CN112778400A - 一种奥曲肽的制备方法 - Google Patents
一种奥曲肽的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112778400A CN112778400A CN202110164800.7A CN202110164800A CN112778400A CN 112778400 A CN112778400 A CN 112778400A CN 202110164800 A CN202110164800 A CN 202110164800A CN 112778400 A CN112778400 A CN 112778400A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- octreotide
- resin
- linear
- fmoc
- reagent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- DEQANNDTNATYII-OULOTJBUSA-N (4r,7s,10s,13r,16s,19r)-10-(4-aminobutyl)-19-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-16-benzyl-n-[(2r,3r)-1,3-dihydroxybutan-2-yl]-7-[(1r)-1-hydroxyethyl]-13-(1h-indol-3-ylmethyl)-6,9,12,15,18-pentaoxo-1,2-dithia-5,8,11,14,17-pentazacycloicosane-4-carboxa Chemical compound C([C@@H](N)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H](NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC1=O)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 DEQANNDTNATYII-OULOTJBUSA-N 0.000 title claims abstract description 92
- 108010016076 Octreotide Proteins 0.000 title claims abstract description 92
- 229960002700 octreotide Drugs 0.000 title claims abstract description 92
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 22
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 34
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 claims abstract description 25
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 20
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 19
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 88
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 88
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical group OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- KLBPUVPNPAJWHZ-UMSFTDKQSA-N (2r)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-tritylsulfanylpropanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)SC(C=1C=CC=CC=1)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 KLBPUVPNPAJWHZ-UMSFTDKQSA-N 0.000 claims description 19
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims description 18
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims description 18
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 15
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 13
- MUVQIIBPDFTEKM-IUYQGCFVSA-N (2r,3s)-2-aminobutane-1,3-diol Chemical compound C[C@H](O)[C@H](N)CO MUVQIIBPDFTEKM-IUYQGCFVSA-N 0.000 claims description 12
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 11
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 10
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 10
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 9
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000002173 cutting fluid Substances 0.000 claims description 8
