CN112655555A - 一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法 - Google Patents
一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112655555A CN112655555A CN202011500381.1A CN202011500381A CN112655555A CN 112655555 A CN112655555 A CN 112655555A CN 202011500381 A CN202011500381 A CN 202011500381A CN 112655555 A CN112655555 A CN 112655555A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- rhododendron
- seedlings
- culture medium
- culture
- seedling
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 title claims abstract description 22
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 241000320571 Cymbidium floribundum Species 0.000 title description 3
- 241000208422 Rhododendron Species 0.000 claims abstract description 109
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 32
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims abstract description 11
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 56
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 47
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 claims description 41
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 30
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 claims description 25
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 20
- 239000000645 desinfectant Substances 0.000 claims description 16
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 claims description 16
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 15
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 15
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims description 15
- 238000005507 spraying Methods 0.000 claims description 15
- 239000002352 surface water Substances 0.000 claims description 15
- 241000846172 Cremastra appendiculata Species 0.000 claims description 11
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 claims description 10
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 claims description 10
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 claims description 10
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 claims description 10
- 241000218645 Cedrus Species 0.000 claims description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 10
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 10
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 claims description 10
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 claims description 10
- 239000010451 perlite Substances 0.000 claims description 10
- 239000010455 vermiculite Substances 0.000 claims description 10
- 235000019354 vermiculite Nutrition 0.000 claims description 10
- 229910052902 vermiculite Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 7
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 5
- 244000205754 Colocasia esculenta Species 0.000 claims description 5
- 235000006481 Colocasia esculenta Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 5
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 claims description 5
- 230000000249 desinfective effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 5
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims description 5
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims description 5
- JTEDVYBZBROSJT-UHFFFAOYSA-N indole-3-butyric acid Chemical compound C1=CC=C2C(CCCC(=O)O)=CNC2=C1 JTEDVYBZBROSJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000003780 insertion Methods 0.000 claims description 5
- 230000037431 insertion Effects 0.000 claims description 5
- 235000013575 mashed potatoes Nutrition 0.000 claims description 5
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 5
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 5
- 239000012883 rooting culture medium Substances 0.000 claims description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 5
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 5
- 239000002023 wood Substances 0.000 claims description 5
- 241000173289 Cymbidium goeringii Species 0.000 claims 6
- 235000017141 Cymbidium goeringii Nutrition 0.000 claims 6
- 241000732800 Cymbidium Species 0.000 claims 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 claims 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 abstract description 6
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 abstract description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 241000233855 Orchidaceae Species 0.000 description 5
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 208000006877 Insect Bites and Stings Diseases 0.000 description 1
- 241000766380 Iphigenia Species 0.000 description 1
- 244000083724 Rhododendron simsii Species 0.000 description 1
- 241000270295 Serpentes Species 0.000 description 1
- 208000004078 Snake Bites Diseases 0.000 description 1
- 206010053615 Thermal burn Diseases 0.000 description 1
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 1
Abstract
本发明公开了一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法,具体涉及种植技术领域,包括以下步骤,选取已经成熟的杜鹃兰蒴果,采摘杜鹃兰蒴果后,用流水冲洗进行表面清洁,然后置于超净工作台内。本发明通过以杜鹃兰芽体基部的球茎作为外植体,通过不定芽的诱导和无根苗的生根培养和炼苗,大大缩短了培养杜鹃兰再生植株的时间,为杜鹃兰再生植株的大规模繁殖提供了一种新途径,且这种方式培育的杜娟兰生长良好且成活率较高,在现有技术水平上都得到了显著提高,为杜鹃兰种苗的规模化和工厂化生产提供了可靠的技术保障,为杜鹃兰大规模繁殖提供了一种新途径,有效地解决了当前杜鹃兰植物资源和种苗资源短缺的问题。
Description
技术领域
本发明涉及种植技术领域,更具体地说,本发明涉及一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法。
背景技术
杜鹃兰又名毛慈菇和算盘七,为兰科杜鹃兰属的野生珍稀药用及观赏植物,主要分布于东亚地区,尤以中国的贵州和四川为多,以假鳞茎入药,味辛、甘,性寒,有小毒,有清热解毒、润肺止咳、活血止痛、消肿散结等功效,内用可抗肝癌、乳腺癌和子宫癌等,外用治疮毒、蛇虫咬伤、皮肤烫伤或烧伤等。杜鹃兰不仅是珍稀药用植物,而且是我国三级珍稀濒危野生保护植物。
杜鹃兰自然贮存量极少,加之无计划的人为采挖,野生资源濒临枯竭,杜鹃兰喜冷凉阴湿环境,对生态环境要求较严,目前主要依靠分株繁殖,其繁殖系数极低,另外,因杜鹃兰植物种子非常细小且无胚乳,所以在自然环境下其种子繁殖成功率极低,然而药材市场对杜鹃兰的需求量非常大,致使人们进行地毯式的采挖,野生资源濒临枯竭,导致药材价格节节攀升,为挽救这一珍稀物种,确保其资源的永续利用,同时也为满足该药材的市场需求,因此,急需提供一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法来解决上述问题。
发明内容
为了克服现有技术的上述缺陷,本发明提供了一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法,本发明所要解决的技术问题是:因杜鹃兰植物种子非常细小且无胚乳,所以在自然环境下其种子繁殖成功率极低,然而药材市场对杜鹃兰的需求量非常大,致使人们进行地毯式的采挖,野生资源濒临枯竭,导致药材价格节节攀升,为挽救这一珍稀物种,确保其资源的永续利用,同时也为满足该药材的市场需求的问题。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法,包括以下步骤:
S1、选取已经成熟的杜鹃兰蒴果,采摘杜鹃兰蒴果后,用流水冲洗进行表面清洁,然后置于超净工作台内,用75%的酒精浸泡2-3min,并用无菌水洗3-5次,接着再用植物消毒液浸泡5-10min,最后用无菌水洗3-5次,用无水滤纸吸干表面水分,再以解剖刀纵向剖开蒴果,并用力抖出杜鹃兰种子,再将抖出的杜鹃兰种子先用75%的酒精消毒15-20s,再使用无菌水洗3-5次,并使用植物消毒液浸泡8-12min,最后使用无菌水洗3-5次,用滤纸吸干表面水分。
S2、然后将得到的杜鹃兰种子放入由1/2-1MS、2.5-4.5g/L琼脂和0.1mg/LNAA组成的一号培养基中,在温度为15-20℃的无光照条件下诱导培养25-30天,再将其转移到二号培养基中,在温度为22-26℃每天光照8-12小时和光照强度为2000-3000lx的条件下培养40-60天,获得基部生长有球茎的杜鹃兰芽体。
S3、选取幼芽生长长度为2.0-3.0cm的类原球茎,洗去表面培养基后,将芽簇分割成两部分,一部分是芽簇中未分化的原球茎,将其接入培养基中芽簇诱导培养基中继续诱导芽簇形成,另一部分是基部明显膨大且具有分化成苗趋势的原球茎,将其接入生根二号培养基上进行生根培养直至长出3-5条长为2-3cm根的健壮杜鹃兰幼苗。
S4、然后将得到的杜鹃兰幼苗放入激素配比为IBA0.2-0.4mg/L+IAA0.1-0.3mg/L的液体中浸泡30-60min,取出阴干表面水分以后,移栽至消毒基质中培养,每培养5-8天喷洒一次营养液。
S5、培养长大后剪下一些长枝条,并将扦插枝顶剪成平口,该剪口距腋芽约1cm,扦插枝上不留成熟叶片,将扦插口朝下放进配制好的500mg/L的吲哚丁酸中浸泡25分钟后,取出晾干后插入苗床内,并搭建拱棚进行遮阳。
S6、扦插后需保证土壤湿润,当扦插枝生根,抽生新叶后一周,拆除拱棚,培养结束后,将培养基放置到温度为20-30℃的有菌环境中培养4-8天进行炼苗,炼苗结束后取出小苗并清洗干净后移栽到大棚的苗盘中,一周后喷施叶面肥,并定期施加适量的复合肥,进行培养当新叶长出2-3片后,每周喷1次0.2%-0.3%的磷酸二氢钾,以促进根系健康生长,当新叶长出5片后,每周施1次0.5%的腐熟人粪尿,当新叶长出7片后,每周施1次1%-5%的腐熟人粪,当扦插苗大量生长时,再追肥2-3次,每周施0.1%-0.2%的复合肥,当扦插苗进入生长缓慢期时,每周浇施稀肥液2次,3-6个月之后便可以移植到自然土地中进行培养。
作为本发明的进一步方案:所述扦插口斜剪成45度,且剪口需光滑平整。
作为本发明的进一步方案:所述培养基的pH值为5.5-6.2。
作为本发明的进一步方案:所述基质是由珍珠岩、营养土、蛭石、碎杉木皮和碎花生壳组成。
作为本发明的进一步方案:所述珍珠岩、营养土、蛭石、碎杉木皮和碎花生壳的比例为3:1:1:1:1。
作为本发明的进一步方案:所述成熟的杜鹃兰蒴果是指异株异花授粉,且生长期在180天-200天的蒴果。
作为本发明的进一步方案:所述培养基为1/2MS+6BA1-3mg/L+TDZ0.3-0.6mg/L+NAA0.1-0.5mg/L+活性炭1.0-2.0g/L的培养基。
作为本发明的进一步方案:所述二号培养基为MS+6-BA0.1~0.5mg/L+2ip4~8mg/L+2.4-D0.3~2.0mg/L+土豆泥25~50g/L+芋头泥20~50g/L+半胱氨酸2.0~5.0g/L+活性炭1.0~3.0g/L固体培养基。
本发明的有益效果在于:
1、本发明通过以杜鹃兰芽体基部的球茎作为外植体,通过不定芽的诱导和无根苗的生根培养和炼苗,大大缩短了培养杜鹃兰再生植株的时间,为杜鹃兰再生植株的大规模繁殖提供了一种新途径,且这种方式培育的杜娟兰生长良好且成活率较高,在现有技术水平上都得到了显著提高,为杜鹃兰种苗的规模化和工厂化生产提供了可靠的技术保障,为杜鹃兰大规模繁殖提供了一种新途径,有效地解决了当前杜鹃兰植物资源和种苗资源短缺的问题。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1:
一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法,包括以下步骤:
S1、选取已经成熟的杜鹃兰蒴果,采摘杜鹃兰蒴果后,用流水冲洗进行表面清洁,然后置于超净工作台内,用75%的酒精浸泡2-3min,并用无菌水洗3-5次,接着再用植物消毒液浸泡5min,最后用无菌水洗3-5次,用无水滤纸吸干表面水分,再以解剖刀纵向剖开蒴果,并用力抖出杜鹃兰种子,再将抖出的杜鹃兰种子先用75%的酒精消毒15-20s,再使用无菌水洗3-5次,并使用植物消毒液浸泡8-12min,最后使用无菌水洗3-5次,用滤纸吸干表面水分。
S2、然后将得到的杜鹃兰种子放入由1/2-1MS、2.5-4.5g/L琼脂和0.1mg/LNAA组成的一号培养基中,在温度为15℃的无光照条件下诱导培养25-30天,再将其转移到二号培养基中,在温度为22℃每天光照8-12小时和光照强度为2000-3000lx的条件下培养40-60天,获得基部生长有球茎的杜鹃兰芽体。
S3、选取幼芽生长长度为2.0-3.0cm的类原球茎,洗去表面培养基后,将芽簇分割成两部分,一部分是芽簇中未分化的原球茎,将其接入培养基中芽簇诱导培养基中继续诱导芽簇形成,另一部分是基部明显膨大且具有分化成苗趋势的原球茎,将其接入生根二号培养基上进行生根培养直至长出3-5条长为2-3cm根的健壮杜鹃兰幼苗。
S4、然后将得到的杜鹃兰幼苗放入激素配比为IBA0.2-0.4mg/L+IAA0.1-0.3mg/L的液体中浸泡30-60min,取出阴干表面水分以后,移栽至消毒基质中培养,每培养5天喷洒一次营养液。
S5、培养长大后剪下一些长枝条,并将扦插枝顶剪成平口,该剪口距腋芽约1cm,扦插枝上不留成熟叶片,将扦插口朝下放进配制好的500mg/L的吲哚丁酸中浸泡25分钟后,取出晾干后插入苗床内,并搭建拱棚进行遮阳。
