CN112375697A - 一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法 - Google Patents
一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112375697A CN112375697A CN202011138683.9A CN202011138683A CN112375697A CN 112375697 A CN112375697 A CN 112375697A CN 202011138683 A CN202011138683 A CN 202011138683A CN 112375697 A CN112375697 A CN 112375697A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- parts
- culture medium
- culturing
- inoculating
- lactic acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 title claims abstract description 55
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 47
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 40
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 33
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 title claims abstract description 20
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 title claims abstract description 20
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract description 45
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 45
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 42
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims abstract description 26
- 241000194032 Enterococcus faecalis Species 0.000 claims abstract description 24
- 229940032049 enterococcus faecalis Drugs 0.000 claims abstract description 24
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 claims abstract description 22
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 claims abstract description 22
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 claims abstract description 22
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims abstract description 21
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims abstract description 21
- RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N Methicillin Chemical compound COC1=CC=CC(OC)=C1C(=O)N[C@@H]1C(=O)N2[C@@H](C(O)=O)C(C)(C)S[C@@H]21 RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 claims abstract description 7
- 229960003085 meticillin Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 230000000243 photosynthetic effect Effects 0.000 claims description 33
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 31
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 31
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 24
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 23
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims description 23
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 claims description 20
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 claims description 20
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 claims description 20
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 18
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims description 18
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 18
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims description 18
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 12
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 12
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 12
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 12
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 12
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 12
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 12
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims description 12
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims description 12
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 12
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims description 9
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 6
- 235000009467 Carica papaya Nutrition 0.000 claims description 6
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims description 6
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 6
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 claims description 6
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 claims description 6
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims description 6
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 6
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 claims description 6
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims description 6
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 6
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims description 6
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 claims description 6
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 claims description 6
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 claims description 6
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 6
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 claims description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 6
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 6
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 claims description 6
- YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N triammonium citrate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[NH4+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 6
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000001393 triammonium citrate Substances 0.000 claims description 5
- 235000011046 triammonium citrate Nutrition 0.000 claims description 5
- 241000352457 Shivajiella indica Species 0.000 claims description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 claims 11
- 240000006432 Carica papaya Species 0.000 claims 1
- 238000009360 aquaculture Methods 0.000 abstract description 17
- 244000144974 aquaculture Species 0.000 abstract description 17
- 230000036039 immunity Effects 0.000 abstract description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 10
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 abstract description 8
- XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N ammonia nh3 Chemical compound N.N XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 abstract description 7
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 5
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 abstract description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 abstract description 4
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 abstract description 4
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 abstract description 4
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 abstract description 4
- 241000143060 Americamysis bahia Species 0.000 abstract description 3
- 241001414834 Ephemeroptera Species 0.000 abstract description 3
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 abstract description 2
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 abstract description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 10
- 241000219173 Carica Species 0.000 description 5
- 239000007621 bhi medium Substances 0.000 description 5
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JVMRPSJZNHXORP-UHFFFAOYSA-N ON=O.ON=O.ON=O.N Chemical compound ON=O.ON=O.ON=O.N JVMRPSJZNHXORP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 2
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 241000238557 Decapoda Species 0.000 description 1
- 208000035240 Disease Resistance Diseases 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 1
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 1
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 102000038379 digestive enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108091007734 digestive enzymes Proteins 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002360 explosive Substances 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000010842 industrial wastewater Substances 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- -1 pathosin Chemical compound 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 1
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 1
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 239000010865 sewage Substances 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
- A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
- A23K10/18—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
- A23K50/80—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for aquatic animals, e.g. fish, crustaceans or molluscs
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
- C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
- C02F3/341—Consortia of bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/113—Acidophilus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/169—Plantarum
