CN112326862A - 一种茯苓配方颗粒及其制备方法与薄层鉴别方法 - Google Patents

Abstract

本发明采用水作为溶剂提取得到有效物质，以特定种类、比例的展开剂、显色剂进行薄层展开、显色，利用薄层色谱差异进行区分，鉴别方法经过摸索找出最佳方法，可作为茯苓专属薄层鉴别方法；本发明准确、快速，重现性好，提供了一种快速鉴别茯苓的方法；本发明提供制备的配方颗粒剂中各成分组成与标准汤剂一致，有效成分的含量优于标准汤剂，保证配方颗粒剂的药效；同时本发明提供的工艺简单、有效、生物利用度高、效率高、节能且稳定，非常适合大规模工业化生产。

Description

一种茯苓配方颗粒及其制备方法与薄层鉴别方法

技术领域

本发明属于中药药物制剂和鉴别技术领域，具体涉及一种茯苓配方颗粒及其制备方法与薄层鉴别方法。

背景技术

茯苓为多孔菌科植物茯苓的干燥菌核。有栽培和野生两种，栽培以安徽产量较大，称为“安苓”；野生以云南产质量为佳，称为“云苓”。野生茯苓一般在7月至次年3月间到马尾松林中采取。以体重、质坚实，外皮色棕褐、纹细、无裂隙，断面白色细腻，黏牙力强者为佳。茯苓味甘、淡，性平；归心、肺、脾、肾经。具有利水渗湿、健脾、宁心的作用，常用于水肿尿少、痰饮眩悸、脾虚食少、便溏泄泻、心神不安、惊悸失眠等病症。

茯苓中富含多种化学成分，主要有三萜类、多糖类、甾醇类、挥发油类、蛋白质、氨基酸及微量元素等，其中三萜类和多糖类化合物为茯苓的主要

活性成分，茯苓多糖成分约占其菌核质量的70%～90%，并具有抗肿瘤、抗炎、免疫调节等功效。

配方颗粒是针对中药有效成分的理化性质,利用现代制药技术，以中药饮片为原料，经过提取、浓缩、分离、干燥、混合、制粒、整粒、包装等工序制备而成，保证了原料饮片的全部特征，使有效成分最大限度地被提取出来。除去杂质，确保颗粒的稳定性，医师辨证论治可随症进行药量加减，本发明制备的颗粒药性强、药效高，同时又不需要煎煮、直接冲服、服用量少、作用迅速、疗效确切、携带方便、易于调制和适合工业化生产等诸多优点。

专利号CN104958326A公开了一种茯苓配方颗粒的制备方法，具体步骤为：（1）对茯苓饮片进行多次搅拌提取，提取过程是加水后加热沸腾并煎煮，在第一次提取时加水后浸润再煎煮；（2）将多次提取后得到的提取液合并，静置过滤得到药液，将所述药液浓缩至在60℃下相对密度为1.08～1.12g/ml的流浸膏；（3）将所述流浸膏与辅料混合，搅拌均匀，进行喷雾干燥制粒得到茯苓配方颗粒，其中并没有涉及到茯苓专属薄层鉴别方法。

目前配方颗粒质量控制内容一般包括外观鉴别、性状检查、浸出物、薄层鉴别以及有效成分的含量测定，较难全面科学的鉴定中药材及其制剂的质量，故需要一种专门针对茯苓饮片及配方颗粒的薄层鉴别方法。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术缺陷，提供了一种茯苓配方颗粒及其制备方法与薄层鉴别方法。

其技术方案为：

一种茯苓配方颗粒制备方法，包括以下步骤：

步骤一：取茯苓饮片，加水，茯苓饮片：水=1:9，浸泡30分钟，加热煮沸60分钟，煎煮液用200目筛网过滤，滤液另存；再加水，茯苓饮片：水=1:7，加热煮沸40分钟，煎煮液用200目筛网过滤，合并两次滤液；

步骤二：将步骤一中合并后的滤液加热浓缩，浓缩为相对密度1.20～1.30（60℃）的浸膏；

步骤三：将浓缩后的浸膏干燥后粉碎，得浸膏粉备用；

步骤四：将浸膏粉与辅料混合，比例为浸膏粉：辅料=1：5，混匀，制粒后分装。

一种茯苓配方颗粒薄层鉴别方法，包括以下步骤：

步骤一：取样品3g，研细，加5ml盐酸润湿，再加乙酸乙酯20ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液浓缩至5ml，加乙酸乙酯5ml振摇，静置，取上清液作为供试品溶液；

步骤二：取茯苓对照药材1g按步骤一的方法制成对照药材溶液；

步骤三：吸取供试品溶液2μl、对照药材溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（10：4：0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。

具体工艺参数如下：

1.提取

加水煎煮2次，第一次加入9~12倍量的水，浸泡10~30分钟，加热至沸腾，煎煮60~80分钟，煎煮液趁热用200目筛过滤，滤液另存；第二次加入7~9倍量水，加热至沸腾，煎煮40~60分钟，煎煮液趁热用200目筛过滤，合并两次滤液；

2.浓缩

常压加热浓缩成一定比重的流浸膏；

3.干燥

热风循环烘箱进行干燥，干燥温度60~80℃，干膏水分3~5%；

4.粉碎

干膏粉碎成细粉，过3~9号筛；

5.混合

干膏细粉与适量辅料混合均匀。

6.成型

6.1辅料选择

麦芽糊精是DE值5-20的淀粉水解产物，是一种价格低廉、口感滑腻、没有任何味道的营养性多糖。流动性良好，无异味，几乎没有甜度，在水中溶解性能良好，有适度的粘度，吸湿性低，不易结团，有较好的载体作用，极易被人体吸收，成膜性能好。特别适宜作病人和婴幼儿童食品的基础原料；

糊精，别名为玉米糊精，无异味、甜度低，吸潮性低，微溶于冷水，较易溶于热水形成黏性溶液，产品的溶化性能不及麦芽糊精；

经试验对比，辅料选择为麦芽糊精。

6.2辅料用量

采用逐渐递增方式加入辅料，直至成型效果较好时确定用量。

本发明目的之二在于提供一种茯苓配方颗粒薄层鉴别方法，所述的方法包括：取本品3g，研细，加5ml盐酸润湿，再加乙酸乙酯20ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液浓缩至5ml，加乙酸乙酯5ml振摇，静置数分钟后，取上清液作为供试品溶液。另取茯苓对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2015年版通则0502）试验，吸取上述供试品溶液2μl、对照药材溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（10：4：0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

本发明具有以下有益效果：

（1）本发明采用水作为溶剂提取得到有效物质，以特定种类、比例的展开剂、显色剂进行薄层展开、显色，利用薄层色谱差异进行区分，鉴别方法经过摸索找出最佳方法，可作为茯苓专属薄层鉴别方法；

（2）本发明准确、快速，重现性好，提供了一种快速鉴别茯苓的方法；

（3）本发明提供制备的配方颗粒剂中各成分组成与标准汤剂一致，有效成分的含量优于标准汤剂，保证配方颗粒剂的药效；同时本发明提供的工艺简单、有效、生物利用度高、效率高、节能且稳定，非常适合大规模工业化生产。

附图说明

图1工艺流程图；

图2：薄层色谱展开剂考察：1：阴性对照溶液；2：茯苓对照药材溶液；3、4、5：供试品溶液（批号：P190301、P190302、P190303）；

图3：薄层色谱点样量考察：1-3：茯苓对照药材溶液，点样量依次为：5μl、8μl、10μl；

4-9：供试品溶液，点样量依次为：1μl、2μl、3μl、0.25μl、0.5μl、1μl；

图4：薄层色谱展开温度、湿度考察：1：阴性对照溶液；2：茯苓对照药材溶液；3、4、5：供试品溶液（批号：P190301、P190302、P190303）；

图5：薄层色谱薄层板考察：1：阴性对照溶液；2：茯苓对照药材溶液；3、4、5：供试品溶液（批号：P190301、P190302、P190303）；

图6：薄层色谱阴性对照考察：1：阴性对照溶液；2：茯苓对照药材溶液；3、4、5：供试品溶液（批号：P190301、P190302、P190303）；

图7茯苓配方颗粒薄层色谱图

1：阴性对照溶液；2：茯苓对照药材溶液；3、4、5：茯苓配方颗粒（批号：P190301、P190302、P190303）。

具体实施方式

下面通过实施例和附图进一步阐述本发明的实质性特点和显著的作用，但本发明的保护范围绝非仅局限于实施例。

所述的仪器设备、耗材、试剂都是常规物资，市场上易于采购。

实施例1

在充分研究古今文献的基础上，考虑中药药性、药用部位、质地等因素，并参照卫生部、国家中医药管理局《医疗机构中药煎药室管理规范》国中医药发〔2009〕3号文中关于煎药的操作方法要求进行的。

一种茯苓配方颗粒及其制备方法由以下组分：10批小试工艺研究及数据分析

主要试验物料及仪器设备

物料：茯苓饮片、饮用水、麦芽糊精、96%食用乙醇。

试验设备及仪器为常规装置，市场上均可采购，主要包括：粉碎机，提取锅，不锈钢锅，热风循环烘箱，电子天平，量筒，烧杯等。

1、提取

茯苓配方颗粒提取工艺参数进行小试，实验数据如下：

结果表明：滤液总量相对平均偏差小于10%，表明该提取方法易操作及稳定，能耗经济，接近传统汤剂的煎煮方法，暂定茯苓配方颗粒的提取工艺关键参数为：浸泡30分钟；煎煮2次；第一次加9倍量水，煎煮60分钟，第二次加7倍量水，煎煮40分钟；煎煮液过200目筛，合并滤液。

2、浓缩

常压加热浓缩进行小试，实验数据如下：

结果表明：在浓缩过程中均未见焦糊等异常现象，表明常压加热浓缩方法可行，浸膏比重控制在1.20~1.30（60℃），合理可行。

3、干燥粉碎

热风循环烘箱常压干燥，双筛法检测细度进行小试，实验数据如下：

结果表明：温度控制在不超过80℃，能够满足干燥的需求。水分不超过5%的情况下，干膏能粉碎且符合细粉要求。茯苓配方颗粒的干燥粉碎工艺关键参数为：水分≤5%；粉碎目数：80-100目；出膏率（以纯浸膏粉计）范围为：1.0%-2.0%。

4、成型

采用逐渐递增方式加入辅料，直至成型效果较好，实验数据如下：

结果表明：制成的颗粒品质较好，成品收率90.0%以上，辅料用量范围为：50~100g，在保证制粒成型的前提下，投料1000g，制得颗粒93.0g。

经折算，每1g颗粒相当于10.75g饮片，在保持工艺不变且制得量为1000g颗粒的前提下，所需理论投料量为10750g。

通过对10批小试茯苓配方颗粒制备工艺中关于提取时间、出膏率、干燥温度、水分控制、辅料用量等关键参数实验数据的统计与分析，初步确定每克颗粒相当于原药材饮片量的关键参数，基本确定茯苓配方颗粒的制备工艺。

综上所述，茯苓配方颗粒的制备工艺拟定为：取茯苓饮片10750g，加水煎煮两次，第一次加水9倍量，浸泡30分钟，加热煮沸60分钟，煎煮液用200目筛网过滤，滤液另存；第二次加水7倍量，加热煮沸40分钟，煎煮液用200目筛网过滤，合并两次滤液。把合并后的滤液浓缩成相对密度为1.20~1.30(60℃)的浸膏，干燥，粉碎，加适量辅料，混匀，制粒，共制成1000g，分装，即得。

实施例2

1.放大倍数连续生产三批茯苓配方颗粒制备工艺验证方案

按小试拟定的制备工艺同步放大生产，即取茯苓饮片60kg（放大5.6倍），加水煎煮两次，合并滤液，滤过，滤液浓缩成浸膏。干燥，粉碎，加入辅料适量，混匀，制粒，即得。

2.主要生产设备

提取设备:直筒提取罐、药液储罐。

浓缩设备：双效真空浓缩器、单效真空浓缩器。

干燥设备：低温真空带式干燥机、真空干燥机、喷雾干燥机。

粉碎设备：高速万能吸尘粉碎机。

混合设备：双锥混合机、方锥混合机。

制粒设备：干法制粒机。

包装设备：自动颗粒包装机、半自动颗粒灌装机、全自动颗粒瓶装线。

3.连续生产三批生产数据统计与分析

按拟定的生产工艺方案，进行3批次放大生产，关键工艺参数如下：

结果表明：出膏率、辅料用量等关键工艺参数，与小试研究拟定的制备工艺参数比较接近，重现性较好。

4.制定生产工艺流程

根据验证结果，制定茯苓配方颗粒的生产工艺草案为：

取茯苓饮片10000g，加水煎煮两次，第一次加水9倍量，浸泡30分钟，加热煮沸60分钟，煎煮液用200目筛网过滤，滤液另存；第二次加水7倍量，加热煮沸40分钟，煎煮液用200目筛网过滤，合并两次滤液。把合并后的滤液浓缩成相对密度为1.20~1.30(60℃)的浸膏。干燥，粉碎，再加适量辅料，混匀，制粒，共制成1000g，分装，即得。

2、出膏率范围（%）：1.51×（1±25%）。

实施例3

【鉴别】薄层鉴别，参照《中国药典》2015年版一部“茯苓”药材“鉴别”项制定本方法，并按正文方法进行试验，结果薄层色谱斑点清晰，重现性较好，辅料无干扰，方法可行，列入标准正文作为本品的鉴别方法。具体方法如下：

供试品溶液制备：取本品（批号分别为：P190301、P190302、P190303）3g，研细，加5ml盐酸润湿，再加乙酸乙酯20ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液浓缩至5ml，加乙酸乙酯5ml振摇，静置数分钟后，取上清液作为供试品溶液。

对照药材溶液制备：取茯苓对照药材1g（批号：121117-201509；来源：中国食品药品检定研究院），同法制成对照药材溶液。

薄层板：硅胶G薄层板。

点样量：供试品溶液2μl、对照药材溶液5μl。

展开剂：甲苯-乙酸乙酯-甲酸（10：4：0.5）为展开剂。

显色及检视：置紫外光灯（365nm）下检视。

结果：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

（1）展开剂考察

分别配制两种展开剂，A:甲苯-乙酸乙酯（10：4）；B:甲苯-乙酸乙酯-甲酸（10：4：0.5）。进行试验。结果见图2。由考察可知，展开剂B对茯苓鉴别具有更好的分离效果。

（2）点样量考察

选择展开剂B，对不同点样量进行考察，结果如图3所示。由考察结果可知，对照药材5μl、供试品2μl点样量时已能明显观察斑点，且分离效果好。故优选对照药材5μl、供试品2μL作为点样量。

（3）展开温度、湿度考察

选择展开剂B，对不同的展开温度、湿度进行考察（11℃，52%；16℃，42%），结果如图4所示。由考察结果可知，该方法在温度、湿度变化下色谱图效果略有不同，但均能达到良好的分离效果效果。

（4）薄层板的考察

选择展开剂B，对不同厂家的薄层板进行考察分别对硅胶G板（青岛海洋）和硅胶G板（青岛鼎康）进行比较，结果如图6所示。结果表明不同厂家薄层板对本方法影响不大，耐用性较好。

（5）阴性对照考察

选择展开剂B，分别取供试品、对照药材、阴性对照在同等条件下进行薄层色谱试验，以确定辅料对薄层色谱有无影响，结果如图6所示。由考察可知，薄层色谱在该方法下，辅料无干扰，重现性较好。

经上述方法学验证试验，结果表明以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（10：4：0.5）为展开剂可达到分离效果，且分离效果好、斑点集中；不同厂家的薄层板及温度、湿度、点样量变化可导致色谱效果略有不同，但均能达到良好的分离效果。

照上述薄层色谱鉴别方法，对该样品进行检测，均能检出，重现性好（见图7）。

Claims (3)

1.一种茯苓配方颗粒制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一：取茯苓饮片，加水，茯苓饮片：水=1:9，浸泡30分钟，加热煮沸60分钟，煎煮液用200目筛网过滤，滤液另存；再加水，茯苓饮片：水=1:7，加热煮沸40分钟，煎煮液用200目筛网过滤，合并两次滤液；

步骤二：将步骤一中合并后的滤液加热浓缩，浓缩为相对密度1.20～1.30（60℃）的浸膏；

步骤三：将浓缩后的浸膏干燥后粉碎，得浸膏粉备用；

步骤四：将浸膏粉与辅料混合，投料比例为浸膏粉：辅料=1：5，混匀，制粒后分装。

2.一种如权利要求1所述的茯苓配方颗粒薄层鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一：取样品3g，研细，加5ml盐酸润湿，再加乙酸乙酯20ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液浓缩至5ml，加乙酸乙酯5ml振摇，静置，取上清液作为供试品溶液；

步骤二：取茯苓对照药材1g按步骤一的方法制成对照药材溶液；

步骤三：吸取供试品溶液2μl、对照药材溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（10：4：0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。

3.如权利要求1所述的一种茯苓配方颗粒制备方法，其特征在于，所述辅料为麦芽糊精。

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