CN116019747B - 一种番石榴发酵产物的制备方法及其产品和应用 - Google Patents
一种番石榴发酵产物的制备方法及其产品和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116019747B CN116019747B CN202310050547.1A CN202310050547A CN116019747B CN 116019747 B CN116019747 B CN 116019747B CN 202310050547 A CN202310050547 A CN 202310050547A CN 116019747 B CN116019747 B CN 116019747B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- guava
- fermentation product
- parts
- fermentation
- sterilizing
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims abstract description 131
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims abstract description 131
- 241000508269 Psidium Species 0.000 title claims abstract description 108
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 33
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims abstract description 34
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims abstract description 33
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims abstract description 26
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims abstract description 18
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims abstract description 18
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 17
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 16
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 12
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 9
- 241000235342 Saccharomycetes Species 0.000 claims abstract description 7
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 4
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 claims description 33
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 claims description 19
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 claims description 19
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 claims description 19
- 244000057717 Streptococcus lactis Species 0.000 claims description 18
- 235000014897 Streptococcus lactis Nutrition 0.000 claims description 18
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 17
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical group [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 15
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 claims description 10
- 239000008213 purified water Substances 0.000 claims description 10
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims description 8
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 7
- 241001608472 Bifidobacterium longum Species 0.000 claims description 6
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 claims description 6
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 claims description 6
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 claims description 6
- 244000199885 Lactobacillus bulgaricus Species 0.000 claims description 6
- 235000013960 Lactobacillus bulgaricus Nutrition 0.000 claims description 6
- 229940009291 bifidobacterium longum Drugs 0.000 claims description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 229940004208 lactobacillus bulgaricus Drugs 0.000 claims description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 6
- 241000235029 Zygosaccharomyces bailii Species 0.000 claims description 5
- 241000722885 Brettanomyces Species 0.000 claims description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 4
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 claims description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 3
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 claims description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 claims description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 claims description 2
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 claims description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 2
- AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-(3-ethyl-3-methylpentyl)propanedioate Chemical compound CCC(C)(CC)CCC(C(=O)OC)C(=O)OC AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 claims description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 25
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 8
- 230000037394 skin elasticity Effects 0.000 abstract description 7
- 238000005282 brightening Methods 0.000 abstract description 6
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 abstract description 6
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 abstract description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 4
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 abstract description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 4
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 abstract description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 4
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 abstract description 3
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 abstract description 2
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 abstract description 2
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 abstract description 2
- 230000002040 relaxant effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 119
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 51
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 30
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 23
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 14
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 14
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 11
- 240000004153 Hibiscus sabdariffa Species 0.000 description 10
- 235000001018 Hibiscus sabdariffa Nutrition 0.000 description 10
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 10
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 10
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 10
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 10
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 9
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 9
- 230000002292 Radical scavenging effect Effects 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 8
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 8
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 7
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 7
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 7
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 6
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 6
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 5
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 5
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 5
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 5
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 description 5
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 description 5
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 5
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 4
- TXFPEBPIARQUIG-UHFFFAOYSA-N 4'-hydroxyacetophenone Chemical compound CC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 TXFPEBPIARQUIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 4
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 4
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 4
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 4
- 230000001153 anti-wrinkle effect Effects 0.000 description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 4
- TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N hydroxyl Chemical compound [OH] TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 6,7-dimethyl-3-[[methyl-[2-[methyl-[[1-[3-(trifluoromethyl)phenyl]indol-3-yl]methyl]amino]ethyl]amino]methyl]chromen-4-one;dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.C=1OC2=CC(C)=C(C)C=C2C(=O)C=1CN(C)CCN(C)CC(C1=CC=CC=C11)=CN1C1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 3
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 3
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 description 3
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 3
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N Acrylic acid Chemical compound OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 229910001369 Brass Inorganic materials 0.000 description 2
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000010951 brass Substances 0.000 description 2
- 229960001631 carbomer Drugs 0.000 description 2
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N diphenyl-(2,4,6-trinitrophenyl)iminoazanium Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1N=[N+](C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011790 ferrous sulphate Substances 0.000 description 2
- 235000003891 ferrous sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 150000002213 flavones Chemical class 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- WQGWDDDVZFFDIG-UHFFFAOYSA-N pyrogallol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1O WQGWDDDVZFFDIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 2
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 2
- 229940015975 1,2-hexanediol Drugs 0.000 description 1
- PKAUICCNAWQPAU-UHFFFAOYSA-N 2-(4-chloro-2-methylphenoxy)acetic acid;n-methylmethanamine Chemical compound CNC.CC1=CC(Cl)=CC=C1OCC(O)=O PKAUICCNAWQPAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010063409 Acarodermatitis Diseases 0.000 description 1
- 238000004131 Bayer process Methods 0.000 description 1
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 1
- 235000007821 Cattley guava Nutrition 0.000 description 1
- PGLIUCLTXOYQMV-UHFFFAOYSA-N Cetirizine hydrochloride Chemical compound Cl.Cl.C1CN(CCOCC(=O)O)CCN1C(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=CC=C1 PGLIUCLTXOYQMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 101100289061 Drosophila melanogaster lili gene Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000747105 Fuscoporia Species 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 description 1
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 description 1
- 241001147746 Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis Species 0.000 description 1
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 description 1
- 102000006833 Multifunctional Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108010047290 Multifunctional Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 244000170064 Myrciaria floribunda Species 0.000 description 1
- 235000006994 Myrciaria floribunda Nutrition 0.000 description 1
- 241000219926 Myrtaceae Species 0.000 description 1
- JYDNKGUBLIKNAM-UHFFFAOYSA-N Oxyallobutulin Natural products C1CC(=O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(CO)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C JYDNKGUBLIKNAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 244000169711 Psidium cattleianum Species 0.000 description 1
- 235000015126 Psidium littorale Nutrition 0.000 description 1
- 206010038084 Rectocele Diseases 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 241000447727 Scabies Species 0.000 description 1
