CN111903982A - 具有降胆固醇作用的双歧杆菌bz25发酵乳 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种具有降胆固醇作用的双歧杆菌BZ25发酵乳，所述发酵乳的活性成分包括：益生菌和辅料，辅料包括松茸和植物甾醇。所述益生菌为动物双歧杆菌BZ25，菌种保藏编号为CGMCC NO.10225。本发明将BZ25菌和经筛选后的辅料复配，在复配后，显著提升BZ25菌降低胆固醇的功效，再将组方制成发酵乳后用以动物实验，在饲喂高脂饲料的同时饲喂本发明的制剂，小鼠的胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇的水平和仅饲喂普通饲料的小鼠近似，和西药洛伐他汀取得了近似的效果，说明了本申请的发酵乳具有显著降低胆固醇水平的功能，在降胆固醇的药物或食物研究领域具有较高的应用价值。
Description
技术领域
本发明涉及生物制品技术领域，尤其涉及一种具有降胆固醇作用的双歧杆菌BZ25发酵乳。
背景技术
高血脂是指血脂水平过高，会直接引起多种严重危害人体健康的疾病，如动脉粥样硬化、冠心病、胰腺炎等。血脂水平通常通过胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)四种物质的水平进行检测。在高血脂人群体内，通常胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇水平较高，而高密度脂蛋白胆固醇的水平较低。
目前，为了降低高血脂带来的多种疾病风险，可以采取控制体重、运动锻炼或控制饮食，限制高胆固醇和饱和脂肪酸含量食物的食用或使用药物进行治疗等方式。现有技术有多种降胆固醇功能的中西药物，西药目前应用较为广泛的包括贝特类以及他汀类降脂药物，例如苯扎贝特、非诺贝特、普伐他汀、阿托伐他汀等。但是这些药物在使用的过程中往往伴随着多种副作用，主要是对肝脏和肾脏的损害，还可能引起精神抑郁、血管神经性水肿、脱发等不良反应(杜晓春.他汀类药物的不良反应[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(72):155.)。与之相对应的，中药虽然副作用较小，但是起效缓慢且适应性差(申请号为201610589923.4的中国专利)。为了缓解这方面的矛盾，现有技术有采用益生菌来制备具有降脂功能的药物或食品，例如将益生菌加入至乳制品中利用具有降脂功能的益生菌来降低人体内的血脂浓度(申请号为201710773744.0的中国专利)，大部分是单独利用益生菌的降脂功能，但在实际应用中，效果不佳，降脂效果难以达到预期。
发明内容
为了解决现有技术存在的问题，本发明提供一种具有降胆固醇作用的双歧杆菌BZ25发酵乳。
第一方面，本发明提供一种具有降脂功能的组合物，包括：
益生菌和辅料，以重量份计，所述益生菌为5～35份，所述益生菌为动物双歧杆菌；所述辅料包括松茸15～70份和植物甾醇10～40份。
进一步地，在所述组合物中，以重量份计，所述益生菌为10～30份，所述辅料包括松茸20～65份和植物甾醇20～30份。
优选地，所述益生菌为10～20份，所述辅料包括松茸25～40份和植物甾醇20～25份。
本发明中使用的益生菌、植物甾醇、松茸等辅料均可以通过本领域常规办法制得或市售购得。
所述益生菌优选为动物双歧杆菌BZ25(保藏编号：CGMCC No.10225，来源于申请号为201510018130.2的中国专利)，该菌株不仅降胆固醇能力高，而且耐酸受性、耐胆盐受性、耐氧性能力良好及具有益生特性，可以更好地促进益生菌的生长。
所述辅料松茸优选为松茸多糖含量为14.5％-18.0％。
所述植物甾醇优选为提取自大豆，甾醇含量95％-99％。
