CN111983222A - 一种毛发中毒品提取液、提取方法及应用 - Google Patents

一种毛发中毒品提取液、提取方法及应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种毛发中毒品提取液，所述毛发中毒品提取液由以下组分组成：质量浓度为5‑8％蛋白酶K和质量浓度为1‑5％角蛋白酶，体积浓度为1‑2％甲醇，质量浓度为0.1％二硫苏糖醇，50mM tris‑cl，所述提取液的PH为7.5‑8。本发明提取液增加了角蛋白酶降低了蛋白酶k的使用量，降低了成本；本发明将剪碎毛发加入含有毒品提取液的破碎管中，于高频振荡破碎器上，调节破碎时间，振荡频率。可以快速检测出头发中的毒品，并进行定性。从样品处理到出结果仅仅需要5‑10分钟。操作简单，时效性好。

Description

一种毛发中毒品提取液、提取方法及应用
技术领域
本发明涉及公共安全检测技术领域，尤其涉及一种毛发中毒品提取液、提取方法及应用。
背景技术
目前世界各地因吸毒引发的抢劫盗窃、暴力伤害、交通肇事等案件不断增多，严重影响社会治安和公共安全。在毒品问题全球化的大背景下，中国毒品形势依然严峻复杂。
当前毒品检测样本主要有尿液，血液，唾液、毛发。检测方法有化学方法、色谱法、光谱法、免疫法等。
毛发中毒品定性检测是法医毒物鉴定学科中兴起的检测技术，主要对阿片类、苯丙胺类、氯胺酮等毒品进行定性检测。相对于其他检材，毛发分析可避免暂时性药物切断或掺假的干扰、采样容易、检材稳定、结果可信，且检测期限宽，可反映吸毒的时间范围、吸毒的程度及吸毒的变化。因此与其他检材相比，毛发分析在甄别吸毒者方面，具有检测时限长、药物储存稳定、便于取材、样品保存等优势，毛发检测出毒品成分现已被作为公安机关认定其吸毒成瘾的重要依据。
现有的毛发中毒品检测技术仅停留在实验室中的仪器检测，常用的仪器检测方法为气相色谱-质谱联用、高效液相色谱串联质谱法等，然而这些检测方式操作流程及其复杂、价格高而且周期相对较长，限制了毛发中毒品检测的应用范围。
发明内容
基于此，有必要提供一种毛发中毒品提取试剂盒、提取方法和检测方法，以解决传统的提取方法周期长、操作不便的问题。
为实现上述目的，本发明具体技术方案如下：
首先，本发明提供一种毛发中毒品提取液，所述毛发中毒品提取液由以下组分组成：质量浓度为5-8％蛋白酶K和质量浓度为1-5％角蛋白酶，体积浓度为1-2％甲醇，质量浓度为0.1％二硫苏糖醇，50mM tris-cl，所述提取液的PH为7.5-8。
优选地，所述毛发中毒品提取液由以下组分组成：质量浓度为5％蛋白酶K和质量浓度为5％角蛋白酶，体积浓度为1％甲醇，质量浓度为0.1％二硫苏糖醇，50mM tris-cl，所述提取液的PH为7.5-8。
将蛋白酶K、角蛋白酶、甲醇、二硫苏糖醇和tris-cl加入离子水中并混合均匀，得到配方浓度的毛发中毒品提取液。
进一步地，本发明提供了所述的毛发中毒品提取液在制备毛发中毒品提取试剂盒中的应用。
在一些实施方式中，所述试剂盒包括所述的毛发中毒品提取液和破碎管；
所述破碎管为耐高频振荡的塑料管，内有破碎珠。
在一些实施方式中，所述破碎珠为金属珠、氧化锆、玻璃珠的一种或多种；
在一些实施方式中，所述的破碎珠直径为2-4mm。
进一步地，本发明提供一种毛发中毒品提取检测方法，使用所述的毛发中毒品提取液，所述毛发中毒品提取方法包括如下步骤：
步骤一，将待测毛发样本与毛发中毒品提取液同时加入到破碎管中；
步骤二，将步骤一制得的破碎管进行高频振荡，频率为50-70hz，时间为30-90秒；
步骤三，将步骤二制得的毛发中毒品提取混合溶液离心，取上清进行检测，或直接取悬液进行胶体金法检测。
具体的，取5-10滴上清溶液或悬液，滴入胶体金毒品检测盒检测区的圆孔内，静置3-5分钟后即可观测结果，若C、T两条线则表示检测结果为阴性，若只有C线则表示检测结果为阳性，若只有T线则表示检测结果无效。
在一种实施方式中，所述步骤二中所述的高频振荡采用常温高频振荡粉碎器。
更进一步地，本发明提供所述的毛发中毒品提取液或所述的毛发中毒品提取检测方法在毒品鉴定中的应用。
基于上述技术方案，本发明具有以下有益效果：
发明人公开了一种毛发中毒品提取液，所述毛发中毒品提取液由以下组分组成：质量浓度为5-8％蛋白酶K和质量浓度为1-5％角蛋白酶，体积浓度为1-2％甲醇，质量浓度为0.1％二硫苏糖醇，50mM tris-cl，所述提取液的PH为7.5-8。本发明提取液增加了角蛋白酶降低了蛋白酶k的使用量，降低了成本；本发明将剪碎毛发加入含有毒品提取液的破碎管中，于高频振荡破碎器上，调节破碎时间，振荡频率。可以快速检测出头发中的毒品，并进行定性。从样品处理到出结果仅仅需要5-10分钟。操作简单，时效性好。
附图说明
图1毛发中毒品提取液的鉴定结果。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。
实施例1毛发中毒品提取液方案1配制
配制：质量浓度为5％蛋白酶K和质量浓度为1％角蛋白酶，体积浓度为1％甲醇，质量浓度为0.1％二硫苏糖醇，50mM tris-cl，所述提取液的PH为7.5-8。
实施例2毛发中毒品提取液方案2配制
配制：质量浓度为8％蛋白酶K和质量浓度为1％角蛋白酶，体积浓度为2％甲醇，质量浓度为0.1％二硫苏糖醇，50mM tris-cl，所述提取液的PH为7.5-8。
实施例3毛发中毒品提取液方案3配制
配制：质量浓度为5％蛋白酶K和质量浓度为5％角蛋白酶，体积浓度为1％甲醇，质量浓度为0.1％二硫苏糖醇，50mM tris-cl，所述提取液的PH为7.5-8。
实施例4毛发中毒品提取液方案4配制
配制：质量浓度为6％蛋白酶K和质量浓度为3％角蛋白酶，体积浓度为2％甲醇，质量浓度为0.1％二硫苏糖醇，50mM tris-cl，所述提取液的PH为7.5-8。
实施例5毛发中毒品提取液的提取效果鉴定
称取剪碎成2-3mm的毛发10mg分别用1-4方案进行，高频振荡破碎器上，破碎(60s，60hz)提取，以比浊度作为毛发降解的评价指标(美国Biotek酶标仪Epoch检测)。结果如下表1所示：
表1毛发降解的浊度指标
OD600(n＝6)
方案1 1.985±0.237
方案2 1.356±0.179
方案3 1.736±0.395
方案4 1.537±0.551
OD值越小，浊度越低，提取液的提取效果越好。
实施例6毛发中毒品检测
取待检测头发，2-3厘米，20根左右，剪碎1-3毫米，分别称取5mg加入含有50μl毒品提取液实施例1-4或对照提取液(吗啡、甲基安非他明联合检测试剂，杭州博拓生物)的破碎管中。与高频振荡破碎器上，调节破碎时间60秒，振荡频率60hz；制得毛发中毒品提取混合溶液离心，取5-10滴上清溶液滴入胶体金毒品检测盒检测区的圆孔内，静置3-5分钟后即可观测结果，若C、T两条线则表示检测结果为阴性，若只有C线则表示检测结果为阳性，若只有T线则表示检测结果无效。
结果如图1所示，本发明实施例1-4提供的毛发中毒品提取液，通过特定浓度的各特定组分相互配合，实施例1-4中提供的毛发中毒品提取液能够有效检测出毛发中的毒品(冰毒)。结合提取液的制作成本与提取效果(表1)，本发明提供的提取液的最佳方案为方案3。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (10)

1.一种毛发中毒品提取液，其特征在于，所述毛发中毒品提取液由以下组分组成：质量浓度为5-8％蛋白酶K和质量浓度为1-5％角蛋白酶，体积浓度为1-2％甲醇，质量浓度为0.1％二硫苏糖醇，50mM tris-cl，所述提取液的PH为7.5-8。
2.根据权利要求1所述的毛发中毒品提取液，其特征在于，所述毛发中毒品提取液由以下组分组成：质量浓度为5％蛋白酶K和质量浓度为5％角蛋白酶，体积浓度为1％甲醇，质量浓度为0.1％二硫苏糖醇，50mM tris-cl，所述提取液的PH为7.5-8。
3.如权利要求1或2所述的毛发中毒品提取液的制备方法，其特征在于，将蛋白酶K、角蛋白酶、甲醇、二硫苏糖醇和tris-cl加入离子水中并混合均匀，得到配方浓度的毛发中毒品提取液。
4.权利要求1或2所述的毛发中毒品提取液在制备毛发中毒品提取试剂盒中的应用。
5.根据权利要求4所述应用，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1或2所述的毛发中毒品提取液和破碎管；
所述破碎管为耐高频振荡的塑料管，内有破碎珠。
6.根据权利要求5所述应用，其特征在于，所述破碎珠为金属珠、氧化锆、玻璃珠的一种或多种；
所述的破碎珠直径为2-4mm。
7.一种毛发中毒品提取检测方法，其特征在于，使用如权利要求1或2中所述的毛发中毒品提取液，所述毛发中毒品提取方法包括如下步骤：
步骤一，将待测毛发样本与毛发中毒品提取液同时加入到破碎管中；
步骤二，将步骤一制得的破碎管进行高频振荡，频率为50-70hz，时间为30-90秒；
步骤三，将步骤二制得的毛发中毒品提取混合溶液离心，取上清进行检测，或直接取悬液进行胶体金法检测。
8.根据权利要求7所述的毛发中毒品提取检测方法，其特征在于，取5-10滴上清溶液或悬液，滴入胶体金毒品检测盒检测区的圆孔内，静置3-5分钟后即可观测结果，若C、T两条线则表示检测结果为阴性，若只有C线则表示检测结果为阳性，若只有T线则表示检测结果无效。
9.根据权利要求7所述的毛发中毒品提取检测方法，其特征在于，所述步骤二中所述的高频振荡采用常温高频振荡粉碎器。
10.权利要求1或2所述的毛发中毒品提取液或权利要求7～9任一项所述的毛发中毒品提取检测方法在毒品鉴定中的应用。
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