CN112243895A - 一种半滑舌鳎雌鱼高效人工催产方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于水产养殖的技术领域,涉及一种半滑舌鳎雌鱼高效人工催产方法。本发明通过雌性亲鱼的选择、控制催产池养殖条件、人工催产、人工授精和孵化,实现对半滑舌鳎雌性亲鱼的高效人工催产。采用本发明的方法,半滑舌鳎雌鱼的催产率、相对产卵量、受精率和孵化率大大提高,是一种极为高效的人工催产方法。本发明所述的方法具有很好的实用性和可操作性,有利于半滑舌鳎养殖产业的进一步快速发展。
Description
技术领域
本发明属于水产养殖的技术领域,涉及一种半滑舌鳎雌鱼高效人工催产方法。
背景技术
半滑舌鳎(Cynoglossus semiliaevis)属于鲽形目,舌鳎科,舌鳎属,俗称鳎米鱼、龙利和牛舌头等,是我国沿海地区重要的海水养殖鱼类之一。半滑舌鳎人工育苗技术于2002年获得成功,随后在国内养殖规模逐渐扩大。由于其味道鲜美和营养丰富等特点,深受消费者欢迎,其经济价值极高,养殖前景非常广阔。
近几年,年均苗种需求量持续上升,但是受人工催产技术限制,半滑舌鳎现有的雌性亲鱼人工催产技术成功率较低,产卵量、受精率和孵化率较低,并且极不稳定。如杨景峰等(半滑舌鳎人工催产技术研究,内蒙古民族大学学报,2010)报道的方法,分别用10种不同的配方分别对10尾半滑舌鳎雌鱼进行人工催产,亲鱼催产前和催产后没有进行水温和光线强度调节的刺激,总体受精率为65.3%,总体孵化率为44.8%,该方法存在重大缺陷,即没有形成稳定可靠的人工催产技术和方法,很难在生产中大规模应用。再比如中国发明专利“全年获得半滑舌鳎高雌受精卵的方法”(CN202010506606.8)中的方法,通过使用促黄体素释放激素类似物(LHRH-A3)加绒毛膜促性腺素(HCG)对半滑舌鳎亲鱼进行人工催产(催产一次),其核心是该方法实现了全年高雌受精卵生产,没有对催产前和催产后水温和光线调节操作进行特别的说明,该方法产卵量、受精率和孵化率不高,同样存在效率过低的问题。另外,张玉祥等(催产激素对半滑舌鳎卵巢生化成分及血浆生殖激素水平的影响,水产科学,2017)中报道的方法,用促黄体素释放激素类似物(LHRH-A3)加绒毛膜促性腺素(HCG)对半滑舌鳎雌鱼进行人工催产,虽然该方法采用二次催产的方法,但该论文主要聚焦于催产后半滑舌鳎卵巢生化成分及血浆生殖激素的研究,虽然有关于产卵量、上浮卵量等的结果,但是催产率、受精率和孵化率这三个衡量催产效果的重要指标并未报道,因此该论文的方法在生产中的应用效果不可知。上述提到的相关报道,在半滑舌鳎雌性亲鱼人工催产操作的细节(例如催产前和催产后的水温和光线控制方面)方面描述很简单,在实际生产中很难重复。
因此,为了真正提高半滑舌鳎人工催产的效果,提高经济效益,需要寻找一种更高效并能在生产中大规模使用的半滑舌鳎雌性亲鱼人工催产的方法,提高产卵量、催产率、受精率和孵化率,进而提高半滑舌鳎养殖产量、促进产业发展和提高经济社会效益。
发明内容
本发明的目的在于提供一种高效的半滑舌鳎雌性亲鱼人工催产方法,有效提高半滑舌鳎催产率、产卵量、受精率和孵化率。
本发明是采用以下的技术方案实现的:
本发明提供了一种半滑舌鳎雌鱼高效人工催产方法,包括以下步骤:
(1)雌性亲鱼的选择
选择半滑舌鳎雌性亲鱼,年龄要达到3龄以上,体重1.5kg以上,性腺隆起的长度与身体全长的比达到0.4~0.5;
(2)控制催产池养殖条件
催产池底面积为20~40m2的圆形或方形水泥池,水深30~50cm,配有进排水系统、控光、控温和充氧设备设施,控制水的溶氧6~8mg/L,盐度28~30‰,pH7.4~8.0,日换水率为500%;
(3)人工催产
第一次催产前8h将雌鱼和雄鱼按照1:4~1:3的比例放入催产池中,水温控制在22.5~23.5℃之间,水面光线强度控制在100~200lx;第一次人工催产,用Ovaprim激素对雌鱼进行肌肉注射催产,水温继续严格控制在22.5~23.5℃之间,水面光线强度控制在100~200lx;24h后用同样的激素、剂量和方法进行第二次人工催产,随后将水温控制在24~25℃,水面光线强度控制在400~500lx;
(4)人工授精和孵化
第一次催产36h和60h后,雌鱼腹部能明显感觉到卵子在卵巢腔内流动时,立即进行人工挤卵,用干法或湿法授精;受精后,将受精卵放置在孵化池中孵化网箱中进行孵化,每方水体放卵量应控制在1500mL。
进一步地,所述雄鱼催产激素剂量为雌鱼的四分之一,或不用进行人工催产。
其中,所述步骤(3)中两次人工催产所用激素剂量为雌鱼每千克体重0.5~0.8mL,催产方法为背部肌肉注射。
进一步地,所述步骤(4)中第一次催产36h和60h后,应每隔半小时抚摸挤压雌鱼腹部,如果柔软并且能明显感觉到卵子在卵巢腔内流动,应立即进行人工挤卵,随后立即挤精,用干法或湿法授精,每100mL卵子需要精子量为0.2~0.3mL;受精5~10分钟后,用干净海水将粘液和多余的精子清洗干净,将受精卵放置在孵化网箱中进行孵化。
具体的,所述孵化网箱中用散气石微充气;孵化池水温22.5~24.5℃,溶氧7~8mg/mL,盐度28~30‰,pH7.4~8.0,日换水率应在200%以上;孵化网箱为80目。
进一步地,所述步骤(1)中半滑舌鳎雌性亲鱼从经过营养强化培育的群体中进行挑选,或从在工厂化养殖条件下达到性成熟的群体中挑选,健康无畸形。
本发明的有益效果是:
(1)通过对半滑舌鳎雌性亲鱼进行两次催产,并严格控制两次催产后的水温和光线强度,实现36h和60h后可以分别挤卵一次,亲鱼相对产卵量大大提高;
(2)催产率以及卵子的受精率和孵化率大幅提高;
(3)本发明涉及的方法操作简单,可重复性强,可以在生产中迅速广泛使用。
具体实施方式
为了使本发明目的、技术方案更加清楚明白,对本发明作进一步详细说明。下述实施例中所述实验方法,如无特殊说明,均为常规方法;实施例中未注明具体技术或条件者,按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行;所述试剂和材料,如无特殊说明,均可从商业途径获得。
下列实施例中,催产激素Ovaprim购买自青岛为科生物技术有限责任公司。促黄体素释放激素类似物(LHRH-A3)、绒毛膜促性腺素(HCG)和地欧酮购买自宁波激素二厂。
实施例1
步骤1.雌性亲鱼的选择
2019年3月中旬,选取人工养殖群体中的3龄雌性亲鱼280尾,平均体重1.8kg,在亲鱼培育车间经过约2个月的强化培育后,2019年5月中旬挑选性腺隆起的长度与身体全长的比达到0.4~0.5的雌鱼30尾用于人工催产。
步骤2.控制催产池养殖条件
所用催产池为底面积25m2的方形水泥池,水深控制在40cm,溶氧6~8mg/L,盐度28~30‰,pH7.4~8.0,日换水率为500%。
步骤3.人工催产
第一次人工催产前8h将雌鱼和雄鱼按照1:4~1:3的比例放入催产池中。通过控温设备将水温严格控制在22.5~23.5℃之间,水面光线强度控制在100~200lx。
第一次人工催产,用Ovaprim激素对雌鱼进行肌肉注射催产,激素剂量为雌鱼每kg体重0.6mL,催产方法为背部肌肉注射,水温继续严格控制在22.5~23.5℃之间,水面光线强度控制在100~200lx。
24h后用同样的Ovaprim激素剂量和方法进行第二次人工催产,随后将水温控制在24~25℃,水面光线强度控制在400~500lx。池水溶氧始终控制在6~8mg/L,pH控制在7.4~8.0,盐度控制在28~30‰。
对雄鱼不进行催产。
步骤4.人工授精和孵化
第一次催产36h和60h后,均每隔半小时抚摸挤压雌鱼腹部,明显感觉到卵子在卵巢腔内流动时,将雌鱼捞到操作台上,用毛巾将鱼体擦干,轻轻挤压腹部,将卵子收集到3L的塑料量杯中,进行人工挤卵,随后立即挤2~3条雄鱼精子,每100mL卵子与0.3mL精子混合,加1000mL海水授精。授精8分钟后,用干净海水将粘液和多余的精子清洗干净,将受精卵放置在孵化池中的80目孵化网箱中进行孵化,每方水体放卵量应控制在1500mL左右,孵化网箱中用散气石微充气。孵化池水温22.5~24.5℃,溶氧7~8mg/mL,盐度28~30‰,pH7.4~8.0,日换水率300%。为统计相对产卵量、受精率和孵化率,每次挤卵前称量雌鱼体重,记录产卵量和产卵雌鱼的数量,取每条雌鱼的少量受精卵统计受精率和孵化率。
对比例1
该对比例根据实施例1中的实施方法,区别在于:(1)步骤3中人工催产方法采用发明专利“全年获得半滑舌鳎高雌受精卵的方法”(CN202010506606.8)中的方法,即用促黄体素释放激素类似物(LHRH-A3)加绒毛膜促性腺素(HCG)进行人工催产,用生理盐水将上述两种药物配成每mL含有LHRH-A3 0.3μg和HCG 6U的溶液,雌鱼每尾注射1mL,注射方法为背部肌肉注射,注射一次,亲鱼催产前后水温一直控制在22.5~23.5℃,水面光线强度一直控制在100~200lx;(2)步骤4中,只能在催产34h之后,进行人工挤卵、授精和孵化操作。
其余步骤和操作与实施例1相同,并且实施时间与实施例1中一致,所用亲鱼与实施例1来自同一批的不同个体。
对比例2
该对比例根据实施例1中的实施方法,区别在于:(1)步骤3中的人工催产方法采用杨景峰等(半滑舌鳎人工催产技术研究,内蒙古民族大学学报,2010)报道的方法,即用促黄体素释放激素类似物(LHRH-A3)加地欧酮(DOM)进行人工催产,剂量为LHRH-A3 1.4μg每kg雌鱼体重,DOM1.8mg每kg雌鱼体重,背部肌肉注射,只注射一次,亲鱼催产前后水温一直控制在22.5~23.5℃,水面光线强度一直控制在100~200lx;(2)步骤4中,催产36h之后,进行人工挤卵、授精和孵化操作1次。
其余步骤和操作与实施例1相同,并且实施时间与实施例1中一致,所用亲鱼与实施例1来自同一批的不同个体。
对实施例1、对比例1和对比例2的半滑舌鳎催产率、相对产卵量、受精率和孵化率进行统计,结果如表1所示。
表1.实施例1和对比例1、对比例2组半滑舌鳎催产情况对比表
表中:催产率=(产卵雌鱼数量/催产雌鱼数量)×100%;
相对产卵量=(产卵mL数/雌鱼体重)×100%;
受精率=(受精卵粒数/总卵数)×100%;
孵化率=数(孵化仔鱼数/受精卵)×100%。
由表1可以看出,本发明的催产方法,催产率、相对产卵量、受精率和孵化率明显提高,尤其是相对产卵量,因为本发明通过两次催产实现了两次挤卵,所以产卵量较以往的方法相对产卵量翻倍。
当然,以上仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种半滑舌鳎雌鱼高效人工催产方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)雌性亲鱼的选择
选择半滑舌鳎雌性亲鱼,年龄要达到3龄以上,体重1.5kg以上,性腺隆起的长度与身体全长的比达到0.4~0.5;
(2)控制催产池养殖条件
催产池底面积为20~40m2的圆形或方形水泥池,水深30~50cm,配有进排水系统、控光、控温和充氧设备设施,控制水的溶氧6~8mg/L,盐度28~30‰,pH7.4~8.0,日换水率为500%;
(3)人工催产
第一次催产前8h将雌鱼和雄鱼按照1:4~1:3的比例放入催产池中,水温控制在22.5~23.5℃之间,水面光线强度控制在100~200lx;第一次人工催产,用Ovaprim激素对雌鱼进行肌肉注射催产,水温继续严格控制在22.5~23.5℃之间,水面光线强度控制在100~200lx;24h后用同样的激素、剂量和方法进行第二次人工催产,随后将水温控制在24~25℃,水面光线强度控制在400~500lx;
(4)人工授精和孵化
第一次催产36h和60h后,雌鱼腹部能明显感觉到卵子在卵巢腔内流动时,立即进行人工挤卵,用干法或湿法授精;受精后,将受精卵放置在孵化池中孵化网箱中进行孵化,每方水体放卵量应控制在1500mL。
2.根据权利要求1所述的一种半滑舌鳎雌鱼高效人工催产方法,其特征在于,所述雄鱼催产激素剂量为雌鱼的四分之一,或不用进行人工催产。
3.根据权利要求1或2所述的一种半滑舌鳎雌鱼高效人工催产方法,其特征在于,所述步骤(3)中两次人工催产所用激素剂量为雌鱼每千克体重0.5~0.8mL,催产方法为背部肌肉注射。
4.根据权利要求3所述的一种半滑舌鳎雌鱼高效人工催产方法,其特征在于,所述步骤(4)中第一次催产36h和60h后,应每隔半小时抚摸挤压雌鱼腹部,如果柔软并且能明显感觉到卵子在卵巢腔内流动,应立即进行人工挤卵,随后立即挤精,用干法或湿法授精,每100mL卵子需要精子量为0.2~0.3mL;受精5~10分钟后,用干净海水将粘液和多余的精子清洗干净,将受精卵放置在孵化网箱中进行孵化。
5.根据权利要求4所述的一种半滑舌鳎雌鱼高效人工催产方法,其特征在于,所述孵化网箱中用散气石微充气;孵化池水温22.5~24.5℃,溶氧7~8mg/mL,盐度28~30‰,pH7.4~8.0,日换水率应在200%以上;孵化网箱为80目。
6.根据权利要求4所述的一种半滑舌鳎雌鱼高效人工催产方法,其特征在于,所述步骤(1)中半滑舌鳎雌性亲鱼从经过营养强化培育的群体中进行挑选,或从在工厂化养殖条件下达到性成熟的群体中挑选,健康无畸形。
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