CN112175857A - 植物乳酸菌固体菌剂及其制备方法和应用 - Google Patents

植物乳酸菌固体菌剂及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及微生物发酵饲料领域，具体涉及植物乳酸菌固体菌剂及其制备方法和应用。该方法包括：(1)将植物乳酸菌的菌种接种到第一固体发酵培养基中进行第一发酵培养，得到第一发酵物料；(2)将所述第一发酵物料接种到第二固体发酵培养基中进行第二发酵培养，得到第二发酵物料；其中，所述第一固体发酵培养基含有淀粉质原料粉碎产物和淀粉渣；所述第二固体发酵培养基含有DDGS、DDS、淀粉质原料皮和钙源。通过上述技术方案，在特定的发酵培养基中对植物乳酸菌进行二次发酵，显著提高了菌种的代谢能力，从而使得最终获得的发酵产物中乳酸含量菌体数量得到了大大地提高，也即，改善了发酵效果。

Description

植物乳酸菌固体菌剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及微生物发酵饲料领域，具体涉及植物乳酸菌固体菌剂及其制备方法和应用。
背景技术
微生物发酵饲料具有天然发酵香味，良好的诱食效果。植物乳酸菌，例如植物乳杆菌是人和动物肠道内主要的益生菌群，具有很多保健作用，维持肠道内菌群平衡、免疫调节和促进营养物质吸收等多种功能；对致病菌有一定的抑制作用，改善肠道微环境；缓解乳糖不耐症。另外，植物乳酸菌为消化道内正常存在的一类微生物，在肠黏膜具有较强的耐受和定植能力。
随着发酵饲料应用范围的普及，发酵饲料产量的提升迫在眉睫，固体发酵具有操作简便、能耗低、发酵过程容易控制、对无菌要求相对较低、不易发生大面积的污染等优点，能解决设备、技术、人力等方向的限制，是稳定和提升产品质量和提高产量的重要因素。
在植物乳酸菌的固体发酵中，通常是将植物乳酸菌的菌种接种到固体培养基中进行发酵培养，但目前的固体发酵方法存在菌种代谢不旺盛的问题，从而导致代谢产物乳酸含量低，菌体数量低，发酵效果差。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有技术存在的上述问题，提供一种能够提高代谢产物乳酸含量和菌体数量的植物乳酸菌固体菌剂的制备方法，以及该方法制备得到的植物乳酸菌固体菌剂和应用。
为了实现上述目的，本发明一方面提供一种植物乳酸菌固体菌剂的制备方法，该方法包括：
(1)将植物乳酸菌的菌种接种到第一固体发酵培养基中进行第一发酵培养，得到第一发酵物料；
(2)将所述第一发酵物料接种到第二固体发酵培养基中进行第二发酵培养，得到第二发酵物料；
其中，所述第一固体发酵培养基含有淀粉质原料粉碎产物和淀粉渣；
所述第二固体发酵培养基含有DDGS、DDS、淀粉质原料皮和钙源。
本发明第二方面提供如上所述的方法制备的植物乳酸菌固体菌剂。
本发明第三方面提供如上所述的植物乳酸菌的固体菌剂在动物饲料中的应用。
通过上述技术方案，在特定的发酵培养基中对植物乳酸菌进行二次发酵，显著提高了菌种的代谢能力，从而使得最终获得的发酵产物中乳酸含量和菌体数量得到了大大地提高，也即，改善了发酵效果。
具体实施方式
在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。
在本发明中，术语“淀粉质原料粉碎产物”是指淀粉质原料直接粉碎得到的产物，比如含淀粉的种子或根茎粉碎后的产物。例如，玉米粉是指将玉米种粒直接粉碎得到的产物，红薯粉是指将红薯块茎直接粉碎得到的产物。
