CN112206328A - 一种肿瘤药物植入缓释载体材料及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提出了一种肿瘤药物植入缓释载体材料的制备方法，包括以下步骤：S1.叶酸活性脂的制备；S2.PEG‑OMs的制备；S3.PEG‑18F的制备；S4.脂质体‑PEG‑18F的制备；S5.叶酸‑脂质体‑PEG‑18F的制备。本发明药物缓释载体具有良好的稳定性，载药量较高，载药面广；体内毒副作用小，抑瘤作用强，药物释放稳定，释药时间长等特点，本发明且制备方法简单、使用方便，具有广阔的应用前景。

Description

一种肿瘤药物植入缓释载体材料及其制备方法
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种肿瘤药物植入缓释载体材料及其制备方法。
背景技术
传统的化学治疗肿瘤疾病中大多数药物是以普通剂型给药，通常会被细胞组织和器官摄取，随机地分布于体内，而不是定向分布于病灶区，这主要是由于体内环境与药物作用的结果，如口服给药会受到胃肠道上皮细胞及肝中酶类降解与代谢，注射给药又要受到血浆蛋白的结合、分解等作用，最终也仅有少部分药物到达肿瘤病变区，这两种给药方式可能使药物浓度达不到治疗效果，要达到药物疗效就要增大给药剂量，这样也增大了对正常组织和细胞的毒副作用，因此将化疗药物制成特异性靶向给药体系，即能提高治疗效果，又可降低毒副作用。
在临床治疗中，药物的低毒和高效一直是人们研究的重点，化疗是临床上治疗肿瘤的主要手段，但是目前传统的化疗药物普通剂型缺乏靶向性，在杀伤肿瘤细胞的同时也会对正常细胞产生毒性，引起的毒副作用使患者不能耐受。因此，构建靶向肿瘤组织的药物传递系统是解决肿瘤化疗问题的有效途径。近年来，叶酸受体作为抗肿瘤药物的靶点受到了极大的关注，成为新型抗肿瘤药物研究的热点之一。叶酸是小分子量维生素，相对于单分子抗体等蛋白质，具有结构稳定、价格低廉、无免疫原性等特点。研究发现，叶酸受体(folate receptor，FR)是一种跨膜单链糖蛋白，在大多数上皮组织的恶性肿瘤细胞中过表达，而在正常细胞中低表达。利用叶酸受体在肿瘤细胞和正常细胞上表达的差异性及叶酸受体与叶酸和叶酸类似物结合的高特异性、高亲和性，通过叶酸受体的介导作用可望实现肿瘤的靶向性。叶酸受体介导的靶向给药系统主要采用两种手段，一种是对药物分子的直接叶酸化修饰，另一种是对药物载体的叶酸化修饰。叶酸直接修饰得到的叶酸-药物复合物虽能够提高药物对肿瘤的靶向性，但由于叶酸在生理条件下极低的溶解性能，当与药物形成复合物后会降低药物的溶解性，从而影响其生物利用率。加之一些疗效良好的抗肿瘤药物在生理条件下的溶解度都十分有限，因此药物载体在这些药物的临床应用方面极具潜力。而通过对药物载体的叶酸修饰化既可实现难溶药物或不稳定药物的靶向性输送，又可避免体内酶对药物的水解，提高药物的生物利用率。叶酸修饰的药物载体主要有脂质体、纳米粒子、树状大分子等。
分子影像学技术在疾病早期诊断和靶向治疗领域极具发展潜力和应用前景。目前，具有造影功能的靶向抗肿瘤药物载体尚无，开辟具有造影功能的靶向抗肿瘤药物载体，为提高疾病治愈率，高敏感、高精准诊疗技术的应用必不可少。
发明内容
本发明的目的在于提出一种肿瘤药物植入缓释载体材料及其制备方法，具有良好的稳定性，载药量较高，载药面广；体内毒副作用小，抑瘤作用强，药物释放稳定，释药时间长等特点，本发明且制备方法简单、使用方便，具有广阔的应用前景。
本发明的技术方案是这样实现的：
本发明提供一种肿瘤药物植入缓释载体材料的制备方法，包括以下步骤：
