CN112730823A - 一种处理硝酸纤维素膜的方法及胶体金检测卡 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种处理硝酸纤维素膜的方法及胶体金检测卡,其中,采用处理液对硝酸纤维素膜进行处理,所述处理液包括缓冲液,硝酸纤维素膜经过缓冲液处理后,硝酸纤维素膜的亲水性增强,在进行批间划膜时,不易出现断线。解决了硝酸纤维素膜性能不稳定所导致的批间划膜不均一的问题,避免了产品的浪费,降低了生产成本。
Description
技术领域
本发明涉及膜技术领域,具体涉及一种处理硝酸纤维素膜的方法及胶体金检测卡。
背景技术
硝酸纤维素膜(nitrocellulose filter membrane,简称NC膜),在胶体金试纸中用做C/T线的承载体,同时也是免疫反应的发生处。NC膜是生物学试验中最重要的耗材之一。
由于不同的厂家在制备硝酸纤维素浆时,所加入的溶液配方不一样以及在成膜时的控制工艺的不同,导致所得到的硝酸纤维素膜质量稳定性较差,在进行批间划膜时,会出现C/T线不均匀、出现膜线断断续续、粗细不一。
因此,如何提升硝酸纤维素膜批间划膜时的膜线均一性是亟需解决的问题。
发明内容
本发明提供一种处理硝酸纤维素膜的方法及胶体金检测卡,旨在一定程度上解决现有技术中部分硝酸纤维素膜批间划膜时膜线不均一的技术问题。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下:
第一方面,一种处理硝酸纤维素膜的方法,其中,采用处理液对硝酸纤维素膜进行处理,所述处理液包括缓冲液。
可选地,所述的处理硝酸纤维素膜的方法,其中,按质量百分比计,所述预处理液还包括:表面活性剂。
可选地,所述的处理硝酸纤维素膜的方法,其中,所述缓冲液选自磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、Tris缓冲液中的一种。
可选地,所述的处理硝酸纤维素膜的方法,其中,所述表面活性剂选自吐温-10、吐温-20、曲拉通-100、曲拉通-114、S1、S7、S9中的一种或多种。
可选地,所述的处理硝酸纤维素膜的方法,其中,所述预处理液的pH值为7-9。
可选地,所述的处理硝酸纤维素膜的方法,其中,所述采用处理液对硝酸纤维素膜进行处理的步骤,具体包括:
提供待处理的硝酸纤维素膜;
将所述待处理的硝酸纤维素膜浸泡在所述预处理液中,浸泡预定时间后取出,经干燥后得到硝酸纤维素膜。
可选地,所述的处理硝酸纤维素膜的方法,其中,所述预定时间为20-40min。
可选地,所述的处理硝酸纤维素膜的方法,其中,所述待处理的硝酸纤维素膜为表面交联壳聚糖的硝酸纤维素膜。
可选地,所述的处理硝酸纤维素膜的方法,其中,所述将所述湿的硝酸纤维素膜经干燥后得到硝酸纤维素膜,其中,干燥时间为10-15小时。
第二方面,一种胶体金检测卡,其中,包括上述所述的硝酸纤维素膜。
有益效果:本发明提供一种硝酸纤维素膜,通过将成品纤维素膜经含有缓冲液的预处理液进行处理,使得处理后的纤维素膜的整体亲水性得到均一化,有利于进行批次划膜,使所划出的膜线均一。
附图说明
图1为现有技术中批间划膜时,出现膜线断断续续的情况示意图;
图2为本发明实施例提供的硝酸纤维素膜,批间划膜时膜线均一示意图。
具体实施方式
为了便于理解本发明,下面将参照相关附图对本发明进行更全面的描述。附图中给出了本发明的较佳实施方式。但是,本发明可以以许多不同的形式来实现,并不限于本文所描述的实施方式。相反地,提供这些实施方式的目的是使对本发明的公开内容理解的更加透彻全面。
除非另有定义,本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施方式的目的,不是旨在于限制本发明。
胶体金免疫层析技术(colloidal gold immunochromatography assay,简称GITA)是结合了蛋白免疫层析法和胶体金标记技术以硝酸纤维素膜(NC膜)作为载体的一种新型固相膜免疫分析方法。其中的硝酸纤维素膜在研发胶体金检测卡中起到了作为C/T线承载体的作用,同时也是免疫反应的发生处,因此也成为了最重要的耗材之一。硝酸纤维素膜有不同的规格,其规格主要以孔径和爬速进行区分。
现在所售的硝酸纤维素膜主要分国产和进口牌子,进口品牌的NC膜质量较为稳定,在进行批间划膜时稳定性较好,灵敏度一致。而国产部分硝酸纤维素膜其质量稳定性相对较差一些,在进行批间划膜时,会出现C/T线不均匀、出现膜线断断续续、粗细不一(如图1所示,图中10表示硝酸纤维素膜,20表示膜线),导致在后期胶体金的显色上会出现颜色深浅不一,难判读的情况。
发明人经过反复的实验论证认为:由于硝酸纤维素膜通常是将硝酸纤维素粒子溶解在溶剂中,制成硝酸纤维素浆,通过涂布、干燥后得到硝酸纤维素膜。在将硝酸纤维素湿膜进行干燥的过程中,由于溶剂的挥发,会导致纤维素膜的表面出现皲裂、使得硝酸纤维素膜的表面润湿性变差。在进行批间划膜时,极易出现膜线断裂,绘制的膜线不均匀。
基于此,本发明提供一种能够解决上述技术问题的方案,其详细内容将在后续实施例中得以阐述。
本发明实施例提供一种处理硝酸纤维素膜的方法,采用处理液对硝酸纤维素膜进行处理,所述处理液包括缓冲液。
在本实施例中,所述硝酸纤维素膜为市售的成品硝酸纤维素膜,尤其是膜的质量稳定性不高的一类膜,所谓的质量稳定性不高指的是该类膜在进行批间划膜时,易出现C/T线不均匀,膜线断断续续、粗细不一。其中,所述的C/T线指的是,在胶体金检测卡上所设置的质检线(C线)、检测线(T线)。将市售的成品硝酸纤维素膜再经过预处理液处理后,所得到的硝酸纤维素膜的亲水性得到增强,在进行批间划膜时,所划出的膜线均一性较高,不易出现断线。
具体来说,所述预处理液中的缓冲液选自磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、Tris缓冲液中的一种。上述所述的缓冲液为水基盐溶液,硝酸纤维素膜经过缓冲液处理后,在硝酸纤维素膜的表面上吸附有亲水性的盐离子,从而使得硝酸纤维素膜整体的亲水性得到增强。在进行质控线和检测线涂制时,不易出现断线。由于硝酸纤维素膜在起始制备时,即由硝酸纤维素颗粒,溶解成浆料,然后制备成硝酸纤维素膜时,也有用到缓冲溶液,因此,在预处理液中使用缓冲溶液对后续将硝酸纤维素膜制备成胶体金检测卡的检测性能影响较小。
在本发明实施例的一种实施方式中,所述预处理液还包括表面活性剂,所述表面活性剂包括但不限于吐温-10、吐温-20、曲拉通-100、曲拉通-114、S1、S7、S9。通过补加表面活性剂可以进一步改善硝酸纤维素膜的亲水性能。
在本实施例中,按质量百分比计,所述表面活性剂的加入量为0.1%至0.2%,0.2%至0.3%,0.3%至0.4%,0.4%至0.5%,0.5%至0.6%,0.6%至0.7%,0.7%至0.8%,0.8%至0.9%,0.9%至1%。通过控制表面活性剂的加入量,可以防止预处理液浓度的增高,不易于对硝酸纤维素膜的处理。
在本发明实施例的一种实施方式中,所述预处理液的pH值为7-9,将预处理液的pH值控制在7-9,可以有效避免预处理对硝酸纤维素膜性能的破坏。
在本发明实施例的一种实施方式中,所述采用处理液对硝酸纤维素膜进行处理的步骤具体包括:提供待处理的硝酸纤维素膜;将所述待处理的硝酸纤维素膜浸泡在所述预处理液中,浸泡预定时间后取出,经干燥后得到硝酸纤维素膜。即采用预处理液对所述对硝酸纤维素膜进行处理的步骤可以是,取市售的稳定性不高的硝酸纤维素膜(所谓的待处理的硝酸纤维素膜)贴敷在支撑板上,如PVC板上,浸泡在预先配置好的缓冲液中(浸泡时硝酸纤维素膜全部没入在缓冲液中),如pH值为7的磷酸盐缓冲液,浸泡时间可以是20min至40min,待所述硝酸纤维素膜得到充分浸泡后,所述的充分浸泡指的是,浸泡后的纤维素膜的重量随着时间的增加,重量不再发生变化。取出沥干液体后,放入干燥室进行加热烘干,其中加热方式可以是电加热、热空气加热等。具体加热方式在此不做限定。
在本实施例中,将纤维素膜平稳的贴在PVC板上,可以避免在浸泡和烘干时发生变形,如出现褶皱,同时采用PVC板做支撑板,一方面PVC板方便易得,且在浸泡和烘烤的过程中不易发生变形。