在本发明中，术语“淀粉渣”是指淀粉质原料生产淀粉过程中得到的副产品或下脚料。例如，玉米渣是指玉米淀粉生产过程中得到的副产品或下脚料。
在本发明中，术语“淀粉质原料皮”是指淀粉质原料的种皮部分。具体的，以玉米皮为例，玉米皮的制备方法为玉米经过浸泡、破碎后分离出来的玉米皮。
在本发明中，术语“喷浆玉米皮”是指将玉米的浸泡液喷到玉米皮上的产物，所以叫喷浆玉米皮。喷浆玉米皮又称玉米麸或玉米蛋白饲料，玉米皮是用玉米加湿后生产淀粉及胚芽后的副产品，再将其中蛋白质、能量高的玉米浆(玉米的浸泡液)喷上去使蛋白质、能量、氨基酸含量大大增加，本产品外观为黄色。
在本发明中，DDGS是指玉米干酒糟及其可溶物，是玉米谷物加工业的副产品.是玉米谷物提取酒精和油后的植物蛋白质饲料。DDGS是将玉米酒精废液固液分离后的滤渣和蒸发浓缩后的滤液经混合干燥而制成的饲料，其中，玉米酒精废液固液分离后的滤渣为DDG，蒸发浓缩后的滤液为DDS。
第一方面，本发明提供了一种植物乳酸菌固体菌剂的制备方法，该方法包括：
(1)将植物乳酸菌的菌种接种到第一固体发酵培养基中进行第一发酵培养，得到第一发酵物料；
(2)将所述第一发酵物料接种到第二固体发酵培养基中进行第二发酵培养，得到第二发酵物料；
其中，所述第一固体发酵培养基含有淀粉质原料粉碎产物和淀粉渣；
所述第二固体发酵培养基含有DDGS、DDS、淀粉质原料皮和钙源。
根据本发明，尽管将植物乳酸菌的菌种接种到如上特定的固体发酵培养基中进行二级培养，即可提高最终制备的固体菌剂中的乳酸含量和菌体密度，而对于培养基中各组分的含量并没有特别的限制。
优选的，相对于100重量份的所述第一固体发酵培养基，所述淀粉质原料粉碎产物的含量为25-35重量份(例如，25重量份、26重量份、27重量份、28重量份、29重量份、30重量份、31重量份、32重量份、33重量份、34重量份、35重量份)，所述淀粉渣的含量为25-35重量份(例如，25重量份、26重量份、27重量份、28重量份、29重量份、30重量份、31重量份、32重量份、33重量份、34重量份、35重量份)，余量为水。
根据本发明，所述淀粉质原料粉碎产物的来源不受特别的限制，可以为将本领域公知的各种淀粉质原料粉碎后获得所述淀粉质原料粉碎产物，例如，可以为但不限于水稻、小麦、大麦、玉米、红薯、马铃薯及它们的组合中的一种或多种，优选为玉米。
根据本发明，用于制备所述淀粉渣的原料的来源不受特别的限制，可以为本领域公知的各种淀粉质原料生产淀粉过程中得到的副产品或下脚料，例如，可以为但不限于水稻、小麦、大麦、玉米、红薯、马铃薯及它们的组合中的一种或多种，优选为玉米。
优选的，相对于100重量份的所述第二固体发酵培养基，所述DDGS的含量为4-10重量份(4重量份、5重量份、6重量份、7重量份、8重量份、9重量份、10重量份)，所述DDS的含量为28-40重量份(28重量份、29重量份、30重量份、31重量份、32重量份、33重量份、34重量份、35重量份、36重量份、37重量份、38重量份、39重量份、40重量份)，所述淀粉质原料皮的含量为40-52重量份(40重量份、41重量份、42重量份、43重量份、44重量份、45重量份、46重量份、47重量份、48重量份、49重量份、50重量份)，所述钙源的含量为1-1.7重量份(1重量份、1.1重量份、1.2重量份、1.3重量份、1.4重量份、1.5重量份、1.6重量份、1.7重量份1)，余量为水。
根据本发明，所述淀粉质原料皮可以为将本领域公知的各种淀粉质原料脱皮后获得的外皮，所述外皮可以为种子的外皮，也即种皮，也可以为块根或块茎的外皮，所述例如，淀粉质原料皮可以为水稻种皮、小麦皮、大麦皮、玉米皮、红薯皮、马铃薯皮及它们的组合中的一种或多种，优选为玉米皮，进一步优选为喷浆玉米皮。在优选喷浆玉米皮的情况下，最终所获得发酵产物中乳酸的含量和菌体密度能够得到进一步提高。
