CN112168727A - 一种含有灵芝子实体孢子粉发酵液的精华及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种含有灵芝子实体孢子粉发酵液的精华，按照重量份，包括水19.5‑73.4份、甘油1‑10份、小核菌胶0.1‑5份和对羟基苯乙酮0.1‑1.5份、子实体孢子粉发酵液20‑40份、工业大麻叶提取物5‑10份、南极洲丛梗藻提取物0.1‑5份、聚谷氨酸钠0.1‑3份、皱波角叉菜提取物0.1‑5份和苯氧乙醇0.1‑1份。本发明制备的精华添加了灵芝子实体孢子粉发酵液，通过复配舒缓功效的工业大麻叶提取物、南极洲丛梗藻提取物，各原料中的活性物质能更好的溶解并且稳定存在于精华配方中，能够起到舒缓肌肤，增加皮肤弹性，保持皮肤年轻态的作用。

Description

一种含有灵芝子实体孢子粉发酵液的精华及其制备方法
技术领域
本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种含有灵芝子实体孢子粉发酵液的精华及其制备方法。
背景技术
灵芝又称林中灵，外形呈伞状，菌盖肾形、半圆形或近圆形，为多孔菌科真菌灵芝的子实体。灵芝久负盛名，具有滋补强体、固本扶正、养颜安神的功效，不同于一般营养保健食品只对某一方面营养素的不足进行补充和强化，而是在整体上双向调节人体机能平衡，调动机体内部活力，调节人体新陈代谢机能，提高免疫力。
灵芝孢子粉是灵芝成熟是所释放的孢子，是灵芝有性生殖细胞，又称担孢子。灵芝孢子粉在保健品中应用很广泛，其水提物也和灵芝子实体一样含有多糖、蛋白质、多肽，但其成分结构和含量有所区别，灵芝子实体和孢子粉成分进行分析对比，结果表明，孢子粉的蛋白含量约是子实体的两倍，脂肪含量孢子粉是子实体的五倍，但多糖含量子实体更高。灵芝孢子壁具有双层细胞壁，结实坚硬，不破壁的孢子粉只有10％～20％有效成分被人体吸收。研究发现，灵芝孢子粉具有提高机体免疫力、清除自由基抗衰老的作用。
皮肤敏感许多皮肤问题中很重要的其中一个问题，由于空气污染，现代人作息时间不规律等原因，越来越多人出现了皮肤敏感的问题，针对皮肤敏感设计的舒缓类化妆品也越来越火热。同时，水嫩有弹性的年轻肌肤是所有爱美人士的追求，具有抗衰老功效的护肤品一直受到追捧。因此，兼具舒缓和抗衰老功效的面部精华具有广阔市场。目前还没有公开利用灵芝子实体和孢子粉发酵液应用在精华上。
鉴于以上原因，特提出本发明。
发明内容
为了解决现有技术存在的以上问题，本发明提供了一种含有灵芝子实体孢子粉发酵液的精华及其制备方法，本发明的精华通过灵芝子实体和孢子粉混合进行发酵制备而成，本发明的含有灵芝子实体孢子粉发酵液具有高含量的多肽，本发明的精华通过灵芝子实体孢子粉发酵液与具有舒缓功效的大麻提取物、南极洲丛梗藻提取物复配，能够很好的溶解并且稳定存在于精华配方中，具有舒缓肌肤，增加皮肤弹性，保持皮肤年轻态的作用。
本发明的第一目的，提供了一种含有灵芝子实体孢子粉发酵液的精华，按照重量份，所述的精华包括A相和B相：
所述的A相包括水19.5-73.4份、甘油1-10份、小核菌胶0.1-5份和对羟基苯乙酮0.1-1.5份；
所述的B相包括子实体孢子粉发酵液20-40份、工业大麻叶提取物5-10份、南极洲丛梗藻提取物0.1-5份、聚谷氨酸钠0.1-3份、皱波角叉菜提取物0.1-5份和苯氧乙醇0.1-1份。
本发明中所述的工业大麻叶提取物生产厂家为云南太瑞生物科技有限公司，南极洲丛梗藻提取物生产厂家为Odycea公司，商品名南极冰海褐藻；皱波角叉菜提取物生产厂家为Odycea公司，商品名保湿海藻灵。
进一步的，按照重量份，所述的精华包括A相和B相：
所述的A相包括水46.45份、甘油5.5份、小核菌胶2.55份和对羟基苯乙酮0.8份；
所述的B相包括精华包括灵芝子实体孢子粉发酵液30份、工业大麻叶提取物7.5份、南极洲丛梗藻提取物2.55份、聚谷氨酸钠1.55份、皱波角叉菜提取物2.55份和苯氧乙醇0.55份。
进一步的，所述的灵芝子实体孢子粉发酵液通过如下方法制备而成，具体包括如下步骤：
(1)灵芝发酵基质制备：将灵芝子实体干燥，粉碎过80-120目筛处理，加入孢子粉，再加入蒸馏水制备成质量分数为7-13％的溶液，灭菌处理，得到灭菌后的灵芝发酵基质；
(2)菌种活化：采用平板划线法将菌种分别接种到培养基中，在30-37℃下培养44-52h，得到活化菌株；
(3)混合发酵：将所述的活化菌株进行扩大培养后进行混合，得到混合种子液，将所述的混合种子液加入到所述的灭菌后的灵芝发酵基质中，进行发酵，得到初始灵芝子实体孢子粉发酵液；
(4)发酵后处理：将所述的初始灵芝子实体孢子粉发酵液灭菌处理，菌体破碎，过滤，得到所述的灵芝子实体孢子粉发酵液。
