CN116832097A - 一种荔枝核发酵产物及其制备方法与在制备具有抗炎作用的产品中的应用 - Google Patents

一种荔枝核发酵产物及其制备方法与在制备具有抗炎作用的产品中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种荔枝核发酵产物及其制备方法与在制备具有抗炎作用的产品中的应用。所述的荔枝核发酵产物的制备方法，其包含如下步骤：(1)取荔枝核粉与营养物质以及水混合后得发酵体系；(2)在发酵体系中接种发酵菌种进行发酵，发酵结束后取发酵液浓缩干燥后得发酵液浓缩产物，即所述的荔枝核发酵产物；步骤(2)中所述的发酵菌种为酿酒酵母。本发明以荔枝核为原料通过本发明上述方法发酵制备得到的荔枝核发酵产物，其抗炎作用显著高于以荔枝核为原料通过提取方法制备得到的荔枝核提取物。由于本发明所述的荔枝核发酵产物具有较好的抗炎作用；因此，将其作为活性成分用于制备具有抗炎作用的药物、护肤品或化妆品具有重要的应用价值。

Description

一种荔枝核发酵产物及其制备方法与在制备具有抗炎作用的 产品中的应用
技术领域
本发明涉及发酵产物技术领域，具体涉及一种荔枝核发酵产物及其制备方法与在制备具有抗炎作用的产品中的应用。
背景技术
荔枝核为无患子科植物荔枝Litchi chinensis Sonn.的干燥成熟种子；其具有行气散结、祛寒止痛之功效；主要用于寒疝腹痛、睾丸肿痛。
中国发明专利CN108272977A公开了一种含荔枝核提取物的抗男性睾丸炎药物及其制备方法；其包括以下重量份的原料：荔枝核15-25份、麻黄3-6份、柴胡5-8份、鸡血藤6-10份、龙胆草2-4份、薏米6-8份、黄精2.5-5份、白芨3-6份、枇杷叶4-7份和芡实5-8份。该发明通过将不同的原料采用不同的提取工艺，通过各种提取液的相须、相使可以起到协同作用，从而提高药效；各种提取液的相畏、相杀可以消除毒副作用，制备的成品具有安全有效的治疗睾丸炎的作用。
上述发明虽然公开了荔枝核具有治疗睾丸炎的作用；但是其必须通过与其它中药复配后才能达到较好的效果。发明人在实际研究中发现，以单独的荔枝核为原料，通过提取工艺制备得到的荔枝核提取物，其抗炎作用不佳；有待进一步提高。
发明内容
为了克服现有技术中存在的至少之一的技术问题，本发明首先提供了一种荔枝核发酵产物的制备方法。
本发明所要解决上述技术问题，通过以下技术方案予以实现：
本发明首先提供了一种荔枝核发酵产物的制备方法，其包含如下步骤：
(1)取荔枝核粉与营养物质以及水混合后得发酵体系；
(2)在发酵体系中接种发酵菌种进行发酵，发酵结束后取发酵液浓缩干燥后得发酵液浓缩产物，即所述的荔枝核发酵产物；
步骤(2)中所述的发酵菌种为酿酒酵母。
发明人在研究中惊奇的发现，以荔枝核为原料通过本发明上述方法发酵制备得到的荔枝核发酵产物，其抗炎作用显著高于以荔枝核为原料通过提取方法制备得到的荔枝核提取物。
优选地，步骤(1)中所述的营养物质包含酵母粉、蛋白胨以及葡萄糖。
进一步优选地，发酵体系中荔枝核粉与酵母粉、蛋白胨、葡萄糖以及水的重量比为10～20:1～2:2～4:2～4:100～200。
最优选地，发酵体系中荔枝核粉与酵母粉、蛋白胨、葡萄糖以及水的重量比为15:1.5:3:3:150；
优选地，步骤(2)中发酵菌种的接种重量为发酵体系重量的4～6％。
最优选地，步骤(2)中发酵菌种的接种重量为发酵体系重量的5％。
优选地，步骤(2)中所述的发酵菌种由酿酒酵母和保加利亚乳杆菌组成。
发明人在进一步研究中发现，在本发明中，发酵菌种的组成，对于制备得到的荔枝核发酵产物的抗炎作用起着重要的影响。发明人在大量的实验中惊奇的发现，在发酵过程中加入保加利亚乳杆菌，采用酿酒酵母和保加利亚乳杆菌共同发酵制备得到的荔枝核发酵产物，其抗炎作用要显著高于采用单独的酿酒酵母发酵制备得到的荔枝核发酵产物。
优选地，酿酒酵母和保加利亚乳杆菌的重量比为2～4:1。
最优选地，酿酒酵母和保加利亚乳杆菌的重量比为3:1。
优选地，所述的发酵是指在25～30℃下发酵40～60h。
最优选地，所述的发酵是指在28℃下发酵48h。
优选地，进一步将发酵液浓缩产物上D101型大孔树脂柱，先用3～6倍柱体积的体积分数为32～35％的乙醇水溶液进行洗脱除杂；接着再用3～6倍柱体积的体积分数为57～60％的乙醇水溶液进行洗脱，收集体积分数为57～60％的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得大孔树脂柱活性部位，即所述的荔枝核发酵产物。
最优选地，进一步将发酵液浓缩产物上D101型大孔树脂柱，先用5倍柱体积的体积分数为33％的乙醇水溶液进行洗脱除杂；接着再用5倍柱体积的体积分数为58％的乙醇水溶液进行洗脱，收集体积分数为58％的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得大孔树脂柱活性部位，即所述的荔枝核发酵产物。
发明人在进一步研究中发现，将发酵液浓缩产物通过本发明所述的大孔树脂柱洗脱可以进一步富集得到更多的抗炎活性成分；使得制备得到的荔枝核发酵产物的抗炎作用相比于发酵液浓缩产物得到了进一步的大幅提高。
发明人在研究中还发现，大孔树脂柱的洗脱条件，对于进一步制备得到的荔枝核发酵产物相比于发酵液浓缩产物能否进一步大幅提高抗炎作用起着决定性的作用。发明人在大量的实验中惊奇的发现，只有在本发明所述大孔树脂洗脱条件下制备得到的荔枝核发酵产物才能够富集得到大量的抗炎活性成分，其抗炎作用与发酵液浓缩产物相比，才能得到进一步的大幅提高；而在其它大孔树脂洗脱条件下制备得到的荔枝核发酵产物并不能够富集得到大量的抗炎活性成分，其抗炎作用与发酵液浓缩产物相比，并不能得到提高或大幅提高。
本发明还提供了一种由上述制备方法制备得到的荔枝核发酵产物。
本发明还提供了一种上述荔枝核发酵产物在制备具有抗炎作用的产品中的应用。
优选地，所述的产品为药物、护肤品或化妆品。
有益效果：本发明提供了一种全新的荔枝核发酵产物的制备方法，以荔枝核为原料通过本发明上述方法发酵制备得到的荔枝核发酵产物，其抗炎作用显著高于以荔枝核为原料通过提取方法制备得到的荔枝核提取物。由于本发明所述的荔枝核发酵产物具有较好的抗炎作用；因此，将其作为活性成分用于制备具有抗炎作用的药物、护肤品或化妆品具有重要的应用价值。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步解释本发明，但实施例对本发明并不做任何形式的限定。
以下实施例中的酿酒酵母采用的是安琪白酒王酿酒高活性干酵母；所述的保加利亚乳杆菌采用的是100亿CFU/g的保加利亚乳杆菌冻干粉。
实施例1荔枝核发酵产物的制备
(1)取荔枝核粉与酵母粉、蛋白胨、葡萄糖以及水混合后得发酵体系；其中，荔枝核粉与酵母粉、蛋白胨、葡萄糖以及水的重量比为15:1.5:3:3:150；
(2)在发酵体系中接种发酵菌种，放在摇床(摇床转速为200rpm)中于
28℃下进行发酵48h，发酵结束后取发酵液浓缩干燥后得发酵液浓缩产物，即所述的荔枝核发酵产物；
步骤(2)中发酵菌种的接种重量为发酵体系重量的5％；所述的发酵菌种为酿酒酵母。
实施例2荔枝核发酵产物的制备
(1)取荔枝核粉与酵母粉、蛋白胨、葡萄糖以及水混合后得发酵体系；其中，荔枝核粉与酵母粉、蛋白胨、葡萄糖以及水的重量比为10:2:4:2:100；
(2)在发酵体系中接种发酵菌种，放在摇床(摇床转速为200rpm)中于25℃下进行发酵60h，发酵结束后取发酵液浓缩干燥后得发酵液浓缩产物，即所述的荔枝核发酵产物；
步骤(2)中发酵菌种的接种重量为发酵体系重量的6％；所述的发酵菌种为酿酒酵母。
实施例3荔枝核发酵产物的制备
(1)取荔枝核粉与酵母粉、蛋白胨、葡萄糖以及水混合后得发酵体系；其中，荔枝核粉与酵母粉、蛋白胨、葡萄糖以及水的重量比为20:1:2:4:200；
(2)在发酵体系中接种发酵菌种，放在摇床(摇床转速为200rpm)中于30℃下进行发酵40h，发酵结束后取发酵液浓缩干燥后得发酵液浓缩产物，即所述的荔枝核发酵产物；
步骤(2)中发酵菌种的接种重量为发酵体系重量的4％；所述的发酵菌种为酿酒酵母。
实施例4荔枝核发酵产物的制备
(1)取荔枝核粉与酵母粉、蛋白胨、葡萄糖以及水混合后得发酵体系；其中，荔枝核粉与酵母粉、蛋白胨、葡萄糖以及水的重量比为15:1.5:3:3:150；
(2)在发酵体系中接种发酵菌种，放在摇床(摇床转速为200rpm)中于
28℃下进行发酵48h，发酵结束后取发酵液浓缩干燥后得发酵液浓缩产物，即所述的荔枝核发酵产物；
步骤(2)中发酵菌种的接种重量为发酵体系重量的5％；所述的发酵菌种由重量比为3:1的酿酒酵母和保加利亚乳杆菌组成。
实施例5荔枝核发酵产物的制备
(1)取荔枝核粉与酵母粉、蛋白胨、葡萄糖以及水混合后得发酵体系；其中，荔枝核粉与酵母粉、蛋白胨、葡萄糖以及水的重量比为15:1.5:3:3:150；
(2)在发酵体系中接种发酵菌种，放在摇床(摇床转速为200rpm)中于28℃下进行发酵48h，发酵结束后取发酵液浓缩干燥后得发酵液浓缩产物；其中，发酵菌种的接种重量为发酵体系重量的5％；所述的发酵菌种由重量比为3:1的酿酒酵母和保加利亚乳杆菌组成；
(3)将发酵液浓缩产物上D101型大孔树脂柱(装填有30倍发酵液浓缩产物重量的D101型大孔树脂)，先用5倍柱体积的体积分数为33％的乙醇水溶液进行洗脱除杂；接着再用5倍柱体积的体积分数为58％的乙醇水溶液进行洗脱，收集体积分数为58％的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得大孔树脂柱活性部位，即所述的荔枝核发酵产物。
对比例1荔枝核提取物的制备
取荔枝核粉，加入10倍重量的体积分数为95％的乙醇水溶液，然后加热至75℃进行回流提取1.5h，提取结束后将提取液浓缩干燥后即得所述的荔枝核提取物。
对比例2荔枝核发酵产物的制备
(1)取荔枝核粉与酵母粉、蛋白胨、葡萄糖以及水混合后得发酵体系；其中，荔枝核粉与酵母粉、蛋白胨、葡萄糖以及水的重量比为15:1.5:3:3:150；
(2)在发酵体系中接种发酵菌种，放在摇床(摇床转速为200rpm)中于28℃下进行发酵48h，发酵结束后取发酵液浓缩干燥后得发酵液浓缩产物；其中，发酵菌种的接种重量为发酵体系重量的5％；所述的发酵菌种由重量比为3:1的酿酒酵母和保加利亚乳杆菌组成；
(3)将发酵液浓缩产物上D101型大孔树脂柱(装填有30倍发酵液浓缩产物重量的D101型大孔树脂)，先用5倍柱体积的体积分数为10％的乙醇水溶液进行洗脱除杂；接着再用5倍柱体积的体积分数为40％的乙醇水溶液进行洗脱，收集体积分数为40％的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得大孔树脂柱活性部位，即所述的荔枝核发酵产物。
对比例3荔枝核发酵产物的制备
(1)取荔枝核粉与酵母粉、蛋白胨、葡萄糖以及水混合后得发酵体系；其中，荔枝核粉与酵母粉、蛋白胨、葡萄糖以及水的重量比为15:1.5:3:3:150；
(2)在发酵体系中接种发酵菌种，放在摇床(摇床转速为200rpm)中于28℃下进行发酵48h，发酵结束后取发酵液浓缩干燥后得发酵液浓缩产物；其中，发酵菌种的接种重量为发酵体系重量的5％；所述的发酵菌种由重量比为3:1的酿酒酵母和保加利亚乳杆菌组成；
(3)将发酵液浓缩产物上D101型大孔树脂柱(装填有30倍发酵液浓缩产物重量的D101型大孔树脂)，先用5倍柱体积的体积分数为55％的乙醇水溶液进行洗脱除杂；接着再用5倍柱体积的体积分数为80％的乙醇水溶液进行洗脱，收集体积分数为80％的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得大孔树脂柱活性部位，即所述的荔枝核发酵产物。
实验例1本发明荔枝核发酵产物的抗炎实验结果
(1)斑马鱼胚胎经受试物处理
取斑马鱼胚胎随机分成9组，每组24尾；其中实验组8组，模型对照组1组；其中，模型对照组的斑马鱼胚胎放入含有10μmol/L硫酸铜的斑马鱼胚胎培养液中，实验组的斑马鱼胚胎放入含有10μmol/L硫酸铜以及1g/L受试物的斑马鱼胚胎培养液中，于28±1℃的恒温培养箱中培养45min。
其中，实验组1的受试物为实施例1制备得到的荔枝核发酵产物；实验组2的受试物为实施例2制备得到的荔枝核发酵产物；实验组3的受试物为实施例3制备得到的荔枝核发酵产物；实验组4的受试物为实施例4制备得到的荔枝核发酵产物；实验组5的受试物为实施例5制备得到的荔枝核发酵产物；实验组6的受试物为对比例1制备得到的荔枝核提取物；实验组7的受试物为对比例2制备得到的荔枝核发酵产物；实验组8的受试物为对比例3制备得到的荔枝核发酵产物。
(2)斑马鱼胚胎固定染色
2.1培养结束后将各组斑马鱼胚胎于多聚甲醛中固定1h后，用PBST处理斑马鱼胚胎3次，每次5min，然后用体积分数为50％的乙醇处理3min；
2.2用苏丹黑染色溶液对斑马鱼胚胎进行室温染色1h后，用体积分数为70％的乙醇浸洗4次，每次5min，然后用PBST处理2次，每次5min；
2.3用漂白溶液(含质量分数为1％KOH和3％H2O2的水溶液)处理斑马鱼胚胎10min，然后用体积分数为70％的乙醇处理5min；PBST处理1min，用清洗液1(含质量分数20％甘油和0.25％KOH的水溶液)处理15min，清洗液2(含质量分数50％甘油和0.25％KOH的水溶液)处理10min，再用PBST处理3min。
(3)样本的显微分析
将经固定染色的斑马鱼胚胎侧身拜访。然后放到体视显微镜下对斑马鱼胚胎尾部进行拍照。
(4)数据和结果计算
计数每尾斑马鱼胚胎从肛门起四分之三尾部侧线区域的中性粒细胞数目。
计算中性粒细胞的聚集抑制率：
抑制率＝[(C-S)/C]x100％；式中，S为实验组斑马鱼胚胎中性粒细胞数目的平均值；C为模型对照组斑马鱼胚胎中性粒细胞数目的平均值。其中，中性粒细胞的聚集抑制率越高，抗炎效果越好；实验结果见表1。
表1.发明荔枝核发酵产物的抗炎实验结果
中性粒细胞的聚集抑制率
实施例1制备得到的荔枝核发酵产物 40％
实施例2制备得到的荔枝核发酵产物 34％
实施例3制备得到的荔枝核发酵产物 35％
实施例4制备得到的荔枝核发酵产物 58％
实施例5制备得到的荔枝核发酵产物 83％
对比例1制备得到的荔枝核提取物 18％
对比例2制备得到的荔枝核发酵产物 41％
对比例3制备得到的荔枝核发酵产物 62％
从表1实验结果可以看出，实施例1制备得到的荔枝核发酵产物其对斑马鱼胚胎的中性粒细胞的聚集抑制率为40％，显著高于对比例1制备得到的荔枝核提取物；这说明：以荔枝核为原料通过本发明所述方法发酵制备得到的荔枝核发酵产物，其抗炎作用显著高于以荔枝核为原料通过提取方法制备得到的荔枝核提取物。
从表1实验结果可以看出，实施例4制备得到的荔枝核发酵产物其对斑马鱼胚胎的中性粒细胞的聚集抑制率达到58％，进一步显著高于实施例1制备得到的荔枝核发酵产物；这说明：在本发明中，发酵菌种的组成对于制备得到的荔枝核发酵产物的抗炎作用起着重要的影响；上述实验表明，在发酵过程中加入保加利亚乳杆菌，采用酿酒酵母和保加利亚乳杆菌共同发酵制备得到的荔枝核发酵产物，其抗菌作用要显著高于采用单独的酿酒酵母发酵制备得到的荔枝核发酵产物。
从表1实验结果可以看出，实施例5制备得到的荔枝核发酵产物其对斑马鱼胚胎的中性粒细胞的聚集抑制率达到83％，进一步大幅高于实施例4制备得到的荔枝核发酵产物；这说明：将发酵液浓缩产物通过本发明所述的大孔树脂柱洗脱可以进一步富集得到更多的抗炎活性成分；将发酵液浓缩产物进一步通过本发明所述的大孔树脂洗脱条件制备得到的荔枝核发酵产物，相比于发酵液浓缩产物，可以进一步大幅提高其抗炎作用。
从表1实验结果可以看出，对比例2制备得到的荔枝核发酵产物其对斑马鱼胚胎的中性粒细胞的聚集抑制率为41％，反而小于实施例4的58％；对比例3制备得到的荔枝核发酵产物其对斑马鱼胚胎的中性粒细胞的聚集抑制率为62％，其与实施例4相比虽然有提高，但是提高幅度不大；这说明：本发明大孔树脂柱的洗脱条件，对于进一步制备得到的荔枝核发酵产物相比于发酵液浓缩产物，能否进一步大幅提高抗炎作用起着决定性的作用；上述实验表明，只有在本发明所述大孔树脂洗脱条件下(即，先用体积分数为55％的乙醇水溶液进行洗脱除杂；接着再用体积分数为80％的乙醇水溶液进行洗脱)制备得到的荔枝核发酵产物才能够富集得到大量的抗炎活性成分，其抗炎作用与发酵液浓缩产物相比，才能得到进一步的大幅提高；而在其它大孔树脂洗脱条件下制备得到的荔枝核发酵产物并不能够富集得到大量的抗炎活性成分，其抗炎作用与发酵液浓缩产物相比，并不能得到提高或大幅提高。

Claims (10)

1.一种荔枝核发酵产物的制备方法，其特征在于，包含如下步骤：
(1)取荔枝核粉与营养物质以及水混合后得发酵体系；
(2)在发酵体系中接种发酵菌种进行发酵，发酵结束后取发酵液浓缩干燥后得发酵液浓缩产物，即所述的荔枝核发酵产物；
步骤(2)中所述的发酵菌种为酿酒酵母。
2.根据权利要求1所述的荔枝核发酵产物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的营养物质包含酵母粉、蛋白胨以及葡萄糖。
3.根据权利要求2所述的荔枝核发酵产物的制备方法，其特征在于，发酵体系中荔枝核粉与酵母粉、蛋白胨、葡萄糖以及水的重量比为10～20:1～2:2～4:2～4:100～200；
最优选地，发酵体系中荔枝核粉与酵母粉、蛋白胨、葡萄糖以及水的重量比为15:1.5:3:3:150。
4.根据权利要求1所述的荔枝核发酵产物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中发酵菌种的接种重量为发酵体系重量的4～6％；
步骤(2)中发酵菌种的接种重量为发酵体系重量的5％。
5.根据权利要求1所述的荔枝核发酵产物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的发酵菌种由酿酒酵母和保加利亚乳杆菌组成。
6.根据权利要求5所述的荔枝核发酵产物的制备方法，其特征在于，酿酒酵母和保加利亚乳杆菌的重量比为2～4:1；
最优选地，酿酒酵母和保加利亚乳杆菌的重量比为3:1。
7.根据权利要求1所述的荔枝核发酵产物的制备方法，其特征在于，所述的发酵是指在25～30℃下发酵40～60h；
最优选地，所述的发酵是指在28℃下发酵48h。
8.权利要求1～7任一项所述的制备方法制备得到的荔枝核发酵产物。
9.权利要求8所述的荔枝核发酵产物在制备具有抗炎作用的产品中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的产品为药物、护肤品或化妆品。
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Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102526315A (zh) * 2012-01-13 2012-07-04 广州市中医医院 一种荔枝核有效部位群提取物的制备方法
US20130302454A1 (en) * 2011-01-21 2013-11-14 Jilin Zixin Pharmaceutical Research Institution Llc. Method for preparing fermentation broth of fruits and vegetables
KR20140145324A (ko) * 2013-06-13 2014-12-23 (주) 씨엔텍 인(仁) 혼합물을 기반으로 하는 복합 인 발효물, 이 발효물의 제조방법 및 이 발효물을 함유하는 화장료 조성물
CN107375197A (zh) * 2017-08-03 2017-11-24 广东莱恩医药研究院有限公司 一种连翘苷眼膏及其制备方法
CN111096986A (zh) * 2019-12-31 2020-05-05 江门民康生物科技研究有限公司 一种以神秘果果核为原料的提取物及其在制备具有降血糖作用的药物或保健品中的应用
CN111920040A (zh) * 2019-05-13 2020-11-13 安琪酵母股份有限公司 牡丹发酵产物及其制备方法
KR20220081786A (ko) * 2020-12-09 2022-06-16 전북대학교산학협력단 항비만활성이 증가된 꾸지뽕열매 발효식초 및 그 제조방법
CN114755335A (zh) * 2022-04-15 2022-07-15 广东莱恩医药研究院有限公司 一种生物样本中嘧啶衍生物1d228对映异构体的定量检测方法
CN116019747A (zh) * 2023-02-01 2023-04-28 广州优科生物科技有限公司 一种番石榴发酵产物的制备方法及其产品和应用

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20130302454A1 (en) * 2011-01-21 2013-11-14 Jilin Zixin Pharmaceutical Research Institution Llc. Method for preparing fermentation broth of fruits and vegetables
CN102526315A (zh) * 2012-01-13 2012-07-04 广州市中医医院 一种荔枝核有效部位群提取物的制备方法
KR20140145324A (ko) * 2013-06-13 2014-12-23 (주) 씨엔텍 인(仁) 혼합물을 기반으로 하는 복합 인 발효물, 이 발효물의 제조방법 및 이 발효물을 함유하는 화장료 조성물
CN107375197A (zh) * 2017-08-03 2017-11-24 广东莱恩医药研究院有限公司 一种连翘苷眼膏及其制备方法
CN111920040A (zh) * 2019-05-13 2020-11-13 安琪酵母股份有限公司 牡丹发酵产物及其制备方法
CN111096986A (zh) * 2019-12-31 2020-05-05 江门民康生物科技研究有限公司 一种以神秘果果核为原料的提取物及其在制备具有降血糖作用的药物或保健品中的应用
KR20220081786A (ko) * 2020-12-09 2022-06-16 전북대학교산학협력단 항비만활성이 증가된 꾸지뽕열매 발효식초 및 그 제조방법
CN114755335A (zh) * 2022-04-15 2022-07-15 广东莱恩医药研究院有限公司 一种生物样本中嘧啶衍生物1d228对映异构体的定量检测方法
CN116019747A (zh) * 2023-02-01 2023-04-28 广州优科生物科技有限公司 一种番石榴发酵产物的制备方法及其产品和应用

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
周云，等: "蛹虫草核苷体外抗肿瘤实验研究", 今日药学, vol. 25, no. 04, 25 April 2015 (2015-04-25), pages 233 - 235 *
周秋艳，等: "荔枝核多酚纯化工艺优化研究", 安徽农业科学, vol. 47, no. 23, 31 December 2019 (2019-12-31), pages 196 - 198 *
李玉凤，等: "基于网络药理学探讨荔枝核抗炎作用机制", 特产研究, vol. 43, no. 03, 30 June 2021 (2021-06-30), pages 57 *
涂岩: "猕猴桃酿酒酵母与乳酸杆菌的混合发酵初探", 九江师专学报, no. 05, 31 December 1989 (1989-12-31), pages 36 - 38 *
王亚惠，等: "红麻副产品栽培中华红芝发酵液美白抗氧化研究", 中国麻业科学, vol. 42, no. 02, 10 April 2020 (2020-04-10), pages 83 - 90 *

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