CN1120547A - 神经生长刺激肽(ntps)的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及的是一种神经生长刺激肽(NTPS)的制备方法，它是一种从健康幼年哺乳类动物的脑中，采用中空纤维超虑提取具有较高生物活性的神经生长刺激肽(NTPS)的方法，按该方法提取分子量小于1万和/或5万道尔顿的产物，和常规的透析法比较，所提取的产物浓度和活性更高，提取物可临床应用于脑外伤或脑类后遗症等疾病的治疗。
Description
本发明涉及的是神经生长刺激肽(NTPS)，尤其是涉及具有稳定生物活性的NTPS的技术领域。
(NTPS)神经生长刺激肽制备传统工艺是采用透析法制备，存在产量低、活性低的问题。一般用于治疗各种神经系统疾病的脑活素或与脑活素相似的同类产品，均系从成年猪脑中来源，而从幼年哺乳类动物脑中制备NTPS活性的物质，目前尚未见报道。
本发明目的在于提供一种采用中空纤维超滤技术制备出浓度高、产量高、活性高的(NTPS)，且系选取健康幼年哺乳类动物的脑可以制成口服液，也可是制成注射药。
本发明的目的可通过以下的技术措施来达到：选取健康幼年哺乳类动物的脑，用任何机械方式捣碎—→接下来进行-20℃深冻→融解后按每10L液体加1ml浓HCl，搅匀→加热80℃，15min→恢复室温，冻存→融解后，离心3000rpm，30分钟→取上清液→过正压截
下面结合附图进一部说明本发明所述方法及其产品的图谱：
附图1为本发明的NTPS的紫外光谱扫描分析图谱；
附图2为本发明的NTPS的HPLC的图谱；
本发明的目的还可以通过以下技术措施来达到：冻融方法可重复1至数次、加HCl的剂量可从1ml至数十毫升，目的是破坏匀浆的胶体平衡，加温方式是从60—80℃之间任一温度、截留柱系采用中空纤维超滤柱，截留分子量≤50000Da及≤10000Da，正压0.5×104Pa，其组合方式可为单一柱或多柱串联使用。制备的神经生长刺激肽(NTPS)活性保持冷冻干燥方法：-40℃速冻，维持2小时30分钟，于半小时升温至0℃，持续3小时后在1小时内升温至37℃—38℃维持30小时。制备的刺激肽(NTPS)是一类具有促进神经元存活和突起生长，促进神经元内线粒体脱氢酶活力的分子量为5000—10000Da的多肽或蛋血混合物。
本发明制备出的神经生长刺激肽(NTPS)截留分子量≤50000Da时可用于制成神脑口服液，截留分子量≤10000Da时制成注射用药。当要成为神脑口服液时，在制备过程到除菌一步则要加调味剂而后分装成品。用于制注射用药，则在制备过程到分装一步，而后冻干、包装成品。
本发明的目的采用中空纤维过滤技术制备刺激肽，与传统工艺透析法制备相比具有浓度高、产量高、活性高的特点，其比较强果如下表。(含量测定采用改良Lowry’s法，活性测定见方法专利)
中空纤维法与透析法生产的NTPS比较
中空纤维法 透析法
NTPS的产量 2.0 1.5
(ml/g脑)
多肽含量 1.75 0.12
(mg/ml)
活性单位 87 6
(in/ml)
本发明制备的神经生长刺激肽(NTPS)的健康幼年哺乳类动物选自如：人、猪、牛、马、羊、狗、兔。
本发明制备的神经生长刺激肽(NTPS)可制成口服液和肌肉注射，或与其他药物配伍静脉滴入给药。
本发明的具体实施方法如下：
神经生长刺激肽(NTPS)是一种用于治疗神经系统疾病的药物，其制备方法是采用中空纤维法，选取健康幼年哺乳类动物的脑经任何机构方式捣碎、深冻、融解加HCL加热、冻存、离心，上清液、过正压截留柱、除菌、分装、冻干、包装流程制得注射用药或除菌后加调味剂、分装流程制成口服液，它们实际上是一种多肽混合物，生物活性稳定，具有刺激神经元突起生长和支持存活的作用。与透析法相比制备的NTPS具有产量高、浓度高、活性高等特点。
本发明涉及的是一种治疗神经系统疾病的药物——促脑康，是从健康幼年哺乳动物如乳猪、新生牛等大脑提取的神经生长刺激肽(NTPS)，分子量为≤10000Da及≤50000Da它实际是一种多肽混合物，生物活性稳定，具有刺激神经元突起生长和支持存活作用。临床应用可采用口服和肌肉注射给药，也可与其它药物配伍静脉滴入，在治疗神经系统疾病方面显示出良好的效果。
Claims (4)
1、一种稳定的神经生长刺激肽(NTPS)的制备方法，其特征是所述的制备方法，选取健康幼年哺乳类动物的脑，用任何机械方式捣碎→-20℃深冻→融解后按每10L液体加1ml浓Hcl，搅匀→加热80℃，15min→恢复室温，冻存→融解后，离心3000rpm，30分钟→取上清液→过正压
2、根据权利要求1所述的神经生长刺激肽制备方法，其特征是：冻融方法，可重复1至数次、加HCl的剂量可从1ml至数十毫升、加温方式是从60-80℃之间任一温度、截留柱系采用中空纤维超滤柱，截留分子量≤50000Da及≤10000Da，正压0.5×104Pa，其组合方式可为单一柱或多柱串联使用。
3、根据权利要求1所述的神经生长刺激肽制备方法，其特征是制备的刺激肽活性保持冷冻干燥方法：-40℃速冻，维持2小时30分钟后，于半小时升温至0℃，持续3小时后在1小时内升温至37℃—38℃维持30小时。
4、根据权利要求1所述的神经生长刺激肽制备方法，其特征是制备的刺激肽(NTPS)是一类具有促进神经元存活和突起生长，促进神经元内线粒体脱氢酶活力的分子量为5000—10000Da的多肽或蛋血混合物。
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| CN 94116345 CN1052239C (zh) | 1994-10-10 | 1994-10-10 | 神经生长刺激肽(NTPs)的制备方法 |
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Country Status (1)
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| CN (1) | CN1052239C (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2024164927A1 (en) * | 2023-02-09 | 2024-08-15 | Alis Pharma Ltd. | Use of fetal sheep brain extracts for managing neurodegenerative diseases |
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1994
- 1994-10-10 CN CN 94116345 patent/CN1052239C/zh not_active Expired - Lifetime
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|---|---|---|---|---|
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Also Published As
| Publication number | Publication date |
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| CN1052239C (zh) | 2000-05-10 |
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