S1.叶酸活性脂的制备：称取叶酸溶于第一溶剂中，10-30℃搅拌下加入乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳化二亚胺盐酸化物和N-羟基琥珀酰亚胺，避光反应5-10h，抽滤去除沉淀，余液加入1-3倍体积的第二溶剂并搅拌产生沉淀，抽滤，并用第二溶剂洗涤所得沉淀，干燥即为叶酸活性脂；
S2.PEG-OMs的制备：将聚乙二醇2000溶于第三溶剂中，加入三乙胺，置于冰浴中边搅拌边加入甲基磺酰氯，冰浴反应1-3h，加入饱和碳酸钠溶液淬灭反应，反复震荡后，分液，水层用第三溶剂萃取3次，合并所有的有机相，干燥，减压除去溶剂，柱层析色谱纯化，得到PEG-OMs；
S3.PEG-18F的制备：将PEG-OMs加入第四溶剂中，加入Na18F，搅拌反应1-3h后，过滤，沉淀用水反复洗涤1-3次，得到PEG-18F；
S4.脂质体-PEG-18F的制备：称取氢化卵磷酯、胆固醇和PEG-18F溶于第五溶剂中，35-40℃减压旋转蒸发除去溶剂直至在容器内壁上形成一层脂质薄膜，室温下，置于真空干燥箱中过夜除去残余的溶剂，用Tris-HCl缓冲液于50-55℃水化脂质膜，再将水化后的脂质体于45-55℃水浴中，在通氮气的条件下，用高压挤出器过0.22μm滤膜整粒3-7次，得到脂质体-PEG-18F；
S5.叶酸-脂质体-PEG-18F的制备：称取叶酸活性脂溶于第六溶剂中，得到溶液A，将脂质体-PEG-18F溶于第七溶剂中，得到溶液B，将溶液B逐滴加入到溶液A中，室温避光搅拌反应8-12h，反应结束用第六溶剂清洗1-3次，再用去离子水清洗1-3次，最后用去离子水分散均匀，得到叶酸-脂质体-PEG-18F，即为肿瘤药物植入缓释载体材料。
作为本发明的进一步改进，步骤S1中所述第一溶剂选自DMSO、乙腈、DMF、四氢呋喃中的一种或几种混合；所述第二溶剂选自乙醚、甲乙醚、乙醇、甲醇、苯甲醚中的一种或几种混合；所述叶酸、乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳化二亚胺盐酸化物和N-羟基琥珀酰亚胺的质量比为1：(0.5-0.8)：(0.1-0.5)。
作为本发明的进一步改进，步骤S2中所述聚乙二醇2000、三乙胺和甲基磺酰氯的物质的量之比为(1.8-2.2)：(3-5)：1，所述第三溶剂选自二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、甲苯中的一种或几种混合。
作为本发明的进一步改进，步骤S3中所述PEG-OMs、Na18F的物质的量之比为1：(1-1.2)；所述第四溶剂为饱和碳酸氢钠溶液或饱和碳酸钠溶液。
作为本发明的进一步改进，步骤S4中所述氢化卵磷酯、胆固醇和PEG-18F的质量比为(1-3)：(2-4)：2；所述第五溶剂选自二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳中的一种或几种混合；所述Tris-HCl缓冲液的pH值为7.0-7.5。
作为本发明的进一步改进，步骤S5中所述叶酸活性脂和脂质体-PEG-18F的质量比为1：(0.9-1.4)；所述第六溶剂选自pH＝9-10的碳酸盐缓冲液、pH＝6.5-7的PBS缓冲液、pH＝7-7.5的Tris-HCl缓冲液中的一种；所述第七溶剂为pH＝7-7.5的Tris-HCl缓冲液。
作为本发明的进一步改进，所述肿瘤药物植入缓释载体材料载药的方法为：将叶酸-脂质体-PEG-18F、肿瘤药物、三乙胺溶于四氢呋喃、甲乙醚和二甲亚砜的混合液中，滴入去离子水，超声振荡，透析去离子后，去除溶剂和未包裹入载体的肿瘤药物，用0.22μm微孔滤膜过滤大的凝聚物，冷冻干燥，既得。