S6、扦插后需保证土壤湿润,当扦插枝生根,抽生新叶后一周,拆除拱棚,培养结束后,将培养基放置到温度为20-30℃的有菌环境中培养4-8天进行炼苗,炼苗结束后取出小苗并清洗干净后移栽到大棚的苗盘中,一周后喷施叶面肥,并定期施加适量的复合肥,进行培养当新叶长出2-3片后,每周喷1次0.2%-0.3%的磷酸二氢钾,以促进根系健康生长,当新叶长出5片后,每周施1次0.5%的腐熟人粪尿,当新叶长出7片后,每周施1次1%-5%的腐熟人粪,当扦插苗大量生长时,再追肥2-3次,每周施0.1%-0.2%的复合肥,当扦插苗进入生长缓慢期时,每周浇施稀肥液2次,3-6个月之后便可以移植到自然土地中进行培养。
扦插口斜剪成45度,且剪口需光滑平整。
培养基的pH值为5.5。
基质是由珍珠岩、营养土、蛭石、碎杉木皮和碎花生壳组成。
珍珠岩、营养土、蛭石、碎杉木皮和碎花生壳的比例为3:1:1:1:1。
成熟的杜鹃兰蒴果是指异株异花授粉,且生长期在180天的蒴果。
培养基为1/2MS+6BA1-3mg/L+TDZ0.3-0.6mg/L+NAA0.1-0.5mg/L+活性炭1.0-2.0g/L的培养基。
二号培养基为MS+6-BA0.1~0.5mg/L+2ip4~8mg/L+2.4-D0.3~2.0mg/L+土豆泥25~50g/L+芋头泥20~50g/L+半胱氨酸2.0~5.0g/L+活性炭1.0~3.0g/L固体培养基。
实施例2:
一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法,包括以下步骤:
S1、选取已经成熟的杜鹃兰蒴果,采摘杜鹃兰蒴果后,用流水冲洗进行表面清洁,然后置于超净工作台内,用75%的酒精浸泡2-3min,并用无菌水洗3-5次,接着再用植物消毒液浸泡8min,最后用无菌水洗3-5次,用无水滤纸吸干表面水分,再以解剖刀纵向剖开蒴果,并用力抖出杜鹃兰种子,再将抖出的杜鹃兰种子先用75%的酒精消毒15-20s,再使用无菌水洗3-5次,并使用植物消毒液浸泡8-12min,最后使用无菌水洗3-5次,用滤纸吸干表面水分。
S2、然后将得到的杜鹃兰种子放入由1/2-1MS、2.5-4.5g/L琼脂和0.1mg/LNAA组成的一号培养基中,在温度为18℃的无光照条件下诱导培养25-30天,再将其转移到二号培养基中,在温度为24℃每天光照8-12小时和光照强度为2000-3000lx的条件下培养40-60天,获得基部生长有球茎的杜鹃兰芽体。
S3、选取幼芽生长长度为2.0-3.0cm的类原球茎,洗去表面培养基后,将芽簇分割成两部分,一部分是芽簇中未分化的原球茎,将其接入培养基中芽簇诱导培养基中继续诱导芽簇形成,另一部分是基部明显膨大且具有分化成苗趋势的原球茎,将其接入生根二号培养基上进行生根培养直至长出3-5条长为2-3cm根的健壮杜鹃兰幼苗。
S4、然后将得到的杜鹃兰幼苗放入激素配比为IBA0.2-0.4mg/L+IAA0.1-0.3mg/L的液体中浸泡30-60min,取出阴干表面水分以后,移栽至消毒基质中培养,每培养6天喷洒一次营养液。
S5、培养长大后剪下一些长枝条,并将扦插枝顶剪成平口,该剪口距腋芽约1cm,扦插枝上不留成熟叶片,将扦插口朝下放进配制好的500mg/L的吲哚丁酸中浸泡25分钟后,取出晾干后插入苗床内,并搭建拱棚进行遮阳。
S6、扦插后需保证土壤湿润,当扦插枝生根,抽生新叶后一周,拆除拱棚,培养结束后,将培养基放置到温度为20-30℃的有菌环境中培养4-8天进行炼苗,炼苗结束后取出小苗并清洗干净后移栽到大棚的苗盘中,一周后喷施叶面肥,并定期施加适量的复合肥,进行培养当新叶长出2-3片后,每周喷1次0.2%-0.3%的磷酸二氢钾,以促进根系健康生长,当新叶长出5片后,每周施1次0.5%的腐熟人粪尿,当新叶长出7片后,每周施1次1%-5%的腐熟人粪,当扦插苗大量生长时,再追肥2-3次,每周施0.1%-0.2%的复合肥,当扦插苗进入生长缓慢期时,每周浇施稀肥液2次,3-6个月之后便可以移植到自然土地中进行培养。
扦插口斜剪成45度,且剪口需光滑平整。
培养基的pH值为6。
基质是由珍珠岩、营养土、蛭石、碎杉木皮和碎花生壳组成。
珍珠岩、营养土、蛭石、碎杉木皮和碎花生壳的比例为3:1:1:1:1。
成熟的杜鹃兰蒴果是指异株异花授粉,且生长期在190天的蒴果。
培养基为1/2MS+6BA1-3mg/L+TDZ0.3-0.6mg/L+NAA0.1-0.5mg/L+活性炭1.0-2.0g/L的培养基。
二号培养基为MS+6-BA0.1~0.5mg/L+2ip4~8mg/L+2.4-D0.3~2.0mg/L+土豆泥25~50g/L+芋头泥20~50g/L+半胱氨酸2.0~5.0g/L+活性炭1.0~3.0g/L固体培养基。
实施例3:
一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法,包括以下步骤:
S1、选取已经成熟的杜鹃兰蒴果,采摘杜鹃兰蒴果后,用流水冲洗进行表面清洁,然后置于超净工作台内,用75%的酒精浸泡2-3min,并用无菌水洗3-5次,接着再用植物消毒液浸泡10min,最后用无菌水洗3-5次,用无水滤纸吸干表面水分,再以解剖刀纵向剖开蒴果,并用力抖出杜鹃兰种子,再将抖出的杜鹃兰种子先用75%的酒精消毒15-20s,再使用无菌水洗3-5次,并使用植物消毒液浸泡8-12min,最后使用无菌水洗3-5次,用滤纸吸干表面水分。
S2、然后将得到的杜鹃兰种子放入由1/2-1MS、2.5-4.5g/L琼脂和0.1mg/LNAA组成的一号培养基中,在温度为20℃的无光照条件下诱导培养25-30天,再将其转移到二号培养基中,在温度为26℃每天光照8-12小时和光照强度为2000-3000lx的条件下培养40-60天,获得基部生长有球茎的杜鹃兰芽体。
S3、选取幼芽生长长度为2.0-3.0cm的类原球茎,洗去表面培养基后,将芽簇分割成两部分,一部分是芽簇中未分化的原球茎,将其接入培养基中芽簇诱导培养基中继续诱导芽簇形成,另一部分是基部明显膨大且具有分化成苗趋势的原球茎,将其接入生根二号培养基上进行生根培养直至长出3-5条长为2-3cm根的健壮杜鹃兰幼苗。
S4、然后将得到的杜鹃兰幼苗放入激素配比为IBA0.2-0.4mg/L+IAA0.1-0.3mg/L的液体中浸泡30-60min,取出阴干表面水分以后,移栽至消毒基质中培养,每培养8天喷洒一次营养液。
S5、培养长大后剪下一些长枝条,并将扦插枝顶剪成平口,该剪口距腋芽约1cm,扦插枝上不留成熟叶片,将扦插口朝下放进配制好的500mg/L的吲哚丁酸中浸泡25分钟后,取出晾干后插入苗床内,并搭建拱棚进行遮阳。
S6、扦插后需保证土壤湿润,当扦插枝生根,抽生新叶后一周,拆除拱棚,培养结束后,将培养基放置到温度为20-30℃的有菌环境中培养4-8天进行炼苗,炼苗结束后取出小苗并清洗干净后移栽到大棚的苗盘中,一周后喷施叶面肥,并定期施加适量的复合肥,进行培养当新叶长出2-3片后,每周喷1次0.2%-0.3%的磷酸二氢钾,以促进根系健康生长,当新叶长出5片后,每周施1次0.5%的腐熟人粪尿,当新叶长出7片后,每周施1次1%-5%的腐熟人粪,当扦插苗大量生长时,再追肥2-3次,每周施0.1%-0.2%的复合肥,当扦插苗进入生长缓慢期时,每周浇施稀肥液2次,3-6个月之后便可以移植到自然土地中进行培养。
扦插口斜剪成45度,且剪口需光滑平整。
培养基的pH值为6.2。
基质是由珍珠岩、营养土、蛭石、碎杉木皮和碎花生壳组成。
珍珠岩、营养土、蛭石、碎杉木皮和碎花生壳的比例为3:1:1:1:1。
成熟的杜鹃兰蒴果是指异株异花授粉,且生长期在200天的蒴果。
培养基为1/2MS+6BA1-3mg/L+TDZ0.3-0.6mg/L+NAA0.1-0.5mg/L+活性炭1.0-2.0g/L的培养基。
二号培养基为MS+6-BA0.1~0.5mg/L+2ip4~8mg/L+2.4-D0.3~2.0mg/L+土豆泥25~50g/L+芋头泥20~50g/L+半胱氨酸2.0~5.0g/L+活性炭1.0~3.0g/L固体培养基。
对比例1:
采用现有技术中的杜鹃兰培育技术对杜鹃兰种子进行培育。
根据实施例1-3和对比例1得出下表:
产出率 | 生长情况 | 成活率 | |
实施例1 | 较高 | 较佳 | 98.5% |
实施例2 | 较高 | 较佳 | 96.9% |
实施例3 | 较高 | 较佳 | 97.5% |
对比例1 | 较低 | 一般 | 65.8% |
由上表中的对比可知:本发明通过以杜鹃兰芽体基部的球茎作为外植体,通过不定芽的诱导和无根苗的生根培养和炼苗,大大缩短了培养杜鹃兰再生植株的时间,为杜鹃兰再生植株的大规模繁殖提供了一种新途径,且这种方式培育的杜娟兰生长良好且成活率较高,在现有技术水平上都得到了显著提高,为杜鹃兰种苗的规模化和工厂化生产提供了可靠的技术保障,为杜鹃兰大规模繁殖提供了一种新途径,有效地解决了当前杜鹃兰植物资源和种苗资源短缺的问题,与现有技术相比,本发明的培育方法不仅成活率较高,而且生长情况较佳,产出率也较高。
最后应说明的几点是:虽然,上文中已经用一般性说明及具体实施例对本发明作了详尽的描述,但在本发明的基础上,以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
Claims (8)
1.一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、选取已经成熟的杜鹃兰蒴果,采摘杜鹃兰蒴果后,用流水冲洗进行表面清洁,然后置于超净工作台内,用75%的酒精浸泡2-3min,并用无菌水洗3-5次,接着再用植物消毒液浸泡5-10min,最后用无菌水洗3-5次,用无水滤纸吸干表面水分,再以解剖刀纵向剖开蒴果,并用力抖出杜鹃兰种子,再将抖出的杜鹃兰种子先用75%的酒精消毒15-20s,再使用无菌水洗3-5次,并使用植物消毒液浸泡8-12min,最后使用无菌水洗3-5次,用滤纸吸干表面水分;
S2、然后将得到的杜鹃兰种子放入由1/2-1MS、2.5-4.5g/L琼脂和0.1mg/LNAA组成的一号培养基中,在温度为15-20℃的无光照条件下诱导培养25-30天,再将其转移到二号培养基中,在温度为22-26℃每天光照8-12小时和光照强度为2000-3000lx的条件下培养40-60天,获得基部生长有球茎的杜鹃兰芽体;
S3、选取幼芽生长长度为2.0-3.0cm的类原球茎,洗去表面培养基后,将芽簇分割成两部分,一部分是芽簇中未分化的原球茎,将其接入培养基中芽簇诱导培养基中继续诱导芽簇形成,另一部分是基部明显膨大且具有分化成苗趋势的原球茎,将其接入生根二号培养基上进行生根培养直至长出3-5条长为2-3cm根的健壮杜鹃兰幼苗;
S4、然后将得到的杜鹃兰幼苗放入激素配比为IBA0.2-0.4mg/L+IAA0.1-0.3mg/L的液体中浸泡30-60min,取出阴干表面水分以后,移栽至消毒基质中培养,每培养5-8天喷洒一次营养液;
S5、培养长大后剪下一些长枝条,并将扦插枝顶剪成平口,该剪口距腋芽约1cm,扦插枝上不留成熟叶片,将扦插口朝下放进配制好的500mg/L的吲哚丁酸中浸泡25分钟后,取出晾干后插入苗床内,并搭建拱棚进行遮阳;
S6、扦插后需保证土壤湿润,当扦插枝生根,抽生新叶后一周,拆除拱棚,培养结束后,将培养基放置到温度为20-30℃的有菌环境中培养4-8天进行炼苗,炼苗结束后取出小苗并清洗干净后移栽到大棚的苗盘中,一周后喷施叶面肥,并定期施加适量的复合肥,进行培养当新叶长出2-3片后,每周喷1次0.2%-0.3%的磷酸二氢钾,以促进根系健康生长,当新叶长出5片后,每周施1次0.5%的腐熟人粪尿,当新叶长出7片后,每周施1次1%-5%的腐熟人粪,当扦插苗大量生长时,再追肥2-3次,每周施0.1%-0.2%的复合肥,当扦插苗进入生长缓慢期时,每周浇施稀肥液2次,3-6个月之后便可以移植到自然土地中进行培养。
2.根据权利要求1所述的一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法,其特征在于:所述扦插口斜剪成45度,且剪口需光滑平整。
3.根据权利要求1所述的一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法,其特征在于:所述培养基的pH值为5.5-6.2。
4.根据权利要求1所述的一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法,其特征在于:所述基质是由珍珠岩、营养土、蛭石、碎杉木皮和碎花生壳组成。
5.根据权利要求4所述的一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法,其特征在于:所述珍珠岩、营养土、蛭石、碎杉木皮和碎花生壳的比例为3:1:1:1:1。
6.根据权利要求1所述的一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法,其特征在于:所述成熟的杜鹃兰蒴果是指异株异花授粉,且生长期在180天-200天的蒴果。
7.根据权利要求1所述的一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法,其特征在于:所述一号培养基为1/2MS+6BA1-3mg/L+TDZ0.3-0.6mg/L+NAA0.1-0.5mg/L+活性炭1.0-2.0g/L的培养基。
8.根据权利要求1所述的一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法,其特征在于:所述二号培养基为MS+6-BA0.1~0.5mg/L+2ip4~8mg/L+2.4-D0.3~2.0mg/L+土豆泥25~50g/L+芋头泥20~50g/L+半胱氨酸2.0~5.0g/L+活性炭1.0~3.0g/L固体培养基。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202011500381.1A CN112655555A (zh) | 2020-12-18 | 2020-12-18 | 一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202011500381.1A CN112655555A (zh) | 2020-12-18 | 2020-12-18 | 一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN112655555A true CN112655555A (zh) | 2021-04-16 |
Family
ID=75405143
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202011500381.1A Pending CN112655555A (zh) | 2020-12-18 | 2020-12-18 | 一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN112655555A (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109105264A (zh) * | 2018-11-02 | 2019-01-01 | 成都大学 | 一种杜鹃兰再生植株的快速培育方法 |
CN110100733A (zh) * | 2019-05-29 | 2019-08-09 | 成都大学 | 一种以杜鹃兰组培根为外植体快速诱导杜鹃兰再生植株的方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109105264A (zh) * | 2018-11-02 | 2019-01-01 | 成都大学 | 一种杜鹃兰再生植株的快速培育方法 |
CN109924073A (zh) * | 2019-03-26 | 2019-06-25 | 四川大学 | 一种见血清种子无菌萌发及快速成苗方法 |
-
2020
- 2020-12-18 CN CN202011500381.1A patent/CN112655555A/zh active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109105264A (zh) * | 2018-11-02 | 2019-01-01 | 成都大学 | 一种杜鹃兰再生植株的快速培育方法 |
CN109924073A (zh) * | 2019-03-26 | 2019-06-25 | 四川大学 | 一种见血清种子无菌萌发及快速成苗方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
廖婷婷: "山慈菇(杜鹃兰)快速繁殖技术体系的建立", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》 * |
张传海等主编: "《植物生物技术》", 30 September 2015, 合肥工业大学出版社 * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109105264A (zh) * | 2018-11-02 | 2019-01-01 | 成都大学 | 一种杜鹃兰再生植株的快速培育方法 |
CN110100733A (zh) * | 2019-05-29 | 2019-08-09 | 成都大学 | 一种以杜鹃兰组培根为外植体快速诱导杜鹃兰再生植株的方法 |
CN110100733B (zh) * | 2019-05-29 | 2022-03-01 | 成都大学 | 一种以杜鹃兰组培根为外植体快速诱导杜鹃兰再生植株的方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN108157180B (zh) | 一种马铃薯脱毒苗开放式工厂化快繁的方法 | |
CN108293878B (zh) | 一种栝楼嫩叶的组培育苗方法 | |
WO2021174933A1 (zh) | 一种无刺花椒组培苗的继代繁育方法 | |
CN109105264B (zh) | 一种杜鹃兰再生植株的快速培育方法 | |
CN110692521A (zh) | 一种西南远志茎段组培高成苗率培育方法 | |
CN105191792B (zh) | 扁桃斑鸠菊的快速繁殖方法 | |
CN112655555A (zh) | 一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法 | |
CN111657151A (zh) | 一种元宝枫快速成苗方法 | |
CN101803571A (zh) | 一种水半夏的组培快繁法 | |
CN113243295B (zh) | 朱顶红组培繁育方法 | |
CN109863997B (zh) | 一种蒙桑种苗的组织培养方法 | |
CN1154413C (zh) | 魔芋组培苗批量化生产及组培苗栽培技术 | |
CN116058281B (zh) | 一种沙木蓼组织快繁方法 | |
CN101564010B (zh) | 一种蓝果树的快速繁殖方法 | |
CN110810242A (zh) | 一种蒜头果的快速繁殖方法 | |
CN103430822B (zh) | 一种魔芋微型种芋的水培繁种方法 | |
WO2022171212A2 (zh) | 一种无刺青花椒的离体培养方法 | |
CN101129131B (zh) | 朱顶红无菌苗再切割成苗方法 | |
CN113973717A (zh) | 一种珠芽魔芋组培微球茎催芽育苗方法 | |
CN112352678A (zh) | 一种湿地松种苗的组织培养快繁技术 | |
CN112806262A (zh) | 一种盐桦组织培养高效繁殖方法 | |
CN105900564A (zh) | 一种促使珍稀濒危植物甜菜树种子高效萌发的方法 | |
CN111448985A (zh) | 一种细梗蔷薇的组织培养方法 | |
CN116391618B (zh) | 一种药用苦木组培快繁方法 | |
CN114027198B (zh) | 一种芦荟锦的繁育与栽培方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210416 |
|
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |