CN111904908B - 一种含有玫瑰发酵液的精华液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种含有玫瑰发酵液的精华液及其制备方法，所述的精华液包括如下原料制成：水、甘油、氢化卵磷脂、聚丙烯酸钠、植物角鲨、玫瑰发酵液、水解植物蛋白、泛醇、山梨酸钾和苯甲酸钠。本发明的玫瑰发酵液黄酮、多糖含量均较高，同时也含有色氨酸，能够起到舒缓抗敏皮肤的作用；精华液中添加了植物角鲨烷、泛醇、水解植物蛋白和玫瑰发酵液，泛醇能够起到很好的保湿肌肤作用，植物角鲨烷可以修复皮肤屏障，水解植物蛋白具有促进皮肤细胞胶原蛋白合成的功效，同时添加的玫瑰发酵液作为后生元能够达到舒敏镇定皮肤的功效。对于皮肤无刺激性，更适合敏感性的肌肤长期使用。

Description

一种含有玫瑰发酵液的精华液及其制备方法

技术领域

本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种含有玫瑰发酵液的精华液及其制备方法。

背景技术

随着生活水平的不断提高，人们对护肤品的要求越来越高，除了保湿外，还期待产品能够有一定功效，舒缓抗敏是其中的重要诉求。

精华液不是一种新型产品，有很多方面与化妆水、乳液、膏霜和油类相似，由于消费者生活方式和节奏改变，例如人们为节省时间，想简化其每日化妆的程序，想要一种有较好功效的“浓缩型产品”，要求在产品设计方面更方便使用；要求发展高功能保湿剂和有生理作用的活性组分，为适应消费者的需要，随着新原料、配方技术、生产和功效评价方法的发展，被称为精华液的化妆品在市场上出现。

后生元(postbiotics)是指：益生菌的代谢产物、裂解提取物、细胞壁组分甚至培养上清，能表现出明显的益生作用，这一类有健康功效的组分称之为后生元。后生元的作用有抗菌、抗氧化、抗炎等。前期研究发现，微生物代谢会产生色氨酸，而色氨酸能够减轻特应性皮炎患者的症状，减轻炎症反应。

精华液这类直接与皮肤接触的化妆品，它的温和性是重要指标。如果精华液中添加了具有舒敏作用的后生元，可以增加其温和性，带来舒缓功效。满足健康皮肤消费者的同时，对皮肤敏感人群也适用，符合人们对于健康与美对追求，具有很大市场。

鉴于以上原因，特提出本发明。

发明内容

为了解决现有技术存在的以上问题，本发明提供了一种含有玫瑰发酵液的精华液及其制备方法，本发明的精华液具有很好的保湿肌肤的作用，还可以修复皮肤屏障，促进皮肤胶原蛋白合成，加入添加后生元玫瑰发酵液，在玫瑰与益生菌混合发酵后，产生了色氨酸，色氨酸能够对皮肤起到抗炎的作用，从而维持皮肤健康。

本发明的第一目的，提供了一种含有玫瑰发酵液的精华液，按照重量份，所述的精华液包括如下原料制成：

A相：水30份、甘油6.5份、氢化卵磷脂1.05份、聚丙烯酸钠0.55份；

B相：植物角鲨烷2份；

C相：玫瑰发酵液70份、水解植物蛋白1.05份、泛醇2.75份、山梨酸钾0.65份和苯甲酸钠0.55份。

本发明中甘油为保湿剂、氢化卵磷脂为乳化和保湿的作用、聚丙烯酸钠为增稠剂、植物角鲨烷为润肤剂、水解植物蛋白紧致肌肤，增加胶原蛋白合成、泛醇为保湿剂、山梨酸钾和苯甲酸钠为防腐剂。

进一步的，所述的玫瑰发酵液的制备方法包括如下步骤：

(1)玫瑰发酵基质制备：将干玫瑰花蕾粉碎后过筛，并加水配成混合液，灭菌后得到玫瑰发酵基质；

(2)菌种活化：采用平板划线法将菌种分别接种到固体活化培养基表面，于37℃恒温倒置培养15～20h，得到活化菌株；

(3)混合发酵：将所述活化菌株扩大培养后进行混合得到混合菌液，将所述混合菌液以1.5％～2.5％的质量百分含量加入玫瑰发酵基质中，于40～45℃摇床发酵培养45～50h，得到初始发酵液；

(4)发酵后处理：对所述初始发酵液依次进行灭菌、菌体破碎和过滤后，得到所述玫瑰发酵液。

进一步的，步骤(1)中，所述混合液的质量浓度为10％～15％。

进一步的，步骤(1)中，筛网的目数为100～200目，灭菌为将混合液在121℃下灭菌15min，或对混合液进行软包装后，用水作为介质，在600MPa，25℃下进行超高压灭菌。超高压灭菌的温度较低，可保护多酚、黄酮类物质，但超高压灭菌成本高，可根据实际情况选择灭菌方式。

菌种活化的目的是使保藏菌种的活性得以恢复，同时恢复其优良的生产性能。菌种选自双歧杆菌、芽孢杆菌、乳杆菌、酿酒酵母中的至少一种。

进一步的，步骤(2)中，所述菌种选自青春双歧杆菌CICC 6175、纳豆芽孢杆菌CICC10262、保加利亚乳杆菌CICC 20271、酿酒酵母菌CICC 1252中的至少一种。

进一步的，所述菌种为纳豆芽孢杆菌CICC 10262、保加利亚乳杆菌CICC 20271和酿酒酵母菌CICC 1252的混合菌种，步骤(3)中扩大培养后的所述纳豆芽孢杆菌CICC10262、保加利亚乳杆菌CICC 20271和酿酒酵母菌CICC 1252种子液的质量比例为1:(2～5):(2～5)。申请人研究发现，当发酵菌种满足上述配比时，得到的玫瑰发酵液中含有较多的黄酮和糖类物质。

进一步的，菌种活化方式为：用灭菌竹签蘸取少量的菌种，按照平板划线法在固体活化培养基上划线，于37℃的恒温培养箱中倒置培养15～20h，得到活化菌株。由于双歧杆菌和乳杆菌需要无氧条件活化，芽孢杆菌和酿酒酵母需要有氧活化，可以将双歧杆菌、乳杆菌、芽孢杆菌和酿酒酵母分别接种于不同的固体活化培养基，然后在适宜的条件下培养，待混合发酵步骤将上述活化菌株加入玫瑰发酵基质中即可。

进一步的，步骤(2)中，所述活化培养基为MRS培养基，包括牛肉膏5g/L，蛋白胨10g/L，葡萄糖20g/L，酵母粉4g/L，乙酸钠5g/L，硫酸镁0.2g/L，柠檬酸三铵2g/L，磷酸氢二钾2g/L，硫酸锰0.05g/L，吐温-80 1g/L，琼脂20g/L，pH值6.2±0.2。

不同菌种的扩大培养方法如下：

[1]对于酿酒酵母菌CICC 1252，固体培养基活化后，用接种针或接种环从固体培养基菌落中挑取菌落，放入装有液体培养基的三角瓶中，轻微摆动接种针，使菌体分散于液体培养基内，37℃，120rpm培养，直到菌种数量达到1*10^9cfu/mL时结束，得到酿酒酵母种子液。

[2]对于纳豆芽孢杆菌CICC 10262，固体培养基活化后，用接种针或接种环从固体培养基菌落中挑取菌落，放入装有液体培养基的三角瓶中，轻微摆动接种针，使菌体分散于液体培养基内，37℃，120rpm培养，直到菌种数量达到1*10^9cfu/mL时结束，得到纳豆芽孢杆菌种子液。

[3]对于青春双歧杆菌CICC 6175，由于在无氧条件进行活化，需要对其进行耐氧训练。具体为固体培养基活化后，用接种针或接种环从固体培养基菌落中挑取菌落，放入装有液体培养基的三角瓶中，静置培养24h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为5％，37℃，20rpm培养12h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为10％，37℃，60rpm培养12h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为15％，37℃，120rpm培养，直到菌种数量达到1*10^9cfu/mL时结束，得到青春双歧杆菌种子液；

[4]对于保加利亚乳杆菌CICC 20271，由于在无氧条件进行活化，需要对其进行耐氧训练。具体为固体培养基活化后，用接种针或接种环从固体培养基菌落中挑取菌落，放入装有液体培养基的三角瓶中，静置培养24h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为5％，37℃，20rpm培养12h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为10％，37℃，60rpm培养12h；吸取上步骤菌液再接种到装有液体培养基的三角瓶中，接种量为15％，37℃，120rpm培养，直到菌种数量达到1*10^9cfu/mL时结束，得到保加利亚乳杆菌种子液。

进一步的，步骤(2)中，所述活化培养基还包括海藻多糖，所述海藻多糖的加入量为3g/L。

所述海藻多糖可作为碳源加入，有利于菌株活化，对于菌落直径、形态、菌体体积以及长出的菌落时间都有正向效果。

进一步的，步骤(3)中采用摇床培养可以使菌种与发酵底物充分接触。

进一步的，步骤(3)中，所述摇床转速为100～150rpm。

进一步的，步骤(1)和(4)中，所述灭菌为将所述初始发酵液在121℃下灭菌15min，或对其在600MPa，25℃下进行超高压灭菌；

步骤(4)中，采用高压匀浆机破碎菌体，压力设定为100MPa，匀浆3～5次，出口温度为25℃。

过滤选自离心分离、超滤膜过滤、微滤膜过滤、反渗透过滤中的一种，或者在灭菌后破碎菌体无需进行过滤，目的是除去悬浮物，防止沉降。

采用高压匀浆机破碎菌体，目的是破碎发酵菌及部分玫瑰细胞，使胞内物质溶出，玫瑰发酵液的成分更丰富。高压匀浆压力设定为100MPa，匀浆3～5次，出口温度为25℃。也可采用超声破碎菌体。

本发明的第二目的，提供了一种所述的含有玫瑰发酵液的精华液的制备方法，包括如下步骤：

(a)按照各原料的重量分别称取备用；

(b)乳化锅清洗干净，将A相中的水和甘油加入到乳化锅中，加热至80-85℃，搅拌均匀，将氢化卵磷脂、聚丙烯酸钠加入到乳化锅中搅拌至完全均匀；

(c)将B相原料加入到乳化锅中，2800-3200r/min下均质1-3min，然后开始降温；

(d)降温至45℃以下，再将C相原料加入乳化锅中，搅拌至溶解均匀，得到所述的含有玫瑰发酵液的精华液。与现有技术相比，本发明的有益效果为：

(1)本发明提供了一种含有玫瑰发酵液的精华液，本发明中加入玫瑰发酵液，所述的玫瑰发酵液采用特定的方法制备而成，本发明的玫瑰发酵液黄酮、多糖含量均较高，同时也含有色氨酸，能够起到舒缓抗敏皮肤的作用；

(2)本发明所述的精华液中添加了植物角鲨烷、泛醇、水解植物蛋白和玫瑰发酵液，泛醇与玫瑰发酵液共同作用能够提高保湿肌肤的作用，植物角鲨烷可以修复皮肤屏障，水解植物蛋白具有促进皮肤细胞胶原蛋白合成的功效，同时添加的玫瑰发酵液作为益生元和后生元能够调节菌群和皮肤，从而达到舒敏镇定皮肤的功效，对于皮肤无刺激性，更适合敏感性的肌肤长期使用，本发明的精华液通过各原料的综合作用，提高了精华液的抗敏作用，保湿作用；

(3)本发明的精华液制备方法简单，生产成本低，可以大规模生产。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的技术方案进行详细的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本发明所保护的范围。

制备例玫瑰发酵液的制备

制备例1

(1)玫瑰发酵基质制备：将干玫瑰花蕾粉碎后过100目筛，并加水配成质量浓度为10％的混合液，121℃下灭菌15min，得到玫瑰发酵基质。

(2)菌种活化：用灭菌竹签蘸取纳豆芽孢杆菌CICC 10262，按照平板划线法在固体活化培养基上划线，于37℃的恒温培养箱中倒置有氧培养15～20h，得到活化纳豆芽孢杆菌CICC 10262菌株。

用灭菌竹签蘸取保加利亚乳杆菌CICC 20271，按照平板划线法在固体活化培养基上划线，于37℃的恒温培养箱中倒置无氧培养15～20h，得到活化保加利亚乳杆菌CICC20271菌株。

用灭菌竹签蘸取酿酒酵母菌CICC 1252，按照平板划线法在固体活化培养基上划线，于37℃的恒温培养箱中倒置有氧培养15～20h，得到活化酿酒酵母菌CICC 1252菌株。

活化培养基为MRS培养基，包括牛肉膏5g/L，蛋白胨10g/L，葡萄糖20g/L，酵母粉4g/L，乙酸钠5g/L，硫酸镁0.2g/L，柠檬酸三铵2g/L，磷酸氢二钾2g/L，硫酸锰0.05g/L，吐温-80 1g/L，琼脂20g/L，pH值6.2±0.2。

(3)混合发酵：将活化菌株分别扩大培养，以纳豆芽孢杆菌CICC10262、保加利亚乳杆菌CICC 20271和酿酒酵母菌CICC 1252的种子液质量比例为1:3:3混合，把混合菌液按照2％的质量百分含量加入玫瑰发酵基质中，于40℃，120rpm摇床发酵培养48h，得到初始发酵液。

(4)发酵后处理：对初始发酵液在121℃下灭菌15min后，使用High PressureHomogenizer高压匀浆机进行菌体破碎，压力设定为100MPa，匀浆3次，出口温度为25℃，然后离心分离取上清液，得到玫瑰发酵液。

制备例2～12改变某一项实验参数，其它操作步骤和测试过程同制备例1，具体设置方式见表1。制备例中的青春双歧杆菌CICC 6175、纳豆芽孢杆菌CICC 10262、保加利亚乳杆菌CICC 20271、酿酒酵母菌CICC 1252均购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。

对比例1中的玫瑰提取液的提取方法为：将干玫瑰花蕾粉碎后过100目筛，并加水配成质量浓度为10％的混合液，121℃下灭菌15min，然后在40℃下保温48h，再在121℃下灭菌15min，离心分离取上清液，即得到清水提取液。

对比例2中的玫瑰发酵液的制备方法为：将步骤2)中的活化培养基替换为沙氏葡萄糖液体培养基。

表1

营养成分检测

对于制备例1至12制备得到的玫瑰发酵液，以及对比例1和2制备得到的玫瑰提取液，采用分光光度法测定总黄酮含量；参照GB/T 5009.7-2008测定总糖含量；参照GB/T5009.124-2003测定氨基酸含量。测试结果见表2和表3。

表2玫瑰发酵液各成分含量

表3玫瑰发酵液氨基酸含量

上述实验结果表明，比较制备例1和对比例1可知，与传统玫瑰水提物相比，本发明的玫瑰发酵液含有更多的活性物质，例如多糖、黄酮和氨基酸。

比较制备例1～6可知，采用纳豆芽孢杆菌CICC 10262、保加利亚乳杆菌CICC20271和酿酒酵母菌CICC 1252作为发酵菌种，且三者质量比例满足1:(2～5):(2～5)时，玫瑰发酵液中的活性物质含量最高。

比较制备例1和7～9可知，如果在此基础上向活化培养基和扩大培养基中均加入海藻多糖，能够进一步提升活性物质含量。但将海藻多糖替换为葡萄糖或米粉则不具有相应效果，原因可能是海藻多糖刺激菌种表达了某些基因，使其分解、合成活性物质的能力提升，并且使菌生长状态更加旺盛，活力更强。

比较制备例1和对比例2可知，采用固体活化培养基与液体活化培养基相比，能获得更多的活性物质。并且与液体培养基相比，固体培养基单位体积的质量更轻，而且对生产过程中所需设备要求较低。大量培育液体菌种需要在大型液体发酵罐中进行，对场地、能源(蒸汽)的需求较高；而使用固体培养基培育菌种，仅需灭菌设备即可，在条件较低的情况下即可生产。

实施例1

利用制备例11制备的玫瑰发酵液制备精华液，所述的精华液包括如下原料制成：

A相：水30kg、甘油6.5kg、氢化卵磷脂1.05kg、聚丙烯酸钠0.55kg；

B相：植物角鲨烷2kg；

C相：玫瑰发酵液70kg、水解植物蛋白1.05kg、泛醇2.75kg、山梨酸钾0.65kg和苯甲酸钠0.55kg。

所述的精华液的制备方法，包括如下步骤：

(a)按照各原料的重量分别称取备用；

(b)乳化锅清洗干净，将A相中的水和甘油加入到乳化锅中，加热至82.5℃，搅拌均匀，将氢化卵磷脂、聚丙烯酸钠加入到乳化锅中搅拌至完全均匀；

(c)将B相原料加入到乳化锅中，3000r/min下均质2min，然后开始降温；

(d)降温至45℃以下，再将C相原料加入乳化锅中，搅拌至溶解均匀，得到所述的含有玫瑰发酵液的精华液。

试验例1

将实施例1制备的精华液进行保湿效果的测试。

参照QB/T 256-2001化妆品保湿功效评价指南，每个样品选择20名测试者，将所制备的精华液涂抹于脸部，采用皮肤水分测试仪Corneometer CM825 MDD分别测量使用样品后0h、0.5h、1h、2h、4h、8h皮肤角质层水含率(％)，结果见表4。

表4

时间(h)	实施例1
		0	24.45
0.5	47.85
		1	57.53
2	63.51
		4	51.23
8	43.21

由表4可以看出，采用本发明的原料制备的精华液的保湿效果较好。

以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。

Claims (7)

1.一种含有玫瑰发酵液的精华液，其特征在于，按照重量份，所述的精华液包括如下原料制成：

A相：水30份、甘油6.5份、氢化卵磷脂1.05份、聚丙烯酸钠0.55份；

B相：植物角鲨烷2份；

C相：玫瑰发酵液70份、水解植物蛋白1.05份、泛醇2.75份、山梨酸钾0.65份和苯甲酸钠0.55份；

其中，所述的玫瑰发酵液通过如下方法制备而成：

(1)玫瑰发酵基质制备：将干玫瑰花蕾粉碎后过筛，并加水配成混合液，灭菌后得到玫瑰发酵基质；

(2)菌种活化：采用平板划线法将菌种分别接种到固体活化培养基表面，于37℃恒温倒置培养15～20h，得到活化菌株；

(3)混合发酵：将所述活化菌株扩大培养后进行混合得到混合菌液，将所述混合菌液以1.5％～2.5％的质量百分含量加入玫瑰发酵基质中，于40～45℃摇床发酵培养45～50h，得到初始发酵液；

(4)发酵后处理：对所述初始发酵液依次进行灭菌、菌体破碎和过滤后，得到所述玫瑰发酵液；

所述菌种为纳豆芽孢杆菌CICC 10262、保加利亚乳杆菌CICC 20271和酿酒酵母菌CICC1252的混合菌种，步骤3)中扩大培养后的所述纳豆芽孢杆菌CICC 10262、保加利亚乳杆菌CICC 20271和酿酒酵母菌CICC1252种子液的质量比例为1:(2～5):(2～5)。

2.根据权利要求1所述的一种含有玫瑰发酵液的精华液，其特征在于，步骤(1)中，所述混合液的质量浓度为10％～15％。

3.根据权利要求1所述的一种含有玫瑰发酵液的精华液，其特征在于，步骤(2)中，所述活化培养基为MRS培养基，包括牛肉膏5g/L，蛋白胨10g/L，葡萄糖20g/L，酵母粉4g/L，乙酸钠5g/L，硫酸镁0.2g/L，柠檬酸三铵2g/L，磷酸氢二钾2g/L，硫酸锰0.05g/L，吐温-80 1g/L，琼脂20g/L，pH值6.2±0.2。

4.根据权利要求1所述的一种含有玫瑰发酵液的精华液，其特征在于，步骤(2)中，所述活化培养基还包括海藻多糖，所述海藻多糖的加入量为3g/L。

5.根据权利要求1所述的一种含有玫瑰发酵液的精华液，其特征在于，步骤(3)中，所述摇床转速为100～150rpm；

步骤(4)中，采用高压匀浆机破碎菌体，压力设定为100MPa，匀浆3～5次，出口温度为25℃。

6.根据权利要求5所述的一种含有玫瑰发酵液的精华液，其特征在于，所述灭菌为将所述初始发酵液在121℃下灭菌15min，或对其在600MPa，25℃下进行超高压灭菌。

7.一种权利要求1-6任意一项所述的含有玫瑰发酵液的精华液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(a)按照各原料的重量分别称取备用；

(b)乳化锅清洗干净，将A相中的水和甘油加入到乳化锅中，加热至80-85℃，搅拌均匀，将氢化卵磷脂、聚丙烯酸钠加入到乳化锅中搅拌至完全均匀；

(c)将B相原料加入到乳化锅中，2800-3200r/min下均质1-3min，然后开始降温；

(d)降温至45℃以下，再将C相原料加入乳化锅中，搅拌至溶解均匀，得到所述的含有玫瑰发酵液的精华液。