CN112110925A - 6-(乙酰-aa-巯基)嘌呤,其合成,与顺铂联用的活性和应用 - Google Patents

6-(乙酰-aa-巯基)嘌呤,其合成,与顺铂联用的活性和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了下式的6‑(乙酰‑AA‑巯基)嘌呤(式中AA为Asp,Met和Ser残基),公开了它们的制备方法,公开了它们的抗肿瘤活性,公开了它们与顺铂联用降低顺铂肾毒性的作用。因而本发明公开了它们与顺铂联合在制备抗肿瘤药物中的应用。
Figure DDA0002103121620000011

Description

6-(乙酰-AA-巯基)嘌呤,其合成,与顺铂联用的活性和应用
技术领域
本发明涉及下式的6-(乙酰-AA-巯基)嘌呤,涉及它们的制备方法,涉及它们与顺铂联用降低顺铂肾毒性的作用。因而本发明涉及它们与顺铂联合在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明属于生物医药领域。
背景技术
6-巯基嘌呤是临床治疗儿童急性淋巴细胞白血病的常用药物。不过,也用于治疗绒毛膜上皮癌。然而,一些毒副作用限制了6-巯基嘌呤的临床应用。例如6-巯基嘌呤的骨髓抑制作用较严重,半衰期较短,以及剂量较大。虽然在过去的几十年里有大量研究试图克服6-巯基嘌呤的这些缺点,但是没有明显成效。发明人经过数年探索发现用CH2CO-AA(式中AA为Asp,Met,Ser残基)修饰6-巯基嘌呤的6-SH,可消除6-巯基嘌呤的骨髓抑制作用,延长半衰期以及降低剂量。顺铂是一种广谱抗癌药物,对多种实体瘤都具有良好的疗效。顺铂可以铂的形态在体内蓄积而导致诸多毒性,例如肾毒性。虽然在过去的几十年里有大量研究试图克服顺铂的肾毒性,但是没有明显成效。发明人经过数年探索发现用CH2CO-AA(式中AA为Asp,Met和Ser残基)修饰6-巯基嘌呤的6-SH,可消除6-巯基嘌呤的骨髓抑制作用,延长半衰期以及降低剂量。发明人进一步发现CH2CO-AA(式中AA为Asp,Met和Ser残基)修饰6-巯基嘌呤的6-SH得到的衍生物与顺铂联合使用,可以进一步降低顺铂的肾毒性等副作用。根据这些发现,发明人提出了本发明。
发明内容
本发明的第一个内容是提供6-(乙酰-AA-巯基)嘌呤,式中AA为Asp,Met和Ser残基。
Figure BDA0002103121600000011
本发明的第二个内容是提供6-(乙酰-AA-巯基)嘌呤,式中AA为Asp,Met和Ser残基,的制备方法,该方法包括:
1.合成6-乙酰-O-乙基巯基嘌呤；
2.合成6-羧甲基巯基嘌呤；
3.采用二环己基碳二亚胺为缩合剂,1-羟基苯并三唑为催化剂的液相法将6-(羧甲基巯基)嘌呤与AA-OBzl(式中AA为Asp,Met和Ser残基)缩合,制备6-乙酰-Asp(OBzl)-OBzl-巯基嘌呤,6-乙酰-Met-OBzl-巯基嘌呤及6-乙酰-Ser-OBzl-巯基嘌呤；
4.将6-乙酰-Asp(OBzl)-OBzl-巯基嘌呤,6-乙酰-Met-OBzl-巯基嘌呤及6-乙酰-Ser-OBzl-巯基嘌呤脱保护基制备6-乙酰-AA-巯基嘌呤,式中AA为Asp,Met和Ser残基。
本发明的第三个内容是评价6-(乙酰-AA-巯基)嘌呤与顺铂联合使用的抗肿瘤作用。
附图说明
图1. 6-(乙酰-AA-巯基)嘌呤的合成路线.i)溴乙酸乙酯,二甲基甲酰胺,K2CO3,65℃；ii)CH3OH,2N NaOH水溶液；iii)二环己基碳二亚胺,1-羟基苯并三唑,N-甲基吗啉,二甲基甲酰胺。3a中AA为Asp(OBzl)残基,4a中AA为Asp残基；3b和4b中AA为Met残基；3c和4c中AA为Ser残基。
具体实施方式
为了进一步阐述本发明,下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的,它们仅用来对本发明进行具体描述,不应当理解为对本发明的限制。
实施例1制备6-(乙酰-O-乙基巯基)嘌呤(1)
向2.070g(13.60mmol)6-巯基嘌呤中加入50mL N,N-二甲基甲酰胺，65℃搅拌至6-巯基嘌呤完全溶解，溶液呈黄色，澄清透明。加入2.250g(16.32mmol)K2CO3作为催化剂，活化30min,加1.80mL(16.32mmol)溴乙酸乙酯,继续于65℃反应。24h后TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/2)显示6-巯基嘌呤消失。反应液过滤,滤液减压浓缩。得到的橘黄色油状物用硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝1/1),得到2.360g(72％)标题化合物,为无色固体。ESI-MS(m/e):239[M+H]+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ/ppm＝13.651(s,1H),8.503(s,1H),8.499(s,1H),4.175(q,J＝7.8Hz,2H),4.036(dd,J1＝12.0Hz,J2＝5.4Hz,1H),1.254(t,J＝7.8Hz,3H)；13C-NMR(75MHz,DMSO-d6):δ/ppm＝167.90,166.65,150.88,150.34,149.51,132.67,60.60,31.14,14.11。
实施例2制备6-(羧甲基巯基)嘌呤(2)
将0.310g(1.30mmol)6-(乙酰-O-乙基巯基)嘌呤(1)用10mL甲醇完全溶解,溶液澄清透明。该溶液于0℃用0.8mL(1.56mmol)2N NaOH水溶液调pH至13,0℃搅拌4h后,TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/2)监测反应完全。反应液用饱和KHSO4水溶液调pH至7,减压浓缩,有无色盐固体析出。加5mL水使固体完全溶解。该溶液于0℃用饱和KHSO4水溶液调pH至2。静置使固体充分析出,过滤,滤渣用蒸馏水淋洗,室温放置使其自然干燥,得到0.245g(89％)标题化合物,为无色固体。ESI-MS(m/e):209[M-H]+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ/ppm＝13.650(s,1H),12.844(s,1H),8.506(s,1H),8.492(s,1H),4.033(dd,J1＝12.0Hz,J2＝5.4Hz,1H)；13C-NMR(75MHz,DMSO-d6):δ/ppm＝171.00,166.53,150.89,150.34,149.55,132.60,32.07。
实施例3制备6-[乙酰-Asp(OBzl)-OBzl-巯基]嘌呤(3a)
将0.210g(1.00mmol)6-(羧甲基巯基)嘌呤(2)用10mL无水N,N-二甲基甲酰胺溶解,于0℃下加0.135g(1.00mmol)1-羟基苯并三唑,搅拌10min后加0.227g(1.10mmol)二环己基碳二亚胺,活化30min，反应液中有无色固体析出。将0.498g(11.00mmol)Asp(OBzl)-OBzl于冰浴下加入反应液中，用N-甲基吗啉调节反应混合物pH至9，室温搅拌反应12h后TLC(二氯甲烷/甲醇＝20/1)显示原料点消失。过滤,滤液减压浓缩,残留物用30mL乙酸乙酯溶解,过滤,滤液用饱和NaHCO3水溶液洗(15mL×3),饱和NaCl水溶液洗(15mL×3),5％KHSO4水溶液洗(15mL×3),饱和NaCl水溶液洗(15mL×3),饱和NaHCO3水溶液洗(15mL×3),饱和NaCl水溶液洗(15mL×3),得到的乙酸乙酯相用无水硫酸钠干燥12h。过滤,滤液减压浓缩,得到的黄色油状物用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷/甲醇＝35/1),得到0.180g(35％)标题化合物。ESI-MS(m/e):504[M-H]-，1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ/ppm＝13.576(s,1H),8.867～8.840(d,J＝8.1Hz,1H),8.612(s,1H),8.482(s,1H),7.327～7.302(m,10H),5.071(s,2H),5.034(s,2H),4.750(dd,J1＝7.8Hz,J2＝6.6Hz,1H),4.124(m,2H),2.954～2.787(m,2H)；13C-NMR(75MHz,DMSO-d6):δ/ppm＝170.62,170.28,168.04,151.74,136.20,136.08,128.86,128.80,128.52,128.45,128.37,128.06,66.78,66.35,49.45,36.16,32.02。
实施例4制备6-(乙酰-Met-OBzl-巯基)嘌呤(3b)
将0.900g(4.28mmol)6-(羧甲基巯基)嘌呤(2)用20mL无水N,N-二甲基甲酰胺溶解,于0℃下加0.578g(4.28mmol)1-羟基苯并三唑,搅拌10min后,加0.971g(4.71mmol)二环己基碳二亚胺,搅拌30min。将1.95g(4.71mmol)Met-OBzl于0℃下加至反应液中,用N-甲基吗啉调反应混合物pH至9,室温搅拌12h后TLC(二氯甲烷/甲醇＝25/1)显示反应完成。反应液过滤,滤液减压浓缩,残留物用50mL乙酸乙酯溶解,滤去不溶物,滤液用饱和NaHCO3水溶液洗(30mL×3),饱和NaCl水溶液洗(30mL×3),5％KHSO4水溶液洗(30mL×3),饱和NaCl水溶液洗(30mL×3),饱和NaHCO3水溶液洗(30mL×3),饱和NaCl水溶液洗(30mL×3),得到的乙酸乙酯相用无水硫酸钠干燥12h。过滤,滤液减压浓缩,得到的黄色油状物用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷/甲醇＝25/1),得到1.790g(97％)标题化合物。ESI-MS(m/e):430[M-H]-，1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ/ppm＝13.55(s,1H),8.735～8.709(d,J＝7.8Hz,1H),8.632(s,1H),8.473(s,1H),7.358～7.307(m,5H),5.169～5.080(dd,J1＝12.6Hz,J2＝1.5Hz,2H),4.508～4.464(dd,J1＝5.1Hz,J2＝3.3Hz,1H),4.437～4.156(dd,J1＝9.0Hz,J2＝4.2Hz,2H),2.517～2.441(m,2H),1.900(m,2H),2.031～1.902(m,4H)；13C-NMR(75MHz,DMSO-d6):δ/ppm＝171.82,168.10,151.72,136.33,128.87,128.50,128.26,66.52 51.86,32.18,30.98,29.80,14.96。
实施例5制备6-(乙酰-Ser-OBzl-巯基)嘌呤(3c)
将0.500g(2.38mmol)6-(羧甲基巯基)嘌呤(2)用20mL无水N,N-二甲基甲酰胺溶解,于0℃下加0.322g(2.38mmol)1-羟基苯并三唑,搅拌10min后加0.945g(2.62mmol)二环己基碳二亚胺,搅拌30min。将0.968g(2.62mmol)Ser-OBzl于0℃加入反应液中,用N-甲基吗啉调节反应混合物pH至9,室温搅拌12h后TLC(二氯甲烷/甲醇＝15/1)显示反应完成。减压浓缩,残留物加用20mL乙酸乙酯溶解,过滤,滤渣用乙酸乙酯洗,甲醇洗,自然干燥得到0.695g(76％)标题化合物。ESI-MS(m/e):386[M-H]-,1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ/ppm＝13.562(s,1H),8.649(s,1H),8.521(s,1H),8.464(s,1H),7.333(m,5H),5.167～5.149(d,J＝5.4Hz,2H),5.117(s,1H),4.441～4.426(d,J＝4.5Hz,2H),4.416～4.144(m,2H),3.798～3.643(m,2H)；13C-NMR(75MHz,DMSO-d6):δ/ppm＝170.66,168.17,151.77,143.59,136.38,128.80,128.36,127.99,66.37,61.67,55.56,31.99。
实施例6制备6-(乙酰-Asp-巯基)嘌呤(4a)
将0.080g(0.16mmol)化合物3a用10mL甲醇溶解,于0℃下用2N NaOH水溶液调pH至13,搅拌4h后TLC(二氯甲烷/甲醇＝20/1)监测反应完成。反应液用饱和KHSO4水溶液调pH至7,减压浓缩,析出的无色盐固体加5mL水使固体完全溶解。得到的澄清透明溶液0℃下用饱和KHSO4水溶液调pH至2,减压除去部分溶剂,剩余约3mL溶液用RP-C18柱层析纯化(60％甲醇水溶液),馏分冷冻干燥,得到0.020g(38％)标题化合物。FT-MS(m/e):324.06[M-H]-；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ/ppm＝13.575(s,1H),12.699(s,2H),8.644(s,1H),8.606～8.583(d,J＝6.9Hz,1H),8.459(s,1H),4.526～4.503(m,1H),4.116(s,2H),2.643～2.587(m,2H)；13C-NMR(75MHz,DMSO-d6):δ/ppm＝172.52,172.14,168.23,167.76,151.79,49.34,36.43,32.06。
实施例7制备6-(乙酰-Met-巯基)嘌呤(4b)
将0.600g(1.39mmol)化合物3b用10mL甲醇溶解，于0℃下用2N NaOH水溶液调反应液pH至12,0℃搅拌4h后TLC(二氯甲烷/甲醇＝25/1)监测反应完全。反应液用饱和KHSO4水溶液调pH至7,减压浓缩,残留物加10mL水,0℃下用饱和KHSO4水溶液调pH至2,搅拌,过滤,滤饼用蒸馏水洗,室温自然干燥得到0.457g(96％)标题化合物。FT-MS(m/e):340.06[M-H]-；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ/ppm＝13.551(s,1H),12.545(s,1H),8.648(s,1H),8.552～8.526(d,J＝7.8Hz,1H),8.462(s,1H),4.375～4.304(m,1H),4.211～4.085(dd,J1＝15.3Hz,J2＝7.5Hz,2H),2.544～2.430(m,2H),2.037(s,3H),2.005～1.821(m,2H)；13C-NMR(75MHz,DMSO-d6):δ/ppm＝173.46,167.85,151.73,143.57,128.49,127.07,63.34,51.73,32.26,31.22,29.98,14.99。
实施例8制备6-(乙酰-Ser-巯基)嘌呤(4c)
向0.364g(0.94mmol)化合物3c中加入10mL甲醇，超声使其悬浮。于0℃下用2NNaOH水溶液调反应液pH至12,0℃搅拌4h后TLC(二氯甲烷/甲醇＝15/1)监测反应完全,反应液用饱和KHSO4水溶液调pH至7,减压浓缩,加5mL水使固体完全溶解。溶液澄清透明溶液于0℃下用饱和KHSO4水溶液调pH至2。过滤,滤渣用甲醇和蒸馏水洗,室温自然晾干。滤液用乙酸乙酯萃取(20mL×3),将乙酸乙酯合并后用饱和NaCl水溶液洗(20mL×3),乙酸乙酯相用无水硫酸钠干燥12h。滤去Na2SO4,滤液减压浓缩,得到无色固体。将该固体用水/甲醇混合溶剂溶解后,使用RP-C18柱层析纯化(30％甲醇水溶液),馏分冷冻干燥。合并得到的无色固体,共0.133g(48％)标题化合物。FT-MS(m/e):296.05[M-H]-；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ/ppm＝13.5562(s,1H),8.699(s,1H),8.612～8.588(d,J＝7.2Hz,1H),8.482(s,1H),5.110(t,J＝3.6Hz,1H),4.508～4.464(dd,J1＝5.1Hz,J2＝3.3Hz,2H),4.412～4.320(m,1H),4.201(s,2H),3.789～3.606(m,2H)；13C-NMR(75MHz,DMSO-d6):δ/ppm＝171.23,168.07,151.78,61.66,55.42,52.32,32.06。
实施例9评价4a,b与顺铂联合使用的抗肿瘤作用
6-巯基嘌呤和羧甲基纤维素钠均购自国药集团化学试剂有限公司。SPF级ICR品系雄性小鼠(20±2g)购自北京维通利华实验动物技术有限公司。实验采用移植性小鼠S180肉瘤模型。
化合物4a,b的剂量为32μmol/kg,阳性对照6-巯基嘌呤的剂量为164μmol/kg,顺铂的剂量为5.7μmol/kg,阴性对照为CMCNa。
建模 移植性小鼠S180肉瘤模型用的瘤源为S180小鼠肉瘤细胞,购自北京大学医学部动物实验中心,按悬浮细胞培养方法自行传代保留。取传代一周的荷S180腹水瘤SPF级雄性ICR小鼠,适量乙醚麻醉后断颈处死,浸泡于75％酒精中消毒1min,剖开腹腔,取腹水S180瘤液,经1000r/min×10min离心,弃上清液,残留物以少量经冷却的生理盐水洗去非细胞碎片,组织及浮血,用MUSE流式细胞仪标定细胞活力,结果显示细胞活度达94.67％。活细胞计数,密度为4×107个/mL。活细胞悬浮于冷却的生理盐水中,使细胞密度为2×107个/mL,尽快用于接种。接种时左手固定小鼠,右手持1mL注射器刺入小鼠右侧腋下约2mm至皮下,轻轻钝性分离出一小空腔,注入0.2mL活细胞悬液。
检测 接种后每日观察小鼠,至大部分小鼠腋下可见绿豆粒大小实体瘤(平均约接种第5天)时分组,每组11只小鼠,连续给药10天,至第11天称各组小鼠进行称重,以乙醚麻醉,颈椎脱臼处死,固定小鼠腋下实体瘤生长部位,取剪刀剪开皮肤,充分暴露瘤体,沿皮肤,上肢钝性分离取出肉瘤称重。依次剖出脑,心,肝,脾和肾并称重,计算各脏器指数。
数据 原位瘤重以均值±SD g表示,SD值先经SPSS软件进行方差分析,检验方差齐性,采用t-test检验,进行组间统计学比较。
结果4a,b 与顺铂联合使用,抗肿瘤活性显著优于顺铂单独使用的抗肿瘤活性。并且,4a,b在比6-巯基嘌呤剂量降低4倍的情况下,与顺铂联合使用的抗肿瘤活性与6-巯基嘌呤与顺铂联合使用抗肿瘤活性相当。这是本案的意想不到的技术效果。
表1 4a,b与顺铂联用的S180抗肿瘤活性
化合物(剂量,μmol/kg) 瘤重(均值±SD g)
CMCNa(—) 3.06±0.20
顺铂(5.7) 1.95±0.32<sup>a</sup>
6-巯基嘌呤(164)+顺铂(5.7) 1.49±0.45<sup>c</sup>
4a(32)+顺铂(5.7) 1.36±0.45<sup>b</sup>
4b(32)+顺铂(5.7) 1.18±0.37<sup>b</sup>
a)与CMCNa比p<0.05；b)与CMCNa比p<0.05,与顺铂比p<0.01；c)与CMCNa比p<0.05,与顺铂比p<0.05；n＝12.
实施例10评价4a,b与顺铂联用的肝毒性
操作 连续给药治疗10天的小鼠,处死之前进行眼球取血,在30min内于4℃1000rpm离心15min,取血清后用谷丙转氨酶/ALT/GPT试剂盒进行检测。4a,b为6-(乙酰-AA-巯基)嘌呤的代表,对照为CMCNa,假手术组为正常小鼠。
结果 表2显示,化合物4a,b联合顺铂组小鼠的血清谷丙转氨酶活力显著低于顺铂组或6-巯基嘌呤联合顺铂组小鼠的谷丙转氨酶活力(p<0.05),即在32μmol/kg的剂量下4a,b联合顺铂用药可在一定程度上降低顺铂的肝毒性。
表2 4a,b与顺铂联用的小鼠血清谷丙转氨酶活力
Figure BDA0002103121600000061
Figure BDA0002103121600000071
a)与假手术组比p<0.05；b)与顺铂比p<0.05；n＝6.
实施例11评价4a,b与顺铂联用的肾毒性
操作 连续给药治疗10天的小鼠,处死之前进行眼球取血,在30min内于4℃1000rpm离心15min,取血清后用肌酐(Cr)试剂盒进行检测。4a,b为6-(乙酰-AA-巯基)嘌呤的代表,对照为CMCNa,假手术组为正常小鼠。
结果 表3显示,化合物4a,b联合顺铂组小鼠的血清肌酐含量显著低于顺铂组或6-巯基嘌呤联合顺铂组小鼠的肌酐含量(p<0.05),即在32μmol/kg的剂量下4a,b联合顺铂用药可在一定程度上降低顺铂的肾毒性。
表3 4a,b与顺铂联用的小鼠血清肌酐水平
化合物 血清肌酐水平(均值±SDμmol/L)
假手术组 218.5±31.1
顺铂 565.8±158.2<sup>a</sup>
6-巯基嘌呤+顺铂 328.6±72.5<sup>b</sup>
4a+顺铂 328.6±72.5<sup>b</sup>
4b+顺铂 286.8±61.4<sup>b</sup>
a)与假手术组比p<0.05；b)与假手术组比p<0.05,与顺铂比p<0.05；n＝6.
实施例12评价4a,b与顺铂联用的骨髓抑制毒性
操作 连续给药治疗10天的小鼠处死之前眼球取血20μL于0.5mL专用EDTA采血管中,盖紧管口上下摇匀,并在4h内采用全自动三分类血液细胞分析仪检测。4a,b为6-(乙酰-AA-巯基)嘌呤的代表,对照为CMCNa。
结果 表4显示,顺铂组小鼠的白细胞数显著降低于CMCNa组小鼠,血小板数和红细胞数无明显降低。这表明顺铂造成的骨髓抑制毒性主要表现为对白细胞数的抑制。6-巯基嘌呤联合顺铂组小鼠血小板数显著低于CMCNa组小鼠。4a,b联合顺铂组小鼠的白细胞数和血小板数明显比顺铂组或6-巯基嘌呤联合顺铂组小鼠高,即4a,b可降低顺铂的骨髓抑制副作用。这是本案的意想不到的技术效果。
表4 4a,b与顺铂联用组小鼠的骨髓抑制毒性
Figure BDA0002103121600000072
Figure BDA0002103121600000081
a)与CMCNa比p<0.05；b)与CMCNa比p<0.05,与顺铂比p<0.01；n＝8.
实施例13评价4a,b与顺铂联用组小鼠体内铂含量
操作 取连续给药10天后的小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肾脏、脑等脏器、血液、排泄物等生物样本,在MARS-AApress微波消解仪中硝化至澄清溶液,用Varian710-ES电感耦合等离子体发射光谱仪测定铂元素的含量。
结果 表5显示,4a,b联合顺铂组小鼠各器官及血液中的铂含量显著低于顺铂组小鼠各脏器和血液中的铂含量(p<0.05),并且,4a,b联合顺铂组小鼠尿液中的铂含量显著高于顺铂组小鼠(p<0.05),即在32μmol/kg的剂量下4a,b可在一定程度上减少小鼠体内铂蓄积,增加铂排泄。
表5 4a,b与顺铂联用小鼠体内铂含量
Figure BDA0002103121600000082
a)与顺铂比p<0.05；b)与顺铂比p<0.01；n＝8。

Claims (3)

1.结构式如下的6-乙酰-AA-巯基嘌呤,式中AA为Asp、Met和Ser残基,
Figure FDA0002103121590000011
2.权利要求1的6-乙酰-AA-巯基嘌呤的制备方法,该方法包括:
2.1.合成6-乙酰-O-乙基巯基嘌呤；
2.2.合成6-羧甲基巯基嘌呤；
2.3.采用二环己基碳二亚胺为缩合剂,1-羟基苯并三唑为催化剂的液相法将6-(羧甲基巯基)嘌呤与AA-OBzl缩合,制备6-乙酰-Asp(OBzl)-OBzl-巯基嘌呤,6-乙酰-Met-OBzl-巯基嘌呤及6-乙酰-Ser-OBzl-巯基嘌呤；
2.4.将6-乙酰-Asp(OBzl)-OBzl-巯基嘌呤,6-乙酰-Met-OBzl-巯基嘌呤及6-乙酰-Ser-OBzl-巯基嘌呤脱保护基制备6-乙酰-AA-巯基嘌呤。
3.权利要求1的6-乙酰-AA-巯基嘌呤在制备与顺铂联合治疗抗肿瘤药物中的应用。
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