CN112203657A

CN112203657A - 患有经典法布里病的患者的治疗

Info

Publication number: CN112203657A
Application number: CN201980024335.8A
Authority: CN
Inventors: 杰伊·巴斯; 埃尔弗里达·本杰明
Original assignee: Amicus Therapeutics Inc
Current assignee: Amicus Therapeutics Inc
Priority date: 2018-02-06
Filing date: 2019-02-06
Publication date: 2021-01-08
Also published as: US20210038579A1; DK3749308T3; JP2021512896A; JP2024026080A; HRP20240025T1; PL3749308T3; EP4316589A2; EP3749308B1; FI3749308T3; AU2019217603A1; WO2019157056A8; AR114392A1; TW201944998A; SI3749308T1; RS65103B1; EP4316589A3; CA3090499A1; EP3749308A1; PT3749308T; KR20200128675A

Abstract

提供了用于治疗患者的经典法布里病的方法。某些方法包括向所述患者施用约123mg的米加司他游离碱当量，以降低肾脏球形三酰神经酰胺，稳定肾功能，降低左心室质量，降低血浆球丙糖酰基鞘氨醇和/或治疗胃肠道症状。

Description

患有经典法布里病的患者的治疗

技术领域

本发明的原理和实施例总体上涉及用于治疗溶酶体贮积失调的药理学伴侣的用途，特别是用于治疗法布里病的米加司他(migalastat)的用途。

参考序列表

随本文提交的序列表文本文件被标识为“00790758.TXT”(22Kb，于2019年2月1日创建)，通过引用并入本文。

背景技术

法布里病是一种进行性的X-连锁的先天性鞘糖脂代谢缺陷，是由作为α-Gal A基因(GLA)突变的结果的在溶酶体酶α-半乳糖苷酶A(α-Gal A)方面的缺乏造成的。尽管是X-连锁障碍，女性可能表现出不同程度的临床表现。法布里病是一种罕见的疾病，发生率估计在40,000分之一的男性发病至117,000分之一的一般人群发病。此外，存在着可能在诊断标准以下的法布里病的迟发表型的变体，因为它们没有呈现出经典的体征和症状。这种情况以及法布里病的新生儿筛查，表明法布里病的实际发病率可能高于目前的估计。

如果不治疗，法布里患者的预期寿命减少，通常在四十岁或五十岁左右由于影响肾脏、心脏和/或中枢神经系统的血管疾病而死亡。酶缺乏导致底物，球形三酰神经酰胺(GL-3)，在全身血管内皮和内脏组织中的细胞内积累。由于鞘糖脂沉积，肾功能逐步衰退和氮质血症的发展通常在生命的三十岁至五十岁时发生，但是也可能早在二十岁就发生。肾损伤在半合子(男性)和杂合子(女性)患者中都有发现。

法布里病引起的心脏病发生在大多数男性和许多女性中。早期的心脏所见包括左心室增大、心瓣膜受累以及传导异常。二尖瓣关闭不全是典型存在于儿童或青少年中的最常见的瓣膜损伤。脑血管表现主要来自多病灶小血管受累并且可能包括血栓、短暂脑缺血发作、基底动脉缺血和动脉瘤、癫痫发作、偏瘫、偏身麻木、失语症、迷路病症或脑出血。脑血管表现的平均发作年龄为33.8岁。可能随着年龄增长而表现出人格改变和精神病行为。

目前认可的法布里病的治疗为酶替代疗法(“ERT”)。两种α-Gal A产品目前可用于治疗法布里病：α-半乳糖苷酶(

希雷人基因治疗公司(Shire Human GeneticTherapies))和β-半乳糖苷酶(

赛诺菲健赞公司(Sanofi GenzymeCorporation))。这两种形式的ERT旨在用于静脉施用重组酶形式来补偿患者不足的α-GalA活性。虽然ERT在许多情况下是有效的，这种治疗还是有限制的。例如，没有证实这两种α-Gal A产物能充分降低中风的风险，心肌对治疗反应缓慢，并且GL-3从肾脏的一些细胞类型中的消除受到限制。

此外，具有经典法布里表型的患者倾向于具有较低的基线α-Gal A活性，多器官系统受累以及基线时更为严重的疾病表现。

因此，仍然需要用于治疗法布里病的疗法，尤其是治疗患有经典法布里病的患者的疗法。

发明内容

本发明的不同方面涉及使用米格司他来治疗患有经典法布里病的患者。此类治疗可包括降低肾脏GL-3，稳定肾功能，降低左心室质量(LVM)，降低血浆球丙糖酰基鞘氨醇(溶血-Gb₃)和/或治疗胃肠道症状。

本发明的一个方面涉及一种在患有经典法布里病的患者中降低肾脏GL-3的方法，该方法包括以每隔一天一次的频率向该患者施用有效量的米加司他或其盐以降低该患者的肾脏GL-3。在一个或多个实施例中，该有效量为约100mg至约150mg游离碱当量(FBE)。

在一个或多个实施例中，在开始施用米加司他或其盐之前，该患者具有升高的肾间质毛细血管GL-3。

在一个或多个实施例中，降低肾脏GL-3包括降低每个肾间质毛细血管的GL-3内含物。

在一个或多个实施例中，患者的α-Gal A突变选自p.Ile253Th(I253T)、p.Pro259Arg(P259R)、p.Gly183Asp(G183D)、p.Leu243Phe(L243F)、p.Cys174Arg(C174R)、p.Asp55Val/Gln57Leu(D55V/Q57L)、p.Gly144Val(G144V)、p.Arg328Gln(R301Q)、p.Gly373Ser(G373S)、p.Asp322Glu(D322E)、p.Gly325Arg G325R和p.Tyr216Cys(Y216C)。

在一个或多个实施例中，该米加司他或其盐增强α-Gal A活性。

在一个或多个实施例中，该有效量为约123mg FBE。

在一个或多个实施例中，该有效量为约123mg的米加司他游离碱。

在一个或多个实施例中，米加司他的该盐是米加司他盐酸盐。

在一个或多个实施例中，该有效量为约150mg的米加司他盐酸盐。

在一个或多个实施例中，该米加司他或其盐呈口服剂型。在一个或多个实施例中，该口服剂型包含片剂、胶囊剂或溶液剂。

在一个或多个实施例中，该米加司他或其盐施用至少6个月。

在一个或多个实施例中，该患者是ERT初治患者。

在一个或多个实施例中，向一组经典法布里患者施用米加司他或其盐在施用米加司他或其盐6个月后提供每个肾间质毛细血管的GL-3内含物至少约0.5的平均降低。

本发明的另一方面涉及一种在有需要的患者中治疗经典法布里病的方法，该方法包括以每隔一天一次的频率向患者施用有效量的米加司他或其盐。在一个或多个实施例中，该有效量为约100mg至约150mg FBE。在一个或多个实施例中，施用米加司他或其盐可降低患者的肾脏GL-3。

在一个或多个实施例中，患者在α-Gal A中具有选自由I253T、P259R、G183D、L243F、C174R、D55V/Q57L、G144V、R301Q、G373S、D322E、G325R和Y216C组成的组的突变。

在一个或多个实施例中，该有效量为约123mg FBE。

在一个或多个实施例中，该米加司他或其盐施用至少6个月。

在一个或多个实施例中，该患者是ERT初治患者。

本发明的另一方面涉及在患有经典法布里病的患者中稳定肾功能的方法，该方法包括以每隔一天一次的频率向患者施用有效量的米加司他或其盐以稳定患者的肾功能。在一个或多个实施例中，该有效量为约100mg至约150mg FBE。

在一个或多个实施例中，患者在开始施用米加司他或其盐之前具有肾脏损害。

在一个或多个实施例中，该有效量为约123mg FBE。

在一个或多个实施例中，该米加司他或其盐施用至少6个月。

在一个或多个实施例中，该米加司他或其盐施用至少24个月。

在一个或多个实施例中，该患者是ERT初治患者。

在一个或多个实施例中，向一组经典法布里患者施用米加司他或其盐在施用米加司他或其盐24个月后提供eGFR_CKD-EPI大于-1.0mL/min/1.73m²的平均年变化率。

本发明的另一方面涉及一种在有需要的患者中治疗经典法布里病的方法，该方法包括以每隔一天一次的频率向患者施用有效量的米加司他或其盐。在一个或多个实施例中，该有效量为约100mg至约150mg FBE。在一个或多个实施例中，施用米加司他或其盐稳定患者的肾功能。

在一个或多个实施例中，该有效量为约123mg FBE。

在一个或多个实施例中，该米加司他或其盐施用至少6个月。

在一个或多个实施例中，该患者是ERT初治患者。

本发明的另一方面涉及一种在患有经典法布里病的患者中降低LVM的方法，该方法包括以每隔一天一次的频率向该患者施用有效量的米加司他或其盐以降低该患者的LVM。在一个或多个实施例中，该有效量为约100mg至约150mg FBE。

在一个或多个实施例中，在开始施用米加司他或其盐之前，该患者患有左心室肥大(LVH)。

在一个或多个实施例中，降低LVM包括降低左心室质量指数(LVMi)。

在一个或多个实施例中，该有效量为约123mg FBE。

在一个或多个实施例中，该米加司他或其盐施用至少6个月。

在一个或多个实施例中，该患者是ERT初治患者。

在一个或多个实施例中，向一组经典法布里患者施用米加司他或其盐在施用米加司他或其盐24个月后提供LVMi至少约5g/m²的平均降低。

本发明的另一方面涉及一种在有需要的患者中治疗经典法布里病的方法，该方法包括以每隔一天一次的频率向患者施用有效量的米加司他或其盐。在一个或多个实施例中，该有效量为约100mg至约150mg FBE。在一个或多个实施例中，施用米加司他或其盐降低患者的LVM。

在一个或多个实施例中，在开始施用米加司他或其盐之前，该患者患有LVH。

在一个或多个实施例中，降低LVM包括降低LVMi。

在一个或多个实施例中，该有效量为约123mg FBE。

在一个或多个实施例中，该米加司他或其盐施用至少6个月。

在一个或多个实施例中，该患者是ERT初治患者。

本发明的另一方面涉及一种在患有经典法布里病的患者中降低血浆溶血-Gb₃的方法，该方法包括以每隔一天一次的频率向该患者施用有效量的米加司他或其盐以降低该患者的血浆溶血-Gb₃。在一个或多个实施例中，该有效量为约100mg至约150mg FBE。

在一个或多个实施例中，患者在开始施用米加司他或其盐之前具有升高的血浆溶血-Gb₃。

在一个或多个实施例中，该有效量为约123mg FBE。

在一个或多个实施例中，该米加司他或其盐施用至少6个月。

在一个或多个实施例中，该患者是ERT初治患者。

在一个或多个实施例中，其中向一组经典法布里患者施用米加司他或其盐在施用米加司他或其盐24个月后提供血浆溶血-Gb₃至少约15nmol/L的平均降低。

本发明的另一方面涉及一种在有需要的患者中治疗经典法布里病的方法，该方法包括以每隔一天一次的频率向患者施用有效量的米加司他或其盐。在一个或多个实施例中，该有效量为约100mg至约150mg FBE。在一个或多个实施例中，施用米加司他或其盐降低患者的血浆溶血-Gb₃。

在一个或多个实施例中，患者在开始施用米加司他或其盐之前具有升高的血浆溶血-Gb3。

在一个或多个实施例中，该有效量为约123mg FBE。

在一个或多个实施例中，该米加司他或其盐施用至少6个月。

在一个或多个实施例中，该患者是ERT初治患者。

本发明的另一方面涉及在患有经典法布里病的患者中治疗胃肠道症状的方法，该方法包括以每隔一天一次的频率向患者施用包含有效量的米加司他或其盐的配制品以治疗胃肠道症状。在一个或多个实施例中，该有效量为约100mg至约150mg FBE。

在一个或多个实施例中，患者在开始施用米加司他或其盐之前有腹泻。

在一个或多个实施例中，治疗患者的一种或多种胃肠道症状包括减轻腹泻症状。

在一个或多个实施例中，该有效量为约123mg FBE。

在一个或多个实施例中，该米加司他或其盐施用至少6个月。

在一个或多个实施例中，该患者是ERT初治患者。

在一个或多个实施例中，向一组经典法布里患者施用米加司他或其盐在施用米加司他或其盐24个月后提供胃肠道腹泻症状评定量表(GSRS-D)至少约0.5的平均降低。

本发明的另一方面涉及一种在有需要的患者中治疗经典法布里病的方法，该方法包括以每隔一天一次的频率向患者施用有效量的米加司他或其盐。在一个或多个实施例中，该有效量为约100mg至约150mg FBE。在一个或多个实施例中，施用米加司他或其盐治疗患者的一种或多种胃肠道症状。

在一个或多个实施例中，该有效量为约123mg FBE。

在一个或多个实施例中，该米加司他或其盐施用至少6个月。

在一个或多个实施例中，该患者是ERT初治患者。

在一个或多个实施例中，向一组经典法布里患者施用米加司他或其盐在施用米加司他或其盐24个月后提供GSRS-D至少约0.5的平均降低。

附图说明

从以下书面描述和附图中，本发明的其他特征将变得明显，其中：

图1A-1E显示了人野生型GLA基因的完整DNA序列(SEQ ID NO:1)；

图2显示了野生型α-Gal A蛋白(SEQ ID NO:2)；

图3显示了编码野生型α-Gal A蛋白的核酸序列(SEQ ID NO:3)；和

图4.图4A-4E显示了在经典男性和其他患者(非经典男性和女性)亚组中疾病严重程度的测量。(A)从基线/第6个月到第24个月的GFR平均年变化率。(B)LVMi从基线/第6个月到第24个月的平均变化。(C)GSRS-D从基线/第6个月到第24个月的平均变化。(D)每个间质毛细血管的平均GL-3内含物从基线到第12个月的平均变化。在每个亚组(经典男性和其他)中，根据治疗分配对患者进行分组(米格司他比米格司他或安慰剂比米格司他)。(E)血浆溶血-Gb₃从基线/第6个月到第24个月的平均变化。在图4A-4E中，^a组由在第6个月从安慰剂转换为米格司他的患者构成，并且^b数据是第6个月(在6个月的安慰剂治疗后)每个间质毛细血管的GL-3内含物的平均(SD)数。

具体实施方式

在描述本发明的若干示例性实施例之前，应当理解，本发明不限于以下描述中列出的构建或方法步骤的细节。本发明能够有其他的实施例，并且能够以不同的方式实施或进行。

本发明的不同方面涉及用于施用用于治疗经典法布里病的药理学伴侣，例如米加司他的给药方案。在一个或多个实施例中，米加司他的给药方案降低肾脏GL-3、稳定肾功能、降低LVM、降低血浆lyso-Gb₃和/或治疗胃肠道症状。

定义

在本说明书中使用的术语在本发明的上下文中以及在使用每个术语的特定上下文中通常具有其在本领域中的普通含义。某些术语在下文或在本说明书的其他地方讨论，以向从业者提供描述本发明的组合物和方法以及如何制备和使用它们的另外指导。

术语“法布里病”是指由于缺乏溶酶体α-Gal A活性而导致的鞘糖脂分解代谢的X连锁先天错误。该缺陷导致底物球形三酰神经酰胺(“GL-3”，也称为Gb3或神经酰胺三己糖苷(ceramide trihexoside))和相关的鞘糖脂在心脏、肾脏、皮肤和其他组织的血管内皮溶酶体中的积累。该酶的另一种底物是血浆球丙糖酰基鞘氨醇(“血浆溶血Gb3”)。