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F2103/00—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated
- C02F2103/20—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated from animal husbandry
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
- Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish
- Y02A40/818—Alternative feeds for fish, e.g. in aquacultures
Abstract
本发明属于微生态制剂技术领域，尤其为一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：S1、将植物乳杆菌接种到MRS灭菌培养基的玻璃瓶中，在PH值6～7、生长温度30～35℃的条件下培养25～30h，将粪肠球菌接种到BHI培养基的玻璃瓶中。本发明所制得复合型乳酸菌微生态制剂在具备改进调整肠胃微生物菌种有益菌的均衡，提高水产养殖机体的免疫能力，提高动物存活率，具有维持消化道微生态平衡，促进营养物质吸收，提高机体免疫力和净化养殖水环境作用的同时，有效抑制其它病原菌的生长，培养蜉蝣动物作饵料，除增加营养，降低饲料系数外，明显降低养殖水体氨氮等有害物质的含量，分解鱼类残饵、粪便及水中有机质，促进鱼虾类健康生长。
Description
技术领域
本发明涉及微生态制剂技术领域，具体为一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法。
背景技术
随着水产养殖业集约化经营模式的提高，残存饵料的腐烂、生物代谢物和生物残体沉积，使池塘有机污染严重，导致有害藻类和病菌的大量繁殖，水质恶化。此外，人类生活污水、各种工业废水、农业退水等的超量排放，进一步污染了养殖用水水源，养殖环境恶化。而抗生素和化学药品的滥用带来了药物在鱼虾体内大量富集残留和病原菌的抗药性等问题，导致水产品质量的下降，既危害了人类健康，也污染了环境。
养殖中后期随着饵料投入量的增加，普遍出现亚硝态氮和氨氮含量偏高现象。亚硝态氮和氨氮中的非离子氨对养殖生物均有很强的毒性。亚硝态氮直接影响养殖生物血液的携带氧能力，是诱发爆发性疾病的主要环境因子，其含量的高低直接关系到水质的好坏和养殖能否成功。非离子氨进入养殖生物体内，对酶水解反应和膜稳定性会产生明显影响，表现为呼吸困难、不摄食、免疫力下降等，养殖生物生长受到抑制甚至中毒死亡。
因此，采用微生物技术修复养殖环境，是水产养殖业健康可持续发展的必然趋势。复合型乳酸菌微生态制剂是应用于水产养殖的微生物技术中的一种微生态制剂，现有的复合型乳酸菌微生态制剂通常采用植物乳杆菌与粪肠球菌作为主要成分，起到提高水产养殖机体的免疫能力的作用，同时具有较好的净化养殖水环境的作用，可促进水产养殖业健康发展。但该类复合型乳酸菌微生态制剂净化水质作用有限，仅靠粪肠球菌并不能很好的抑制其它病原菌的生长，维护水体微生态平衡，不能降低饲料系数，养殖成本高，在促进动物生长、降低养殖水体氨氮等有害物质的含量、分解鱼类残饵、粪便及水中有机质、增强免疫力及提高动物存活率等方面优势不明显。
发明内容
（一）解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，解决了现有的复合型乳酸菌微生态制剂净化水质作用有限，仅靠粪肠球菌并不能很好的抑制其它病原菌的生长，维护水体微生态平衡，不能降低饲料系数，养殖成本高，在促进动物生长、降低养殖水体氨氮等有害物质的含量、分解鱼类残饵、粪便及水中有机质、增强免疫力及提高动物存活率等方面优势不明显的问题。
（二）技术方案
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、将植物乳杆菌接种到MRS灭菌培养基的玻璃瓶中，在PH值6～7、生长温度30～35℃的条件下培养25～30h，将粪肠球菌接种到BHI培养基的玻璃瓶中，在PH值6.8～7.2、生长温度34～38℃的条件下培养18～24h，将光合细菌接种到光合细菌富集培养基的玻璃瓶中，在PH值7.5～8.5、生长温度30～34℃的条件下培养30～35h，将嗜酸乳杆菌接种到MRS灭菌培养基的玻璃瓶中，在PH值6.2～6.6、生长温度35～38℃的条件下培养18～22h；
S2、将所述S1培养得到的植物乳杆菌、粪肠球菌、光合细菌和嗜酸乳杆菌分别接种于二级发酵罐中，培养发酵，获得二级发酵培养液；
S3、将所述S2得到的二级发酵培养液按重量比混合，获得复合乳酸菌发酵液；
S4、将所述S3得到的复合乳酸菌发酵液接种到固体培养基中，混合均匀，后密封，在PH值3.0～4.0、生长温度30～36℃的条件下培养36～72h，即得复合型乳酸菌微生态制剂。
作为本发明的一种优选技术方案，所述S1中，MRS灭菌培养基的重量份组成为：大豆蛋白胨0.8～1.5份，牛肉膏0.8～1.5份，酵母浸粉0.3～0.7份，葡萄糖1.5～2.5份，磷酸氢二钾0.15～0.35份，乙酸钠0.2～0.6份，柠檬酸三铵0.1～0.3份，硫酸镁0.05～0.08份，硫酸锰0.01～0.03份，吐温0.05～0.15份，余量为蒸馏水。
作为本发明的一种优选技术方案，所述S1中，BHI培养基的重量份组成为：牛脑1.8～2.5份，牛心浸出汁2～3份，蛋白胨0.01～0.03份，葡萄糖1.5～2.5份，NaCl0.03～0.06份，琼脂0.1～0.4份，余量为蒸馏水。
作为本发明的一种优选技术方案，所述S1中，光合细菌富集培养基的重量份组成为：醋酸钠1.0～1.3份，蛋白胨0.03～0.06份，碳酸氢钠0.3～0.8份，硫代硫酸钠0.2～0.5份，氯化钠0.1～0.4份，硫酸镁0.08～0.15份，磷酸二氢钾0.03～0.07份，余量为蒸馏水。
作为本发明的一种优选技术方案，所述S3中，植物乳杆菌、粪肠球菌、光合细菌和嗜酸乳杆菌按2:2:1:2的重量比进行混合。
作为本发明的一种优选技术方案，所述S4中，固体培养基为玉米粉、麸皮、豆粕粉，苹果渣和木瓜渣。
（三）有益效果
与现有技术相比，本发明提供了一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，具备以下有益效果：