现有技术中，有一些益生菌株具备降解胆固醇或抑制肠道对胆固醇吸收的功能从而进一步降低人体胆固醇水平的功能，不同的菌株降低机体胆固醇水平的机理不同。本发明中成分益生菌BZ25主要是通过对胆固醇的吸收与粘附从而起到降胆固醇的作用。本发明经过大量研究发现，将益生菌与植物甾醇、松茸等辅料复配使用后，进一步提升了益生菌的降胆固醇功能，主要是由于植物甾醇、松茸等辅料对益生菌BZ25的生长具有促进作用，在益生菌和植物甾醇、松茸等同时使用后，益生菌对胆固醇的吸收与粘附作用得到显著加强，减少并阻断了肠道对胆固醇的吸收。
为了更好地使益生菌发挥降低胆固醇的功效，辅料中以重量份计还包括亚麻籽油10～50份、红曲粉5～40份、泛酸5～40份、烟酸5～25份和益生元5～35份。
其中益生元为低聚果糖、抗性糊精、低聚木糖、菊粉、水苏糖、低聚半乳糖、葡聚糖、壳聚糖或低聚异麦芽糖，优选为菊粉或抗性糊精，这可以显著促进组合物中的益生菌的生长。
本发明进一步提供所述组合物在制备具有降脂功能的食品添加剂或药物中的应用。
具体地，所述组合物可以降低胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇水平，同时提高高密度脂蛋白胆固醇的水平。
本发明进一步提供降胆固醇制剂，以所述组合物作为活性成分还可以根据制剂形式添加粘合剂、崩解剂、填充剂、甜味剂、稳定剂、色素、香精中的一种或几种。
所述降胆固醇制剂的剂型可以为散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、乳剂、混悬剂或者发酵剂。
优选地，所述组合物在降胆固醇制剂中的质量百分含量为15～50％。
作为一种优选的实施方式，本发明提供一种具有降胆固醇作用的双歧杆菌BZ25发酵乳，以重量份计，由如下成分组成：
进一步地，所述松茸中松茸多糖的含量为15％～20％；
进一步地，所述植物甾醇为大豆来源的植物甾醇。
本发明具有如下有益效果：
本发明将益生菌和经筛选的辅料复配，在复配后，显著促进了益生菌的生长繁殖，提升益生菌降低胆固醇的功效，再将组方制成发酵乳后用以动物实验，在饲喂高脂饲料的同时饲喂本发明的发酵乳，小鼠的胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇的水平和仅饲喂普通饲料的小鼠近似，和西药洛伐他汀效果近似，说明了本申请的发酵乳具有显著降低胆固醇水平的功能，对于解决高胆固醇问题具有重要意义。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1
本实施例提供一种降胆固醇功能的组合物，以重量份计，包括如下成分：
益生菌5～35份、植物甾醇10～40份、松茸15～70份、亚麻籽油10～50份、红曲粉5～40份、泛酸5～40份、烟酸5～25份和益生元5～35份。
以该组合物为活性成分，可以制备成多种剂型，如散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、乳剂、混悬剂或者发酵剂。
作为一种降低胆固醇效果较为显著的方式，本实施例进一步将该组合物制备成发酵乳的形式，包括：
上述组分中，动物双歧杆菌为动物双歧杆菌BZ25(保藏编号：CGMCC No.10225，来源于申请号为201510018130.2的中国专利)。
具体制备方法如下：称取上述份数组分(每份表示1.0g)，混合后，加入50份的动物乳搅拌混合后发酵，灌装制备成发酵乳。
称取上述份数组分(每份表示1.0g)，混合后，加入50份的动物乳搅拌混合后发酵，灌装制备成发酵乳。
实施例2
本实施例提供一种降胆固醇功能的发酵乳，以重量份计，包括如下成分：
上述组分中，动物双歧杆菌为动物双歧杆菌BZ25(保藏编号：CGMCC No.10225，来源于申请号为201510018130.2的中国专利)。
制备方法和实施例1相同。
实施例3
本实施例提供一种降胆固醇功能的发酵乳，以重量份计，包括如下成分：
动物双歧杆菌 10份
植物甾醇 25份
松茸 25份
上述组分中，动物双歧杆菌为动物双歧杆菌BZ25(保藏编号：CGMCC No.10225，来源于申请号为201510018130.2的中国专利)
制备方法和实施例1相同。