术语“经典法布里病”是指多器官系统受累的患者。在一个或多个实施例中，患者还具有残留外周血单核细胞(PBMC)α-Gal A活性<正常的3％。

在各种实施例中，可以基于病史在基线处确定多器官系统受累。在其他实施例中，可以通过鉴定基线时具有心脏、中枢神经系统、神经系统疼痛和/或胃肠道系统的患者，然后进一步由于基线尿蛋白>150mg/24小时或由于基线eGFR<90mL/min/1.73m²将患者鉴定为具有肾脏症状。

下图显示了用于在ERT初治试验和已经历ERT的试验中鉴定经典男性的示例性标准的总结：

*在已经历ERT的试验使用了不同的标准，因为在研究进入之前立即使用ERT会影响基线时的WBCα-gal-A值。

因此，在一组ERT初治试验的示例性标准中，经典患者具有在基线的多器官受累以及在基线WBCα-gal-A<正常的3％(即上图中的1和3)。在ERT初治试验的另一组示例性标准中，经典患者的基线尿蛋白>150mg/24小时或基线eGFR<90mL/min/1.73m²，以及WBCα-gal-A基线<正常的3％(即上表中的2和3)。

在已经历ERT的试验的示例性标准中，经典患者具有在基线的多器官受累，或基线尿蛋白>150mg/24小时，或基线eGFR<90mL/min/1.73m²(即上图中1或2)。

“携带者”是一名女性，其具有一个有缺陷型GLA基因的X染色体和一个有正常基因的X染色体，并且其中一种或多种细胞类型中存在正常等位基因的X染色体失活。携带者通常被诊断为患有法布里病。

“患者”是指已经被诊断为患有或疑似患有特定疾病的受试者。患者可以是人或动物。

“法布里患者”是指已经被诊断为患有或疑似患有法布里病并且具有如下进一步定义的突变的α-Gal A的个体。法布里病的特征标记能以相同的发生率出现在男性半合子和女性携带者中，但是女性受到的影响通常不太严重。

术语“ERT初治患者”是指从未接受ERT或在开始米加司他疗法前至少6个月未接受ERT的法布里患者。

人α-半乳糖苷酶A(α-Gal A)是指由人GLA基因编码的酶。包括内含子和外显子的α-Gal A的完整DNA序列可在GenBank登录号X14448.1中获得，并显示于SEQ ID NO:1和图1A-1E中。人α-Gal A酶由429个氨基酸组成，并且可在GenBank登录号X14448.1和U78027.1中获得，并显示于SEQ ID NO:2和图2中。图3显示了仅包含SEQ ID NO:1的编码区(即外显子)的核酸序列(SEQ ID NO:3)。

术语“突变体蛋白”包括在编码该蛋白质的基因中具有突变的蛋白质，该突变导致该蛋白质在通常存在于内质网中的条件下不能达到稳定构象。不能达到稳定构象导致大量的酶被降解，而不是被转运到溶酶体。这样一种突变有时称为“构象突变体”。此类突变包括但不限于错义突变以及框内小缺失和插入。

如本文在一个实施例中所使用的，术语“突变体α-Gal A”包括在编码α-Gal A的基因中具有突变的α-Gal A，该突变导致该酶在通常存在于内质网中的条件下不能达到稳定构象。不能达到稳定构象导致大量的酶被降解，而不是被转运到溶酶体。

如本文所用，术语“药理学伴侣”(“PC”)是指特异性结合蛋白质并具有一种或多种以下效应的任何分子，包括小分子、蛋白质、肽、核酸、碳水化合物等：(i)增强所述蛋白质的稳定分子构象的形成；(ii)诱导该蛋白质从内质网运输到另一个细胞位置(优选地天然细胞位置)，即，防止蛋白的内质网相关的降解；(iii)防止错误折叠的蛋白质的聚集；和/或(iv)恢复或增强所述蛋白质的至少部分野生型功能和/或活性。一种化合物特异性结合到例如α-Gal A，意味着它结合到该酶并对该酶而不是相关或不相关的酶的群组施加伴侣效应。更具体地，此术语不是指内源伴侣例如BiP，或指对不同蛋白质表现非特异性伴侣活性的非特异性试剂例如甘油、DMSO或氘化水，即化学伴侣。在本发明的一个或多个实施例中，PC可以是可逆的竞争性抑制剂。

酶的“竞争性抑制剂”可以指代在结构上类似于酶底物的化学结构和分子几何形状以在与底物大致相同的位置结合酶的化合物。因此，抑制剂与底物分子竞争相同的活性位点，从而增加Km。如果足够的底物分子可用于取代抑制剂，竞争性抑制通常是可逆的，即竞争性抑制剂可以可逆地结合。因此，酶抑制的量取决于抑制剂浓度、底物浓度以及抑制剂和底物对活性位点的相对亲和力。

如本文所用，术语“特异性地结合”是指药理学伴侣与蛋白质例如α-Gal A的相互作用，特别是与所述蛋白质的氨基酸残基的相互作用，所述氨基酸残基直接参与接触药理学伴侣。药理学伴侣特异性结合靶蛋白例如α-Gal A，以对该蛋白而不是相关或不相关蛋白的群组施加伴侣效应。与任何给定的药理学伴侣相互作用的蛋白质的氨基酸残基可以在或可以不在蛋白质的“活性位点”内。可以通过常规结合测定或通过结构研究(例如共结晶、NMR等)评价特异性结合。α-Gal A的活性位点是底物结合位点。

“缺陷型α-Gal A活性”是指来自患者的细胞中的α-Gal A活性，与(使用相同的方法)不患有或没有疑似患有法布里或任何其他疾病(尤其是血液病)的正常个体中的活性相比，其低于正常范围。

如本文所用，术语“增强α-Gal A活性”或“增加α-Gal A活性”是指相对于在不与对α-Gal A具有特异性的药理学伴侣接触的细胞(优选是相同细胞类型或相同细胞，例如，在更早的时间)中采用稳定构象的α-Gal A的量，在与对α-Gal A具有特异性的药理学伴侣接触的细胞中增加采用稳定构象的α-Gal A的量。这个术语还指代相对于在不与对蛋白质具有特异性的药理学伴侣接触的情况下的α-Gal A的运输，增加α-Gal A向与对α-Gal A具有特异性的药理学伴侣接触的细胞中的溶酶体中的运输。这些术语同时指代野生型和突变α-Gal A。在一个实施例中，细胞中α-Gal A的量的增加是通过测量来自已经用PC处理的细胞的裂解物中人工底物的水解来测量。水解的增加表明α-Gal A活性增加。

术语“α-Gal A活性”是指细胞中野生型α-Gal A的正常生理功能。例如，α-Gal A活性包括GL-3的水解。

“响应者”是被诊断为患有或疑似患有溶酶体贮积障碍(例如像法布里病)的个体，响应于接触PC，其细胞分别表现出足够增加的α-Gal A活性和/或症状的减轻或替代标记的增强。法布里替代标记的增强的非限制性实例是溶血-Gb3和美国专利申请公开号US 2010/0113517中披露的那些。

在U.S.2010/0113517中披露的法布里病的替代标记的改善的非限制性实例包括细胞(例如，成纤维细胞)和组织中α-Gal A水平或活性的增强；GL-3积累的减少；高半胱氨酸和血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)的血浆浓度降低；心肌细胞和瓣膜纤维细胞内GL-3积累减少；血浆溶血Gb3的减少；心脏肥大(尤其是左心室肥大)的减少，瓣膜功能不全和心律失常改善；蛋白尿改善；脂质(如CTH、乳糖神经酰胺、神经酰胺)的尿浓度降低，并且葡糖神经酰胺和鞘磷脂的尿浓度增加；肾小球上皮细胞中无层状包涵体(斑马体)；肾功能改善；少汗症的减轻；无血管角质瘤；以及听力异常(如高频感觉神经性听力损失、进行性听力损失、突发性耳聋或耳鸣)的增强。神经症状的增强包括短暂性脑缺血发作(TIA)或中风的预防；以及自身表现为肢端感觉异常(四肢灼痛或刺痛)的神经性疼痛的改善。可以针对法布里病进行评估的另一种类型的临床标记是有害的心血管表现的发生率。

“升高的肾间质毛细血管GL-3”是指肾脏间质毛细血管GL-3的任何可检测水平。在健康人的肾脏中，无间质毛细管GL-3积累。相反，由于肾功能下降，肾脏中的间质毛细血管GL-3水平，例如法布里患者的肾脏中的间质毛细血管GL-3水平升高—通过使用肾脏活检中的病理学可以检测到。

如本文所用，短语“稳定肾功能”和类似术语是指减少肾功能下降和/或恢复肾功能。由于未经治疗的法布里患者的肾功能预期会显著下降，因此肾功能恶化速率的改善和/或肾功能的改善证明了如本文所述的米加司他疗法的益处。

“肾脏损害”是指估算的肾小球滤过率(eGFR)小于90mL/min/1.73m²的患者。用于从血清肌酐计算eGFR的两个最常用的方程是慢性肾脏病流行病学合作研究(CKD-EPI)方程和肾脏疾病饮食调整(MDRD)，其分别被称为eGFR_CKD-EPI和eGFR_MDRD。慢性肾脏病的严重程度已经以六个阶段定义：

a.(阶段0)肾功能正常-eGFR高于90mL/min/1.73m²并且无蛋白尿；

b.(阶段1)-eGFR高于90mL/min/1.73m²且有肾脏损害的证据；(阶段2)(轻度)-eGFR为60至89mL/min/1.73m²且有肾脏损害的证据；

c.(阶段3)(中度)-eGFR为30至59mL/min/1.73m²；

d.(阶段4)(重度)-eGFR为15至29mL/min/1.73m²；

e.(阶段5)肾衰竭-eGFR小于15mL/min/1.73m²。

如本文所用，术语“左心室肥大”或“LVH”是指LVMi高于正常范围的患者。由于女性的LVMi正常范围是43-95g/m²，男性的LVMi正常范围是49-115g/m²，因此女性LVH患者的LVMi>95g/m²，而男性LVH患者的LVMi>115g/m²。

“升高的血浆溶血-Gb₃”是指高于正常范围的血浆溶血-Gb₃水平。血浆溶血-Gb₃的正常范围会有所不同，这取决于用于评估血浆溶血-Gb₃的特定测定方法。在一个或多个实施例中，血浆溶血-Gb₃的正常范围是0.375-1.19nmol/L，升高的血浆溶血-Gb₃是指血浆溶血-Gb₃的水平大于1.19nmol/L。

短语“药学上可接受的”是指分子实体和组合物是生理上可耐受的并且当施用人时通常不会产生不良反应。在一些实施例中，如本文所用，术语“药学上可接受的”是指由联邦或州政府的管理机构批准的或者在美国药典或其他普遍认可的药典中列出的用于在动物体内、更特别是在人体内使用。就药物载体而论的术语“载体”是指与化合物一起施用的稀释剂、辅助剂、赋形剂或媒介物。此类药物载体可以是无菌液体，例如水和油类。优选地应用水或水溶液盐溶液以及右旋糖和甘油水溶液作为载体，特别是用于可注射溶液。合适的药物载体描述于由E.W.Martin编辑的“Remington’s Pharmaceutical Sciences[雷明顿药物科学]”,第18版或其他版本中。

术语“酶替代疗法”或“ERT”是指将非天然的经纯化的酶引入缺乏这种酶的个体。施用的蛋白质可以从自然来源或通过重组表达而获得(如下文更详细描述的)。该术语也指将经纯化的酶引入个体，该个体在其他情况下需要或受益于施用经纯化的酶，例如该个体遭受酶不足。该引入的酶可以是在体外产生的经纯化的重组酶，或从离体组织或体液(例如像胎盘或动物奶)或从植物纯化的蛋白质。

如本文所用，术语“分离的”意味着将参比材料从其通常发现的环境中去除。因此，分离的生物材料可以不含细胞组分，即发现或产生该材料的细胞的组分。在核酸分子的情况下，分离的核酸包括PCR产物、凝胶上的mRNA条带、cDNA或限制性片段。在另一个实施例中，分离的核酸优选地从可以在其被发现的染色体上切除，并且更优选地不再与非调节性非编码区连接，或与位于当在染色体中发现时由分离的核酸分子包含的基因上游或下游的其他基因连接。在又另一个实施例中，分离的核酸缺少一个或多个内含子。分离的核酸包括插入质粒、粘粒、人工染色体等中的序列。因此，在一个特定实施例中，重组核酸是分离的核酸。分离的蛋白质可以与其在细胞中结合的其他蛋白质或核酸或两者结合，或者如果其是膜结合蛋白质则与细胞膜结合。将分离的细胞器、细胞或组织从其在生物体中发现的解剖部位去除。分离的材料可以是但不必是纯化的。

术语“约”和“大约”通常意指在给定测量的性质或精度的情况下测量的量的可接受的误差程度。典型的示例性误差程度在给定值或值范围的20％以内、优选地在10％以内、更优选地在5％以内。可替代地，特别是在生物系统中，术语“约”和“大约”可以意指在给定值的一个数量级内、优选地在10倍或5倍内、更优选地在2倍内的值。除非另有说明，本文给出的数字量是近似的，意味着当没有明确说明时，可以推断出术语“约”或“大约”。

法布里病

法布里病是一种罕见的、进行性的和破坏性的X连锁溶酶体贮积障碍。GLA基因的突变导致溶酶体酶α-Gal A(其是鞘糖脂代谢所需的)的缺乏。从生命的早期开始，α-Gal A活性的降低导致鞘糖脂(包括GL-3和血浆溶血Gb3)的积累，并导致法布里病的症状和生命限制性后遗症，包括疼痛、胃肠道症状、肾衰竭、心肌病、脑血管事件和早期死亡。早期开始疗法和终身治疗提供了减慢疾病进展和延长预期寿命的机会。

法布里病涵盖广泛的疾病严重程度和发病年龄，尽管它传统上被分为2种主要表型，即“经典”和“迟发”。经典表型主要已经归于具有不可检测的至低的α-Gal A活性和肾、心脏和/或脑血管表现的更早发作的男性。迟发型表型主要已经归于具有更高残留α-Gal A活性和这些疾病表现的更晚发作的男性。杂合性女性携带者通常表达迟发型表型，但是取决于X染色体失活的模式，也可以显示经典表型。

已经鉴定出超过1000种导致法布里病的GLA突变。大约60％是错义突变，导致α-Gal A酶中的单氨基酸取代。错义GLA突变通常会导致α-Gal A的异常折叠和不稳定形式的产生。内质网中的正常细胞质量控制机制阻断了这些异常蛋白质转运到溶酶体上，并且将这些异常蛋白质作为过早降解和消除的目标。许多错义突变体形式是米加司他(α-Gal A特异性药理学伴侣)的靶标。

法布里病的临床表现具有广泛的严重程度，并且与患者的残留α-Gal A水平大致相关。具有经典表型的患者经历各种器官(包括肾脏、心脏和脑)的疾病，其中疾病症状首先出现在青春期，并且通常严重程度不断进展，直到生命的第四或第五个十年死亡为止。许多最近的研究表明，存在大量未确诊的男性和女性，他们具有一系列通常首次出现在成年期的法布里病症状，例如心脏或肾功能受损和中风。患有这种类型的法布里病的个体，称为迟发型法布里病，与经经典法布里患者相比，倾向于具有更高的残留α-Gal A水平。患有迟发型法布里病的个体通常在成年期首次经历疾病症状，并且疾病症状通常集中在单个器官，例如左心室的扩大或进行性肾衰竭。另外，迟发型法布里病也可能以未知原因的中风形式出现。

法布里患者具有进行性肾脏损害，并且未经治疗的患者到生命的第五个十年之前表现出末期肾损害。α-Gal A活性的缺乏导致GL-3和相关的鞘糖脂在许多细胞类型(包括肾脏中的细胞)中积累。GL-3积累在足细胞、上皮细胞以及远端小管和亨利氏环的管状细胞中。肾功能损害可以表现为蛋白尿和肾小球滤过率降低。

由于法布里病罕见，涉及多个器官，发病年龄范围广，并且是异质性的，正确诊断是一个挑战。医疗保健专业人员中的意识较低，并且误诊频繁。一旦患者有症状，加上突变分析，法布里病的诊断最常基于血浆或外周白细胞(WBC)中降低的α-Gal A活性来证实。在女性中，诊断甚至更具挑战性，因为携带者女性的酶鉴定由于携带者的一些细胞中的随机X染色体失活而不太可靠。例如，一些肯定携带者(经典地受影响的男性的女儿)具有从正常到非常低活性范围的α-Gal A酶活性。由于携带者在白细胞中可以具有正常的α-Gal A酶活性，所以仅通过遗传学检验鉴定α-Gal A突变提供了精确的携带者标识和/或诊断。

α-Gal A的突变体形式被认为顺从米加司他，当α-Gal A的突变体形式在HEK-293细胞中表达时(称为“HEK测定”)，根据良好实验室规范(Good Laboratory Practice，GLP)验证的体外测定(GLP HEK或米加司他顺从性测定(Migalastat Amenability Assay))，被定义为显示≥1.20倍的相对增加(+10μM米加司他)和≥3.0％野生型(WT)的绝对增加(+10μM米加司他)。此类突变在本文中也被称为“HEK测定顺从性”突变。

已经提供以前的筛选方法，其在开始治疗之前评估酶增强。例如，使用HEK-293细胞的测定已经在临床试验中用于预测给定的突变是否响应于药理学伴侣(例如，米加司他)治疗。在这个测定中，建立了cDNA构建体。相应的α-Gal A突变形式在HEK-293细胞中瞬时表达。然后将细胞±米加司他(17nM至1mM)孵育4至5天。之后，在细胞裂解物中使用合成的荧光底物(4-MU-α-Gal)或通过蛋白质印迹测量α-Gal A水平。这已经针对已知的导致疾病的错义或小的框内插入/缺失突变进行。以前使用这些方法鉴定为响应PC(例如，米加司他)的突变在美国专利号8,592,362中列出。

药理学伴侣

与LSD相关的酶的小分子抑制剂的结合可以增加突变酶和相应的野生型酶的稳定性(参见美国专利号6,274,597；6,583,158；6,589,964；6,599,919；6,916,829和7,141,582，全部通过引用并入本文)。特别地，葡萄糖和半乳糖的小分子衍生物(其是用于若干种靶标溶酶体酶的特异性、选择性竞争性抑制剂)的施用有效地增加了体外细胞中酶的稳定性，并因此增加了酶到溶酶体的运输。因此，通过增加溶酶体中酶的量，酶底物的水解预期会增加。这种策略背后的原有理论如下：由于突变酶蛋白在内质网中不稳定(Ishii等人，Biochem.Biophys.Res.Comm.[生物化学和生物物理研究通讯]1996；220：812-815)，因此酶蛋白在正常转运途径(内质网→高尔基体→核内体→溶酶体)中延迟并过早降解。因此，结合并增加突变酶稳定性的化合物可以充当酶的“伴侣”，并增加可以离开内质网并移动到溶酶体的量。此外，由于一些野生型蛋白质的折叠和运输是不完全的，在一些情况下一些野生型蛋白质的多达70％在达到其最终细胞位置之前被降解，所以这些伴侣可用于稳定野生型酶，并增加可以离开内质网并被运输到溶酶体的酶的量。

在一个或多个实施例中，该药理学伴侣包括米加司他或其盐。如本文所用，化合物米加司他，也称为1-脱氧半乳糖野尻霉素(1-DGJ)或(2R,3S,4R,5S0-2-(羟甲基)哌啶-3,4,5-三醇，并且是具有以下化学式的化合物：

如下讨论，米加司他的药学上可接受的盐也可以用于本发明。当使用米加司他的盐时，调整所述盐的剂量，这样使得由患者接受的米加司他的剂量与使用米加司他游离碱时接受的量是相当的。米加司他的药学上可接受的盐的一个实例是盐酸米加司他：

除非有相反的确切说明，术语“米加司他”涵盖米加司他游离碱或其药学上可接受的盐(例如，如上所示的米加司他HCl)。

如本文所用，术语“游离碱当量”或“FBE”是指米加司他或其盐中存在的米加司他的量。换句话说，术语“FBE”意指一个量的米加司他游离碱，抑或由米加司他的盐提供的当量的量的米加司他游离碱。例如，由于盐酸盐的重量，150mg的米加司他盐酸盐仅提供和123mg的游离碱形式的米加司他所提供的同样多的米加司他。其他盐将具有不同的转换因子，这取决于盐的分子量。

米加司他是一种低分子量亚氨基糖，并且是GL-3末端半乳糖的类似物。体外和体内药理学研究已经证明，米加司他充当药理学伴侣，以高亲和力选择性地和可逆地结合到野生型(WT)α-Gal A和α-Gal A的特定突变体形式的活性位点上，该特定突变体形式的基因型被称为HEK测定顺从性突变。米加司他结合稳定了内质网中这些突变形式的α-Gal A，从而有助于其正确地运输到溶酶体上，在溶酶体上米加司他的解离允许α-Gal A降低GL-3和其他底物的水平。大约35％-50％的法布里病患者具有HEK测定顺从性突变；其中大多数与疾病的经典表型相关。HEK测定顺从性突变的列表至少包括下表1中列出的那些突变。在一个或多个实施例中，如果双重突变存在于同一染色体(男性和女性)上，则如果该双重突变存在于表1中的一个条目中(例如，D55V/Q57L)，该患者被认为是HEK测定顺从性的。在一些实施例中，如果双重突变存在于不同染色体(仅在女性中)上，则如果个体突变中的任一个存在于表1中，则所述患者被认为是HEK测定顺从性的。

表1

核苷酸变化	核苷酸变化	蛋白质序列变化
			c.7C>G	c.C7G	L3V
c.8T>C	c.T8C	L3P
			c.[11G>T；620A>C]	c.G11T/A620C	R4M/Y207S
c.37G>A	c.G37A	A13T
			c.37G>C	c.G37C	A13P
c.43G>A	c.G43A	A15T
			c.44C>G	c.C44G	A15G
c.53T>G	c.T53G	F18C
			c.58G>C	c.G58C	A20P
c.59C>A	c.C59A	A20D
			c.70T>C或c.70T>A	c.T70C或c.T70A	W24R
c.70T>G	c.T70G	W24G
			c.72G>C或c.72G>T	c.G72C或c.G72T	W24C
c.95T>C	c.T95C	L32P
			c.97G>T	c.G97T	D33Y
c.98A>G	c.A98G	D33G
			c.100A>G	c.A100G	N34D
c.101A>C	c.A101C	N34T
			c.101A>G	c.A101G	N34S
c.102T>G或c.102T>A	c.T102G或c.T102A	N34K
			c.103G>C或c.103G>A	c.G103C或c.G103A	G35R
c.104G>A	c.G104A	G35E
			c.104G>T	c.G104T	G35V
c.107T>C	c.T107C	L36S
			c.107T>G	c.T107G	L36W
c.108G>C或c.108G>T	c.G108C或c.G108T	L36F
			c.109G>A	c.G109A	A37T
c.110C>T	c.C110T	A37V
			c.122C>T	c.C122T	T41I
c.124A>C或c.124A>T	c.A124C或c.A124T	M42L
			c.124A>G	c.A124G	M42V
c.125T>A	c.T125A	M42K

表1

表1

表1

表1

核苷酸变化	核苷酸变化	蛋白质序列变化
			c.641C>T	c.C641T	P214L
c.643A>G	c.A643G	N215D
			c.644A>G	c.A644G	N215S
c.644A>T	c.A644T	N215I
			c.[644A>G；937G>T]	c.A644G/G937T	N215S/D313Y
c.646T>G	c.T646G	Y216D
			c.647A>G	c.A647G	Y216C
c.655A>C	c.A655C	I219L
			c.656T>A	c.T656A	I219N
c.656T>C	c.T656C	I219T
			c.659G>A	c.G659A	R220Q
c.659G>C	c.G659C	R220P
			c.662A>C	c.A662C	Q221P
c.671A>C	c.A671C	N224T
			c.671A>G	c.A671G	N224S
c.673C>G	c.C673G	H225D
			c.683A>G	c.A683G	N228S
c.687T>A或c.687T>G	c.T687A或c.T687G	F229L
			c.695T>C	c.T695C	I232T
c.713G>A	c.G713A	S238N
			c.716T>C	c.T716C	I239T
c.720G>C或c.720G>T	c.G720C或c.G720T	K240N
			c.724A>G	c.A724G	I242V
c.724A>T	c.A724T	I242F
			c.725T>A	c.T725A	I242N
c.725T>C	c.T725C	I242T
			c.728T>G	c.T728G	L243W
c.729G>C或c.729G>T	c.G729C或c.G729T	L243F
			c.730G>A	c.G730A	D244N
c.730G>C	c.G730C	D244H
			c.733T>G	c.T733G	W245G
c.740C>G	c.C740G	S247C
			c.747C>G或c.747C>A	c.C747G或c.C747A	N249K
c.749A>C	c.A749C	Q250P
			c.749A>G	c.A749G	Q250R
c.750G>C	c.G750C	Q250H
			c.758T>C	c.T758C	I253T
c.758T>G	c.T758G	I253S
			c.760-762delGTT	c.760_762delGTT	p.V254del
c.769G>C	c.G769C	A257P
			c.770C>G	c.C770G	A257G
c.772G>C或c.772G>A	c.G772C或c.G772A	G258R

表1

表1

表1

核苷酸变化	核苷酸变化	蛋白质序列变化
			c.973G>A	c.G973A	G325S
c.973G>C	c.G973C	G325R
			c.978G>C或c.978G>T	c.G978C或c.G978T	K326N
c.979C>G	c.C979G	Q327E
			c.980A>T	c.A980T	Q327L
c.983G>C	c.G983C	G328A
			c.989A>G	c.A989G	Q330R
c.1001G>A	c.G1001A	G334E
			c.1010T>C	c.T1010C	F337S
c.1012G>A	c.G1012A	E338K
			c.1016T>A	c.T1016A	V339E
c.1027C>A	c.C1027A	P343T
			c.1028C>T	c.C1028T	P343L
c.1033T>C	c.T1033C	S345P
			c.1046G>C	c.G1046C	W349S
c.1055C>G	c.C1055G	A352G
			c.1055C>T	c.C1055T	A352V
c.1061T>A	c.T1061A	I354K
			c.1066C>G	c.C1066G	R356G
c.1066C>T	c.C1066T	R356W
			c.1067G>A	c.G1067A	R356Q
c.1067G>C	c.G1067C	R356P
			c.1072G>C	c.G1072C	E358Q
c.1073A>C	c.A1073C	E358A
			c.1073A>G	c.A1073G	E358G
c.1074G>T或c.1074G>C	c.G1074T或c.G1074C	E358D
			c.1076T>C	c.T1076C	I359T
c.1078G>A	c.G1078A	G360S
			c.1078G>T	c.G1078T	G360C
c.1079G>A	c.G1079A	G360D
			c.1082G>A	c.G1082A	G361E
c.1082G>C	c.G1082C	G361A
			c.1084C>A	c.C1084A	P362T
c.1085C>T	c.C1085T	P362L
			c.1087C>T	c.C1087T	R363C
c.1088G>A	c.G1088A	R363H
			c.1102G>A	c.G1102A	A368T
c.1117G>A	c.G1117A	G373S
			c.1124G>A	c.G1124A	G375E
c.1153A>G	c.A1153G	T385A
			c.1168G>A	c.G1168A	V390M
c.1172A>C	c.A1172C	K391T

表1

核苷酸变化	核苷酸变化	蛋白质序列变化
			c.1184G>A	c.G1184A	G395E
c.1184G>C	c.G1184C	G395A
			c.1192G>A	c.G1192A	E398K
c.1202_1203insGACTTC	c.1202_1203insGACTTC	p.T400_S401dup
			c.1208T>C	c.T1208C	L403S
c.1225C>G	c.C1225G	P409A
			c.1225C>T	c.C1225T	P409S
c.1225C>A	c.C1225A	P409T
			c.1228A>G	c.A1228G	T410A
c.1229C>T	c.C1229T	T410I
			c.1232G>A	c.G1232A	G411D
c.1235C>A	c.C1235A	T412N
			c.1253A>G	c.A1253G	E418G
c.1261A>G	c.A1261G	M421V

给药、配制品和施用

在一个或多个实施例中，以每隔一天一次(也称为“QOD”)的频率向法布里患者施用米加司他或其盐。在不同实施例中，本文所述的剂量涉及米加司他盐酸盐或当量剂量的米加司他或其不是盐酸盐的盐。在一些实施例中，这些剂量涉及米加司他的游离碱。在替代性实施例中，这些剂量涉及米加司他的盐。在另外的实施例中，米加司他的所述盐是米加司他盐酸盐。米加司他或米加司他的盐的施用在本文中被称为“米加司他疗法”。

米加司他或其盐的有效量可以在约100mg FBE至约150mg FBE的范围内。示例性剂量包括约100mg FBE、约105mg FBE、约110mg FBE、约115mg FBE、约120mg FBE、约123mgFBE、约125mg FBE、约130mg FBE、约135mg FBE、约140mg FBE、约145mg FBE或约150mg FBE。

再次，应当注意，150mg的米加司他盐酸盐相当于123mg的游离碱形式的米加司他。因此，在一个或多个实施例中，所述剂量是以每隔一天一次的频率施用的150mg的米加司他盐酸盐或当量剂量的米加司他或其不是盐酸盐的盐。如上所述，这个剂量被称为123mg FBE的米加司他。在另外的实施例中，所述剂量是以每隔一天一次的频率施用的150mg的米加司他盐酸盐。在其他实施例中，所述剂量是以每隔一天一次的频率施用的123mg的米加司他游离碱。

在不同实施例中，该有效量为约122mg、约128mg、约134mg、约140mg、约146mg、约150mg、约152mg、约159mg、约165mg、约171mg、约177mg或约183mg的米加司他盐酸盐。

因此，在不同实施例中，米加司他疗法包括以每隔一天一次的频率施用123mgFBE，例如每隔一天施用150mg的米加司他盐酸盐。

米加司他或其盐的施用可以持续某一段时间。在一个或多个实施例中，米加司他或其盐施用至少28天，例如至少30、60或90天，或至少3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、16、20、24、30或36个月，或至少1、2、3、4或5年。在不同实施例中，米加司他疗法是至少6个月(例如至少6、7、8、9、10、11、12、16、20、24、30或36个月，或至少1、2、3、4或5年)的长期米加司他疗法。

根据本发明的米加司他或其盐的施用可以是以适合于任何施用途径的配制品形式，但是优选地以口服剂型(例如片剂、胶囊剂或溶液剂)施用。作为一个实例，向患者口服施用胶囊剂，每个胶囊剂含有150mg米加司他盐酸盐或当量剂量的米加司他或其不是盐酸盐的盐。

在一些实施例中，口服施用PC(例如，米加司他或其盐)。在一个或多个实施例中，通过注射施用PC(例如，米加司他或其盐)。PC可以伴有药学上可接受的载体，这可以取决于施用方法。

在本发明的一个实施例中，PC(例如，米加司他或其盐)作为单一疗法被施用，并且可以是以适合任何施用途径的形式，包括例如以片剂或胶囊或液体的形式口服、以用于注射的无菌水溶液形式，或以干燥的冻干粉末(在重建期间或之后立即添加到替代酶的配制品中，以防止在施用前在体外进行酶聚集)形式。

当PC(例如，米加司他或其盐)被配制用于口服施用时，片剂或胶囊剂可以通过常规手段用药学上可接受的赋形剂来制备，这些赋形剂是例如粘合剂(例如，预糊化玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮或羟丙基甲基纤维素)；填充剂(例如，乳糖、微晶纤维素或磷酸氢钙)；润滑剂(例如，硬脂酸镁、滑石或二氧化硅)；崩解剂(例如，马铃薯淀粉或羟基乙酸淀粉钠)；或湿润剂(例如，十二烷基硫酸钠)。片剂可以通过本领域公知的方法包衣。用于口服施用的液体制剂可以采取例如溶液、糖浆或悬浮液的形式，或者它们可以作为干燥的产品(在使用前用水或其他合适的媒介物构建)而存在。此类液体制剂可以通过常规手段用药学上可接受的添加剂来制备，这些添加剂是例如助悬剂(例如，山梨糖醇糖浆、纤维素衍生物或氢化的可食用脂肪)；乳化剂(例如，卵磷脂或阿拉伯胶)；非水性媒介物(例如，杏仁油、油状酯、乙醇或分馏的植物油)；以及防腐剂(例如，对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸)。适当时，制剂还可以含有缓冲盐、调味剂、着色剂和甜味剂。可以适当地配制用于口服施用的制剂以使活性伴侣化合物可控制地释放。

适合于肠胃外/注射使用的PC(例如，米加司他或其盐)的药物配制品通常包括无菌水溶液(在水溶性的情况下)、或者分散体以及用于临时制备无菌可注射溶液或分散体的无菌粉末。在所有情况下，该形式必须是无菌的且必须具有达到容易注射的程度的流动性。它在生产和储存条件下必须是稳定的并且必须抗微生物(例如细菌和真菌)的污染作用而保存。载体可以是含有例如以下的溶剂或分散介质：水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇和聚乙二醇等)、其合适的混合物以及植物油。可以例如通过使用包衣(例如卵磷脂)、在分散体的情况下通过维持所需颗粒大小以及通过使用表面活性剂来维持适当的流动性。防止微生物的作用可以通过不同的抗细菌剂以及抗真菌剂(例如，对羟苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、苄醇、山梨酸等)来实现。在许多情况下，包括等渗剂(例如，糖类或氯化钠)将是合理的。可以通过在组合物中使用延迟吸收的试剂(例如，单硬脂酸铝和明胶)来实现可注射组合物的延长吸收。

按照需要，可以通过将经纯化的酶(若有的话)和PC(例如，米加司他或其盐)以需要的量掺入具有以上列举的各种其他成分的适当溶剂中，随后进行过滤或最终灭菌来制备无菌可注射溶液。通常，通过将各种灭菌的活性成分掺入无菌媒介物中来制备分散体，该无菌媒介物含有基础分散介质以及来自以上列举的那些的所需其他成分。在用于制备无菌可注射溶液的无菌粉末的情况下，优选的制备方法是真空干燥和冷冻干燥技术，这从其之前的无菌过滤溶液产生活性成分加上任何另外的所需成分的粉末。

该配制品可以含有赋形剂。在配制品中包括的药学上可接受的赋形剂是缓冲液，如柠檬酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、乙酸盐缓冲液、和碳酸氢盐缓冲液、氨基酸、尿素、醇、抗坏血酸、磷脂；蛋白质，例如血清白蛋白、胶原和明胶；盐，例如EDTA或EGTA和氯化钠；脂质体；聚乙烯吡咯烷酮；糖，例如右旋糖酐、甘露糖醇、山梨糖醇和甘油；丙二醇和聚乙二醇(例如，PEG-4000、PEG-6000)；甘油；甘氨酸或其他氨基酸；以及脂质。与配制品一起使用的缓冲剂体系包括柠檬酸盐；乙酸盐；碳酸氢盐；以及磷酸盐缓冲剂。磷酸盐缓冲剂是一个优选的实施例。

伴侣化合物的施用途径可以是口服的或肠胃外的，包括静脉内、皮下、动脉内、腹膜内、眼内、肌内、经颊、经直肠、经阴道、眼眶内、脑内、真皮内、颅内、脊柱内、心室内、鞘内、脑池内、囊内、肺内、鼻内、经粘膜、经皮或经由吸入。

伴侣化合物的上述肠胃外配制品的施用可以是通过周期性注射制剂的推注，或者可以从储库通过静脉内或腹膜内施用来施用，该储库可以是外部的(例如，静脉注射袋)或内部的(例如，生物可蚀性植入物)。

涉及药物配制品和施用的实施例可以与本发明的任何其他实施例组合，例如涉及治疗患有经典法布里病的患者的方法、治疗患有经典法布里病的ERT初治患者的方法、降低肾脏GL-3的方法、稳定肾功能的方法、降低LVM或LVMi的方法、降低血浆溶血Gb₃的方法和/或治疗胃肠道症状(例如腹泻)的方法、增强被诊断为患有或疑似患有法布里病的患者的α-Gal A的方法、α-Gal A的药理学伴侣在制备用于治疗被诊断为患有法布里病的患者的药物中的用途或用于治疗被诊断为患有法布里病的患者的α-Gal A的药理学伴侣的实施例以及涉及顺从性突变、PC及其合适的剂量的实施例。

在一个或多个实施例中，PC(例如，米加司他或其盐)与ERT组合施用。通过输注的方式，通过外源地引入野生型或具有生物学功能的酶，ERT增加了蛋白质的量。已经针对许多遗传疾病开发了这种疗法，包括如上引用的溶酶体贮积失调(例如法布里病)。输注后，预期外源酶通过非特异性或受体特异性机制被组织吸收。通常，吸收效率不高，并且外源蛋白质的循环时间短。另外，外源蛋白质是不稳定的，并且经受快速的细胞内降解，而且在随后治疗的情况下具有不利免疫反应的可能。在一个或多个实施例中，将伴侣与替代酶(例如，替代α-Gal A)同时施用。在一些实施例中，将伴侣与替代酶(例如，替代α-Gal A)共配制。

在一个或多个实施例中，将患者从ERT转换至米加司他疗法。在一些实施例中，鉴定了接受ERT的患者，中断了患者的ERT，并且该患者开始接受米加司他疗法。可以根据本文所述的任何方法进行米加司他疗法。

肾脏GL-3

本文所述的给药方案可降低法布里患者的肾脏GL-3(例如，每个肾间质毛细血管的GL-3内含物)。由于未经治疗的法布里患者通常随着时间的推移表现出肾脏GL-3的增加，因此肾脏GL-3的降低和维持不变都指示米加司他疗法的益处。如以下实例中进一步详细描述的，第3期研究发现，米加司他疗法可降低经典法布里病的ERT初治患者的肾脏GL-3。因此，米加司他疗法可通过降低和/或稳定肾脏GL-3来治疗经典的法布里病患者。

与没有用米加司他疗法治疗的同一患者相比，米加司他疗法可降低经典法布里患者肾脏GL-3的增加。在一个或多个实施例中，米加司他疗法提供了患者的每个肾间质毛细血管的GL-3内含物的变化，该变化小于0(即比0更负)，例如小于约-0.1、-0.2、-0.3、-0.4、-0.5、-0.6、-0.7、-0.8、-0.9或-1。换句话说，在一个或多个实施例中，米加司他疗法提供每个肾间质毛细血管的GL-3内含物的大于0的降低，例如降低至少约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9或1。

在一个或多个实施例中，在施用米加司他或其盐6个月后，米加司他疗法提供一组经典法布里患者中每个肾间质毛细血管的GL-3内含物的至少约0.1的平均降低。在不同实施例中，在施用米加司他或其盐6个月后，经典法布里患者组中的平均降低为至少约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7或0.8，例如约0.8。在不同实施例中，经典法布里患者是ERT初治患者。

肾功能

在此所述的给药方案可以在法布里患者中稳定和/或增强肾功能(例如，eGFR)。由于未经治疗的法布里患者典型地随着时间的推移表现出肾功能的退化，所以肾功能的增强和维持不变都指示米加司他疗法的益处。如以下实例中进一步详细描述的，第3期研究发现，米加司他疗法可降低稳定经典法布里病的ERT初治患者的肾功能。因此，米加司他疗法可用于通过增加和/或稳定肾功能来治疗经典法布里病患者。

与没有用米加司他疗法进行治疗的同一患者相比，米加司他疗法可以遏制或减少法布里患者的肾功能降低和/或增加肾功能。在一个或多个实施例中，米加司他疗法为患者提供了eGFR_CKD-EPI年变化率，该年变化率大于(即更正于)-5.0mL/min/1.73m²/年，例如大于-4.5、-4.0、-3.5、-3.0、-2.5、-2.0、-1.5、-1.0、-0.9、-0.8、-0.7、-0.6、-0.5、-0.4、-0.3、-0.2、-0.1或甚至大于0mL/min/1.73m²/年。在一个或多个实施例中，米加司他疗法为患者提供了mGFR_碘海醇年变化率，该年变化率大于-5.0mL/min/1.73m²/年，例如大于-4.5、-4.0、-3.5、-3.0、-2.5、-2.0、-1.5、-1.0、-0.9、-0.8、-0.7、-0.6、-0.5、-0.4、-0.3、-0.2、-0.1或甚至大于0mL/min/1.73m²/年。因此，米加司他疗法可以减少患者肾功能的衰退或甚至改善其肾功能。这些年变化率可以在特定时间段内(例如在6个月、12个月、18个月、24个月、30个月、或36个月)进行测量。

在一个或多个实施例中，在施用米加司他或其盐24个月后，米格司他疗法在一组经典法布里病患者中提供以下eGFR_CKD-EPI平均年变化率，该年变化率大于-5.0mL/min/1.73m²/年，例如大于-4.5、-4.0、-3.5、-3.0、-2.5、-2.0、-1.5、-1.0、-0.9、-0.8、-0.7、-0.6、-0.5、-0.4、-0.3、-0.2、-0.1或甚至大于0mL/min/1.73m²/年。在一个或多个实施例中，在施用米加司他或其盐24个月后，米格司他疗法在一组经典法布里病患者中提供以下mGFR_碘海醇的平均年变化率，该年变化率大于-5.0mL/min/1.73m²/年，例如大于-4.5、-4.0、-3.5、-3.0、-2.5、-2.0、-1.5、-1.0、-0.9、-0.8、-0.7、-0.6、-0.5、-0.4、-0.3、-0.2、-0.1或甚至大于0mL/min/1.73m²/年。在不同实施例中，经典法布里患者是ERT初治患者。

左心室质量

本文所述的给药方案可以改善法布里患者的LVM或LVMi。无论表型如何，未经治疗的法布里患者的LVMi和心脏肥大的自然病史(Patel,O'Mahony等人2015)表现为LVMi以+4.07和+8.0g/m²/年之间的速率逐渐增加(Kampmann,Linhart等人2008；Wyatt,Henley等人2012；Germain,Weidemann等人2013)。由于未经治疗的法布里患者通常随着时间的推移表现出LVMi的增加，所以LVMi的降低和维持不变都指示米加司他疗法的益处。如以下实例中进一步详细描述的，第3期研究发现，米加司他疗法可降低经典法布里病的ERT初治患者的LVMi。因此，米加司他疗法可用于通过降低LVM和/或降低LVMi来治疗经典法布里患者，包括LVH患者。

与没有用米加司他疗法治疗的同一患者相比，米加司他疗法可以减少法布里患者LVM或LVMi的增加。在一个或多个实施例中，米加司他疗法为患者提供了LVMi的变化，该变化小于(即，更负于)0g/m²，例如小于或等于约-0.5、-1、-1.5、-2、-2.5、-3、-3.5、-4、-4.5、-5、-5.5、-6、-7、-8、-9、-10、-11、-12、-13、-14、-15、-16、-17、-18、-19或-20g/m²。换一种方式表达，在一个或多个实施例中，米加司他疗法提供了大于0g/m²的LVMi降低，例如至少约0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20g/m²的降低。

在一个或多个实施例中，在施用米加司他或其盐24个月后，米加司他疗法为一组经典法布里患者提供了至少约1g/m²的LVMi的平均降低。在不同实施例中，在施用米加司他或其盐的24个月后，经典法布里患者组的平均降低为至少约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16或17g/m²，例如约16.7g/m²。在不同实施例中，经典法布里患者是ERT初治患者。

血浆溶血-Gb₃

本文所述的给药方案可以减少法布里患者的血浆溶血-Gb₃。由于未经治疗的法布里患者通常随着时间的推移表现出血浆溶血Gb₃的增加，因此血浆溶血Gb₃的减少和维持都指示米加司他疗法的益处。如以下实例中进一步详细描述的，第3期研究发现，米加司他疗法可降低经典法布里病的ERT初治患者的血浆溶血-Gb₃。因此，米加司他疗法可通过降低和/或稳定血浆溶血-Gb₃来治疗经典的法布里病患者。

与没有用米加司他疗法治疗的同一患者相比，米加司他疗法可以减少法布里患者血浆溶血-Gb₃的增加。在一个或多个实施例中，米加司他疗法为患者提供了以下血浆溶血-Gb₃变化，该变化小于0nmol/L(即比0nmol/L更负)，例如小于约-5、-10、-15、-20、-25、-30、-35、-40nmol/L。换句话说，在一个或多个实施例中，米加司他疗法提供的血浆溶血-Gb₃的降低大于0nmol/L，例如降低至少约5、10、15、20、25、30、35或40nmol/L。

在一个或多个实施例中，在施用米加司他或其盐24个月后，米加司他疗法为一组经典法布里患者中提供了至少约5nmol/L的血浆溶血-Gb₃的平均降低。在不同实施例中，在施用米加司他或其盐6个月后，经典法布里患者组的平均降低为至少约5、10、15、20、25、30、35或40nmol/L，例如约36nmol/L。在不同实施例中，经典法布里患者是ERT初治患者。

胃肠道症状

本文所述的给药方案可以治疗法布里患者的胃肠道症状(例如，腹泻)。如以下实例中进一步详细描述的，第3期研究发现，米加司他疗法可降低经典法布里病的ERT初治患者的腹泻症状。因此，米加司他疗法可用于通过减轻胃肠道症状例如腹泻来治疗经典法布里患者。

与没有用米加司他疗法治疗的同一患者相比，米加司他疗法可以降低法布里患者的GSRS-D。在一个或多个实施例中，米加司他疗法为患者提供以下GSRS-D变化，该变化小于0(即，比0更负)，例如小于约-0.1、-0.2、-0.3、-0.4、-0.5、-0.6、-0.7、-0.8、-0.9、-1、-1.1、-1.2、-1.3、-1.4、-1.5、-1.6、-1.7、-1.8、-1.9或-2。换句话说，在一个或多个实施例中，米加司他疗法提供每个肾间质毛细血管的GL-3内含物的大于0的降低，例如降低至少约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9或2。

在一个或多个实施例中，在施用米加司他或其盐6个月后，米加司他疗法为一组经典法布里患者中提供了至少约0.1的GSRS-D的平均降低。在不同实施例中，在施用米加司他或其盐6个月后，经典法布里患者组中的平均降低为至少约0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35或0.4，例如约0.4。在不同实施例中，经典法布里患者是ERT初治患者。

在一个或多个实施例中，在施用米加司他或其盐24个月后，米加司他疗法为一组经典法布里患者中提供了至少约0.1的GSRS-D的平均降低。在不同实施例中，在施用米加司他或其盐的24个月后，经典法布里患者组的平均降低为至少约0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45、0.5、0.55、0.6、0.65、0.7、0.75、0.8、0.85、0.9、0.95或1，例如约0.9。在不同实施例中，经典法布里患者是ERT初治患者。

实例

结合以下实例将更好地理解本发明的组合物和方法，这些实例仅用于举例说明，并不限制本发明的范围。对所披露的实施例的不同改变和修改对本领域技术人员将是显而易见的，并且可以在不脱离本发明的精神和所附权利要求的范围的情况下进行此类改变和修改(包括但不限于与本发明的方法、配制品和/或方法相关的那些)。

实例1：使用米加司他盐酸盐治疗法布里患者的给药方案

本实例描述了在ERT初治的法布里患者(包括患有经典法布里病的患者)中的米加司他疗法的第3期研究。

患者入选。符合条件的患者年龄在16-74岁之间，并且患有基因确诊的法布里病；≥6个月未曾接受或未接受过ERT；基于入选时使用的HEK分析，具有GLA突变，所述突变导致对米加司他应答的突变蛋白；eGFR>30ml/min/1.73m²，并且尿GL-3≥正常上限的4倍。

研究设计。在合格性-基线评估(2个月)后，随机分配患者至阶段1-每隔一天双盲施用150mg的米加司他盐酸盐或安慰剂，持续6个月。完成阶段1的所有患者都有资格在阶段2(第6-12月)以及之后的另外一年(第13-24月)接受非盲米加司他。主要目的是，比较在6个月的治疗后，相对于安慰剂，米加司他对肾脏GL-3的影响，如通过间质毛细血管中内含物数量的组织学评分所评估的。阶段1的次要目的是，比较相对于安慰剂，米加司他对尿GL-3水平、肾功能、24小时尿蛋白以及安全性和耐受性的影响。第三个目的是心脏功能、患者报告的结果、探索性肾脏分析和白细胞α-Gal A活性。研究完成者有资格参加非盲延伸研究，持续长达5年。

肾脏组织学评估。每个患者进行基线肾活检，连同在6个月和12个月时重复肾活检。每个患者在基线时以及在6个月和12个月时，每个肾间质毛细血管的GL-3内含物的数量由3个独立病理学家(对治疗和访视双盲)在300个毛细血管中进行定量评估。在统计分析之前，在给定时间内对每个个体活检的所有值取平均值。

足细胞、内皮细胞和系膜细胞中的GL-3变化以及肾小球硬化由同样的3个病理学家(对治疗/访视双盲)进行定量评估。

神经酰胺三己糖苷和球丙糖酰基鞘氨醇。使用新颖稳定的同位素标记的内标物13C6-溶血Gb3(下限定量：0.200ng/mL，0.254nmol/L)，通过液相色谱-质谱法分析血浆溶血Gb3和24小时尿GL-3。

肾功能评估。年变化率(mL/min/1.73m²/年)是使用慢性肾脏疾病流行病学合作(Chronic Kidney Disease Epidemiology Collaboration)-eGFR_CKD-EPI和测量的碘海醇清除率-mGFR_碘海醇进行计算的。

超声心动描记术。LVMi、左后壁厚、舒张压、室间隔厚、舒张压等参数通过盲式、集中评价进行评估。

患者报告的结果。使用胃肠道症状评分量表(Gastrointestinal-Symptoms-Rating-Scale)(GSRS)、简易格式(Short Form)-36v2TM和简明疼痛量表疼痛程度组分(Brief-Pain-Inventory-Pain-Severity-Component)评估患者报告的结果。

安全分析与不良事件。将接受≥1剂量的随机患者纳入安全性分析，该分析包括生命体征、体检、心电图、临床实验室和不良事件。

肾间质毛细血管GL-3底物的统计学分析。主要的阶段1(6个月)结束点(具有基线活检的ITT人群，n＝64)是米加司他和安慰剂组中每个肾间质毛细血管的GL-3内含物减少≥50％的患者的比例。评估另外两个阶段1结束点(修改后的ITT人群：具有配对基线和第6个月活检的随机患者；n＝60)：每个肾间质毛细血管的GL-3内含物的百分比变化，以及不含GL-3内含物的间质毛细血管的百分比。

针对阶段2(第6-12月)和非盲延伸(第12-24个月)中的每个肾间质毛细血管的GL-3内含物和其他预先指定的结束点的功效分析是基于以下修改的治疗意图(mITT)：治疗由具有通过验证测定显示适合于米加司他治疗的突变体α-Gal A酶的随机患者组成的人群；n＝50)。

对于除每个肾间质毛细血管内GL-3内含物外的所有结果，汇总表型亚组内患者的数据，而不论前六个月的治疗分配如何(米加司他或安慰剂)。

结果

基线特征。对六十七个具有潜在应答性的突变体α-Gal A的患者(16-74岁，64％为女性)(ITT人群)进行随机分组。表2提供了具有适合的突变体α-Gal A的ITT群体中的50个患者的基线特征。基线参数没有统计学显著性差异。

表2：基线特征

与具有适合突变的患者(n＝50)的基因型相关的一种或多种临床表型的已发表报告表明，30例(60％)具有与法布里病经典表型相关的突变，一例(2％)具有与非经典表型相关的突变，三例(6％)具有与两种表型都相关的突变，以及16例(32％)尚未分类。16例男性中有14例(87％)中发现残留WBCα-Gal A活性<3％；31例男性和女性中有29例(94％)具有升高的血浆溶血Gb3，并且50例男性和女性中有47例(94％)具有多器官系统疾病。

基于多器官系统受累和PBMCα-Gal A活性<正常值的3％，男性患者被鉴定为患有经典法布里病。与其他患者(即，具有非经典表型的男性患者和女性患者；n＝36)相比，经典男性患者(n＝14)在基线时具有更严重的法布里病表现(图4A-4E)。平均基线eGFR_CKD-EPI(标准差[SD])(87.8[8.98]相比于95.3[3.37]mL/min/1.73m²)和mGFR_碘海醇(78.6[6.90]相比于88.2[3.95]mL/min/1.73m²)在经典男性患者中比其他患者更低，并且LVMi更高(114.3[7.31]相比于88.2[5.90]g/m²)。经典男性亚组中的突变为：p.Ile253Thr(n＝2)、p.Pro259Arg(n＝2)、p.Gly183Asp、p.Leu243Phe、p.Cys174Arg、p.Asp55Val/Gln57Leu、p.Gly144Val、p.Arg301Gln、p.Gly373Ser、p.Asp322Glu、p.Gly325Arg、和p.Tyr216Cys(每个n＝1)。

体外活性。下表3提供了基线PBMCα-Gal A活性和根据HEK测定法测量的米加司他对α-Gal A活性的影响。

表3：米格司他对α-Gal A活性的影响

BLD＝低于检测限(<142nmol/mg/hr)；PBMC＝外周血单核细胞；SEM＝平均值的标准差；WT＝野生型。

数据表示为二十个数据点的平均值±SEM：突变体α-Gal A活性表示为在平行测定的没有米加司他(-米加司他)的情况下孵育的WT细胞裂解物中测得的α-Gal A活性的百分比。

10μM(％WT)处的绝对增加＝10μM米加司他(+米加司他)的野生型α-Gal A活性的百分比减去野生型α-Gal A活性的基线(-米加司他)百分比。

10μM处的α-Gal A活性(相对于基线的倍数)＝有10μM米加司他情况下的突变体转染的细胞裂解物中的α-Gal A活性/没有米加司他情况下的突变体转染的细胞裂解物中的α-GalA活性。

使用单尾曼恩-惠特尼U非参数检验确定了不使用米加司他(n＝20)相比于使用10uM米加司他(n＝20)情况下，α-Gal A活性的统计学显著差异：*p<0.001。星号表示αGal A突变形式，与10uM米加司他孵育后，其显示αGal A活性的统计学上显著的增加。

“BLD”表示平均αGal A活性(n＝20的平均值)低于检测限(<142nmol/mg/hr；值等于pcDNA活性(单位nmol/mg/hr)的3*标准差(在十个方法验证实验中对128个样品进行矢量减法后))。

^a仅显示男性患者的PBMC数据。

^b经典表型的标准：男性，PBMCα-Gal A活性<正常的3％，多器官疾病。

对于文献中报道的与经典表型相关的在本研究中入选的患者中发现的GLA突变，使用10μM米加司他情况下的α-Gal A活性的平均绝对增加为WT的24.8％，并且平均活性相对于基线增加8.2倍。对于所有其他突变，α-Gal A活性的平均绝对增加为WT的24.5％，并且平均活性相对于基线增加6.8倍

米加司他和肾功能。从基线(或对于随机化至安慰剂的患者而言的第6个月)到第24个月，eGFR_CKD-EPI的平均(标准差[SD])年变化率为：经典男性亚组-0.3(3.76)mL/min/1.73m²(95％CI-2.80，2.25)，其他患者亚组-0.3(4.47)mL/min/1.73m²(95％CI 1.98，1.48)(图4A)。在这段时间内，经典男性和其他患者的中位年变化率分别为0.25mL/min/BSA(最小值，最大值：-8.6，4.3)和0.33mL/min/BSA(最小值，最大值：-13.8，7.4)。同一时间段内，mGFR_碘己醇的平均(SD)年变化率在经典男性中为-3.0(6.04)mL/min/1.73m²(95％CI-7.65，1.64)和在其他患者中为-1.0(6.66)mL/min/1.73m²(95％CI-4.39，2.33)。从第6个月到第24个月，一名经典男性患者具有-16mg/mL/1.73m²的降低。从基线到第24个月，mGFR_碘己醇的中位(范围)变化为经典男性-1.03mg/mL/1.73m²(最小值，最大值：-16.2、3.0)和在其他患者中-0.34mg/mL/1.73m²(最小值，最大值：-20.4，15.8)。

结果与本研究中总体顺从群体的结果相似，即，米加司他稳定了具有顺从突变的患者的GFR，其中eGFR_CKD-EPI和mGFR_碘己醇从基线到第24个月的年变化分别为-0.3(0.66)和-1.5(1.33)mL/min/1.73m²。在研究期间，血管紧张素转换酶(ACE)抑制剂和血管紧张素受体阻滞剂(ARB)的使用未发生变化，因此不会影响肾功能数据。

米加司他和心脏功能。米加司他还导致两个亚组的LVMi降低。值得注意的是，经典男性患者的基线LVMi显著高于其他患者(114.3g/m²相比于88.2g/m²)，并且七名(50％)经典男性患者在基线时具有LVH。LVMi从基线(或第6个月)到第24个月的平均(SD)变化为经典男性-16.7(18.64)g/m²(95％CI-31.1，-2.4)和其他患者-3.2(18.66)g/m²(95％CI-12.5，6.1)(图4B)。

相比之下，在米加司他治疗的24个月后，米加司他治疗的总体群体的LVMi变化为-7.7g/m²(95％CI，-15.4，-0.01)，其中LVH患者的降幅更大(-18.6g/m²[95％CI，-38.2，1.0]。

此外，与具有经典表型的男性的已发表的数据比较，该分析结果表明，米加司他治疗的患者的GFR和LVMi结果优于未接受治疗的患者。未经治疗的男性研究报告，eGFR(使用eGFR_CKD-EPI或eGFR_MDRD测量)的基线年变化范围为-2.6至-12.7mL/min/1.73m²。对于LVMi，未经治疗的男性的研究报告年增加范围为4.1至8.0g/m²。此外，与ERT相比，米加司他在该患者群体中似乎具有潜在的有益作用。尽管已证明ERT改善年轻患者(18-29岁)的LVMi，但在整个年龄段都观察到了米加司他的影响，其中7/8例经典男性患者(年龄在16-61岁；平均42.4岁)的数据报告LVMi降低。

米加司他和胃肠道体征和症状。基线时，经典男性患者的GSRS-D平均(SD)得分为2.4(1.69)，其他患者为2.1(1.49)。八名(57％)经典男性患者在基线时具有腹泻症状(即GSRS-D得分≥1)。在经典男性患者中，用米加司他治疗六个月改善GSRS-D得分(从基线的平均[SD]变化-0.3[1.75])，而用安慰剂治疗的患者确实有小幅增加(0.2[0.46])。经典男性患者受益于持续使用米加司他治疗或从安慰剂转变为米加司他治疗。到24个月时，腹泻症状从基线(或第6个月)的平均(SD)变化为-0.9(1.75)(图4C)，在基线时具有腹泻的8位经典男性患者中，有7位(88％)达到了GSRS-D的最小临床重要差异(MCID)降低0.33。在第24个月，其他患者的相应变化为-0.5(1.01)。这些结果与本研究中所有顺从患者群体的结果相似，其中使用米加司他治疗的具有顺从突变的患者在第6个月和第24个月的GSRS-D平均变化分别为-0.3和-0.5。

米加司他和肾脏GL-3。在研究的前6个月中，在用米加司他治疗的经典男性中，每个肾间质毛细血管的GL-3内含物的平均值(SD)较基线降低(-0.8[-0.78])(图4D)。相反，在这段时间里，接受安慰剂的经典男性患者的GL-3内含物增加(平均值[SD]，0.3[0.94])。在这些患者中，在第6个月从安慰剂转换为米加司他后，每个肾间质毛细血管的GL-3内含物在接下来的6个月内平均降低(SD)-0.7(0.91)。这些结果反映了本研究中针对总顺从患者群体报告的结果，其中在米加司他治疗的6个月中GL-3内含物减少(平均-0.25)，而在安慰剂治疗的6个月中增加(平均0.07)。在总的患者群体中，在第6个月从安慰剂转换为米加司他后，平均GL-3内含物随后减少-0.33。

在其他患者亚组中，无论是从第0-6个月使用米加司他治疗(-0.1[0.30])还是在第6个月(第6-12个月的变化；-0.1[0.24])从安慰剂转换为米加司他，每个肾间质毛细血管的平均GL-3内含物的平均(SD)数量减少(图4D)。在从第0-6(-0.05[0.10])个月用安慰剂治疗的其他患者亚组中也出现了小幅减少，尽管总体减少很小(可能是由于低基线水平)，但在用米加司他情况下的变化幅度是安慰剂的两倍。

米加司他和血浆溶血-Gb₃。米加司他与经典男性和其他患者亚组的血浆溶血-Gb₃降低有关。具有经典表型的患者的降低幅度是两倍以上，这可能是由于与其他患者亚组平均值[SD]相比更高的基线水平，99.8[35.28]vs.29.3[48.32]nmol/L)。血浆溶血-Gb₃从基线(或第6个月)到第24个月的平均(SD)变化为：经典男性-36.04(34.48)nmol/L(95％CI-67.93，-4.15)并且其他患者-16.33(19.73)nmol/L(95％CI-25.07，-7.58)(图4E)。

安全性与不良事件。在阶段1，治疗突发性不良事件在组间是相似的。与安慰剂相比，接受米加司他的患者中出现的高频不良事件为头痛(12/34个患者-35％对比7/33个患者-21％)和鼻咽炎(6/34个患者-18％对比2/34-6％)。阶段2最常报告的不良事件是头痛(9/63个患者-14％)和操作性疼痛(7/63个患者-11％，与肾活检相关)，以及非盲延伸阶段最常报告的不良事件是蛋白尿(9/57个患者-16％)、头痛(6/57个患者-11％)和支气管炎(6/57个患者-11％)。大多数不良事件严重程度为轻度或中度。没有不良事件导致米加司他中断。

六个患者在阶段1出现严重不良事件(2：米加司他；4：安慰剂)，5个患者在阶段2出现严重不良事件，以及11个患者在非盲延伸期出现严重不良事件。两个严重不良事件(疲劳和感觉异常)被调查者评估为可能与米加司他相关。两者在第12-24个月之间发生在同一患者身上，并已解决。由>1个患者报告了无个体严重不良事件。两个患者由于严重不良事件而中断米加司他；这两者都被认为与米加司他无关。未报告出现死亡病例。

在第12-24个月之间有9个患者(16％)发生了治疗突发性蛋白尿，并且其中一例被判断与米加司他相关。在5个患者中，24个月的值均与基线相同。三个具有适合的突变的患者基线蛋白尿明显(>1g/24-hr)，该水平在24个月内有所上升。在28个基线蛋白尿<300mg/24-h的患者中，有23个的24小时尿蛋白在米加司他治疗期间保持稳定。

没有Banikazemi等人所定义的进展到终末期肾病、心脏死亡或中风。有一例短暂性脑缺血发作-判断为与米加司他无关。

生命体征、体检发现、实验室和ECG参数的分析未揭示米加司他的临床相关作用。

本文提及的专利和科学文献建立了本领域技术人员可用的知识。本文引用的所有美国专利和公开或未公开的美国专利申请均通过引用而并入。本文引用的所有公开的外国专利和专利申请均通过引用特此并入。本文引用的所有其他公开的参考文献、文件、手稿和科学文献均通过引用特此并入。

尽管已经参照本发明的优选实施例具体显示和描述了本发明，但是本领域技术人员应当理解，在不脱离所附权利要求所涵盖的本发明的范围的情况下，可以在形式和细节上进行各种改变。

序列表

<110> 阿米库斯治疗学公司

<120> 患有经典法布里病的患者的治疗

<130> TWLB11595-20P8

<150> US 62/626,992

<151> 2018-02-06

<160> 3

<170> PatentIn 3.5版

<210> 1

<211> 12436

<212> DNA

<213> 智人

<400> 1

cccttctgta ggggcagaga ggttctactt cattactgcg tctcctggga aggccatcag 60

gactgctggc taaagtggga accaggactc tttgtgagtt aagaatttgt gtatttatat 120

gtgtgttata cacatttttt aaaaaactgt aacgacatca ggttgagcag tcgtctccgg 180

gtggtgaatt atgtgtattt ttaaatttta tactatattg ttatttttca aatgttcgaa 240

attgaatatg tagattgttg ttatcagcag aaaaataaac attattcaaa tactctattc 300

agtaaagtaa tttattgggc gcctttgtca agcacgcatt tgcctagatg tgactctaca 360

gataaaattc acttggggcc tccccttaca gacaatcagg cagtggagac tgagtgcctg 420

aatggataga ccagcactca gaccactatt ttcagtatct gtttttctta actcagggcc 480

gtggttttca aacgtttttc gccttacggt cacccttagg gtcccccgag accggcccag 540

acagacagat atacaaaaac acatacacag tcatgagcgt ccaccatttc cccaccaggc 600

gcagcacagg cggcttcccg gcactgagat gggggggagg agggagagag cgcgaggggg 660

gaggggaaag cagagaacga aagaggcgga ggcggccccc gaaccccgct ctggtcttca 720

tcatcaccac ccctgggtcc ccagttccca cccacacacc aacctctaac gataccgggt 780

aattttcctc cttcttccct caaacggcta tagcgagacg gtagacgacg accagaacta 840

cttctgctca cgtaagcgag taatcacgtg agcgcctacg tcatgtgaga tctcggtcac 900

gtgagcaact ctcggcttaa actcgggatc actaaggtgc cgcacttcct tctggtatgg 960

aaatagggcg ggtcaatatc aagaaaggaa gagggtgatt ggttagcgga acgtcttacg 1020

tgactgatta ttggtctacc tctggggata accgtcccag ttgccagaga aacaataacg 1080

tcattattta ataagtcatc ggtgattggt ccgcccctga ggttaatctt aaaagcccag 1140

gttacccgcg gaaatttatg ctgtccggtc accgtgacaa tgcagctgag gaacccagaa 1200

ctacatctgg gctgcgcgct tgcgcttcgc ttcctggccc tcgtttcctg ggacatccct 1260

ggggctagag cactggacaa tggattggca aggacgccta ccatgggctg gctgcactgg 1320

gagcgcttca tgtgcaacct tgactgccag gaagagccag attcctgcat caggtatcag 1380

atattgggta ctcccttccc tttgcttttc catgtgtttg ggtgtgtttg gggaactgga 1440

gagtctcaac gggaacagtt gagcccgagg gagagctccc ccacccgact ctgctgctgc 1500

ttttttatcc ccagcaaact gtcccgaatc aggactagcc ctaaactttc tctgtgtgac 1560

ctttcctggg atgggagtcc ggccagcggc ccctgtttct ttctctctct ctctctctct 1620

cgttctcctt ctctttctct ttctcttctt tcctctctct ttctctctct ccctgcccgg 1680

ttctcttttt tcactgctcc ttgcagagca gggccacccc ataggcagtg tgcccaaagt 1740

agccctgccc ggttctattc agacccttct tgtgaacttc tgctcttcct ctgccgggtg 1800

ctaaccgtta gaacatctag ggtgggtagg aggaatgggg aactaagatt cgtgccattt 1860

tttctccttt tggggtcgtg gatttctcgg cagtatctcg agggagttag agagaccata 1920

aggtcgctga gatctctccc acctcgccca tgagcgtggc atcaggctgg aaggttgaca 1980

tggaggaact ttatacattt acacctttgc gtgagggttg aggctggatt agataggtat 2040

tgaacatatc tgaccctcac aatccttatc tgtaaattgg gattacaacc ttttaatttc 2100

agggagctga caaaaaaaat ctgaaaaata gttcttatct cacacaggtg agttttcaag 2160

gagataacct atttaaagta catagcacag cgcttgacca ttcaactgcg cttacagagc 2220

aaatgttcaa tgggaaaatg aatgtaaatc tacaaatctg aatgaatatg tgtatttttc 2280

tggagagagg atatttacct ttcttcaaat tctcaaaggg ctctgtgatt taaaaaaggt 2340

taggaatcac tgatagatgt tggtaaaagg tggcagtcac agtacatttc tgtgtccata 2400

agttattcct atgaatatct ttatagataa agtcaggatg ttggtcagac atcacagaag 2460

aaattggcct tgtaagtttc atgtgaccct gtggtacagt atgtgtggca attttgccca 2520

tcacggattt ttttttattg gtatttgcat ctgattataa aactaatgca tgatcattgc 2580

aaaaaatgta gataaagaag agcaaaatga aaataaagat ttccccccac cgttccacca 2640

cccagaaata atcatggttt aaatgttaat atacaacctt acaattgttt tctatataaa 2700

tgaaaacata gatttcttta tttcattatt ttccataaaa aatggatcat gtttatgtca 2760

tgtttggcta atggcaagac cctggcaccc agtctgggct caaattctgc ctcattgtta 2820

cttagccctg tgacattggg taaattacac tttttttttt tttttttttt tgagacgggg 2880

tctcgctctg tcgcccaggc tggagtgcag tggcacgatc tcggctcact gcaagtccgc 2940

ctcctgggtt cacgccattc ttctgcctca gcctcccgag tagctgggac tacaggcgcc 3000

tgccaccacg cctggctctt tttttttttt tttttttttt tagtacagac ggggtttcac 3060

catgttagcc agggtggtct caatctcctg acctcgtgat tcgcccgcct cagcctccca 3120

aagtgctggt gtgagccacc gtgcccagcc ttactttttt ttttgagagg gggtctcact 3180

ctgtcaccca ggttggagtg cagtggcgcg atctctgctc agtgcaaact ccacctcccg 3240

ggtttaagca gttctcctgt cgtagtctcc tgagtagctg ggattacagg cacaccacca 3300

cggccagcta atttttgtat tttcagtaga gacgggtttc accatgttgc ccaagctggt 3360

ctcgaactcc tggcctcaag tgatctgccc gccttggcct cccagagtgc tgggattaca 3420

ggtgtgagcc accgcacccg gcctcttttt tcttttttag tctatcatac cttgcaaata 3480

cagtggttct tcctatgtgt tggttttgat atttatgtaa tcaaacacat cagtttttcc 3540

tttctgattt ctgactttgg ggtcatgctg agaaagtcct ttcctacctg aagataatac 3600

agtatatacg tttcttacta gtatttttgt ggatttttaa aatatttaaa tctttagtcc 3660

atctgaactt gttcttctat cagaaatgcc acatttaata aataataagt cccatggtat 3720

cagatggctg gaaggacctc tttcgaaact ttgtttaatt ccattaatct gtgtattctt 3780

attctaatgc taatagttcc acactagctt cctttatctt ttttttcttt tttttttttt 3840

ttttgagctg gagtttcgct cttgttgccc aggctggagt acaatgtcac gatctcggtt 3900

caccgcaacc tccgcctccc aggttcaagc aattctcctg cctcatcctc gcgagtagct 3960

ggaattacag gcatgcgcca ccacgcctag ctattttgta tttttagtag agatggggtt 4020

tctccatgtt ggtcaggctg gtctcaaact cccagcctca ggtgatctgc ctgcctcggc 4080

ctcccaaaat gctgttatta caggcgtgag ccaccacgcc cagccttcat cttttaatga 4140

atgtacatgt atgtaatctt ttaggtgaac tttttgtaat gttgtgccaa gttccttaaa 4200

aagccctttt ggaagctggg caggtggcca cgcctgtaat cccagcattt tgggagtctg 4260

aggcaggtgg atcacttgag gccaggagtt caagactagc ctagccaaaa tgcaaaaccc 4320

tgtctctact aaagatacaa aaattagccg gatgcgatgg cacatgcctg taatctcagc 4380

tactcgggag gctgaggtag aagaatcgct tgaaccgggg aggcagaggt tgcagtgagc 4440

aagatggcgc cactgcactc cagcctgggt gacagaggga gactccatct caaaaaaaaa 4500

aaaaaaaaaa aagataaaaa ggaaacctaa gtactcttgg gctttgttaa ggattttgtt 4560

aaatatacaa aggattgcag ggaaaattaa cttattttta atattgagta tgcttatcca 4620

agagcaaaat aatatttctc catttattca aatcatttag gagcatcata gttttaacat 4680

atgggccttg cacgtatctt aaatttatct ctaggcattt taggttgttc agttgttctt 4740

gtgaatggga tctttttctc caaataggat tattgttgat atctgttgat tatgttaact 4800

ttgtagtttc tgactttact gaactgtctt cttagatcta atactctttt caatttcatc 4860

atatatttct cattcctatt ttgtttgggg tttttagggc gggaatatta acgggataag 4920

agagacaaaa gaaaatctgg aaaaacaatt cattttacct tacattgctt gtgattacta 4980

ccacactatt actgggttgg aaaaaattgt gaaatcccaa ggtgcctaat aaatgggagg 5040

tacctaagtg ttcatttaat gaattgtaat gattattgga atttctcttt cagtgagaag 5100

ctcttcatgg agatggcaga gctcatggtc tcagaaggct ggaaggatgc aggttatgag 5160

tacctctgca ttgatgactg ttggatggct ccccaaagag attcagaagg cagacttcag 5220

gcagaccctc agcgctttcc tcatgggatt cgccagctag ctaattatgt gagtttatag 5280

ataatgttct tgttcattca gaggactgta agcacttctg tacagaagct tgtttagaaa 5340

cagccctcat ggccgggcgt ggtggctcac gctgtaatcc caacactttg ggaggccgag 5400

gcgggtggat cacctgaggt caagagttca agaccagcct ggccaacatg gtgaaacccc 5460

aactctatta aaagtacaaa aaattagctg ggcatggtgg tgaacgcctg taaccccagc 5520

tacttgggag gctgaggcag gagaatcgct tgaacccagg aggtggaagt ttcagtgagc 5580

tgagatcacg ccattgcact ctagcctggg caacaaaaga gaaactccat ctcaaaaaaa 5640

aaaacaagga aaaaaagaaa cagccctcat gacacttaga aagtagaata gctggctgtt 5700

atctgaacat tgaattgtaa ggcttatcag gtggactttg cattccatca gcagacaatt 5760

tttttttttt tttttttttg agatggagtc tcattctgtc tcccaggctg gagggcagtg 5820

gtgcgatctc ggctcactgc aagctccacc tcctgggttc atgccattct cctgcctcag 5880

cctcccaagt agctgggacc acaggcaccc gccaccatgc ccagttaatt ttttgtattt 5940

ttagtagaga cggggtttca ccatgttagc caagatggtc tcgatctcct gacctcgtga 6000

tccgcccacc tcggcctccc aaagtgctgg gattacaggc atgagccacc gcgcctagcc 6060

tacaaatgtt ttgtaatagc tcttgaggcc catcttggag ttctcctttt gctaaaacca 6120

ctgaactctc taggaggaaa aaggaacttg gttcttgaca tatgtgtgca tgtatttcca 6180

tataaccttt aggaagctat tgcaatggta ctataaacta gaattttaga agatagaagg 6240

aaaatattct ggagatcatt gaagagaaat ggagtccaac actagttaaa gatgatgaag 6300

acagattttt ttttttgacg gagtctcgct ctgtcgccca ggctggagtg cagtggcaca 6360

atctcagctc actgcaaccc tccacctctt gggttcaagt gattctcctg cctcagcctc 6420

ccaagtagct gggactacag gcgcacacca ccacgcccgg ctaatttttg tatttttagt 6480

agagacaagg tttcaccata ttcgccaggc tggtctcgaa ctcctgacct tgtaatccgc 6540

ccaccttggc ctcccaaagt gctgggatta caggcatgag ccaccacgcc cggccgatga 6600

agacagattt tattcagtac taccacagta gaggaaagag ccaagttcaa ttccaaatac 6660

aacaaagaca ggtggagatt tatagccaat gagcagattg agggggtcag tggatggaat 6720

atttaagaag acatcaaggg tagggagctt cttgctaaag cttcatgtac ttaaacaaga 6780

agggtggggg atgagggaaa ttgatcagat atcaatggtg gcagtattga cttagcagga 6840

ttcttgctaa gaggtcttgc taggacagac ataggaagcc aaggtggagg tctagtcgaa 6900

aagaaggctc atcagagaag tctaactaaa gtttggtcaa gaagagtctt tgtcaaggta 6960

aatctatcat ttccctcaaa aggtaatttt caggatccca tcaggaagat tagcatggct 7020

gctagctttc tcctcagttc tgggctatag ctcacatgcc tagtttgaac tagctcagca 7080

gaactggggg atttattctt tgtcttccaa caaactcatc tggatgattt tgggggtttg 7140

tggggaaaag cccccaatac ctggtgaagt aaccttgtct cttcccccag cctggaatgg 7200

ttctctcttt ctgctacctc acgattgtgc ttctacaatg gtgactcttt tcctccctct 7260

catttcaggt tcacagcaaa ggactgaagc tagggattta tgcagatgtt ggaaataaaa 7320

cctgcgcagg cttccctggg agttttggat actacgacat tgatgcccag acctttgctg 7380

actggggagt agatctgcta aaatttgatg gttgttactg tgacagtttg gaaaatttgg 7440

cagatggtaa tgtttcattc cagagattta gccacaaagg aaagaacttt gaggccatgg 7500

tagctgagcc aaagaaccaa tcttcagaat tttaaatacc ctgtcacaat actggaaata 7560

attattctcc atgtgccaga gctcccatct cttctctttc agttcattaa ttaattaatt 7620

aattcatgta aaatccatgc atacctaacc atagctaata ttgtgcactt ataattcaag 7680

agggctctaa gagttaatta gtaattgtaa ctctctataa catcatttag gggagtccag 7740

gttgtcaatc ggtcacagag aaagaagcat cttcattcct gcctttcctc aatatacaca 7800

ccatctctgc actacttcct cagaacaatc ccagcagtct gggaggtact ttacacaatt 7860

taagcacaga gcaactgcct gtccctgctg ctagtttaaa catgaacctt ccaggtagcc 7920

tcttcttaaa atatacagcc ccagctgggc atgatggctc atgcctgtaa tcctagcact 7980

ttgggaggct gaggcgggtg gattacttga ggtcaggagt tcgagaccac cctggccaac 8040

atggtgaaac cccatctcta gtaaaaatac aaaaattagc tgactttggt ggcacatgcc 8100

tgtaatccca gctacttggg aagctgagac agaagagtca cttgaacctg ggaaacagag 8160

gttgcagtga gccaagatcg caccactgca ctccaccctg gatgacagac tgaaccccat 8220

ctcaaaaaat taaaataaaa taaaataaaa taactatata tatagcccca gctggaaatt 8280

catttctttc ccttatttta cccattgttt tctcatacag gttataagca catgtccttg 8340

gccctgaata ggactggcag aagcattgtg tactcctgtg agtggcctct ttatatgtgg 8400

ccctttcaaa aggtgagata gtgagcccag aatccaatag aactgtactg atagatagaa 8460

cttgacaaca aaggaaacca aggtctcctt caaagtccaa cgttacttac tatcatccta 8520

ccatctctcc caggttccaa ccacttctca ccatccccac tgctgtaatt atagcctaag 8580

ctaccatcac ctggaaagtc atccttgtgt cttccccttt atttcaccat tcatgtcctg 8640

tctatcaaca gtccttccac cagtatctct aaaatatctc ctgaatcagc ccacttcctt 8700

ccatcttcac tacatgcacc ctggccttcc aagctactat cggctctcaa ccagactgct 8760

gggaccacct gatctctctg cttccactct gtctcaaccc ccatctattt tccaagcagc 8820

actagagtta tcatattaaa atgtaaatat cagttttttt tttaaagaaa aaaaccctga 8880

gacttaacag agttataaaa aatataaatg tcatcatcag ttccctgctt aaaaccctta 8940

actcgcttcc aattgcactt ggaatgaaac caaactgcac tgatccagcc cttgcctgcc 9000

tccccaaagt ccaaggggtc atggctcttt ccctggctac actggttttc tttctgtccc 9060

tcaacactgc aagcctattg ctgccccagg gcctttacac ttgctttttt tctgcctaga 9120

acagttcttc cccaaagatt tttaaagggc cgggctcctt aacattgaag tcgcagacca 9180

aacgccacat atgcagacag ttcttctcta actactttaa aatagccctc tgtccattca 9240

ttcttcatca cattaacctg tttaattttc ttctcagagc tccacactat ttggaagtat 9300

ttgttgactt gttaccatgt ctccccacta gagtgtaagt ttcatgaggg cagggacctt 9360

gtctgacttt gactgtatct ctcgcatatg gttaagtgtt aaatagttat ttatggaatg 9420

aatccctatt attccctcat tatctctgca aaatagtctt ttttctcaac atcttaaacc 9480

tgatatccca cctgcctatc tacaaacttt ttttttgcga cagagtctca ctgtcaccca 9540

ggctagagtg cagtggcgcc atctcggctc actgcaacct ccgcctcccg ggtttaagcg 9600

attctcttgc ctcagcctcc cagtagctgg gattataggc gtgcgctacc acatctggct 9660

aatttttgta tttttagtag agatggtttc accatgttgg ccaggcttgt ctcgaactcc 9720

tgacctcaga tgatccacct gcctcggcct cccaaagtgc tgggattaca ggcatgagcc 9780

accgtgccca gcctctacaa actttttatt ccattaacaa actatatgct gggatttaag 9840

ttttcttaat acttgatgga gtcctatgta attttcgagc ttttaatttt actaagacca 9900

ttttagttct gattatagaa gtaaattaac tttaagggat ttcaagttat atggcctact 9960

tctgaagcaa acttcttaca gtgaaaattc attataaggg tttagacctc cttatggaga 10020

cgttcaatct gtaaactcaa gagaaggcta caagtgcctc ctttaaactg ttttcatctc 10080

acaaggatgt tagtagaaag taaacagaag agtcatatct gttttcacag cccaattata 10140

cagaaatccg acagtactgc aatcactggc gaaattttgc tgacattgat gattcctgga 10200

aaagtataaa gagtatcttg gactggacat cttttaacca ggagagaatt gttgatgttg 10260

ctggaccagg gggttggaat gacccagata tggtaaaaac ttgagccctc cttgttcaag 10320

accctgcggt aggcttgttt cctattttga cattcaaggt aaatacaggt aaagttcctg 10380

ggaggaggct ttatgtgaga gtacttagag caggatgctg tggaaagtgg tttctccata 10440

tgggtcatct aggtaacttt aagaatgttt cctcctctct tgtttgaatt atttcattct 10500

ttttctcagt tagtgattgg caactttggc ctcagctgga atcagcaagt aactcagatg 10560

gccctctggg ctatcatggc tgctccttta ttcatgtcta atgacctccg acacatcagc 10620

cctcaagcca aagctctcct tcaggataag gacgtaattg ccatcaatca ggaccccttg 10680

ggcaagcaag ggtaccagct tagacaggta aataagagta tatattttaa gatggcttta 10740

tatacccaat accaactttg tcttgggcct aaatctattt ttttcccttg ctcttgatgt 10800

tactatcagt aataaagctt cttgctagaa acattacttt atttccaaaa taatgctaca 10860

ggatcatttt aatttttcct acaagtgctt gatagttctg acattaagaa tgaatgccaa 10920

actaacaggg ccacttatca ctagttgcta agcaaccaca ctttcttggt ttttcaggga 10980

gacaactttg aagtgtggga acgacctctc tcaggcttag cctgggctgt agctatgata 11040

aaccggcagg agattggtgg acctcgctct tataccatcg cagttgcttc cctgggtaaa 11100

ggagtggcct gtaatcctgc ctgcttcatc acacagctcc tccctgtgaa aaggaagcta 11160

gggttctatg aatggacttc aaggttaaga agtcacataa atcccacagg cactgttttg 11220

cttcagctag aaaatacaat gcagatgtca ttaaaagact tactttaaaa tgtttatttt 11280

attgccaact actacttcct gtccaccttt ttctccattc actttaaaag ctcaaggcta 11340

ggtggctcat gcctgtaatc ccagcacttt gggaggctga ggcgggcaga tcacctgagg 11400

tcgggacttt gagacccgcc tggacaacat ggtgaaaccc catttctaat aaaaatataa 11460

aaattagcca ggtgtggtgg cgcacctgtg gtcccagcta ctctgggggc tgaggcatga 11520

gaatcgcttg aacccgggag tggaggttgc attgagctga gatcatgcca cctcactcca 11580

gcctgggcaa caaagattcc atctcaaaaa aaaaaaaaaa gccaggcaca gtggctcatg 11640

cctggaatcc cagcactttt ggaagctgag gcaggcagat cacttgaggt taggatttca 11700

agaccagcct ggctaacata gtaaagccct gtctctacta aaaatacaaa aattagccag 11760

gtatggtggc gagcttctgt agccccagct actcaggaga ctgaggcagg agaatcactt 11820

gaacccggga agtggggggg tgcagtgacc caagatcacg ccactgcatt ccagcctggg 11880

caacagagca agactccatc tcaaaaaaaa aagttctatt tccttgaata aaattttccg 11940

aagtttaaac tttaggaata aaactattaa acccgtattt actcatccag atacccaccc 12000

cccttgttga gattctctcc caattatcaa aatgtgtagc atatttaact accaagagct 12060

aaacatcatt aagactgaaa tgtattaaga aggatgtata ggccaggcac ggtgtctcac 12120

gcctgtaatc ccaacacttt gggaggccaa gtcgggcgga tcacgaggtc aggagatgga 12180

gaccatcctg gccaacatgg tgaaaccccc tctctactaa aaatacaaaa attagccagg 12240

caggtggcag gcacctgtaa tcccagctac tccagaggct gaggcaggac aatcacttga 12300

acctgggagg cagaggctgc agtgagctga ggttgtacca attgcactcc agcctaggta 12360

acgagcaaca ctccatctca aaaaaagaaa aaaaaaaaga tgtataattt ggaactgtta 12420

agaggcattt taaaga 12436

<210> 2

<211> 429

<212> PRT

<213> 智人

<400> 2

Met Gln Leu Arg Asn Pro Glu Leu His Leu Gly Cys Ala Leu Ala Leu

1 5 10 15

Arg Phe Leu Ala Leu Val Ser Trp Asp Ile Pro Gly Ala Arg Ala Leu

20 25 30

Asp Asn Gly Leu Ala Arg Thr Pro Thr Met Gly Trp Leu His Trp Glu

35 40 45

Arg Phe Met Cys Asn Leu Asp Cys Gln Glu Glu Pro Asp Ser Cys Ile

50 55 60

Ser Glu Lys Leu Phe Met Glu Met Ala Glu Leu Met Val Ser Glu Gly

65 70 75 80

Trp Lys Asp Ala Gly Tyr Glu Tyr Leu Cys Ile Asp Asp Cys Trp Met

85 90 95

Ala Pro Gln Arg Asp Ser Glu Gly Arg Leu Gln Ala Asp Pro Gln Arg

100 105 110

Phe Pro His Gly Ile Arg Gln Leu Ala Asn Tyr Val His Ser Lys Gly

115 120 125

Leu Lys Leu Gly Ile Tyr Ala Asp Val Gly Asn Lys Thr Cys Ala Gly

130 135 140

Phe Pro Gly Ser Phe Gly Tyr Tyr Asp Ile Asp Ala Gln Thr Phe Ala

145 150 155 160

Asp Trp Gly Val Asp Leu Leu Lys Phe Asp Gly Cys Tyr Cys Asp Ser

165 170 175

Leu Glu Asn Leu Ala Asp Gly Tyr Lys His Met Ser Leu Ala Leu Asn

180 185 190

Arg Thr Gly Arg Ser Ile Val Tyr Ser Cys Glu Trp Pro Leu Tyr Met

195 200 205

Trp Pro Phe Gln Lys Pro Asn Tyr Thr Glu Ile Arg Gln Tyr Cys Asn

210 215 220

His Trp Arg Asn Phe Ala Asp Ile Asp Asp Ser Trp Lys Ser Ile Lys

225 230 235 240

Ser Ile Leu Asp Trp Thr Ser Phe Asn Gln Glu Arg Ile Val Asp Val

245 250 255

Ala Gly Pro Gly Gly Trp Asn Asp Pro Asp Met Leu Val Ile Gly Asn

260 265 270

Phe Gly Leu Ser Trp Asn Gln Gln Val Thr Gln Met Ala Leu Trp Ala

275 280 285

Ile Met Ala Ala Pro Leu Phe Met Ser Asn Asp Leu Arg His Ile Ser

290 295 300

Pro Gln Ala Lys Ala Leu Leu Gln Asp Lys Asp Val Ile Ala Ile Asn

305 310 315 320

Gln Asp Pro Leu Gly Lys Gln Gly Tyr Gln Leu Arg Gln Gly Asp Asn

325 330 335

Phe Glu Val Trp Glu Arg Pro Leu Ser Gly Leu Ala Trp Ala Val Ala

340 345 350

Met Ile Asn Arg Gln Glu Ile Gly Gly Pro Arg Ser Tyr Thr Ile Ala

355 360 365

Val Ala Ser Leu Gly Lys Gly Val Ala Cys Asn Pro Ala Cys Phe Ile

370 375 380

Thr Gln Leu Leu Pro Val Lys Arg Lys Leu Gly Phe Tyr Glu Trp Thr

385 390 395 400

Ser Arg Leu Arg Ser His Ile Asn Pro Thr Gly Thr Val Leu Leu Gln

405 410 415

Leu Glu Asn Thr Met Gln Met Ser Leu Lys Asp Leu Leu

420 425

<210> 3

<211> 1290

<212> DNA

<213> 智人

<400> 3

atgcagctga ggaatcccga gctccacctg ggctgtgctc tggctctgcg gttcctggcc 60

ctcgtgtcct gggacatccc tggcgctagg gccctcgata acggactggc ccggaccccc 120

acaatgggat ggctccactg ggaaaggttc atgtgcaatc tggactgtca ggaggaaccc 180

gactcctgca tcagcgaaaa gctcttcatg gagatggccg agctgatggt gagcgagggc 240

tggaaggacg ccggctacga gtatctgtgc atcgatgact gctggatggc ccctcaaagg 300

gactccgaag gcaggctgca ggctgatccc caaaggtttc cccacggaat ccggcagctc 360

gccaactacg tgcattccaa gggcctcaag ctcggcatct acgccgacgt gggcaacaaa 420

acatgcgccg gattccccgg cagcttcggc tactacgaca tcgacgccca gacattcgct 480

gattggggag tggacctgct gaagttcgac ggctgttact gcgattccct ggaaaacctg 540

gccgacggct acaaacacat gtccctcgcc ctgaaccgga caggcaggtc catcgtgtac 600

agctgcgagt ggcccctgta catgtggcct ttccagaagc ccaactacac agagatcagg 660

cagtactgca accactggag gaacttcgct gacatcgacg actcctggaa gagcatcaag 720

agcatcctgg actggaccag cttcaaccag gagaggatcg tggacgtggc tggacccgga 780

ggctggaacg accccgatat gctggtgatt ggcaacttcg gactgagctg gaaccagcag 840

gtgacccaga tggccctgtg ggccattatg gccgctcccc tgttcatgtc caacgacctg 900

aggcacatca gcccccaggc caaggctctg ctgcaggaca aggatgtgat cgccatcaac 960

caggaccccc tgggcaagca gggctaccag ctgaggcaag gagataactt cgaggtgtgg 1020

gagaggcccc tgtccggact ggcttgggcc gtggccatga tcaatcggca ggagatcggc 1080

ggaccccggt cctacaccat tgctgtggcc agcctgggaa aaggagtcgc ctgcaacccc 1140

gcctgcttca ttacccagct gctccccgtg aagcggaagc tgggcttcta tgagtggacc 1200

agcaggctga ggtcccatat caatcctacc ggcaccgtcc tcctccagct cgagaatacc 1260

atgcagatga gcctcaagga tctgctgtga 1290

Claims

1.一种降低患有经典法布里病的患者的肾脏球形三酰神经酰胺(GL-3)的方法，所述方法包括以每隔一天一次的频率给所述患者施用有效量的米加司他或其盐以降低所述患者的肾脏GL-3，其中所述有效量为约100mg至约150mg游离碱当量(FBE)。

2.如权利要求1所述的方法，其中在开始施用所述米加司他或其盐之前，所述患者具有升高的肾间质毛细管GL-3。

3.如权利要求1或2所述的方法，其中降低肾脏GL-3包括降低每个肾间质毛细血管的GL-3内含物。

4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述患者在α-Gal A中具有选自由I253T、P259R、G183D、L243F、C174R、D55V/Q57L、G144V、R301Q、G373S、D322E、G325R和Y216C组成的组的突变。

5.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐增强α-半乳糖苷酶A活性。

6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述有效量为约123mg FBE。

7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述有效量为约123mg的米加司他游离碱。

8.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中米加司他的所述盐是米加司他盐酸盐。

9.如权利要求8所述的方法，其中所述有效量为约150mg的米加司他盐酸盐。

10.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐呈口服剂型。

11.如权利要求10所述的方法，其中所述口服剂型包含片剂、胶囊或溶液。

12.如权利要求1-11中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐施用至少6个月。

13.如权利要求1-12中任一项所述的方法，其中向一组经典法布里患者施用所述米加司他或其盐在施用所述米加司他或其盐6个月后提供每个肾间质毛细血管的GL-3内含物至少约0.5的平均降低。

14.一种在有需要的患者中治疗经典法布里病的方法，所述方法包括以每隔一天一次的频率向所述患者施用有效量的米加司他或其盐，其中所述有效量为约100mg至约150mg游离碱当量(FBE)，并且其中施用所述米加司他或其盐降低所述患者的肾脏球形三酰神经酰胺(GL-3)。

15.如权利要求14所述的方法，其中在开始施用所述米加司他或其盐之前，所述患者具有升高的肾间质毛细管GL-3。

16.如权利要求14或15所述的方法，其中降低肾脏GL-3包括降低每个肾间质毛细血管的GL-3内含物。

17.如权利要求14-16中任一项所述的方法，其中所述患者在α-Gal A中具有选自由I253T、P259R、G183D、L243F、C174R、D55V/Q57L、G144V、R301Q、G373S、D322E、G325R和Y216C组成的组的突变。

18.如权利要求14-17中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐增强α-半乳糖苷酶A活性。

19.如权利要求14-18中任一项所述的方法，其中所述有效量为约123mg FBE。

20.如权利要求14-19中任一项所述的方法，其中所述有效量为约123mg的米加司他游离碱。

21.如权利要求14-19中任一项所述的方法，其中米加司他的所述盐是米加司他盐酸盐。

22.如权利要求20所述的方法，其中所述有效量为约150mg的米加司他盐酸盐。

23.如权利要求14-22中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐呈口服剂型。

24.如权利要求23所述的方法，其中所述口服剂型包含片剂、胶囊或溶液。

25.如权利要求14-24中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐施用至少6个月。

26.如权利要求14-25中任一项所述的方法，其中向一组经典法布里患者施用所述米加司他或其盐在施用所述米加司他或其盐6个月后提供每个肾间质毛细血管的GL-3内含物至少约0.5的平均降低。

27.一种在患有经典法布里病的患者中稳定肾功能的方法，所述方法包括以每隔一天一次的频率向所述患者施用有效量的米加司他或其盐以稳定所述患者的肾功能，其中所述有效量为约100mg至约150mg游离碱当量(FBE)。

28.如权利要求27所述的方法，其中在开始施用所述米加司他或其盐之前，所述患者具有肾脏损害。

29.如权利要求27或28所述的方法，其中所述患者在α-Gal A中具有选自由I253T、P259R、G183D、L243F、C174R、D55V/Q57L、G144V、R301Q、G373S、D322E、G325R和Y216C组成的组的突变。

30.如权利要求27-29中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐增强α-半乳糖苷酶A活性。

31.如权利要求27-30中任一项所述的方法，其中所述有效量为约123mg FBE。

32.如权利要求27-31中任一项所述的方法，其中所述有效量为约123mg的米加司他游离碱。

33.如权利要求27-31中任一项所述的方法，其中米加司他的所述盐是米加司他盐酸盐。

34.如权利要求33所述的方法，其中所述有效量为约150mg的米加司他盐酸盐。

35.如权利要求27-34中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐呈口服剂型。

36.如权利要求35所述的方法，其中所述口服剂型包含片剂、胶囊或溶液。

37.如权利要求27-36中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐施用至少6个月。

38.如权利要求27-37中任一项所述的方法，其中向一组经典法布里患者施用所述米加司他或其盐在施用所述米加司他或其盐24个月后提供eGFR_CKD-EPI大于-1.0mL/min/1.73m²的平均年变化率。

39.一种在有需要的患者中治疗经典法布里病的方法，所述方法包括以每隔一天一次的频率向所述患者施用有效量的米加司他或其盐，其中所述有效量为约123mg游离碱当量(FBE)，并且其中施用所述米加司他或其盐稳定所述患者的肾功能。

40.如权利要求39所述的方法，其中在开始施用所述米加司他或其盐之前，所述患者具有肾脏损害。

41.如权利要求39或40所述的方法，其中所述患者在α-Gal A中具有选自由I253T、P259R、G183D、L243F、C174R、D55V/Q57L、G144V、R301Q、G373S、D322E、G325R和Y216C组成的组的突变。

42.如权利要求39-41中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐增强α-半乳糖苷酶A活性。

43.如权利要求39-42中任一项所述的方法，其中所述有效量为约123mg FBE。

44.如权利要求39-43中任一项所述的方法，其中所述有效量为约123mg的米加司他游离碱。

45.如权利要求39-43中任一项所述的方法，其中米加司他的所述盐是米加司他盐酸盐。

46.如权利要求45所述的方法，其中所述有效量为约150mg的米加司他盐酸盐。

47.如权利要求39-46中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐呈口服剂型。

48.如权利要求47所述的方法，其中所述口服剂型包含片剂、胶囊或溶液。

49.如权利要求39-48中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐施用至少6个月。

50.如权利要求39-49中任一项所述的方法，其中向一组经典法布里患者施用所述米加司他或其盐在施用所述米加司他或其盐24个月后提供eGFR_CKD-EPI大于-1.0mL/min/1.73m²的平均年变化率。

51.一种降低患有经典法布里病的患者的左心室质量(LVM)的方法，所述方法包括以每隔一天一次的频率向所述患者施用有效量的米加司他或其盐以降低所述患者的LVM，其中所述有效量为约100mg至约150mg游离碱当量(FBE)。

52.如权利要求51所述的方法，其中在开始施用所述米加司他或其盐之前，所述患者具有左心室肥大(LVH)。

53.如权利要求51或52所述的方法，其中降低LVM包括降低左心室质量指数(LVMi)。

54.如权利要求51-53中任一项所述的方法，其中所述患者在α-Gal A中具有选自由I253T、P259R、G183D、L243F、C174R、D55V/Q57L、G144V、R301Q、G373S、D322E、G325R和Y216C组成的组的突变。

55.如权利要求51-54中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐增强α-半乳糖苷酶A活性。

56.如权利要求51-55中任一项所述的方法，其中所述有效量为约123mg FBE。

57.如权利要求51-56中任一项所述的方法，其中所述有效量为约123mg的米加司他游离碱。

58.如权利要求51-56中任一项所述的方法，其中米加司他的所述盐是米加司他盐酸盐。

59.如权利要求58所述的方法，其中所述有效量为约150mg的米加司他盐酸盐。

60.如权利要求51-59中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐呈口服剂型。

61.如权利要求60所述的方法，其中所述口服剂型包含片剂、胶囊或溶液。

62.如权利要求51-61中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐施用至少6个月。

63.如权利要求51-62中任一项所述的方法，其中向一组经典法布里患者施用所述米加司他或其盐在施用所述米加司他或其盐24个月后提供LVMi至少约5g/m²的平均降低。

64.一种在有需要的患者中治疗经典法布里病的方法，所述方法包括以每隔一天一次的频率向所述患者施用有效量的米加司他或其盐，其中所述有效量为约100mg至约150mg游离碱当量(FBE)，并且其中施用所述米加司他或其盐降低所述患者的左心室质量(LVM)。

65.如权利要求64所述的方法，其中在开始施用所述米加司他或其盐之前，所述患者具有左心室肥大(LVH)。

66.如权利要求64或65所述的方法，其中降低LVM包括降低左心室质量指数(LVMi)。

67.如权利要求64-66中任一项所述的方法，其中所述患者在α-Gal A中具有选自由I253T、P259R、G183D、L243F、C174R、D55V/Q57L、G144V、R301Q、G373S、D322E、G325R和Y216C组成的组的突变。

68.如权利要求64-67中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐增强α-半乳糖苷酶A活性。

69.如权利要求64-68中任一项所述的方法，其中所述有效量为约123mg FBE。

70.如权利要求64-69中任一项所述的方法，其中所述有效量为约123mg的米加司他游离碱。

71.如权利要求64-69中任一项所述的方法，其中米加司他的所述盐是米加司他盐酸盐。

72.如权利要求71所述的方法，其中所述有效量为约150mg的米加司他盐酸盐。

73.如权利要求64-72中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐呈口服剂型。

74.如权利要求73所述的方法，其中所述口服剂型包含片剂、胶囊或溶液。

75.如权利要求64-74中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐施用至少6个月。

76.如权利要求64-75中任一项所述的方法，其中向一组经典法布里患者施用所述米加司他或其盐在施用所述米加司他或其盐24个月后提供LVMi至少约5g/m²的平均降低。

77.一种降低患有经典法布里病的患者的血浆球丙糖酰基鞘氨醇(溶血-Gb₃)的方法，所述方法包括以每隔一天一次的频率向所述患者施用有效量的米加司他或其盐以降低所述患者的血浆溶血-Gb₃，其中所述有效量为约100mg至约150mg游离碱当量(FBE)。

78.如权利要求77所述的方法，其中在开始施用所述米加司他或其盐之前，所述患者具有升高的血浆溶血-Gb3。

79.如权利要求77或78所述的方法，其中所述患者在α-Gal A中具有选自由I253T、P259R、G183D、L243F、C174R、D55V/Q57L、G144V、R301Q、G373S、D322E、G325R和Y216C组成的组的突变。

80.如权利要求77-79中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐增强α-半乳糖苷酶A活性。

81.如权利要求77-80中任一项所述的方法，其中所述有效量为约123mg FBE。

82.如权利要求77-81中任一项所述的方法，其中所述有效量为约123mg的米加司他游离碱。

83.如权利要求77-81中任一项所述的方法，其中米加司他的所述盐是米加司他盐酸盐。

84.如权利要求83所述的方法，其中所述有效量为约150mg的米加司他盐酸盐。

85.如权利要求77-84中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐呈口服剂型。

86.如权利要求85所述的方法，其中所述口服剂型包含片剂、胶囊或溶液。

87.如权利要求77-86中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐施用至少6个月。

88.如权利要求77-87中任一项所述的方法，其中向一组经典法布里患者施用所述米加司他或其盐在施用所述米加司他或其盐24个月后提供血浆溶血-Gb₃至少约15nmol/L的平均降低。

89.一种在有需要的患者中治疗经典法布里病的方法，所述方法包括以每隔一天一次的频率向所述患者施用有效量的米加司他或其盐，其中所述有效量为约100mg至约150mg游离碱当量(FBE)，并且其中施用所述米加司他或其盐降低所述患者的血浆球丙糖酰基鞘氨醇(溶血-Gb₃)。

90.如权利要求89所述的方法，其中在开始施用所述米加司他或其盐之前，所述患者具有升高的血浆溶血-Gb3。

91.如权利要求89或90所述的方法，其中所述患者在α-Gal A中具有选自由I253T、P259R、G183D、L243F、C174R、D55V/Q57L、G144V、R301Q、G373S、D322E、G325R和Y216C组成的组的突变。

92.如权利要求89-91中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐增强α-半乳糖苷酶A活性。

93.如权利要求89-92中任一项所述的方法，其中所述有效量为约123mg FBE。

94.如权利要求89-93中任一项所述的方法，其中所述有效量为约123mg的米加司他游离碱。

95.如权利要求89-93中任一项所述的方法，其中米加司他的所述盐是米加司他盐酸盐。

96.如权利要求95所述的方法，其中所述有效量为约150mg的米加司他盐酸盐。

97.如权利要求89-96中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐呈口服剂型。

98.如权利要求97所述的方法，其中所述口服剂型包含片剂、胶囊或溶液。

99.如权利要求89-98中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐施用至少6个月。

100.如权利要求89-99中任一项所述的方法，其中向一组经典法布里患者施用所述米加司他或其盐在施用所述米加司他或其盐24个月后提供血浆溶血-Gb₃至少约15nmol/L的平均降低。

101.一种在患有经典法布里病的患者中治疗胃肠道症状的方法，所述方法包括以每隔一天一次的频率向所述患者施用有效量的米加司他或其盐以治疗所述胃肠道症状，其中所述有效量为约100mg至约150mg游离碱当量(FBE)。

102.如权利要求101所述的方法，其中在开始施用所述米加司他或其盐之前，所述患者具有腹泻。

103.如权利要求101或102所述的方法，其中治疗所述患者的一种或多种胃肠道症状包括减轻腹泻症状。

104.如权利要求101-103中任一项所述的方法，其中所述患者在α-半乳糖苷酶A中具有选自由I253T、P259R、G183D、L243F、C174R、D55V/Q57L、G144V、R301Q、G373S、D322E、G325R和Y216C组成的组的突变。

105.如权利要求101-104中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐增强α-半乳糖苷酶A活性。

106.如权利要求101-105中任一项所述的方法，其中所述有效量为约123mg FBE。

107.如权利要求101-106中任一项所述的方法，其中所述有效量为约123mg的米加司他游离碱。

108.如权利要求101-106中任一项所述的方法，其中米加司他的所述盐是米加司他盐酸盐。

109.如权利要求108所述的方法，其中所述有效量为约150mg的米加司他盐酸盐。

110.如权利要求101-109中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐呈口服剂型。

111.如权利要求110所述的方法，其中所述口服剂型包含片剂、胶囊或溶液。

112.如权利要求101-111中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐施用至少6个月。

113.如权利要求101-112中任一项所述的方法，其中向一组经典法布里患者施用所述米加司他或其盐在施用所述米加司他或其盐24个月后提供胃肠道腹泻症状评定量表(GSRS-D)至少约0.5的平均降低。

114.一种在有需要的患者中治疗经典法布里病的方法，所述方法包括以每隔一天一次的频率向所述患者施用有效量的米加司他或其盐，其中所述有效量为约100mg至约150mg游离碱当量(FBE)，并且其中施用所述米加司他或其盐治疗所述患者的一种或多种胃肠道症状。

115.如权利要求114所述的方法，其中在开始施用所述米加司他或其盐之前，所述患者具有腹泻。

116.如权利要求114或115所述的方法，其中治疗所述患者的一种或多种胃肠道症状包括减轻腹泻症状。

117.如权利要求114-116中任一项所述的方法，其中所述患者在α-半乳糖苷酶A中具有选自由I253T、P259R、G183D、L243F、C174R、D55V/Q57L、G144V、R301Q、G373S、D322E、G325R和Y216C组成的组的突变。

118.如权利要求114-117中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐增强α-半乳糖苷酶A活性。

119.如权利要求114-118中任一项所述的方法，其中所述有效量为约123mg FBE。

120.如权利要求114-119中任一项所述的方法，其中所述有效量为约123mg的米加司他游离碱。

121.如权利要求114-119中任一项所述的方法，其中米加司他的所述盐是米加司他盐酸盐。

122.如权利要求121所述的方法，其中所述有效量为约150mg的米加司他盐酸盐。

123.如权利要求114-122中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐呈口服剂型。

124.如权利要求123所述的方法，其中所述口服剂型包含片剂、胶囊或溶液。

125.如权利要求114-124中任一项所述的方法，其中所述米加司他或其盐施用至少6个月。

126.如权利要求114-125中任一项所述的方法，其中向一组经典法布里患者施用所述米加司他或其盐在施用所述米加司他或其盐24个月后提供胃肠道腹泻症状评定量表(GSRS-D)至少约0.5的平均降低。