CN114027198B - 一种芦荟锦的繁育与栽培方法 - Google Patents

一种芦荟锦的繁育与栽培方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种芦荟锦的繁育与栽培方法，具体包括以下步：(1)芦荟锦外植体的制备；(2)芦荟锦外植体组织培养；(3)芦荟锦组培苗移栽；(4)组培苗移栽后的管理。本发明通过采取从芦荟锦茎尖生长点处进行纵剖，将其一分为二，两边同时保留一部分生长点，随后进行诱导、增殖，使用不加细胞分裂素的增殖培养基，提高芦荟锦的出锦率，从而提升芦荟锦繁殖效率，因此可在短时间内生产出大量质量稳定的芦荟锦组培苗，满足市场的需要。

Description

一种芦荟锦的繁育与栽培方法
技术领域
本发明涉及植物组织培养技术领域，更具体的说是涉及一种芦荟锦的繁育与栽培方法。
背景技术
芦荟(学名：Aloe vera(Haw.)Berg)，是百合科的多年生常绿肉质草本植物，原产于非洲东南等热带地区，叶簇生、叶片大而肥厚。长久以来，芦荟的食用、观赏、药用等多种价值都为人们所重视，目前美国、日本、韩国为世界上芦荟的主要生产国，现已生产规模化、集约化、系列化。近几年，我国也对开始重视并支持芦荟产业发展，已有不少芦荟产品相继问世。
斑锦是一种嵌合体，即不同的细胞杂合在一个植物体上，包括锦细胞(异常细胞)和绿色细胞(正常细胞)的嵌合。因此芦荟锦叶片有黄色或白色斑纹，斑纹形状因植株而异，或呈丝状，或呈块状。出锦芦荟根据锦化程度差异形成不同品种，颜色丰富，品种稀少，更具观赏价值，因此价格也更加昂贵。通过分株、播种和叶插等常规的繁殖方法，不仅繁殖速度很慢，还容易使芦荟锦失锦(即叶片恢复回绿色)，使其观赏价值及经济价值大大降低，无法满足芦荟锦资源对种苗的要求以及其种植业的发展。因此，如何提供一种稳定的芦荟锦快速繁殖方法是本领域技术人员亟需解决的问题。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种芦荟锦的繁育与栽培方法，通过对芦荟锦的快速繁殖技术进行研究，以期建立出锦率高、成本低、效益高的芦荟锦组织培养技术体系，在短时间内繁殖大量规格一致、种性稳定的种苗，为芦荟锦的规模化生产奠定基础。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种芦荟锦的繁育与栽培方法，具体包括以下步骤：
(1)芦荟锦外植体的制备
选择年轻健壮的芦荟锦植株，通风晾晒，剥掉芦荟锦植株的外层干枯叶片，切除根部，用自来水冲洗干净，经过消毒液处理和无菌水清洗后，得到芦荟锦外植体；
(2)芦荟锦外植体组织培养
采用纵剖方式将芦荟锦外植体茎尖的生长点一切为二，再接种于诱导培养基中诱导培养25-30d；
将经过诱导的带锦侧芽切下，接种于增殖培养基中进行培养，待其长至高度3cm以上，采用纵剖方式将其茎尖生长点一切为二，再接种于增殖培养基中增殖培养25-30d，重复循环，直至得到足够数量的侧芽；
待增殖的侧芽高度2.5cm以上，将其接种至生根培养基中生根培养25-30d，得到芦荟锦组培苗；
(3)芦荟锦组培苗移栽
先将芦荟锦组培苗进行炼苗晾苗，然后进行移栽；
(4)组培苗移栽后的管理
包括光照管理、温度控制、湿度控制和水肥管理，即得芦荟锦种苗。
进一步，上述步骤(1)中，通风晾晒的时间为10-15天。
采用上述进一步技术方案的有益效果在于，通过通风晾晒，能够降低芦荟锦外植体的含水量，从而防止组织培养过程中出现叶片腐烂的现象。
进一步，上述步骤(1)中，消毒液处理的操作步骤具体为：在超净工作台上，先用质量浓度为75％的酒精浸泡15-30s，再放入质量浓度为0.1％的升汞溶液中消毒8min；无菌水清洗的操作步骤具体为：先用无菌水冲洗4-6次，再用无菌滤纸滤干水分。