实施例4
本实施例提供一种降胆固醇功能的发酵乳，以重量份计，包括如下成分：
上述组分中，动物双歧杆菌为动物双歧杆菌BZ25(保藏编号：CGMCC No.10225，来源于申请号为201510018130.2的中国专利)，制备方法和实施例1相同。
对比例1
本对比例提供一种具有降低胆固醇功能的发酵乳，成分包括：
制备方法和用量与实施例1相同。
对比例2
本对比例提供一种具有降低胆固醇功能的发酵乳，成分包括：
上述组分中，动物双歧杆菌为动物双歧杆菌BZ25(保藏编号：CGMCC No.10225，来源于申请号为201510018130.2的中国专利)，制备方法和用量与实施例1相同。
对比例3
本对比例提供一种具有降低胆固醇功能的发酵乳，成分包括：
上述组分中，动物双歧杆菌为动物双歧杆菌BZ25(保藏编号：CGMCC No.10225，来源于申请号为201510018130.2的中国专利)，制备方法和实施例1相同。
对比例4
本实施例提供一种降胆固醇功能的发酵乳，以重量份计，包括如下成分：
上述组分中，乳杆菌为市售常见乳杆菌。
制备方法和实施例1相同。
对比例5
本对比例提供一种具有降低血脂功能的发酵乳，成分包括：
上述组分中，酵母菌为市售常见酵母菌。
制备方法和实施例1相同。
对比例6
本对比例提供一种具有降低血脂功能的发酵乳，成分包括
上述组分中，醋酸菌为市售购得。
制备方法和实施例1相同。
对比例7
上述组分中，动物双歧杆菌为动物双歧杆菌BZ25(保藏编号：CGMCC No.10225，来源于申请号为201510018130.2的中国专利)，制备方法和实施例1相同。
试验例1
本试验例将上述实施例和对比例制备得到的发酵乳通过动物实验进行效果验证。实验方法参照《保健食品检验与评价技术规范(2003版)》
具体方法为：选取正常SD大鼠组，分为实验组与对照组，实验组又分为实验组1-11，对照组分为空白对照组1、空白对照组2、阳性对照组，以上每组8只SD大鼠。其中实验组1-4分别为饲喂高脂饲料的同时饲喂实施例1-4得到的发酵乳；实验组5-11同时饲喂对比例1-7得到的发酵乳。空白对照组1饲喂普通饲料、空白对照组2饲喂高脂饲料，阳性对照组饲喂高脂饲料的同时饲喂降脂药物洛伐他汀片(产自北京万生药业有限公司)。
其中，阳性对照组饲喂洛伐他汀片的量为每千克体重2.8mg；实验组1-11饲喂发酵乳的量为每千克体重10.3mg。连续饲养30天后，通过生化指标分析仪检测实验大鼠血液中TC、TG、LDL-C、HDL-C的浓度。
实验检测结果如表1和表2所示：
表1实施例1-4发酵乳的降脂效果(单位：mmol/L
)
| 项目 | 空白对照组1 | 空白对照组2 | 阳性对照组 | 实验组1 | 实验组2 | 实验组3 | 实验组4 |
| TC | 3.15±0.05 | 7.48±0.05 | 2.83±0.04 | 2.84±0.06*+ | 2.93±0.03*+ | 3.07±0.06*+ | 2.81±0.06*+ |
| TG | 1.97±0.04 | 8.01±0.06 | 1.04±0.07 | 1.12±0.01*+ | 1.50±0.07*+ | 1.57±0.04*+ | 0.91±0.05*+ |
| LDL-C | 1.51±0.04 | 5.43±0.04 | 1.57±0.03 | 1.60±0.05* | 1.69±0.06*+ | 1.71±0.06*+ | 1.51±0.04* |
| HDL-C | 1.64±0.04 | 0.60±0.05 | 1.51±0.05 | 1.53±0.01*+ | 1.44±0.06*+ | 1.40±0.06*+ | 1.55±0.05*+ |
表2对比例1-7发酵乳的降脂效果(单位：mmol/L
)
| 项目 | 实验组5 | 实验组6 | 实验组7 | 实验组8 | 实验组9 | 实验组10 | 实验组11 |
| TC | 7.12±0.02* | 3.93±0.04* | 4.07±0.04* | 5.15±0.04* | 6.50±0.05* | 7.03±0.02* | 5.00±0.04* |
| TG | 7.74±0.02* | 1.71±0.065* | 1.98±0.06* | 2.60±0.05* | 4.17±0.01* | 7.57±0.01* | 2.53±0.04* |
| LDL-C | 4.33±0.05* | 1.74±0.06* | 1.85±0.02* | 2.53±0.03* | 3.01±0.05* | 4.00±0.01* | 2.29±0.05* |
| HDL-C | 0.52±0.04* | 1.35±0.04* | 1.44±0.05* | 0.97±0.04* | 0.88±0.03* | 0.65±0.01* | 1.01±0.05* |
注：“*”表示与空白对照组2相比，P<0.05差异显著，“+”表示与阳性对照组相比P＜0.05差异显著。
由表1中的实验结果可推知如下结论:
1、实验组1、2、3和阳性对照组分别对不同的生化指标在实验结果分析上有差异，但是整体在降低胆固醇效果上近似，说明实施例1、2、3的组合物取得了和洛伐他汀片类似的降低胆固醇、甘油三酯和低密度胆固醇的效果；
2、实验组5-11中，实验组11相较于实验组1、2、3在降脂效果上有很大程度的降低，这说明了虽然益生菌BZ25单独使用具有一定的降脂效果，但是其和植物甾醇、松茸等辅料复配后，降脂效果得到了显著的提升。
3、实验组8-10均使用的是市售声称有降血脂功能的各类益生菌，但是在同样配合松茸和植物甾醇使用时，降血脂效果并不明显。
总结而言，本发明经过以上研究发现，将益生菌与植物甾醇、松茸等辅料复配使用后，进一步提升了益生菌的降胆固醇功能，主要是由于植物甾醇、松茸等辅料对益生菌BZ25的生长具有促进作用使益生菌达到一个较为活跃的状态，在益生菌和植物甾醇、松茸等同时使用后，益生菌对胆固醇的吸收、粘附与沉淀作用得到显著加强，减少并阻断了肠道对胆固醇的吸收，具有很好的降胆固醇的作用。
试验例2
辅料松茸中各成分对于益生菌BZ25发酵乳功效的影响。
为了进一步研究松茸中各成分对于益生菌BZ25发酵乳功效的影响，本发明以实施例2制备得到益生菌BZ25发酵乳为实验组12，使用不同种类的松茸进行实验，方法和试验例1中的相同，这些松茸的区别主要在于松茸多糖成分的含量不同，得到如下表的实验结果：
表3松茸中不同成分对于益生菌BZ25发酵乳功效的影响(单位：mmol/L
)
| 项目 | 实验组12 | 对照组1 | 对照组2 | 对照组3 |
| TC | 2.93±0.03 | 2.98±0.03 | 4.07±0.03* | 2.91±0.06 |
| TG | 1.50±0.07 | 1.52±0.02 | 1.83±0.01* | 1.52±0.05 |
| LDL-C | 1.69±0.06 | 1.70±0.06 | 1.85±0.03* | 1.70±0.05 |
| HDL-C | 1.44±0.06 | 1.43±0.03 | 1.27±0.03* | 1.42±0.03 |
| 松茸多糖的含量 | 17.8％ | 15.4％ | 10.1％ | 19.0％ |
注：“*”表示与实验组12相比，差异显著。
由上表可知：松茸多糖含量在10.1％的情况下，该发酵乳物降胆固醇的作用于实验组12差异显著，而松茸多糖含量在15.4％的情况下，该发酵乳降低胆固醇的作用与实验组12差异不显著，而松茸含量为19％的对照组3，其发酵乳降低胆固醇的作用与实验组12差异不显著，说明松茸多糖含量达到一定时，组合物的降胆固醇作用并不会因为松茸多糖的增加而有所提高，极有可能产生抑制，并且松茸多糖含量高于18％的松茸也是不易获得的。
试验例3
辅料植物甾醇中各组分对于益生菌BZ25发酵乳功效的影响。
为了进一步研究植物甾醇中各成分(或者来源不同的植物甾醇)的影响，本发明以实施例2制备得到益生菌BZ25发酵乳为实验组12，使用来源不同的植物甾醇进行实验，方法和试验例1中的相同，这些来源不同的植物甾醇均可以市售购得，得到如下表的实验结果：
表4植物甾醇的不同来源对于益生菌BZ25发酵乳功效的影响(单位：mmol/L
)
| 项目 | 实验组12 | 对照组4 | 对照组5 | 对照组6 |
| TC | 2.93±0.03 | 3.47±0.03<sup>*</sup> | 3.55±0.04<sup>*</sup> | 3.32±0.04<sup>*</sup> |
| TG | 1.50±0.07 | 2.30±0.01<sup>*</sup> | 1.88±0.05<sup>*</sup> | 2.54±0.06<sup>*</sup> |
| LDL-C | 1.69±0.06 | 2.69±0.03<sup>*</sup> | 2.57±0.01<sup>*</sup> | 2.70±0.02<sup>*</sup> |
| HDL-C | 1.44±0.06 | 0.90±0.03<sup>*</sup> | 1.45±0.03<sup>*</sup> | 0.96±0.04<sup>*</sup> |
| 植物甾醇成分来源 | 大豆 | 玉米 | 芝麻 | 橄榄油 |
注：“*”表示与实验组12相比，差异显著。
由表可知，多种来源的植物甾醇在复配后效果近似，但是以大豆来源的植物甾醇的BZ25发酵乳其降胆固醇效果最优。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (10)
1.一种具有降胆固醇功能的组合物，其特征在于，包括：益生菌和辅料，所述益生菌为动物双歧杆菌；以重量份计，所述益生菌为5～35份，所述辅料包括松茸15～70份和植物甾醇10～40份。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，在所述组合物中，以重量份计，所述益生菌为10～30份，所述辅料包括松茸20～65份和植物甾醇20～30份。
3.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，在所述组合物中，以重量份计，所述益生菌为10～20份，所述辅料包括松茸25～40份和植物甾醇20～25份。
4.根据权利要求1-3任一项所述的组合物，其特征在于，所述益生菌为动物双歧杆菌BZ25，保藏编号：CGMCC No.10225。
5.根据权利要求1-4任一项所述的组合物，其特征在于，所述松茸中松茸多糖的含量为14.5％～18.0％；
和/或，所述植物甾醇为大豆来源的植物甾醇。
6.根据权利要求5所述的组合物，其特征在于，以重量份计，所述辅料还包括亚麻籽油10～50份、红曲粉5～40份、泛酸5～40份、烟酸5～25份和益生元5～35份。
7.根据权利要求6所述的组合物，其特征在于，所述益生元为低聚果糖、抗性糊精、低聚木糖、菊粉、水苏糖、低聚半乳糖、葡聚糖、壳聚糖、低聚异麦芽糖中的一种或几种，优选为菊粉或抗性糊精中的一种或两种。
8.权利要求1-7任一项所述组合物在制备具有胆固醇功能的食品、药物或保健品中的应用；优选地，所述食品、药物或保健品具有降低胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇和升高高密度脂蛋白胆固醇功能。
9.一种降胆固醇制剂，其特征在于，以权利要求1-7任一项所述的组合物为活性成分，还包括粘合剂、崩解剂、填充剂、甜味剂、稳定剂、色素、香精中的一种或几种；所述降胆固醇制剂的剂型优选为散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、乳剂、混悬剂或发酵剂中的一种或多种。
10.一种具有降胆固醇作用的双歧杆菌BZ25发酵乳，其特征在于，以权利要求7所述组合物为活性成分；所述活性成分在所述具有降胆固醇作用的双歧杆菌BZ25发酵乳中的质量百分含量为15～50％。
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