作为本发明的进一步改进，所述肿瘤药物包括但不限于DOX氯化物、顺铂、长春新碱、紫杉醇、喜树碱。
本发明进一步保护一种上述方法制得的肿瘤药物植入缓释载体材料。
本发明进一步保护一种上述的肿瘤药物植入缓释载体材料在制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明具有如下有益效果：本发明目的以叶酸为药物载体的靶向材料，并在PEG另一端连接放射元素18F，使其制得的药物缓释载体不仅能靶向给药，还能通过光学影响跟踪放射元素18F的分布，从而定位肿瘤的位置和形状，为精准医疗提供了有效途径；本发明叶酸-脂质体-PEG-18F作为药物缓释载体，形成胶束将肿瘤药物包裹在其中，利用载体本身生物相容性好，无细胞毒性，植入人体内不会产生炎症反应，利用其自身缓慢降解而达到药物缓释等优点，对其表面改性从而与叶酸分子结合，制备出能和肿瘤细胞特异性结合，靶向给药的纳米药物给药体系，对治疗肿瘤有着专一性强，高效率，对人体伤害小等特点。
本发明药物缓释载体具有良好的稳定性，载药量较高，载药面广；体内毒副作用小，抑瘤作用强，药物释放稳定，释药时间长等特点，本发明且制备方法简单、使用方便，具有广阔的应用前景。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例1制得的叶酸-脂质体-PEG-18F的SEM图；
图2为本发明测试例1中载药叶酸-脂质体-PEG-18F造影剂体外寻靶的共聚焦图(×600)；
图3为本发明测试例2中载药叶酸-脂质体-PEG-18F对A549R细胞的抗肿瘤效果图；
图4为本发明测试例2中载药叶酸-脂质体-PEG-18F对A549细胞的抗肿瘤效果图。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例中pH＝7.2的Tris-HCl缓冲液为0.01mol/L的pH＝7.2的Tris-HCl，的配置方法为：50mL 0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与44.7mL 0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100mL。
实施例中pH＝6.8的PBS缓冲液为0.01mol/L的pH＝6.8的PBS缓冲液，的配置方法为：取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250mL，加0.2mol/L氢氧化钠溶液118mL，用水稀释至1000mL。
实施例1肿瘤药物植入缓释载体材料的制备
S1.叶酸活性脂的制备：称取1g叶酸溶于20mL第一溶剂中，10℃搅拌下加入0.5g乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳化二亚胺盐酸化物和0.1g N-羟基琥珀酰亚胺，避光反应5h，抽滤去除沉淀，余液加入1倍体积的第二溶剂并搅拌产生沉淀，抽滤，并用10mL第二溶剂洗涤所得沉淀，干燥即为叶酸活性脂；
S2.PEG-OMs的制备：将1.8g聚乙二醇2000溶于50mL第三溶剂中，加入3g三乙胺，置于冰浴中边搅拌边加入1g甲基磺酰氯，冰浴反应1h，加入等体积饱和碳酸钠溶液淬灭反应，反复震荡后，分液，水层用50mL第三溶剂萃取3次，合并所有的有机相，干燥，减压除去溶剂，柱层析色谱纯化，得到PEG-OMs；
S3.PEG-18F的制备：将1g PEG-OMs加入20mL第四溶剂中，加入1g Na18F，搅拌反应1h后，过滤，沉淀用10mL水反复洗涤1次，得到PEG-18F；
S4.脂质体-PEG-18F的制备：称取1g氢化卵磷酯、2g胆固醇和2g PEG-18F溶于50mL第五溶剂中，35℃减压旋转蒸发除去溶剂直至在容器内壁上形成一层脂质薄膜，室温下，置于真空干燥箱中过夜除去残余的溶剂，用pH＝7.2Tris-HCl缓冲液于50℃水化脂质膜，再将水化后的脂质体于45℃水浴中，在通氮气的条件下，用高压挤出器过0.22μm滤膜整粒3次，得到脂质体-PEG-18F；
S5.叶酸-脂质体-PEG-18F的制备：称取1g叶酸活性脂溶于20mL第六溶剂中，得到溶液A，将0.9g脂质体-PEG-18F溶于20mL第七溶剂中，得到溶液B，将溶液B逐滴加入到溶液A中，室温避光搅拌反应8h，反应结束用第六溶剂清洗1次，再用去离子水清洗1次，最后50mL用去离子水分散均匀，得到叶酸-脂质体-PEG-18F，即为肿瘤药物植入缓释载体材料，图1为本发明叶酸-脂质体-PEG-18F的SEM图；
S6.肿瘤药物植入缓释载体材料载药的方法为：将1g叶酸-脂质体-PEG-18F、0.7g紫杉醇、1g三乙胺溶于50mL四氢呋喃、甲乙醚和二甲亚砜的混合液(四氢呋喃、甲乙醚和二甲亚砜的体积比为1:1:1)中，滴入5mL去离子水，1000W超声振荡，透析去离子后，去除溶剂和未包裹入载体的紫杉醇，用0.22μm微孔滤膜过滤大的凝聚物，冷冻干燥，既得。
本实施例中，步骤S1中所述第一溶剂选自DMSO；所述第二溶剂选自乙醚。
步骤S2中所述第三溶剂为二氯甲烷。
步骤S3中所述第四溶剂为饱和碳酸氢钠溶液。
步骤S4中所述第五溶剂为二氯甲烷。
步骤S5中所述第六溶剂为pH＝7.2的Tris-HCl缓冲液；所述第七溶剂为pH＝7.2的Tris-HCl缓冲液。
实施例2肿瘤药物植入缓释载体材料的制备
S1.叶酸活性脂的制备：称取1g叶酸溶于20mL第一溶剂中，30℃搅拌下加入0.8g乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳化二亚胺盐酸化物和0.5g N-羟基琥珀酰亚胺，避光反应10h，抽滤去除沉淀，余液加入3倍体积的第二溶剂并搅拌产生沉淀，抽滤，并用10mL第二溶剂洗涤所得沉淀，干燥即为叶酸活性脂；
S2.PEG-OMs的制备：将2.2g聚乙二醇2000溶于50mL第三溶剂中，加入5g三乙胺，置于冰浴中边搅拌边加入1g甲基磺酰氯，冰浴反应3h，加入等体积饱和碳酸钠溶液淬灭反应，反复震荡后，分液，水层用50mL第三溶剂萃取3次，合并所有的有机相，干燥，减压除去溶剂，柱层析色谱纯化，得到PEG-OMs；
S3.PEG-18F的制备：将1g PEG-OMs加入20mL第四溶剂中，加入1.2g Na18F，搅拌反应3h后，过滤，沉淀用10mL水反复洗涤3次，得到PEG-18F；
S4.脂质体-PEG-18F的制备：称取3g氢化卵磷酯、4g胆固醇和2g PEG-18F溶于50mL第五溶剂中，40℃减压旋转蒸发除去溶剂直至在容器内壁上形成一层脂质薄膜，室温下，置于真空干燥箱中过夜除去残余的溶剂，用pH＝7.2Tris-HCl缓冲液于55℃水化脂质膜，再将水化后的脂质体于55℃水浴中，在通氮气的条件下，用高压挤出器过0.22μm滤膜整粒7次，得到脂质体-PEG-18F；
S5.叶酸-脂质体-PEG-18F的制备：称取1g叶酸活性脂溶于20mL第六溶剂中，得到溶液A，将1.4g脂质体-PEG-18F溶于20mL第七溶剂中，得到溶液B，将溶液B逐滴加入到溶液A中，室温避光搅拌反应12h，反应结束用第六溶剂清洗1-3次，再用去离子水清洗3次，最后50mL用去离子水分散均匀，得到叶酸-脂质体-PEG-18F，即为肿瘤药物植入缓释载体材料；
S6.肿瘤药物植入缓释载体材料载药的方法为：将1g叶酸-脂质体-PEG-18F、0.7g喜树碱、1g三乙胺溶于50mL四氢呋喃、甲乙醚和二甲亚砜的混合液(四氢呋喃、甲乙醚和二甲亚砜的体积比为1:1:1)中，滴入5mL去离子水，1200W超声振荡，透析去离子后，去除溶剂和未包裹入载体的喜树碱，用0.22μm微孔滤膜过滤大的凝聚物，冷冻干燥，既得。
步骤S1中所述第一溶剂为DMF；所述第二溶剂为甲乙醚。
步骤S2中所述第三溶剂为三氯甲烷。
步骤S3中所述第四溶剂为饱和碳酸钠溶液。
步骤S4中所述第五溶剂为三氯甲烷。
步骤S5中所述第六溶剂为pH＝6.8的PBS缓冲液；所述第七溶剂为pH＝7.2的Tris-HCl缓冲液。
实施例3肿瘤药物植入缓释载体材料的制备
S1.叶酸活性脂的制备：称取1g叶酸溶于20mL第一溶剂中，20℃搅拌下加入0.75g乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳化二亚胺盐酸化物和0.35g N-羟基琥珀酰亚胺，避光反应7h，抽滤去除沉淀，余液加入2倍体积的第二溶剂并搅拌产生沉淀，抽滤，并用10mL第二溶剂洗涤所得沉淀，干燥即为叶酸活性脂；
S2.PEG-OMs的制备：将2g聚乙二醇2000溶于50mL第三溶剂中，加入4g三乙胺，置于冰浴中边搅拌边加入1g甲基磺酰氯，冰浴反应2h，加入等体积饱和碳酸钠溶液淬灭反应，反复震荡后，分液，水层用50mL第三溶剂萃取3次，合并所有的有机相，干燥，减压除去溶剂，柱层析色谱纯化，得到PEG-OMs；
S3.PEG-18F的制备：将1g PEG-OMs加入20mL第四溶剂中，加入1-1.2g Na18F，搅拌反应2h后，过滤，沉淀用10mL水反复洗涤2次，得到PEG-18F；
S4.脂质体-PEG-18F的制备：称取2g氢化卵磷酯、3g胆固醇和2g PEG-18F溶于50mL第五溶剂中，37℃减压旋转蒸发除去溶剂直至在容器内壁上形成一层脂质薄膜，室温下，置于真空干燥箱中过夜除去残余的溶剂，用pH＝7.2Tris-HCl缓冲液于52℃水化脂质膜，再将水化后的脂质体于50℃水浴中，在通氮气的条件下，用高压挤出器过0.22μm滤膜整粒5次，得到脂质体-PEG-18F；
S5.叶酸-脂质体-PEG-18F的制备：称取1g叶酸活性脂溶于20mL第六溶剂中，得到溶液A，将1.2g脂质体-PEG-18F溶于20mL第七溶剂中，得到溶液B，将溶液B逐滴加入到溶液A中，室温避光搅拌反应10h，反应结束用第六溶剂清洗2次，再用去离子水清洗2次，最后50mL用去离子水分散均匀，得到叶酸-脂质体-PEG-18F，即为肿瘤药物植入缓释载体材料；
S6.肿瘤药物植入缓释载体材料载药的方法为：将1g叶酸-脂质体-PEG-18F、0.7gDOX氯化物、1g三乙胺溶于50mL四氢呋喃、甲乙醚和二甲亚砜的混合液(四氢呋喃、甲乙醚和二甲亚砜的体积比为1:1:1)中，滴入5mL去离子水，1100W超声振荡，透析去离子后，去除溶剂和未包裹入载体的阿霉素，用0.22μm微孔滤膜过滤大的凝聚物，冷冻干燥，既得。
步骤S1中所述第一溶剂为四氢呋喃；所述第二溶剂为苯甲醚。
步骤S2中所述第三溶剂为甲苯。
步骤S3中所述第四溶剂为饱和碳酸氢钠溶液。
步骤S4中所述第五溶剂为三氯甲烷。
步骤S5中所述第六溶剂为pH＝7.2的Tris-HCl缓冲液；所述第七溶剂为pH＝7.2的Tris-HCl缓冲液。
测试例1体外超声、光声双模态显像
采用琼脂糖凝胶为模型，取载药的叶酸-脂质体-PEG-18F靶向用双蒸水稀释至1mg/mL，以单纯双蒸水为对照组。采用医用超声诊断仪观察基波及谐波模式下超声显影情况(LA523探头，频率4-12MHz，增益70％，MI0.12)，并采用超声Flash辐照，作用3次后，继续观察其超声显影情况，并用超声定量仪进行定量分析。
取上述相同浓度造影剂于模型中，模型孔心距探头＜1cm，以波长为700nm脉冲激光辐照，以双蒸水为对照，观察其光声成像情况。
结果见图2，载药的叶酸-脂质体-PEG-18F靶向造影剂体外靶向能力在激光共聚焦显微镜下，经DiL染色造影剂外壳呈红色，DiO染色细胞膜呈绿色。靶向造影剂组可见大量造影剂向MDA-MB-231细胞紧密聚集，在细胞表面较明显，部分被细胞吞噬于胞内。
测试例2作为抗肿瘤药物的体外实验
本实验选择两种购自ATCC公司的肿瘤细胞株，为肺癌细胞(A549)和耐药肺癌细胞(A549R)。
(1)MTT检测功能化纳米硒
取处于对数生长期的肿瘤细胞，调整活细胞浓度为1×104/mL加于96孔培养板，每孔100μL，在37℃，5％CO2培养箱中培养24h。待贴壁后，再分别加入不同浓度(10μM、20μM、40μM、80μM)上述实施例3制备得到的肿瘤药物植入缓释载体材料载药材料溶液100μL，对照为等体积pH＝6.8的PBS溶液，加样组和对照组均设5个复孔，置37℃，5％CO2培养72h，然后加入MTT(5mg/mL)20μL/孔，4h后用移液枪移去上层清液，加入二甲基亚砜(DMSO)150μL/孔，振荡10min左右，用酶标仪在570nm波长下测定OD值。计算细胞存活率。
细胞存活率(％)＝加药孔的实际OD值/对照孔的OD值；
细胞抑制率(％)＝100％-细胞存活率。
实验结果见图3和图4。由图可见，本发明制备的载药叶酸-脂质体-PEG-18F具有脂溶性和水溶性，易为人体吸收，在MTT试验中两者对肿瘤细胞均显示出较强的抑制作用，且20μM时的抗肿瘤效果更好。
与现有技术相比，本发明目的以叶酸为药物载体的靶向材料，并在PEG另一端连接放射元素18F，使其制得的药物缓释载体不仅能靶向给药，还能通过光学影响跟踪放射元素18F的分布，从而定位肿瘤的位置和形状，为精准医疗提供了有效途径；本发明叶酸-脂质体-PEG-18F作为药物缓释载体，形成胶束将肿瘤药物包裹在其中，利用载体本身生物相容性好，无细胞毒性，植入人体内不会产生炎症反应，利用其自身缓慢降解而达到药物缓释等优点，对其表面改性从而与叶酸分子结合，制备出能和肿瘤细胞特异性结合，靶向给药的纳米药物给药体系，对治疗肿瘤有着专一性强，高效率，对人体伤害小等特点。
本发明药物缓释载体具有良好的稳定性，载药量较高，载药面广；体内毒副作用小，抑瘤作用强，药物释放稳定，释药时间长等特点，本发明且制备方法简单、使用方便，具有广阔的应用前景。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种肿瘤药物植入缓释载体材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.叶酸活性脂的制备：称取叶酸溶于第一溶剂中，10-30℃搅拌下加入乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳化二亚胺盐酸化物和N-羟基琥珀酰亚胺，避光反应5-10h，抽滤去除沉淀，余液加入1-3倍体积的第二溶剂并搅拌产生沉淀，抽滤，并用第二溶剂洗涤所得沉淀，干燥即为叶酸活性脂；
S2.PEG-OMs的制备：将聚乙二醇2000溶于第三溶剂中，加入三乙胺，置于冰浴中边搅拌边加入甲基磺酰氯，冰浴反应1-3h，加入饱和碳酸钠溶液淬灭反应，反复震荡后，分液，水层用第三溶剂萃取3次，合并所有的有机相，干燥，减压除去溶剂，柱层析色谱纯化，得到PEG-OMs；
S3.PEG-18F的制备：将PEG-OMs加入第四溶剂中，加入Na18F，搅拌反应1-3h后，过滤，沉淀用水反复洗涤1-3次，得到PEG-18F；
S4.脂质体-PEG-18F的制备：称取氢化卵磷酯、胆固醇和PEG-18F溶于第五溶剂中，35-40℃减压旋转蒸发除去溶剂直至在容器内壁上形成一层脂质薄膜，室温下，置于真空干燥箱中过夜除去残余的溶剂，用Tris-HCl缓冲液于50-55℃水化脂质膜，再将水化后的脂质体于45-55℃水浴中，在通氮气的条件下，用高压挤出器过0.22μm滤膜整粒3-7次，得到脂质体-PEG-18F；
S5.叶酸-脂质体-PEG-18F的制备：称取叶酸活性脂溶于第六溶剂中，得到溶液A，将脂质体-PEG-18F溶于第七溶剂中，得到溶液B，将溶液B逐滴加入到溶液A中，室温避光搅拌反应8-12h，反应结束用第六溶剂清洗1-3次，再用去离子水清洗1-3次，最后用去离子水分散均匀，得到叶酸-脂质体-PEG-18F，即为肿瘤药物植入缓释载体材料。
2.根据权利要求1所述一种肿瘤药物植入缓释载体材料的制备方法，其特征在于，步骤S1中所述第一溶剂选自DMSO、乙腈、DMF、四氢呋喃中的一种或几种混合；所述第二溶剂选自乙醚、甲乙醚、乙醇、甲醇、苯甲醚中的一种或几种混合；所述叶酸、乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳化二亚胺盐酸化物和N-羟基琥珀酰亚胺的质量比为1：(0.5-0.8)：(0.1-0.5)。
3.根据权利要求1所述一种肿瘤药物植入缓释载体材料的制备方法，其特征在于，步骤S2中所述聚乙二醇2000、三乙胺和甲基磺酰氯的物质的量之比为(1.8-2.2)：(3-5)：1，所述第三溶剂选自二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、甲苯中的一种或几种混合。
4.根据权利要求1所述一种肿瘤药物植入缓释载体材料的制备方法，其特征在于，步骤S3中所述PEG-OMs、Na18F的物质的量之比为1：(1-1.2)；所述第四溶剂为饱和碳酸氢钠溶液或饱和碳酸钠溶液。
5.根据权利要求1所述一种肿瘤药物植入缓释载体材料的制备方法，其特征在于，步骤S4中所述氢化卵磷酯、胆固醇和PEG-18F的质量比为(1-3)：(2-4)：2；所述第五溶剂选自二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳中的一种或几种混合；所述Tris-HCl缓冲液的pH值为7.0-7.5。
6.根据权利要求1所述一种肿瘤药物植入缓释载体材料的制备方法，其特征在于，步骤S5中所述叶酸活性脂和脂质体-PEG-18F的质量比为1：(0.9-1.4)；所述第六溶剂选自pH＝9-10的碳酸盐缓冲液、pH＝6.5-7的PBS缓冲液、pH＝7-7.5的Tris-HCl缓冲液中的一种；所述第七溶剂为pH＝7-7.5的Tris-HCl缓冲液。
7.根据权利要求1所述一种肿瘤药物植入缓释载体材料的制备方法，其特征在于，所述肿瘤药物植入缓释载体材料载药的方法为：将叶酸-脂质体-PEG-18F、肿瘤药物、三乙胺溶于四氢呋喃、甲乙醚和二甲亚砜的混合液中，滴入去离子水，超声振荡，透析去离子后，去除溶剂和未包裹入载体的肿瘤药物，用0.22μm微孔滤膜过滤大的凝聚物，冷冻干燥，既得。
8.根据权利要求7所述一种肿瘤药物植入缓释载体材料的制备方法，其特征在于，所述肿瘤药物包括但不限于DOX氯化物、顺铂、长春新碱、紫杉醇、喜树碱。
9.一种如权利要求1-8任一项权利要求所述方法制得的肿瘤药物植入缓释载体材料。
10.一种如权利要求9所述的肿瘤药物植入缓释载体材料在制备抗肿瘤药物中的应用。
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