在本实施例中,加热温度可以设置为40℃至50℃,当然还可以是其他温度,加热时间可以是8小时至10小时,10小时至12小时,12小时至15小时等。
在本实施中,所述待处理硝酸纤维素膜可以是经过改性的硝酸纤维素膜,如表面交联壳聚糖的硝酸纤维素膜。通过对硝酸纤维素膜进行壳聚糖改性,使得改性后的硝酸纤维素膜的亲水性、以及韧性得到增强,再经过预处理液处理后,亲水性更强,更有利于批间划膜。
基于相同的发明构思,本发明还提供一种胶体金检测卡,该胶体金检测卡包括:PVC胶板以及设置在所述PVC胶板上的样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜吸水材料。其中,所述的硝酸纤维素膜为上述所述的经过预处理液处理后的硝酸纤维素膜。由于所使用的硝酸纤维素膜经过预处理液处理,使得胶体金检测卡的灵敏度降低,进而可以降低抗原抗体的使用量即可达到检出限的要求。
下面通过具体的实施例,来对本发明所提供的硝酸纤维素膜,做进一步的解释说明。
实施例1
将硝酸纤维素膜剪切成30cm长度、平稳的贴于PVC底板上,背靠背放置于66柱立柱式试管架上。
配制磷酸盐缓冲溶液(4L):称取1.748g磷酸二氢钠,10.316g磷酸氢二钠,34g氯化钠以及吸取4ml吐温-20,全部溶解于纯净水中后,用2L的量筒进行补水至4L,将其溶液全部倒入干净的长40cm*宽30cm*高17cm的塑料储物箱中,混匀。
将放置于66柱立柱式试管架的硝酸纤维素膜整齐摆放到已注入缓冲液的塑料储物箱内,液面需覆盖过硝酸纤维素膜,将储物箱放置于水平旋转振荡器上,速度设置在80-100,匀速浸泡20min,使其硝酸纤维素膜充分的浸泡到缓冲液后,停止水平旋转,拿出沥干液体后,放入干燥室进行干燥10小时,得到硝酸纤维素膜,对所得到的硝酸纤维素膜进行批间划线,所划线条均匀无断线(如图2所示)。
实施例2
将硝酸纤维素膜剪切成25cm长度、平稳的贴于PVC底板上,背靠背放置于66柱立柱式试管架上。
配制磷酸盐缓冲溶液(4L):称取1.748g磷酸二氢钠,10.316g磷酸氢二钠,34g氯化钠以及吸取4ml曲拉通-100,全部溶解于纯净水中后,用2L的量筒进行补水至4L,将其溶液全部倒入干净的长40cm*宽30cm*高17cm的塑料储物箱中,混匀。
将放置于66柱立柱式试管架的硝酸纤维素膜整齐摆放到已注入缓冲液的塑料储物箱内,液面需覆盖过硝酸纤维素膜,将储物箱放置于水平旋转振荡器上,速度设置在80-100,匀速浸泡30min,使其硝酸纤维素膜充分的浸泡到缓冲液后,停止水平旋转,拿出沥干液体后,放入干燥室进行干燥12小时,得到硝酸纤维素膜,对所得到的硝酸纤维素膜进行批间划线,所划线条均匀无断线。
实施例3
将硝酸纤维素膜剪切成30cm长度、平稳的贴于PVC底板上,背靠背放置于66柱立柱式试管架上。
配制磷酸盐缓冲溶液(4L):称取1.748g磷酸二氢钠,10.316g磷酸氢二钠,34g氯化钠以及吸取4ml S7,全部溶解于纯净水中后,用2L的量筒进行补水至4L,将其溶液全部倒入干净的长40cm*宽30cm*高17cm的塑料储物箱中,混匀。
将放置于66柱立柱式试管架的硝酸纤维素膜整齐摆放到已注入缓冲液的塑料储物箱内,液面需覆盖过硝酸纤维素膜,将储物箱放置于水平旋转振荡器上,速度设置在80-100,匀速浸泡40min,使其硝酸纤维素膜充分的浸泡到缓冲液后,停止水平旋转,拿出沥干液体后,放入干燥室进行干燥15小时,得到硝酸纤维素膜,对所得到的硝酸纤维素膜进行批间划线,所划线条均匀无断线。
实施例4
将硝酸纤维素膜剪切成30cm长度、平稳的贴于PVC底板上,背靠背放置于66柱立柱式试管架上。
配制磷酸盐缓冲溶液(4L):称取1.748g磷酸二氢钠,10.316g磷酸氢二钠,34g氯化钠,全部溶解于纯净水中后,用2L的量筒进行补水至4L,将其溶液全部倒入干净的长40cm*宽30cm*高17cm的塑料储物箱中,混匀。
将放置于66柱立柱式试管架的硝酸纤维素膜整齐摆放到已注入缓冲液的塑料储物箱内,液面需覆盖过硝酸纤维素膜,将储物箱放置于水平旋转振荡器上,速度设置在80-100,匀速浸泡20min,使其硝酸纤维素膜充分的浸泡到缓冲液后,停止水平旋转,拿出沥干液体后,放入干燥室进行干燥12小时,得到硝酸纤维素膜,对所得到的硝酸纤维素膜进行批间划线,所划线条均匀无断线。
实施例5
将硝酸纤维素膜剪切成30cm长度、平稳的贴于PVC底板上,背靠背放置于66柱立柱式试管架上。
配制硼酸盐缓冲溶液(4L):吸取180ml 0.05M硼砂和220ml 0.2M硼酸,充分混匀后,用2L的量筒进行补水至4L,将其溶液全部倒入干净的长40cm*宽30cm*高17cm的塑料储物箱中,混匀。
将放置于66柱立柱式试管架的硝酸纤维素膜整齐摆放到已注入缓冲液的塑料储物箱内,液面需覆盖过硝酸纤维素膜,将储物箱放置于水平旋转振荡器上,速度设置在80-100,匀速浸泡20min,使其硝酸纤维素膜充分的浸泡到缓冲液后,停止水平旋转,拿出沥干液体后,放入干燥室进行干燥10小时,得到硝酸纤维素膜,对所得到的硝酸纤维素膜进行批间划线,所划线条均匀无断线。
实施例6
将硝酸纤维素膜剪切成30cm长度、平稳的贴于PVC底板上,背靠背放置于66柱立柱式试管架上。
配制Tris缓冲液(4L):称取24.228g Tris,全部溶解于纯净水中后,调节PH于8-8.5,用2L的量筒进行补水至4L,将其溶液全部倒入干净的长40cm*宽30cm*高17cm的塑料储物箱中,混匀。
将放置于66柱立柱式试管架的硝酸纤维素膜整齐摆放到已注入缓冲液的塑料储物箱内,液面需覆盖过硝酸纤维素膜,将储物箱放置于水平旋转振荡器上,速度设置在80-100,匀速浸泡20min,使其硝酸纤维素膜充分的浸泡到缓冲液后,停止水平旋转,拿出沥干液体后,放入干燥室进行干燥10小时,得到硝酸纤维素膜,对所得到的硝酸纤维素膜进行批间划线,所划线条均匀无断线。
综上所述,本发明提供了一种处理硝酸纤维素膜的方法及胶体金检测卡,其中,采用处理液对硝酸纤维素膜进行处理,所述处理液包括缓冲液,硝酸纤维素膜经过缓冲液处理后,硝酸纤维素膜的亲水性增强,在进行批间划膜时,不易出现断线。解决了硝酸纤维素膜性能不稳定所导致的批间划膜不均一的问题,避免了产品的浪费,降低了生产成本。
以上所述仅为本发明的较佳实施例,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种处理硝酸纤维素膜的方法,其特征在于,采用处理液对硝酸纤维素膜进行处理,所述处理液包括缓冲液。
2.如权利要求1所述的处理硝酸纤维素膜的方法,其特征在于,所述采用处理液对硝酸纤维素膜进行处理的步骤,具体包括:
提供硝酸纤维素膜;
将所述硝酸纤维素膜浸泡在所述处理液中,浸泡预定时间后取出,并干燥。
3.如权利要求1所述的处理硝酸纤维素膜的方法,其特征在于,所述预处理液还包括:表面活性剂。
4.如权利要求1所述的处理硝酸纤维素膜的方法,其特征在于,所述缓冲液选自磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、Tris缓冲液中的一种。
5.如权利要求3所述的处理硝酸纤维素膜的方法,其特征在于,所述表面活性剂选自吐温-10、吐温-20、曲拉通-100、曲拉通-114、S7、S1、S9中的一种或多种。
6.如权利要求1-5任一所述的处理硝酸纤维素膜的方法,其特征在于,所述预处理液的pH值为7-9。
7.如权利要求2所述的处理硝酸纤维素膜的方法,其特征在于,所述预定时间为20-40min。
8.如权利要求2所述的处理硝酸纤维素膜的方法,其特征在于,所述待处理的硝酸纤维素膜为表面交联壳聚糖的硝酸纤维素膜。
9.如权利要求2所述的处理硝酸纤维素膜的方法,其特征在于,所述将所述待处理的硝酸纤维素膜浸泡在所述预处理液中,浸泡预定时间后取出,经干燥后得到硝酸纤维素膜,其中,干燥时间为10-15小时。
10.一种胶体金检测卡,其特征在于,包括权利要求1-9任一所述的经处理后的硝酸纤维素膜。
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