CN113521212A - 一种健脾和胃、平衡家禽肠道菌群的发酵中药组合物 - Google Patents

一种健脾和胃、平衡家禽肠道菌群的发酵中药组合物 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种健脾和胃、平衡家禽肠道菌群的发酵中药组合物，原料组分包括，中药部分：神曲、麦芽、山楂、黄芪、白术、党参、刺五加、陈皮、木香、藿香、蒲公英、苍术和茯苓；辅料部分：稻糠、豆粕、玉米和石粉；菌种部分：乳酸菌和枯草芽孢杆菌；本发明制备的发酵中药组合物对提高家禽生产性能、防控肠道疾病具有显著效果，且将有可能取代饲料中添加的抗肠道疾病药及其他抗生素，为改善肠道，提高饲料转化率，降低蛋壳破损率，改善蛋壳质量和颜色以及防控因大肠杆菌、沙门氏菌及产气荚膜梭菌等病原微生物感染引发的肠道疾病提供了可能。

Description

一种健脾和胃、平衡家禽肠道菌群的发酵中药组合物
技术领域
本发明涉及一种健脾和胃、平衡家禽肠道菌群的发酵中药组合物，属于兽药技术领域。
背景技术
肠道疾病是家禽最为常见的疾病，因病症复杂且有混合感染，这类疾病可造成家禽死亡或影响正常的生长发育。在家禽生产中，由于抗生素的长期使用，不但导致禽类产品中抗生素含量残留过高，而且使致病菌产生了耐药性，这些产生耐药性的致病菌在危害人们健康的同时，也将这些耐药性的影响间接地传递给人类，从而给人类造成更大的潜在危害。危害家禽肠道健康的病原菌主要包括大肠杆菌、葡萄球菌、沙门氏菌等，这些病原菌严重危害家禽健康，导致家禽生产能力降低。
现阶段对细菌性肠道疾病的防治主要依靠抗生素类药物。但在细菌耐药性日益严重和国家推行无抗养殖的影响下，家禽肠道问题更加突出。多年来抗生素的滥用，已经导致细菌耐药菌株不断增多，耐药性不断加强。随着国家限抗、禁抗政策的实施，为养殖业寻找抗生素替代品已迫在眉睫。发酵中药以其吸收快、药效强、无毒副作用等特点，近两年在兽药行业发展迅速,成为“减抗/替抗”的重点研发项目。
我国的中药发酵历史悠久，而中药发酵炮制的实质是利用微生物对药材进行的生物转化，经过发酵可以改变药物药性、增效减毒，从而使药材的药理作用发生变化产生新的化学成分。与煨、炒、煅、炮、炼、焙、烘、烤等其他中药炮制方法相比，发酵法是在常温常压条件下进行的，反应条件温和、操作简单，同时转化反应中利用了产生于微生物生长代谢过程中的酶，酶选择性的对底物进行结构修饰，所以能进行一些其他炮制方法无法实现的反应，以低成本、少公害的优势获得活性更好、结构更合理的中药成分。
但是，我国的现代中药发酵技术尚处于起步阶段，上市品种较少，诸多问题尚需解决，目前多使用单一的菌种对中药进行发酵，对于混合菌种研究较少；我国药用植物有11146种而中药发酵研究的品种很少，这与中药成分复杂、药效和活性成分代谢途径不清楚有关；微生物代谢产物也可能与中药有效成分发生中和作用，从而降低中药生物活性，所以有许多中药发酵后生物活性并无明显改变，甚至药理活性降低，即中药组成不同，使用的微生物不同，中药发酵后所产生的作用效果都是无法预期的，因此限制了中药发酵产品的开发应用。
发明内容
本发明针对现有技术的不足，提供一种改善家禽肠道，提高饲料转化率，降低蛋壳破损率，改善蛋壳质量和颜色的发酵中药组合物。为中药复方的发酵技术提供依据，同时促进发酵中药的开发和发酵中药产业的经济效益。
本发明药物复方使用发酵的方法，提高发酵后的中药复合物的有效成分含量，从而使得发酵后的中药复方能够有效地增强家禽的脾胃功能，同时调整肠道菌群平衡，防控因大肠杆菌、沙门氏菌及产气荚膜梭菌等病原微生物感染引发的肠道疾病。
本发明的技术方案如下：
一种健脾和胃、平衡家禽肠道菌群的发酵中药组合物，原料组分包括：
中药部分：神曲、麦芽、山楂、黄芪、白术、党参、刺五加、陈皮、木香、藿香、蒲公英、苍术和茯苓；
辅料部分：稻糠、豆粕、玉米和石粉；