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims description 8
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 8
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 claims description 8
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 claims description 8
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 7
- 239000012043 crude product Substances 0.000 claims description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 6
- ADOHASQZJSJZBT-AREMUKBSSA-N (2r)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-[1-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]indol-3-yl]propanoic acid Chemical compound C12=CC=CC=C2N(C(=O)OC(C)(C)C)C=C1C[C@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 ADOHASQZJSJZBT-AREMUKBSSA-N 0.000 claims description 5
- ZYJPUMXJBDHSIF-LLVKDONJSA-N (2r)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ZYJPUMXJBDHSIF-LLVKDONJSA-N 0.000 claims description 5
- SJVFAHZPLIXNDH-QFIPXVFZSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-phenylpropanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)C1=CC=CC=C1 SJVFAHZPLIXNDH-QFIPXVFZSA-N 0.000 claims description 5
- UMRUUWFGLGNQLI-QFIPXVFZSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-6-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]hexanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CCCCNC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 UMRUUWFGLGNQLI-QFIPXVFZSA-N 0.000 claims description 5
- LZOLWEQBVPVDPR-VLIAUNLRSA-N (2s,3r)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]butanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H]([C@H](OC(C)(C)C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 LZOLWEQBVPVDPR-VLIAUNLRSA-N 0.000 claims description 5
- -1 2-Cl-trityl Chemical group 0.000 claims description 5
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 claims description 5
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 claims description 5
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Substances CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- RHQDFWAXVIIEBN-UHFFFAOYSA-N Trifluoroethanol Chemical group OCC(F)(F)F RHQDFWAXVIIEBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 claims description 4
- HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N thioanisole Chemical compound CSC1=CC=CC=C1 HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- HBGPNLPABVUVKZ-POTXQNELSA-N (1r,3as,4s,5ar,5br,7r,7ar,11ar,11br,13as,13br)-4,7-dihydroxy-3a,5a,5b,8,8,11a-hexamethyl-1-prop-1-en-2-yl-2,3,4,5,6,7,7a,10,11,11b,12,13,13a,13b-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]chrysen-9-one Chemical compound C([C@@]12C)CC(=O)C(C)(C)[C@@H]1[C@H](O)C[C@]([C@]1(C)C[C@@H]3O)(C)[C@@H]2CC[C@H]1[C@@H]1[C@]3(C)CC[C@H]1C(=C)C HBGPNLPABVUVKZ-POTXQNELSA-N 0.000 claims description 3
- PFRGGOIBYLYVKM-UHFFFAOYSA-N 15alpha-hydroxylup-20(29)-en-3-one Natural products CC(=C)C1CCC2(C)CC(O)C3(C)C(CCC4C5(C)CCC(=O)C(C)(C)C5CCC34C)C12 PFRGGOIBYLYVKM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000007821 HATU Substances 0.000 claims description 3
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- SOKRNBGSNZXYIO-UHFFFAOYSA-N Resinone Natural products CC(=C)C1CCC2(C)C(O)CC3(C)C(CCC4C5(C)CCC(=O)C(C)(C)C5CCC34C)C12 SOKRNBGSNZXYIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 3
- 125000000025 triisopropylsilyl group Chemical group C(C)(C)[Si](C(C)C)(C(C)C)* 0.000 claims description 3
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 claims description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 12
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 abstract description 12
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 12
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 abstract description 11
- 239000012634 fragment Substances 0.000 abstract description 10
- 238000009833 condensation Methods 0.000 abstract description 9
- 230000005494 condensation Effects 0.000 abstract description 9
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 abstract description 7
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 abstract description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 abstract 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 17
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 7
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 6
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 2
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 2
- KPFBUSLHFFWMAI-HYRPPVSQSA-N [(8r,9s,10r,13s,14s,17r)-17-acetyl-6-formyl-3-methoxy-10,13-dimethyl-1,2,7,8,9,11,12,14,15,16-decahydrocyclopenta[a]phenanthren-17-yl] acetate Chemical compound C1C[C@@H]2[C@](CCC(OC)=C3)(C)C3=C(C=O)C[C@H]2[C@@H]2CC[C@](OC(C)=O)(C(C)=O)[C@]21C KPFBUSLHFFWMAI-HYRPPVSQSA-N 0.000 description 2
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- CMWYAOXYQATXSI-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylformamide;piperidine Chemical compound CN(C)C=O.C1CCNCC1 CMWYAOXYQATXSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 2
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- JFLSOKIMYBSASW-UHFFFAOYSA-N 1-chloro-2-[chloro(diphenyl)methyl]benzene Chemical compound ClC1=CC=CC=C1C(Cl)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 JFLSOKIMYBSASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004066 1-hydroxyethyl group Chemical group [H]OC([H])([*])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 206010000599 Acromegaly Diseases 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- 229930182832 D-phenylalanine Natural products 0.000 description 1
- 229930182827 D-tryptophan Natural products 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N D-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102400000321 Glucagon Human genes 0.000 description 1
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 1
- 101000829127 Homo sapiens Somatostatin receptor type 2 Proteins 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 102100023802 Somatostatin receptor type 2 Human genes 0.000 description 1
- DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N acetaldehyde Diethyl Acetal Natural products CCOC(C)OCC DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical class [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N benzenecarboxaldehyde Natural products O=CC1=CC=CC=C1 HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 1
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 208000015706 neuroendocrine disease Diseases 0.000 description 1
- 201000011519 neuroendocrine tumor Diseases 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N para-ethylbenzaldehyde Natural products CCC1=CC=C(C=O)C=C1 QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012716 precipitator Substances 0.000 description 1
- 238000004262 preparative liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
本发明涉及化合物合成技术领域，具体地，本发明涉及一种奥曲肽的制备方法。本发明提供一种奥曲肽的制备方法，该方法在在奥曲肽的制备中通过固相多肽合成与液相片段缩合的联用，发挥其各自的优势，操作简便，降低成本。通过采用更具优势的保护氨基酸、成本低廉的全保护切割试剂和高效绿色的二硫键配对试剂，实现了适用于奥曲肽的工业化制备。
Description
技术领域
本发明涉及化合物合成技术领域，具体地，本发明涉及一种奥曲肽的制备方法。
背景技术
奥曲肽是一种人工合成的生长抑素8肽类似物，具有与天然内源性生长抑素类似的作用，其化学式为C49H66N10O10S2，分子量为1019.24，其结构简式如式Ⅰ所示。N端的D-苯丙氨酸，C端的苏氨醇，加上D-色氨酸和二硫键，使该肽具有很强的抗代谢降解特性。与天然SRIF相比，奥曲肽具有更大的代谢稳定性和更长的体内半衰期(约90分钟)。此外，由于其对SSTR2受体亚型具有更高的亲和力和特异性，与胰岛素和胰高血糖素相比，它对GH抑制具有更高的选择性。在过去的几十年里，奥曲肽已成为几种神经内分泌疾病治疗策略的主要成分之一，如肢端肥大症和食管肝胰腺神经内分泌肿瘤。此外，研究表明，除了这些主要适应症外，奥曲肽及其类似物在其他医学应用方面具有很大的潜力和前景，如用于肿瘤成像或治疗目的的放射性核素体内载体。由于其广泛的活性，一些旨在增加奥曲肽治疗适应症的研究仍在进行中，主要研究领域包括肿瘤学、胃肠病学和肥胖症。2019年，奥曲肽的全球市场规模达到接近16亿美元，且随着缓释制剂技术的不断发展，长效剂型的奥曲肽被不断开发出来。
式Ⅰ：奥曲肽的一级结构
由于奥曲肽C端苏氨醇的存在，使得通过固相多肽合成策略获取全长奥曲肽具有非常大的挑战性。发展合适的方法，适用于奥曲肽低成本和高产量的工业化制备具有很大的必要。目前制备奥曲肽主要有三种策略。
策略一为全固相合成策略，该策略需在树脂上引入特殊的连接臂实现苏氨醇的偶连，包括：专利US 5889146和WO 2005087794采用了一种含醛基的树脂，通过缩醛实现苏氨醇与树脂的连接。专利US20040039161采用三氯乙酰亚胺基连接臂，以及专利WO2013046233采用苯甲醛连接臂实现苏氨醇与树脂的连接。由于需要特殊的树脂修饰，且成本相对较高，此类方法并未在工业规模生产中得到广泛应用。直接采用将苏氨醇偶连到商业化树脂上也是一种可行的方法，例如：专利US 6476186实现了苏氨醇与2-氯三苯甲基氯树脂的偶连。专利WO 2013098802实现了苏氨醇侧链羟基与MBHA树脂的偶连。这类方法简化了树脂的获取难度，但苏氨醇与树脂之间偶连的效率仍需进一步提高。
策略二为全液相合成策略，通过液相合成两个或多个片段，再将各个片段偶连成一体来实现奥曲肽的制备。专利WO 2003097668和WO 2007110765采用三片段[3+3]+2策略，专利WO 2013132505采用两片段2+6策略。液相合成可以实现大体量多肽片段的平行制备，但其操作过于复杂，使得生产周期优势并不明显。
策略三是固液相结合的合成策略，通过固相合成的片段，在液相缩合的条件下实现奥曲肽的制备。例如专利WO 2005087794和WO 2013046233所描述的通过固相合成两个或多个片段，再将这些片段在液相中实现偶连。专利WO 2010089757采用固相合成N端7肽，并实现7+1的液相缩合。
固相合成中，树脂占总成本的比例较重，而专利WO 2005087794和WO 2013046233中多肽片段多次使用树脂，经济性较差。虽然，专利WO 2010089757最大化了固相和液相的优势，然而其线性奥曲肽采用碘氧化策略，无形中增加了副产物的可能性，降低了后续纯化的便利性。
因此，亟需开发一种成本更低、产率更高的奥曲肽的制备方法。
发明内容
本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提供一种奥曲肽的制备方法，该方法在奥曲肽的制备中通过固相多肽合成与液相片段缩合的联用，发挥其各自的优势，操作简便，降低成本，降低副产物的生成。
为此，本发明一方面提供了一种奥曲肽的制备方法。根据本发明的实施例，所述制备方法包括步骤：
(1)固相合成获得全保护的线性七肽树脂，所述线性七肽的氨基酸序列为D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys；
(2)利用全保护切割试剂对所述线性七肽树脂进行切割，获得第一切割液，所述第一切割液中含有全保护的线性七肽，对所述第一切割液进行旋蒸处理，以便获取所述全保护的线性七肽；
(3)将所述全保护的线性七肽与苏氨醇混合，进行缩合反应，获得全保护的线性八肽中间体；
(4)利用第二切割试剂切割所述线性八肽中间体，获得第二切割液，以便获取线性奥曲肽粗品；
(5)利用二硫键配对试剂将所述线性奥曲肽粗品氧化，以便获取产物奥曲肽；
其中，所述全保护切割试剂为三氟乙醇/DCM溶液；
所述二硫键配对试剂为双氧水。
固相多肽合成具有操作简便，可机械化流程化的优势，而液相合成具有成本低，可规模化的优势。将固相合成和液相合成结合，发挥其各自的优势，在工业化生产中具有重要的意义。本发明通过固相合成获得全保护7肽，并通过液相合成将苏氨醇偶连至全保护7肽，得到全保护的线性奥曲肽，最后经过保护基脱除及双氧水氧化得到奥曲肽。本发明通过采用更具优势的保护氨基酸、成本低廉的全保护切割试剂和高效绿色的二硫键配对试剂(双氧水)，实现了适用于奥曲肽的工业化制备。
根据本发明的实施例，所述全保护的线性七肽树脂通过以下方法获得：
1)以树脂为载体，将Fmoc-Cys(trt)-OH及DIEA加入所述树脂中，投料比(摩尔比)为树脂：Fmoc-Cys(trt)-OH：DIEA＝1:(1-6):(2-12)，以便获取连接有Cys的树脂；
2)依次将Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-D-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH和Boc-D-Phe-OH逐个偶连到所述连接有Cys的树脂上，以便获取所述全保护的线性七肽树脂；
其中，氨基酸偶联过程中使用的缩合剂选自DIC、EDCI、HATU、HCTU、PyAOP、PyBOP中的至少之一。
根据本发明的实施例，所述树脂为经DMF和/或DCM溶胀的树脂，所述树脂选自2-Cl-trityl resin、SASRIN resin。
根据本发明的实施例，所述树脂、每一种带有保护基的氨基酸以及所述缩合剂之间的摩尔比为1:(2-6):(2-6)。
根据本发明的优选的实施例，所述树脂、每一种带有保护基的氨基酸以及所述缩合剂之间的摩尔比为1:6:6，在此条件下，产生全保护的线性七肽树脂的效率较高。
根据本发明的实施例，在步骤(2)中，所述全保护切割试剂的浓度为20％-50％v/v。
所述全保护切割试剂的浓度只有在20％-50％v/v范围内，才能达到较好的切割效果，所述全保护切割试剂浓度过低，会影响切割效率。
根据本发明的实施例，在步骤(2)中，所述全保护切割试剂与所述线性七肽树脂的体积质量比为(5-50)mL:1g。
根据本发明优选的实施例，在步骤(2)中，所述全保护切割试剂与所述线性七肽树脂的体积质量比为10mL:1g。
根据本发明的实施例，在步骤(2)中，进行切割的时间为2-3h。
根据本发明的实施例，在步骤(3)中，所述全保护的线性七肽与苏氨醇的摩尔比为1：(1-10)。
根据本发明优选的实施例，在步骤(3)中，所述全保护的线性七肽与苏氨醇的摩尔比为1：1.2。
根据本发明的实施例，在步骤(3)中，所述缩合反应在DCM中进行，反应时间2-12h。
根据本发明的实施例，在步骤(4)中，所述第二切割试剂为TIPS、EDT、苯酚、茴香硫醚、水中的至少之一和TFA的混合液。
根据本发明的实施例，在步骤(4)中，所述第二切割试剂中TFA的浓度为85％-97.5％v/v。
所述第二切割试剂中TFA浓度过低会导致切割失败，浓度过高导致切割效果不好。
根据本发明的实施例，所述第二切割试剂切割所述线性八肽中间体的时间为2-3h。
根据本发明的实施例，步骤(4)进一步包括将所述第二切割液进行浓缩、沉淀、过滤，以便获取所述线性奥曲肽粗品；
其中，沉淀时所用的沉淀剂选自冰乙醚、冰甲基叔丁基醚。
根据本发明的实施例，在步骤(5)中，对所述线性奥曲肽粗品进行氧化的步骤如下：
获取所述线性奥曲肽粗品的水溶液，所述线性奥曲肽粗品的水溶液的浓度为1-10mg/mL，pH为7-9，将所述线性奥曲肽粗品的水溶液与双氧水混合，进行氧化反应，以便获取产物奥曲肽。
发明人利用双氧水进行二硫键配对，相比现有的碘氧化策略，降低了副产物的生成，从而减少后续纯化步骤，降低了纯化成本，适用于奥曲肽的工业化制备。
根据本发明的实施例，所述线性奥曲肽粗品与双氧水的摩尔比为1:(2-50)。
根据本发明优选的实施例，所述线性奥曲肽粗品的水溶液与双氧水的摩尔比为1:10。
发明人利用双氧水进行二硫键配对，所述线性奥曲肽粗品与双氧水的摩尔比在1:(2-50)范围内，优选1:10，才能获得较高的奥曲肽产率。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
附图说明
本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：
图1显示了实施例7中线性奥曲肽粗品的色谱结果；
图2显示了实施例7中线性奥曲肽粗品的质谱结果；
图3显示了实施例9中纯化后的奥曲肽的色谱结果；
图4显示了实施例9中纯化后的奥曲肽的质谱结果。
具体实施方式
根据本发明的具体实施例，本发明提供的奥曲肽的制备方法，包括步骤：
1)使用经DMF或DCM或DMF/DCM溶胀的树脂，树脂为2-Cl-trityl resin或SASRINresin；
2)将Fmoc-Cys(trt)-OH及DIEA加入到上述溶胀好的树脂中，反应2-12小时，投料比(摩尔比)为树脂：Fmoc-Cys(trt)-OH：DIEA＝1:(1-6):(2-12)，以便获取连接有Cys的树脂；
3)按照固相多肽合成的方法，根据奥曲肽的序列，依次将Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-D-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH和Boc-D-Phe-OH逐个偶连到所述连接有Cys的树脂上，得到全保护的奥曲肽七肽树脂。氨基酸偶连过程中使用的缩合剂选自DIC、EDCI、HATU、HCTU、PyAOP、PyBOP中的至少之一，其中，所述树脂、每一种带有保护基的氨基酸以及所述缩合剂之间的摩尔比为1:(2-6):(2-6)；
4)向全保护的奥曲肽七肽树脂中，加入全保护切割试剂，室温切割2-3小时，其中，全保护切割试剂为20％-50％v/v的三氟乙醇/DCM溶液，收集切割液，旋蒸去除液体，得到全保护的奥曲肽七肽；
5)将全保护的奥曲肽七肽及缩合剂溶于DCM中，向上述DCM溶液中滴加苏氨醇的DMF溶液，室温反应2-12小时。反应结束后，水洗，旋蒸去除溶剂，得到全保护线性八肽中间体；
6)向全保护线性八肽中间体中加入第二切割试剂，室温切割2-3小时。反应结束后，浓缩切割液，加入沉淀剂，过滤得到线性奥曲肽粗品。第二切割试剂为TIPS、EDT、苯酚、茴香硫醚、水中的至少之一和TFA的混合液。沉淀剂为冰乙醚或冰甲基叔丁基醚；
7)将线性奥曲肽粗品溶于水中，至终浓度为1-10mg/mL。调溶液pH至7-9之间，加入双氧水，室温进行线性奥曲肽的氧化；
8)将奥曲肽氧化液进行分离纯化，得到奥曲肽纯品。
在本发明中，Fmoc、tBu以及Boc为氨基酸的保护基。
各个带有保护基的氨基酸的用量可以相同也可以不同，只需满足所述树脂、每一种带有保护基的氨基酸以及所述缩合剂之间的摩尔比为1:(2-6):(2-6)即可。
本发明中“二硫键配对试剂”是指能够在线性奥曲肽中两个Cys之间形成二硫键的试剂。下面详细描述本发明的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1 Fmoc-Cys(Trt)-2-Cl-trityl resin的制备
称取2-Cl-trityl resin(1.2mmol/g,16.6g，20mmol)置于反应管中，加入200mLDMF/DCM，溶胀树脂1小时。称取Fmoc-Cys(Trt)-OH(23.3g,40mmol)溶于200mL DMF中并加入DIEA(13.9mL，80mmol)，混匀后加入上述溶胀好的树脂中，室温反应12小时。反应结束后，加入10mL甲醇。继续反应30min后，抽干树脂，使用DMF和DCM洗涤树脂，最后使用甲醇收缩树脂，获得干燥的Fmoc-Cys(Trt)-2-Cl-trityl resin，测得树脂替代值为0.52mmol/g。
实施例2 Fmoc-Cys(Trt)-2-Cl-trityl resin的制备
称取2-Cl-trityl resin(1.2mmol/g,16.6g，20mmol)置于反应管中，加入200mLDMF/DCM，溶胀树脂1小时。称取Fmoc-Cys(Trt)-OH(46.6g,80mmol)溶于200mL DMF中并加入DIEA(27.8mL，160mmol)，混匀后加入上述溶胀好的树脂中，室温反应2小时。反应结束后，加入10mL甲醇。继续反应30min后，抽干树脂，使用DMF和DCM洗涤树脂，最后使用甲醇收缩树脂，获得干燥的Fmoc-Cys(Trt)-2-Cl-trityl resin，测得树脂替代值为0.61mmol/g。
实施例3全保护奥曲肽七肽树脂的制备
称取实施例1中的Fmoc-Cys(Trt)-2-Cl-trityl resin(0.52mmol/g,19.2g，10mmol)置于反应管中，加入200mL DMF/DCM，溶胀树脂1小时。抽干树脂，加入200mL 20％哌啶/DMF进行Fmoc的脱除。脱除反应进行两次，每次15分钟。使用DMF和DCM洗涤脱除反应后的树脂。称量Fmoc-Thr(tBu)-OH(15.8g,40mmol)、DIC(7.7mL，50mmol)和Oxyma(7.1g，50mmol)溶于200mL DMF中，混匀后加入上述洗涤干净的树脂，室温反应2小时，进行氨基酸的缩合。根据奥曲肽的氨基酸序列，依次偶连Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-D-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH和Boc-D-Phe-OH。每一次偶连过程均包括Fmoc的脱除、树脂的洗涤和氨基酸的缩合。最后使用甲醇洗涤树脂，风干后获得全保护奥曲肽七肽树脂。
实施例4全保护奥曲肽七肽树脂的制备
称取实施例2中的Fmoc-Cys(Trt)-2-Cl-trityl resin(0.61mmol/g，16.3g，10mmol)置于反应管中，加入200mL DMF/DCM，溶胀树脂1小时。抽干树脂，加入200mL 20％哌啶/DMF进行Fmoc的脱除。脱除反应进行两次，每次15分钟。使用DMF和DCM洗涤脱除反应后的树脂。称量Fmoc-Thr(tBu)-OH(7.9g,20mmol)、HCTU(8.2g，20mmol)、HOBt(2.7g,20mmol)和DIEA(6.6mL,40mmol)溶于200mL DMF中，混匀后加入上述洗涤干净的树脂，室温反应2小时，进行氨基酸的缩合。根据奥曲肽的氨基酸序列，依次偶连Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-D-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH和Boc-D-Phe-OH。每一次偶连过程均包括Fmoc的脱除、树脂的洗涤和氨基酸的缩合。最后使用甲醇洗涤树脂，风干后获得全保护奥曲肽七肽树脂。
实施例5全保护奥曲肽七肽树脂的全保护切割
称取50g实施例3中全保护奥曲肽七肽树脂置于反应管中，向其加入500mL 25％三氟乙醇/DCM溶液，室温反应2小时。抽滤，收集全保护切割液。旋蒸获得全保护奥曲肽七肽。
实施例6全保护奥曲肽七肽与苏氨醇的缩合
称取10g实施例5中全保护奥曲肽七肽、1.3g EDCI和0.95g Oxyma溶于100mL DCM中，向上述DCM溶液中滴加50mL含有0.7g苏氨醇的DMF溶液。室温反应2小时后，加入100mL蒸馏水混匀后，收集有机相。旋蒸去除溶剂，得到全保护奥曲肽八肽。
实施例7全保护奥曲肽的切割
称取5g实施例6中全保护奥曲肽八肽置于烧瓶中，加入50mL切割试剂(TFA:H2O:TIPS:EDT＝90:5:2.5:2.5)，室温反应2小时。待反应结束后，旋蒸至大量切割液蒸出后，加入冰乙醚，离心收集沉淀，晾干后得到线性奥曲肽粗品，图1和图2分别展示了线性奥曲肽粗品的色谱图和质谱图。
实施例8全保护奥曲肽的切割
称取5g实施例6中全保护奥曲肽置于烧瓶中，加入50mL切割试剂(TFA:H2O:苯酚:茴香硫醚:EDT＝90:2.5:2.5:2.5:2.5)，室温反应2小时。待反应结束后，旋蒸至大量切割液蒸出后，加入冰甲基叔丁基醚，离心收集沉淀，晾干后得到线性奥曲肽粗品。
实施例9线性奥曲肽的氧化
称取1g实施例8中线性奥曲肽粗品溶于1000mL蒸馏水中，使用氨水调pH至8.0左右，加入0.76mL双氧水，进行线性奥曲肽的氧化。待反应平衡后，调pH至3.0左右，终止反应。使用制备液相色谱进行奥曲肽氧化液的分离纯化，图3和图4分别展示了奥曲肽纯化后色谱图和质谱图。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
Claims (8)
1.一种奥曲肽的制备方法，其特征在于，包括步骤：
(1)固相合成获得全保护的线性七肽树脂，所述线性七肽的氨基酸序列为D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys；
(2)利用全保护切割试剂对所述线性七肽树脂进行切割，获得第一切割液，所述第一切割液中含有全保护的线性七肽，对所述第一切割液进行旋蒸处理，以便获取所述全保护的线性七肽；
(3)将所述全保护的线性七肽与苏氨醇混合，进行缩合反应，以便获得全保护的线性八肽中间体；
(4)利用第二切割试剂切割所述线性八肽中间体，获得第二切割液，以便获取线性奥曲肽粗品；
(5)利用二硫键配对试剂将所述线性奥曲肽粗品氧化，以便获取产物奥曲肽；
其中，所述全保护切割试剂为三氟乙醇/DCM溶液；
所述二硫键配对试剂为双氧水。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述全保护的线性七肽树脂通过以下方法获得：
1)以树脂为载体，将Fmoc-Cys(trt)-OH及DIEA加入所述树脂中，投料比为树脂：Fmoc-Cys(trt)-OH：DIEA＝1:(1-6):(2-12)，以便获取连接有Cys的树脂；
2)依次将Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-D-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH和Boc-D-Phe-OH逐个偶连到所述连接有Cys的树脂上，以便获取所述全保护的线性七肽树脂；
其中，氨基酸偶联过程中使用的缩合剂选自DIC、EDCI、HATU、HCTU、PyAOP、PyBOP中的至少之一。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述树脂为经DMF和/或DCM溶胀的树脂，所述树脂选自2-Cl-trityl resin、SASRIN resin；
任选地，所述树脂、每一种带有保护基的氨基酸以及所述缩合剂之间的摩尔比为1:(2-6):(2-6)。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述全保护切割试剂的浓度为20％-50％v/v；
任选地，所述全保护切割试剂与所述线性七肽树脂的体积质量比为(5-50)mL:1g；
任选地，进行切割的时间为2-3h。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述全保护的线性七肽与苏氨醇的摩尔比为1：(1-10)；
任选地，所述缩合反应在DCM中进行，反应时间2-12h。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(4)中，所述第二切割试剂为TIPS、EDT、苯酚、茴香硫醚、水中的至少之一和TFA的混合液；
任选地，所述第二切割试剂中TFA的浓度为85％-97.5％v/v；
任选地，所述第二切割试剂切割所述线性八肽中间体的时间为2-3h。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)进一步包括将所述第二切割液进行浓缩、沉淀、过滤，以便获取所述线性奥曲肽粗品；
其中，沉淀时所用的沉淀剂选自冰乙醚、冰甲基叔丁基醚。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(5)中，对所述线性奥曲肽粗品进行氧化的步骤如下：
获取所述线性奥曲肽粗品的水溶液，所述线性奥曲肽粗品的水溶液的浓度为1-10mg/mL，pH为7-9，将所述线性奥曲肽粗品的水溶液与双氧水混合，进行氧化反应，以便获取产物奥曲肽。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110164800.7A CN112778400A (zh) | 2021-02-05 | 2021-02-05 | 一种奥曲肽的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110164800.7A CN112778400A (zh) | 2021-02-05 | 2021-02-05 | 一种奥曲肽的制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112778400A true CN112778400A (zh) | 2021-05-11 |
Family
ID=75761065
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110164800.7A Pending CN112778400A (zh) | 2021-02-05 | 2021-02-05 | 一种奥曲肽的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112778400A (zh) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0953577A1 (en) * | 1998-01-29 | 1999-11-03 | Lipotec, S.A. | Procedure for obtaining the somatostatin analog, octreotide |
| CN1569890A (zh) * | 2004-04-30 | 2005-01-26 | 长春力尔凡药业有限公司 | 醋酸奥曲肽的固相合成方法 |
| WO2010089757A2 (en) * | 2008-11-07 | 2010-08-12 | Usv Limited | An improved process for synthesis of cyclic octapeptide |
| CN101863961A (zh) * | 2010-05-07 | 2010-10-20 | 苏州中科天马肽工程中心有限公司 | 一种奥曲肽的制备方法 |
| CN107778351A (zh) * | 2016-08-25 | 2018-03-09 | 成都圣诺生物制药有限公司 | 一种全固相合成奥曲肽的方法 |
| CN109824760A (zh) * | 2019-03-20 | 2019-05-31 | 西南医科大学附属医院 | 奥曲肽类生长抑素前体化合物、配体化合物及制备和应用 |
-
2021
- 2021-02-05 CN CN202110164800.7A patent/CN112778400A/zh active Pending
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0953577A1 (en) * | 1998-01-29 | 1999-11-03 | Lipotec, S.A. | Procedure for obtaining the somatostatin analog, octreotide |
| US6346601B1 (en) * | 1998-01-29 | 2002-02-12 | Lipotec S.A. | Procedure for obtaining the somatostatin analog, octreotide |
| CN1569890A (zh) * | 2004-04-30 | 2005-01-26 | 长春力尔凡药业有限公司 | 醋酸奥曲肽的固相合成方法 |
| WO2010089757A2 (en) * | 2008-11-07 | 2010-08-12 | Usv Limited | An improved process for synthesis of cyclic octapeptide |
| CN101863961A (zh) * | 2010-05-07 | 2010-10-20 | 苏州中科天马肽工程中心有限公司 | 一种奥曲肽的制备方法 |
| CN107778351A (zh) * | 2016-08-25 | 2018-03-09 | 成都圣诺生物制药有限公司 | 一种全固相合成奥曲肽的方法 |
| CN109824760A (zh) * | 2019-03-20 | 2019-05-31 | 西南医科大学附属医院 | 奥曲肽类生长抑素前体化合物、配体化合物及制备和应用 |
Non-Patent Citations (8)
| Title |
|---|
| M. V. SIDOROVA ET AL.: "The Use of Hydrogen Peroxide for Closing Disulfide Bridges", 《RUSSIAN JOURNAL OF BIOORGANIC CHEMISTRY》 * |
| 刘作家: "醋酸奥曲肽的合成研究" * |
| 吴腾飞: "奥曲肽合成方法学研究" * |
| 李谦编主编: "《中国健康传媒集团》", 31 December 2019 * |
| 杨潇骁等: "脱苏氨醇奥曲肽的微波辅助合成" * |
| 温凯等: "68Ga-NOTA-ANCP-PSMA的制备与初步评价", 《核化学与放射化学》 * |
| 胡玉玺等: "制备工艺和过程控制对合成多肽药物有关物质的影响" * |
| 许玲: "具有生化功能的泛素Toolboxes的合成新策略研究", 《中国博士学位论文全文数据库(电子期刊) 基础科学辑》 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102875655B (zh) | 一种合成利那洛肽的方法 | |
| CN106928320B (zh) | 一种合成Etelcalcetide的方法 | |
| CN103497245A (zh) | 一种合成胸腺法新的方法 | |
| CN106167514A (zh) | 一种利那洛肽的合成和纯化方法 | |
| CN107880111B (zh) | 一种制备利拉鲁肽的方法 | |
| CN110317188B (zh) | 化合物及其制备方法和应用 | |
| CN109575109B (zh) | 片段缩合制备地加瑞克的方法 | |
| CN108218957B (zh) | 一种固液相结合制备amg416的方法 | |
| WO2005087794A1 (en) | Process for octreotide synthesis | |
| CN1923849B (zh) | 固相多肽合成奥曲肽的制备方法 | |
| CN110903352A (zh) | 一种西曲瑞克的制备方法 | |
| CN109180803A (zh) | 生长抑素及其制备方法和药物组合物 | |
| CN107778351B (zh) | 一种全固相合成奥曲肽的方法 | |
| CN103694336B (zh) | 一种固液相片段缩合制备胸腺肽α1的方法 | |
| CN112062811B (zh) | 一种维拉卡肽的合成方法 | |
| CN111057129B (zh) | 一种用于合成含有两对二硫键的多肽的制备方法及其试剂盒，以及普利卡那肽的制备方法 | |
| JP2001342200A (ja) | オクトレオチドとその誘導体の製法 | |
| CN112778400A (zh) | 一种奥曲肽的制备方法 | |
| CN110498835B (zh) | 一种合成etelcalcetide的方法 | |
| CN113039193A (zh) | 具有分子内s-s键的环化肽的制造方法 | |
| CN103665144A (zh) | 液相片段缩合制备胸腺肽α1的方法 | |
| CN110894227A (zh) | 一种利拉鲁肽的固相合成方法 | |
| CN111378009A (zh) | 一种奥曲肽的制备方法 | |
| CN114805480A (zh) | 一种奥曲肽的制备方法 | |
| CN113045641A (zh) | 一种索马鲁肽的制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210511 |