CN112513631A - 细胞检查装置和细胞检查方法 - Google Patents
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Abstract
一种细胞检查方法,其具有下述工序:准备工序,在上述光源与上述观察部之间配置腔室,该腔室在内部空间中具备捕捉细胞的过滤器;第1注入工序,将细胞悬浮液从过滤器的表面侧注入到腔室的内部空间中;第1排出工序,将细胞悬浮液从过滤器的背面侧排出到腔室的外部;第2注入工序,从过滤器的表面侧向腔室的内部空间中注入对细胞进行染色的染色液;第2排出工序,将染色液从过滤器的背面侧排出到腔室的外部;平坦工序,通过按压过滤器,使过滤器平坦;和观察工序,一边利用光源进行照明,一边通过观察部对变平坦的过滤器上的细胞进行观察。
Description
技术领域
本发明涉及细胞检查装置和细胞检查方法。
背景技术
为了诊断癌症等,广泛地实施采集组织的一部分来进行病理诊断的活检。作为微创活检,进行了经皮穿刺抽吸针活检、使用内窥镜/超声波内窥镜的利用钳子/穿刺抽吸针的活检(EBUS-GS、EBUS-TBNA、EUS-FNA),但由于通过超声波图像间接地访问患部,因此未必能够可靠地采集目标组织。于是,进行了当场评价在一部分所采集的样本是否为目标样本的快速细胞诊断(Rapid on-site evaluation(快速现场评估),以下称为ROSE)。通常的ROSE是由病理医生或细胞检验员将在床旁采集的样本的一部分分取到载玻片上,利用压拉法(涂片法)薄薄地铺展到载玻片上并固定,利用染色液对细胞进行染色,利用显微镜对细胞进行观察,评价是否采集到了目标样本。通过ROSE能够判断在采集细胞的部位是否采集到了所需的细胞。不使用ROSE的情况下,利用穿刺针等采集的细胞被运送至与采集细胞的场所不同的检查场所,间隔一段时间后进行病理诊断等检查。其结果,即使在未采集到所需细胞的情况下,活检也已经结束。在使用ROSE的检查中,能够在采集细胞的现场判断是否采集到了所需的细胞,因而能够容易地追加进行细胞的采集。因此,ROSE能够减少穿刺次数,减轻患者的负担,降低再检查率,因此希望在各设施中实施ROSE。但是,ROSE通常是由病理医生或细胞检验员进行的,因此在人员确保方面常常极为困难。并且各工序通过手工操作来进行,特别是涂片的制作和细胞图像的评价需要熟练性。因此,可实施的设施受限。
作为更简便的细胞诊断方法,有液基细胞学检测(Liquid Based Cytology、以下称为LBC)。将所采集的样本收纳在细胞保存液中,使细胞扩散而制作细胞悬浮液。从细胞悬浮液中补充细胞而将细胞制成标本后,利用显微镜对细胞进行观察。标本的制作无需特殊技能。
基于LBC的细胞标本制作方法有几种,作为迅速、简便地制作标本的方法,已知有捕捉在膜滤器上捕捉到的细胞并直接用显微镜进行观察的方法。但是,这种情况下,在用显微镜进行细胞观察时,过滤器的孔(pore)明显,妨碍观察。因此,公开了一种在透明载玻片上贴合有使光漫射的半透明密封片的切片(例如参见专利文献1)。专利文献1中,在密封片上形成凹凸部,使安装有过滤器的框体嵌合于凹凸部,将细胞捕捉到过滤器上后,载置添加有封固剂的盖玻片而制作出切片。
另外,膜滤器是由树脂形成的薄膜,因此平面度不均匀,进而由于用于标本制作的染色等操作而发生溶胀,平面度进一步劣化。因此,显微镜的对焦操作变得繁杂。
现有技术文献
专利文献
专利文献1:日本特开平3-191310号公报
发明内容
发明所要解决的课题
在使用专利文献1中公开的切片制作细胞标本的情况下,需要使安装有过滤器的框体在粘贴有密封片的载玻片上移动,因此操作变得繁杂。
另外,使用专利文献1的切片的ROSE需要下述工序:利用切片制作细胞标本的工序;将细胞浸渍到染色液中的工序;和将染色后的细胞放置于显微镜的载物台上进行观察的工序。在这种检查方法中,各工序中的操作在不同的场所进行,因此存在操作变得繁杂的问题。
本发明是鉴于这种问题而进行的,其目的在于提供一种能够准确地对细胞进行观察、并且能够顺利且迅速地对细胞进行检查的细胞检查装置和细胞检查方法。
用于解决课题的手段
本发明的第1方式的细胞检查方法为使用光源和观察部对细胞悬浮液中含有的细胞进行检查的细胞检查方法,其具有下述工序:准备工序,在上述光源与上述观察部之间配置腔室,该腔室在内部空间中具备捕捉上述细胞的过滤器;第1注入工序,从上述过滤器的表面侧将上述细胞悬浮液注入到上述腔室的内部空间中;第1排出工序,从上述过滤器的背面侧将上述细胞悬浮液排出到上述腔室的外部;第2注入工序,从上述过滤器的表面侧将对上述细胞进行染色的染色液注入到上述腔室的内部空间中;第2排出工序,从上述过滤器的背面侧将上述染色液排出到上述腔室的外部;平坦工序,在使上述过滤器位于上述光源与上述观察部之间的状态下按压上述过滤器,由此使上述过滤器平坦;和观察工序,在使上述过滤器位于上述光源与上述观察部之间的状态下,一边利用上述光源进行照明,一边通过上述观察部对变平坦的上述过滤器上的上述细胞进行观察。
本发明的第2方式的细胞检查方法中,在上述第1方式中,上述细胞悬浮液和上述染色液可以从上述腔室的侧壁注入到上述内部空间中。
本发明的第3方式的细胞检查方法中,在上述第1方式或上述第2方式中,上述细胞悬浮液和上述染色液可以从上述腔室的侧壁排出到上述内部空间外。
本发明的第4方式的细胞检查方法中,在上述第1方式至上述第3方式中的任一方式中,可以在上述第1注入工序和上述第2注入工序中形成下述空间,该空间配置于上述过滤器的表面侧,被按压上述过滤器的按压部件、上述腔室的内壁面和上述过滤器所包围,并且用于将上述细胞悬浮液和上述染色液注入到上述过滤器的表面侧。
本发明的第5方式的细胞检查方法中,在上述第1方式至上述第4方式中的任一方式中,可以在上述第1排出工序和上述第2排出工序中形成下述空间,该空间配置于上述过滤器的背面侧,被按压上述过滤器的按压部件、上述腔室的内壁面和上述过滤器所包围,并且用于将上述细胞悬浮液和上述染色液排出到上述过滤器的背面侧。
本发明的第6方式的细胞检查方法中,在上述第4方式或上述第5方式中,在上述观察工序中,上述过滤器与上述按压部件之间可以被液体充满。
本发明的第7方式的细胞检查方法中,在上述第4方式至上述第6方式中的任一方式中,在上述观察工序中,可以透过设置在上述观察部与上述过滤器之间的盖玻片,通过上述观察部对上述过滤器上的上述细胞进行观察。
本发明的第8方式的细胞检查方法中,在上述第4方式至上述第7方式中的任一方式中,上述按压部件可以由来自上述光源的光可透过的透光材料构成。
本发明的第9方式的细胞检查装置具备:过滤器,捕捉细胞悬浮液中含有的细胞;腔室,具有内部空间,在上述内部空间中配置有上述过滤器;注入部,从上述过滤器的表面侧将上述细胞悬浮液和对上述细胞进行染色的染色液注入到上述腔室的上述内部空间中;排出部,从上述过滤器的背面侧将上述细胞悬浮液和上述染色液排出到上述腔室的外部;按压部件,以能够与上述过滤器相对移动的方式设置于上述内部空间中,对上述过滤器进行按压,使上述过滤器平坦;光源,对上述细胞照射光;和观察部,设置在上述过滤器的与上述光源相反的一侧。
本发明的第10方式的细胞检查装置中,在上述第9方式中,上述按压部件可以设置在上述腔室内,并且配置于上述过滤器的表面侧,形成被上述按压部件、上述腔室的内壁面和上述过滤器所包围并且用于将上述细胞悬浮液和上述染色液注入到上述过滤器的表面侧的空间。
本发明的第11方式的细胞检查装置中,在上述第9方式中,上述按压部件可以设置在上述腔室内,并且配置于上述过滤器的背面侧,形成被上述按压部件、上述腔室的内壁和上述过滤器所包围并且用于将上述细胞悬浮液和上述染色液排出到上述过滤器的背面侧的空间。
本发明的第12方式的细胞检查装置中,在上述第9方式至上述第11方式中的任一方式中,上述注入部和上述排出部可以能够从上述腔室上装卸。
本发明的第13方式的细胞检查装置中,在上述第9方式至上述第12方式中的任一方式中,上述按压部件可以由来自上述光源的光可透过的透光材料构成。
本发明的第14方式的细胞检查装置中,在上述第9方式至上述第13方式中的任一方式中,上述按压部件可以是使来自上述光源的光发生漫射的漫射板。
本发明的第15方式的细胞检查装置中,在上述第9方式至上述第14方式中的任一方式中,可以在上述观察部与上述过滤器之间设有盖玻片。
发明的效果
根据上述各方式的细胞检查装置和细胞检查方法,能够准确地对细胞进行观察,并且能够顺利且迅速地进行细胞的检查。
附图说明
图1是示出本发明的第1实施方式的细胞检查装置的整体图。
图2是示出图1的过滤器的立体图。
图3是示出用按压部件抵靠图1的过滤器时的状态的主要部分截面图。
图4是示出本发明的细胞检查装置的框图。
图5是示出本发明的细胞检查方法的流程图。
图6是示出本发明的细胞检查方法中使用的细胞悬浮液的制作步骤的图。
图7是示出本发明的细胞检查方法中使用的细胞悬浮液的制作步骤的图。
图8是示出本发明的细胞检查方法中使用的细胞悬浮液的制作步骤的图。
图9是示出本发明的细胞检查方法中使用的细胞悬浮液的制作步骤的图。
图10是示出本发明的细胞检查方法的图。
图11是示出本发明的细胞检查方法的图。
图12是示出本发明的细胞检查方法的图。
图13是示出本发明的细胞检查方法的图。
图14是示出本发明的细胞检查方法的图。
图15是示出本发明的第1实施方式的细胞检查装置的变形例的图。
图16是示出本发明的第2实施方式的细胞检查装置的整体图。
图17是示出本发明的细胞检查方法的图。
图18是示出本发明的细胞检查方法的图。
具体实施方式
[第1实施方式]
参照图1至图14,对本发明的第1实施方式的细胞检查装置进行说明。
细胞检查装置1是捕捉细胞悬浮液中含有的细胞并进行观察的装置。如图1所示,细胞检查装置1具备过滤器10、腔室20、注入部30、排出部40、按压部件50、光源60和观察部70。在光源60与观察部70之间配置有过滤器10、腔室20和按压部件50。
如图2所示,过滤器10具备圆环状的框体11、和对粘贴在框体11的表面上的细胞进行捕捉的过滤器部12。过滤器部12捕捉细胞悬浮液中含有的细胞,因此具有比细胞小的孔径。过滤器部12的滤材为薄膜的膜滤器,常使用在聚碳酸酯等树脂中开有独立的孔的过滤器。由于过滤器部12为薄膜,因此通常并非平面而是具有微小的起伏。图1中,为了易于理解,将该起伏放大示出。
如图1所示,腔室20配置于光源60与观察部70之间。腔室20具有内部空间P,在内部空间P内配置有过滤器10。过滤器10的框体11的外侧面11a以保持气密、水密的方式与腔室20的内壁面20a接触。过滤器10的框体11与腔室20的内壁面20a接触的同时,过滤器10以能够在内部空间P中移动的方式配置。过滤器10能够移动至过滤器10的框体11的表面11b与腔室的表面20b成为同一面。在腔室的表面20b上设置有限制过滤器10向朝向观察部70的方向移动的限制器。
在腔室20的侧壁20c,沿着观察部70与光源60的排列方向隔开间隔形成有第1贯通孔21和第2贯通孔22。第1贯通孔21配置在比第2贯通孔22更靠近观察部70侧的位置。第2贯通孔22配置在比第1贯通孔21更靠近光源60侧的位置。第1贯通孔21和第2贯通孔22将腔室20的内部空间P与外部连通。
过滤器10配置在内部空间P中从侧面观察腔室20时第1贯通孔21与第2贯通孔22之间的位置。在内部空间P中形成有被过滤器10、腔室20的内壁面20a和表面20b所包围的上部空间P1。
如图1所示,注入部30具备:与第1贯通孔21连通的流路31;向内部空间P中注入细胞悬浮液C的注入口32;和存积染色液S的存积部33。存积部具备多种染色液以及清洗液。注入部30经由流路31从过滤器10的表面10a侧将细胞悬浮液C和对细胞进行染色的染色液S注入到腔室20的上部空间P1中。图1中,流路31集中成一条,第1贯通孔21为一个,但流路31也可以对于细胞悬浮液C和多种染色液S与清洗液是独立的,与之对应地设有多个第1贯通孔21。存积部33的各液体通过主体的压电致动器、步进电机等独立地被注入到腔室20的上部空间P1中。
如图1所示,排出部40具备安装在第2贯通孔22的流路41、以及对细胞悬浮液C和染色液S进行抽吸的抽吸部42。排出部40经由流路41将内部空P内的细胞悬浮液C和染色液S通过主体的压电致动器或步进电机等从过滤器10的背面10b侧排出到腔室20的外部。
如图1所示,按压部件50配置于内部空间P的过滤器10的背面10b侧,并按照能够与过滤器10相对移动的方式设置。按压部件50在内部空间P中与过滤器10隔开间隔地配置在比第2贯通孔22更靠近光源60侧的位置。在内部空间P中形成有被按压部件50、腔室20的内壁面20a和过滤器10所包围,并且用于将细胞悬浮液C和染色液S排出到腔室20的外部、过滤器10的背面10b侧的下部空间(空间)P2。
按压部件50具备圆环状的框体51、和配置于框体51内的与过滤器10接触的凸部件52。凸部件52的与过滤器10相向的面52a是光滑的平面。面52a的直径小于过滤器的直径。按压部件50的框体51的外侧面51a以保持气密、水密的方式与腔室20的内壁面20a接触。按压部件50的框体51与腔室20的内壁面20a接触的同时,按压部件50能够在内部空间P中移动。如图3所示,按压部件50的凸部件52通过按压过滤器10的背面10b,对过滤器10施加张力,表面10a变得平坦。
凸部件52由使来自光源60的光透过的透光材料构成。另外,凸部件52使来自光源60的光散射。凸部件52例如可以由折射率相互不同的多个透明部件形成,也可以由磨砂玻璃等散射板、或在表面配设有微小凹凸的漫射板形成。
光源60例如与压电致动器或步进电机等连接,能够沿着向观察部70接近的方向、或者从观察部70远离的方向移动。光源60的大小与按压部件50的框体51的大小大致相同。光源60能够在内部空间P中移动,能够将按压部件50向过滤器10的背面10b推进。
接着,对细胞检查装置1的框图构成进行说明。图4是细胞检查装置1的框图。
如图4所示,细胞检查装置1具备控制部80。控制部80内置有显微镜图像的处理/保存机构,与存积部33的注入机构、抽吸部42的抽吸机构、光源60和显示器71连接。控制部80根据由未图示的输入部输入的指令信号对存积部33的注入机构、抽吸部42的抽吸机构、观察部70和光源60的工作进行控制。
当注入染色液S的指令信号被输入时,控制部80控制存积部33的注入机构的驱动,以与所输入的指令信号相应的时间,经由流路31将与所输入的指令信号相应的种类及量的染色液S和清洗液注入到腔室20的内部空间P中。
当抽吸细胞悬浮液C、或染色液S与清洗液的指令信号被输入时,控制部80控制抽吸部42的抽吸机构的驱动,通过抽吸部42来抽吸腔室20的内部空间P内的细胞悬浮液C、或染色液S与清洗液。
当使光源60移动的指令信号被输入时,控制部80控制光源60的驱动,使光源60向接近观察部70的方向移动。
细胞检查装置1还具备显示器(显示部)71。显示器71与控制部80连接。通过观察部70获得的细胞Tb的图像由控制部80适当地进行图像处理后,显示到显示器71上。
接着,利用图5的流程图对本实施方式的细胞检查方法进行说明。
首先,如图1所示,在光源60与观察部70之间配置盒(cartridge),该盒具备:在内部空间具备过滤器10和按压部件50的腔室20;注入部30;和排出部40(准备工序:步骤S1)。
接着,一边用超声波内窥镜观察患者的体内一边将穿刺针等刺入组织中,采集细胞。如图6所示,将采集的样本T排出到培养皿90中,向培养皿90内注入细胞保存液,将样本T理开。理开样本T后,如图7所示,向培养皿90内插入在底部设有过滤器91的容器92。如图8所示,将容器92推进到培养皿90内时,如图9所示,分离成容器92内的细胞悬浮液C和培养皿90内的组织Ta。这样,制作出细胞悬浮液C。
将所制作的细胞悬浮液C抽吸至滴管或注射器等中,注入到图1所示的注入口32中。细胞悬浮液C通过流路31从第1贯通孔21被注入到腔室20的上部空间P1中(第1注入工序:步骤S2)。如图10所示,细胞悬浮液C停留在过滤器10的表面10a上。
接着,控制部80驱动抽吸部42的抽吸机构,使下部空间P2内为负压,由此对上部空间P1的细胞悬浮液C和通过了过滤器10的细胞悬浮液C进行抽吸。抽吸出的细胞悬浮液C从第2贯通孔22通过流路41被排出到抽吸部42(第1排出工序:步骤S3)。如图11所示,细胞悬浮液C内的细胞被捕捉到过滤器10上。
接着,控制部80驱动存积部33的注入机构。存积部33内的染色液S和清洗液通过流路31从第1贯通孔21被注入到腔室20的上部空间P1中(第2注入工序:步骤S4)。如图12所示,染色液C停留在过滤器10的表面10a上,将细胞Tb染色。需要说明的是,在第1注入工序和第2注入工序时,过滤器10位于比第1贯通孔21更靠近观察部70侧的位置的情况下、或堵塞了第1贯通孔21的情况下,将过滤器10配置在比第1贯通孔21更靠近光源60侧的位置,形成注入细胞悬浮液C和染色液S的内部空间P1。
接着,控制部80驱动抽吸部42的抽吸机构,使下部空间P2内为负压,由此对上部空间P1的染色液S和通过了过滤器10的染色液S进行抽吸。抽吸出的染色液S从第2贯通孔22通过流路41被排出到抽吸部42(第2排出工序:步骤S5)。从流路31注入与之前不同的染色液S(步骤S4),并从流路41排出(步骤S5)。进行与染色液的种类数相应的染色液S的注入(步骤S4)和排出(步骤S5)。
如图13所示,细胞Tb被染色。需要说明的是,在第1排出工序和第2排出工序时,过滤器10位于比第2贯通孔22更靠近光源60侧的位置的情况下、或堵塞了第2贯通孔22的情况下,将过滤器10配置在比第2贯通孔22更靠近观察部70侧的位置,形成排出细胞悬浮液C和染色液S的内部空间P2。所有染色完成后,将清洗液以同样的工序注入到腔室20中(步骤S4-1),之后排出清洗液(步骤S5-1),清洗多余的染色液。
接着,控制部80驱动光源60,光源60向接近按压部件50的方向移动。光源60与按压部件50接触,并与按压部件50一起向过滤器10移动。光源60进一步向接近过滤器10的方向移动时,按压部件50的凸部件52与过滤器10的背面10b接触。光源60推进按压部件50和过滤器10,直至过滤器10的表面10a与腔室的表面20b成为同一面。当按压部件50抵靠过滤器10的背面10b时,如图14所示,按压部件50的凸部件52对过滤器10进行按压,因此捕捉有细胞Tb的过滤器10被施加张力,表面变得平坦(平坦工序:步骤S6)。
一边利用光源60对变平坦的过滤器10照射光,一边通过观察部70利用显示器71对过滤器10的表面10a的细胞进行观察(观察工序:步骤S7)。若采集到所需的细胞,则将图9所示的组织Ta和残留的细胞悬浮液C运送至病理检查。另一方面,在未采集到所需细胞的情况下,利用内窥镜再次采集样本。
根据本实施方式的细胞检查装置1,通过使用按压部件50,能够使过滤器10平坦。由此,能够准确地观察被捕捉到过滤器10的表面10a上的细胞Tb。即,通常在对过滤器10上的细胞进行观察时,由于过滤器10是起伏的,因此观察部70的焦点仅对准细胞Tb的一部分,难以观察整个细胞Tb。本实施方式中,由于能够使过滤器10平坦,因此容易将焦点对准细胞Tb,能够观察到清晰的细胞Tb的图像。
另外,在腔室20的内部空间P中形成有下部空间P2,该下部空间P2被按压部件50、腔室20的内壁面20a和过滤器10所包围,并且用于将细胞悬浮液C和染色液S排出到过滤器10的背面10b侧。由此,过滤器10和按压部件50不会妨碍细胞悬浮液C和染色液S的抽吸。
另外,按压部件50的凸部件52由使来自光源60的光透过的透光部件构成。由此,能够高效地利用光源60的光,因此能够通过观察部70清晰地观察细胞Tb。另外,按压部件50的凸部件52是使来自光源60的光散射的散射板。由此,除了按压部件50以外无需设置散射板,因此能够减少部件数量。
另外,由腔室20、注入部30和排出部40构成的盒100可以构成为每次使用时进行更换的一次性类型。由此,装置不会被样本污染,还能够防止样本对医务人员的感染、样本间的污染。
另外,根据本实施方式的细胞检查方法,在光源60与观察部70之间、即在相同的场所进行准备工序(步骤S1)、第1注入工序(步骤S2)、第1排出工序(步骤S3)、第2注入工序(步骤S4)、第2排出工序(步骤S5)、平坦工序(步骤S6)、观察工序(步骤S7),因此能够顺利且迅速地对细胞Tb进行检查。
另外,通过在腔室20的侧壁20c上形成第1贯通孔21,能够在不妨碍观察部70的情况下将细胞悬浮液C和染色液S注入到上部空间P1中。通过在腔室20的侧壁20c上形成第2贯通孔22,能够在不妨碍光源60的情况下将细胞悬浮液C和染色液S从下部空间P2排出到外部。
需要说明的是,按压部件50也可以不一定由透光材料构成,但优选由透光率高的部件构成。按压部件50也可以不一定为漫射板。
另外,染色液S使用了多种,但也可以为一种。利用清洗液的清洗不是必须的。
另外,光源60对按压部件50进行了按压,但也可以是光源60不动、按压部件50与致动器等连接而移动的构成。
另外,通过控制部80驱动了存积部33的注入机构、抽吸部42的抽吸机构和光源60,但也可以不具备控制部80而使存积部33、抽吸部42和光源60为手动。控制部80通过指令信号的输入控制了存积部33的注入机构、抽吸部42的抽吸机构和光源60,但所有一系列的流程也可以自动地进行。
另外,利用显示器71对由观察部70获得的细胞Tb的图像进行了观察,但也可以藉由目镜通过目视来观察细胞Tb。
另外,采用了在腔室的表面20b上设有限制过滤器10向朝向观察部70的方向移动的限制器的构成,但也可以为通过控制部80使光源60移动预先设定的移动量的构成。
[变形例]
本变形例中,腔室24的构成与第1实施方式的腔室20的构成不同。对于与上述共通的构成要素附以相同的符号,并省略重复说明。
如图15所示,腔室24在腔室24的表面25b上设有盖玻片23。形成了被过滤器10、腔室24的内壁面25a和盖玻片23所包围的上部空间P1a。上部空间P1a被密闭。
接着,对细胞检查方法进行说明。
首先,从上述步骤S1进行至步骤S6。经由流路31将封固液I注入到上部空间P1a中。在上部空间P1a被填充的状态下,一边光源60对变平坦的过滤器10照射光,一边通过观察部70利用显示器71对过滤器10的表面10a的细胞进行观察。
需要说明的是,在过滤器10与盖玻片23之间隔开间隔的情况下进行了细胞Tb的观察,但也可以使过滤器10接近盖玻片23而缩小空间、或者使过滤器10与盖玻片23接触来进行观察。
另外,代替盖玻片23,也可以为透明的树脂板。通过用封固液将上部空间P1a充满,能够在进一步减小过滤器10的孔对图像的影响的情况下进行观察。
[第2实施方式]
使用图16至图18对本发明的第2实施方式进行说明。
本实施方式的细胞检查装置在按压部件的构成上与第1实施方式不同。
在后述说明中,对于与上述共通的构成要素附以相同符号,并省略重复说明。
如图16所示,在腔室20的上壁20d上形成有开口部25。按压部件55以堵塞开口部25的方式设置在腔室20的上壁20d的与观察部70相向的位置。按压部件55的与过滤器10相向的面55a(内部空间P侧的面)为平面。按压部件55由使来自光源60的光透过的透光材料构成。
与第1实施方式同样地,过滤器10配置在内部空间P中从侧面观察腔室20时第1贯通孔21与第2贯通孔22之间的位置。在内部空间P中形成有被过滤器10、腔室20的内壁面20a和按压部件55所包围的上部空间(空间)P3。
在腔室20的内部空间P中,在过滤器10的背面10b侧设有漫射板26。漫射板26配置在比第2贯通孔22更靠近光源60侧的位置。在内部空间P中形成有被漫射板26、腔室20的内壁面20a和过滤器10所包围的下部空间P4。漫射板26的外侧面26a与腔室20的内壁面20a接触而配置。漫射板26在外侧面26a与腔室20的内壁面20a接触的同时能够在内部空间P内移动。漫射板26使来自光源60的光漫射。
与第1实施方式同样地,光源60能够在内部空间P内移动,能够将漫射板26向过滤器10的背面10b推进。
存积部33中,除了染色液S和清洗液以外,还具备封固液I。
接着,使用图5所示的流程图对本实施方式的细胞检查方法进行说明。
对于与第1实施方式同样的部位,省略说明。
在光源60与观察部70之间配置腔室20,该腔室20在上壁20d上设有按压部件55,在内部空间P中具备过滤器10和漫射板26(准备工序:步骤S1)。向上部空间P3中注入细胞悬浮液C(第1注入工序:步骤S2),使下部空间P4为负压而将细胞悬浮液C排出(第1排出工序:步骤S3),将细胞Tb捕捉到过滤器10上。之后,向上部空间P3中注入染色液S(第2注入工序:步骤S4),使下部空间P4为负压而将染色液S排出(第2排出工序:步骤S5),对细胞Tb进行染色。如图17所示,染色后的细胞Tb被捕捉到过滤器10的表面10a上。接着,向容纳有被染色液染色的细胞Tb的过滤器上注入少量封固液(液体)I,使过滤器湿润。
接着,当控制部80驱动光源60时,光源60向接近漫射板26的方向移动。光源60与漫射板26接触,并与漫射板26一起向过滤器10移动。当光源60进一步向接近过滤器10的方向移动时,过滤器10与漫射板26接触。光源60将过滤器10和漫射板26推向按压部件55。当过滤器10被按压部件55按压时,如图18所示,捕捉有细胞Tb的过滤器10变得平坦(平坦工序:步骤S6)。按压部件55与过滤器10的表面10a之间被封固液I充满。图18中,为了易于理解地示出被捕捉到过滤器10上的细胞Tb,将其放大表示。
接着,与第1实施方式同样地,通过观察部70对细胞Tb进行观察(观察工序:步骤S7)。若采集到所需的细胞,则将图9所示的细胞Tba运送至病理检查。另一方面,在未采集到所需细胞的情况下,利用内窥镜再次采集细胞。
根据本实施方式的细胞检查装置,能够利用按压部件55使过滤器10平坦。由此,能够准确地观察被捕捉到过滤器10的表面10a上的细胞Tb。
另外,在腔室20的内部空间P中形成有上部空间P3,该上部空间P3被按压部件55、腔室20的内壁面20a和过滤器10所包围,并且用于将细胞悬浮液C和染色液S注入到过滤器10的表面10a侧。由此,过滤器10和按压部件55不会妨碍细胞悬浮液C和染色液S的注入。
另外,在观察工序中,过滤器10与按压部件55之间被封固液I充满,由于封固液侵入到过滤器的孔中,因此能够减轻孔的影响,清晰地观察细胞Tb。另外,在过滤器10与按压部件55之间未被液体充满的情况下,有时在过滤器10与按压部件55之间产生气泡或过滤器的贴附/浮起等而难以观察。
需要说明的是,过滤器10与按压部件之间被封固液I充满。通常,封固液使用调整至在显微镜观察时不易产生孔的影响的折射率的二甲苯等液体,但对醇、甘油溶液、水等封固液的种类没有特别限定。例如,在对染色液后的清洗液进行抽吸时,可以不排出所有的清洗液而使其少量残留。
另外,可以不一定具备漫射板26,光源60可以直接按压过滤器10,将过滤器10向按压部件55上按压。
表面
以上,对本发明的优选实施方式进行了说明,但本发明不限定于这些实施方式。可以在不脱离本发明主旨的范围内进行构成的添加、省略、置换和其他变更。本发明不受上述说明的限定,仅受所附权利要求书的限定。
工业实用性
根据上述各实施方式的细胞检查装置和细胞检查方法,能够准确地对细胞进行观察,并且能够顺利且迅速地进行细胞的检查。
符号说明
C 细胞悬浮液
I 封固液(液体)
P 内部空间
P2 下部空间(空间)
P3 上部空间(空间)
S 染色液
T 样本
Tb 细胞
10 过滤器
10a 过滤器的表面
10b 过滤器的背面
20 腔室
20a 腔室的内壁面
20c 腔室的侧壁
30 注入部
40 排出部
50,55 按压部件
60 光源
70 观察部
Claims (15)
1.一种细胞检查方法,其是使用光源和观察部对细胞悬浮液中含有的细胞进行检查的细胞检查方法,其具有下述工序:
准备工序,在所述光源与所述观察部之间配置腔室,该腔室在内部空间中具备捕捉所述细胞的过滤器;
第1注入工序,从所述过滤器的表面侧将所述细胞悬液注入到所述腔室的内部空间中;
第1排出工序,从所述过滤器的背面侧将所述细胞悬浮液排出到所述腔室的外部;
第2注入工序,从所述过滤器的表面侧将对所述细胞进行染色的染色液注入到所述腔室的内部空间中;
第2排出工序,从所述过滤器的背面侧将所述染色液排出到所述腔室的外部;
平坦工序,在使所述过滤器位于所述光源与所述观察部之间的状态下按压所述过滤器,由此使所述过滤器平坦;和
观察工序,在使所述过滤器位于所述光源与所述观察部之间的状态下,一边利用所述光源进行照明,一边通过所述观察部对变平坦的所述过滤器上的所述细胞进行观察。
2.如权利要求1所述的细胞检查方法,其中,所述细胞悬浮液和所述染色液从所述腔室的侧壁注入到所述内部空间中。
3.如权利要求1或权利要求2所述的细胞检查方法,其中,所述细胞悬浮液和所述染色液从所述腔室的侧壁排出到所述内部空间外。
4.如权利要求1至权利要求3中任一项所述的细胞检查方法,其中,在所述第1注入工序和所述第2注入工序中形成下述空间,
该空间配置于所述过滤器的表面侧,被按压所述过滤器的按压部件、所述腔室的内壁面和所述过滤器所包围,并且用于将所述细胞悬浮液和所述染色液注入到所述过滤器的表面侧。
5.如权利要求1至权利要求3中任一项所述的细胞检查方法,其中,在所述第1排出工序和所述第2排出工序中形成下述空间,
该空间配置于所述过滤器的背面侧,被按压所述过滤器的按压部件、所述腔室的内壁面和所述过滤器所包围,并且用于将所述细胞悬浮液和所述染色液排出到所述过滤器的背面侧。
6.如权利要求4或权利要求5所述的细胞检查方法,其中,在所述观察工序中,所述过滤器与所述按压部件之间被液体充满。
7.如权利要求4至权利要求6中任一项所述的细胞检查方法,其中,在所述观察工序中,透过设置在所述观察部与所述过滤器之间的盖玻片,通过所述观察部对所述过滤器上的所述细胞进行观察。
8.如权利要求4至权利要求7中任一项所述的细胞检查方法,其中,所述按压部件由来自所述光源的光可透过的透光材料构成。
9.一种细胞检查装置,其具备:
过滤器,捕捉细胞悬浮液中含有的细胞;
腔室,具有内部空间,在所述内部空间中配置有所述过滤器;
注入部,从所述过滤器的表面侧将所述细胞悬浮液和对所述细胞进行染色的染色液注入到所述腔室的所述内部空间中;
排出部,从所述过滤器的背面侧将所述细胞悬浮液和所述染色液排出到所述腔室的外部;
按压部件,以能够与所述过滤器相对移动的方式设置于所述内部空间中,对所述过滤器进行按压,使所述过滤器平坦;
光源,对所述细胞照射光;和
观察部,设置在所述过滤器的与所述光源相反的一侧。
10.如权利要求9所述的细胞检查装置,其中,
所述按压部件设置在所述腔室内,并且配置于所述过滤器的表面侧,
形成被所述按压部件、所述腔室的内壁面和所述过滤器所包围并且用于将所述细胞悬浮液和所述染色液注入到所述过滤器的表面侧的空间。
11.如权利要求9所述的细胞检查装置,其中,
所述按压部件设置在所述腔室内,并且配置于所述过滤器的背面侧,
形成被所述按压部件、所述腔室的内壁和所述过滤器所包围并且用于将所述细胞悬浮液和所述染色液排出到所述过滤器的背面侧的空间。
12.如权利要求9至权利要求11中任一项所述的细胞检查装置,其中,所述注入部和所述排出部能够从所述腔室上装卸。
13.如权利要求9至权利要求12中任一项所述的细胞检查装置,其中,所述按压部件由来自所述光源的光可透过的透光材料构成。
14.如权利要求9至权利要求13中任一项所述的细胞检查装置,其中,所述按压部件是使来自所述光源的光发生漫射的漫射板。
15.如权利要求9至权利要求14中任一项所述的细胞检查装置,其中,在所述观察部与所述过滤器之间设有盖玻片。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20210316 |