CN112451599A - 一种水溶性葡萄籽提取物及其制备方法 - Google Patents

一种水溶性葡萄籽提取物及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种水溶性葡萄籽提取物及其制备方法，所述制备方法包括如下步骤：(1)提取：称取原料，加水搅拌提取；(2)过滤：滤布过滤，滤液通过板框压滤机；(3)树脂吸附：将滤液过DM21树脂吸附；(4)洗杂：用水洗杂；(5)解吸：70％乙醇解吸，解析液再次通过板框压滤机；(6)浓缩：将解吸液减压浓缩；(7)干燥：将浓缩液进行喷雾干燥，得成品。本发明采用水提工艺，对提取液直接进行上柱解吸，大幅提高了生产效率；并且本发明增加了精过滤步骤，大幅改善了葡萄籽提取物的水溶性；另外，本发明采用DM21树脂，大幅提高了原花青素和多酚的含量，其中原花青素含量≥95％，多酚含量≥90％，产物水溶性好。

Description

一种水溶性葡萄籽提取物及其制备方法
技术领域
本发明涉及植物提取技术领域，具体涉及一种水溶性葡萄籽提取物及其制备方法。
背景技术
葡萄籽提取物是从葡萄籽中提取的一种人体内不能合成的新型高效天然抗氧化剂物质，主要为多酚类物质，包括儿茶素类和原花青素类(OPC)。它是目前自然界中发现的抗氧化、清除自由基能力最强的物质，其抗氧化活性为维生素E的50倍、维生素C的20倍，它能有效清除人体内多余的自由基，具有延缓衰老、增强免疫力、抗氧化、抗过敏、抗疲劳、增强体质、改善亚健康状态等作用，还能改善烦躁易怒、头昏乏力、记忆力减退等症状。
现有葡萄籽的提取工艺是乙醇浸提法：将脱脂的葡萄籽原料用6BV的70％乙醇浸提两遍，200目滤布过滤，合并提取液浓缩至Be 20左右且无醇味，加水稀释，过层析柱LSA-8纯化，高浓度乙醇解析烘干得到产物。
传统葡萄籽采用醇提工艺，存在步骤多，溶剂成本高，终端产物水溶性差的缺点。
因此，需要探索一种操作方便、适合工业化生产、成本低、水溶性好的葡萄籽提取物提取工艺。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是克服背景技术的技术缺陷，提供一种水溶性葡萄籽提取物及其制备方法。本发明改善了传统工艺中溶剂的使用，减少了溶剂的回收量，节约能耗的同时，降低了生产中的安全隐患；本发明水溶性葡萄籽提取物中的原花青素含量≥95％，多酚含量≥90％，水溶性好。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案如下：
一种水溶性葡萄籽提取物的制备方法，包括如下步骤：
(1)提取：称取原料，加入5～8倍量水于100℃进行搅拌提取2～3次，每次2.5h；
(2)过滤：滤布过滤，收集滤液，将得到的滤液通过板框压滤机精过滤，得透亮的滤液；
(3)树脂吸附：将(2)步的滤液过DM21树脂吸附，吸附流速为2BV/h；
(4)洗杂：用2BV水洗杂；
(5)解吸：70％乙醇解吸，解吸流速为1BV/h，收集解吸液1.5BV，将解析液再次通过板框压滤机；
(6)浓缩：将(5)步得到的解吸液，减压浓缩为婆美度为20；
(7)干燥：将(6)步得到的浓缩液进行喷雾干燥，得成品。
优选地，所述步骤(2)中，所述滤布的目数为200目。
优选地，所述步骤(6)中，所述减压浓缩的条件为-0.06～-0.1MPa，50～70℃。
优选地，所述步骤(7)中，所述喷雾干燥时的进口温度为185～200℃，出口温度为85～100℃。
一种水溶性葡萄籽提取物，采用如上所述制备方法制备得到。
上述技术方案中，过滤装置的精密程度一定程度决定了产物水溶性的好坏，采用压滤板装置是解决传统滤布过滤杂差的办法，使用过程中根据压力和板数量来调节强弱，同时定期清理板网是保持高过滤性的重要保养方法。
上述技术方案中，本发明从提高含量的角度出发，比较后选择吸附纯化能力更好的DM21树脂，在吸附时，流出速度不能太快，否则容易跑料，洗杂过程中洗至颜色无流出为止，解吸的速度不宜快；另外，树脂需要定期保养，可采用酸碱泡洗的方法处理。
上述技术方案中，所述％为质量百分含量。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
(1)传统乙醇浸提葡萄籽的工艺存在耗时久，耗能高，生产效率低下的问题，且传统工艺只采用200目滤布过滤，杂质过滤率低，提取物水溶性差；本发明改进工艺方法，采用水提的工艺，对提取液直接进行上柱解吸，大幅提高了生产效率；并且本发明增加了精过滤步骤，采用板框压滤机对解吸液进行过滤，大幅改善了葡萄籽提取物的水溶性；
(2)传统的LSA-8树脂对原花青素和多酚的富集能力随着使用次数呈下降趋势，且提取物的含量低；本发明对此进行改进，采用DM21树脂，能有效的提高后续生产过程中的收率，减少生产过程中的浪费，并且大幅提高了原花青素和多酚的含量。
具体实施方式
为了更好地理解本发明的内容，下面结合具体实施例作进一步说明。应理解，这些实施例仅用于对本发明进一步说明，而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明所述的内容后，该领域的技术人员对本发明作出一些非本质的改动或调整，仍属于本发明的保护范围。
实施例1
一种水溶性葡萄籽提取物的制备方法，包括如下步骤：
(1)提取：称取1000g原料，加入8BV水于100℃进行搅拌提取3次，每次2.5h；
(2)过滤：用200目滤布过滤，收集滤液，将得到的滤液通过板框压滤机精过滤，得透亮的滤液；
(3)树脂吸附：将(2)步的滤液用DM21树脂吸附，吸附流速为2BV/h；
(4)洗杂：用2BV的水洗杂；
(5)解吸：70％乙醇解吸，解吸流速为1BV/h，收集解吸液1.5BV，将解析液再次通过板框压滤机；
(6)浓缩：将(5)步得到的解吸液，于-0.080Mpa下，60℃减压浓缩为婆美度20；
(7)干燥：将(6)步得到的浓缩液进行喷雾干燥，进口温度185℃，出口温度85℃；
(8)检测：收集产物送检，原花青素含量为95％，多酚含量为90％，水溶性好。
对比例1
一种葡萄籽提取物的制备方法，包括如下步骤：
(1)提取：称取1000g原料，加入4倍量的水于100℃进行搅拌提取3次，每次2.5h；
(2)过滤：用200目滤布过滤，收集滤液；
(3)树脂吸附：将(2)步的滤液用LSA-8树脂吸附，吸附流速为3BV/h；
(4)洗杂：用3BV的水洗杂；
(5)解吸：65％乙醇解吸，解吸流速为2BV/h，收集解吸液1.5BV；
(6)浓缩：将(5)步得到的解吸液，于-0.080Mpa下，60℃减压浓缩为婆美度20；
(7)干燥：将(7)步得到的浓缩液进行喷雾干燥，进口温度185℃，出口温度85℃；
(8)检测：收集产物送检，原花青素含量为80％，多酚含量为70％，水溶性差。
对比例2
一种葡萄籽提取物的制备方法，包括如下步骤：
(1)提取：称取1000g原料，加入6BV水于100℃进行搅拌提取3次，每次2.5h；
(2)过滤：用200目滤布过滤，收集滤液，将得到的滤液通过板框压滤机精过滤，得透亮的滤液；
(3)树脂吸附：将(2)步的滤液用LSA-8树脂吸附，吸附流速为2BV/h；
(4)洗杂：用2.5BV的水洗杂；
(5)解吸：70％乙醇解吸，解吸流速为1.5BV/h，收集解吸液1.5BV；
(6)浓缩：将(5)步得到的解吸液，于-0.080Mpa下，60℃减压浓缩为婆美度20；
(7)干燥：将(6)步得到的浓缩液进行喷雾干燥，进口温度185℃，出口温度85℃；
(8)检测：收集产物送检，原花青素含量为85％，多酚含量为75％，水溶性好。
本发明原花青素含量及多酚含量的测试方法如下：
一、原花青素含量的测定方法
1供试品溶液配制
1.1取混合均匀的参照品约10mg，精密称定(十万分之一)，置100ml量瓶中，加甲醇(AR级)溶液80ml，超声处理至样品溶解，冷却至室温，加甲醇(AR级)定容至刻度。
1.2取混合均匀的供试品约10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇(AR级)溶液80ml，超声处理至样品溶解，冷却至室温，加甲醇(AR级)定容至刻度。
1.3取10ml具塞试管排列于金属试管架中，左侧具中上下排列的两支为“空白”，“空白”右侧从上到下共四排，每排5支。
1.4于10ml具塞试管中各加入6ml盐酸正丁醇溶液(见3.1)和0.2ml硫酸亚铁铵盐酸溶液；再于左侧两支“空白”试管各加入1ml甲醇，右侧四排从上到下间隔加入参照品溶液与供试品溶液各1ml，其中两排分别为参照品与供试品的平行样。各试管加塞，振荡使管内液体互溶均匀。连同试管架置沸水浴中反应40分钟，取出，迅速用冷水浴(2～10℃)冷却至室温，在546nm处测得吸光度。
2计算：
Figure BDA0002823527240000061
W样：供试品称量(g)
A样：供试品吸光度
V样：供试品稀释倍数
3试剂配制
3.1盐酸正丁醇溶液：取25ml吸管，吸取浓盐酸25ml，置500ml容量瓶中，加正丁醇使成500ml，摇匀，即可。本试剂存放期不得超过七天，夏季高温季节不得超过二天。
3.2硫酸亚铁铵盐酸溶液：称取硫酸亚铁铵2.000g，置100ml容量瓶中，加2mol/L盐酸溶液使成100ml，摇匀，即可。
3.3 2mol/L盐酸溶液：取25ml吸管，吸取浓盐酸18ml置100ml容量瓶中，加去离子水使成100ml，摇匀，即可。
4注意事项
4.1此方法受环境影响，不能省却已知含量的参照品，当测得的参照品含量与已知值差别较大时，要全部重测。
4.2当样品含量较低时，称样量应适当加大，但不应超过15mg。
4.3数据处理时，同一样品的5支试管的计算结果往往不一致，不能简单地取平均值，对明显不合理的数据要进行取舍。
4.4本法精度要求：不同日期、不同人员所测得的结果相差不得超过3.0％。
二、总酚(多酚)含量的测定方法
1标准曲线溶液的配制
1.1取于105℃干燥2小时的没食子酸对照品约250mg，精密称定(十万分之一)，置50ml容量瓶中，加去离子水约40ml，超声处理使溶解，取出，加去离子水稀释定容至刻度。
1.2取5ml吸管，依次吸取上述溶液0.5、1.0、1.5、2.5、5.0ml，分别置50ml容量瓶中，用去离子水稀释定容至刻度。
1.3取1ml移液管，从上述5瓶中各吸取1ml，分别置5个50ml容量瓶中；取50ml量筒，各加入去离子水30ml；另取一个50ml容量瓶，加入去离子水30m作为“空白”。
1.4取2.5ml吸管，于上述6个容量瓶中分别加入福林酚试剂B2.5ml，混匀，放置0.5～8分钟；取10ml吸管，于上述6个容量瓶中分别加入20％碳酸钠溶液10ml，摇匀，加去离子水定容至刻度，摇匀，在室温(10～30℃)下静置2小时。
1.5以1.3中的“空白”作为空白，在765nm处测得吸光度，绘制标准曲线。
2供试品溶液的制备
2.1取供试品约15～20mg，精密称定(十万分之一)，置50ml容量瓶中，加入50％甲醇溶液约40ml，超声使溶解，取出，放冷至室温；加50％甲醇溶液定容至刻度。
2.2取1ml移液管，精密吸取上述溶液1ml置50ml容量瓶中，取50ml量筒，量取去离子水30ml至容量瓶中；取2.5ml吸管，吸取福林酚试剂B2.5ml于容量瓶中，混匀，放置0.5～8分钟；取10ml吸管，吸取20％碳酸钠溶液10ml于容量瓶中，摇匀，加去离子水定容至刻度，摇匀，在室温(10～30℃)下静置2小时。
3测定法
在765nm处测得吸光度，用标准曲线计算含量，即得。
4试剂配制
4.1福林酚试剂B：称取钨酸钠100g，钼酸钠25g，用去离子水700ml溶解，加盐酸100ml，磷酸50ml，加热回流10小时，放冷至室温；加硫酸锂150g，去离子水50ml和溴0.2ml，煮沸15分钟，冷却至室温，加去离子水稀释至1000ml，摇匀，滤过，即可。(过滤后溶液呈金黄色，于棕色瓶中保存，可使用多年。如放置后变为绿色，可加溴0.2ml，煮沸除去多余的溴即可。)
4.2 20％碳酸钠溶液：取20.00g碳酸钠溶解于100ml去离子水中，煮沸，趁热过滤，放冷，即可。
4.3 50％甲醇溶液：取50ml量筒，量取甲醇50ml置100ml容量瓶中，加去离子使成100ml，即可。
4.4计算
W1＝(C1×V1)/M1×100％；
C1：照标准曲线得待测样的浓度(mg/mL)；
V1：待测样的体积(mL)；
M1：待测样的质量(mg)。
上述说明并非对本发明的限制，本发明也并不限于上述举例。本技术领域的普通技术人员在本发明的实质范围内，做出的变化、改型、添加或替换，也应属于本发明的保护范围。

Claims (5)

1.一种水溶性葡萄籽提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)提取：称取原料，加入5～8倍量水于100℃进行搅拌提取2～3次，每次2.5h；
(2)过滤：滤布过滤，收集滤液，将得到的滤液通过板框压滤机精过滤，得透亮的滤液；
(3)树脂吸附：将(2)步的滤液过DM21树脂吸附，吸附流速为2BV/h；
(4)洗杂：用2BV水洗杂；
(5)解吸：70％乙醇解吸，解吸流速为1BV/h，收集解吸液1.5BV，将解析液再次通过板框压滤机；
(6)浓缩：将(5)步得到的解吸液，减压浓缩为婆美度为20；
(7)干燥：将(6)步得到的浓缩液进行进行喷雾干燥，得成品。
2.如权利要求1所述的一种水溶性葡萄籽提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述滤布的目数为200目。
3.如权利要求1所述的一种水溶性葡萄籽提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤(6)中，所述减压浓缩的条件为-0.080～-0.1MPa，50～70℃。
4.如权利要求1所述的一种水溶性葡萄籽提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤(7)中，所述喷雾干燥时的进口温度为185～200℃，出口温度为85～100℃。
5.一种水溶性葡萄籽提取物，其特征在于，采用如权利要求1～4任意一项所述的一种水溶性葡萄籽提取物的制备方法制备得到。
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