菌种部分：乳酸菌和枯草芽孢杆菌。
根据本发明优选的，所述中药组合物的原料组分，按重量份计包括如下：
中药部分：神曲100-140份、麦芽100-140份、山楂100-140份、黄芪110-150份、白术110-150份、党参100-140份、刺五加100-140份、陈皮100-140份、木香80-110份、藿香80-110份、蒲公英100-140份、苍术80-110份和茯苓80-110份；
辅料部分：稻糠180-230份、豆粕15-50份、玉米140-200份和石粉100-140份；
菌种部分：乳酸菌菌液400-550份，菌种浓度≥107cfu/(ml或g)、枯草芽孢杆菌菌液400-550份，菌种浓度≥107cfu/(ml或g)。
进一步优选的，所述中药组合物的原料组分，按重量份计包括如下：
中药部分：神曲120份、麦芽120份、山楂120份、黄芪135份、白术135份、党参120份、刺五加120份、陈皮120份、木香105份、藿香105份、蒲公英120份、苍术90份和茯苓90份；
辅料部分：稻糠210份、豆粕20份、玉米160份和石粉110份。
菌种部分：乳酸菌菌液500份，菌液浓度为108cfu/(ml或g)以上；枯草芽孢杆菌菌液500份，菌液浓度为108cfu/(ml或g)以上；所述乳酸菌包括粪肠球菌和嗜酸乳杆菌，粪肠球菌与嗜酸乳杆菌的组成比例1：1。
进一步优选的，所述粪肠球菌的菌种编号为CICC23658、嗜酸乳杆菌的菌种编号为CICC22162、枯草芽孢杆菌的菌种编号为CICC20872。
上述中药组合物的制备方法，包括如下步骤：
(1)制备乳酸菌菌液和枯草芽孢杆菌液；
(2)将步骤(1)的乳酸菌菌液和枯草芽孢杆菌菌液与中药部分和辅料部分混合均匀，制得固体发酵料；
(3)步骤(2)的固体发酵料在密封容器中进行固体发酵获得中药组合物。
根据本发明优选的，步骤(2)的中药部分与辅料部分的粉碎目数为40目。
根据本发明优选的，步骤(2)的固体发酵料含水量为40-42％。
根据本发明优选的，步骤(3)中固体发酵料在密封袋中固体发酵，条件为20-25℃，发酵周期18-25天。
上述中药组合物在饲养家禽中的应用。
上述中药组合物在饲养鸡中的应用。
药理分析
神曲：味甘、辛，性温。归脾、胃经。具有健脾和胃，消食化积之功效。
神曲含酵母菌、酶类、维生素B复合体、麦角固醇、挥发油、苷类等。
麦芽：味甘，性平。归脾、胃经。具有行气消食，健脾开胃，回乳消胀之功效。
麦芽主要含α-及β-淀粉酶，催化酶，过氧化异构酶等。另含大麦芽碱，大麦芽胍碱A、B，腺嘌呤胆碱，蛋白质，氨基酸，维生素D、D、E，细胞色素C。尚含麦芽毒毒，即白栝楼碱。
山楂：酸、甘，微温。归脾、胃、肝经。具有消食健胃，行气散瘀，化浊降脂之功效。
山楂果实含山楂酸、酒石酸、枸橼酸、黄酮类、内酯、甙类、解酯酶及糖类。野山楂果实含山楂酸、槲皮素、绿原酸、咖啡酸、齐墩果酸、枸橼酸、苹果酸、维生素C、核黄素、鞣质、果糖、胡萝卜素及钙、磷、铁等。种仁含蛋白质、脂肪、腈甙等。叶含绿原酸、槲皮素、山楂酸、熊果醇。
黄芪：味甘，性微温；归脾、肺经。具有补气固表、利尿、强心、降压、抗菌、托毒、排脓、生肌之功效
含黄酮类成分毛蕊异黄酮、3-羟基-9，10-二甲氧基紫檀烷，还含黄芪皂甙Ⅰ、Ⅴ、Ⅲ。
白术：苦、甘，温。入脾、胃经。具有健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎之功效。
根茎含挥发油，内有α-及β-葎草烯，β-榄香醇，α姜黄烯，苍术酮，3β-乙酰氧基苍术酮，芹子二烯酮，桉叶醇，棕榈酸，茅术醇，β-芹子烯等。还含倍半萜内酯化合物：苍术内酯-Ⅰ、-Ⅱ、-Ⅲ及8β-乙氧基苍术内酯-Ⅱ。又含多炔类化合物：14-乙酰基-12-千里光酰基-8-顺式折术三醇，14-乙酰基各里光酰基-8-反式白术三醇，12-千里光光酰基-8-顺式白术三醇，12-千里光酰基-8-反式白术三醇，12α-甲基丁酰基-14-乙酰基-8-顺式白术三醇，12α-甲基丁酰基-14-乙酰基-8-反式白术三醇，14α-甲基丁酰基-8-顺式白术三醇，14α-甲基丁酰基-8-反式白术三醇。另含东莨菪素，果糖，菊糖，具免疫活性的甘露聚糖AM-3[6]，以及天冬氨酸，丝氨酸，谷氨酸，丙氨酸，甘氨酸，缬氨酸，异亮氨酸，亮氨酸，酪氨酸，苯丙氨酸，赖氨酸，组氨酸，精氨酸，脯氨酸等氨基酸。
党参：味甘，性平。归脾、肺经。具有补中益气、止渴、健脾益肺，养血生津之功效。
由葡萄糖、半乳糖、果糖、阿拉伯糖、甘露糖、核糖、木糖按摩糖、半乳糖、果糖、阿拉伯糖、甘露糖、核糖、木糖按摩尔比1.77：1：0.43：0.26：0.12：0.023：0.013组成，相对分子质量12000。根还含甙类成分：丁香甙，正已基-β-D-吡喃葡萄糖甙，乙基-α-D-呋喃果糖甙，党参甙Ⅰ生物碱和含氮成分：胆碱，黑麦草碱，脲基甲酸正丁酯，焦谷氨酸N-果糖甙，烟酸，5-羟基-2-吡啶甲醇以及赖氨酸，苏氨酸，缬氨酸，蛋氨酸，异亮氨酸，亮氨酸，苯丙氨酸，天冬气酸，组氨酸，丝氨酸、谷氨酸，甘氨酸、丙氨酸，胱氨酸，酷氨酸，粗氨酸，脯氨酸等17种氨基酸；甾醇及三萜成分：蒲公英赛醇，乙酸蒲公英甾醇酯，无羁，，α-菠菜甾醇β-D-葡萄糖甙，7-豆甾烯醇，7-豆甾烯醇-β-D-葡萄糖甙，豆甾醇，豆甾醇-β-D-葡萄糖甙)α-菠菜甾酮，5，22-豆甾二烯-3-酮；其他成分：丁香醛，香草酸，2-呋羟酸，苍术内酯Ⅱ及Ⅲ[3]，5-羟甲基糠醛[7，14]，5-甲氧基甲基糠醛[14]，桂冠榈酸甲酯[12]等以及铁、铜、钴、锰、锌、镍、锶、铝、钒、氟等无机元素[1，15]。根另含挥发油，一种报道称：油中主成分为棕榈酸甲酯，占总油量的28.04％，还含α蒎烯，2，4-壬二烯醛，龙脑，ξ-愈创木烯，α-姜黄烯等32种成分；
刺五加：味微苦；辛；性温。归脾、肾、心经。具有益气健脾，补肾安神之功效。
根含刺五加甙A、B、B1、C、D、E，刺五加甙A即是胡萝卜甙，刺五加甙B即是丁香甙[1，2]；根还含芥子醛葡萄糖甙，松柏醛葡萄糖甙，松柏甙[3]鹅掌楸甙，苦杏仁甙[4]，3β-[O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[O-α-L-吡喃葡萄糖醛酸基]-16-α-羟基-13β，28-环氧齐墩果烷
陈皮：味苦、辛，性温。归肺、脾经。具有理气健脾，燥湿化痰之功效。
成熟果皮含挥发油，其中主成分为柠檬烯，尚含β-月桂烯，α-及β-蒎烯，α-及γ-松油烯，α-侧柏烯，α-水芹烯，香桧烯，辛醛，对-聚伞花素，α-罗勒烯，异松油烯，芳樟醇，3，7-二甲基-7-辛烯醛(3，7-dimethyl-7-octenal)，4-松油醇，α-松油醇，癸醛，香茅醇，α-金合欢烯，紫苏醛，香荆芥酚，以及苯甲醇，橙花醇，橙花醛，辛醇，百里香酚，香茅醛，水化香桧烯等。又含黄酮类成分：5，7，4’-三甲氧基黄酮，5，7，8，4’-四甲氧基黄酮，甜橙素，川陈皮素，苏达齐黄酮，福橘素，黄姜味草醇，以及橙皮苷，新橙皮苷，米橘素，5-去甲米橘素等。还含β-谷甾醇，柠檬苦素，阿魏酸等。
木香：味辛、苦，温。归脾、胃、大肠、三焦、胆经。具有行气止痛，健脾消食之功效。
木香根中含木香烯内酯，木香萜胺，去氢木香内酯，木香内酯，异去氢木香内酯，4β-甲氧基去氢木香内酯，12-甲氧基二氢去氢木香内酯)，二氢木香内酯，α-环木香烯内酯，β-环木香烯内酯，二氢木香烯内酯，土木香内酯，异土木香内酯，木香萜醛，木香烯，单紫杉烯，异中美菊素C，对-聚伞花素，月桂烯，柏木烯，柏木醇，芳樟醇，木香醇，榄香醇，β-谷甾醇，豆甾醇，木香酸，棕榈酸，亚油酸，氨基酸等。
藿香：味辛，性温。归脾、胃、肺经。具有化湿醒脾，辟秽和中，解暑，发表之功效。
广藿香含挥发油约1.5％，油中主成分为广藿香醇，约占52～57％；其他成分有苯甲醛、丁香油酚、桂皮醛广藿香薁醇、广藿香吡啶、表愈创吡啶；另有多种其他倍半萜如石竹烯、β-榄香烯、别香橙烯、γ-广藿香烯、β-古芸烯、α-愈创木烯、瓦伦烯、α-古芸烯、γ-毕澄茄烯、δ-愈创木烯、α-广藿香烯、二氢白菖考烯等。
藿香含挥发油0.28％，主要成分为甲基胡椒酚，占80％以上。并含有茴香醚、茴香醛、d-柠檬烯，以及对-甲氧基桂皮醛、α-蒎烯、β-蒎烯、辛酮-3、辛醇-3、对-聚伞花素、辛烯-1-醇-3、芳樟醇、l-石竹烯、β-榄香烯、β-葎草烯、α-衣兰烯、β-金合欢烯、γ-毕澄茄烯、二氢白菖考烯等。我国东北产藿香风干材料，全草含挥发油0.54％，并含微量鞣质及苦味质。
蒲公英：性寒，味苦、甘。归肝经、胃经。具有清热解毒，利尿散结之功效。
含蒲公英甾醇、胆碱、菊糖、果胶、蒲公英固醇、蒲公英素、蒲公英赛醇、咖啡酸等成分。
苍术：味辛、苦，性温。归脾、胃、肝经。具有燥湿健脾，祛风散寒，明目之功效。
茅苍术根茎含挥发油3.25％-6.92％，内含2-蒈烯，1，3，4，5，6，7-六氢-2，5，5-trimethyl-2H-2,4α桥亚乙基萘，β-橄槛烯，花柏烯，丁香烯，榄香烯，葎草烯，芹子烯，广藿香烯，1，9-马兜铃二烯，愈创薁醇，榄香醇，苍术酮，芹子二烯酮
[seli-na-4(14),7(11)-diene-8-one]，苍术呋喃烃，茅术醇，β-桉叶醇等。根茎还含糠醛，乙酰氧基苍术酮，3β-羟基苍术酮，白术内酯等。
茯苓：味甘、淡，性平。归心、肺、脾、肾经。具有利水渗湿，健脾，宁心之功效。
含三萜羧酸，有茯苓酸、土莫酸、齿孑L菌、松苓酸、松苓新酸等，还含有多聚糖，主要为茯苓聚糖，含量最高可达75％，经结构改造后可得到具有较强抗肿瘤活性的茯苓次聚糖。此外，尚含有组氨酸、腺嘌呤、胆碱、β-茯苓聚糖酶、蛋白酶、脂肪酸、脂肪、卵磷脂、麦角甾醇、茯苓素、茯苓新酸、3-氢化松苓酸、麦角甾-7，22-二烯-3β-醇、7，9(11)去氢茯苓酸等。
本发明，一种健脾和胃、平衡家禽肠道菌群的中药组合物是在中医传统理论《伤寒论》和《温病论》的指导下，对肠道类疾病进行卫气营血辨证和六经辩证，结合中药的药性、归经，在传统方剂的基础上进行调配而成。方中神曲、山楂、麦芽消食化积，健脾开胃，行气散瘀。三药共为君药。黄芪补气升阳；白术补脾健胃；健党参脾益肺；刺五加益气健脾、补肾。共为臣药。陈皮、木香理气健脾；藿香、苍术燥湿健脾；蒲公英清热解毒；茯苓利水健脾。共为佐使药。方剂的配伍特点在于健脾益胃、消食导滞、燥湿清热，达到了既补益又驱邪的目的，这也是中兽医治疗疾病的主要法则之一。
有益效果
本发明制备的发酵中药组合物对提高家禽生产性能、防控肠道疾病具有显著效果，且将有可能取代饲料中添加的抗肠道疾病药及其他抗生素，为改善肠道，提高饲料转化率，降低蛋壳破损率，改善蛋壳质量和颜色以及防控因大肠杆菌、沙门氏菌及产气荚膜梭菌等病原微生物感染引发的肠道疾病提供了可能。
具体实施方式
下面结合实施例和试验例对本发明进一步说明，但本发明内容的保护范围不限于此。
实施例中未详加说明的内容均按本领域现有技术。
材料来源
神曲、麦芽、山楂、黄芪、白术、党参、刺五加、陈皮、木香、藿香、蒲公英、苍术、茯苓均购自聊城万全大药店。
所述粪肠球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌的菌种编号分别为CICC23658、CICC2216、CICC20872，均来源于中国工业微生物菌种保藏管理中心。
实施例1
一种健脾和胃、平衡家禽肠道菌群的发酵中药组合物，原料药组分包括如下，均为重量份：
中药部分：神曲120份、麦芽120份、山楂120份、黄芪135份、白术135份、党参120份、刺五加120份、陈皮120份、木香105份、藿香105份、蒲公英120份、苍术90份、茯苓90份
辅料部分：稻糠210份、豆粕20份、玉米160份、石粉110份
菌液部分：乳酸菌菌液500份、枯草芽孢杆菌CICC20872菌液500份，所述乳酸菌包括粪肠球菌CICC23658和嗜酸乳杆菌CICC2216，粪肠球菌与嗜酸乳杆菌组成比例为1：1。
上述中药组合物的制备方法，包括如下步骤：
1、菌种分离、纯化
(1)制备样品稀释溶液
称取菌种样品1g，放入盛有99ml无菌水的三角烧瓶，振动混匀，使样品与水分混合，将细胞分散。用一支1ml无菌吸管从中吸取1ml悬液加入盛有9ml无菌水的试管中充分混匀，然后用无菌吸管从此试管中吸取1ml加入另一个盛有9ml无菌水的试管中，混合均匀，以此类推制成10-1，10-2，10-3，10-4，10-5，10-6不同稀释度的溶液(以菌种含量来确定稀释倍数)。
(2)涂布
用无菌吸管分别由10-4，10-5，10-6三管稀释液中各取0.2ml对号放入已写好稀释度的平板中，用无菌玻璃涂棒在培养基表面轻轻地涂布均匀，室温下静置5～10min，使菌液吸附进培养基。
(3)培养
置于37℃温室培养箱，培养24h。
(4)菌种分离
平板划线
用接菌针挑取单个菌落，平板划线，接种到平板培养基，置于37℃温室培养箱，培养24h。
(5)菌种分离、纯化
将嗜酸乳杆菌、粪肠球菌、枯草芽孢杆菌进行分离、纯化，斜面保存，备用。
2、种子液培养
(1)乳酸菌培养基：LB培养基，按配方制备2500ml培养基。
(2)枯草芽孢杆菌培养基，按配方制备2500ml培养基。
(3)将配置好的培养基，装瓶，121℃下高压蒸汽灭菌25分钟。
(4)将灭完菌的培养基，放置30℃左右，接种。
(5)将接种好的枯草芽孢杆菌培养基放入摇床，培养条件：温度36℃，转速150rpm/min，培养24h，制得枯草芽孢杆菌种子液；乳酸菌培养基，放置摇床培养，温度30℃，培养24h，每隔6h摇晃一次，制得乳酸菌种子液，即粪肠球菌种子液和嗜酸乳杆菌种子液。
培养基制备
乳酸菌培养基配方(LB培养基)见表1；
表1
序号 名称 数量/kg
1 蛋白胨 4
2 酵母粉 2
3 氯化钠 4
4 水 400
5 pH 6.2±0.2
枯草芽孢杆菌培养基见表2
表2
序号 名称 数量/kg
1 豆粕 2
2 玉米粉 1
3 磷酸氢二钾 0.6
4 磷酸二氢钾 0.3
5 碳酸钙 0.1
6 硫酸镁 0.04
7 氯化钠 1
8 葡萄糖 0.2
9 水 200
10 pH 6.5-7.0
3、发酵培养
(1)将步骤2制备的种子液分别接种到发酵罐中，乳酸菌培养条件：温度30℃，30min转动一次，pH值控制在6.0-6.5，培养48h；枯草芽孢杆菌培养条件：温度36℃，转速150rpm/min，ph值控制在6.5-7.0，培养48h，制得发酵液中菌体浓度均大于108cfu/ml。
4、固体料发酵
(1)步骤3制备的发酵液接种固体料，固体发酵物组分见表3；
表3
Figure BDA0003179630710000081
Figure BDA0003179630710000091
(2)固体料的接种：将发酵液与中药部分和辅料部分混合均匀，完成固体料接种，最终调节接种后固体料的含水量为40-42％。
(3)将步骤(2)接种后的固体料装入密封袋中，密封袋的尺寸为长35cm、宽25cm，每袋装料量为2.5kg；保持环境温度为保持环境温度为20-25℃，发酵时间为21天，制得发酵中药组合物。
(4)真空包装
将步骤(3)制得的发酵中药组合物进行3kg抽真空包装，放置3天。检测真空密封性，防止出现涨袋以及长霉菌现象出现。
实施例2
一种健脾和胃、平衡家禽肠道菌群的发酵中药组合物，原料药组分包括如下，均为重量份：
中药部分：神曲110份、麦芽110份、山楂110份、黄芪120份、白术120份、党参110份、刺五加110份、陈皮110份、木香95份、藿香95份、蒲公英110份、苍术80份、茯苓80份；
辅料部分：稻糠210份、豆粕20份、玉米160份、石粉110份。
菌液部分：乳酸菌菌液500份、枯草芽孢杆菌CICC20872菌液500份；所述乳酸菌包括粪肠球菌CICC23658和嗜酸乳杆菌CICC2216，粪肠球菌与嗜酸乳杆菌组成比例为1：1。
上述中药组合物的制备方法同实施例1。
实施例3
一种健脾和胃、平衡家禽肠道菌群的发酵中药组合物，原料药组分包括如下，均为重量份：
中药部分：神曲100份、麦芽100份、山楂100份、黄芪110份、白术110份、党参100份、刺五加100份、陈皮100份、木香85份、藿香85份、蒲公英100份、苍术70份、茯苓70份
辅料部分：稻糠210份、豆粕20份、玉米160份、石粉110份。
菌液部分：乳酸菌菌液500份、枯草芽孢杆菌CICC20872菌液500份；所述乳酸菌包括粪肠球菌CICC23658和嗜酸乳杆菌CICC2216，粪肠球菌与嗜酸乳杆菌组成比例为1：1。
上述中药组合物的制备方法同实施例1。
对比例1
与实施例1的不同之处在于，不含有神曲、山楂和麦芽，其他均不变，制得一种健脾和胃、平衡家禽肠道菌群的发酵中药组合物，原料药组分包括如下，均为重量份：
中药部分：黄芪135份、白术135份、党参120份、刺五加120份、陈皮120份、木香105份、藿香105份、蒲公英120份、苍术90份、茯苓90份；
辅料部分：稻糠210份、豆粕20份、玉米160份、石粉110份；
菌液部分：乳酸菌菌液500份、枯草芽孢杆菌CICC20872菌液500份，所述乳酸菌包括粪肠球菌CICC23658和嗜酸乳杆菌CICC2216，粪肠球菌与嗜酸乳杆菌组成比例为1：1。
所述中药组合物的制备方法同实施例1。
对比例2
与实施例1的不同之处在于不经过发酵处理，直接将中药部分、辅料部分和菌液部分混合均匀，制得一种健脾和胃、平衡家禽肠道菌群的发酵中药组合物，原料药组分包括如下，均为重量份：
中药部分：神曲120份、麦芽120份、山楂120份、黄芪135份、白术135份、党参120份、刺五加120份、陈皮120份、木香105份、藿香105份、蒲公英120份、苍术90份、茯苓90份
辅料部分：稻糠210份、豆粕20份、玉米160份、石粉110份
菌液部分：乳酸菌菌液500份、枯草芽孢杆菌CICC20872菌液500份，所述乳酸菌包括粪肠球菌CICC23658和嗜酸乳杆菌CICC2216，粪肠球菌与嗜酸乳杆菌组成比例为1：1。
对比例3
一种健脾和胃、平衡家禽肠道菌群的发酵中药组合物，与实施例1的不同之处在于，菌液部分组成不同，具体如下：
菌液部分：乳酸菌菌液500份、枯草芽孢杆菌CICC20872菌液500份，所述乳酸菌为嗜酸乳杆菌CICC2216，不包括粪肠球菌CICC23658。
所述中药组合物的制备方法同实施例1。
效果例
检测方法：
(1)黄酮含量：
提取液的制备：精确称取发酵中药10g，倒入具塞锥形瓶中，用1000ml的量筒量取200ml75％乙醇倒入锥形瓶，摇匀，静置20分钟，制得发酵中药组合物提取液。
吸取1.00毫升的提取液置于25毫升容量瓶中，加入1.00毫升质量浓度5％NaNO溶液，摇匀，静置6分钟，加入1.00毫升质量浓度10％Al(NO)溶液，摇匀，静置6分钟，加入5.00毫升4％NaOH溶液，摇匀，最后加入50％的乙醇定容至刻度线，上下颠倒容量瓶，待溶液混匀后静置15分钟，在510nm波长处测定其吸光度，再由芦丁标准曲线得出溶液中黄酮类物质的质量浓度。
(2)皂苷含量：称取3份发酵中药组合物,每份10g,按料液比1:15加入70％乙醇,在60℃下超声处理40min,抽滤,合并三份滤液后浓缩,用1倍体积的水饱和正丁醇萃取2次,合并上层正丁醇萃取液并减压浓缩至干,加入甲醇溶解并定容至50m L,得发酵中药组合物总皂苷提取液,用0.45μm滤膜过滤除菌后4℃保存备用。以黄芪甲苷为标准品,在560nm处测定系列标准品与经适当倍数稀释后的待测液吸光度值,绘制标准曲线后根据回归方程结合稀释倍数计算得总皂苷浓度。
(3)多糖含量：将10mL发酵中药组合物步骤(1)中的提取液稀释25倍，取0.5mL稀释液于25mL具塞试管中，加水稀释至2mL，加入1.0mL的5％的苯酚溶液，摇匀，迅速滴加浓硫酸各5.0mL，在室温下显色20min，以空白校正零点，于490nm处检测其吸光值，代入到葡萄糖标准曲线中，计算出样品中多糖的浓度，见表4、表5、表6、表7、表8、表9。
表4
Figure BDA0003179630710000121
表5
Figure BDA0003179630710000122
表6
Figure BDA0003179630710000123
表7
Figure BDA0003179630710000124
表8
Figure BDA0003179630710000131
表9
Figure BDA0003179630710000132
根据实施例1-3实验数据分析可得，当药物组分相同时，本专利优选的重量份的中药组合物，发酵后得到的中药黄酮、皂苷、多糖的含量相对于其余重量份的重要组合物具有较大提升。中药复合物中的神曲、麦芽、山楂，能够健脾胃，进行饲喂试验后，鸡群剩余饲料数量减少，采食量增加；黄芪、刺五加的存在，补肾固气，使鸡群的红粪数量减少，粪便正常数增多，因此，此中药组方效果显著。
根据对比例1-3实验数据分析可得，发酵中药组合物与未进行发酵的中药组合物有效成分含量提升明显，并且发酵中药组合物所使用的混合发酵菌种，在菌种协同作用下，即抑制了有害菌的生长，也加深了组合物的发酵程度，大量破坏中药的细胞壁，提高了多糖、皂苷、黄酮的含量，因此相对于对比例3来说，本方所优选菌种，组合后的协同作用能够使中药组合物发酵效果更显著。
应用例
应用方法：
实验组：称取试验所用中药组合物，按质量分数0.3％的比例添加到全价料中，全天饲喂鸡群。
对照组：不添加中药组合物，只饲喂全价饲料。
在同样饲喂及试验条件下，分别对实施例1、2、3、与对比例1、2、3进行试验并数据分析，统计如下所示：
指标检测：蛋重、产蛋率、破损率、蛋壳颜色和质量、粪便颜色，见表10。
检测方法：
(1)蛋重：称量法，随机抽取鸡蛋360枚，放置于纸箱中，置于电子台秤上，进行称重。
(2)产蛋率：当日产蛋数量除以鸡舍总蛋鸡数。
(3)破损率：破损鸡蛋数量除以当日产蛋数。
(4)蛋壳颜色：蛋壳色素主要成分:原卟啉Ⅸ、胆绿素和胆绿素锌螯合物,三种成分按照不同的比例形成不同的颜色。蛋壳颜色采用QCR蛋壳颜色测定仪测定,以纯黑色为0,纯白色为*进行校正,数据越小表明蛋壳颜色越深。
(5)蛋壳质量：微量元素作为酶的辅基,通过影响晶体的形成及改变,蛋壳晶体的结构,影响蛋壳的形成，使用蛋壳强度测定仪测定蛋壳强度，国际要求蛋在竖放时能承受2.7-3.6Kg/cm2压力。
表10
Figure BDA0003179630710000141
本发明涉及的中药组合物具有健脾胃、提高禽类生产性能、平衡家禽肠道菌群的作用，制备方法简单易行，特别是规模化养禽业更为方便。
本次试验表明，中药健脾胃、提高禽类生产性能、平衡家禽肠道菌群，方法简单易行，投喂确实可用，特别是规模化养禽业更为方便。中药具有来源广泛，价格低廉，毒副作用小，无残留，疗效确实，安全方便，不产生耐药等特点优势，本试验是在经典方剂的基础上，通过卫气营血辨证和六经辨证的方法，结合家禽肠道疾病以及蛋鸡产蛋疾病的临床表现，不断筛选优化防治方案，最终获得了一种调整肠道菌群平衡、提高禽类生产性能，防控因大肠杆菌、沙门氏菌及产气荚膜梭菌等病原微生物感染引发的肠道疾病的中药组合物，并形成了一套成功的防治技术。
实施例1制得的发酵中药组合物与对比例制得的发酵中药组合物中的药物有3味是不同的，即实施例1中含有药物山楂、神曲和麦芽，不同于对比例1中的不含这三味药物。试验证实，实施例1制得的发酵中药组合物效果显著优于对比例1制得的发酵中药组合物。方中方中神曲、山楂、麦芽消食化积，健脾开胃，行气散瘀。三药共为君药。方剂的配伍特点在于健脾益胃、消食导滞、燥湿清热，达到了既补益又驱邪的目的，这也是中兽医治疗疾病的主要法则之一。这也是实施例1发酵中药组合物比对比例1发酵中药组合物的防治效果明显好的原理所在。
实施例1制得的发酵中药组合物与对比例制得的发酵中药组合物中的饲喂效果显著优于对比例1、对比例2、对比例3制得的发酵中药组合物的饲喂效果。
本发明使用的中药具有来源广泛，价格低廉，毒副作用小，无残留，安全方便，不产生耐药等特点优势。
随着家禽养殖行业的持续发展与进步，促生长剂以及抗生素逐渐被禁止使用，家禽养殖的过程中经常会出现的肠道疾病包括坏死性肠炎，鸡球虫病，菌落失调症等等。胃肠道是家禽与体外环境进行交流的主要的通道，接触病原体的概率最大，饲养的环境，营养情况等因素都会导致家禽肠道疾病的发生。

Claims (10)

1.一种健脾和胃、平衡家禽肠道菌群的发酵中药组合物，其特征在于，原料组分包括：
中药部分：神曲、麦芽、山楂、黄芪、白术、党参、刺五加、陈皮、木香、藿香、蒲公英、苍术和茯苓；
辅料部分：稻糠、豆粕、玉米和石粉；
菌种部分：乳酸菌和枯草芽孢杆菌。
2.如权利要求1所述发酵中药组合物，其特征在于，所述中药组合物的原料组分，按重量份计包括如下：
中药部分：神曲100-140份、麦芽100-140份、山楂100-140份、黄芪110-150份、白术110-150份、党参100-140份、刺五加100-140份、陈皮100-140份、木香80-110份、藿香80-110份、蒲公英100-140份、苍术80-110份和茯苓80-110份；
辅料部分：稻糠180-230份、豆粕15-50份、玉米140-200份和石粉100-140份；
菌种部分：乳酸菌菌液400-550份，菌种浓度≥107cfu/(ml或g)、枯草芽孢杆菌菌液400-550份，菌种浓度≥107cfu/(ml或g)。
3.如权利要求2所述发酵中药组合物，其特征在于，所述中药组合物的原料组分，按重量份计包括如下：
中药部分：神曲120份、麦芽120份、山楂120份、黄芪135份、白术135份、党参120份、刺五加120份、陈皮120份、木香105份、藿香105份、蒲公英120份、苍术90份和茯苓90份；
辅料部分：稻糠210份、豆粕20份、玉米160份和石粉110份；
菌种部分：乳酸菌菌液500份，菌液浓度为108cfu/(ml或g)以上；枯草芽孢杆菌菌液500份，菌液浓度为108cfu/(ml或g)以上；所述乳酸菌包括粪肠球菌和嗜酸乳杆菌，粪肠球菌与嗜酸乳杆菌的组成比例1：1。
4.如权利要求3所述发酵中药组合物，其特征在于，所述粪肠球菌的菌种编号为CICC23658、嗜酸乳杆菌的菌种编号为CICC22162、枯草芽孢杆菌的菌种编号为CICC20872。
5.权利要求1-4任一项所述发酵中药组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)制备乳酸菌菌液和枯草芽孢杆菌液；
(2)将步骤(1)的乳酸菌菌液和枯草芽孢杆菌菌液与中药部分和辅料部分混合均匀，制得固体发酵料；
(3)步骤(2)的固体发酵料在密封容器中进行固体发酵获得中药组合物。
6.如权利要求5所述制备方法，其特征在于，步骤(2)的中药部分与辅料部分的粉碎目数为40目。
7.如权利要求5所述制备方法，其特征在于，步骤(2)的固体发酵料含水量为40-42％。
8.如权利要求5所述制备方法，其特征在于，步骤(3)中固体发酵料在密封袋中固体发酵，条件为20-25℃，发酵周期18-25天。
9.权利要求1-4任一项所述发酵中药组合物或权利要求5-8任一项所述方法制备的发酵中药组合物在饲养家禽中的应用。
10.如权利要求9所述应用，其特征在于，发酵中药组合物在饲养鸡中的应用。
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