CN108064775A - 一种圆口铜鱼人工繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公布了一种圆口铜鱼人工繁殖方法。步骤是：（1）亲鱼挑选：根据圆口铜鱼亲鱼外部特征和挖卵器挖出的卵粒挑选性腺发育成熟度高的亲鱼作为催产亲鱼；（2）催产药物的配制及注射：按鱼体体重使用生理盐水配制催产药物促黄体素释放激素A3、鱼类脑垂体和绒毛膜促性腺激素；注射采用二次注射法，水温20.5~22.0℃，针距8~10 h；（3）人工催产与授精：注射催产药物后，不定时检查亲鱼，发现有排卵排精现象，进行人工授精，授精方法为湿法受精；（4）孵化：将获得的受精卵倒入锥形孵化器孵化，鱼苗出膜后移至鱼苗培育箱进行苗种培育。操作简便，有效的提高了人工繁殖率和鱼苗成活率（85％以上），为增殖放流保护圆口铜鱼种群资源奠定了坚实基础。
Description
技术领域
本发明属于水产养殖领域，更具体涉及一种圆口铜鱼人工繁殖方法，包括亲鱼挑选、催产药物的配制及注射、人工催产与授精和孵化，适用于圆口铜鱼的人工繁殖。
背景技术
圆口铜鱼（Coreius guichenoti）隶属鲤形目（Cypriniformes），鲤科（Cyprinidae），鮈亚科（Gotiongiae），铜鱼属，分布和生长在长江中上游。作为一种产漂流性卵的河道洄游型鱼类，其性腺发育高度依赖于金沙江中下游的特殊生境。近年来，随着金沙江梯级电站的逐级开发运行，圆口铜鱼栖息地减少，洄游通道受阻，其繁殖受到一定程度的影响，特别是拦河设施所导致的栖息地面积的日益缩小、生境的相互隔离，不仅阻隔了长江中游圆口铜鱼对金沙江繁殖群体进行补充的通道，而且也对顺流而下的圆口铜鱼幼鱼产生一定的阻隔作用。综合影响，圆口铜鱼种群数量锐减，种群生存堪忧。掌握一种有效的圆口铜鱼人工繁殖方法，获取大规模鱼苗进行增殖放流，是圆口铜鱼种群保护的重要措施。
经文献检索，发现已有专家报道过一种圆口铜鱼人工催产方法，但与本发明存在诸多差异，如使用的催产药物不同、授精方法不同、孵化装置不同。本发明一种圆口铜鱼人工繁殖方法，使用的催产药物为促黄体素释放激素A3（LHRH-A3）、鱼类脑垂体（PG）和绒毛膜促性腺激素（HCG）；授精方法为湿法受精；孵化装置为自制的锥形孵化器，底部连接水泵。采用本方法，受精率和孵化率较高，人工繁殖率高效，具有技术借鉴和示范作用。
发明内容
本发明的目的是在于提供了一种圆口铜鱼人工繁殖方法，操作简便，有效的提高了人工繁殖率和鱼苗成活率（85％以上），为增殖放流保护圆口铜鱼种群资源奠定了坚实基础。
为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种圆口铜鱼人工繁殖方法，其步骤包括：
1、亲鱼挑选：禁食24~48 h，根据外部特征和挖卵器挖出的卵粒挑选性腺发育成熟度高的亲鱼作为催产亲鱼。雌鱼腹部膨大，靠近泄殖孔附近较松软，生殖孔红肿突出；雄鱼胸鳍追星明显，生殖孔微红，轻轻挤压腹部后端有乳白色精液流出；挖卵器挖出的卵粒饱满，呈青灰色。
2、催产药物的配制及注射：按鱼体体重使用浓度0.9%的生理盐水配制催产药物：促黄体素释放激素A3（LHRH-A3）、鱼类脑垂体（PG）和绒毛膜促性腺激素（HCG）；采用二次注射法，水温20.5~22.0 ℃，针距8~10 h，第一针只注射雌鱼，第二针雌鱼和雄鱼均注射，雄鱼注射剂量为雌鱼的1/4~1/2。
3、人工催产与授精：注射催产药物后，不定时检查亲鱼，发现有排卵排精现象，立即进行人工授精，授精方法为湿法受精。
4、孵化：将受精卵倒入锥形孵化器充氧孵化，孵化器底部连接水泵，使得受精卵上浮，避免因聚积缺氧而死亡。鱼苗出膜后移至鱼苗培育箱进行鱼种培育。
所述步骤3，挤卵受精前，首先使用100 ppm的MS-222麻醉催产亲鱼，以充分获取卵粒和精液；另一方面降低鱼的应激反应，提高成活率；挤卵受精后，按照0.2ml/kg鱼体重对催产亲鱼注射恩诺沙星，增强鱼体免疫力，防止伤口感染。
通过上述1、2、3、4等步骤的技术措施：
最关键的是步骤2，催产药物的配制，剂量偏大，卵子和精子过熟；剂量偏小，卵子和精子不完全成熟，挤卵不通畅，因此，本发明根据挑选亲鱼的成熟度和鱼体体重，配制适宜剂量的催产药物，LHRH-A3 2~6 ug/kg鱼体重，PG 4~6 mg/kg鱼体重，LHRH-A3 8~14 ug/kg鱼体重，HCG 800~1000 IU/kg鱼体重，按照此方法，催产4尾雌鱼，产卵4万粒，催产率100%。其次是步骤4，相对于孵化桶和孵化环道，本发明使用的尼龙网布（60目）自制的锥形孵化器，更便于清洗和携带，实用性强，解决了亲鱼催产地和孵化设备不在同一地点的难题；另外，孵化用水不仅经滤网和生物棉过滤器处理，而且通过紫外灯杀菌和臭氧消毒，保证水体病菌少、水质清新，提高了孵化率（75%以上）。
技术方案与现有技术的主要区别：1）亲鱼挑选和孵化用水均具有双重保障，挑选出的亲鱼成熟度高，卵子和精子质量高，受精率高（85%-95%）；另外孵化用水不仅经滤网和生物棉过滤器处理，而且通过紫外灯杀菌和臭氧消毒，水质有保证，孵化率高（75%以上），从而大大提高了圆口铜鱼人工繁殖成功率；2）挤卵受精前后，分别对催产亲鱼麻醉、注射恩诺沙星，催产亲鱼成活率高达100%。
本发明与现有技术相比，具有以下优点及有益效果：
1、本发明亲鱼挑选具有双重保障：首先根据外部特征挑选，另外使用挖卵器挖出卵粒，根据卵粒的成熟度确保挑选出的亲鱼可用于人工催产，保证了挑选出的亲鱼，性腺发育成熟度高，卵和精子的质量高，卵粒饱满，呈青灰色，用透明液浸泡，显微镜观察，卵核偏位趋近鱼卵边缘，显微观察精液可见大量精子，遇水激活激烈运动。
2、本发明在挤卵受精前，首先使用100 ppm的MS-222麻醉催产亲鱼，使其处于安静状态，方便挤卵等操作顺利进行而充分获取卵粒和精液，不造成浪费；另一方面降低鱼的应激反应，减少对鱼的伤害，提高催产亲鱼成活率。
3、本发明在挤卵受精后，按照0.2ml/kg鱼体重对催产亲鱼注射恩诺沙星，增强鱼体免疫力，防止伤口感染，提高催产亲鱼成活率。
4、本发明使用的孵化装置是自制的锥形孵化器，底部连接水泵，保证受精卵漂浮，避免因聚积缺氧而死亡。另外本孵化器易拆卸和安装，方便清洗和携带，实用性强，解决了亲鱼催产地和孵化设备不在同一地点的难题。
5、本发明孵化用水充分曝气，具有双重保障：不仅经滤网和生物棉过滤器处理，而且通过紫外灯杀菌和臭氧消毒，保证水体病菌少、水质清新，提高了孵化率。
基于以上优点，本发明一种圆口铜鱼人工繁殖方法，有效提高了催产率（85%-100%）、受精率（85%-95%）、孵化率（75%以上）以及催产亲鱼的成活率（100%），为培育大规模鱼苗，保护圆口铜鱼种群资源提供了技术支撑，具有重大的经济效益、社会效益和生态效益。
具体实施方式
以下对本发明的具体实施方式进行具体说明。本发明实施例所述技术方案，如未特别说明，本领域均可借鉴采用。
实施例1：
一种圆口铜鱼人工繁殖方法，其步骤包括：
1、亲鱼挑选：1）禁食24或30或36或42或48 h后，将亲鱼集中起来，先根据外部特征挑选催产亲鱼，雌鱼体表粗糙，腹部膨大，柔软有弹性，特别是靠近泄殖孔附近较松软，生殖孔红肿突出；雄鱼胸鳍追星明显，手感粗糙，生殖孔微红，轻轻挤压腹部后端有乳白色精液流出；将挑选出的催产亲鱼按雌雄分别暂时放置在2个整理箱中，期间用气石充氧曝气；2）为确保根据外部特征挑选出的亲鱼性腺发育成熟，使用挖卵器（普通）挖卵，将挖卵器伸入生殖孔2或3 cm，然后向左或向右偏转插入卵巢，轻轻转动挖卵器挖卵，挖出的卵粒饱满，呈青灰色，用透明液浸泡，显微镜观察，卵核偏位趋近鱼卵边缘；显微观察精液有大量精子，遇水激活激烈运动。观察到上述现象，亲鱼性腺发育成熟度高，可用于人工催产。经过双重挑选出的催产亲鱼雌雄比例1:2，将其称量体重后按照雌雄暂放在2个整理箱中。
2、催产药物的配制及注射：为防止药物失效，催产药物现配现用。根据亲鱼性腺成熟度和鱼体体重，采用浓度0.9%的生理盐水配制催产药物促黄体素释放激素A3（LHRH-A3）、鱼类脑垂体（PG）和绒毛膜促性腺激素（HCG），稀释剂量以便于注射时换算为宜。注射采用二次注射法，注射部位为鱼胸鳍基部无鳞凹陷处，注射时鱼体在水体中，只露出头部和胸鳍部位即可，并用布轻轻遮盖鱼的眼睛，降低应激反应，注射针头与鱼体呈45度角，深入胸鳍基部1 cm。注射水温20.5或21.0或21.5或22.0 ℃，针距8或9或10 h。第一针：LHRH-A3 2~6 ug/ kg鱼体重，雄鱼不注射，第二针：PG 4~6 mg + LHRH-A3 8~14 ug + HCG 800~1000 IU /kg鱼体重，雌鱼和雄鱼均注射，雄鱼注射剂量，根据其成熟度采用1/4~1/2雌鱼剂量。每次注射完毕后，按雌雄分别放在2个网箱中，加以冲水刺激，促进亲鱼排卵排精。
3、人工催产与授精：注射催产药物后，冲水刺激亲鱼，并不定时捞出亲鱼，发现生殖孔外翻红肿，轻轻挤压腹部，发现有排卵排精现象，立即进行人工授精。水温20.5或21.0或21.5或22.0 ℃，效应时间为18或19或20 h。为充分获取卵粒和精液以及提高催产亲鱼成活率，首先在2个整理箱中配制100 ppm的MS-222麻醉催产亲鱼，保证水温与效应期间的水温一致（温差在1 ℃内）。每次麻醉1尾雌鱼和2尾雄鱼，待鱼体侧翻，不再游动，握在手中不折腾时进行人工授精操作。授精方法为湿法授精，首先将雄鱼从麻醉液中捞出，用干毛巾擦干体表水分，将精液挤入加有10 mL等温生理盐水的盆中，轻轻摇动授精盆，让精液散开，同时捞出雌鱼擦干水分，随即将鱼卵和精液同时挤入盆中，边挤边轻轻摇动授精盆，之后加入20或30或40 mL浓度为5%的葡萄糖继续摇匀，接着加入经过充分曝气、生化棉过滤、臭氧和紫外灯杀菌处理的孵化用水，轻轻摇匀，使卵和精子充分接触，之后静置2 min，完成授精过程。
4、孵化：卵和精子受精后，倒入尼龙网布制作的锥形孵化器（60目，半径0.2 m，高0.7 m，0.12 m3）充氧孵化，受精卵密度1.1×105粒/m3。孵化器架在一个大型圆形池（直径3.66 m，高0.91 m）中，池中孵化用水经过了充分曝气、生化棉过滤、臭氧和紫外灯杀菌处理。孵化器底部连接水泵，使受精卵在孵化器中能漂浮起来，避免聚积缺氧而死亡。另外，避免阳光照射。水温20.5或21.0或21.5或22.0或22.5 ℃，溶氧大于7 mg/L，出膜时间48或52或56或62h。出膜3或4或5 d后，鱼苗开始平游，将其转移至鱼苗培育箱培育。
按照上述技术措施，操作简便，易掌握，受精率和孵化率高，有效的提高了圆口铜鱼人工繁殖成功率，使实现圆口铜鱼的资源增殖成为可能，对长江上游珍稀特有鱼类的保护提供技术借鉴。挑选的4尾雌鱼和8尾雄鱼性腺发育成熟度高，采用二次注射法，第一针：LHRH-A3 4 ug / kg鱼体重，雄鱼不注射，第二针：PG 6 mg + LHRH-A3 12 ug + HCG 1000IU / kg鱼体重，雄鱼注射剂量是雌鱼的一半，针距10 h，效应时间19 h，催产率100%，催产出的卵和精子质量高，产卵4万粒左右，相对繁殖力为13.61粒/ g，受精率92%，孵化率80%，出苗3万尾左右，催产亲鱼成活率100%。为培育大规模鱼苗，保护圆口铜鱼种群资源提供了技术支撑，具有重大的经济效益、社会效益和生态效益。
Claims (1)
1.一种圆口铜鱼人工繁殖方法，其步骤是：
A、亲鱼挑选：禁食24~48 h，根据外部特征和挖卵器挖出的卵粒挑选性腺发育成熟亲鱼作为催产亲鱼，雌鱼腹部膨大，靠近泄殖孔附近较松软，生殖孔红肿突出；雄鱼胸鳍追星明显，生殖孔微红，挤压腹部后端有乳白色精液流出；挖卵器挖出的卵粒饱满，呈青灰色；
B、催产药物的配制及注射：按鱼体体重使用浓度0.9%的生理盐水配制催产药物：促黄体素释放激素A3、鱼类脑垂体和绒毛膜促性腺激素；采用二次注射法，水温20.5~22.0 ℃，针距8~10 h，第一针只注射雌鱼，第二针雌鱼和雄鱼均注射，雄鱼注射剂量为雌鱼的1/4~1/2；
C、人工催产与授精：注射催产药物后，不定时检查亲鱼，发现有排卵排精现象，进行人工授精，授精方法为湿法受精；
D、孵化：将受精卵倒入锥形孵化器充氧孵化，孵化器底部连接水泵，使得受精卵上浮，鱼苗出膜后移至鱼苗培育箱进行苗种培育；
所述的步骤（C），挤卵受精前，首先使用100 ppm的MS-222麻醉催产亲鱼，获取卵粒和精液；挤卵受精后，按照0.2ml/kg鱼体重对催产亲鱼注射恩诺沙星。
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