根据本发明，所述钙源可以为乳酸菌培养过程中常规使用的各种钙源，例如，可以为但不限于氢氧化钙、碳酸钙和碳酸氢钙中的一种或多种，优选为氢氧化钙。
根据本发明，第一固体发酵培养基和/或第二固体发酵培养基的pH值可以为本领域公知的用于植物乳酸菌培养的pH值，例如，第一固体发酵培养基的pH值可以为4.5-6.5，和/或第二固体发酵培养基的pH值可以为4.5-6.5。然而本发明的发明人在研究的过程中进一步发现，当第一固体发酵培养基的pH值大于第二固体发酵培养基的pH值，且将第一固体发酵培养基的pH值调节至6-6.5(例如，6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5)，而第二固体发酵培养基的pH值调节至5-6(例如，5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0)时，能够进一步提高发酵产物中乳酸含量和菌体数量。需要说明的是，各培养基的pH值均是指未灭菌之前的pH值。
根据本发明，进行第一发酵培养的条件可以为植物乳酸菌常规的培养条件，例如，其可以为厌氧或兼性厌氧培养，培养的温度可以为30-40℃，优选为30-35℃，时间为2-3天。所述厌氧或兼性厌氧的环境可以通过本领域常规的技术手段获得，例如，充氮气、密封等方法。
根据本发明，进行第二发酵培养的条件可以为植物乳酸菌常规的培养条件，例如，其可以为厌氧或兼性厌氧培养，培养的温度可以为30-40℃，优选为30-35℃，时间为3-6天。所述厌氧或兼性厌氧的环境可以通过本领域常规的技术手段获得，例如，充氮气、密封等方法。
根据本发明，所述植物乳酸菌在第一固体发酵培养基中的接种量不受特别的限制，可以在较宽的范围内进行变化。优选的，相对于100重量份的第一固体发酵培养基，所述植物乳酸菌的菌种的接种量为1×109-1×1011cfu。
根据本发明，所述第一发酵物料在第二固体培养基中的接种量不受特别的限制，可以在较宽的范围内进行变化。优选的，相对于100重量份的第二固体发酵培养基，所述第一发酵物料的接种量为20-30重量份。
本发明的发明人在研究中发现，在第一固体发酵培养基中接种植物乳酸菌的同时接种酵母菌和/或枯草芽孢杆菌，不仅能够提供植物乳酸菌生长的厌氧环境，丰富最终发酵产物的有益菌群，还能够进一步提高终产品中植物乳酸菌的菌体密度和乳酸含量。
优选的，所述酵母菌为酿酒酵母。
其中，所述酵母菌可以直接以干酵母的形式接种，也可以在接种所述酵母菌之前对其进行简单的活化，例如，将干酵母用5倍以上2重量％的糖水活化，活化温度可以为30-35℃，时间可以为15-30分钟。本发明对所述酵母菌的接种量并没有特别的限制，例如，以干酵母计，基于100g的第一固体发酵培养基，酵母菌的接种量为0.01-0.03g。
其中，所述枯草芽孢杆菌可以以其干菌剂的形式直接接种，也可以在接种所述枯草芽孢杆菌之前对其进行简单的活化，例如，将枯草芽孢杆菌用5倍以上2重量％的糖水活化，活化温度可以为30-35℃，时间可以为15-30分钟。本发明对所述枯草芽孢杆菌的接种量并没有特别的限制，例如，以活化的枯草芽孢杆菌干菌剂计，基于100g的第一固体发酵培养基，枯草芽孢杆菌的接种量为0.05-0.2g。