采用上述进一步技术方案的有益效果在于，通过消毒液处理和无菌水清洗，有利于提高芦荟锦外植体的诱导成功率。
进一步，上述步骤(2)中，诱导培养基的配方组成为：MS+NAA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.0g/L，pH＝5.8；增殖培养基的配方组成为：MS+NAA1.0mg/L+蔗糖40g/L+琼脂6.0g/L，pH＝5.8；生根培养基的配方为：1/2MS培养基+IBA0.5mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖20g/L+活性炭1.0g/L+琼脂6.0g/L，pH＝5.8；诱导培养、增殖培养和生根培养过程中的培养温度均为26-28℃，光照强度均为1800-2100lx。
采用上述进一步技术方案的有益效果在于，本发明以MS培养基为基本培养基，通过多次调整，最终得到以MS培养基为基础，去除细胞分裂素的诱导、增殖培养基，更适合芦荟锦的生长繁殖及出锦，并且芦荟锦组培苗长势良好。
进一步，步骤(3)芦荟锦组培苗移栽的操作步骤具体为：移栽于次年3月进行，将具有3条根以上、4cm以上高度、带有4-5片叶、生长健壮的生根苗在温室大棚炼苗15天后，将炼好后的苗取出，用水将根部残留的培养基冲洗干净，用内吸性的杀菌剂噁霉灵浸泡1min，置于阴凉通风处晾苗5d后，移栽到基质为进口草炭:赤玉土＝3:1(体积比)的基质中，在温室大棚中培养。更进一步，噁霉灵的质量浓度为30％，稀释至1000倍。
采用上述进一步技术方案的有益效果在于，芦荟锦组培苗移栽时，基质的良好透气性和保水性是移栽成活率的关键；同时，在移栽后的管理过程中，要适当控制水分，加强光照，加强棚内通风条件，以降低芦荟锦组培苗在基质中出现烂苗及猝倒的几率。芦荟锦组培苗获得较高的移栽成活率，是建立其生产体系的重要环节，从而为芦荟锦种苗的进一步商业化生产奠定良好的基础。
经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
本发明通过多次纵剖，每经历一个培养周期，侧芽的数目都以对数方式增加，可以提高芦荟锦的增殖系数，从而提升繁殖效率，同时芦荟锦组培苗失锦率较低，因此可在短时间内生产出大量质量稳定的芦荟锦组培苗，满足市场的需要。
附图说明
图1为本发明实施例2中芦荟锦培育过程的纵剖图(沿芦荟锦茎尖生长点剖开，一切为二)；
图2为本发明实施例2中芦荟锦培育过程的诱导图；
图3为本发明实施例2中芦荟锦培育过程的增殖图；
图4为本发明实施例2中芦荟锦培育过程的生根图；
图5为本发明实施例2中芦荟锦培育过程的移栽图。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：芦荟锦组织培养基的制备过程
本实施例1提供了一种芦荟锦组织培养基，由诱导培养基、增殖培养基和生根培养基组成，分别在不同的组织培养阶段使用；诱导培养基的配方组成为：MS+NAA 0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.0g/L，pH＝5.8；
增殖培养基的配方组成为：MS+NAA 1.0mg/L+蔗糖40g/L+琼脂6.0g/L，pH＝5.8；
生根培养基的配方组成为：1/2MS培养基+IBA 0.5mg/L+NAA 0.5mg/L+蔗糖20g/L+活性炭1.0g/L+琼脂6.0g/L，pH＝5.8。
实施例2：利用纵剖方式进行芦荟锦组培苗快速繁育的方法
(1)芦荟锦外植体的制备
选择年轻健壮的芦荟锦植株，通风晾晒15天后，先剥掉芦荟锦植株的外层干枯叶片，切除根部，用自来水冲洗干净；然后在超净工作台上，先用质量浓度为75％的酒精浸泡30s，再放入质量浓度为0.1％的升汞溶液中消毒8min；最后用无菌水冲洗6次，用无菌滤纸滤干水分，即得到芦荟锦外植体；