进一步的，步骤(1)中灵芝子实体与孢子粉的质量比为(10-1)：(1-10)，优选的，质量比为1：1。
本发明人经过大量的试验发现，灵芝子实体和孢子粉采用上述的质量比发酵得到的发酵液中各活性成分的含量较高，制备的精华的抗氧化、舒缓皮肤，强韧屏障泛红效果较好。
进一步的，步骤(2)中所述的菌种选自青春双歧杆菌CICC 6175、纳豆芽孢杆菌CICC 10262、保加利亚乳杆菌CICC 20271、酿酒酵母菌CICC 1252中的一种或多种。
进一步的，所述的菌种为菌种选自青春双歧杆菌CICC 6175、纳豆芽孢杆菌CICC10262、保加利亚乳杆菌CICC 20271和酿酒酵母菌CICC 1252的混合菌种。
进一步的，步骤(3)中混合种子液中青春双歧杆菌CICC 6175、纳豆芽孢杆菌CICC10262、保加利亚乳杆菌CICC 20271和酿酒酵母菌CICC 1252的质量比为(1.5-2.5):1:(1.5:-2.5)：(0.8-1.2)，优选的，质量比为2:1:2:1。
本发明人经过大量的试验发现，当菌种采用上述四种菌种混合时发酵时可以使孢子粉坚韧的双层细胞壁、子实体细胞壁打开，细胞膜破裂，胞内成分流出，活性物质利用率提高，可以提高制备的精华的抗氧化、舒缓皮肤，强韧屏障泛红的效果。同时采用上述比例范围下的四种菌种发酵，灵芝子实体和孢子粉中的有益成分提取率高。
本发明中各菌种的活化方法均采用现有方法进行，具体如下所示：
青春双歧杆菌活化培养基：MRS培养基，牛肉膏5g/L，蛋白胨10g/L，葡萄糖20g/L，酵母粉4g/L，乙酸钠5g/L，硫酸镁0.2g/L，柠檬酸三铵2g/L，磷酸氢二钾2g/L，硫酸锰0.05g/L，吐温-80 1g/L，琼脂20g/L，蒸馏水，pH值6.2±0.2；
青春双歧杆菌活化方法：在MRS固体培养基中划线，37℃厌氧培养48h，无氧条件下传3代。
纳豆芽孢杆菌活化培养基：牛肉膏蛋白胨培养基，牛肉膏3g/L，蛋白胨10g/L，NaCl5g/L，琼脂15～20g/L，蒸馏水，pH值7.5±0.2；
纳豆芽孢杆菌活化方法：在牛肉膏蛋白胨培养基上划线，35℃正常培养48h。
保加利亚乳杆菌活化培养基：MRS固体培养基，牛肉膏5g/L，蛋白胨10g/L，葡萄糖20g/L，酵母粉4g/L，乙酸钠5g/L，硫酸镁0.2g/L，柠檬酸三铵2g/L，磷酸氢二钾2g/L，硫酸锰0.05g/L，吐温-80 1g/L，琼脂20g/L，蒸馏水，pH值6.2±0.2；
保加利亚乳杆菌活化方法：在MRS培养基中划线，37℃恒温无氧培养48h。
酿酒酵母菌活化培养基：营养酵母葡萄糖液体培养基(NYDA固体培养基)，牛肉浸膏g/L，酵母浸粉5g/L，葡萄糖10g/L，琼脂20g/L，正常PH。
酿酒酵母菌活化方法：在NYDA培养基上划线，30℃正常培养48h。
进一步的，步骤(3)中混合种子液以1.5-2.5％的质量分数加入到所述的灭菌后的灵芝发酵基质中。
进一步的，步骤(3)中发酵温度为35-45℃，在转速为100-150rpm的摇床上进行发酵44-52h。
本发明中活化菌株进行扩大培养具体如下：
各培养基都是液体培养基：
酿酒酵母菌CICC 1252扩大培养培养基：NYDB液体培养基，牛肉浸膏g/L，酵母浸粉5g/L，葡萄糖10g/L，琼脂20g/L，正常PH。
活化后，用接种针或接种环从固体培养基菌落中挑取菌落，放入装有液体培养基的三角瓶中，轻微摆动接种针，使菌体分散于液体培养基内，30℃，120rpm培养，直到菌种数量达到1*10^8cfu/mL时结束，得到酿酒酵母种子液。
纳豆芽孢杆菌CICC 10262扩大培养培养基：牛肉膏3g/L，蛋白胨10g/L，NaCl 5g/L，PH 7。
固体培养基活化后，用接种针或接种环从固体培养基菌落中挑取菌落，放入装有液体培养基的三角瓶中，轻微摆动接种针，使菌体分散于液体培养基内，35℃，120rpm培养，直到菌种数量达到1*10^8cfu/mL时结束，得到纳豆芽孢杆菌种子液。
青春双歧杆菌CICC 6175培养基：MRS液体培养基，包括牛肉膏5g/L，蛋白胨10g/L，葡萄糖20g/L，酵母粉4g/L，乙酸钠5g/L，硫酸镁0.2g/L，柠檬酸三铵2g/L，磷酸氢二钾2g/L，硫酸锰0.05g/L，吐温-80 1g/L，pH值6.2±0.2。
固体培养基活化后，用接种针或接种环从固体培养基菌落中挑取菌落，放入装有液体培养基的三角瓶中，静置培养24h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为5％，37℃，20rpm培养12h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为10％，37℃，60rpm培养12h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为15％，37℃，120rpm培养，直到菌种数量达到1*10^8cfu/mL时结束，得到青春双歧杆菌种子液；
保加利亚乳杆菌CICC 20271(耐氧训练)：
固体培养基活化后，用接种针或接种环从固体培养基菌落中挑取菌落，放入装有液体培养基的三角瓶中，静置培养24h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为5％，37℃，20rpm培养12h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为10％，37℃，60rpm培养12h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为15％，37℃，120rpm培养，直到菌种数量达到1*10^8cfu/mL时结束，得到保加利亚乳杆菌种子液；
或液体培养基活化后，接种5％到装有液体培养基的三角瓶中，静置培养24h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为5％，37℃，20rpm培养12h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为10％，37℃，60rpm培养12h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为15％，37℃，120rpm培养，直到菌种数量达到1*10^9cfu/mL时结束，得到保加利亚乳杆菌种子液。
进一步的，步骤(1)和(4)中灭菌处理为在121℃下灭菌15min或在600MPa，25℃下进行超高压灭菌。
进一步的，步骤(4)中菌体破碎采用高压匀浆机或超声破碎，过滤采用离心、超滤膜、微滤膜或反渗透过滤。
本发明人经过大量的试验发现，菌体破碎后部分灵芝细胞内物质溶出，让有益成分流出。使用High Pressure Homogenizer高压匀浆机，压力设定为100mpa，匀浆3次，出口温度为25℃。
本发明的第二目的，提供了一种所述的含有灵芝子实体孢子粉发酵液的精华的制备方法，包括如下步骤：
(a)按照各原料的重量分别称取备用；
(b)将A相原料加入乳化锅，搅拌，加热至75-80℃，直至完全溶解均匀；
(c)降温至42-48℃，加入B相原料，搅拌溶解均匀，得到所述的精华。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
(1)本发明的精华通过灵芝子实体和孢子粉发酵制备而成，灵芝子实体和孢子粉混合发酵，发酵菌水解灵芝孢子双层细胞壁、灵芝子实体细胞壁，使胞内物质流出，从而促进有效成分的提取率，同时发酵可以降解大分子得到分子量更小即更易被皮肤吸收的小分子，促进功效物质的吸收利用；
(2)本发明制备的精华添加了灵芝子实体孢子粉发酵液，通过复配舒缓功效的工业大麻叶提取物、南极洲丛梗藻提取物，各原料中的活性物质能更好的溶解并且稳定存在于精华配方中，起到舒缓肌肤，增加皮肤弹性，保持皮肤年轻态的作用；(3)本发明的精华制备方法简单，生产成本低，利于大规模生产。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的技术方案进行详细的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本发明所保护的范围。
本发明中菌种活化和扩大培养均采用如下方法：
具体的菌种活化如下：
青春双歧杆菌活化培养基：MRS培养基，牛肉膏5g/L，蛋白胨10g/L，葡萄糖20g/L，酵母粉4g/L，乙酸钠5g/L，硫酸镁0.2g/L，柠檬酸三铵2g/L，磷酸氢二钾2g/L，硫酸锰0.05g/L，吐温-80 1g/L，琼脂20g/L，蒸馏水，pH值6.2±0.2；
青春双歧杆菌活化方法：在MRS固体培养基中划线，37℃厌氧培养48h，无氧条件下传3代。
纳豆芽孢杆菌活化培养基：牛肉膏蛋白胨培养基，牛肉膏3g/L，蛋白胨10g/L，NaCl5g/L，琼脂15～20g/L，蒸馏水，pH值7.5±0.2；
纳豆芽孢杆菌活化方法：在牛肉膏蛋白胨培养基上划线，35℃正常培养48h。
保加利亚乳杆菌活化培养基：MRS固体培养基，牛肉膏5g/L，蛋白胨10g/L，葡萄糖20g/L，酵母粉4g/L，乙酸钠5g/L，硫酸镁0.2g/L，柠檬酸三铵2g/L，磷酸氢二钾2g/L，硫酸锰0.05g/L，吐温-80 1g/L，琼脂20g/L，蒸馏水，pH值6.2±0.2；
保加利亚乳杆菌活化方法：在MRS培养基中划线，37℃恒温无氧培养48h。
酿酒酵母菌活化培养基：营养酵母葡萄糖液体培养基(NYDA固体培养基)，牛肉浸膏g/L，酵母浸粉5g/L，葡萄糖10g/L，琼脂20g/L，正常PH。
酿酒酵母菌活化方法：在NYDA培养基上划线，30℃正常培养48h。
活化菌株扩大培养具体如下：
各培养基都是液体培养基：
酿酒酵母菌CICC 1252扩大培养培养基：NYDB液体培养基，牛肉浸膏g/L，酵母浸粉5g/L，葡萄糖10g/L，琼脂20g/L，正常PH。
活化后，用接种针或接种环从固体培养基菌落中挑取菌落，放入装有液体培养基的三角瓶中，轻微摆动接种针，使菌体分散于液体培养基内，30℃，120rpm培养，直到菌种数量达到1*10^8cfu/mL时结束，得到酿酒酵母种子液。
纳豆芽孢杆菌CICC 10262扩大培养培养基：牛肉膏3g/L，蛋白胨10g/L，NaCl 5g/L，PH 7。
固体培养基活化后，用接种针或接种环从固体培养基菌落中挑取菌落，放入装有液体培养基的三角瓶中，轻微摆动接种针，使菌体分散于液体培养基内，35℃，120rpm培养，直到菌种数量达到1*10^8cfu/mL时结束，得到纳豆芽孢杆菌种子液。
青春双歧杆菌CICC 6175培养基：MRS液体培养基，包括牛肉膏5g/L，蛋白胨10g/L，葡萄糖20g/L，酵母粉4g/L，乙酸钠5g/L，硫酸镁0.2g/L，柠檬酸三铵2g/L，磷酸氢二钾2g/L，硫酸锰0.05g/L，吐温-80 1g/L，pH值6.2±0.2。
固体培养基活化后，用接种针或接种环从固体培养基菌落中挑取菌落，放入装有液体培养基的三角瓶中，静置培养24h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为5％，37℃，20rpm培养12h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为10％，37℃，60rpm培养12h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为15％，37℃，120rpm培养，直到菌种数量达到1*10^8cfu/mL时结束，得到青春双歧杆菌种子液；
保加利亚乳杆菌CICC 20271(耐氧训练)：
固体培养基活化后，用接种针或接种环从固体培养基菌落中挑取菌落，放入装有液体培养基的三角瓶中，静置培养24h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为5％，37℃，20rpm培养12h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为10％，37℃，60rpm培养12h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为15％，37℃，120rpm培养，直到菌种数量达到1*10^8cfu/mL时结束，得到保加利亚乳杆菌种子液。
制备例为灵芝子实体孢子粉发酵液的制备
制备例1
本制备例的灵芝子实体孢子粉发酵液的制备方法，包括如下步骤：
(1)灵芝发酵基质制备：将灵芝子实体干燥，粉碎过100目筛处理，加入孢子粉，灵芝子实体与孢子粉的质量比为1:1，再加入蒸馏水制备成质量分数为10％的溶液，在121℃下灭菌15min处理，得到灭菌后的灵芝发酵基质；
(2)菌种活化：采用平板划线法将菌种分别接种到培养基中进行培养，所述的菌种为菌种选自青春双歧杆菌CICC 6175、纳豆芽孢杆菌CICC 10262、保加利亚乳杆菌CICC20271和酿酒酵母菌CICC 1252的混合菌种，得到活化菌株；
(3)混合发酵：将所述的活化菌株进行扩大培养后进行混合，得到混合种子液，混合种子液中青春双歧杆菌CICC 6175、纳豆芽孢杆菌CICC 10262、保加利亚乳杆菌CICC20271和酿酒酵母菌CICC 1252的质量比2:1:2:1，将所述的混合种子液以2％的质量分数加入到所述的灭菌后的灵芝发酵基质中，进行发酵，发酵温度为40℃，在转速为125rpm的摇床上进行发酵48h，得到初始灵芝子实体孢子粉发酵液；
(4)发酵后处理：将所述的初始灵芝子实体孢子粉发酵液在121℃下灭菌15min处理，采用高压匀浆机进行菌体破碎，压力设定为100mpa，匀浆3次，出口温度为25℃，离心过滤，得到所述的灵芝子实体孢子粉发酵液。
以下制备例中改变某一项或几项实验参数，其他操作均与制备例1相同，具体的参数设定参见表1，制备例中的青春双歧杆菌CICC 6175、纳豆芽孢杆菌CICC 10262、保加利亚乳杆菌CICC 20271、酿酒酵母菌CICC 1252均购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。
对比例1
本对比例中的灵芝子实体孢子粉发酵液的制备方法为：将灵芝子实体粉碎过100目筛处理，加入孢子粉，灵芝子实体与孢子粉的质量比为1：1，加水配制成质量分数为10％的溶液，在121℃下灭菌15min处理，然后在40℃下保温48h，再在121℃下灭菌15min，离心分离取上清液，即得到清水提取液。
对比例2
本对比例中的灵芝子实体孢子粉发酵液的制备方法与制备例1相同，不同之处在于，将孢子粉和灵芝子实体替换为相同重量的灵芝子实体进行发酵。
对比例3
本对比例中的灵芝子实体孢子粉发酵液的制备方法与制备例1相同，不同之处在于，将孢子粉和灵芝子实体替换为相同重量的孢子粉进行发酵。
对比例4
本对比例中的灵芝子实体孢子粉发酵液的制备方法与制备例1相同，不同之处在于，步骤(4)中菌体不进行破碎处理。
表1
Figure BDA0002709967310000111
灵芝子实体孢子粉发酵液成分的测定
分别测定制备例1-14以及对比例1-4制备的灵芝子实体孢子粉发酵液，多糖测试方法参照SNT4260；采用BCA法测定蛋白多肽的含量；采用Folin-Ciocalteu法测定多酚含量；采用Al(NO3)3-NaNO2-NaOH法测定总黄酮含量，结果见表2。
表2
组别 多糖(mg/mL) 多肽(mg/mL) 多酚(mg/mL) 总黄酮(mg/mL)
制备例1 3.17 4.24 0.057 0.033
制备例2 3.12 4.18 0.053 0.031
制备例3 3.08 4.15 0.051 0.029
制备例4 2.84 3.86 0.037 0.018
制备例5 2.76 3.79 0.032 0.015
制备例6 3.01 4.02 0.045 0.026
制备例7 2.98 4.06 0.047 0.025
制备例8 2.91 3.97 0.041 0.023
制备例9 3.11 4.19 0.052 0.030
制备例10 3.08 4.11 0.051 0.028
制备例11 2.85 3.79 0.032 0.017
制备例12 2.89 3.82 0.034 0.020
制备例13 3.15 4.19 0.055 0.032
制备例14 3.14 4.21 0.053 0.030
对比例1 1.04 2.03 0.033 0.019
对比例2 3.25 3.88 0.052 0.021
对比例3 1.93 3.29 0.041 0.014
对比例4 2.81 3.75 0.038 0.021
从表1和表2中制备例1-5中可以看出，采用本发明的混合种子液青春双歧杆菌CICC 6175、纳豆芽孢杆菌CICC 10262、保加利亚乳杆菌CICC 20271和酿酒酵母菌CICC1252的质量比为(1.5-2.5):1:(1.5:-2.5)：(0.8-1.2)下制备的灵芝子实体孢子粉发酵液的多糖、多肽、多酚及总黄酮成分含量相对较高，当比例为2:1:2:1时即制备例1的方案时各成分的含量最高，说明采用本发明的四种菌种在上述比例范围内进行发酵，灵芝子实体和孢子粉中的有益成分提取率最高。
从制备例1-3和制备例6-8中的数据可以看出，采用四种菌种发酵比采用少于四种菌种发酵灵芝子实体和孢子粉中发酵液中的有益成分高。
从制备例1和制备例9-12的数据可以看出，采用本发明的孢子粉和子实体的质量比1：1下发酵得到的灵芝子实体和孢子粉中发酵液中的有益成分高。
从对比例1-4的数据中可以看出，采用水提制备灵芝子实体和孢子粉水提液、单独采用孢子粉或灵芝子实体发酵得到的发酵液中的有益成分较低，对于步骤(4)得到的菌体进行破碎处理，可以明显提高发酵液中的有益成分含量。
抗炎试验
1、实验方法
将RAW264.7细胞接种至96孔板，用1μg/ml LPS进行诱导刺激，同时加入待测化合物(终浓度50μM)处理，设置不含药物组和L-NMMA阳性药物组做对照。细胞过夜培养后取培养基检测NO生成，在570nm处测定吸光值。在剩余培养基中加入MTS进行细胞存活率检测，排除化合物对细胞的毒性影响。
NO生成抑制率(％)＝(非药物处理组OD570nm-样品组OD570nm)/非药物处理组OD570nm×100％
IC50(50％concentration of inhibition)按Reed&Muench法计算。
2、试剂
小鼠单核巨噬细胞RAW264.7购自中科院上海细胞库，DMEM培养基和胎牛血清购自BI公司。Griess Reagent、LPS及对照药物L-NMMA购自Sigma公司。
3、实验结果如表3所示。
表3
Figure BDA0002709967310000131
Figure BDA0002709967310000141
4、结果分析
一氧化氮(nitric oxide,NO)具有广泛而重要的生物学调控功能，在炎症、肿瘤及心血管系统等均有重要作用。当免疫细胞遭受微生物内毒素、炎症介质等刺激时，会生成大量的诱导型一氧化氮合成酶(induced NO synthase，iNOS)，产生NO进行免疫应答，因此抑制NO生成是化合物抗炎活性的直接指标。将小鼠单核巨噬细胞RAW264.7用LPS脂多糖诱导一氧化氮合成酶的生成，同时加入待测化合物处理，吸取培养基通过Griess法在570nm波长测吸光值来检测亚硝酸盐(NO2-)。
从上表可以看出，采用本发明的方法制备的灵芝子实体孢子粉发酵液能够抑制一氧化氮的生成并且不产生细胞毒性，实施例1-12的数据可以看出，当采用灵芝子实体与孢子粉的质量比不在(10-1)：(1-10)范围内时，一氧化氮抑制率明显降低，实施例1与对比例1-4的数据可以看出，采用水提制备灵芝子实体和孢子粉水提液、单独采用孢子粉或灵芝子实体发酵得到的发酵液对一氧化氮的抑制率明显降低，进而证明本发明制备的灵芝发酵液具有较好的抗炎作用，且所述抗炎作用与本发明包括菌种选择、菌种之间的比例，灵芝子实体与孢子粉的质量比在内的多种参数在内的特定的发酵方法有明显关联。DPPH自由基清除率试验
分别取制备例1-14和对比例1-4制备的灵芝子实体孢子粉发酵液3ml与2×10- 4mol/L的DPPH溶液混匀(A1)；取等体积的去离子水与2×10-4mol/L的DPPH溶液混匀(A2)；取等体积的无水乙醇与待测液混匀(A3)；反应30min后，在517nm下测吸光度值。按式下式计算DPPH自由基清除率，结果如表4所示。
EDPPH＝A2+A3-A1/A2*100％
EDPPH——APPH自由基清除率，％；
A1——样品与DPPH混合液的吸光度；
A2——去离子水与DPPH混合液的吸光度；
A3——无水乙醇与DPPH混合液吸光度。
表4
组别 E<sub>DPPH</sub>(％)
制备例1 82.45
制备例2 81.23
制备例3 82.06
制备例4 63.26
制备例5 65.31
制备例6 79.56
制备例7 78.14
制备例8 77.48
制备例9 80.26
制备例10 81.49
制备例11 73.96
制备例12 75.89
制备例13 80.54
制备例14 81.57
对比例1 48.59
对比例2 74.82
对比例3 72.47
对比例4 75.49
从表4中可以看出，采用本发明的采用本发明的混合种子液青春双歧杆菌CICC6175、纳豆芽孢杆菌CICC 10262、保加利亚乳杆菌CICC 20271和酿酒酵母菌CICC 1252的质量比为(1.5-2.5):1:(1.5:-2.5)：(0.8-1.2)时DPPH自由基清除率高，当比例为2:1:2:1时即制备例1的方案时清除率最高，采用四种菌种发酵比采用少于四种菌种发酵灵芝子实体和孢子粉制备的发酵液的DPPH自由基清除率高，采用本发明的孢子粉和子实体的质量比1：1下发酵得到的灵芝子实体和孢子粉中发酵液的DPPH自由基清除率高，从对比例1-3的数据中可以看出，采用水提制备灵芝子实体和孢子粉水提液、单独采用孢子粉或灵芝子实体发酵得到的发酵液的清除率明显降低。
实施例1
利用制备例1制备的灵芝子实体孢子粉发酵液制备精华，所述的精华包括A相和B相：
所述的A相包括水19.5kg、甘油10kg、小核菌胶0.1kg和对羟基苯乙酮1.5kg；
所述的B相包括子实体孢子粉发酵液20kg、工业大麻叶提取物10kg、南极洲丛梗藻提取物0.1kg、聚谷氨酸钠3kg、皱波角叉菜提取物0.1kg和苯氧乙醇1kg。
本实施例的精华的制备方法，包括如下步骤：
(a)按照各原料的重量分别称取备用；
(b)将A相原料加入乳化锅，搅拌，加热至75℃，直至完全溶解均匀；
(c)降温至42℃，加入B相原料，搅拌溶解均匀，得到所述的精华。
实施例2
利用制备例13制备的灵芝子实体孢子粉发酵液制备精华，所述的精华包括A相和B相：
所述的A相包括水46.45kg、甘油5.5kg、小核菌胶2.55kg和对羟基苯乙酮0.8kg；
所述的B相包括精华包括灵芝子实体孢子粉发酵液30kg、工业大麻叶提取物7.5kg、南极洲丛梗藻提取物2.55kg、聚谷氨酸钠1.55kg、皱波角叉菜提取物2.55kg和苯氧乙醇0.55kg。
本实施例的精华的制备方法，包括如下步骤：
(a)按照各原料的重量分别称取备用；
(b)将A相原料加入乳化锅，搅拌，加热至77.5℃，直至完全溶解均匀；
(c)降温至45℃，加入B相原料，搅拌溶解均匀，得到所述的精华。
实施例3
利用制备例14制备的灵芝子实体孢子粉发酵液制备精华，所述的精华包括A相和B相：
所述的A相包括水73.4kg、甘油1kg、小核菌胶1.5kg和对羟基苯乙酮0.1kg；
所述的B相包括子实体孢子粉发酵液40kg、工业大麻叶提取物5kg、南极洲丛梗藻提取物5kg、聚谷氨酸钠0.1kg、皱波角叉菜提取物5kg和苯氧乙醇0.1kg。
本实施例的精华的制备方法，包括如下步骤：
(a)按照各原料的重量分别称取备用；
(b)将A相原料加入乳化锅，搅拌，加热至80℃，直至完全溶解均匀；
(c)降温至48℃，加入B相原料，搅拌溶解均匀，得到所述的精华。
对比例5
本对比例的精华的原料及制备方法与实施例2相同，不同之处，将灵芝子实体孢子粉发酵液替换为制备例11的灵芝子实体孢子粉发酵液。
对比例6
本对比例的精华的原料及制备方法与实施例2相同，不同之处，将灵芝子实体孢子粉发酵液替换为制备例12的灵芝子实体孢子粉发酵液。
对比例7
本对比例的精华的原料及制备方法与实施例2相同，不同之处，将灵芝子实体孢子粉发酵液替换为对比例1提取的灵芝子实体孢子粉水提液制备精华。
对比例8
本对比例的精华的原料及制备方法与实施例2相同，不同之处，不添加灵芝子实体孢子粉发酵液。
试验例1
将实施例1-3和对比例5-8制备的精华进行保湿效果的测试。
参照QB/T 256-2001化妆品保湿功效评价指南，每个样品选择5名测试者，将所制备的精华液涂抹于脸部，采用皮肤水分测试仪Corneometer CM825 MDD分别测量使用样品后0h、0.5h、1h、2h、4h、8h皮肤角质层水平均含率(％)，结果见表5。
表5
Figure BDA0002709967310000181
从表5可以看出，采用本发明制备的灵芝子实体孢子粉发酵液制备的精华的保湿效果较好，不添加灵芝子实体孢子粉发酵液、采用水提取液、单独使用孢子粉发酵或子实体发酵制备的精华的保湿效果较差。
试验例2
选定测试人员30人，男女不限，20-35岁，自觉是敏感性肌肤人群(面部可见性泛红)，平均分成6组，一组5人。分别使用实施例1～3和对比例6～8。
每组人员在第0天(使用产品前)、第14天(使用产品后)和第28天(使用产品后)分别到访，使用水分流失测试探头Tewameter TM300、皮肤弹性测试仪Cutermeter dualMPA580测量同一侧面部情况，观察水分流失和皮肤弹性情况，面部经皮失水差异性分析如表6和表7。
经皮水分散失(TEWL)又称为透皮失水，表示真皮深层的水分通过表皮的蒸发散失，是描述皮肤屏障的重要参数，TEWL越大，透皮失水越多，皮肤屏障功能越差，皮肤抵抗外界刺激的能力越差；皮肤弹性R2值是肌肤年龄的一个重要指标，表示第一次循环中，无负压时皮肤回弹量与负压时最大拉伸量之比，比值越接近1，说明皮肤弹性越好。
表6
TEWL(g/h/m<sup>2</sup>) 0天 14天 28天
实施例1 18.12 15.78 13.52
实施例2 16.28 13.28 12.88
实施例3 15.36 13.67 12.18
对比例5 17.18 15.17 14.78
对比例6 14.66 14.08 12.56
对比例7 18.60 17.69 17.11
对比例8 16.23 15.82 15.79
表7
皮肤弹性R2 0天 14天 28天
实施例1 0.7182 0.7469 0.7802
实施例2 0.7201 0.7540 0.7912
实施例3 0.7311 0.7566 0.7823
对比例5 0.7235 0.7398 0.7612
对比例6 0.7291 0.7428 0.7588
对比例7 0.7164 0.7315 0.7423
对比例8 0.7183 0.7288 0.7356
从表6可以看出，实施例1～3是采用本发明制备的灵芝子实体孢子粉发酵液制备的精华，其经皮失水变化值更大，对皮肤屏障的改善更好，而对比例5～8是单独使用孢子粉发酵或子实体发酵制备、采用水提取液、不添加灵芝子实体孢子粉发酵液的精华，其屏障修复效果较差。
从表7可以看出，实施例1～3是采用本发明制备的灵芝子实体孢子粉发酵液制备的精华，其皮肤弹性变化值更大，对抗皮肤衰老的效果更好，而对比例5～8是单独使用孢子粉发酵或子实体发酵制备、采用水提取液、不添加灵芝子实体孢子粉发酵液的精华，其增强皮肤弹性效果较差。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。

Claims (10)

1.一种含有灵芝子实体孢子粉发酵液的精华，其特征在于，按照重量份，所述的精华包括A相和B相：
所述的A相包括水19.5-73.4份、甘油1-10份、小核菌胶0.1-5份和对羟基苯乙酮0.1-1.5份；
所述的B相包括子实体孢子粉发酵液20-40份、工业大麻叶提取物5-10份、南极洲丛梗藻提取物0.1-5份、聚谷氨酸钠0.1-3份、皱波角叉菜提取物0.1-5份和苯氧乙醇0.1-1份。
2.根据权利要求1所述的一种含有灵芝子实体孢子粉发酵液的精华，其特征在于，按照重量份，所述的精华包括A相和B相：
所述的A相包括水46.45份、甘油5.5份、小核菌胶2.55份和对羟基苯乙酮0.8份；
所述的B相包括精华包括灵芝子实体孢子粉发酵液30份、工业大麻叶提取物7.5份、南极洲丛梗藻提取物2.55份、聚谷氨酸钠1.55份、皱波角叉菜提取物2.55份和苯氧乙醇0.55份。
3.根据权利要求1或2所述的一种含有灵芝子实体孢子粉发酵液的精华，其特征在于，所述的灵芝子实体孢子粉发酵液通过如下方法制备而成，具体包括如下步骤：
(1)灵芝发酵基质制备：将灵芝子实体干燥，粉碎过80-120目筛处理，加入孢子粉，再加入蒸馏水制备成质量分数为7-13％的溶液，灭菌处理，得到灭菌后的灵芝发酵基质；
(2)菌种活化：采用平板划线法将菌种分别接种到培养基中，在30-37℃下培养44-52h，得到活化菌株；
(3)混合发酵：将所述的活化菌株进行扩大培养后进行混合，得到混合种子液，将所述的混合种子液加入到所述的灭菌后的灵芝发酵基质中，进行发酵，得到初始灵芝子实体孢子粉发酵液；
(4)发酵后处理：将所述的初始灵芝子实体孢子粉发酵液灭菌处理，菌体破碎，过滤，得到所述的灵芝子实体孢子粉发酵液。
4.根据权利要求3所述的一种含有灵芝子实体孢子粉发酵液的精华，其特征在于，步骤(1)中灵芝子实体与孢子粉的质量比为(10-1)：(1-10)，优选的，质量比为1：1。
5.根据权利要求3所述的一种含有灵芝子实体孢子粉发酵液的精华，其特征在于，步骤(2)中所述的菌种选自青春双歧杆菌CICC 6175、纳豆芽孢杆菌CICC 10262、保加利亚乳杆菌CICC 20271、酿酒酵母菌CICC 1252中的一种或多种，优选的，所述的菌种为菌种选自青春双歧杆菌CICC 6175、纳豆芽孢杆菌CICC 10262、保加利亚乳杆菌CICC 20271和酿酒酵母菌CICC 1252的混合菌种。
6.根据权利要求5所述的一种含有灵芝子实体孢子粉发酵液的精华，其特征在于，步骤(3)中混合种子液中青春双歧杆菌CICC 6175、纳豆芽孢杆菌CICC 10262、保加利亚乳杆菌CICC 20271和酿酒酵母菌CICC 1252的质量比为(1.5-2.5):1:(1.5:-2.5)：(0.8-1.2)，优选的，质量比为2:1:2:1。
7.根据权利要求3所述的一种含有灵芝子实体孢子粉发酵液的精华，其特征在于，步骤(3)中混合种子液以1.5-2.5％的质量分数加入到所述的灭菌后的灵芝发酵基质中。
8.根据权利要求3所述的一种含有灵芝子实体孢子粉发酵液的精华，其特征在于，步骤(3)中发酵温度为35-45℃，在转速为100-150rpm的摇床上进行发酵44-52h。
9.根据权利要求3所述的一种含有灵芝子实体孢子粉发酵液的精华，其特征在于，步骤(1)和(4)中灭菌处理为在121℃下灭菌15min或在600MPa，25℃下进行超高压灭菌，优选的，步骤(4)中菌体破碎采用高压匀浆机或超声破碎，过滤采用离心、超滤膜、微滤膜或反渗透过滤。
10.一种权利要求1-9任意一项所述的含有灵芝子实体孢子粉发酵液的精华的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(a)按照各原料的重量分别称取备用；
(b)将A相原料加入乳化锅，搅拌，加热至75-80℃，直至完全溶解均匀；
(c)降温至42-48℃，加入B相原料，搅拌溶解均匀，得到所述的精华。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114917160A (zh) * 2022-06-06 2022-08-19 青蛙王子（福建）婴童护理用品有限公司 一种具有抗氧化、抗炎、修护功效的香水莲花发酵物及其制备与应用
CN115501142A (zh) * 2022-09-26 2022-12-23 植物医生(广东)生物科技有限公司 一种面部精华液及其制备工艺

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114917160A (zh) * 2022-06-06 2022-08-19 青蛙王子（福建）婴童护理用品有限公司 一种具有抗氧化、抗炎、修护功效的香水莲花发酵物及其制备与应用
CN114917160B (zh) * 2022-06-06 2023-09-08 青蛙王子（福建）婴童护理用品有限公司 一种具有抗氧化、抗炎、修护功效的香水莲花发酵物及其制备与应用
CN115501142A (zh) * 2022-09-26 2022-12-23 植物医生(广东)生物科技有限公司 一种面部精华液及其制备工艺

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