保护植物免受非生物胁迫的影响。

8.权利要求1所述五大连池芽孢杆菌BS39菌株在制备微生物肥料中的应用。

9.一种促进植物生长的方法，其特征在于，是将权利要求1所述五大连池芽孢杆菌BS39菌株和/或其发酵液接种至植物根际。

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