根据本发明，所述植物乳酸菌的菌种优选为将植物乳酸菌的种子接种到扩培培养基中进行扩培后得到的种子液；其中，所述扩培培养基可以为本领域公知的各种用于乳酸菌培养的培养基，例如，可以为MRS肉汤培养基。根据本发明一种优选的实施方式，相对于每升所述扩培培养基，其含有30-50g的葡萄糖、20-40g的酵母粉、0.1-0.3g的硫酸镁、1-10g的醋酸钠、1-3g的柠檬酸铵、1-3g的磷酸氢二钾、0.03-0.08g的硫酸锰、0.5-1.5ml吐温、10-20g碳酸钙、15-25g淀粉，pH值为7-7.5，将在该优选的扩培培养基中对植物乳酸菌进行培养获得的种子液接种到所述第一固体发酵培养基中进行发酵后得到的最终物料中，植物乳酸菌的菌体密度和乳酸含量能够得到进一步提高。
其中，所述扩培的条件可以包括：温度为35-40℃，时间为17-19h。
根据本发明，优选的，在将植物乳酸菌的种子接种到所述扩培培养基中之前，还包括将植物乳酸菌进行活化的步骤，所述活化的方法为本领域技术人员所公知，例如，在摇瓶中进行1-3级活化培养。所述活化用的培养基可以为本领域公知的各种用于乳酸菌培养的培养基，例如，可以为MRS肉汤培养基。所述活化的条件可以包括：温度30-35℃，时间12-16h。
根据本发明，所述方法还可以包括对第二发酵物料进行干燥处理，所述干燥处理可采用本领域常规的技术手段。优选地，所述干燥的温度为35-45℃，优选为38-42℃；所述干燥的时间为1-30min，优选为10-20min。可以对发酵产物进行单次或多次干燥处理，便于发酵产物的粉碎。此外，也可以对第二发酵物料进行冷冻干燥处理。
根据本发明，所述方法还可以包括对干燥后的第二发酵物料进行粉碎处理，所述粉碎处理可采用本领域常规的技术手段，例如可以用固体粉碎机进行粉碎。可以根据需要，对发酵产物进行单次或多次粉碎处理。
根据本发明，所述植物乳酸菌优选为植物乳杆菌，所述植物乳杆菌可以为本领域常用的各种植物乳杆菌，可以通过商购获得，例如，可以为来自于中粮营养健康学院菌种保藏中心的植物乳杆菌(编号为BC00171)。
第二方面，本发明提供了如上所述的方法制备的植物乳酸菌固体菌剂。
第三方面，本发明还提供了如上所述的植物乳酸菌的固体菌剂在动物饲料中的应用。
以下将通过实施例对本发明进行详细描述。以下实施例中，
以下结合具体实施例对本文进行详细描述。本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
下述实施例中使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂和设备等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
以下实施例和对比例中所涉及的菌种：
植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum CGMCC 15013，中国普通微生物菌种保藏管理中心)；
酿酒酵母购自安琪酵母股份有限公司，产品标准代号：Q/YB2048S，规格：5千克×2；
枯草芽孢杆菌购自朝阳华星生物工程有限公司，规格：20KG/袋；
植物乳杆菌的活菌数的检测方法：依据DB37/T 3405-2018动物微生物饲料添加剂中植物乳杆菌的检测；
乳酸含量使用安捷伦1200液相色谱仪进行检测：
仪器参数：
色谱柱：Aminex HPX-87H,300x 7.8mm
流动相:0.005M H2SO4
温度:25℃
流速：0.6mL/min
进样量：10μL
检测器：DAD波长：210nm
分析时间：25min。
制备例1
本制备例用于说明植物乳酸菌的菌种的制备
按照表1中的培养基和条件进行植物乳酸菌的活化和扩培培养，以扩培罐获得发酵液作为接种液。
表1
Figure BDA0002120877480000091
制备例2
本制备例用于说明酿酒酵母菌剂的活化
将酵母菌剂用7倍的2重量％的葡萄糖水溶液，在30-35℃活化15-30分钟，即得到活化酵母菌
制备例3
本制备例用于说明枯草芽孢杆菌菌剂的活化
将枯草芽孢菌剂用7倍的2重量％的葡萄糖水溶液，在30-35℃条件下活化15-30分钟，即得到活化枯草芽孢杆菌。
实施例1
本实施例用于说明本发明提供的植物乳杆菌的固体发酵方法
(1)将30g玉米粉、30g玉米淀粉渣和40g水混合均匀，调节pH值为6.3，121℃湿热灭菌15min，得到第一固体发酵培养基。然后接种制备例1制备的植物乳杆菌的接种液、制备例2的活化酵母菌和制备例3的活化枯草芽孢杆菌(比例按0.1ml/100g：0.02g/100g：0.1g/100g)。32℃发酵2天，得到第一发酵物料；其中，酵母菌的接种量以未活化的干酵母计，枯草芽孢杆菌的接种量以未活化的枯草芽孢杆菌计。
(2)将10g的DDGS、36g的DDS、52g喷浆玉米皮、1.4g氢氧化钙和0.6g水混合均匀，调节pH值为5.5，121℃湿热灭菌15min，得到第二固体发酵培养基。然后接种步骤(1)制备的第一发酵物料，接种量30重量％。32℃发酵4天，得到第二发酵物料。
检测第二发酵物料中植物乳杆菌以及乳酸含量，结果见表2。
实施例2
本实施例用于说明本发明提供的植物乳杆菌的固体发酵方法
(1)将25g玉米粉、35g玉米淀粉渣和40g水混合均匀，调节pH值为6.1，121℃湿热灭菌15min，得到第一固体发酵培养基。然后接种制备例1制备的植物乳杆菌的接种液、制备例2的活化酵母菌和制备例3的活化枯草芽孢杆菌(比例按0.1ml/100g：0.02g/100g：0.1g/100g)。35℃发酵2天，得到第一发酵物料；其中，酵母菌的接种量以未活化的干酵母计，枯草芽孢杆菌的接种量以未活化的枯草芽孢杆菌计。
(2)将4g的DDGS、32g的DDS、40g喷浆玉米皮、1.0g氢氧化钙和23g水混合均匀，调节pH值为5.0，121℃湿热灭菌15min，得到第二固体发酵培养基。然后接种步骤(1)制备的第一发酵物料，接种量20重量％。35℃发酵4天，得到第二发酵物料。
检测第二发酵物料中植物乳杆菌以及乳酸含量，结果见表2。
实施例3
本实施例用于说明本发明提供的植物乳杆菌的固体发酵方法
(1)将35g玉米粉、25g玉米淀粉渣和40g水混合均匀，调节pH值为6.5，121℃湿热灭菌15min，得到第一固体发酵培养基。然后接种制备例1制备的植物乳杆菌的接种液、制备例2的活化酵母菌和制备例3的活化枯草芽孢杆菌(比例按0.1ml/100g：0.02g/100g：0.1g/100g)。30℃发酵2天，得到第一发酵物料；其中，酵母菌的接种量以未活化的干酵母计，枯草芽孢杆菌的接种量以未活化的枯草芽孢杆菌计。
(2)将7g的DDGS、28g的DDS、45g喷浆玉米皮、1.7g氢氧化钙和18.3g水混合均匀，调节pH值为6.0，121℃湿热灭菌15min，得到第二固体发酵培养基。然后接种步骤(1)制备的第一发酵物料，接种量25重量％。30℃发酵4天，得到第二发酵物料。
检测第二发酵物料中植物乳杆菌以及乳酸含量，结果见表2。
实施例4
本实施例用于说明本发明提供的植物乳杆菌的固体发酵方法
按照实施例1的固体发酵方法进行植物乳杆菌的固体发酵，不同的是，第一固体发酵培养基和第二固体发酵培养基的pH值均为5.5。
检测第二发酵物料中植物乳杆菌以及乳酸含量，结果见表2。
实施例5
本实施例用于说明本发明提供的植物乳杆菌的固体发酵方法
按照实施例1的固体发酵方法进行植物乳杆菌的固体发酵，不同的是，第一固体发酵培养基含有20g的红薯粉、30g的红薯淀粉渣和40g水。
第二固体发酵培养基含有10g的DDGS、36g的DDS、52g小麦皮、1.4g氢氧化钙和0.6g水。
检测第二发酵物料中植物乳杆菌以及乳酸含量，结果见表2。
实施例6
本实施例用于说明本发明提供的植物乳杆菌的固体发酵方法
按照实施例1的固体发酵方法进行植物乳杆菌的固体发酵，不同的是，将第二固体发酵培养基中的喷浆玉米皮替换为等量的玉米皮。
检测第二发酵物料中植物乳杆菌以及乳酸含量，结果见表2。
实施例7
本实施例用于说明本发明提供的植物乳杆菌的固体发酵方法
按照实施例1的固体发酵方法进行植物乳杆菌的固体发酵，不同的是，使用MRS肉汤培养基(也即一级摇瓶和二级摇瓶培养所用的培养基)替代扩培培养基进行接种液的制备。
检测第二发酵物料中植物乳杆菌以及乳酸含量，结果见表2。
实施例8
本实施例用于说明本发明提供的植物乳杆菌的固体发酵方法
按照实施例1的固体发酵方法进行植物乳杆菌的固体发酵，不同的是，不接种酵母菌和枯草芽孢杆菌。
检测第二发酵物料中植物乳杆菌以及乳酸含量，结果见表2。
对比例1
本对比例用于说明参比的植物乳杆菌的固体发酵方法
将30g玉米粉、30g玉米淀粉渣、10g的DDGS、36g的DDS、52g喷浆玉米皮、1.4g氢氧化钙和40g水混合均匀，调节pH值为5.5，121℃湿热灭菌15min，得到固体发酵培养基。然后接种制备例1制备的植物乳杆菌的接种液、制备例2的活化酵母菌和制备例3的活化枯草芽孢杆菌(比例按0.1ml/100g：0.02g/100g：0.1g/100g)。32℃发酵6天后得到发酵物料。其中，酵母菌的接种量以未活化的干酵母计，枯草芽孢杆菌的接种量以未活化的枯草芽孢杆菌计。
检测第二发酵物料中植物乳杆菌以及乳酸含量，结果见表2。
对比例2
本对比例用于说明参比的植物乳杆菌的固体发酵方法
按照实施例1的固体发酵方法进行植物乳杆菌的固体发酵，不同的是，将第一固体发酵培养基和第二固体发酵培养基互换。
检测第二发酵物料中植物乳杆菌以及乳酸含量，结果见表2。
对比例3
本对比例用于说明参比的植物乳杆菌的固体发酵方法
按照实施例1的固体发酵方法进行植物乳杆菌的固体发酵，不同的是，将DDS替换为等量的DDGS。
检测第二发酵物料中植物乳杆菌以及乳酸含量，结果见表2。
对比例4
本对比例用于说明参比的植物乳杆菌的固体发酵方法
按照实施例1的固体发酵方法进行植物乳杆菌的固体发酵，不同的是，将DDGS替换为等量的DDS。
检测第二发酵物料中植物乳杆菌以及乳酸含量，结果见表2。
对比例5
本对比例用于说明参比的植物乳杆菌的固体发酵方法
按照实施例1的固体发酵方法进行植物乳杆菌的固体发酵，不同的是，不使用喷浆玉米皮，并将DDGS的用量调整到36g，DDS的用量调整到62g。
检测第二发酵物料中植物乳杆菌以及乳酸含量，结果见表2。
表2
Figure BDA0002120877480000141
Figure BDA0002120877480000151
通过表1的结果可以看出，相对于对比例，采用本发明的技术方案的实施例能够有效地提高终产品中植物乳酸菌的菌体密度和乳酸含量。并且在优选的分步调节pH、优选的原料选择、以及使用特定的培养基进行扩配以及优选结合酵母菌和枯草芽孢杆菌共同接种的情况下，终产品中植物乳酸菌的菌体密度和乳酸含量能够得到进一步提高。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于此。在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，包括各个技术特征以任何其它的合适方式进行组合，这些简单变型和组合同样应当视为本发明所公开的内容，均属于本发明的保护范围。

Claims (11)

1.一种植物乳酸菌固体菌剂的制备方法，其特征在于，该方法包括：
(1)将植物乳酸菌的菌种接种到第一固体发酵培养基中进行第一发酵培养，得到第一发酵物料；
(2)将所述第一发酵物料接种到第二固体发酵培养基中进行第二发酵培养，得到第二发酵物料；
其中，所述第一固体发酵培养基含有淀粉质原料粉碎产物和淀粉渣；
所述第二固体发酵培养基含有DDGS、DDS、淀粉质原料皮和钙源。
2.根据权利要1所述的方法，其中，相对于100重量份的所述第一固体发酵培养基，所述淀粉质原料粉碎产物的含量为25-35重量份，所述淀粉渣的含量为25-35重量份，余量为水；
优选的，所述淀粉质原料选自水稻、小麦、大麦、玉米、红薯、马铃薯及它们的组合中的一种或多种，优选为玉米；
优选的，用于制备所述淀粉渣的原料选自水稻、小麦、大麦、玉米、红薯、马铃薯及它们的组合中的一种或多种，优选为玉米。
3.根据权利要1所述的方法，其中，相对于100重量份的所述第二固体发酵培养基，所述DDGS的含量为4-10重量份，所述DDS的含量为28-40重量份，所述淀粉质原料皮的含量为40-52重量份，所述钙源的含量为1-1.7重量份，余量为水；
优选的，所述淀粉质原料皮选自水稻种皮、小麦皮、大麦皮、玉米皮、红薯皮、马铃薯皮及它们的组合中的一种或多种，优选为玉米皮，进一步优选为喷浆玉米皮；
优选的，所述钙源选自氢氧化钙、碳酸钙和碳酸氢钙中的一种或多种。
4.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中，第一固体发酵培养基的pH值大于第二固体发酵培养基的pH值；
且所述第一固体发酵培养基的pH值为6-6.5；所述第二固体发酵培养基的pH值为5-6。
5.根据权利要求1-4中任意一项所述的方法，其中，所述第一发酵培养的条件包括：温度为30-40℃，时间为2-3天；和/或
所述第二发酵培养的条件包括：温度为30-40℃，时间为3-6天。
6.根据权利要求1-5中任意一项所述的方法，其中，相对于100重量份的第一固体发酵培养基，所述植物乳酸菌的菌种的接种量为1×109-1×1011cfu；和/或
相对于100重量份的第二固体发酵培养基，所述第一发酵物料的接种量为20-30重量份。
7.根据权利要求1所述的方法，其中，该方法还包括向所述第一发酵培养基中接种酵母菌和/或枯草芽孢杆菌。
8.根据权利要求1所述的方法，其中，所述植物乳酸菌的菌种为将植物乳酸菌的种子接种到扩培培养基中进行扩培后得到的种子液；
其中，相对于每升所述扩培培养基，其含有30-50g的葡萄糖、20-40g的酵母粉、0.1-0.3g的硫酸镁、1-10g的醋酸钠、1-3g的柠檬酸铵、1-3g的磷酸氢二钾、0.03-0.08g的硫酸锰、0.5-1.5ml吐温、10-20g碳酸钙、15-25g淀粉，pH值为7-7.5；
优选的，所述扩培的条件包括：温度为35-40℃，时间为17-19h。
9.根据权利要求1-8中任意一项所述的方法，其中，该方法还包括对第二发酵物料进行干燥和粉碎。
10.权利要求1-9中任意一项所述的方法制备的植物乳酸菌固体菌剂。
11.权利要求10所述的植物乳酸菌的固体菌剂在动物饲料中的应用。
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