CN112305090A - 一种测定复杂组分中维生素c的高效液相色谱分析方法 - Google Patents

一种测定复杂组分中维生素c的高效液相色谱分析方法 Download PDF

Info

Publication number
CN112305090A
CN112305090A CN201910684846.4A CN201910684846A CN112305090A CN 112305090 A CN112305090 A CN 112305090A CN 201910684846 A CN201910684846 A CN 201910684846A CN 112305090 A CN112305090 A CN 112305090A
Authority
CN
China
Prior art keywords
vitamin
mobile phase
solution
oxalic acid
liquid chromatography
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201910684846.4A
Other languages
English (en)
Inventor
黄小梅
李勇
徐希平
田敏卿
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Fulette Shenzhen Precision Nutrition Food Group Co ltd
AUSA PHARMED Ltd
Original Assignee
Fulette Shenzhen Precision Nutrition Food Group Co ltd
AUSA PHARMED Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fulette Shenzhen Precision Nutrition Food Group Co ltd, AUSA PHARMED Ltd filed Critical Fulette Shenzhen Precision Nutrition Food Group Co ltd
Priority to CN201910684846.4A priority Critical patent/CN112305090A/zh
Publication of CN112305090A publication Critical patent/CN112305090A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)

Abstract

本发明提供一种高效测定复杂组分中维生素C的液相色谱分析方法，是以0.1M磷酸二氢钾、0.01M磷酸氢二钾混合溶液‑乙腈为流动相进行洗脱，在12分钟内可实现避免其他组分的干扰，准确灵敏地检测出维生素C的含量；该方法专属性强、精密度高、稳定性较好、准确度高，操作简单，试剂与耗材价廉易得，适用于含维生素C组合物的片剂、粉末、胶囊等剂型中复杂组分中维生素C含量检测，检测质量控制，可有效地节约检测成本和时间。

Description

一种测定复杂组分中维生素C的高效液相色谱分析方法
技术领域
本发明涉及一种高效快速测定复杂组分中维生素C含量的液相色谱分析方法。具体通过对样品前处理和色谱条件的优化，可简单、方便且准确快速检测出复杂组分中维生素C的含量。
背景技术
维生素C(C6H8O6)是一种水溶性维生素，含有6个碳原子的酸性多羟基化合物，维生素C的结构如下：
Figure BDA0002145923560000011
维生素C分子中第2及第3位上两个相邻的烯醇式羟基极易解离而释出H+，故具有酸的性质，又称抗坏血酸。维生素C具有很强的还原性，很容易被氧化成脱氢维生素C，但其反应是可逆的，并且抗坏血酸和脱氢抗坏血酸具有同样的生理功能，但脱氢坑坏血酸若继续氧化，生成二酮古乐糖酸，则反应不可逆而完全失去生理效能。
由于多种维生素矿物质片中含有多种成分，某种成分可能会对维生素C造成降解，故有必要研究出一种能专属检测维生素C且其与杂质峰能很好的分离开的高效液相色谱分析方法。
发明内容
为避免复杂组分中的成分对维生素C造成降解，且能高效分离杂质峰，本发明提供一种提取率高、稳定性好、准确度高、重复性好的专属维生素C的高效液相色谱方法，所述方法包括以下步骤：
一种用于测定片剂、粉剂、胶囊剂型等复杂组合物产品中维生素C含量的高效液相色谱分析方法，供试品的提取溶剂为草酸溶液，提取方法为室温超声提取；流动相A为磷酸盐缓冲液，流动相B为乙腈，流动相A与流动相B的混合比例为 100～70:0～30，梯度洗脱；紫外检测波长为250～270nm。
本发明中，所述草酸溶液配制步骤：称取20～35g草酸，加水稀释至1000ml，搅拌使溶解。
本发明中，进样盘温度为10～20
Figure 1
；优选温度为10
Figure 2
本发明中，所述流动相A的磷酸盐缓释液是0.1M磷酸二氢钾和0.01M磷酸氢二钾的混合溶液。
本发明中，所述流动相A与流动相B混合溶液的pH值是3.00～5.00，优选3.00～4.00，更加优选4.00。
在一个实施方案中，进行上述色谱分析的色谱仪器及条件为：
检测仪器：高效液相色谱仪(Thermo Fisher，U3000)，配备紫外检测器；
色谱条件：色谱柱：Welch-C18，4.6*150mm，5um；检测波长：250～270nm；流速：0.8～1.5ml/min；柱温：20～30
Figure 3
；最佳柱温：25
Figure 4
；进样体积：10ul；运行时间：12min。流动相：磷酸盐缓冲液-乙腈；洗脱方式：梯度洗脱如表1；
表1洗脱梯度
时间(min) A(％) B(％)
0.00 99.5 0.5
3.00 99.5 0.5
3.01 75 25
7.00 75 25
本发明中，采用高效液相色谱对多种维生素矿物质片溶液中的维生素C进行定量检测，需要对该方法进行专属性、准确度等多方面的确认，具体为：
专属性：配制多种维生素矿物质片溶液和不含维生素C的空白辅料溶液，分别进样，结果显示空白溶剂、空白辅料对供试品溶液的主峰出峰无干扰，且能与相邻峰有效地分离开，说明本发明提供的方法能够准确测定多种维生素矿物质片功效成分维生素C的含量。
准确度：采用本发明的高效液相色谱方法对多种维生素矿物质片溶液中的维生素C进行检测，结果显示其回收率在合格标准范围，准确度良好。
线性：采用本发明的高效液相色谱方法对多种维生素矿物质片中的维生素C对照品溶液进行检测，在线性范围60％～150％内，结果显示其主成分线性相关系数不小于0.998，表明检测结果与维生素C的浓度具有良好的线性关系。
本发明中，采用高效液相色谱对不同规格样品配制成的样品溶液中的维生素C 进行定量检测，实施例会说明。
本发明中，采用高效液相色谱对不同片剂样品配制成的样品溶液中的维生素C 进行定量检测，实施例会说明。
本发明中，采用高效液相色谱对胶囊样品配制成的样品溶液中的维生素C进行定量检测，实施例会说明。
附图说明
图1示供试品溶液的HPLC检测的色谱图；
图2、3、4示实施例1的色谱条件下HPLC检测的色谱图；
图5示实施例2的色谱条件下HPLC检测的色谱图；
图6示实施例3的色谱条件下HPLC检测的色谱图；
图7示实施例4的色谱条件下HPLC检测的色谱图；
具体实施方式
下面通过实施例对本发明作进一步详细地说明，分别以片剂、片剂不同规格、胶囊为例。
试剂：乙腈(SINENCE，批号180/A0683)，磷酸二氢钾、磷酸氢二钾(天津市大茂化学试剂厂，AR)，磷酸(天津市富宇精细化工有限公司，AR)，二水合草酸(上海凌峰化学试剂有限公司)，维生素C对照品(中国食品药品检定研究院)，样品(深圳芙莱特营养与健康有限公司提供)
实施例1：
深圳芙莱特营养与健康有限公司生产的A1111-A2131-A3333号牌多种维生素矿物质片(含有维生素A、维生素E、维生素B1、维生素B2、烟酸、泛酸、维生素B6、生物素、维生素C、维生素D、叶酸、维生素B12、铁、锌、硒、镁、铜、钙、铬、钾等20种成分)样品中维生素C含量的测定。第一实施例的具体步骤如下：
第一步：提取溶剂，称取30g草酸，加水稀释至1000ml，搅拌使溶解。
第二步：对照品溶液的配制，取维生素C对照品，精密称定，加入草酸溶液适量，室温超声1min使溶解，加草酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液；稀释到需要浓度的对照品溶液，即可。
第三步：样品溶液配制，取本品研磨成细粉，精密称定，加草酸溶液，室温超声溶解，得到维生素C溶液。A1111-A2131-A3333牌号多种维生素矿物质片各配制两份。
第四步：液相色谱条件的具体内容如下：
色谱柱：Welch-C18，4.6*150mm，5um
流动相：磷酸盐缓冲液-乙腈(梯度洗脱如表1)
检测波长：262nm
流速：1.0ml/min
柱温：25℃
进样体积：10ul
运行时间：12min
检测色谱图如2、3、4图，检测结果如表2
表2检测结果
Figure BDA0002145923560000041
实施例2：
深圳芙莱特营养与健康有限公司生产维生素C片样品中维生素C含量的测定。具体步骤：
第一步：提取溶剂，称取30g草酸，加水稀释至1000ml，搅拌使溶解。
第二步：对照品溶液的配制，取维生素C对照品，精密称定，加入草酸溶液适量，室温超声1min使溶解，加草酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液；稀释到需要浓度的对照品溶液，即可。
第三步：样品溶液配制，取维生素C片研磨成细粉，精密称定，加草酸溶液，室温超声溶解，得到维生素C溶液。
第四步：液相色谱条件的具体内容如下：
色谱柱：Welch-C18，4.6*150mm，5um
流动相：磷酸盐缓冲液-乙腈(梯度洗脱如表1)
检测波长：262nm
流速：1.0ml/min
柱温：25℃
进样体积：10ul
运行时间：12min
样品检测色谱图如图5，检测结果如表3。
表3检测结果
Figure BDA0002145923560000051
实施例3：
深圳芙莱特营养与健康有限公司生产维生素C矿物质片样品中维生素C含量的测定。具体步骤：
第一步：提取溶剂，称取30g草酸，加水稀释至1000ml，搅拌使溶解。
第二步：对照品溶液的配制，取维生素C对照品，精密称定，加入草酸溶液适量，室温超声1min使溶解，加草酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液；稀释到需要浓度的对照品溶液，即可。
第三步：样品溶液配制，取维生素C矿物质片研磨成细粉，精密称定，加草酸溶液，室温超声溶解，得到维生素C溶液。
第四步：液相色谱条件的具体内容如下：
色谱柱：Welch-C18，4.6*150mm，5um
流动相：磷酸盐缓冲液-乙腈(梯度洗脱如表1)
检测波长：262nm
流速：1.0ml/min
柱温：25℃
进样体积：10ul
运行时间：12min
样品检测色谱图如图6，检测结果如表4。
表4检测结果
Figure BDA0002145923560000052
Figure BDA0002145923560000061
实施例4：
深圳芙莱特营养与健康有限公司生产的多种维生素胶囊(含维生素A、维生素E、维生素B1、维生素B2、烟酸、泛酸、维生素B6、生物素、维生素C、维生素D、叶酸、维生素B12、铁、锌、硒、镁、铜、钙、铬、钾等20种成分)样品中维生素C 含量的测定。具体步骤如下：
第一步：提取溶剂，称取30g草酸，加水稀释至1000ml，搅拌使溶解。
第二步：对照品溶液的配制，取维生素C对照品，精密称定，加入草酸溶液适量，室温超声1min使溶解，加草酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液；稀释到需要浓度的对照品溶液，即可。
第三步：样品溶液配制，取本品胶囊20粒，除去胶囊壳倒出内容物，精密称取内容物适量，加草酸溶液，室温超声溶解，得到维生素C溶液。
第四步：液相色谱条件的具体内容如下：
色谱柱：Welch-C18，4.6*150mm，5um
流动相：磷酸盐缓冲液-乙腈(梯度洗脱如表1)
检测波长：262nm
流速：1.0ml/min
柱温：25℃
进样体积：10ul
运行时间：12min
样品检测色谱图如图7，检测结果如表5。
表5检测结果
Figure BDA0002145923560000062
本发明对含有多种维生素矿物质片、维生素C片、维生素C矿物质片、多种维生素矿物质胶囊样品进行检测，维生素C均能在3min左右出峰，且均可以避免其他杂质的干扰，使得峰型美观、分离度良好。说明本发明适用于不同剂型的复杂组分中维生素C的检测。
以上所述的具体实施例，对本发明的解决的技术问题、技术方案以及有益效果作了一系列的详细说明。但该说明仅仅是针对本发明的具体实施例而已，凡没有脱离本发明技术基础、原则和精神而作的等效实施例或变更，均应包括在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种用于高效测定复杂组合物中维生素C含量的高效液相色谱分析方法，其特征在于，供试品的提取溶剂为草酸溶液，提取方法为室温超声提取；流动相A为磷酸盐缓冲液，流动相B为乙腈，流动相A与流动相B的混合比例为100～70:0～30，梯度洗脱；紫外检测波长为250～270nm。
2.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述草酸溶液配制步骤：称取20～35g草酸，加水稀释至1000ml，搅拌使溶解。
3.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，进样盘温度为10～20℃，优选温度为10℃。
4.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述流动相A的磷酸盐缓释液是0.1M磷酸二氢钾和0.01M磷酸氢二钾的混合溶液。
5.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述流动相A与流动相B的混合溶液的pH值是3.00～5.00，优选3.00～4.00，更加优选4.00。
CN201910684846.4A 2019-07-26 2019-07-26 一种测定复杂组分中维生素c的高效液相色谱分析方法 Pending CN112305090A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910684846.4A CN112305090A (zh) 2019-07-26 2019-07-26 一种测定复杂组分中维生素c的高效液相色谱分析方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910684846.4A CN112305090A (zh) 2019-07-26 2019-07-26 一种测定复杂组分中维生素c的高效液相色谱分析方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN112305090A true CN112305090A (zh) 2021-02-02

Family

ID=74329778

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910684846.4A Pending CN112305090A (zh) 2019-07-26 2019-07-26 一种测定复杂组分中维生素c的高效液相色谱分析方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112305090A (zh)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102552294A (zh) * 2012-01-10 2012-07-11 辽宁海思科制药有限公司 一种注射用复方维生素（3）冻干粉针剂及其制备方法和分析方法
CN103961364A (zh) * 2014-04-22 2014-08-06 广州汉光医药进出口有限公司 含有多种维生素的药物组合物及其制备方法和检测方法
CN104181274A (zh) * 2014-09-11 2014-12-03 云南省林业科学院 一种植物维生素c含量的测定方法
CN104730190A (zh) * 2015-03-04 2015-06-24 苏州源泽生物技术有限公司 同时测定食品或保健品当中多种水溶性维生素含量的方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102552294A (zh) * 2012-01-10 2012-07-11 辽宁海思科制药有限公司 一种注射用复方维生素（3）冻干粉针剂及其制备方法和分析方法
CN103961364A (zh) * 2014-04-22 2014-08-06 广州汉光医药进出口有限公司 含有多种维生素的药物组合物及其制备方法和检测方法
CN104181274A (zh) * 2014-09-11 2014-12-03 云南省林业科学院 一种植物维生素c含量的测定方法
CN104730190A (zh) * 2015-03-04 2015-06-24 苏州源泽生物技术有限公司 同时测定食品或保健品当中多种水溶性维生素含量的方法

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
吴健翎 等: "高效液相色谱法分离测定复合维生素片剂中的水溶性维生素", 《河北北方学院学报(自然科学版)》 *
徐新娟 等: "不同酸提取对维生素C测定结果的影响", 《湖北农业科学》 *
成志强 等: "反相高效液相色谱法同时测定食品和多维片中8种水溶性维生素", 《分析化学》 *
潘瑶 等: "建立RP-HPLC法同时测定复合维生素注射液中11种维生素含量", 《药物分析杂志》 *
蒋晔 等: "反相高效液相色谱法同时测定9种水溶性维生素", 《药物分析杂志》 *
雍莉 等: "高效液相色谱法快速测定保健食品和果蔬中的VitC", 《现代预防医学》 *
黄桂颖 等: "RP-HPLC测定夏橙中Vc含量", 《安徽农业科学》 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104730190B (zh) 同时测定食品或保健品当中多种水溶性维生素含量的方法
Cho et al. Simultaneous determination of water-soluble vitamins excreted in human urine after eating an overdose of vitamin pills by a HPLC method coupled with a solid phase extraction
Wang et al. Rapid screening of mycotoxins in liquid milk and milk powder by automated size-exclusion SPE-UPLC–MS/MS and quantification of matrix effects over the whole chromatographic run
CN107561172B (zh) 一种同时检测营养素软胶囊中多种维生素含量的方法
CN103076410A (zh) 一种辛伐他汀溶出度的检测方法
Roach et al. Evaluation and single laboratory validation of an on-line turbulent flow extraction tandem mass spectrometry method for melamine in infant formula
Ulusoy et al. Simultaneous determination of vitamins B1 and B2 in food samples by modified cloud point extraction method and HPLC-DAD
Mateeva et al. Simultaneous analysis of water-soluble and fat-soluble vitamins through RP-HPLC/DAD in food supplements and brewer’s yeast
CN109633028B (zh) 一种特殊医学用途配方食品中香料添加剂的检测方法
Di et al. A high-performance liquid chromatography: chemiluminescence method for potential determination of vardenafil in dietary supplement
JP7450860B2 (ja) ピロロキノリンキノン分析方法
CN111693615B (zh) 同时测定烟酸、维生素b1、b6和泛酸的分析方法
CN112305090A (zh) 一种测定复杂组分中维生素c的高效液相色谱分析方法
Frankowski Aluminium and Its Complexes in Teas and Fruity Brew Samples, Speciation and Ions Determination by Ion Chromatography and High-Performance Liquid Chromatography–Fluorescence Analytical Methods
CN112444569A (zh) 一种测定复杂组分中维生素e的高效液相色谱分析方法
CN103257192B (zh) 一种软胶囊的溶出度测定方法
Gómez et al. Multicomponent analysis using flow systems
CN104535683B (zh) 一种精氨洛芬中游离布洛芬的高效液相色谱测定方法
JP4823472B2 (ja) アルミニウム測定用キレート試薬及び測定方法
Kim Development of an ion‐pairing reagent and HPLC‐UV method for the detection and quantification of six water‐soluble vitamins in animal feed
CN112034052A (zh) 一种测定复杂组分中维生素b2的高效液相色谱分析方法
CN108627590A (zh) 一种测定依地酸二钠含量的高效液相色谱分析方法
CN113125580A (zh) 测定复杂组分中生物素的高效液相色谱分析方法
CN112816567A (zh) 测定褪黑素和维生素b6的高效液相色谱分析方法
Kiszkiel-Taudul et al. Dispersive liquid–liquid microextraction of famotidine and Nizatidine from water samples

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20210202

RJ01 Rejection of invention patent application after publication