CN112094749B - 一种用于亚心形扁藻中继培养的高比重海水培养方法 - Google Patents

一种用于亚心形扁藻中继培养的高比重海水培养方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种用于亚心形扁藻中继培养的高比重海水培养方法，属于水产养殖技术领域。本方法基本步骤包括亚心形扁藻中继培养设备选择、培养液配制、接种、日常管理。在亚心形扁藻中继培养过程中，采用高比重海水按照常规配方添加营养盐和复合维生素B配制成培养液。利用高比重海水培养液进行亚心形扁藻的中继培养，亚心形扁藻生长繁殖速度快，能够快速形成优势种群抑制其他杂藻和敌害生物的生长繁殖，为亚心形扁藻的生产性培养提供充足的藻种，保障亚心形扁藻的规模化生产正常进行，提高亚心形扁藻培养效率。本发明适用于亚心形扁藻的中继培养，容易在生产企业推广，具有显著的实用价值和经济效益。

Description

一种用于亚心形扁藻中继培养的高比重海水培养方法
技术领域
本发明属于水产养殖技术领域，涉及一种亚心形扁藻高比重海水培养方法，适用于亚心形扁藻的人工培养，特别适合亚心形扁藻中继培养。
背景技术
亚心形扁藻(Platymonas subcordiformis)属绿藻门、绿藻纲、团藻目、衣藻科，扁藻属。亚心形扁藻富含脂肪酸、蛋白质、维生素等营养物质，是鱼、虾、蟹和贝类人工育苗的优良饵料。与金藻、角毛藻等微藻相比较，亚心形扁藻个体大，繁殖速度快，特别适合作为珍珠贝类、扇贝类以及砗磲类等贝类人工育苗后期幼体的优良饵料，是保障贝类人工育苗成功的关键因素。亚心形扁藻的生长和繁殖受到营养盐的种类和浓度、光照强度和温度等环境因素的影响。于贞等(2005)进行了扁藻培养条件初探研究，结果显示扁藻主要营养盐的浓度为硝酸钠(NaNO3)0.08g/L，磷酸二氢钾(KH2PO4)0.006g/L，碳酸氢钠(NaHCO3)0.8g/L。孙育平等(2011)进行了不同氮、磷浓度下亚心形扁藻的生长及水体氮、磷变化的研究，结果表明氮、磷质量比为17时最适合亚心形扁藻的生长。陈建业等(2014)进行了不同氮源、磷源营养盐对亚心形扁藻生长的影响实验，结果表明尿素[CO(NH2)2]和磷酸二氢钠(NaH2PO4)为氮、磷源能够促进亚心形扁藻的生长。
目前，我国亚心形扁藻的人工培养均使用近岸天然海水，比重多为1.018-1.025(盐度约为25-33)，海水经加热或者用含氯消毒剂处理后，按照亚心形扁藻培养液的配方添加营养盐，然后接种进行培养。高温暴雨期间，近岸海水比重急剧下降至1.018以下甚至接近比重为1.0的淡水。高温低比重海水培养液培养的亚心形扁藻生长缓慢，而亚心形扁藻的敌害生物如腹毛虫、急游虫、尖鼻虫等繁殖迅速，对亚心形扁藻造成严重的污染，导致扁藻的培养失败，因此，我国南方高温暴雨期间亚心形扁藻的生产性培养成功率低。
单细胞藻(微藻)的培养方式分为藻种培养、中继培养和生产性培养。中继培养，目的是扩大藻种培养，为生产性大量培养提供藻种，是室内或者室外中型培养，是微藻生产性培养十分重要的中间环节。在亚心形扁藻的中继培养中使用高比重海水配制培养液，亚心形扁藻生长繁殖速度快，能够在较短时间内形成优势种群抑制其他藻类和敌害生物的生长，为亚心形扁藻的生产性培养提供充足纯净的藻种，保证亚心形扁藻生产性培养的顺利进行，为鱼、虾、蟹、贝类人工育苗提高充足、优质的饵料供应，保障育苗生产的正常进行。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于亚心形扁藻中继培养的高比重海水培养方法，能够提高亚心形扁藻的生长、繁殖速度，同时抑制亚心形扁藻常见敌害生物如腹毛虫、急游虫、尖鼻虫等生长和繁殖，为亚心形扁藻的生产性培养提供充足优质的藻种供应，保障鱼、虾、贝类人工育苗的顺利进行，具有显著的实用价值和良好的经济效益。
本发明的技术方案如下：
一种用于亚心形扁藻中继培养的高比重海水培养方法，包括如下步骤：
(1)培养设备的选择：选择透光性良好的透明薄膜袋或者白色塑料桶或者玻璃瓘；
(2)高比重海水的制备：将盛水装置清洗干净，注入天然过滤海水，添加卤水或者粗盐配制成高比重海水；
(3)高比重海水培养液的制备：将步骤(2)制备的高比重海水注入步骤(1)的培养设备中，经消毒处理后，按照亚心形扁藻的培养配方添加营养盐和复合维生素B；
(4)接种：按照亚心形扁藻培养方法将亚心形扁藻接种到步骤(3)配制的培养液中；
(5)日常管理：按照亚心形扁藻培养的常规方法进行日常管理。
优选地，步骤(1)所述的亚心形扁藻中继培养设备为容积100-500L的透明薄膜袋或者容积100-200L的塑料桶或者容积200-500L的透明玻璃罐，每个设备安装散气石1-2个，使用前用淡水冲洗干净晾干。
优选地，步骤(2)所述盛水装置为容积1-2立方米水体的水泥池。
优选地，步骤(2)所述高比重海水的制备，从沙滤井抽取天然海水，经砂滤池过滤，添加卤水或者粗盐配制成比重1.030-1.034的高比重海水。
优选地，步骤(3)所述高比重海水的消毒，用常规含氯消毒剂进行消毒处理。
优选地，步骤(3)所述亚心形扁藻的培养配方为：NaNO3(硝酸钠)60mg，KH2PO4(磷酸二氢钾)5mg，FeC6H5O7(柠檬酸铁)2mg，NaHCO3(碳酸氢钠)600mg，复合维生素B 100μg-300μg，消毒海水1000mL。
优选地，步骤(4)所述接种，将经过高比重海水驯化后的生长比重达到1.030-1.034的扁藻藻种接种到步骤(3)制备的培养液中，藻液容量和新配培养液容量的比例为1:4-6。
优选地，步骤(5)所述的日常管理，利用充气机保持微波充气，光照强度保持6000-10000lx，水温20-30℃，pH7.8-8.4。
优选地，亚心形扁藻藻种高比重海水驯化，如果亚心形扁藻藻种生长比重低于1.030，接种到比重比原培养液高0.004-0.005的培养液中，保持3天，进行第二次接种，海水比重再提高0.004-0.005，保持3天，进行第三次接种，重复进行直到亚心形扁藻藻种生长比重达到1.030-1.034。
本发明的有益效果是：
目前，亚心形扁藻人工培养，包括藻种培养、中继培养和生产性培养均是利用近岸海区的海水，经过滤和消毒处理后，按照亚心形扁藻培养的配方添加营养盐配制成培养液，然后接种亚心形扁藻，按照常规方法进行管理。我国南方5-9月是鱼、虾、蟹和贝类人工育苗的主要时间段，但此时高温暴雨频繁发生，高温和暴雨导致的低比重海水培养的亚心形扁藻生长繁殖缓慢，而亚心形扁藻的常见敌害生物如腹毛虫、急游虫、尖鼻虫等在高温暴雨期间繁殖迅速，使得亚心形扁藻在培养过程中容易受到敌害生物的侵袭，导致培养失败。
本发明在常规海水中，添加卤水或者粗盐配制成高比重海水，经消毒处理后添加营养盐和复合维生素B配制成亚心形扁藻培养液。采用高比重海水培养液进行亚心形扁藻中继培养，亚心形扁藻生长速度快、繁殖速度快，而亚心形扁藻常见敌害生物如腹毛虫、急游虫、尖鼻虫等生长和繁殖受到抑制。其次，在培养液中添加少量的复合维生素B又能够进一步促进亚心形扁藻的生长和繁殖。因此，亚心形扁藻容易在培养液中形成优势种群，有效防止和抑制敌害生物和其他藻类的生长，为亚心形扁藻生产性大量培养提供藻种。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明做进一步详细说明，这些实施例仅用来说明本发明，并不限制本发明的范围。
实施例1
一种用于亚心形扁藻中继培养的高比重海水培养方法
(1)培养设备的选择：选择容积100L的透明薄膜袋4个，容积300L的透明薄膜袋2个，每个薄膜袋安装散气石1个，使用前用淡水冲洗干净晾干。
(2)高比重海水的制备：将容积1立方米水体的水泥池清洗干净，注入天然过滤海水，添加卤水配制成比重为1.030的高比重海水，调节pH值7.8。
(3)高比重海水的消毒：将步骤(2)制备的高比重海水注入到步骤(1)准备的薄膜袋中，用含氯消毒剂对高比重海水进行消毒处理。
(4)高比重海水培养液的制备：在步骤(3)制备的高比重海水中，按照每1000mL消毒海水依次添加NaNO3(硝酸钠)60mg，KH2PO4(磷酸二氢钾)5mg，FeC6H5O7(柠檬酸铁)2mg，NaHCO3(碳酸氢钠)600mg，复合维生素B 100μg。
(5)亚心形扁藻藻种的高比重海水驯化：将培养在比重1.015培养液中的藻种，接种到比重提高0.005达1.020的培养液中，保持3天，进行第二次接种，海水比重提高0.005达到1.025，保持3天，第三次接种，培养液比重提高0.005达到1.030，将藻种培养在比重1.030的培养液中备用。
(6)接种：将步骤(5)培养的藻种接种到步骤(4)制备的培养液中，藻液容量和新配培养液容量的比例为1:4。
(7)日常管理：用充气机保持微波充气，光照强度6000lx，水温20℃，pH7.8。
实施例2
一种用于亚心形扁藻中继培养的高比重海水培养方法
(1)培养设备的选择：选择容积500L的透明薄膜袋4个，每个薄膜袋安装散气石2个，使用前用淡水冲洗干净晾干。
(2)高比重海水的制备：将容积2立方米水体的水泥池清洗干净，注入天然过滤海水，添加卤水配制成比重为1.032的高比重海水，调节pH值8.0。
(3)高比重海水的消毒：将步骤(2)制备的高比重海水注入到步骤(1)准备的薄膜袋中，用含氯消毒剂进行消毒处理。
(4)高比重海水培养液的制备：在步骤(3)制备的高比重海水中，按照每1000mL消毒海水依次添加NaNO3(硝酸钠)60mg，KH2PO4(磷酸二氢钾)5mg，FeC6H5O7(柠檬酸铁)2mg，NaHCO3(碳酸氢钠)600mg，复合维生素B 200μg；
(5)亚心形扁藻藻种的高比重海水驯化：将培养在比重1.018培养液中的藻种，接种到比重提高0.005达1.023的培养液中，保持3天，进行第二次接种，培养液比重提高0.005达到1.028，保持3天，第三次接种，培养液比重提高0.005达到1.033，藻种培养在比重1.033的培养液中备用。
(6)接种：将经过步骤(5)培养的扁藻藻种接种到步骤(4)制备的培养液中，藻液容量和新配培养液容量的比例为1:4。
(7)日常管理：用充气机保持微波充气，光照强度7000lx，水温24℃，pH8.0。
实施例3
一种用于亚心形扁藻中继培养的高比重海水培养方法
(1)培养设备的选择：选择容积150L的白色塑料桶6个，每个塑料桶安装散气石1个，使用前用淡水冲洗干净晾干。
(2)高比重海水的制备：将容积1.5立方米水体的水泥池清洗干净，注入天然过滤海水，添加粗盐配制成比重为1.033的高比重海水，调节pH值8.2；
(3)高比重海水的消毒：将步骤(2)制备的高比重海水注入到步骤(1)准备的塑料桶中，用含氯消毒剂进行消毒处理；
(4)高比重海水培养液的制备：在步骤(3)制备的高比重海水中，按照每1000mL消毒海水依次添加NaNO3(硝酸钠)60mg，KH2PO4(磷酸二氢钾)5mg，FeC6H5O7(柠檬酸铁)2mg，NaHCO3(碳酸氢钠)600mg，复合维生素B 250μg；
(5)亚心形扁藻藻种的高比重海水驯化：将培养在比重1.020培养液中的藻种，接种到比重提高0.005达1.025的培养液中，保持3天，进行第二次接种，培养液比重提高0.005达到1.030，保持3天，第三次接种，培养液比重提高0.004达到1.034，藻种培养在比重1.034的培养液中备用。
(6)接种：将步骤(5)驯化后生长在比重1.034的扁藻藻种接种到步骤(4)制备的培养液中，藻液容量和新配培养液容量的比例为1:5。
(7)日常管理：用充气机保持微波充气，光照强度8000lx，水温26℃，pH 8.2。
实施例4
一种用于亚心形扁藻中继培养的高比重海水培养方法
(1)培养设备的选择：选择容积200L的透明玻璃罐6个，每个玻璃罐安装散气石1个，使用前用淡水冲洗干净晾干。
(2)高比重海水的制备：将容积1.5立方米水体的水泥池清洗干净，注入天然过滤海水，添加粗盐配制成比重为1.034的高比重海水，调节pH值8.4；
(3)高比重海水的消毒：将步骤(2)制备的高比重海水注入到步骤(1)准备的玻璃罐中，用含氯消毒剂进行消毒处理；
(4)高比重海水培养液的制备：在步骤(3)制备的高比重海水中，按照每1000mL消毒海水依次添加NaNO3(硝酸钠)60mg，KH2PO4(磷酸二氢钾)5mg，FeC6H5O7(柠檬酸铁)2mg，NaHCO3(碳酸氢钠)600mg，复合维生素B 300μg；
(5)亚心形扁藻藻种的高比重海水驯化：将培养在比重1.022培养液中的藻种，接种到比重提高0.005达1.027的培养液中，保持3天，进行第二次接种，培养液比重提高0.005达到1.032，藻种保持在比重1.032的培养液中备用。
(6)接种：将步骤(5)驯化后生长在比重1.032的扁藻藻种接种到步骤(4)制备的培养液中，藻液容量和新配培养液容量的比例为1:6。
(7)日常管理：用充气机保持微波充气，光照强度10000lx，水温30℃，pH 8.4。
亚心形扁藻不同培养方式的培养效果见表1
表1亚心形扁藻培养结果
Figure BDA0002710846770000051
通过上面的对比试验可以看出，采用高比重海水配制培养液进行亚心形扁藻中继培养，亚心形扁藻生长速度快、繁殖速度快，不容易受到敌害生物的污染，亚心形扁藻在接种后第四天就能够达到比较高的培养密度，可以用于亚心形扁藻的生产性培养，为亚心形扁藻的生产性大量培养提供充足纯净的藻种。

Claims (3)

1.一种用于亚心形扁藻中继培养的高比重海水培养方法，其特征在于：包括如下步骤：
（1）培养设备的选择：选择透光性良好的容积为100-500L的透明薄膜袋或者容积为100-200L白色塑料桶或者容积为200-500L的玻璃罐；每个设备安装散气石1-2个，使用前用淡水冲洗干净晾干；
（2）高比重海水的制备：将盛水装置清洗干净，注入天然过滤海水，添加卤水或者粗盐配制成比重为1.030-1.034的高比重海水；
（3）高比重海水培养液的制备：将步骤（2）制备的高比重海水注入步骤（1）的培养设备中，经消毒处理后，按照亚心形扁藻的培养配方添加营养盐和复合维生素B；
（4）接种：按照亚心形扁藻培养方法将亚心形扁藻接种到步骤（3）配制的培养液中；
（5）日常管理：按照亚心形扁藻培养的常规方法进行日常管理，利用充气机保持微波充气，光照强度保持6000-10000lx，水温20-30℃，pH7.8-8.4；
步骤（3）所述亚心形扁藻的培养配方为：硝酸钠60 mg，磷酸二氢钾5 mg，柠檬酸铁2mg，碳酸氢钠600mg，复合维生素B 100μg- 300μg，消毒海水1000mL；
步骤（4）所述接种，将经过高比重海水驯化生长比重达到1.030-1.034的扁藻藻种接种到步骤（3）制备的培养液中，藻液容量和新配培养液容量的比例为1:4-6；
所述亚心形扁藻藻种高比重海水驯化的过程：若亚心形扁藻藻种的生长比重低于1.030，则接种到比重比原培养液高0.004-0.005的培养液中，保持3天，进行第二次接种，培养液比重再提高0.004-0.005，保持3天，如此重复进行上述操作直到亚心形扁藻藻种生长比重达1.030-1.034。
2.根据权利要求1所述用于亚心形扁藻中继培养的高比重海水培养方法，其特征在于：步骤（2）所述盛水装置为容积1-2立方米水体的水泥池。
3.根据权利要求1所述用于亚心形扁藻中继培养的高比重海水培养方法，其特征在于：步骤（3）所述高比重海水的消毒，用常规含氯消毒剂进行消毒处理。
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