CN112557572A - 一种检测Cbz-Glu中异构体含量的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开一种检测Cbz‑Glu中异构体含量的方法，属于化学分析领域，具体的，高效液相色谱条件为：色谱柱为CHIRALCEL OX‑3，检测波长为210nm，柱温为35℃，流动相为正己烷‑无水乙醇的混合液，流动相流速为0.6ml/min，洗脱时间为40min。本发明可有效将Cbz‑L‑Glu与其异构体Cbz‑D‑Glu分离，从而时间检测异构体Cbz‑D‑Glu的含量。

Description

一种检测Cbz-Glu中异构体含量的方法
技术领域
本发明属于化学分析领域，具体涉及一种检测Cbz-Glu中异构体含量的方法。
背景技术
Cbz-Glu存在Cbz-L-Glu和Cbz-D-Glu两种异构体，其中Cbz-L-Glu为目标产物，Cbz-D-Glu为互为异构体的杂质。生产过程中，需严格控制Cbz-D-Glu的含量，而现有技术中并无一种检测Cbz-Glu中异构体Cbz-D-Glu杂质含量的方法。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供一种检测Cbz-Glu中异构体含量的方法。本发明方法可将杂志Cbz- D- Glu有效分离开，从而测定其含量。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种检测Cbz-Glu中异构体含量的方法，高效液相色谱条件为：色谱柱为CHIRALCEL OX-3，检测波长为205-220nm，柱温为35℃，流动相为正己烷-无水乙醇的混合液，流动相流速为0.6ml/min，洗脱时间为30-40min，
进一步的，进样量为10μL，样品稀释浓度为0.5mg/ml。
进一步的，所述色谱柱的规格为250×4.6mm，3μm。
进一步的，流动相中，正己烷与无水乙醇的体积比为85:15，且流动相中添加0.1%TFA。
进一步的，稀释样品的稀释剂为正己烷与无水乙醇的混合液，且正己烷与无水乙醇的体积比为80:20。
进一步的，所述方法，具体为：
（1）取测试样品5mg，精密称定，置10mL容量瓶中，用稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀即得；
（2）将所得样品稀释液进入高效液相色谱系统，进行检测，记录Cbz-L-Glu的峰面积以及Cbz-D-Glu的峰面积；
（3）根据公式
Figure DEST_PATH_IMAGE001
，计算Cbz-D-Glu含量。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
本发明可有效将Cbz-L-Glu与其异构体Cbz-D-Glu分离，从而时间检测异构体Cbz-D-Glu的含量。本发明的流动相中加入0.1%的三氟乙酸，可以有效改善峰形，由于本发明方法仅用于检测待测样品中异构体的含量，因此，本发明方法只需将主成分与其异构体有效分离，且无其他杂质干扰主峰及异构体峰即可。且正己烷容易挥发，因此本发明中将柱温设置为35℃，分离度为3.74。
附图说明
图1为实施例1Cbz-L-Glu与其异构体Cbz-D-Glu的分离图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的描述，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，并不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域的普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的其他所有实施例，都属于本发明的保护范围。
实施例1
（1）设置高效液相色谱条件
色谱柱为CHIRALCEL OX-3，色谱柱的规格为250×4.6mm，3μm，检测波长为210nm，柱温为35℃，流动相为正己烷-无水乙醇的混合液，流动相流速为0.6ml/min，洗脱时间为40min，进样量为10μL，流动相中，正己烷与无水乙醇的体积比为85:15，且流动相中添加0.1%TFA。
（2）取测试样品5mg，精密称定，置10mL容量瓶中，用稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀即得；所述稀释剂为正己烷与无水乙醇的混合液，且正己烷与无水乙醇的体积比为80:20；
（3）将所得样品稀释液进入高效液相色谱系统，进行检测，记录Cbz-L-Glu的峰面积以及Cbz-D-Glu的峰面积；
（4）根据公式
Figure 604397DEST_PATH_IMAGE002
，计算Cbz-D-Glu含量。
实施例2
（1）设置高效液相色谱条件：
色谱柱为CHIRALCEL OX-3，色谱柱的规格为250×4.6mm，3μm，检测波长为205nm，柱温为35℃，流动相为正己烷-无水乙醇的混合液，流动相流速为0.6ml/min，洗脱时间为30min，进样量为10μL，流动相中，正己烷与无水乙醇的体积比为85:15，且流动相中添加0.1%TFA。
（2）取测试样品5mg，精密称定，置10mL容量瓶中，用稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀即得；所述稀释剂为正己烷与无水乙醇的混合液，且正己烷与无水乙醇的体积比为80:20；
（3）将所得样品稀释液进入高效液相色谱系统，进行检测，记录Cbz-L-Glu的峰面积以及Cbz-D-Glu的峰面积；
（4）根据公式
Figure 990379DEST_PATH_IMAGE003
，计算Cbz-D-Glu含量。
实施例3
（1）设置高效液相色谱条件：
色谱柱为CHIRALCEL OX-3，色谱柱的规格为250×4.6mm，3μm，检测波长为220nm，柱温为35℃，流动相为正己烷-无水乙醇的混合液，流动相流速为0.6ml/min，洗脱时间为35min，进样量为10μL，流动相中，正己烷与无水乙醇的体积比为85:15，且流动相中添加0.1%TFA。
（2）取测试样品5mg，精密称定，置10mL容量瓶中，用稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀即得；所述稀释剂为正己烷与无水乙醇的混合液，且正己烷与无水乙醇的体积比为80:20；
（3）将所得样品稀释液进入高效液相色谱系统，进行检测，记录Cbz-L-Glu的峰面积以及Cbz-D-Glu的峰面积；
（4）根据公式
Figure 504537DEST_PATH_IMAGE004
，计算Cbz-D-Glu含量。

Claims (6)

1.一种检测Cbz-Glu中异构体含量的方法，其特征在于，高效液相色谱条件为：色谱柱为CHIRALCEL OX-3，检测波长为205-220nm，柱温为35℃，流动相为正己烷-无水乙醇的混合液，流动相流速为0.6ml/min，洗脱时间为30-40min。
2.根据权利要求1所述的一种检测Cbz-Glu中异构体含量的方法，其特征在于，进样量为10μL，样品稀释浓度为0.5mg/ml。
3.根据权利要求1所述的一种检测Cbz-Glu中异构体含量的方法，其特征在于，所述色谱柱的规格为250×4.6mm，3μm。
4.根据权利要求1所述的一种检测Cbz-Glu中异构体含量的方法，其特征在于，流动相中，正己烷与无水乙醇的体积比为85:15，且流动相中添加0.1%TFA。
5.根据权利要求1所述的一种检测Cbz-Glu中异构体含量的方法，其特征在于，稀释样品的稀释剂为正己烷与无水乙醇的混合液，且正己烷与无水乙醇的体积比为80:20。
6.根据权利要求1-5任一项所述的一种检测Cbz-Glu中异构体含量的方法，其特征在于，所述方法，具体为：
（1）取测试样品5mg，精密称定，置10mL容量瓶中，用稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀即得；
（2）将所得样品稀释液进入高效液相色谱系统，进行检测，进样量为10μL，记录Cbz-L-Glu的峰面积以及Cbz-D-Glu的峰面积；
（3）根据公式
Figure DEST_PATH_IMAGE002
，计算Cbz-D-Glu含量。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101219970A (zh) * 2007-01-09 2008-07-16 吉尔生化（上海）有限公司 一种 n－芴甲氧羰基－n－三苯甲基－d－谷氨酰胺的合成法

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丁洋: "半胱氨酸基超支化聚合物的制备及其对对映体的拆分性", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库（工程科技I辑）》 *
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