CN112587532A - PARP抑制剂Rucaparib在制备抗鱼类弹状病毒产品中的应用 - Google Patents

PARP抑制剂Rucaparib在制备抗鱼类弹状病毒产品中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN112587532A
CN112587532A CN202110011554.1A CN202110011554A CN112587532A CN 112587532 A CN112587532 A CN 112587532A CN 202110011554 A CN202110011554 A CN 202110011554A CN 112587532 A CN112587532 A CN 112587532A
Authority
CN
China
Prior art keywords
parp inhibitor
rucaparib
fish
pharmaceutically acceptable
fish rhabdovirus
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202110011554.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN112587532B (zh
Inventor
赵景壮
卢彤岩
徐黎明
任广明
邵轶智
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Heilongjiang River Fisheries Research Institute of Chinese Academy of Fishery Sciences
Original Assignee
Heilongjiang River Fisheries Research Institute of Chinese Academy of Fishery Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Heilongjiang River Fisheries Research Institute of Chinese Academy of Fishery Sciences filed Critical Heilongjiang River Fisheries Research Institute of Chinese Academy of Fishery Sciences
Priority to CN202110011554.1A priority Critical patent/CN112587532B/zh
Publication of CN112587532A publication Critical patent/CN112587532A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN112587532B publication Critical patent/CN112587532B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明公开了PARP抑制剂Rucaparib在制备抗鱼类弹状病毒产品中的应用。本发明筛选了多种PARP抑制剂，结果发现PARP抑制剂Rucaparib能够抑制IHNV、VHSV以及SVCV在细胞中病毒的mRNA复制，同时降低IHNV、VHSV以及SVCV病毒的滴度(TCID50)；并且Rucaparib对IHNV、VHSV以及SVCV的抑制作用呈现出剂量依赖关系。PARP抑制剂Rucaparib有望成为抗鱼类弹状病毒的新型药物。

Description

PARP抑制剂Rucaparib在制备抗鱼类弹状病毒产品中的应用
技术领域
本发明涉及水产养殖领域，特别涉及PARP抑制剂Rucaparib在制备抗鱼类弹状病毒产品中的应用。
背景技术
2010年以来，世界水产养殖业产量增长迅速，但是传染性疾病的传播严重影响了水产养殖的健康持续发展，治疗及预防性药物的研究和应用成为了水产养殖产业的迫切需求。
传染性造血器官坏死病(infectious hematopoietic necrosis，IHN)是目前危害世界鲑鳟鱼养殖的主要疾病之一，为由传染性造血器官坏死病毒(infectioushematopoietic necrosis virus，IHNV)引起的一种严重威胁鲑、鳟鱼的急性传染病，根据鱼种、鱼龄、病毒菌株及饲养环境的不同通常能够造成80％-100％的死亡率。
病毒性出血性败血症(Viral haemorrhagic septicaemia，VHS)为由病毒性出血性败血症病毒(Viral haemorrhagic septicaemia virus，VHSV)引起的一种以暴发性流行为主的传染性疾病。VHSV感染的宿主范围非常广，除了能够感染虹鳟并引起爆发性疾病外，还能够感染大菱鲆、牙鲆以及多种野生淡水鱼和海水鱼，死亡率高达90-100％。
鲤春病毒血症(Spring viremia of carp，SVC)是由鲤春病毒血症病毒(Springviremia of carp virus，SVCV)引起的鱼类传染性疾病。SVCV不仅能够感染鲤鱼，很多鲤科鱼类都能被SVCV感染，其中包括：金鱼、锦鲤、白鲢、鲫、鳙、草鱼、丁鲷、雅罗鱼。SVC是一种急性、高致死性的鱼类疾病，对幼鱼的感染致死率高达90％。
IHNV、VHSV和SVCV均属于弹状病毒科(Rhabdoviridae)病毒。上述三种疾病目前均被世界动物卫生组织(OIE)列为必须申报的动物疾病，同时也被我国列为必须申报的疫病，它们的暴发严重制约了我国鱼类养殖业的健康可持续发展。我国针对IHNV、VHSV和SVCV的疫苗研究已经进行了多年，但目前仍未研究出一种有效商业疫苗。目前的候选疫苗剂型主要包括灭活疫苗、弱毒活疫苗和核酸疫苗等。虽然灭活疫苗和弱毒疫苗在IHNV、VHSV和SVCV的预防中起到了很好的效果，但是在其使用过程中很容易在养殖环境中造成残留，并有可能导致病原抗性及病毒突变株的形成。相比之下核酸疫苗相对较为安全，但是目前应用的核酸疫苗都是以CMV为启动子进行目的抗原基因的表达，由于CMV启动子为人源病原的启动子，因此核酸疫苗存在着危及人类安全的可能，严重限制了其应用。因此如果能够研发出针对上述病毒的新型抗病毒药物，将极大地降低我国水产养殖产业的经济损失，保证鱼类养殖业的健康可持续发展。
发明内容
本发明的目的是提供PARP抑制剂Rucaparib在制备抗鱼类弹状病毒产品中的应用。
第一方面，本发明要求保护PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐或以PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐为活性成分的物质在制备用于抗鱼类弹状病毒的产品中的应用。
第二方面，本发明要求保护PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐或以PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐为活性成分的物质在制备用于抑制鱼类弹状病毒复制的产品中的应用。
第三方面，本发明要求保护PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐或以PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐为活性成分的物质在制备用于抑制鱼类弹状病毒在细胞内mRNA复制的产品中的应用。
第四方面，本发明要求保护PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐或以PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐为活性成分的物质在制备用于降低细胞内鱼类弹状病毒滴度的产品中的应用。
第五方面，本发明要求保护PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐或以PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐为活性成分的物质在制备用于治疗和/或预防由于鱼类弹状病毒感染所致疾病的产品中的应用。
在上述各方面中，所述鱼类弹状病毒可为传染性造血器官坏死病毒(infectioushematopoietic necrosis virus，IHNV)、病毒性出血性败血症病毒(Viral haemorrhagicsepticaemia virus，VHSV)和/或鲤春病毒血症病毒(Spring viremia of carp virus，SVCV)。
相应的，由IHNV感染所致疾病为传染性造血器官坏死病(infectioushematopoietic necrosis，IHN)；由VHSV感染所致疾病为病毒性出血性败血症(Viralhaemorrhagic septicaemia，VHS)；由SVCV感染所致疾病为鲤春病毒血症(Spring viremiaof carp，SVC)。
在上述各方面中，所述细胞为鱼类细胞。
进一步地，所述鱼类细胞具体可为鲤鱼上皮细胞(EPC细胞)。
第六方面，本发明要求保护一种药物。
本发明要求保护的药物具有如下任一功能的药物：抗鱼类弹状病毒、抑制鱼类弹状病毒复制、抑制鱼类弹状病毒在细胞内mRNA复制、降低细胞内鱼类弹状病毒滴度、治疗和/或预防由于鱼类弹状病毒感染所致疾病。
所述药物由若干个单位剂量的PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐或以PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐为活性成分的物质组成；所述单位剂量为能够起到如下作用，且不会引起毒副作用的量：抗鱼类弹状病毒、抑制鱼类弹状病毒复制、抑制鱼类弹状病毒在细胞内mRNA复制、降低细胞内鱼类弹状病毒滴度、治疗和/或预防由于鱼类弹状病毒感染所致疾病。
在本发明的具体实施方式中，所述单位剂量的PARP抑制剂Rucaparib的量为将其置于鲤鱼上皮细胞(EPC细胞)培养体系中后其终浓度为5μM的量。
在本发明的具体实施方式中，所述传染性造血器官坏死病毒为Sn1203株；所述病毒性出血性败血症病毒毒株为ATCC VR1387所示毒株；所述鲤春病毒血症病毒为Shlj1株。
在本发明的具体实施方式中，所述PARP抑制剂Rucaparib的药学上可接受的盐具体为PARP抑制剂Rucaparib的磷酸盐。当然也可以为磷酸盐形式外PARP抑制剂Rucaparib的药学上可接受的其他盐。
在本发明中，所述PARP抑制剂Rucaparib的磷酸盐具体为式I所示化合物；
Figure BDA0002885364080000031
本发明筛选了多种PARP抑制剂，结果发现PARP抑制剂Rucaparib能够抑制IHNV、VHSV以及SVCV在细胞中病毒的mRNA复制，同时降低IHNV、VHSV以及SVCV病毒的滴度(TCID50)；并且Rucaparib对IHNV、VHSV以及SVCV的抑制作用呈现出剂量依赖关系。以上结果表明，PARP抑制剂Rucaparib有望成为抗鱼类弹状病毒的新型药物。
附图说明
图1为不同PARP小分子抑制剂细胞毒性检测结果。对照组为未经任何药物处理的EPC细胞。
图2为不同PARP小分子抑制剂对鱼类弹状病毒在细胞内mRNA复制的影响。对照组为仅加入病毒不做任何药物处理。
图3为不同PARP小分子抑制剂对鱼类弹状病毒滴度(TCID50)的影响。对照组为仅加入病毒不做任何药物处理。
图4为不同浓度Rucaparib对鱼类弹状病毒在细胞内mRNA复制的影响。对照组为仅加入病毒不做任何药物处理。
图5为不同浓度Rucaparib对鱼类弹状病毒滴度(TCID50)的影响。对照组为仅加入病毒不做任何药物处理。
各图中，*表示在P<0.05水平上与对照组相比具有显著差异。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1、PARP抑制剂Rucaparib在抗鱼类弹状病毒中的应用
1、实验材料
1.1细胞和病毒
EPC细胞ATCCCRL-2872；传染性造血器官坏死病毒Sn1203株(简称IHNV-Sn1203株)(Genbank登录号：KC660147.1)(参考文献“赵景壮,徐黎明,任广明,等.传染性造血器官坏死病毒Sn1203株全基因组序列及系统进化分析[J].水产学杂志,2020,v.33(02):4-12.”)；病毒性出血性败血症病毒株(简称VHSV-1387)(ATCC VR1387)；鲤春病毒血症病毒Shlj1株(简称SVCV-Shlj1)(参考文献“纪锋.鲤春病毒血症病毒Shlj1株糖蛋白空间结构及其B细胞抗原表位的预测[J].大连海洋大学学报，2017,32(4):440-446.”)。
1.2试剂
细胞培养液MEM(C11095500BT)、胰蛋白酶(25200072)、胎牛血清(10099141C)、Penicillin-Streptomycin溶液(15140122)为Gibco生物公司产品；One Step SYBRPrimeScript PLUS RT–PCR kit(RR096A)为TaKaRa公司产品；Trizol试剂(10296028)为Invitrogen公司产品；CellTiter 96Aqueous One Solution Cell Proliferation Assay试剂盒(G3582)为Promega公司产品。
1.3研究中所用PARP小分子抑制剂列表
表1、本发明PARP小分子抑制剂信息
Figure BDA0002885364080000041
Figure BDA0002885364080000051
1.4PARP小分子抑制剂细胞毒性检测
取生长状态良好的EPC细胞，加入胰蛋白酶消化处理后，利用含有10％(体积百分含量)胎牛血清、1％(体积百分含量)Penicillin-Streptomycin的MEM培养基接种于96孔细胞培养板中，每孔细胞为6×104个。将96孔板置于25℃培养箱中培养24h后，分别加入含有PARP小分子抑制剂的新鲜培养基，不同PARP小分子抑制剂设置4个浓度梯度，分别为1μM、5μM、10μM、20μM(为在培养体系中的终浓度)。25℃，0.5％CO2条件下培养72h后，按照CellTiter 96Aqueous One Solution Cell Proliferation Assay试剂盒说明书推荐步骤，进行PARP小分子抑制剂的细胞毒性检测。
1.5不同PARP小分子抑制剂抗鱼类弹状病毒(IHNV、VHSV、SVCV)研究
1.5.1不同PARP小分子抑制剂对鱼类弹状病毒(IHNV、VHSV、SVCV)在细胞内mRNA复制的影响
取生长状态良好的EPC细胞，加入胰蛋白酶消化处理后，利用含有10％(体积百分含量)胎牛血清、1％(体积百分含量)Penicillin-Streptomycin的MEM培养基接种于6孔细胞培养板中，每孔细胞为2×106个。将6孔板置于25℃培养箱中培养24h后弃去培养液，分别加入IHNV-Sn1203病毒株(MOI＝0.1)、VHSV-1387病毒株(MOI＝0.1)、SVCV-Shlj1病毒株(MOI＝0.1)。1h后更换为含有PARP小分子抑制剂的含有2％(体积百分含量)胎牛血清的新鲜培养基(小分子抑制剂终浓度为5μM)。15℃，0.5％CO2条件下培养48h后弃去培养液，按照TRIzol试剂说明书提取病毒RNA，用于病毒mRNA复制水平检测。
以提取的病毒RNA为模板，按照One Step SYBR PrimeScript PLUS RT-PCR Kit说明书对IHNV、VHSV、SVCV在EPC细胞内的mRNA复制情况进行检测。
采用的IHNV检测引物为：
RT-IHNV F：5′-GCTCACCAAGGCTGTTTAT-3′；
RT-IHNV R：5′-CATCAGTCTTACAATGCGTCTA-3′。
采用的VHSV检测引物为：
RT-VHSV F：5′-TCACCCAAGCCGCTAACA -3′；
RT-VHSV R：5′-ATGGACCTCGCCTCCGACACCT-3′。
采用的SVCV检测引物为：
RT-SVCV F：5′-CGATTATCCTTCCACCTT-3′；
RT-SVCV R：5′-CTCCCTTTCTCCTTTCAG-3′。
内参基因为β-actin基因，检测引物为：
RT-actin F：5′-GCCGGCCGCGACCTCACAGACTAC-3′；
RT-actin R：5′-CGGCCGTGGTGGTGAAGCTGTAAC-3′。
1.5.2不同PARP小分子抑制剂对鱼类弹状病毒(IHNV、VHSV、SVCV)病毒滴度(TCID50)的影响
取生长状态良好的EPC细胞，加入胰蛋白酶消化处理后，利用含有10％(体积百分含量)胎牛血清、1％(体积百分含量)Penicillin-Streptomycin的MEM培养基接种于6孔细胞培养板中，每孔细胞为2×106个。将6孔板置于25℃培养箱中培养24h后弃去培养液，分别加入IHNV-Sn1203病毒株(MOI＝0.1)、VHSV-1387病毒株(MOI＝0.1)、SVCV-Shlj1病毒株(MOI＝0.1)。1h后更换为含有PARP小分子抑制剂(终浓度为5μM)的含有2％(体积百分含量)胎牛血清的新鲜培养基(细胞维持液)。15℃，0.5％CO2条件下培养48h后吸取细胞培养上清液，用于病毒滴度(TCID50)的检测。
取生长状态良好的EPC细胞，消化后按照6×104个/孔接种于96孔板，25℃培养箱中培养24h后，接种不同稀释度的培养上清液，每个稀释度8孔，每孔100μL同时设立空白对照组，15℃培养，观察7天后，利用Reed-Muench法计算TCID50。
1.6不同浓度Rucaparib抗鱼类弹状病毒(IHNV、VHSV、SVCV)研究
1.6.1不同浓度Rucaparib对鱼类弹状病毒(IHNV、VHSV、SVCV)在细胞内mRNA复制的影响
细胞培养及病毒接种方法同1.5.1，区别在于PARP小分子抑制剂Rucaparib的终浓度分别为0.5μM、1μM、5μM。15℃，0.5％CO2条件下培养48h后弃去培养液，按照TRIzol试剂说明书提取病毒RNA，用于检测Rucaparib对鱼类弹状病毒mRNA复制水平的影响。
1.6.2不同浓度Rucaparib对鱼类弹状病毒(IHNV、VHSV、SVCV)病毒滴度(TCID50)的影响
细胞培养及病毒接种方法同1.5.2，区别在于PARP小分子抑制剂Rucaparib的终浓度分别为0.5μM、1μM、5μM。15℃，0.5％CO2条件下培养48h后吸取细胞培养上清液，用于检测Rucaparib对鱼类弹状病毒病毒滴度(TCID50)的影响。
2、结果
2.1 PARP小分子抑制剂细胞毒性检测结果
为了确定25种不同PARP小分子抑制剂对细胞的毒性，本发明分别对25种PARP小分子抑制剂进行了细胞毒性检测，每种PARP小分子抑制剂设有1μM、5μM、10μM、20μM共4个浓度梯度，并于处理细胞后的72h进行了细胞增殖情况检测。结果显示(图1)，25种PARP小分子抑制剂在浓度20μM时均对EPC细胞的增殖有明显的抑制作用；在10μM时，3-Aminobenzamide、E7449、G007-LK、JW55、NMS-P118、Veliparib、BGP-15、INO-1001、Benzamide、Picolinamide这10种药物对细胞增殖无明显抑制作用，而A-966492、Niraparib tosylate、AZD-2461、Rucaparib、NVP-TNKS656、XAV-939、Talazoparib、MN-64、Olaparib、UPF 1069、Iniparib、AG-14361、ME0328、1,5-Isoquinolinediol、NU1025这15种药物能对细胞增殖有明显抑制作用；在5μM和1μM时，25种药物对EPC细胞的增殖均无明显影响。因此后续25种PARP小分子抑制剂抗鱼类弹状病毒研究均采用5μM进行。
2.2不同PARP小分子抑制剂对鱼类弹状病毒(IHNV、VHSV、SVCV)在细胞内复制的影响
2.2.1不同PARP小分子抑制剂对鱼类弹状病毒(IHNV、VHSV、SVCV)在细胞内mRNA复制的影响
为了研究25种不同PARP小分子抑制剂对鱼类弹状病毒(IHNV、VHSV、SVCV)在细胞内mRNA复制的影响，本发明利用MOI＝0.1的IHNV-Sn1203病毒株、VHSV-1387病毒株、SVCV-Shlj1病毒株分别感染EPC细胞，在病毒感染1h后利用25种PARP小分子抑制剂(终浓度为5μM)分别处理，并于48h提取病毒RNA进行mRNA复制水平检测。结果表明(图2)，25种PARP小分子抑制剂中仅有Rucaparib对IHNV在细胞内的mRNA复制水平有明显的抑制作用，与对照组(control)相比mRNA复制水平降低了约20.4倍；在对VHSV的研究中发现，与对照组(control)相比仅有MN-64和Rucaparib两种药物有抑制作用，但MN-64(mRNA复制水平降低约1.5倍)的抑制作用明显不如Rucaparib(mRNA复制水平降低约25.3倍)；在对SVCV的研究中发现，与对照组(control)相比仅有Niraparib tosylate、MN-64和Rucaparib三种药物有抑制作用，但Niraparib tosylate(mRNA复制水平降低约1.4倍)和MN-64(mRNA复制水平降低约1.5倍)的抑制作用明显不如Rucaparib(mRNA复制水平降低约29.6倍)。上述结果表明，25种PARP小分子抑制剂中仅有Rucaparib能够显著抑制鱼类弹状病毒(IHNV、VHSV、SVCV)在细胞内的mRNA复制。
2.2.2不同PARP小分子抑制剂对鱼类弹状病毒(IHNV、VHSV、SVCV)病毒滴度(TCID50)的影响
为了研究25种不同PARP小分子抑制剂对鱼类弹状病毒(IHNV、VHSV、SVCV)滴度的影响，本发明利用MOI＝0.1的IHNV-Sn1203病毒株、VHSV-1387病毒株、SVCV-Shlj1病毒株分别感染EPC细胞，在病毒感染1h后利用25种PARP小分子抑制剂(终浓度为5μM)分别处理，并于48h后吸取细胞培养上清液，进行病毒滴度(TCID50)的检测。结果表明(图3)，25种PARP小分子抑制剂中仅有Rucaparib对三种鱼类弹状病毒IHNV、VHSV、SVCV的病毒滴度有明显的抑制作用，在IHNV中对照组为106.41TCID50/ml，Rucaparib处理组为105.44TCID50/ml，在VHSV中对照组为107.32TCID50/ml，Rucaparib处理组为106.15TCID50/ml，在SVCV中对照组为107.52TCID50/ml，Rucaparib处理组为106.52TCID50/ml。
2.3不同浓度Rucaparib抗鱼类弹状病毒(IHNV、VHSV、SVCV)研究
2.3.1不同浓度Rucaparib对鱼类弹状病毒(IHNV、VHSV、SVCV)在细胞内mRNA复制的影响
为了研究不同浓度的Rucaparib对鱼类弹状病毒(IHNV、VHSV、SVCV)在细胞内mRNA复制的影响，本发明利用MOI＝0.1的IHNV-Sn1203病毒株、VHSV-1387病毒株、SVCV-Shlj1病毒株分别感染EPC细胞，在病毒感染1h后分别利用0.5μM、1μM、5μM 3种浓度的Rucaparib处理细胞，并于48h提取病毒RNA进行mRNA复制水平检测。结果表明(图4)，与对照组(control)相比，5μM Rucaparib处理后IHNV、VHSV、SVCV在细胞内的mRNA复制水平分别降低了约20.5倍、30.5倍和30.2倍，1μM Rucaparib处理后IHNV、VHSV、SVCV在细胞内的mRNA复制水平降低了约4.3倍、4.9倍和3.3倍，0.5μM Rucaparib处理后IHNV、VHSV、SVCV在细胞内的mRNA复制水平降低了约1.8倍、2.1倍和1.9倍。上述结果表明，Rucaparib对鱼类弹状病毒(IHNV、VHSV、SVCV)在细胞内的mRNA复制具有明显的抑制作用，并在一定范围内呈现出剂量依赖性。
2.3.2不同浓度Rucaparib对鱼类弹状病毒(IHNV、VHSV、SVCV)病毒滴度(TCID50)的影响
为了研究不同浓度的Rucaparib对鱼类弹状病毒(IHNV、VHSV、SVCV)在细胞内mRNA复制的影响，本发明利用MOI＝0.1的IHNV-Sn1203病毒株、VHSV-1387病毒株、SVCV-Shlj1病毒株分别感染EPC细胞，在病毒感染1h后分别利用0.5μM、1μM、5μM 3种浓度的Rucaparib处理细胞，并于48h后吸取细胞培养上清液，进行病毒滴度(TCID50)的检测。
结果表明(图5)，5μMRucaparib处理后IHNV病毒滴度为106.11TCID50/ml、1μMRucaparib处理后IHNV病毒滴度为106.42TCID50/ml，明显低于对照组(control)(107.11TCID50/ml)，并且存在显著性差异，而0.5μM Rucaparib处理后IHNV病毒滴度为107.17TCID50/ml，与对照组无显著性差异；5μM Rucaparib处理后VHSV病毒滴度为106.46TCID50/ml、1μM Rucaparib处理后VHSV病毒滴度为106.91TCID50/ml，明显低于对照组(control)(107.5TCID50/ml)，并且存在显著性差异，而0.5μM Rucaparib处理后VHSV病毒滴度为107.27TCID50/ml，与对照组无显著性差异；5μM Rucaparib处理后SVCV病毒滴度为106.52TCID50/ml、1μM Rucaparib处理后SVCV病毒滴度为107.01TCID50/ml，明显低于对照组(control)(107.53TCID50/ml)，并且存在显著性差异，而0.5μM Rucaparib处理后SVCV病毒滴度为107.39TCID50/ml，与对照组无显著性差异。上述结果表明，Rucaparib对鱼类弹状病毒(IHNV、VHSV、SVCV)的病毒滴度有明显的抑制作用，并在一定范围内呈现出剂量依赖性。
以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明的宗旨和范围，以及无需进行不必要的实验情况下，可在等同参数、浓度和条件下，在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例，应该理解为，可以对本发明作进一步的改进。总之，按本发明的原理，本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进，包括脱离了本申请中已公开范围，而用本领域已知的常规技术进行的改变。按以下附带的权利要求的范围，可以进行一些基本特征的应用。

Claims (10)

1.PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐或以PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐为活性成分的物质在制备用于抗鱼类弹状病毒的产品中的应用。
2.PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐或以PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐为活性成分的物质在制备用于抑制鱼类弹状病毒复制的产品中的应用。
3.PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐或以PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐为活性成分的物质在制备用于抑制鱼类弹状病毒在细胞内mRNA复制的产品中的应用。
4.PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐或以PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐为活性成分的物质在制备用于降低细胞内鱼类弹状病毒滴度的产品中的应用。
5.PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐或以PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐为活性成分的物质在制备用于治疗和/或预防由于鱼类弹状病毒感染所致疾病的产品中的应用。
6.根据权利要求1-5中任一所述的应用，其特征在于：所述鱼类弹状病毒为传染性造血器官坏死病毒、病毒性出血性败血症病毒和/或鲤春病毒血症病毒。
7.根据权利要求1-6中任一所述的应用，其特征在于：所述细胞为鱼类细胞。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述细胞为鲤鱼上皮细胞。
9.一种具有如下任一功能的药物：抗鱼类弹状病毒、抑制鱼类弹状病毒复制、抑制鱼类弹状病毒在细胞内mRNA复制、降低细胞内鱼类弹状病毒滴度、治疗和/或预防由于鱼类弹状病毒感染所致疾病；
所述药物由若干个单位剂量的PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐或以PARP抑制剂Rucaparib或其衍生物或其药学上可接受的盐为活性成分的物质组成；所述单位剂量为能够起到如下作用，且不会引起毒副作用的量：抗鱼类弹状病毒、抑制鱼类弹状病毒复制、抑制鱼类弹状病毒在细胞内mRNA复制、降低细胞内鱼类弹状病毒滴度、治疗和/或预防由于鱼类弹状病毒感染所致疾病。
10.根据权利要求1-9中任一所述的应用或药物，其特征在于：所述PARP抑制剂Rucaparib的药学上可接受的盐为PARP抑制剂Rucaparib的磷酸盐；
所述PARP抑制剂Rucaparib的磷酸盐为式I所示化合物；
Figure FDA0002885364070000021
CN202110011554.1A 2021-01-06 2021-01-06 PARP抑制剂Rucaparib在制备抗鱼类弹状病毒产品中的应用 Active CN112587532B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110011554.1A CN112587532B (zh) 2021-01-06 2021-01-06 PARP抑制剂Rucaparib在制备抗鱼类弹状病毒产品中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110011554.1A CN112587532B (zh) 2021-01-06 2021-01-06 PARP抑制剂Rucaparib在制备抗鱼类弹状病毒产品中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN112587532A true CN112587532A (zh) 2021-04-02
CN112587532B CN112587532B (zh) 2022-03-15

Family

ID=75207442

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110011554.1A Active CN112587532B (zh) 2021-01-06 2021-01-06 PARP抑制剂Rucaparib在制备抗鱼类弹状病毒产品中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112587532B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115040537A (zh) * 2022-06-22 2022-09-13 中国科学院水生生物研究所 锰离子在防治水生病毒感染中的应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108853030A (zh) * 2018-09-26 2018-11-23 李敏 一种治疗恶性肿瘤的药物制剂及其制备方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108853030A (zh) * 2018-09-26 2018-11-23 李敏 一种治疗恶性肿瘤的药物制剂及其制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SOUICHI NUKUZUMA等: "Suppressive Effect of PARP-1 Inhibitor on JC Virus Replication In Vitro", 《JOURNAL OF MEDICAL VIROLOGY》 *
孙翰昌等: "鲤春病毒血症病毒的致病机理及防治研究进展", 《中国预防兽医医学部》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115040537A (zh) * 2022-06-22 2022-09-13 中国科学院水生生物研究所 锰离子在防治水生病毒感染中的应用
CN115040537B (zh) * 2022-06-22 2023-09-01 中国科学院水生生物研究所 锰离子在防治水生病毒感染中的应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN112587532B (zh) 2022-03-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10973902B2 (en) Tilapia virus and uses thereof
AU2006210753B2 (en) Method and use of interferon compositions for the treatment of avian influenza
CN111035631B (zh) 乳酸钙在制备防治鲤春病毒血症病毒感染的药物中的应用
Pereiro et al. Compilation of antiviral treatments and strategies to fight fish viruses
CN112587532B (zh) PARP抑制剂Rucaparib在制备抗鱼类弹状病毒产品中的应用
CN112569233B (zh) Parp抑制剂pj34在制备抗鱼类弹状病毒产品中的应用
KR102597757B1 (ko) 천연물 유래 화합물 및 이를 유효성분으로 함유하는 항바이러스제
EP2355834B1 (en) Anti-viral protection with viruses containing defective genome segments
KR20180112269A (ko) Vhsv 백신 및 아쥬반트를 함유하는 백신 조성물
JP6132255B2 (ja) クェルセチンを有効成分とする魚類の抗ウィルス組成物
Wang et al. Adamantoyl chloride inhibited replication of the largemouth bass virus via enhanced immunity and inhibition of apoptosis
Efimova et al. Exogenous Bacillus pumilus RNase (binase) suppresses the reproduction of reovirus serotype 1
CN114848616B (zh) 枯茗醛在制备白斑综合症病毒抑制剂方面的应用
CN112294795B (zh) 蒿甲醚在治疗和预防柯萨奇病毒感染中的应用
US11999806B2 (en) Broad-spectrum polypeptide against enterovirus and application thereof
CN109833317B (zh) 法匹拉韦在制备抑制犬瘟热病毒增殖药物中的应用
CN111150724A (zh) 缬氨酸在制备治疗或预防禽流感病毒感染的药物中的应用
CN106822176B (zh) 氯化锂抑制口蹄疫病毒的用途
KR20230101401A (ko) 바이러스성출혈성패혈증 예방용 불활화 백신 조성물 및 이를 이용한 바이러스성출혈성패혈증의 예방방법
Arnemo The use of Toll-like receptor ligands as adjuvants in fish vaccines
Shijin et al. Chicken Embryo Inhibition Test of Recombinant Freeze-drying Chicken Interferon against Newcastle Disease Virus (NDV) F^ sub 48^ E^ sub 10^
WO2002078717A2 (en) Compositions and methods for reducing rna virus pathogenicity

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant