CN112076120B - 用于修复敏感肌肤的护肤组合物及其制备方法 - Google Patents

用于修复敏感肌肤的护肤组合物及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于化妆品技术领域，具体涉及用于修复敏感肌肤的护肤组合物及其制备方法和精华，所述护肤组合物包含：西番莲愈伤组织培养细胞和/或其提取物，和‑番茄提取物酵母菌发酵产物。本发明提供的护肤组合物可作为抗过敏产品，用于改善皮肤敏感效果突出，具有显著的降低皮肤红色素及祛红的效果，且具有修复皮肤屏障功能的作用；也可与刺激性较大的外用产品并行使用，如含水杨酸、果酸的祛痘产品，具体使用方法可以在使用祛痘产品前或后使用，目的在于抑制祛痘产品引起的敏感肌肤发红，干燥，瘙痒等症状。

Description

用于修复敏感肌肤的护肤组合物及其制备方法
技术领域
本发明属于化妆品技术领域。更具体地，涉及用于修复敏感肌肤的护肤组合物及其制备方法。
背景技术
由于环境因素、季节变化以及过度不当使用面部护肤品导致越来越多敏感肌肤的出现，敏感肌肤一般具有以下特征：①皮肤轻薄，干燥缺水，含有较明显的红血丝；②温度变化及季节变化均会容易引起皮肤泛红、发热、刺激及有瘙痒感；③肌肤保水能力差，表现为明显的紧绷和干燥。
西番莲种类繁多，最普遍的物种为粉色西番莲(P.incarnata)和紫果西番莲(P.edulis)，其中，粉丝西番莲主要成分为黄酮类，其主要存在于叶片中，叶片中还含有较高的异牡荆素和少量的吲哚生物碱、精油、糖类及麦芽酚；紫果西番莲叶片含有较多的异荭草素(是粉色西番莲中没有发现的)，其还含有与西番莲类似的精油和生物碱种类。有研究表明，西番莲的果实或花梢提取物具有清除自由基，抗氧化的作用，因此多被应用于制备抗衰老产品，但是未见将其应用于改善肌肤敏感症状。
番茄提取物含有较多的维生素、有机酸、生物碱和黄酮类化合物，其中，维生素中包括胡萝卜素、维生素B1、维生素B2、维生素A、维生素C、维生素D和番茄红素等；有机酸主要是柠檬酸和苹果酸。将新鲜番茄经组织粉碎后取汁液，在经水或有机溶剂获得的番茄提取物被证实具有较好的抗菌性和抗氧化性，且番茄提取物对表皮细胞的增值作用和对组织蛋白酶的活化作用表明，其可增强皮肤细胞新陈代谢，结合其抗氧化性，可被应用于制备抗衰老化妆品，少见将其应用于改善皮肤敏感。
目前，市面上的修复敏感肌肤的产品一般多是两种或几种以上植物提取物的复合，但是不同植物提取物的复合不一定可以带来抗敏效果的叠加，很多时间，更多的是体现相互的拮抗作用，甚至出现加重皮肤敏感情况。因此，要得到具备协同作用的针对于修复敏感根源的护肤品是不容易的。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有产品的缺陷和不足，提供一种用于修复敏感肌肤的护肤组合物。
本发明的目的是提供用于修复敏感肌肤的护肤组合物，其包含：
-西番莲愈伤组织培养细胞和/或其提取物，和
-番茄提取物酵母菌发酵产物。
优选地，所述西番莲愈伤组织培养细胞是以西番莲的叶片作为外植体采用常规技术培养形成愈伤组织，然后经裂解、均质、冻干制备得到的；当然，以西番莲的茎尖、芽、叶柄、子叶、下胚轴为外植体培养也是可行的，但出于效果优化的考虑，以西番莲的叶片作为外植体培养获得的培养细胞协同提高抗敏的效果是最好的。
术语中“叶片”优选采用2～6月龄的叶片。
术语“培养”可采用目前本领域技术人员熟知的愈伤组织培养技术，特别地，在本发明中愈伤组织培养技术包括以下步骤：将符合条件的叶片作为外植体，在含有10～30g/L蔗糖、0.5～1.2mg/L IBA的MS培养基上培养20d，回收全细胞；其中培养温度为27℃，光周期为10h/d。
术语“回收细胞”是指：培养结束后，将愈伤组织裂解后，经高压均质化，过滤，冻干得到。
试验证明，经过上述培养获得的西番莲愈伤组织培养细胞与番茄提取物酵母菌发酵产物按一定的重量比联合，产生了比单一作用更强的抗敏作用，可用于预防/治疗皮肤过敏现象。
本文中所述西番莲愈伤组织培养细胞提取物是西番莲愈伤组织培养细胞的60～80％乙醇提取物；特别地，所述西番莲愈伤组织培养细胞提取物是将冻干形式的西番莲愈伤组织培养细胞溶解于60～80％乙醇溶液中，提取得到的。
特别地，经发明人的试验表明，西番莲愈伤组织培养细胞提取物与番茄提取物酵母菌发酵产物的组合出乎预料地产生了协同抗敏及修复敏感肌肤的活性，该组合特别适用于保护和修复敏感肌肤。
本文中涉及的“西番莲”可以是粉红色西番莲或紫果西番莲，特别地优选为粉色西番莲。
优选地，所述番茄提取物酵母菌发酵产物是以含有10～35％番茄醇提物的酵母菌培养基作为发酵基质，接种酵母菌发酵，取发酵滤液，经过滤，冻干获得的。
特别地，术语“番茄醇提物”是将新鲜番茄经组织粉碎后取汁液，经醇类经回流提取得到；特别地，术语“醇类”可选自乙醇溶液或甲醇溶液；优选选用50～80％的乙醇溶液；术语“回流提取”的温度70～90℃，优选提取1～3次。原则上，经回流提取后，需要经减压浓缩，过滤的步骤才能获得本发明所述的“番茄醇提物”。
特别地，发酵基质中，番茄醇提物的加入体积比为20～32％；更优选地加入体积为25％、22％、28％或31％。
特别地，所述发酵的参数为：pH值为4.8～5.3；搅拌速度为120～250rpm；通气量为1～4VVM；发酵温度为25～32℃；发酵时间为3天～6天。
术语“酵母菌培养基”原则上可采用现有的常规培养基，在本发明中，可采用以下组成的酵母培养基：每100ml水中含有，马铃薯15g、葡萄糖3g、琼脂1.5～2g。
特别地，本发明较为优选的实施例为，所述西番莲愈伤组织培养细胞和/或其提取物与番茄提取物酵母菌发酵产物的重量比为6:2～8；更优选地，重量比可为6:4、6:2、6:5或6:8。
本发明另一目的是提供上述的护肤组合物在制备修复敏感肌肤化妆品中的用途。
本发明另一目的是提供一种用于修复敏感肌肤的化妆品，其含有1～99％的所述的护肤组合物。特别地，当将所述的护肤组合物制备成可用于局部施用的化妆品时，所述的护肤组合物可作为唯一的或不唯一的功效成分；当其作为唯一的功效成分时，其在所述化妆品中优选的重量为20％、22％、16％或14％。
特别地，所述的化妆品制剂还可以包括本领域中可接受的赋形剂，这些赋形剂是本领域技术人员熟知的，包括但不限于：润肤剂、螯合剂、增稠剂、乳化剂、防腐剂等，具体可根据配方需要进行调整选择。
本发明具有以下有益效果：
本发明提供的护肤组合物可作为抗过敏产品，用于改善皮肤敏感效果突出，具有显著的降低皮肤红色素及祛红的效果，且具有修复皮肤屏障功能的作用；也可与刺激性较大的外用产品并行使用，如含水杨酸、果酸的祛痘产品，具体使用方法可以在使用祛痘产品前或后使用，目的在于抑制祛痘产品引起的敏感肌肤发红，干燥，瘙痒等症状。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。
酵母菌培养基组成为：每100ml水中含有，马铃薯15g、葡萄糖3g、琼脂1.5～2g。
实施例1、护肤组合物
获得番茄提取物酵母菌发酵产物：
a)取新鲜番茄，组织粉碎后，过滤取汁液，加入汁液5倍量的55％的乙醇溶液，在85℃下提取2次，合并滤液，过滤，减压浓缩除去乙醇，获得番茄醇提物；
b)取上述番茄醇提物按25％体积比加入到酵母发酵培养基中获得发酵基质，接种预先摇床培养好的酵母菌，使得发酵基质中酵母菌的浓度为6×106cfu/ml，进行发酵，发酵结束后，取发酵液，经超滤膜过滤，冻干获得番茄提取物酵母菌发酵产物；其中发酵参数为：pH值为4.8～5.3；搅拌速度为120～250rpm；通气量为1～4VVM；发酵温度为25～32℃；发酵时间为4天。
获得西番莲愈伤组织培养细胞和其提取物：
a)挑选4月龄的西番莲叶片作为外植体，在含有30g/L蔗糖、1.2mg/L IBA的MS培养基上培养20d，形成愈伤组织，将愈伤组织进行裂解，经高压均质化，过滤，冻干得到西番莲愈伤组织培养细胞；其中，培养过程中培养温度为27℃，光周期为10h/d；
b)将上述获得的西番莲愈伤组织培养细胞按1g：12ml的料液比溶解于70％乙醇溶液中，均质，过滤，减压浓缩除去乙醇，得到西番莲愈伤组织培养细胞提取物。
本实施例所述护肤组合物由西番莲愈伤组织培养细胞提取物和番茄提取物酵母菌发酵产物按重量比6:4组成。
实施例2、护肤组合物
获得番茄提取物酵母菌发酵产物：
a)取新鲜番茄，组织粉碎后，过滤取汁液，加入汁液6倍量的75％的乙醇溶液，在85℃下提取2次，合并滤液，过滤，减压浓缩除去乙醇，获得番茄醇提物；
b)取上述番茄醇提物按22％体积比加入到酵母发酵培养基中获得发酵基质，接种预先摇床培养好的酵母菌，使得发酵基质中酵母菌的浓度为6×106cfu/ml，进行发酵，发酵结束后，取发酵液，经超滤膜过滤，冻干获得番茄提取物酵母菌发酵产物；其中发酵参数为：pH值为4.8～5.3；搅拌速度为120～250rpm；通气量为1～4VVM；发酵温度为25～32℃；发酵时间为5天。
获得西番莲愈伤组织培养细胞和其提取物：
a)挑选4月龄的西番莲叶片作为外植体，在含有30g/L蔗糖、1.2mg/L IBA的MS培养基上培养20d，形成愈伤组织，将愈伤组织进行裂解，经高压均质化，过滤，冻干得到西番莲愈伤组织培养细胞；其中，培养过程中培养温度为27℃，光周期为10h/d；
b)将上述获得的西番莲愈伤组织培养细胞按1g：20ml的料液比溶解于80％乙醇溶液中，均质，过滤，减压浓缩除去乙醇，得到西番莲愈伤组织培养细胞提取物。
本实施例所述护肤组合物由西番莲愈伤组织培养细胞提取物和番茄提取物酵母菌发酵产物按重量比6:5组成。
实施例3、护肤组合物
获得番茄提取物酵母菌发酵产物：
a)取新鲜番茄，组织粉碎后，过滤取汁液，加入汁液6倍量的80％的乙醇溶液，在85℃下提取2次，合并滤液，过滤，减压浓缩除去乙醇，获得番茄醇提物；
b)取上述番茄醇提物按28％体积比加入到酵母发酵培养基中获得发酵基质，接种预先摇床培养好的酵母菌，使得发酵基质中酵母菌的浓度为6×106cfu/ml，进行发酵，发酵结束后，取发酵液，经超滤膜过滤，冻干获得番茄提取物酵母菌发酵产物；其中发酵参数为：pH值为4.8～5.3；搅拌速度为120～250rpm；通气量为1～4VVM；发酵温度为25～32℃；发酵时间为5天。
获得西番莲愈伤组织培养细胞和其提取物：
a)挑选4月龄的西番莲叶片作为外植体，在含有30g/L蔗糖、1.2mg/L IBA的MS培养基上培养20d，形成愈伤组织，将愈伤组织进行裂解，经高压均质化，过滤，冻干得到西番莲愈伤组织培养细胞；其中，培养过程中培养温度为27℃，光周期为10h/d；
b)将上述获得的西番莲愈伤组织培养细胞按1g：15ml的料液比溶解于65％乙醇溶液中，均质，过滤，减压浓缩除去乙醇，得到西番莲愈伤组织培养细胞提取物。
本实施例所述护肤组合物由西番莲愈伤组织培养细胞提取物和番茄提取物酵母菌发酵产物按重量比6:2组成。
实施例4、护肤组合物
获得番茄提取物酵母菌发酵产物：
a)取新鲜番茄，组织粉碎后，过滤取汁液，加入汁液6倍量的80％的乙醇溶液，在90℃下提取2次，合并滤液，过滤，减压浓缩除去乙醇，获得番茄醇提物；
b)取上述番茄醇提物按31％体积比加入到酵母发酵培养基中获得发酵基质，接种预先摇床培养好的酵母菌，使得发酵基质中酵母菌的浓度为6×106cfu/ml，进行发酵，发酵结束后，取发酵液，经超滤膜过滤，冻干获得番茄提取物酵母菌发酵产物；其中发酵参数为：pH值为4.8～5.3；搅拌速度为120～250rpm；通气量为1～4VVM；发酵温度为25～32℃；发酵时间为6天。
获得西番莲愈伤组织培养细胞和其提取物：
a)挑选4月龄的西番莲叶片作为外植体，在含有30g/L蔗糖、1.2mg/L IBA的MS培养基上培养20d，形成愈伤组织，将愈伤组织进行裂解，经高压均质化，过滤，冻干得到西番莲愈伤组织培养细胞；其中，培养过程中培养温度为27℃，光周期为10h/d；
b)将上述获得的西番莲愈伤组织培养细胞按1g：10ml的料液比溶解于75％乙醇溶液中，均质，过滤，减压浓缩除去乙醇，得到西番莲愈伤组织培养细胞提取物。
本实施例所述护肤组合物由西番莲愈伤组织培养细胞提取物和番茄提取物酵母菌发酵产物按重量比6:8组成。
实施例5、护肤组合物
实施例5护肤组合物与实施例1区别在于，所述护肤组合物由实施例1获得的西番莲愈伤组织培养细胞和番茄提取物酵母菌发酵产物按重量比6:4组成，其余参数与实施例1相同。
实施例6～10用于修复敏感肌肤的精华液配方及其制备方法(质量分数％)
Figure BDA0002679085150000071
注：实施例6～10中所述护肤组合物分别对应使用实施例1～5护肤组合物。
制备方法：
将A相投入到水相锅中，搅拌均匀，加热搅拌至80℃，保温5min；将B相投入到油相锅中，加热至80℃，搅拌均匀；将水相锅中的物料经过滤后抽入到乳化锅中，油相锅中的物料经过滤后，缓慢抽入到乳化锅中，搅拌均匀，均质5min；降温至35℃，加入C相，搅拌均匀，检验合格后出料，灌装即得。
对比例1、与实施例6区别在于，采用番茄醇提取物替代番茄提取物酵母菌发酵产物，其余参数与实施例6相同。
番茄醇提取物的制备方法：取新鲜番茄，组织粉碎后，过滤取汁液，加入汁液5倍量的55％的乙醇溶液，在85℃下提取2次，合并滤液，过滤，减压浓缩除去乙醇，获得番茄醇提物。
对比例2、与实施例6区别在于，采用西番莲70％乙醇溶液提取物替代西番莲愈伤组织培养细胞提取物，其余参数与实施例6相同。
其中，西番莲70％乙醇溶液提取物制备方法为：
挑选西番莲4月龄叶片，组织粉碎，按1g：12ml的料液比加入70％乙醇溶液，均质，过滤，减压浓缩除去乙醇，得到西番莲70％乙醇提取物。
对比例3、与实施例6区别在于，所述护肤组合物为20％西番莲愈伤组织培养细胞提取物，其余参数与实施例6相同。
对比例4、与实施例6区别在于，所述护肤组合物为20％番茄提取物酵母菌发酵产物，其余参数与实施例6相同。
对比例5、与实施例6区别在于，采用乳酸菌替换酵母菌对番茄醇提取物进行发酵获得番茄提取物乳酸菌发酵产物，采用制备的番茄提取物乳酸菌发酵产物替代所述番茄提取物酵母菌发酵产物，其余参数与实施例6相同。
其中，番茄提取物乳酸菌发酵产物的具体制备步骤为：
a)取新鲜番茄，组织粉碎后，过滤取汁液，加入汁液5倍量的55％的乙醇溶液，在85℃下提取2次，合并滤液，过滤，减压浓缩除去乙醇，获得番茄醇提物；
b)取上述番茄醇提物按25％体积比加入到乳酸菌培养基中获得发酵基质，接种预先摇床培养好的乳酸菌，使得发酵基质中酵母菌的浓度为6×106cfu/ml，进行发酵，发酵结束后，取发酵液，经超滤膜过滤，冻干获得番茄提取物乳酸菌发酵产物；其中发酵参数为：搅拌速度为120～200rpm；通气量为1～3VVM；发酵温度为37℃；发酵时间为4天。其中，乳酸菌培养基的组成为：每1000ml水中：马铃薯200g、琼脂15～20g，pH自然。
试验例一、皮肤屏障功能修复试验
通过检测皮肤TEWL值来评价各护肤精华对皮肤屏障功能的修复作用。
1.试验方法：选取100名女性志愿者，各组受试者无全身性疾病和其他皮肤病症，一周内未使用过其他护肤品，女性均不在妊娠期或哺乳期内，自愿全程参加试验；将100名受试者随机分为10组，每组10人，分别外用实施例6～10以及对比例1～5制备的精华，每天使用产品两次，早晚各一次，连续使用28天，采用Tewameter测试仪测试各组受试者使用前及使用后第28天的TEWL值，每次测定采用连续测定的方法，读数周期为1秒，每次测1分钟，测得60个数据的平均值作为透皮失水率(g/hm2)，试验结果如下表1所示。各测试环境：在温度为22～25℃，相对湿度为35～45％的室内进行测定，各组受试者进入测试室休息30分钟后开始测试。
表1皮肤TEWL值变化
样品 使用前 第28天 变化率(％)
实施例6 22.60 12.15 -46.24％
实施例7 21.41 12.54 -41.43％
实施例8 23.37 12.16 -47.97％
实施例9 21.44 11.60 -45.90％
实施例10 22.18 14.33 -35.39％
对比例1 24.46 17.22 -29.60％
对比例2 23.55 18.39 -21.91％
对比例3 23.83 19.85 -16.70％
对比例4 21.94 18.78 -14.40％
对比例5 22.47 14.85 -33.91％
注：TEWL值越小，表明皮肤屏障功能越好，修复越好。
变化率＝(第28天皮肤TEWL值-使用前TEWL值)/使用前TEWL值×100％
由上表可知，由上表可知，使用前各组受试者皮肤TEWL值大多数均在22g/hm2以上，说明皮肤屏障均存在不同程度的受损，而使用本发明实施例6～10护肤精华28天后，各组受试者与使用前相比皮肤屏障功能有明显地增强，各组受试者皮肤TEWL值稳定在12～15g/hm2之间，皮肤屏障功能良好，说明番茄提取物酵母菌发酵产物+西番莲愈伤组织培养细胞和/或其提取物的组合物对皮肤屏障功能具有修复作用；而番茄提取物酵母菌发酵产物和西番莲愈伤组织培养细胞提取物单独作用时，对皮肤屏障修复作用不太理想，说明两者在修复皮肤屏障功能方面取得了协同增效的作用。
试验例二、皮肤红色素分析
采用Mexameter测试仪测试试验例一志愿者使用前及使用产品后第28天脸部红色素情况，结果如下表2所示。
表2皮肤红色素变化情况
Figure BDA0002679085150000091
Figure BDA0002679085150000101
由上表可知，使用本发明实施例6～10护肤精华28天后，各组受试者与使用前相比皮肤红色素有明显减少，其中以实施例6～10效果较优，红色素减少17％以上。说明，以番茄提取物酵母菌发酵产物+西番莲愈伤组织培养细胞和/或其提取物的组合具有良好的改善皮肤红斑的效果，这种效果是两者协同取得的。
试验例三、祛红血丝试验
选取110名脸部分布有红血丝的自愿者，平均年龄为32岁，随机分为10组，每组11人，分别外用实施例6～10以及对比例1～5制备的精华，每天使用产品两次，早晚各一次，连续使用28天，采用VISA皮肤测试仪对使用前和使用后脸部红血丝情况进行拍照存档，并对红血色的变化情况进行评价，评价结果如下表3所示。
评价标准：红血丝祛除30％以上为显效；红血丝祛除5～30％为有效；红血丝祛除5％以下或不明显为无效。
表3红血丝变化情况
Figure BDA0002679085150000102
Figure BDA0002679085150000111
由上表可知，含有本发明护肤组合物的精华对红血色具有优秀的祛除效果，大部分受试者脸部的红血丝祛除均在30％以上；而仅含有番茄提取物酵母菌发酵产物的精华(对比例4)表现出较差的祛红作用；仅含有西番莲愈伤组织培养细胞提取物的精华祛红效果相比实施例6有明显下降。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.用于修复敏感肌肤的护肤组合物，其特征在于，其包含：
-西番莲愈伤组织培养细胞和/或其提取物，和
-番茄提取物酵母菌发酵产物；
其中，所述西番莲愈伤组织培养细胞是以西番莲的叶片作为外植体采用常规技术培养形成愈伤组织，然后经裂解、均质、冻干制备得到的；
所述西番莲愈伤组织培养细胞提取物是将冻干形式的西番莲愈伤组织培养细胞溶解于60~80%乙醇溶液中提取得到的；
所述番茄提取物酵母菌发酵产物是以含有10~35%番茄醇提物的酵母菌培养基作为发酵基质，接种酵母菌发酵，取发酵滤液，经过滤，冻干获得的；
所述西番莲愈伤组织培养细胞和/或其提取物与番茄提取物酵母菌发酵产物的重量比为6:2~8。
2.如权利要求1所述的护肤组合物，其特征在于，所述发酵的参数为：pH值为4.8~5.3；搅拌速度为120~250rpm；通气量为1~4VVM；发酵温度为25~32℃；发酵时间为3天~6天。
3.如权利要求1所述的护肤组合物，其特征在于，所述西番莲愈伤组织培养细胞和/或其提取物与番茄提取物酵母菌发酵产物的重量比为6:4。
4.如权利要求1~3任一所述的护肤组合物在制备修复敏感肌肤化妆品中的用途。
5.一种用于修复敏感肌肤的化妆品，其特征在于，其含有1~99%的如权利要求1~3任一所述的护肤组合物。
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