(2)芦荟锦外植体组织培养
采用纵剖方式沿芦荟锦外植体茎尖的生长点一切为二，(如图1所示)，再接种于实施例1的诱导培养基中(每瓶只接种一个材料，防止交叉污染)，诱导培养30d(如图2所示)；
取诱导的侧芽，接种于增殖培养基中进行培养，待其长至高度3cm以上，茎尖的生长点一切为二，再接种于实施例1的增殖培养基中增殖培养30天(，重复循环增殖培养，直至得到足够数量的侧芽(如图3所示)；得到的侧芽全部培养至高度2.5cm以上。
将增殖获得的高度2.5cm以上侧芽全部接种至实施例1生根培养基中培养30d，得到芦荟锦组培苗(如图4所示)；
其中，诱导培养、增殖培养和生根培养过程中的培养温度为28℃，光照强度为2100lx；
(3)芦荟锦组培苗移栽
移栽于次年3月进行，将具有3条根以上、4cm以上高度、带有4-5片叶、生长健壮的生根苗在温室大棚炼苗15天后(目的：主要是让芦荟锦组培苗逐渐适应外界环境，增强抗性，从而提高移栽成活率)，将炼好后的苗取出，用水将根部残留的培养基冲洗干净，用内吸性的杀菌剂30％噁霉灵可湿性粉剂1000倍稀释液浸泡1min，置于阴凉通风处晾苗5d后，移栽到基质为进口草炭:赤玉土＝3:1(体积比)的基质中，在温室大棚中培养(如图5所示)；
(4)组培苗移栽后的管理
(4.1)光照管理
芦荟锦生长发育过程中，要确保光照时间充足，否则会徒长；但光照强度过高也会影响其生长，甚至因灼伤死亡；春秋两个季节的光照强度和光照时长最适合芦荟锦的生长，无需采取特殊措施；夏季阳光强烈且日照时间长，因此夏季需要适当遮阳，可以采用厚度适宜的遮阳网进行遮阳，避免因暴晒使叶片失水卷曲，影响芦荟锦的生长；
(4.2)温度控制
芦荟锦比较喜光耐热，养殖环境的最佳温度在15-30℃之间，春秋季节温度适宜，适合芦荟锦生长，因此无需特别处理，在大棚中正常种植即可；但夏季棚温容易超过30℃，会引起芦荟锦腐烂枯萎，需要采取遮阳措施及通风换气进行降温；当冬季温度降低至5℃及以下时，芦荟锦就停止生长，容易产生冻害，造成植株死亡，因此冬季温度控制以闷棚为主，可以根据地区实际情况调整大棚的高度，确保冬季养殖环境仍具有较高的温度，使芦荟锦正常生长；
(4.3)湿度控制
春秋季是芦荟锦生长期，湿度过高或过低都不利于芦荟锦的生长，通常情况下控制在70-85％，可适当勤浇、多浇；冬季和夏季芦荟锦可能会进入休眠状态，湿度过高，容易发生病虫害、冻害、烂苗，因此要控制浇水，浇水后要及时通风透气，以降低大棚内相对湿度，尽量把湿度控制在70％以下；
(4.4)水肥管理
珍珠芦荟的肥料施加主要依据是种植的时间和季节；首次种植时应在土壤中适当基肥，每亩施加约1500kg农家肥，适当兑水施加；种植两个月后植株稳定生长时应该适当追肥，可根据实际情况施加，一般而言每亩施加农家肥2000kg、尿素5kg、过磷酸钙25kg，兑水混合施加；一般一年施加3-4次，主要集中在生长期的春秋季，在生长缓慢期的冬夏季可适当减少施加量；施肥前一般进行除草，可以保证更多肥料被植株吸收，另一方面在除草后土壤疏松可以促进根系吸收。
实施例3：6-BA对芦荟锦增殖的影响
将经过诱导的芦荟锦纵剖后，分别接种至添加MS培养基+NAA 1.0mg/L+蔗糖40g/L+琼脂6.0g/L和MS培养基+6-BA 1.0mg/L+NAA 1.0mg/L+蔗糖40g/L+琼脂6.0g/L的增殖培养基中(pH均为5.8)，每次每种培养基均接种50个材料，试验重复3次。
分别统计并计算其出芽数、增殖倍数、出锦数、出锦率和芽生长势。
结果如表1所示。
表1 6-BA对芦荟锦增殖试验结果
Figure BDA0003410902820000071
注：增殖倍数＝出芽数/材料数；出锦率＝出锦数/出芽数；列表中方差分析结果用字母表示，不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)，不同小写字母表示差异显著。
由表1可知，6-BA对芦荟锦芽增殖的影响较大，6-BA(细胞分裂素)促进细胞分裂和非分化组织分化，在添加6-BA的增殖培养基中，虽然芦荟锦增值系数较高，但侧芽出现畸形、失锦的情况，基部会有愈伤组织形成；与较添加6-BA的培养基相比，在不添加6-BA的培养基中增殖，芦荟锦增值系数低一些，但出锦率有较高的提升，长出的侧芽畸形、失锦现象得到缓解，大大提升了芦荟锦的繁殖效率。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (7)

1.一种芦荟锦的繁育与栽培方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
(1)芦荟锦外植体的制备
选择年轻健壮的芦荟锦植株，通风晾晒，剥掉芦荟锦植株的外层干枯叶片，切除根部，用自来水冲洗干净，经过消毒液处理和无菌水清洗后，得到芦荟锦外植体；
(2)芦荟锦外植体组织培养
采用纵剖方式将芦荟锦外植体茎尖的生长点一切为二，再接种于诱导培养基中诱导培养25-30d；所述诱导培养基的配方组成为：MS+NAA 0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.0g/L，pH＝5.8；
将经过诱导的带锦侧芽切下，接种于增殖培养基中进行培养，待其长至高度3cm以上，采用纵剖方式将其茎尖生长点一切为二，接种于增殖培养基中增殖培养25-30d，重复循环，直至得到足够数量的侧芽；所述增殖培养基的配方组成为：MS+NAA 1.0mg/L+蔗糖40g/L+琼脂6.0g/L，pH＝5.8；
待增殖的侧芽培养至高度2.5cm以上，将其接种至生根培养基中生根培养25-30d，得到芦荟锦组培苗；所述生根培养基的配方为：1/2MS培养基+IBA 0.5mg/L+NAA 0.5mg/L+蔗糖20g/L+活性炭1.0g/L+琼脂6.0g/L，pH＝5.8；
(3)芦荟锦组培苗移栽
先将芦荟锦组培苗进行炼苗晾苗，然后进行移栽；
(4)组培苗移栽后的管理
包括光照管理、温度控制、湿度控制和水肥管理，即得芦荟锦种苗。
2.根据权利要求1所述的一种芦荟锦的繁育与栽培方法，其特征在于，步骤(1)中，所述通风晾晒的时间为10-15天。
3.根据权利要求1所述的一种芦荟锦的繁育与栽培方法，其特征在于，步骤(1)中，所述消毒液处理的操作步骤具体为：在超净工作台上，先用质量浓度为75％的乙醇浸泡15-30s，再放入质量浓度为0.1％的升汞溶液中消毒8min。
4.根据权利要求1所述的一种芦荟锦的繁育与栽培方法，其特征在于，步骤(1)中，所述无菌水清洗的操作步骤具体为：先用无菌水冲洗4-6次，再用无菌滤纸滤干水分。
5.根据权利要求1所述的一种芦荟锦的繁育与栽培方法，其特征在于，步骤(2)中，诱导培养、增殖培养和生根培养过程中的培养温度均为26-28℃，光照强度均为1800-2100lx。
6.根据权利要求1所述的一种芦荟锦的繁育与栽培方法，其特征在于，步骤(3)芦荟锦组培苗移栽的操作步骤具体为：
移栽于次年3月进行，将具有3条以上根、4cm以上高度、带有4-5片叶、生长健壮的生根苗在温室大棚炼苗15天后，将炼好后的苗取出，用水将根部残留的培养基冲洗干净，用内吸性的杀菌剂噁霉灵浸泡1min，置于阴凉通风处晾苗5d后，移栽到进口草炭:赤玉土体积比3:1的基质中，在温室大棚中培养。
7.根据权利要求6所述的一种芦荟锦的繁育与栽培方法，其特征在于，所述噁霉灵的质量浓度为30％，稀释至1000倍。
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