该复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，与现有技术相比，所制得复合型乳酸菌微生态制剂在具备改进调整肠胃微生物菌种有益菌的均衡，提高水产养殖机体的免疫能力，提高动物存活率，具有维持消化道微生态平衡，促进营养物质吸收，提高机体免疫力和净化养殖水环境作用的同时，有效抑制其它病原菌的生长，培养蜉蝣动物作饵料，除增加营养，降低饲料系数外，明显降低养殖水体氨氮等有害物质的含量，分解鱼类残饵、粪便及水中有机质，促进鱼虾类健康生长。
附图说明
图1为本发明中复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法流程示意图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例
实施例1
请参阅图1，本发明提供以下技术方案：一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、将植物乳杆菌接种到MRS灭菌培养基的玻璃瓶中，在PH值6.2、生长温度30℃的条件下培养25h，将粪肠球菌接种到BHI培养基的玻璃瓶中，在PH值6、生长温度34℃的条件下培养18h，将光合细菌接种到光合细菌富集培养基的玻璃瓶中，在PH值7.5、生长温度30℃的条件下培养30h，将嗜酸乳杆菌接种到MRS灭菌培养基的玻璃瓶中，在PH值6.2、生长温度35℃的条件下培养18h；
S2、将S1培养得到的植物乳杆菌、粪肠球菌、光合细菌和嗜酸乳杆菌分别接种于二级发酵罐中，培养发酵，获得二级发酵培养液；
S3、将S2得到的二级发酵培养液按重量比混合，获得复合乳酸菌发酵液；
S4、将S3得到的复合乳酸菌发酵液接种到固体培养基中，混合均匀，后密封，在PH值4.0、生长温度36℃的条件下培养72h，即得复合型乳酸菌微生态制剂。
具体的，S1中，MRS灭菌培养基的重量份组成为：大豆蛋白胨0.8份，牛肉膏0.8份，酵母浸粉0.3份，葡萄糖1.5份，磷酸氢二钾0.15份，乙酸钠0.2份，柠檬酸三铵0.1份，硫酸镁0.05份，硫酸锰0.01份，吐温0.05份，余量为蒸馏水。
具体的，S1中，BHI培养基的重量份组成为：牛脑1.8份，牛心浸出汁3份，蛋白胨0.01份，葡萄糖1.5份，NaCl0.03份，琼脂0.1份，余量为蒸馏水。
具体的，S1中，光合细菌富集培养基的重量份组成为：醋酸钠1.0份，蛋白胨0.03份，碳酸氢钠0.3份，硫代硫酸钠0.2份，氯化钠0.1份，硫酸镁0.08份，磷酸二氢钾0.03份，余量为蒸馏水。
具体的，S3中，植物乳杆菌、粪肠球菌、光合细菌和嗜酸乳杆菌按2:2:1:2的重量比进行混合。
具体的，S4中，固体培养基为玉米粉、麸皮、豆粕粉，苹果渣和木瓜渣。
实施例2
请参阅图1，本发明提供以下技术方案：一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、将植物乳杆菌接种到MRS灭菌培养基的玻璃瓶中，在PH值6.2、生长温度32℃的条件下培养26h，将粪肠球菌接种到BHI培养基的玻璃瓶中，在PH值6.9、生长温度35℃的条件下培养20h，将光合细菌接种到光合细菌富集培养基的玻璃瓶中，在PH值7.7、生长温度31℃的条件下培养31h，将嗜酸乳杆菌接种到MRS灭菌培养基的玻璃瓶中，在PH值6.4、生长温度36℃的条件下培养19h；
S2、将S1培养得到的植物乳杆菌、粪肠球菌、光合细菌和嗜酸乳杆菌分别接种于二级发酵罐中，培养发酵，获得二级发酵培养液；
S3、将S2得到的二级发酵培养液按重量比混合，获得复合乳酸菌发酵液；
S4、将S3得到的复合乳酸菌发酵液接种到固体培养基中，混合均匀，后密封，在PH值3.4、生长温度32℃的条件下培养42h，即得复合型乳酸菌微生态制剂。
具体的，S1中，MRS灭菌培养基的重量份组成为：大豆蛋白胨1.0份，牛肉膏1.0份，酵母浸粉0.4份，葡萄糖1.7份，磷酸氢二钾0.2份，乙酸钠0.4份，柠檬酸三铵0.15份，硫酸镁0.06份，硫酸锰0.02份，吐温0.08份，余量为蒸馏水。
具体的，S1中，BHI培养基的重量份组成为：牛脑2.0份，牛心浸出汁2.4份，蛋白胨0.015份，葡萄糖1.8份，NaCl0.04份，琼脂0.2份，余量为蒸馏水。
具体的，S1中，光合细菌富集培养基的重量份组成为：醋酸钠1.15份，蛋白胨0.04份，碳酸氢钠0.5份，硫代硫酸钠0.3份，氯化钠0.2份，硫酸镁0.1份，磷酸二氢钾0.04份，余量为蒸馏水。
具体的，S3中，植物乳杆菌、粪肠球菌、光合细菌和嗜酸乳杆菌按2:2:1:2的重量比进行混合。
具体的，S4中，固体培养基为玉米粉、麸皮、豆粕粉，苹果渣和木瓜渣。
实施例3
请参阅图1，本发明提供以下技术方案：一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、将植物乳杆菌接种到MRS灭菌培养基的玻璃瓶中，在PH值6.4、生长温度33℃的条件下培养27h，将粪肠球菌接种到BHI培养基的玻璃瓶中，在PH值7.0、生长温度37℃的条件下培养22h，将光合细菌接种到光合细菌富集培养基的玻璃瓶中，在PH值8.1、生长温度33℃的条件下培养33h，将嗜酸乳杆菌接种到MRS灭菌培养基的玻璃瓶中，在PH值6.5、生长温度37℃的条件下培养21h；
S2、将S1培养得到的植物乳杆菌、粪肠球菌、光合细菌和嗜酸乳杆菌分别接种于二级发酵罐中，培养发酵，获得二级发酵培养液；
S3、将S2得到的二级发酵培养液按重量比混合，获得复合乳酸菌发酵液；
S4、将S3得到的复合乳酸菌发酵液接种到固体培养基中，混合均匀，后密封，在PH值3.8、生长温度35℃的条件下培养55h，即得复合型乳酸菌微生态制剂。
具体的，S1中，MRS灭菌培养基的重量份组成为：大豆蛋白胨1.2份，牛肉膏1.2份，酵母浸粉0.5份，葡萄糖2.1份，磷酸氢二钾0.25份，乙酸钠0.4份，柠檬酸三铵0.2份，硫酸镁0.07份，硫酸锰0.025份，吐温0.12份，余量为蒸馏水。
具体的，S1中，BHI培养基的重量份组成为：牛脑2.2份，牛心浸出汁2.6份，蛋白胨0.025份，葡萄糖2.3份，NaCl0.05份，琼脂0.3份，余量为蒸馏水。
具体的，S1中，光合细菌富集培养基的重量份组成为：醋酸钠1.25份，蛋白胨0.05份，碳酸氢钠0.6份，硫代硫酸钠0.4份，氯化钠0.3份，硫酸镁0.13份，磷酸二氢钾0.05份，余量为蒸馏水。
具体的，S3中，植物乳杆菌、粪肠球菌、光合细菌和嗜酸乳杆菌按2:2:1:2的重量比进行混合。
具体的，S4中，固体培养基为玉米粉、麸皮、豆粕粉，苹果渣和木瓜渣。
实施例4
请参阅图1，本发明提供以下技术方案：一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、将植物乳杆菌接种到MRS灭菌培养基的玻璃瓶中，在PH值6.8、生长温度35℃的条件下培养30h，将粪肠球菌接种到BHI培养基的玻璃瓶中，在PH值7.2、生长温度38℃的条件下培养24h，将光合细菌接种到光合细菌富集培养基的玻璃瓶中，在PH值8.4、生长温度34℃的条件下培养35h，将嗜酸乳杆菌接种到MRS灭菌培养基的玻璃瓶中，在PH值6.6、生长温度38℃的条件下培养22h；
S2、将S1培养得到的植物乳杆菌、粪肠球菌、光合细菌和嗜酸乳杆菌分别接种于二级发酵罐中，培养发酵，获得二级发酵培养液；
S3、将S2得到的二级发酵培养液按重量比混合，获得复合乳酸菌发酵液；
S4、将S3得到的复合乳酸菌发酵液接种到固体培养基中，混合均匀，后密封，在PH值4.0、生长温度36℃的条件下培养72h，即得复合型乳酸菌微生态制剂。
具体的，S1中，MRS灭菌培养基的重量份组成为：大豆蛋白胨1.5份，牛肉膏1.5份，酵母浸粉0.7份，葡萄糖2.5份，磷酸氢二钾0.35份，乙酸钠0.6份，柠檬酸三铵0.3份，硫酸镁0.08份，硫酸锰0.03份，吐温0.15份，余量为蒸馏水。
具体的，S1中，BHI培养基的重量份组成为：牛脑2.5份，牛心浸出汁3份，蛋白胨0.03份，葡萄糖2.5份，NaCl0.06份，琼脂0.4份，余量为蒸馏水。
具体的，S1中，光合细菌富集培养基的重量份组成为：醋酸钠1.3份，蛋白胨0.06份，碳酸氢钠0.8份，硫代硫酸钠0.5份，氯化钠0.4份，硫酸镁0.15份，磷酸二氢钾0.07份，余量为蒸馏水。
具体的，S3中，植物乳杆菌、粪肠球菌、光合细菌和嗜酸乳杆菌按2:2:1:2的重量比进行混合。
具体的，S4中，固体培养基为玉米粉、麸皮、豆粕粉，苹果渣和木瓜渣。
由本发明制备方法制备的复合型乳酸菌微生态制剂，其主要成分包括植物乳杆菌、粪肠球菌、光合细菌和嗜酸乳杆菌，在相应的MRS灭菌培养基、BHI培养基、光合细菌富集培养基以及MRS灭菌培养基的富集培养下进行菌种活化；发酵后植物乳杆菌根据造成柠檬酸、病菌素、双氧水和双乙酰等几种抗菌物质，起到推动营养元素消化吸收等几种作用，能改进调整肠胃微生物菌种有益菌的均衡，提高水产养殖机体的免疫能力；粪肠球菌是一种革兰氏阳性兼性厌氧菌，能耐受较低的pH，对胃液、肠液、胆盐的耐受性较高，是较具应用潜力的益生菌之一，在水产养殖中粪肠球菌具有维持消化道微生态平衡，促进营养物质吸收，提高机体免疫力和净化养殖水环境的作用，可促进水产养殖业健康发展；光合细菌能抑制其它病原菌的生长，净化水质，能够维护水体微生态平衡，培养蜉蝣动物作饵料，除增加营养，降低饲料系数外，还可起到刺激动物免疫系统，增强消化和抗病能力，促进生长的作用；嗜酸乳杆菌能有效调整动物肠道的菌群平衡，调节机体肠粘膜的免疫活性，增强免疫力，提高动物存活率，能分泌乳酸，并产生蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等消化酶，促进动物生长，明显降低养殖水体氨氮等有害物质的含量，分解鱼类残饵、粪便及水中有机质，促进鱼虾类健康生长，以及能够起到改善微生态环境的作用。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1、将植物乳杆菌接种到MRS灭菌培养基的玻璃瓶中，在PH值6～7、生长温度30～35℃的条件下培养25～30h，将粪肠球菌接种到BHI培养基的玻璃瓶中，在PH值6.8～7.2、生长温度34～38℃的条件下培养18～24h，将光合细菌接种到光合细菌富集培养基的玻璃瓶中，在PH值7.5～8.5、生长温度30～34℃的条件下培养30～35h，将嗜酸乳杆菌接种到MRS灭菌培养基的玻璃瓶中，在PH值6.2～6.6、生长温度35～38℃的条件下培养18～22h；
S2、将所述S1培养得到的植物乳杆菌、粪肠球菌、光合细菌和嗜酸乳杆菌分别接种于二级发酵罐中，培养发酵，获得二级发酵培养液；
S3、将所述S2得到的二级发酵培养液按重量比混合，获得复合乳酸菌发酵液；
S4、将所述S3得到的复合乳酸菌发酵液接种到固体培养基中，混合均匀，后密封，在PH值3.0～4.0、生长温度30～36℃的条件下培养36～72h，即得复合型乳酸菌微生态制剂。
2.根据权利要求1所述的一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述S1中，MRS灭菌培养基的重量份组成为：大豆蛋白胨0.8～1.5份，牛肉膏0.8～1.5份，酵母浸粉0.3～0.7份，葡萄糖1.5～2.5份，磷酸氢二钾0.15～0.35份，乙酸钠0.2～0.6份，柠檬酸三铵0.1～0.3份，硫酸镁0.05～0.08份，硫酸锰0.01～0.03份，吐温0.05～0.15份，余量为蒸馏水。
3.根据权利要求1所述的一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述S1中，BHI培养基的重量份组成为：牛脑1.8～2.5份，牛心浸出汁2～3份，蛋白胨0.01～0.03份，葡萄糖1.5～2.5份，NaCl0.03～0.06份，琼脂0.1～0.4份，余量为蒸馏水。
4.根据权利要求1所述的一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述S1中，光合细菌富集培养基的重量份组成为：醋酸钠1.0～1.3份，蛋白胨0.03～0.06份，碳酸氢钠0.3～0.8份，硫代硫酸钠0.2～0.5份，氯化钠0.1～0.4份，硫酸镁0.08～0.15份，磷酸二氢钾0.03～0.07份，余量为蒸馏水。
5.根据权利要求1所述的一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述S3中，植物乳杆菌、粪肠球菌、光合细菌和嗜酸乳杆菌按2:2:1:2的重量比进行混合。
6.根据权利要求1所述的一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述S4中，固体培养基为玉米粉、麸皮、豆粕粉，苹果渣和木瓜渣。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011138683.9A CN112375697A (zh) | 2020-10-22 | 2020-10-22 | 一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011138683.9A CN112375697A (zh) | 2020-10-22 | 2020-10-22 | 一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112375697A true CN112375697A (zh) | 2021-02-19 |
Family
ID=74581730
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202011138683.9A Pending CN112375697A (zh) | 2020-10-22 | 2020-10-22 | 一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112375697A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114317360A (zh) * | 2021-12-31 | 2022-04-12 | 江苏德禧生物科技有限公司 | 固体培养基、液体培养基以及长双歧杆菌高密度培养方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH09205922A (ja) * | 1996-02-02 | 1997-08-12 | Toyo Bio Reactor Kk | 魚介類の養殖方法 |
| CN109251874A (zh) * | 2018-09-25 | 2019-01-22 | 厦门惠盈动物科技有限公司 | 一种益生菌制剂及其制备方法和应用 |
| CN109287865A (zh) * | 2018-10-31 | 2019-02-01 | 宁波中瑞生物科技有限公司 | 一种复合发酵蛋白饲料及其制备方法 |
| CN111671000A (zh) * | 2020-05-30 | 2020-09-18 | 青岛玛斯特生物技术有限公司 | 一种包含粪肠球菌的微生态复合预混合饲料及其在水产养殖中的应用 |
-
2020
- 2020-10-22 CN CN202011138683.9A patent/CN112375697A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH09205922A (ja) * | 1996-02-02 | 1997-08-12 | Toyo Bio Reactor Kk | 魚介類の養殖方法 |
| CN109251874A (zh) * | 2018-09-25 | 2019-01-22 | 厦门惠盈动物科技有限公司 | 一种益生菌制剂及其制备方法和应用 |
| CN109287865A (zh) * | 2018-10-31 | 2019-02-01 | 宁波中瑞生物科技有限公司 | 一种复合发酵蛋白饲料及其制备方法 |
| CN111671000A (zh) * | 2020-05-30 | 2020-09-18 | 青岛玛斯特生物技术有限公司 | 一种包含粪肠球菌的微生态复合预混合饲料及其在水产养殖中的应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 陈谦等: "用于水产养殖的微生态制剂的研究和应用进展", 《应用与环境生物学报》 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114317360A (zh) * | 2021-12-31 | 2022-04-12 | 江苏德禧生物科技有限公司 | 固体培养基、液体培养基以及长双歧杆菌高密度培养方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101974434B (zh) | 一种水产养殖用多菌种微生物复合制剂及其制备方法 | |
| CN100494093C (zh) | 水产养殖营养调水剂 | |
| CN101591631B (zh) | Em原露及其生产方法 | |
| CN101269884A (zh) | 水环境微生物修复剂及其制备方法 | |
| CN107574136B (zh) | 一种水产养殖用半固体微生态制剂的制备方法 | |
| CN108865944B (zh) | 一种用于鱼饲养的微生物活菌剂 | |
| CN105918620A (zh) | 水产品饲料用微生物菌剂 | |
| CN111733091B (zh) | 一种枯草芽孢杆菌用发酵培养基及其制备方法、枯草芽孢杆菌制剂的制备方法 | |
| CN108660090A (zh) | 一种水产养殖用复合微生物制剂及方法 | |
| CN111172077A (zh) | 一种调节生猪肠道菌群的微生物制剂及制备方法 | |
| CN109607819A (zh) | 一种微生物控制水产养殖法 | |
| CN109549024A (zh) | 一种鱼用饲料添加剂及其制备方法 | |
| CN109971682A (zh) | 一种用于水产养殖的em菌液及其制作方法和应用 | |
| CN111011665A (zh) | 一种促进水产动物生长的微生物发酵湿料及其制备方法和应用 | |
| CN108634119B (zh) | 一种人工哺育0-5日龄乳鸽用人工鸽乳及其制备方法 | |
| CN109549025A (zh) | 一种虾用饲料添加剂及其制备方法 | |
| CN104621357A (zh) | 一种新型的液态饲料添加剂及其制备工艺 | |
| CN110982750A (zh) | 一种沼泽红假单胞菌高密度发酵方法及其应用 | |
| CN112375697A (zh) | 一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法 | |
| CN101891307B (zh) | 海水养殖生物净化剂及其制备方法 | |
| CN110642391A (zh) | 一种池塘用水处理剂 | |
| CN1272260C (zh) | 养殖动物微生物饮用水改良剂及制作方法 | |
| CN110699302B (zh) | 一种提高纳豆枯草芽孢杆菌生物量的培养方法 | |
| CN112825980A (zh) | 基于微生物发酵生产畜牧水产用含葡萄糖氧化酶功能型活性肽粉的方法 | |
| CN112369528A (zh) | 改善禽类肠道环境的微生物制剂及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210219 |