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010051373 Wound haemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 241000235017 Zygosaccharomyces Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000003266 anti-allergic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- FVWJYYTZTCVBKE-ROUWMTJPSA-N betulin Chemical compound C1C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(CO)CC[C@@H](C(=C)C)[C@@H]5[C@H]4CC[C@@H]3[C@]21C FVWJYYTZTCVBKE-ROUWMTJPSA-N 0.000 description 1
- MVIRREHRVZLANQ-UHFFFAOYSA-N betulin Natural products CC(=O)OC1CCC2(C)C(CCC3(C)C2CC=C4C5C(CCC5(CO)CCC34C)C(=C)C)C1(C)C MVIRREHRVZLANQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- CDQSJQSWAWPGKG-UHFFFAOYSA-N butane-1,1-diol Chemical compound CCCC(O)O CDQSJQSWAWPGKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 230000003467 diminishing effect Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 235000011869 dried fruits Nutrition 0.000 description 1
- 208000001848 dysentery Diseases 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- FHKSXSQHXQEMOK-UHFFFAOYSA-N hexane-1,2-diol Chemical compound CCCCC(O)CO FHKSXSQHXQEMOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- WCVRQHFDJLLWFE-UHFFFAOYSA-N pentane-1,2-diol Chemical compound CCCC(O)CO WCVRQHFDJLLWFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 1
- 229940079877 pyrogallol Drugs 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 208000005687 scabies Diseases 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 1
- 230000037067 skin hydration Effects 0.000 description 1
- 230000005808 skin problem Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 description 1
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 239000008782 xin-kang Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明涉及一种番石榴发酵产物的制备方法及其产品和应用，其制备方法包括：将含有番石榴原料的培养基灭菌、冷却后，接种酵母菌液进行一次发酵，得到一次发酵产物；将一次发酵产物灭菌、冷却后，接种乳酸菌液进行二次发酵，得到二次发酵产物；将二次发酵产物灭菌、冷却后，过滤，即得。本发明以番石榴原料为发酵底物，对其依次进行酵母菌发酵和乳酸菌发酵，该制备方法与单一菌株发酵工艺或其他番石榴提取工艺相比，其利用酵母菌和乳酸菌的互补协同增效优势，不仅最大程度地保留了番石榴的功效成分及其活性，还提升了番石榴中营养成分的释放和小分子的转化，使最终的发酵产物具有优异的保湿、抗皱、舒敏、提亮、增加皮肤弹性的功效。
Description
技术领域
本发明属于生物发酵技术领域，涉及一种番石榴发酵产物的制备方法及其产品和应用，具体涉及一种番石榴发酵产物的制备方法及其产品和在制备化妆品中的应用。
背景技术
通过微生物发酵工艺制备天然产物提取物，可以在发酵过程中酶解植物细胞壁结构，更充分地释放天然产物的有效成分，提高其利用率。微生物在发酵过程中，亦会产生次生代谢产物，其中就包括多种生物酶，可以有效地把蛋白质、多糖等生物大分子分解为分子量较小的物质，以蛋白质为例，会被蛋白酶水解为具有与其功能性蛋白质相同序列的特异性小的不同分子量的生物活性肽，其特点是分子量低、结构简单且毒副作用低，故易于被人体吸收发挥更强的生物活性，但又具有更高的安全性。有研究表明，发酵后的提取液可以提高有效成分的物质含量，从而使各种生物活性得到显著提高。此外，微生物发酵还具有成本低、不易致敏等特点，是当今研究和开发的热点。
例如CN113842341A公开了一种玫瑰茄发酵产物及其制备方法和应用，该玫瑰茄发酵产物的制备方法包括：1)将玫瑰茄和溶剂混合，在压强为10-30Mpa下进行高压均质提取，得到玫瑰茄提取液；2)向玫瑰茄提取液中加入培养基，再接种混合菌液进行发酵反应，得到玫瑰茄发酵产物；混合菌液包括酵母菌和乳酸菌。该玫瑰茄发酵产物不仅能保留玫瑰茄本身的有效成分，而且还含有微生物产生新的次级代谢产物，能够增加有效活性成分，减少玫瑰茄可能产生的毒副作用，提升了玫瑰茄发酵产物的功效。
例如CN113288830A公开了一种含有松露白桦茸发酵产物滤液的化妆品原料组合物，包括以下成分：含松露白桦茸酵母菌发酵产物滤液、含松露白桦茸酵乳酸菌双歧杆菌混合发酵产物滤液、1,2-己二醇、对羟基苯乙酮。主要物质由天然发酵制得，具有安全环保的特点，活性物质更为丰富，富含多肽、氨基酸、有机酸、维生素等物质，这些能改善肤质，促进新陈代谢，进而缓解肌肤表面生态平衡带来的肌肤问题，达到护肤的作用。
番石榴，为桃金娘科番石榴属珍珠番石榴和草莓番石榴的成熟果实，是一种热带水果，番石榴味甘、涩、性平，具有止血、止泻、消炎、收敛、燥湿等功效。番石榴果实含有丰富的多糖类成分。临床用于治疗泄泻，久痢，脱肛，湿毒疥疮，创伤出血等症。现代药理研究表明番石榴具有降血糖、降血脂、抗氧化、防衰老、清肝、预防慢性病、润肠通便等作用。目前关于番石榴的生物发酵策略还比较少，且番石榴发酵产物大多应用于保健品领域，开发一种能够应用于化妆品领域的番石榴生物发酵产品是非常有意义的。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种番石榴发酵产物的制备方法及其产品和应用，具体提供一种番石榴发酵产物的制备方法及其产品和在制备化妆品中的应用。由本发明涉及的制备方法制得的番石榴发酵产物外观澄清透明，具有丰富的多酚、有机酸、黄铜、多糖，具有优异的保湿、抗氧化、抗皱、舒敏、提亮、增加皮肤弹性的功效。
为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供一种番石榴发酵产物的制备方法，所述番石榴发酵产物的制备方法包括如下步骤：
(1)将含有番石榴原料的培养基灭菌、冷却后，接种酵母菌液进行一次发酵，得到一次发酵产物；
(2)将一次发酵产物灭菌、冷却后，接种乳酸菌液进行二次发酵，得到二次发酵产物；
(3)将二次发酵产物灭菌、冷却后，过滤，即得所述番石榴发酵产物。
本发明创造性地以番石榴原料为发酵底物，对其依次进行酵母菌发酵和乳酸菌发酵，该制备方法与单一菌株发酵工艺或其他番石榴提取工艺相比，其利用酵母菌和乳酸菌双菌株的互补协同增效优势，不仅最大程度地保留了番石榴的功效成分及其活性，还提升了番石榴中营养成分的释放和小分子的转化，得到更丰富的蛋白质、氨基酸、多糖、黄酮、多酚等物质，同时还与酵母菌和乳酸菌产生的次级代谢产物相互配合，使最终的发酵产物具有优异的保湿、抗氧化、抗皱、舒敏、提亮、增加皮肤弹性的功效，可将其应用于制备具有上述各方面功效的化妆品中。
优选地，所述含有番石榴原料的培养基以重量份数计包括番石榴原料5-30份、氮源1-10份、碳源1-10份、无机盐0.1-0.5份、纯化水55-85份。
在上述用于发酵的培养基中，除了番石榴原料以外还进一步地优选加入氮源、碳源、无机盐，且各类组分以上述特定的质量配比进行组合时具有更优异的发酵效果，即发酵产物的功效更显著。
所述番石榴原料的重量份数可以选择为5份、7份、10份、12份、15份、18份、20份、25份、30份等。
所述氮源的重量份数可以选择为1份、2份、3份、4份、5份、6份、7份、8份、10份等。
所述碳源的重量份数可以选择为1份、2份、3份、4份、5份、6份、7份、8份、10份等。
所述无机盐的重量份数可以选择为0.1份、0.2份、0.3份、0.4份、0.5份等。
所述纯化水的重量份数可以选择为55份、60份、62份、65份、68份、70份、75份、80份、85份等。
上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
所述番石榴原料包括番石榴果、番石榴叶、由番石榴果干燥研磨后得到的番石榴果粉、由番石榴叶干燥研磨后得到的番石榴叶粉中的任意一种或至少两种的组合。
本发明所涉及的番石榴原料包括番石榴果、番石榴叶、番石榴花等以及将其经过各种前处理工艺制备得到的衍生产品，例如经过干燥研磨后得到的粉剂。
优选地，所述氮源选自酵母粉、胰蛋白胨、大豆蛋白胨或牛肉膏中的任意一种或至少两种的组合。
所述碳源选自果糖、葡萄糖、海藻糖、乳糖或半乳糖中的任意一种或至少两种的组合。
所述无机盐选自NaCl和/或K2HPO4。
优选地，所述酵母菌包括酿酒酵母、拜耳接合酵母或酒香酵母中的任意一种或至少两种的组合。
所述酵母菌液的菌浓度为107-109CFU/mL，例如107CFU/mL、5×107CFU/mL、108CFU/mL、5×108CFU/mL、8×108CFU/mL、109CFU/mL等；所述酵母菌液的接种量为3-5％，例如3％、3.5％、4％、4.5％、5％等。
上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述乳酸菌包括植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、乳酸乳球菌、长双歧杆菌或鼠李糖乳杆菌中的任意一种或至少两种的组合。
所述乳酸菌液的菌浓度为107-109CFU/mL，例如107CFU/mL、5×107CFU/mL、108CFU/mL、5×108CFU/mL、8×108CFU/mL、109CFU/mL等；所述乳酸菌液的接种量为3-5％，例如3％、3.5％、4％、4.5％、5％等。
上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述酵母菌为酿酒酵母。
所述乳酸菌为植物乳杆菌和乳酸乳球菌的组合，所述植物乳杆菌与乳酸乳球菌的活菌数之比为(1-3):(2-5)，例如1:2、1:3、1:4、1:5、1:1、2:3、2:5、3:2、3:4、3:5等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
本发明还创造性地发现当酵母菌特定选择为酿酒酵母、乳酸菌特定选择为植物乳杆菌和乳酸乳球菌的组合时，两种菌株的互补协同增效优势更加明显，使最终的发酵产物具有更加优异的保湿、抗氧化、抗皱、舒敏、提亮、增加皮肤弹性的功效。
优选地，所述一次发酵在温度28-35℃(例如28℃、29℃、30℃、31℃、32℃、33℃、34℃、35℃等)、pH＝5.5-7.0(例如pH＝5.7、pH＝6.0、pH＝6.5、pH＝6.8等)下进行24-72h(例如24h、30h、36h、42h、60h、72h等)。
所述二次发酵在温度28-35℃(例如28℃、29℃、30℃、31℃、32℃、33℃、34℃、35℃等)、自然pH下进行24-72h(例如24h、30h、36h、42h、60h、72h等)。
优选地，步骤(1)所述灭菌在115-121℃(例如115℃、117℃、118℃、119℃、120℃、121℃等)下进行20-30min(例如20min、22min、25min、30min等)。
步骤(2)所述灭菌在80-105℃(例如80℃、85℃、90℃、95℃、100℃、105℃等)下进行10-20min(例如10min、12min、15min、20min等)。
步骤(3)所述灭菌在80-90℃(例如80℃、85℃、90℃等)下进行20-30min(例如20min、22min、25min、30min等)。
本发明所涉及的番石榴发酵产物的制备方法需要经过三次灭菌，每次灭菌的工艺条件稍有差异，选择上述限定的特定工艺条件既能保证各步骤发酵菌种不相互干扰，也能更好地保留各类营养成分的活性，使最终的发酵产物呈现更好的保湿、抗氧化、抗皱、舒敏、提亮、增加皮肤弹性的功效。
上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，步骤(3)所述过滤使用8-12μm滤板过滤。
优选地，步骤(3)所述过滤后还包括将滤液与防腐剂进行混合。
所述防腐剂例如可以是对羟基苯乙酮、丁二醇与与1,2-戊二醇的组合。
第二方面，本发明提供根据第一方面所述的制备方法制得的番石榴发酵产物。
第三方面，本发明提供根据第二方面所述的番石榴发酵产物在制备化妆品中的应用。
第四方面，本发明还提供一种多功效的含有番石榴发酵产物的精华水，所述精华水的组分以质量百分含量计包括：第二方面所述的番石榴发酵产物1-20％、pH调节剂0.01-0.5％、增稠剂0.08-0.15％、乳化剂0.08-0.12％、螯合剂0.01-0.05％、水80-95％、防腐剂0.3-0.5％。
相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
本发明创造性地以番石榴原料为发酵底物，对其依次进行酵母菌发酵和乳酸菌发酵，该制备方法与单一菌株发酵工艺或其他番石榴提取工艺相比，其利用酵母菌和乳酸菌双菌株的互补协同增效优势，不仅最大程度地保留了番石榴的全部功效成分及其活性，还提升了番石榴中营养成分的释放和小分子的转化，得到更丰富的蛋白质、氨基酸、多糖、黄酮、多酚等物质，同时还与酵母菌和乳酸菌产生的次级代谢产物相互配合，使最终的发酵产物具有优异的保湿、抗氧化、抗皱、舒敏、提亮、增加皮肤弹性的功效，可将其应用于制备具有上述各方面功效的化妆品中。
附图说明
图1是实施例1制得的番石榴发酵产物的外观图；
图2是志愿者使用应用例1精华水产品前(左)和28天后(右)的面部VISIA测试图。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
下述涉及的部分原料来源信息如下表所示：
| 原料 | 购买源 |
| 酿酒酵母 | 广州优科生物科技有限公司 |
| 拜耳接合酵母 | 广州优科生物科技有限公司 |
| 酒香酵母 | 广州优科生物科技有限公司 |
| 植物乳杆菌 | 广州优科生物科技有限公司 |
| 乳酸乳球菌 | 广州优科生物科技有限公司 |
| 保加利亚乳杆菌 | 广州优科生物科技有限公司 |
| 长双歧杆菌 | 广州优科生物科技有限公司 |
| U20卡波姆 | 路博润特种化工制造有限公司 |
| 乳化剂OLIVEM 1000 | 陕西信康生物科技有限公司 |
其他原料均通过正规市售途径购买获得。
制备例1
本制备例制备番石榴粉：
取成熟新鲜的番石榴果采摘后，切1cm厚薄片后经60℃热风干燥至恒重，将干燥后的果片置于研磨机中打粉，粉碎后过60目筛，得到番石榴粉。
制备例2
本制备例制备酵母菌种子液：
将酿酒酵母、拜耳接合酵母或酒香酵母分别接种至YPD培养基中，培养传代3次，每代培养12h，得到酿酒酵母种子液、拜耳接合酵母种子液、酒香酵母种子液。
制备例3
本制备例制备乳酸菌种子液：
将植物乳杆菌、乳酸乳球菌、保加利亚乳杆菌和长双歧杆菌分别接种至MRS培养基中，培养传代3次，每代培养10h，得到植物乳杆菌种子液、乳酸乳球菌种子液、保加利亚乳杆菌种子液和长双歧杆菌种子液。
实施例1
本实施例提供一种番石榴发酵产物，其制备方法如下：
(1)将番石榴粉8份、酵母粉2份、果糖3份、NaCl 0.2份、K2HPO4 0.1份、纯化水80份混合，在120℃下灭菌25min，冷却至25℃，接种5％的酿酒酵母种子液(108CFU/mL)，控制pH＝5.8-6.2，在35℃下发酵48h，得到一次发酵产物；
(2)将一次发酵产物在90℃下灭菌15min，冷却至25℃，接种2％的植物乳杆菌种子液(108CFU/mL)和2％的乳酸乳球菌种子液(108CFU/mL)，在35℃下发酵30h，得到二次发酵产物；
(3)将二次发酵产物在85℃下灭菌25min，冷却至45℃，10μm滤板过滤、取上清液，其外观如图1所示，产品外观澄清透明，得到番石榴发酵产物。
实施例2
本实施例提供一种番石榴发酵产物，其制备方法如下：
(1)将番石榴粉5份、胰蛋白胨4份、葡萄糖4份、NaCl 0.2份、K2HPO40.1份、纯化水75份混合，在115℃下灭菌30min，冷却至25℃，接种3％的酿酒酵母种子液(108CFU/mL)，控制pH＝5.8-6.2，在35℃下发酵55h，得到一次发酵产物；
(2)将一次发酵产物在100℃下灭菌10min，冷却至25℃，接种1％的植物乳杆菌种子液(108CFU/mL)和2％的乳酸乳球菌种子液(108CFU/mL)，在35℃下发酵36h，得到二次发酵产物；
(3)将二次发酵产物在80℃下灭菌30min，冷却至40℃，8μm滤板过滤、取上清液，得到番石榴发酵产物。
实施例3
本实施例提供一种番石榴发酵产物，其制备方法如下：
(1)将番石榴粉10份、大豆蛋白胨2份、乳糖2份、NaCl 0.2份、K2HPO40.1份、纯化水85份混合，在121℃下灭菌20min，冷却至25℃，接种4％的酿酒酵母种子液(108CFU/mL)，控制pH＝5.8-6.2，在30℃下发酵72h，得到一次发酵产物；
(2)将一次发酵产物在90℃下灭菌20min，冷却至25℃，接种1％的植物乳杆菌种子液(108CFU/mL)和3％的乳酸乳球菌种子液(108CFU/mL)，在32℃下发酵48h，得到二次发酵产物；
(3)将二次发酵产物在90℃下灭菌20min，冷却至50℃，12μm滤板过滤、取上清液，得到番石榴发酵产物。
实施例4
本实施例提供一种番石榴发酵产物，其制备方法与实施例1的区别仅在于步骤(1)中将5％的酿酒酵母种子液(108CFU/mL)替换为5％的拜耳接合酵母种子液(108CFU/mL)，其他条件均保持不变。
实施例5
本实施例提供一种番石榴发酵产物，其制备方法与实施例1的区别仅在于步骤(1)中将5％的酿酒酵母种子液(108CFU/mL)替换为5％的酒香酵母种子液(108CFU/mL)，其他条件均保持不变。
实施例6
本实施例提供一种番石榴发酵产物，其制备方法与实施例1的区别仅在于步骤(2)中将2％的植物乳杆菌种子液(108CFU/mL)和2％的乳酸乳球菌种子液(108CFU/mL)替换为4％的植物乳杆菌种子液(108CFU/mL)，其他条件均保持不变。
实施例7
本实施例提供一种番石榴发酵产物，其制备方法与实施例1的区别仅在于步骤(2)中将2％的植物乳杆菌种子液(108CFU/mL)和2％的乳酸乳球菌种子液(108CFU/mL)替换为4％的乳酸乳球菌种子液(108CFU/mL)，其他条件均保持不变。
实施例8
本实施例提供一种番石榴发酵产物，其制备方法与实施例1的区别仅在于步骤(2)中将2％的植物乳杆菌种子液(108CFU/mL)和2％的乳酸乳球菌种子液(108CFU/mL)替换为2％的保加利亚乳杆菌种子液(108CFU/mL)和2％的长双歧杆菌种子液(108CFU/mL)，其他条件均保持不变。
实施例9
本实施例提供一种番石榴发酵产物，其制备方法与实施例1的区别仅在于步骤(2)中将一次发酵产物在90℃下灭菌15min替换为将一次发酵产物在115℃下灭菌10min，其他条件均保持不变。
实施例10
本实施例提供一种番石榴发酵产物，其制备方法与实施例1的区别仅在于步骤(2)中将一次发酵产物在90℃下灭菌15min替换为将一次发酵产物在75℃下灭菌30min，其他条件均保持不变。
对比例1
本对比例提供一种番石榴发酵产物，其制备方法如下：
(1)将番石榴粉8份、酵母粉2份、果糖3份、NaCl 0.2份、K2HPO4 0.1份、纯化水80份混合，在120℃下灭菌25min，冷却至25℃，接种5％的酿酒酵母种子液(108CFU/mL)，控制pH＝5.8-6.2，在35℃下发酵48h，得发酵液；
(2)将发酵液在85℃下灭菌25min，冷却至45℃，10μm滤板过滤、取上清液，得到番石榴发酵产物。
对比例2
本对比例提供一种番石榴发酵产物，其制备方法如下：
(1)将番石榴粉8份、酵母粉2份、果糖3份、NaCl 0.2份、K2HPO4 0.1份、纯化水80份混合，在120℃下灭菌25min，冷却至25℃，接种2％的植物乳杆菌种子液(108CFU/mL)和2％的乳酸乳球菌种子液(108CFU/mL)，在35℃下发酵30h，得到发酵液；
(2)将发酵液在85℃下灭菌25min，冷却至45℃，10μm滤板过滤、取上清液，得到番石榴发酵产物。
对比例3
本对比例提供一种番石榴发酵产物，其制备方法如下：
(1)将番石榴粉8份、酵母粉2份、果糖3份、NaCl 0.2份、K2HPO4 0.1份、纯化水80份混合，在120℃下灭菌25min，冷却至25℃，接种2％的植物乳杆菌种子液(108CFU/mL)和2％的乳酸乳球菌种子液(108CFU/mL)，在35℃下发酵30h，得到一次发酵产物；
(2)将一次发酵产物在90℃下灭菌15min，冷却至25℃，接种5％的酿酒酵母种子液(108CFU/mL)，控制pH＝5.8-6.2，在35℃下发酵48h，得到二次发酵产物；
(3)将二次发酵产物在85℃下灭菌25min，冷却至45℃，10μm滤板过滤、取上清液，得到番石榴发酵产物。
对比例4
本对比例提供一种番石榴提取液，其制备方法如下：
取制备例1制得的番石榴粉8份、纯化水80份混合，在80℃下加热提取60min，冷却至45℃，静置，采用10μm滤板过滤、取上清液，得到番石榴提取液。
测试例1
本测试例对实施例1-10和对比例1-4制得的产物进行外观、气味、固含量、多酚含量、有机酸含量、黄铜含量、多糖含量的测定。
(1)固含量检测：分别称取2g(m0)实施例1-10、对比例1-4的产物置于95℃下干燥120min，取出放入干燥器中，冷却至25℃后，称重为m1；再按照固含量＝(m1/m0)×100％的公式计算固含量。检测结果如表1所示。
(2)多酚含量检测：分别量取1.5mL实施例1-10、对比例1-4的产物，置于10mL带刻度具塞试管中，加1mL福林酚试剂，摇匀，加2mL碳酸钠溶液，摇匀，补足定容至10mL，摇匀，75℃水浴15min，取出冷却至室温，在760nm波长处测定吸光度，结果每组平均测定3次，取平均值，计算多酚含量。检测结果如表1所示。
(3)有机酸含量检测：
将实施例1-10、对比例1-4的产物用去离子水稀释5倍，用0.22μm微孔滤膜过滤，利用高效液相色谱测定发酵滤液中的有机酸含量。色谱条件：
色谱柱为Aminex@HPX-87H Exclusion Column柱(300mm×7.8mm)；
流动相为0.275％(体积比)的浓硫酸溶液；
流速为0.4mL/min；
柱温为40℃；
进样量为10μL；
检测波长为210nm。检测结果如表1所示。
(4)黄酮含量检测
将实施例1-10、对比例1-4的产物采用分光光度法，检测波长508nm(参照“番石榴果实中总黄酮的提取及含量测定，白丽丽等，中国现代中药，第19卷第2期，2017年2月”中公开的方法进行)。
检测结果如表1所示。
(5)多糖含量检测
将实施例1-10、对比例1-4的产物采用分光光度法，检测波长490nm(参照“番石榴叶中多糖超声提取工艺优化，曾昭智等，广东药学院学报，29(2)，2013年4月”中公开的方法进行)。
检测结果如表1所示。
表1
由表1数据可知：由本发明所涉及的特定制备工艺制得的番石榴发酵产物具有高水平的多酚、有机酸、黄酮和多糖含量，为其优异的抗氧化、抗皱、舒敏等功效提供基础，且番石榴发酵产物的制备工艺条件影响产物中多酚、有机酸、黄酮和多糖含量。
测试例2
本测试例对实施例1-10和对比例1-4制得的产物进行羟自由基清除率、DPPH清除率、超氧阴离子自由基清除率、弹性蛋白酶抑制率、TNF-α抑制率的测定。
(1)羟自由基清除实验
主要试剂：水杨酸(分析纯，国药集团化学试剂有限公司)、硫酸亚铁(分析纯，国药集团化学试剂有限公司)、无水乙醇(分析纯，天津市富宇精细化工有限公司)、双氧水。
主要设备：多功能酶标仪(Spectra Max M5 Molecular Device)。
实验方法：设有样品组(实施例1-10和对比例1-4的产物稀释至1/10)和阴性对照组，分别依次加入0.1份硫酸亚铁、0.1份乙醇、0.1份水杨酸、0.1份样品或阴性对照、1份等离子水、0.1份双氧水到1.5mL离心管中，盖紧管盖上下颠倒摇匀，在37℃水浴锅中保温15min，将溶液移到96孔板中，每组三个复孔。酶标仪测定510nm处吸光度。
羟自由基清除率由如下公式计算得到：
羟自由基清除率％＝{[A0-(AX-AX0)]/A0}×100％，其中，A0为阴性对照组的吸光度，Ax为样品组的吸光度，Axo为样品背景的吸光度。测试结果如表2所示。
(2)DPPH清除实验
根据《化妆品-自由基(DPPH)清除实验方法(T/SHRH006-2018)》，分别检测上述实施例1-10和对比例1-4所制得的产物和空白对照组的DPPH自由基的清除率(％)。
实验方法：采用96孔板，每组设置三个复孔，体系为200μL。样品组：取适量各组产物冷冻干燥产物，溶于100μL蒸馏水中，使待测样品在体系中的终浓度为10％，并向反应体系中加入100μL 0.1mM的DPPH溶液；对照组：取100μL蒸馏水，再加入100μL 0.1mM的DPPH溶液。反应体系构建完成后，避光摇晃10min，使用酶标仪测试在520nm处的吸光度。
清除率的计算方法：清除率(％)＝[(A0-Ax)/A0]×100％，A0为对照组吸光度，Ax为样品组吸光度。DPPH自由基清除测试结果如表2所示。
(3)超氧阴离子自由基清除实验
实验方法：分别取Tris-HCl缓冲液4.5mL两组(A组为待测样品，B组为空白对照)，置于25℃水浴锅中保温20min，保温结束后在A组中加入5mL各组冷冻干燥产物的乙醇水溶液，在B组中加入5mL乙醇水溶液作为空白对照。分别在各组中加入0.3mL邻苯三酚溶液，迅速摇匀充分反应4min后加入0.2mLHCl溶液终止反应。在325nm处测定吸光度值，计算超氧阴离子清除，阳性对照为抗坏血酸。
清除率的计算方法：清除率(％)＝[(ODB-ODA)/ODB]×100％，ODB为对照组的吸光度，ODA为样品溶液的吸光度。超氧阴离子自由基清除测试结果如表2所示。
(4)弹性蛋白酶抑制实验
实验方法：采用弹性蛋白酶(猪胰)作为研究对象。设有样品组为实施例1-10和对比例1-4的冷冻干燥产物的5％稀释液和阴性对照组，每组设立3个平行，分别取10μL的待测样品加入到96孔板，阴性对照组加10μL稀释溶剂，再向96孔板中加入20μL浓度为0.1U/mL的弹性蛋白酶溶液。将96孔板置于25℃恒温培养箱中孵育15min，然后加入50μL浓度为1mg/mL的底物(98％的N-琥珀酰-L-丙氨酰-L-丙氨酸)，使用酶标仪测量样品在410nm下的吸光度，并计算待测样品对弹性蛋白酶活性抑制率。
弹性蛋白酶活性抑制率由如下公式计算得到：
弹性蛋白酶活性抑制率(％)＝[(△A-△B)/△A]×100％，△A表示不含待测样品的阴性对照组吸光度值，△B代表不同组别待测液吸光度值。弹性蛋白酶抑制率越高，说明产物的抗皱效果越好。弹性蛋白酶抑制测试结果如表2所示。
(5)TNF-α抑制实验
实验方法：采用RAW264.7巨噬细胞作为研究对象，通过脂多糖LPS(细菌内毒素)刺激细胞建立细胞炎症模型。接种巨噬细胞至12孔板，在培养箱以37℃、5％ CO2通气量条件下孵育24h，分别加入实施例1-10和对比例1-4的产物的2％稀释液，2h后加入LPS(1μg/ml)，并设置不添加稀释液只添加LPS的组以及不添加LPS只添加稀释液的组，刺激24h，收集上清液，离心，检测。采用ELISA试剂盒分析RAW264.7的促炎性炎症因子TNF-α释放量水平。
TNF-α抑制率由如下公式计算得到：
TNF-α抑制率(％)＝[(LPS刺激组炎症因子浓度-待测物作用组炎症因子浓度)/(LPS刺激组炎症因子浓度-未刺激组炎症因子浓度)]×100％。
TNF-α抑制率越高，说明产物的抗炎效果越好。TNF-α抑制测试结果如表2所示。
表2
由表2数据可知：由本发明所涉及的特定制备工艺制得的番石榴发酵产物具有优异的抗氧化、抗皱和舒敏功效，且番石榴发酵产物的制备工艺条件影响上述功效。
应用例1
本应用例提供一种含有番石榴发酵产物的精华水，其配方组分以质量百分含量计包括：实施例1制得的番石榴发酵产物10％、pH调节剂(三乙醇胺、调节体系pH＝6.0)、增稠剂(U20卡波姆)0.1％、乳化剂(OLIVEM 1000)0.1％、螯合剂(EDTA 2Na)0.03％、余量为水。
应用例2-10
应用例2-10提供九种含有番石榴发酵产物的精华水，其配方组分与应用例1的区别仅在于将实施例1制得的番石榴发酵产物等量替换为实施例2-10制得的番石榴发酵产物，其他组分及含量均保持不变。
对比应用例1-4
对比应用例1-4提供四种精华水，其配方组分与应用例1的区别仅在于将实施例1制得的番石榴发酵产物等量替换为对比例1-4制得的产物，其他组分及含量均保持不变。
测试例3
人体评测试验：
(1)测试对象：挑选年龄分布为30-55周岁的志愿者共140人，随机分成14组，每组8名女性、2名男性。
(2)使用方法：每晚睡前清洁面部后，分别使用等量的应用例1-10和对比应用例1-4的精华水按摩至吸收。每日1次，每周测试1次，测试前保证皮肤清洁，在室内静坐10分钟，进行仪器测试，使用VISIA全脸分析仪照出测试图片。测试4周。测试期间不得更换或合用其它同类产品。
(3)测试仪器：VISIA全脸分析仪，通过此仪器分析皮肤面部皱纹、纹理变化情况。MPA580皮肤测试仪测试皮肤水合度等指标。
(4)测试注意事项：每次测试，保证一个人操作仪器，保证探头与皮肤接触时，力量恒定；保持环境温度，湿度一致。
测试结果如表3所示(正值表是数量提升，负值表示数量下降)：
表3
由表3数据可知：本发明所涉及的含有番石榴发酵产物的精华水具有优异的保湿、除皱、增加皮肤弹性和皮肤亮度的功效，且番石榴发酵产物的制备工艺条件影响上述功效。
同时，应用例1组产品对肌肤的舒缓效果如图2所示，左图为产品使用前的测试图片、右图为产品使用28天后的测试图片，由图可知：使用产品后，面部红色区域面积及深度得到明显减少，肌肤敏感情况得到明显改善。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的一种番石榴发酵产物的制备方法及其产品和应用，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
Claims (5)
1.一种番石榴发酵产物的制备方法，其特征在于，所述番石榴发酵产物的制备方法为如下步骤：
（1）将含有番石榴原料的培养基灭菌、冷却后，接种酵母菌液进行一次发酵，得到一次发酵产物；
（2）将一次发酵产物灭菌、冷却后，接种乳酸菌液进行二次发酵，得到二次发酵产物；
（3）将二次发酵产物灭菌、冷却后，过滤，即得所述番石榴发酵产物；
所述含有番石榴原料的培养基以重量份数计由番石榴原料5-30份、氮源1-10份、碳源1-10份、无机盐0.1-0.5份、纯化水55-85份组成；
所述番石榴原料选自番石榴果和/或番石榴叶；
所述酵母菌选自酿酒酵母、拜耳接合酵母或酒香酵母中的任意一种或至少两种的组合；所述酵母菌液的菌浓度为107-109 CFU/mL，所述酵母菌液的接种量为3-5%；
所述乳酸菌选自植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌、乳酸乳球菌或长双歧杆菌中的任意一种或至少两种的组合；所述乳酸菌液的菌浓度为107-109 CFU/mL，所述乳酸菌液的接种量为3-5%；
所述一次发酵在温度28-35℃、pH=5.5-7.0下进行24-72 h；所述二次发酵在温度28-35℃、自然pH下进行24-72 h；
步骤（1）所述灭菌在115-121℃下进行20-30 min；步骤（2）所述灭菌在80-105℃下进行10-20 min；步骤（3）所述灭菌在80-90℃下进行20-30 min。
2.根据权利要求1所述的番石榴发酵产物的制备方法，其特征在于，所述氮源选自酵母粉、胰蛋白胨、大豆蛋白胨或牛肉膏中的任意一种或至少两种的组合；
所述碳源选自果糖、葡萄糖、海藻糖、乳糖或半乳糖中的任意一种或至少两种的组合；
所述无机盐选自NaCl和/或K2HPO4。
3.根据权利要求1所述的番石榴发酵产物的制备方法，其特征在于，所述酵母菌为酿酒酵母；
所述乳酸菌为植物乳杆菌和乳酸乳球菌的组合，所述植物乳杆菌与乳酸乳球菌的活菌数之比为(1-3):(2-5)。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的制备方法制得的番石榴发酵产物。
5.根据权利要求4所述的番石榴发酵产物在制备化妆品中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310050547.1A CN116019747B (zh) | 2023-02-01 | 2023-02-01 | 一种番石榴发酵产物的制备方法及其产品和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310050547.1A CN116019747B (zh) | 2023-02-01 | 2023-02-01 | 一种番石榴发酵产物的制备方法及其产品和应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116019747A CN116019747A (zh) | 2023-04-28 |
| CN116019747B true CN116019747B (zh) | 2023-11-14 |
Family
ID=86073706
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310050547.1A Active CN116019747B (zh) | 2023-02-01 | 2023-02-01 | 一种番石榴发酵产物的制备方法及其产品和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116019747B (zh) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116473871A (zh) * | 2023-05-09 | 2023-07-25 | 广东丸美生物技术股份有限公司 | 一种含有β-葡聚糖的皮肤修复敷料及其制备方法 |
| CN116832097A (zh) * | 2023-07-03 | 2023-10-03 | 广州湾区生物医药研究院 | 一种荔枝核发酵产物及其制备方法与在制备具有抗炎作用的产品中的应用 |
| CN117530907B (zh) * | 2024-01-05 | 2024-06-18 | 广州优科生物科技有限公司 | 一种控油舒缓和护理头皮的植物发酵产物和应用 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20090034241A (ko) * | 2007-10-02 | 2009-04-07 | 동국대학교 산학협력단 | 천연 식물소재 및 한약재의 발효방법, 상기 방법에 의해서제조된 발효물 및 이를 함유하는 약학 조성물, 화장품조성물 및 식품 조성물 |
| KR20090123458A (ko) * | 2008-05-28 | 2009-12-02 | 주식회사 엘씨에스바이오텍 | 천연 식물소재 또는 한약재의 발효방법, 상기 방법에의해서 제조된 발효물 및 이를 함유하는 화장료 조성물,식료품 조성물 및 약학 조성물 |
| KR20180057753A (ko) * | 2016-11-21 | 2018-05-31 | (주)에코맘의 산골이유식 농업회사법인 | 구아바잎 발효대사체 제조방법 및 아토피 피부염 증상 개선용 구아바잎 발효대사체 조성물 |
| CN115105452A (zh) * | 2022-08-23 | 2022-09-27 | 广州优科生物科技有限公司 | 一种红茶发酵滤液及其制备方法和应用 |
| CN115554226A (zh) * | 2022-11-11 | 2023-01-03 | 广州优科生物科技有限公司 | 一种多重菌株发酵滤液及其制备方法和应用 |
-
2023
- 2023-02-01 CN CN202310050547.1A patent/CN116019747B/zh active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20090034241A (ko) * | 2007-10-02 | 2009-04-07 | 동국대학교 산학협력단 | 천연 식물소재 및 한약재의 발효방법, 상기 방법에 의해서제조된 발효물 및 이를 함유하는 약학 조성물, 화장품조성물 및 식품 조성물 |
| KR20090123458A (ko) * | 2008-05-28 | 2009-12-02 | 주식회사 엘씨에스바이오텍 | 천연 식물소재 또는 한약재의 발효방법, 상기 방법에의해서 제조된 발효물 및 이를 함유하는 화장료 조성물,식료품 조성물 및 약학 조성물 |
| KR20180057753A (ko) * | 2016-11-21 | 2018-05-31 | (주)에코맘의 산골이유식 농업회사법인 | 구아바잎 발효대사체 제조방법 및 아토피 피부염 증상 개선용 구아바잎 발효대사체 조성물 |
| CN115105452A (zh) * | 2022-08-23 | 2022-09-27 | 广州优科生物科技有限公司 | 一种红茶发酵滤液及其制备方法和应用 |
| CN115554226A (zh) * | 2022-11-11 | 2023-01-03 | 广州优科生物科技有限公司 | 一种多重菌株发酵滤液及其制备方法和应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN116019747A (zh) | 2023-04-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN116019747B (zh) | 一种番石榴发酵产物的制备方法及其产品和应用 | |
| CN115105452B (zh) | 一种红茶发酵滤液及其制备方法和应用 | |
| CN113318037B (zh) | 一种提升牡丹花活性成分含量的微生物发酵方法及用途 | |
| CN115554226B (zh) | 一种多重菌株发酵滤液及其制备方法和应用 | |
| CN110946792A (zh) | 藜麦发酵物及其应用 | |
| CN105861381A (zh) | 一种植物乳杆菌发酵人参液方法 | |
| CN106726949B (zh) | 一种葡萄籽发酵原浆化妆品及其制备方法与应用 | |
| CN109939064B (zh) | 含益生菌发酵代谢产物的精华液及其在化妆品中的应用 | |
| CN116211767B (zh) | 一种茉莉花/红茶发酵滤液的制备方法及其应用 | |
| CN113476388A (zh) | 化妆品用百合发酵物及其制备方法 | |
| CN113520942A (zh) | 一种抗氧化、抗衰老的五参发酵物及其制备方法和应用 | |
| CN115554220A (zh) | 一种具有护肤作用的微生物发酵原液及其制备方法与应用 | |
| CN113398045A (zh) | 一种抗衰老、舒缓的芦荟发酵物及其制备方法与应用 | |
| CN112168727A (zh) | 一种含有灵芝子实体孢子粉发酵液的精华及其制备方法 | |
| CN115927128B (zh) | 一种透明颤菌发酵产物及其制备方法与应用 | |
| KR101776613B1 (ko) | 식물성 유산균을 이용한 유산균 생성물질 제조방법 | |
| CN115414290B (zh) | 一种具有保湿、抗氧化、抗炎功效的中药组合物及其制备和应用 | |
| CN113041200B (zh) | 一种含释迦果多重发酵液的化妆品及其制备方法 | |
| CN116211764A (zh) | 组合物及其发酵产物与在制备化妆品中的应用 | |
| CN115154393A (zh) | 一种芦荟发酵液及其制备方法与应用 | |
| CN110638697B (zh) | 一种赤芝乳酸菌发酵提取物的制备及应用 | |
| CN113648254A (zh) | 可用于化妆品的羽扇豆针叶樱桃发酵物及其制备方法 | |
| CN113632922A (zh) | 一种溶胞物、以及制备方法与应用 | |
| CN113648262A (zh) | 化妆品用百合针叶樱桃发酵物及其制备方法 | |
| KR20220103315A (ko) | 수박의 줄기 및 잎 추출물의 발효물을 유효성분으로 포함하는 항산화 또는 항염증용 화장료 조성물 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |