CN1119019A - 治疗免疫调节的炎症的组合物和方法 - Google Patents
治疗免疫调节的炎症的组合物和方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1119019A CN1119019A CN94191441A CN94191441A CN1119019A CN 1119019 A CN1119019 A CN 1119019A CN 94191441 A CN94191441 A CN 94191441A CN 94191441 A CN94191441 A CN 94191441A CN 1119019 A CN1119019 A CN 1119019A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- hydrogen
- hydroxyl
- integer
- yuan
- naphthyl
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06086—Dipeptides with the first amino acid being basic
- C07K5/06095—Arg-amino acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/16—Otologicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06086—Dipeptides with the first amino acid being basic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明提供了预防和治疗免疫调节的炎症特别是与呼吸道有关的疾病的组合物和方法。更具体地是施用类胰蛋白酶抑制剂,一般为羟基芳酰基或羟基杂芳酰基取代的二肽。本发明还提供了药物组合物,一般为气雾剂或局部用制剂。本发明也提供了鼻内施用这些组合物的气雾剂装置。
Description
本申请是同时待审的申请08/031,187号的部分继续申请,本申请涉及美国专利申请08/030,770号的主题。这两个在先申请的申请日为1993年3月12日,发明名称分别为“治疗免疫调节的炎症的组合物和方法”和“治疗与慢性哮喘有关的强应答性的方法”。很明显这些同时待审的申请在本文被引为参考文献。
本发明一般涉及预防和治疗免疫调节的炎症的组合物和方法。更具体地,本发明涉及预防和治疗与呼吸道有关的炎症如哮喘和过敏性鼻炎。本发明的组合物和方法特别用于预防或治疗与慢性哮喘有关的晚期支气管缩小和气道强应答性。
哮喘是一种综合症,对于其急性和慢性表现包含多种生化介质。哮喘的常见特征在于对于免疫特定的变应原和一般化的化学或物质刺激气管和支气管的强应答性渐进发展。哮喘的细支气管组织的强应答性被认为是由慢性炎症反应引起的,炎症反应刺激和损伤上皮衬内的气道壁并促使下层组织的病理性变厚。支气管活组织检查研究表明甚至轻度哮喘的病人在气道壁中都有炎症特征。
炎症过程的起始是对吸入的变应原变应性应答。带有IgE受体的白细胞特别是肥大细胞和嗜碱细胞而且还包括单核细胞、巨噬细胞和嗜曙红细胞存在于支气管的上皮和底层平滑肌组织中,并且通过使特定吸入的抗原与IgE受体结合开始活化上述细胞。活化的肥大细胞释放出大量预先形成的或初始的炎症应答的化学介质和酶。另外,大量次级炎症介质通过活化的肥大细胞的酶反应现场生成,包括超氧化物和脂质衍生的介质。另外,通过肥大细胞的脱粒可释放出几种大分子:蛋白多糖、过氧化物酶、芳基硫酸酯酶B,特别是类胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶(胃促胰酶)。参见“Drug Thera-py of Asthma”,chap 62,1054—54。
肥大细胞的这种化学释放可以解释在暴露于空气传播的变应原后在敏感的个体中存在的早期细支气管缩肌应答。早期的哮喘反应在暴露于变应原后大约15分钟达到最大,接着1至2个小时内恢复。在25—35%个体中,早期哮喘反应后接着在几小时内呼吸功能开始进一步下降,并在暴露后6至12小时达到最大。后期哮喘反应伴随渗入到细支气管平滑肌和上皮细织并且流入气道的炎症细胞数量明显增加。这些细胞包括嗜曙红细胞、中性白细胞和淋巴细胞,所有这些细胞通过肥大细胞衍生试剂的释放被吸引到上述部位。在后期反应阶段渗入细胞本身被活化。后期哮喘应答被认为是通过巨噬细胞的分泌活性部分调节的次级炎症反应。
有关的一类炎症反应发生在上呼吸道粘膜中,通常是对空气传播的变应原的应答。当处于哮喘状态时,肥大细胞通过IgE分子与特定的抗原交联而被活化。对于变应性的多年生的血管舒缩的鼻炎,在没有可识别的暴露于特定抗原下肥大细胞也可被活化。在任一情况下,活化的肥大细胞在脱粒时释放出初级和次级炎症介质。嗜曙红细胞和巨噬细胞被吸引到上述部位以维持炎症反应。鼻根上皮组织的破坏常发生在后期反应中。
类胰蛋酶是人肥大细胞的主要分泌蛋白酶,并被认为包括在神经肽处理和组织炎症中。成年人类胰蛋白酶是一种多相催化活化的亚单元的糖基化的与肝素有关的四聚体。类胰蛋白酸单体氨基酸序列与其基团结构一样已特征化的大量其它丝氨酸蛋白酸中没有接近的相应之物。参见如Vander-slice等人(1990)Pron.Natl.Acad.Sci.USA 87:3811—3815;Miller等人,(1990)J.Clin Invest.86:864—870;Miller等人(1989)J.Clin.Inrest.84:1188—1195,Vander-slice等人(1989)Biochemistry 28:4148—4155。
类胰蛋白酶贮存在肥大细胞分泌粒中。在肥大细胞活化后,在各种生物液体中很容易测到人类胰蛋白酶。例如,在过敏反应后,类胰蛋白酶出现在血流中,并且保持可测几小时。参见Schwartz等人(1987)N.Engl J.Med.316:1622—1626。在用特定抗原刺激特异反应性受实验者的鼻根和肺灌洗液的试样中可测到类胰蛋白酶的存在。参见Castells &Schwartz(1988)J.Allerg.Clin.Immunol.82:348—355和Wenzel等人(1988)Am.Rev.Resp.Dis.141:563—568。在支气管粘膜变应原激化后由特异反应性哮喘病人得到的肺灌洗液中的类胰蛋白酶水平增高。同样,与不吸烟的对照者相比一些吸烟者的支气管肺泡灌洗液的类胰蛋白酶水平显著提高,这一发现对活化肥大细胞的蛋白酶的释放促使在吸烟者的气肿中肺破坏的假说提供了支持。参见Kalenderi-an等人(1988)(chest 94:119—123。另外,现已证明类胰蛋白酶是一种纤维细胞的有效促细胞分裂剂,从而表明它与肺纤维化和间质肺病有关。参见Ruoss等人(1991)J.Clin.In-yest.88:493—499。
类胰蛋白酶与各种生物过程有关,包括血管舒张和支气管松弛神经肽的降解(参见Caughey等人(1988)J.pharma-co1.Exp.Ther.244:133—137;Franconi等人(1988)J.Pharmacol.Exp.Ther.244:133—137;Franconi等人(1988)J.Pharmacol.Exp.Ther.248:947—951;和Tam等人(1990)Am.J.Respir.(ell Mol.Biol.3:27—32)和对于组胺支气管应答性的调节(参见Sekizawa等人(1989)J.Clin.Invest.83:175—179)。这些研究表明类胰蛋白酶通过破坏支气管扩张肽可能增加哮喘中支气管收缩。
另外,已经证明了类胰蛋白酶能分裂纤维蛋白原α—链以及带有可释放的激肽的高分子激肽原,因此可与肝素一起作为局部抗凝血剂。类胰蛋白通过MMP—3活化prostromelysin(proMMP—3)和前胶原酶(pro—MMP—1)的能力表明类胰蛋白酶也与组织的炎症和重建有关。这一发现也表明类胰蛋白酶在类风湿性关节炎的关节破坏中产生作用。另外已证明了类胰蛋白酶能分裂与降钙素原有关的肽。因为这种肽与神经原炎症有关,所以类胰蛋白酶在皮肤神经原炎症的突发反应的调节中为一重要因素。
在工业化国家,哮喘已成为最普通的慢性疾病。至今为止,常规的方法和治疗剂不能有效地治疗哮喘或其它免疫调节的炎症。因此希望提供避免这些常规制剂和方法的缺点同时能有效地治疗这些疾病的改进的组合物和方法。
Ar为羟基取代的芳基或羟基取代的杂芳基,其中羟基位于酰胺侧链的邻位,如果Ar为羟基取代的芳基,那么带有的酰胺侧链的芳环不被卤素取代并且在羟基的邻位上不带有低级烷基;
R1为氢、低级烷基、芳基烷基或杂芳基烷基;
R2为氢或低级烷基;
R3选自:
-(CH2)v-NH2
其中m为3—6的整数,n为0—3的整数,p为0—2的整数,q为0—2的整数;r为0—5的整数;s为0—2的整数;t为1—3的整数;u为1或2;v为3—6的整数;w为0—3的整数;A为—CH=CH—或—C≡C—;X为—NH—或—CH2—;
R4为低级烷基,取代的芳基烷基或取代的杂芳基烷基,R5和R6独立选自:氢、低级烷基、取代的芳烷基和取代的杂芳基烷基;或R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的4元、5元或6元杂环,R6为氢;或R4和R6与它们所连的氮和碳一起形成取代的4元、5元或6元杂环,R5为氢;
R7为—OR8或—NR8R9,其中R8和R9独立选自氢、低级烷基、芳基、芳基烷基或杂芳基烷基,或R8和R9与它们所连的氮一起形成取代的5元和6元杂环。
其中m为3—6的整数,n为0—3的整数,p为0—2的整数,q为0—2的整数;w为0—3的整数;A为—CH=CH—或—C≡C—;X为—NH—或—CH2—;
R4为低级烷基,R5和R6为氢;或R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的4元、5元或6元杂环,R6为氢;R7为—OH、—OCH3、—NH2、3′—氨基羟基—1′—哌啶基或—N(CH3)2。
特别优选的式I的类胰蛋白酶抑制剂为表I和Ⅱ的化合物3:
本文所述的化合物可用于预防和治疗免疫调节的炎症,特别是与呼吸道有关的炎症包括哮喘以及特别是与慢性哮喘有关的强应答性期和变应性鼻炎。因此,本发明还提供了治疗免疫调节的炎症的方法,其中患有对用类胰蛋白酶抑制剂治疗敏感的免疫调节的炎症的病人接受或服用治疗有效剂量或一定量的本发明化合物。
本发明还提供了本文所述化合物的药物组合物。这些药物组合物具有各种剂型包括口服剂型以及可注射的和可灌注的溶液。一般地,当用于治疗或预防哮喘特别是与慢性哮喘有关的强应答性时,这些药物组合物可采用粉剂或溶液的气雾剂。当用于治疗免疫调节的炎症皮肤病时,本发明化合物可与无毒的可药用的局部载体结合使用。本发明的化合物可与消炎药或其他哮喘治疗药如β—肾上腺素能拮抗药、消炎的皮质类固醇、抗胆碱能药等结合使用。
图1为表示羊的特定肺阻力作为抗原刺激后时间(小时)的函数的曲线。空心正方形表示对照组值,空心园表示相同的动物在服用表I和Ⅱ的化合物3后的值。
图2为表示在服用长巴可之前服用表I和Ⅱ化合物2时抗原刺激后24小时长巴可诱导的支气管收缩的羊强应答性产生图。黑色实心条对应于对照组,基准。浅色实心条对应于药物,基准。阴影线条对应于对照组,抗原后。白色条对应于药物,抗原后。
I.定义和通用参数
下述定义用于说明和定义用来描述本发明的各种术语的含义和范围。
“免疫调节的炎症”一般包括与肥大细胞介质释放有关的且对用类胰蛋白酶抑制剂治疗敏感的疾病。这些疾病的实例包括速发型超敏反应疾病如哮喘、变应性鼻炎、荨麻疹、血管水肿、湿疹性皮炎(特应性皮炎)、过敏反应、以及高增生性皮肤病、消化溃疡、肠炎、皮炎等。
“强应答性”是指与慢性哮喘有关的后期支气管收缩和气道高反应性。哮喘的细支气管组织的强应答性被认为是由慢性炎症反应引起的,炎症反应刺激和操作上皮衬内的气道壁并促使下层组织的病理性变厚。
“卤素”是指氟、溴、氯和碘原子。
“羟基”是指基团—OH。
“低级烷基”是指1至6个碳原子的环状、支链或直链烷基。该术语可进一步列举的基团为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基(或2—甲基丙基)、环丙基甲基、正戊基和己基。
“芳基”或“Ar”是指具有单环(如苯基)、多环(如联苯基)或其中至少一个环是芳环的多稠合环(如1,2,3,4—四氢萘基、萘基、蒽基或菲基)的芳族碳环基,它可任选是未取代或被下列基团取代:卤素、低级烷基、低级烷氧基、低级烷硫基、三氟甲基、低级酰氧基、芳基、杂芳基和羟基。然而,根据本发明,带有酰胺侧链的芳环不能进一步被卤素取代。另外,带有酰胺侧链的芳环在羟基的邻位(即酰胺侧链的间位)不能有低级烷基。
“杂环”是指具有单环(例如吗啉代、吡啶基或呋喃基)或多稠合环(例如1.5一二氮杂萘基、喹喔啉基、喹啉基、中氮茚基或苯并[b]噻吩基)并且在环中具有至少一个杂原子如N、O或S的饱和、不饱和或芳族碳环基,它可任选是未取代的或被下列基团取代:卤素、低级烷基、低级烷氧基、低级烷硫基、三氟甲基、低级酰氧基和羟基。术语“杂芳基”和“Het-Ar”是指其中至少一个杂环为芳环的杂环。
“芳烷基”是指基团—R—Ar其中Ar为芳基和R为直链或支链脂族基团。芳烷基可任选是未取代的或被下列基团取代:卤素、低级烷基、低级烷氧基、低级烷硫基、三氟甲基、低级酰氧基和羟基。
“杂芳基烷基”是指基团—R—HetAr其中HetAr为杂芳基,R为直链或支链脂族基团。杂芳基烷基可任选是未取代的或被下列基团取代:卤素、低级烷基、低级烷氧基、低级烷硫基、三氟甲基、低级酰氧基和羟基。
“药物上可接受的盐”是指保持母体化合物的生物功效和性质,并且不是生物学上或其它所不需要的盐。
“药物或治疗上可接受的载体”是指不影响活性成份的生物活性功效并且对宿主或病人无毒的载体介质。
“立体异构体”是指具有相同分子量、化学组成和结构,但原子彼此排列不同的化合物。也就是说,某些相同的化学部分在空间处于不同的取向,因此,纯的立体异构体能够旋转偏振光平面。然而,某些纯的立体异构体具有的旋光度很低而用现代仪器不能测到。本发明的化合物具有一个或多个不对称碳原子,因此包括各种立体异构体。所有立体异构体都包括在本发明的范围之中。
“治疗”是指体外或体内施用类胰蛋白酶抑制剂,包括:
(ⅰ)抑制疾病的症状;
(ⅱ)减轻或抑制疾病的长期作用;和/或
(ⅲ)减轻疾病的症状。
II.类胰蛋白酶抑制剂
本发明提供了包括有效的丝氨酸蛋白酶抑制剂,更特别地为类胰蛋白酶抑制剂的组合物,它可用于减轻免疫调节的炎症特别是哮喘动物由变应原刺激诱导的支气管收缩。
类胰蛋白酶抑制剂是降低或阻止类胰蛋白酶活性的物质。根据本发明的另一方面,
Ar为羟基取代的芳基或羟基取代的杂芳基,其中羟基位于酰胺侧链的邻位,如果Ar为羟基取代的芳基,那么带有酰胺侧链的芳环不被卤素取代并且在羟基的邻位上不带有低级烷基;
R1为氢、低级烷基、芳基烷基或杂芳基烷基;
R2为氢或低级烷基;
-(CH2)v-NH2其中m为3—6的整数:n为0—3的整数;p为0—2的整数;q为0—2的整数;r为0—5的整数;s为0—2的整数;t为1—3的整数;u为1或2;v为3—6的整数;w为0—3的整数;A为—CH=CH—或—C≡C—;X为—NH—或—CH2—;
R4为低级烷基,取代的芳基烷基或取代的杂芳基烷基,R5和R6独立选自:氢、低级烷基、取代的芳烷基和取代的杂芳基烷基;或R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的4元、5元或6元杂环,R6为氢;或R4和R6与它们所连的氮和碳一起形成取代的4元、5元或6元杂环,R5为氢;
R7为—OR8或—NR8R9,其中R8和R9独立选自氢、低级烷基、芳基、芳基烷基或杂芳基烷基,或R8和R9与它们所连的氮一起形成取代的5元或6元杂环。
其中m为3—6的整数,n为0—3的整数,P为0—2的整数,q为0—2的整数;w为0—3的整数;A为—CH=CH—或—C=C—;X为—NH—或—CH2—;
R4为低级烷基,R5和R6为氢,或R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的4元、5元或6元杂环,R6为氢;R7为—OH、—OCH3、—NH2、3′—氨基羧基—1′—哌啶基或—N(CH3)2。
另一优选的类胰蛋白酶抑制剂为表I和II的化合物21:
本发明的类胰蛋白酶抑制剂可用已知方法由易于得到的起始原料制得,下文将更详细地描述。
取决于官能团的性质,本发明化合物可与各种无机和有机酸和碱形成加成盐。形成这些盐的无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等,有机酸如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。
也可以通过用碱金属或碱金属碱如碱金属氢氧化物和碱金属醇盐或碱土金属或碱土金属碱如碱土金属氢氧化物和碱土金属醇盐处理羧酸基团生成盐。另外,也可由羧酸与有机碱生成盐,有机碱如三甲胺、二乙胺、乙醇胺、哌啶、异丙胺、胆碱、咖啡因等。
这些盐可用常规方法制备,例如使产物的游离酸或碱形式与一当量或几当量合适的碱或酸在盐不溶的溶剂或介质中或在可以真空下或通过冷冻干燥除去的溶剂如水中反应,或在合适的离子交换树脂上使已有盐的阳离子交换为其它阳离子。
III.体外和体内试验
按照抑制类胰蛋白酶的能力来筛选有效的抑制剂的体外试验方法在现有技术中是已知的。例如参见Sturzebecher等人(1992)Biol.Chem.Hoppe—Seyler 373:1025—1030。一般地,这些试验测量类胰蛋白酶诱导的肽基色原物质的水解。下面将描述具体方法的细节。
另外,本发明化合物的活性可用大量哮喘动物模型之一进行体内试验来评估。参见Larson,“Experimental Modelsof Reversible Airway obstruction”,The Lung:ScientificFoundations,Crystal,West等人,eds.,Raven Press,New York,1991;Warner等人(1990)Am.Rev.Respir.Dis.141:253—257。理想的动物模型应能复制人哮喘的主要临床和生理特征,包括:对化学介质和物理刺激的气道强应答性,用用于人哮喘的药物(β—类肾上腺素能药、甲基黄嘌呤、皮质类固醇等)可使气道阻塞逆转;活化的白细胞的渗入产生气道炎症;慢性炎症的变性变化,例如基膜变厚、平滑肌肥大和上皮损伤。可用作动物模型的种类包括小鼠、鼠、豚鼠、兔、狗和羊。所有动物都有某些限制,但合适地选择动物模型取决于所涉及的问题。
用豚鼠和狗特别是basenji—greyhounol杂交品种评估初始的哮喘应答,它对于大量非变应原物质如乙酰甲胆碱和柠檬酸产生非特定的气道强应答性。在用蛔虫属蛋白抗原激发后某些选定的羊表现出双重应答。在双重应答动物中,在暴露后6—8小时,初始哮喘应答(IAR)后产生后期哮喘应答(LAR)。对于表现LAR的那些动物在抗原激化后24小时对胆碱能激动剂卡巴可的高敏反应增加。
用变应性模型来评估本发明化合物的抗哮喘的有效作用。在暴露于特定变应原之前或之后给变应性羊施用含有本发明化合物的气雾化溶液的组合物证明这些组合物可大大减轻或排除后期哮喘应答及随后的强应答性。
本发明的化合物也可用于治疗其中类胰蛋白酶活性导致病理状态的其它免疫调节的炎症。这些疾病包括与肥大细胞有关的炎症如类风湿性关节炎、类风湿性脊椎炎、骨关节炎、痛风性关节炎和其它关节炎疾病、肠炎、消化溃疡和各种皮肤病。
本发明化合物用于治疗大多数免疫调节的炎症的功效可用体外或体内试验方法来评估。因此,本发明化合物的抗炎效果可用本领域公知的试验确定,例如逆转被动的阿图期反应(RPAR)—PAW方法(参见Ganguly等人(1992)U.S.5,126,352)。确定本发明化合物治疗各种皮肤病如高增生性皮肤病的治疗作用的试验在本领域中是公知的,例如花生器烯酸鼠耳试验(id)。按照Chiu等人(1984)Archives Interna-tion—ales de Pharmacodynamie et de Therapie 270:128—140所述的方法来评估本发明化合物的抗溃疡活性。
IV.体内给药
根据本发明,给患有免疫调节的炎症的病人服用治疗或药物有效量的类胰蛋白酶抑制剂特别是式I化合物。根据一个具体实施方案,本发明的组合物可用于预防或改善哮喘。在使用本发明组合物治疗哮喘时,在暴露于变应原或其它突发因素之前或如此暴露之后预防性地服用本发明化合物。本发明化合物特别用于改善在季节性和多年生的鼻炎中可见的后期组织的破坏。本发明的另一方面涉及预防和治疗与肥大细胞有关的其它免疫调节的炎症如荨麻疹和血管水肿、温疹性皮炎(特应性皮炎)、过敏症以及高增生性皮肤病、消化溃疡等。
含有本发明化合物的组合物可以预防性的和/或治疗性的形式给药。在治疗应用中,给已经患有上述疾病的病人服用治愈或至少部分抑制疾病症状及其并发症有效量的组合物。足以达到上述目的的用量被定义为“治疗有效量或剂量”。本文所用的有效量取决于疾病的严重程度和病期、以前的治疗、病人的健康状况、对药物的反应以及主治医师的诊断。
在预防应用中,给敏感的或处于特殊疾病危险期的不敏感的病人服用含有本发明化合物的组合物。如此的用量被定义为“预防有效量或剂量”,在此应用中,精确的用量也取决于病人的健康状况、体重等。
一旦病人的状况得到改善,如果必要的话,服用维持剂量。接着根据症状减少服用的剂量或频率或两者至能保持改善的状况的水平。当症状已减轻到所需程度则可停止治疗。然而基于病症的复发,病人需要长期间歇治疗。
一般地,类胰蛋白酶抑制剂的合适的有效剂量为0.1至1000毫克(mg)/受体/天,优选1至100mg/天。所需剂量优选以一、二、三、四或更多个亚剂量形式存在,在一天内接合适的间隔服用亚剂量。这些亚剂量可以单位剂型服用。例如每单位剂型含有5至1000mg优选10至100mg活性成份。
在这些治疗中所用的组合物可采用各种剂型。它们包括固体、半固体和液体剂型,如片剂、丸剂、粉剂、液体溶液或悬浮液、脂质体、注射液和灌注液。优选的剂型取决于预定的给药方式和治疗应用。
尽管可以单独服用本发明的活性成份,但优选作为药物制剂的一部分存在。本发明的制剂包括至少一种治疗上或药物上有效量的本发明化合物或抑制剂与一种或多种可药用的或可治疗用的载体以及任选的其它治疗成份。各种考虑已被描述了,例如在Gilman等人(eds)(1990)Goodman &Gilman′ s:The Pharmacological Bases of Therapeutics,8thEd.,Pergamon Press和Remington′s Supra中。在该文献中讨论了给药方法例如口服、静脉内、腹膜内或肌内给药及其它方法。可药用载体包括水、盐水、缓冲液和在the MerckIndex,Merck & Co.Rahway,NJ.中描述的其它化合物。
一般地,当本发明化合物用于治疗哮喘或变应性鼻炎时,将它们配制成气雾剂。术语“气雾剂”包括本发明化合物的能产生气体的悬浮介质、它能被吸入细支气管或鼻通道。特别地,气雾剂包括本发明化合物的能产生气体的小滴悬浮液,它们被制备在计量吸入器或喷雾器中。气雾剂还包括悬浮在空气或其它载体气体中的本发明化合物的干粉状组合物,综通过从吸入器中吸入给药。
对于用于制备本发明气雾剂的溶液,优选的本发明化合物的浓度范围为0.1—1006毫克(mg)/毫升(mL),较优选为0.1—30mg/mL,最优选为1—10mg/mL。溶液通常用生理上允许的缓冲液如磷酸盐或碳酸氢盐缓冲。通常的pH范围为5至9,优选6.5至7.8,较优选7.0至7.6。一般加入氯化钠将渗透性调节至生物范围,优选在10%等渗性内。为产生气雾剂吸入的这些溶液的制剂已被讨论在Remington′sPharmaceutical Sciences中,也可参见Ganderton &Jones,Drug Delivery to the Respiratory Ttact,Ellis Hor-wood(1987);Gonda(1990)Critical Reviews in Thera-peutic Drug Carrier Systems 6:273—313;和Raeburn等人(1992)J.pharmacol.Toxicol.Methods 27:143—159。
用通常用于制备气雾吸入药剂的公知方法将本发明化合物的溶液转化为气雾剂。一般地,这些方法包括通常用惰性载体气体加压或提供一种使溶液的容器加压装置,使加压的气体通过细管口,从而使溶液的小滴推入到需要服用药物的动物的口和气管中。接管一般安在管口的出口上,以便容易给药到口和气管中。
在一实施方案中,本发明的装置包括使本发明化合物的溶液与在哮喘疗法中用于产生气雾剂的常规装置相连或装于其中,常规装置如计量吸入器、喷射喷雾器或超声喷雾器。这些装置任选包括安在管口上的接管。
在用于治疗变应性鼻炎的实施方案中,本发明的装置包括使本发明化合物的溶液装于鼻用喷雾器中。
含有本发明化合物和任选的赋形剂的干粉剂为本发明的另一实施方案。它可通过含有上述粉剂的药物粉剂吸入器给药。
当然,本发明的方法可与治疗免疫调节的炎症特别是哮喘的其它药剂结合使用。β—烊肾上腺素能促效剂可特别用于这些结合中,因为它能减轻初始哮喘应答症状,而本发明化合物能减轻后期哮喘应答。在这些溶液中优选的β—类腺素能促效剂包括用于减轻哮喘的任何常用的β—促效剂,如舒喘宁、叔丁喘宁、福莫忒醇(formoterol)、芬忒醇(fan-oterol)或prenaline。
与本发明化合物结合使用的其它药剂包括抗胆碱药如溴化异丙托品帮消炎的皮质炎固醇(肾上腺皮质类固醇)如氯地米松、去炎松、flurisolide或地塞米松。
本发明的化合物也可用于治疗哺乳动物的免疫调节的炎症皮肤病如荨麻疹和血管水肿、湿疹性皮炎以及高增生性皮肤病如牛皮癣。通过式I化合物的局部给药,可望减轻症状。因此患有免疫调节的炎症皮肤病的病人可望减轻鳞片、红斑、斑块大小、瘙痒以及与皮肤病有关的其它症状。成功地治疗各个个体病人所需的药物剂量和时间是不同的,但本领域技术人员应能认识到这些不同并可根据治疗过程调节。
本发明还包括皮肤局部应用的制剂,它包括式I化合物一般浓度为0.0001%至10%和无毒可药用的局部用的载体。这些局部制剂可通过使本发明的活性成份与局部干剂、液剂、乳油剂和气雾剂中常用的常规药物稀释剂和载体混合来制备。例如,软膏剂和乳油剂可用水基或油基并加入合适的增稠剂和/或凝胶剂来配制。这些基质包括水和/或油如液体石脂或植物油如花生油或蓖麻子油。根据基质的性质可用的增稠剂包括软石腊、硬脂酸铝、十六烷基十八烷醇、丙二醇、聚乙二醇、羊毛脂、氢化的羊毛脂、蜂蜡等。
洗液可用含水的或油状基质配制,它一般还包括一种或多种如下成份:稳定剂、乳化剂、分散剂、悬浮剂、增稠剂、着色剂、香料等。
粉剂可借助于任何合适的粉剂基质如滑石、乳糖、淀粉等制备。滴剂可用含水基质或非水基质配制,它还可包括一种或多种分散剂、悬浮剂、加溶剂等。
本发明的局部药物组合物还包括一种或多种防腐剂或制菌剂例如羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、氯甲酚、氯化苄烷铵等。局部药物组合物也可含有其它活怀成份如抗微生物剂特别是抗菌素、麻醉剂、止痛药和止痒药。
本发明的化合物也可用于治疗消化溃疡。更具体地,它们表现出化学治疗活性,其活性使得它们能减轻消化溃疡病的症状和抑制溃疡形成,并促使胃和/或十二批肠溃疡的愈合。本发明化合物可与其它治疗剂结合使用,例如消炎药和/或止痛药如阿斯匹林、消炎痛、苯丁唑酮、异丁苯丙酸、甲氧萘丙酸、痛灭啶等。
对于预防和/或治疗本发明药物组合物可通过肠胃外或口服给药。取决于给药方法,本发明药物组合物可用各种单位剂型给药。例如,适合于口服的单位剂型包括粉剂、片剂、丸剂、胶囊剂和糖锭剂。
本发明的药物组合物可以静脉内给药。因此,本发明提供了静脉内给药组合物,它包括溶于或悬浮于可接受载体优选含水载体中的化合物和溶液。可使用各种含水载体例如水、缓冲水、0.4%盐水等。这些组合物有时可用常规公知的灭菌方法灭菌或进行无菌过滤。将所得的水溶液包括使用,例如进行冻干,在施用之前将冻干的制剂与无菌水溶液混合,为达到近似的生理条件,这些组合物可含有可药用的辅助物质如PH调节和缓冲剂、强状调节剂、温润剂等,例如乙酸钠、乳酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙、脱水山梨糖醇单月桂酸酯、三乙醇胺油醇盐等。
对于固体组合物,可使用常规无毒固体载体,它包括药用级的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、滑石、纤维素、葡萄糖、蔗糖、碳酸镁等。对于口服给药,可药用无毒组合物可通过加入任何常用的赋形剂来制备,例如前面所列的那些载体,且通常含有0.1—95%活性成份,优选大约20%。
为了使本文描述的发明被充分理解,列举出下列实施例。当然这些实施例仅用于说明,而不构成对本发明的任何限制。
实验I.概述
本文未描述的起始原料可从市场上购买、是已知的或可按本领域公知的方法制备。式I化合物可按本领域公知的方法用固体或溶液相合成技术制备。制备式I化合物的起始原料在本领域中是公知的或可按本领域技术人员公知的方法制备。例如多肽的固相合成技术被描述在Solid Phase Pep-tide Synthesis:A Practical Approach,(eds.E.Atherton &R.C.sheppard)IRL Press at Oxford Unirersity Press(1989)和Merrifield,J.Amer.Chem.Soc.85:2149—2156(1963)中。肽偶合化学也被描述在The Peptides,Vol.1,(eds.Gross,E.,& J.Meienhofer)。Academic Press Orlan-do(1979)中。其它技术包括Geysen等人,Nature(1991)354:84—86中所述的方法。
在本文描述的制备本发明化合物的方法中,需要保护基团是有机化学领域技术人员公知的。因此,本文所述的方法必含有使用合适的保护基,尽管没有明确说明。
如果需要的话,可用任何合适的分离或纯化方法进行本文所述的化合物和中间体的分离和纯化。例如过滤、萃取、结晶、柱色诸、薄层色谱或厚层色谱、高压液相色谱或这些方法的结合。合适的分离和离析方法的具体说明参见下面的实施例。当然也可使用其它等效的分离或离析方法。
Sakaguchi试验用于测定精氨酸和含有精氨酸的肽,参见Stewart & Young“Solid Phase Peptide Synthesis”,2d.Ed.,Pierce Chemical Company,P.114。制备含有0.01%α—萘酚和5%脲的95%乙醇溶液I。将2g溴溶于100m18%氢氧化钠水溶液中制备溶液II。向溶液I中加入5片氢氧化钠。将待分析的试样点在薄层色谱(TLC)板上。然后用溶液I展开TLC板。将TLC板在空气中干燥,然后用溶液II展开。红点表明有氨基亚氨基甲烷基团存在。II.式I化合物的固相合成
A.表I和II的化合物3的制备
将4—(2′,4′一二甲氧基苯基芴基甲氧羰基(Fmoc)—氨基甲基)苯氧基树脂(Rink树脂;Bachem,CA;3.5g,共载0.289毫当量/克(meq/g)1.01mmol)悬浮于30ml 1∶1(v/V)的N,N一二甲基甲酰胺(DMF):含有30%(体积)哌啶的甲苯的溶液中。将反应混合物搅拌5分钟,然后过滤。再加入哌啶溶液(30ml),然后再将混合物搅拌5分钟。过滤后,用DMF(6×)和二氯甲烷(6×)依次洗涤树脂颗粒。
将Fmoc—L—脯氨酸(Milligen;6.06mmol),苯并三唑—1—基—氧—三(二甲氨基)六氟磷酸盐(BOP、Nov-abiochem;6.06mmol)和1—羟基苯并三唑(HOBT;Aldrich;6.06mmol)溶于大约30mlDMF中。然后将所得的澄清溶液加到Rink树脂中,并将浆状液搅拌(用氮气鼓泡)4小时。过滤反应混合物,并按上述方法洗涤树脂颗粒。按上述方法用哌啶除去Fmoc基团。
将Fmoc—L—精氨酸(PMC)(Milligen;6.06mmol),BOP(6.06mmol)和HOBT(6.06mmol)的DMF(30ml)溶液加至树脂颗粒中,然后将浆状液搅拌4小时,然后按上述方法过滤、洗涤、用哌啶处理并再次洗涤。
加入1—羟基—2—萘甲酸(Aldrich;1.14g,6.06mmol),1,3—二异丙基碳化二亚胺(DIPCDI;Aldrich;0.949ml,6.06mmol)和HOBT(0.819g,6.06ml)的DMF(45mL)溶液,将反应混合物搅拌(机械搅拌杆)7小时。过滤、洗涤并用哌啶处理(按上述方法)后,依次用DMF(6×)、二氯甲烷(6×)和甲醇(6×)洗涤树脂。将树脂悬浮于甲醇中,并搅拌(机械搅拌杆)过夜(15小时)。将树脂过滤并用甲醇洗涤两次。
然后将白色自由流动的固体悬浮于三氟乙酸(TFA)∶苯甲醚∶水(90∶5∶5,30ml)溶液。树脂马上变为桃红色,然后在1—2分钟内颜色变溶成为深红色。搅拌5分钟后,过滤反应混合物。用新的分裂试剂重复上述步骤2次,只是每次重复的反应时间延长至10分钟。
合并TFA溶液,将所得的澄清橙色溶液在室温下放置3.5小时。真空浓缩得到浅黄色油状物,并在真空(<1乇)下保持3小时。将油状物溶于50%乙晴水溶液(100ml)并冷冻干燥得到灰白色固体的粗产物(471mg)。
HPLC分析(Polymer Labs 100A PLRP柱,1.0×150mm,用20至45%乙腈线性梯度洗脱13分钟,流速0.1mL/min),表明粗产物基本为单一化合物(保留时间为10.35分钟,UV吸收>98%),通过HPLC用C18硅胶柱(Vy-dac;22×250mm,15—20μm,300A,用20至35%乙腈线性梯度洗脱30分钟,流速10mL/min)进行纯化。需要多次注射30—35mg,合并同样的馏分(保留时间约为44—48分钟)并冷冻干燥得到松散的白色固体(351mg),经HPLC分析为单一化合物。
电喷质谱(计算的分子量=440.49,实测值M+1=441.1)和NMR谱(质子和13C)与预期的结构一致。
H NMR(CD3OD) & 7.89(d,J=8Hz,1H),7.78(d,J=6Hz,1H),7.76(d,J=6Hz,1H),7.57(dt,J=8,1Hz,1H),7.48(dt,J=8,1Hz,1H),7.29(d,J=8Hz,1H),—4.95(模糊,lH),4.49(dd,J=8,5Hz,1H),3.97(dt,J=10,7Hz,1H),3.73(dt,J=10,7Hz,1H),3.23(t,J=7Hz,2H),2.20(m,1H),1.7—2.2(m,8H)
B.其它式I化合物的制备
按照上述部分A的方法,用下列化合物代替1—羟基—2—萘甲酸:
2—羟基—4—甲基苯甲酸;
3—羟基—2—喹喔啉甲酸;
3—羟基—2—萘甲酸;
2—羟基—1—萘甲酸;
3—羟基—2—吡啶甲酸;
4—羟基—7—甲基—3—(1,5一二氮杂萘)甲酸;
2—羟基—3—吡啶甲酸;
2—羟基苯甲酸;
2,5—二羟基苯甲酸;和
2—羟基—5—苯基苯甲酸(参见下面E)制得下列化合物。
表I和II的化合物2;
表I和II的化合物9;
表I和II的化合物14;
表I和II的化合物15;
表I和II的化合物16;
表I和II的化合物17;
表I和II的化合物18;
表I和II的化合物19;
表I和II的化合物20;以及
表I和II的化合物21;
C.其它式I化合物的制备
按照上述部分A的方法。用Fmoc-D-脯氨酸代替Fmoc-L-脯氨酸。得到表Ⅲ的化合的12。
D.其它式I化合物的制备
表I和II的化合物13的制备是按类似于在上述部分A中用于偶合Fmoc-L-脯氨酸的方法,首先使Fmoc-L-苯丙氨酸与树脂偶合,然后除去Fmoc基团,使苯丙氨酸与Fmoc-L-脯氨酸偶合,用上述部分A所述的方法完成化合物13合成的其余部分。
同样,表I和II的化合物6和7的制备包括使Fmoc-哌啶-3-甲酸或Fmoc-哌淀-4-甲酸分别与树脂偶合,除去Fmoc基团,然后与Fmoc-L-脯氨酸偶合,用上述部分A所述的方法完成合成的其余部分。
E. 2-羟基-5-苯基苯用酸的制备
按下列方法合成2-羟基-5-苯基苯甲酸。将四氢吡喃(THF)保护的4-苯基苯酚(474mg.2mmol,用Green &Wats pp.31-34所述的标准方法由4-苯基苯酚制备)的无水THF(5ml)溶液冷却至—78℃。用正丁基锂(2ml 1.6M的己烷溶液)处理。搅拌反应混合物,并温热至室温,其间形成褐色悬浮液。2小时后,将反应混合物冷却至—78℃,用过量的无水CO2处理几分钟,搅拌反应混合物并温热至室温。2小时后,将反应混合物在乙醚和1NNaOH水溶液间分配。用冰将水层冷却至0℃,用1NHCl水溶液酸化至pH2。然后用二氯甲烷分配水溶液。用硫酸镁干燥有机层。真空浓缩得到灰白色固体的粗产物(258mg,2-羟基-5-苯基苯甲酸)。粗产物的NMP谱与预期的结构一致。
1H NMP(DMSO—d6) & 8.04(d,J=3Hz,1H),7.76(dd,J=9,3Hz,1H),7.62(d,J=7Hz,2H),7.44(t,J=7Hz,2H),7.32(t,J=7Hz,1H),7.00(d,J=9Hz,1H)。
质量计算值:466.5,质量实测值:467.2,LC用25-45%乙腈梯度洗脱13分钟。LC保留时间为3.5分钟。产物无需进一步纯化则可使用。III.式I化合物的溶液相合成
A.表I和III的化合物10的制备
向在盐/冰浴中冷却至—5℃的20g(L)-苯丙氨酸中加入74ml浓硫酸。使反应混合物的温度达到平衡,然后在5分钟内滴加入9.4ml浓盐酸。将反应混合物搅拌30分钟,然后加入700ml碎冰/水。用浓氢氧化铵调节pH至8-9。使溶液在室温下结晶。然后在4℃冷却过液。用硬化的滤纸收集浅黄色晶状产物,用冷水洗涤并干燥。使产物在热水中重结晶,蒸发滤液并重结晶(2×),总产率为55%。
MP:218—222℃(粗产物).TLC:Rf(F)0.18.NMR:(D2O/NaOD),r2.99(dd,J=13.4,7.2Hz,1H),3.10(dd,J=13.4,6.0Hz,1H),3.57(dd,J=7.2,6.0Hz,1H),7.48(d,J=8.6Hz,2H),8.21(d,J=8.7Hz,2H)。
叔丁氧羰基(BOC)保护的氨基酸可用常规方法制备。参见Greene & Wats Protectine Groups in Organic synthe-sis,2nd E2.,John Wiley & Sons,Inc.:New York,pp.327—328(1991)。
向—20℃的BOC保护的对硝基苯丙氨酸(3.00g,9.67mmol)的无水二氯甲烷(5ml)溶液中加入N-甲基吗啉(NMM,1.07ml,9.67mmol),接着加入氯甲酸异丁酯(1.26ml,9.67mmol)。将反应混合物在—20℃下搅拌15分钟。然后向混合物中加入团体甲基-L-脯氨酸盐酸盐(L-Pro—OMe,1.60g,9.67mmol),接着再加入NMM(1.07ml,9.67mmol)。在—20℃下搅拌一小时并在室温下搅拌一小时后,真空浓缩反应混合物然后用乙酸乙酯稀释。乙酸乙酯溶液用10%柠檬酸水溶液,水和盐水洗涤,用硫酸镁干燥并真空浓缩。柱色谱纯化后得到2.4g产物(>60%产率)。
使用常规条件用HCl的二恶烷溶液处理除去BOC基团。参见,Greene & Wuts,同上,pp328—329。向1-羟基-2-萘甲酸(160mg,0.84mmol)的二氯甲烷和N,N-二甲基甲酰胺(1∶1,3ml溶液中加入1-羟基苯并三唑(159mg,1.17mmol)。将溶液冷却至0℃,加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(EDCI,16lmg,0.84mmol)。将溶液在0℃搅拌45分钟后,加入上面制备的二肽(300mg,0.84mmol)溶液,接着加入NMM(93μl,0.84mmol)。将反应混合物在0℃(搅拌1小时,在室温搅拌45分钟。然后将反应混合物真空浓缩,用乙酸乙酯和水稀释。分离有机层,用水然后用盐水洗涤(4×),干燥并真空浓缩。色谱纯化后得到偶合产物(300mg,73%)。
向偶合产物(410mg,0.83mmol)的乙酸乙酯(20ml)溶液中加入冰乙酸(10滴)和10%钯/活性炭(100mg)。将溶液氢化5小时,然后用硅藻土过滤反应混合物,真空浓缩溶液得到375mg(98%)产物,无需进一步纯化则可使用。
向上面氢化反应的产物(200mg,0.45mmol)的无水甲醇(10ml)溶液中加入甲脒磺酸(118mg,0.95mmol,通过按照Maryanoff等人(1986),J.Org.Chem.1082概述的方法,氧化从市场购买的甲脒亚磺酸而制备)。将反应混合物搅拌3天,真空浓缩反应混合物,产物通过色谱分离(用甲醇∶二氯甲烷洗脱)得到17mg所需产物,即表III的化合物10。IV.式I化合物的交替溶液相合成
A. 1-苄氧基-2-萘甲酸(2.247g)的亚硫酰氯(15ml)溶液回流4小时。真空蒸发过量的试剂。残余物用无水DMF(9ml)稀释并浓缩至大约2ml。向该溶液中加入4-二甲氨基吡啶(1.02g)。将混合物在室温下搅拌过夜。然后将所得的吡啶镁配合物加到搅拌着的硝基-L-精氨酸(1.77g),四甲基胍(1ml)和氯化锂(4.56g)的DMF(60ml)溶液中。混合物在室温下搅拌48小时。真空蒸发大部分DMF,将残余物在1.5当量(N)HCl水溶液和乙酸乙酯间分配。合并的有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤并用硫酸镁干燥。真空浓缩得到粗产物(3.5g,1-苄氧基-2-萘甲酰基-N-硝基-L-精氨酸)。TLC:产物的Rf为0.22(用硅胶板并用10%甲醇/乙酸的氯仿溶液洗脱)。产物无需进一步纯化则可使用。
将1-苄氧基-2-萘甲酰基-N-硝基-L-精氨酸(150mg)的无水DMF(5mg)溶液冷却至-25℃,并用氯甲酸异丁酯(0.053mg)处理。搅拌反应混合物并温热至室温。20分钟后。加入固体L-脯氨酸酰胺(以其HCl盐形式,65.9mg)。将混合物搅拌16小时,然后用乙酸乙酯稀释。乙酸乙酯溶液用5%柠檬酸水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤,并用硫酸镁干燥。真空浓缩溶液,用乙醇(40ml,含有10%甲醇和10%乙酸)稀释残余物,用10%钯/炭(10mg)在52磅1平方英寸psi)下氢化直至反应完成(用硅胶进行TLC,用氯仿∶甲醇9∶1洗脱)。正如快速流动点消失所示。反应混合物用硅藻土过滤,用乙醇和甲醇洗涤。真空浓缩混合物,用高压液相色谱纯化得到1-羟基-2-萘甲酰基-L-精氨酰基-L-脯氨酸酰胺(41mg,电喷质谱:M+1=441),以其三氟乙酸盐分离。
B.表III的化合物1的制备
按照上述部分A的方法,用2-苄氧基-1-萘甲酸代替1-苄氧基-2-萘甲酸,用肌氨酸酰胺代替L-脯氨酸酰胺,制得表III的化合物1。
C.其它式I化合物的制备
按照上述部分B的方法,用下列化合物代替肌氨酸酰胺:
L-脯氨酸-N,N-二甲基酰胺;
L-脯氨酸甲酯;以及
反式-4-羟基-L-脯氨酸甲酯;制得下列化合物:
表I和II的化合物5;
表I和II的化合物8;以及
表III的化合物4。V.物理数据
表I
化合物 | 质量计算值 | 质量实测值(M+1)1 | LC梯度2 | LC保留时间(分) |
1 | 414.24 | 415.1 | D | 5.8 |
2 | 404.26 | 405.5 | B | 11.5 |
3 | 440.26 | 441.1 | A | 10.3 |
4 | 471.26 | 472.2 | D | 6.2 |
5 | 468.29 | 469.1 | D | 6.8 |
63 | 551.34 | 552.3 | D | 7.5 |
7 | 551.34 | 552.1 | D | 7.3 |
8 | 455.26 | 456.0 | D | 7.0 |
9 | 442.26 | 443.0 | D | 5.5 |
10 | - | - | - | - |
11 | 456.26 | 456.7 | C | 24.4 |
12 | 440.26 | 441.2 | C | 25.4 |
13 | 587.34 | 588.0 | C | 26.9 |
14 | 440.26 | 440.5 | A | 9.0 |
15 | 440.26 | 440.24 | B | 8.4 |
16 | 391.5 | 391.84 | D | 5.6 |
17 | 456.49 | 456.74 | B | 9.0 |
18 | 393.22 | 391.84 | B | 5.5 |
19 | 390.4 | 391.1 | A | 4.7 |
20 | 406.4 | 407.2 | C | 20.7 |
21 | 466.5 | 467.2 | E | 3.5 |
1.用Finnigan电喷质谱仪测定所有质量,除非另有说明。
2.在所有情况下使用由乙腈和水组成的二元梯度体系。所有洗脱剂含有0.1%三氟乙酸。A:20-45%乙腈,历时13分钟。BV:10-35%乙腈,历时13分钟。C:5—95%乙腈,历时45分钟。D:2-95%乙腈,历时10分钟。E:25-45%乙腈,历时13分钟。
3.试验物质为非对映体的混合物。
4.用Biolon质谱仪测定质量,其值表示M+。VI.体外类胰蛋白酶抑制试验
将对类胰蛋白酶试验的化合物(大约lmg)溶于二甲亚砜(DMSO),并用含有50mMn Tris-HCL(pH8.2),100mMNaCl和0.05%Tween-20的缓冲液稀释至1∶10。用补加10%DMSO的同样缓冲液由初始的稀释液制备7份另外的3倍稀释液。将8份稀释液的每1份的等分试样(50μl)依次转到96孔U底微型滴定板的各孔中。然后将类胰蛋白酶(25μl;0.5nm最终浓度)加到各孔中,并将试样混合,在室温下在室光(即在实验过程中在室内叮得的光)或在控制的“光照”或“黑暗”条件下培养1小时。本文的“光照条件”是指荧光灯发出的400
1500英尺烛光的光照度,本文的“黑暗”是指用铝箔遮住试样容器。然后加入合成的三肽底物,甲苯磺酰基—Glyprolys—对硝基苯胺(25μl;0.5mM最终浓度)开始酶反应,马上将微型滴定板转移到UU/MAX动力学微板记录仪(Molecular devices),接着在分光光度为405nm时水解色原底物5分钟。在这些条件下酶试验通常得到线性进度曲线。用称为“Batchki”的动力学分析上程度(或从BiokinLed.,Madison WI购买)由进度曲线计算出初速值,该初速值用于确定定每抑制的表观抑制常数。上述程序被设计完成非线性数据的回归和曲线拟合。
表II到出了几个本发明化合物所测的抑制常数(K′i,μM),这些化合物中的R1为氢;R2为氢;R3为—(CH2)3—NH—(C=NH)—NH2;R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成5元杂环;以及R6为氢。根据本发明,当化合物的K′i小于1000μM时,化合物被称为“活性的”或有效的类胰蛋白酶抑制剂。与Ki不同,K′i不是酶抑制剂配合物的一个真实无关常于非竞争性抑制剂,Ki′等Ki;对于竞争性和非竞争性抑制剂,Ki′与Ki成正比。
将试验化合物的试验介质溶液曝光可以降低Ki′。通常,试验条件是光敏感的,室内光照试制变化可影响试验的重复性。由于这种潜在的误差来源,一些试验则在黑暗条件下进行。在表II和III中所到的Ki没有括号的是在室光条件下测定的。有括号的Ki′是在上面定义的“黑暗”条件下测定的。带有星号(*)的Ki′是在上面定义的“光照”条件下(即在400—450英尺烛光的光照度下)测定的。
表III列出了几个本发明化合物所测的抑制常数(Ki′,μM)。根据本发明,当化合物的Ki′小于1000μM时,化合物被称为“活性的”或有效的类胰蛋白酶抑制剂。
VII.表I和II的化合物抑制类胰蛋白酶的其它特性
A.pH依赖性
在下列四种不同pH的缓冲体系中试验化合物3对类胰蛋白酶的抑制:120mM NaCl,2.7mM KCl,0.13mMNaH2PO4,0.896mM Na2HPO4。所用的最终缓冲体系包括0.05%Tween—20。表Ⅳ表示化合物3在不同的pH下的Ki′(μM)。
表IV
B.pH7.5时的最佳试验
pH | 6.5 | 7.0 | 7.5 | 8.0 |
Ki 1(μM) | 14 | 8.0 | 5.4 | 6.1 |
本发明人已发现在下列缓冲体系中化合物3对光较不敏感:120mM NaCl,2.7mM KCl,0.13mM NaH2PO4,0.896mM Na2HPO4。和0.05%Tween—20pH为7.5。因此,在完成上述试验步骤时,化合物3的稀释和类胰蛋白酶的加入均可在室光室温(22—26℃)下进行。在加入底物之前,用铝箔遮住试验板培养1小时,该培养也可在室光下进行。稀释和加入类胰蛋白酶的步骤必须在5分钟内完成。另外,化合物3必须溶于DMSO中。VIII.体内试验
在这些研究中使用哮喘的变应性羊模型。在此之前已公开了这些方法(参见Abraham等人,(1983)Am.Rev.Respir.Dis.128:83—844;Allegra等人(1983)J.Appl.Physiol.59:1416—1422;Soler等人(1989)J.Appl.Physiol.67:406—413.每只羊均作为其本身的对照样。这些动物的体重为20—50千克。
在这些研究中,将9mg表I和II的化合物3溶于3mL缓冲盐水中,在抗原刺激之前0.5小时,之后4小时和之后24小时,将总溶液以气雾剂形式给药。(总剂量=27∶n=6),如图1所示化合物3表现出减轻早期应答的趋热并能减少后期应答。在对照(仅用载体)试验中,抗原刺激使早期和后期的峰值超过基线,特定肺阻(SRL)分别增加为374±104%和212±21%(平均值±SE)。与此相反,当用表I和II化合物3处理羊时,早期和后期的SRL增加为280±39%和72±9%(P(0.05,与对照样比较,Wilcoxon信号排列试验)。早期应答峰值为刺激后马上产生的最大值的平均值。使在6—8小时内每只动物得到的最大应答值平均从而计算得到后期应答峰值。这种方法是可靠的,它排除了由于简单平均,后期应答可能减少。在对照和药物试验中抗原刺激后24小时,羊产生气道强应答性。(气道强应答性可表示为PC400,即,使SRL增加400%的长巴可的浓度。因此,PC400减少表明气道变为强应答性的)。表I和II的化合物3阻止了24小时强应答性。参见图2。在对照试验中基线PC400为22.±3.7呼吸单位,在抗原刺激后降为9.1±1.3呼吸单位(P<0.05,与基线比较)。与此相反,在药物试验中,相对于基线PC400未改变(16.0±3.8呼吸单位与抗原激发后的17.63.5呼吸单位比较)。因此,用表I和II化合物3处理使抗原激发的羊的气道功能产生统计上显著的改善。
在本申请中公开的所有论文和参考文献包括专利在此引入作为参考。
当然上面描述是用于说明而不是限制。许多实施方案对于阅读了上面描述的本领域技术人员来说显而易见。因此,本发明的范围不应根据上述描述来确定,而应根据所附的权利要求以及与这些权利要求相应的全范围来确定。
Claims (58)
Ar为羟基取代的芳基或羟基取代的杂芳基,其中羟基位于酰胺侧链的邻位,如果Ar为羟基取代的芳基,那么带有酰胺侧链的芳环不被卤素取代并且在羟基的邻位上不带有低级烷基;
R1为氢、低级烷基、芳基烷基或杂芳基烷基;
R2为氢或低级烷基;
-(CH2)v-NH2
其中m为3-6的整数,n为0-3的整数,p为0-2的整数,q为0-2的整数;r为0-5的整数;s为0-2的整数;t为1-3的整数;u为1或2;v为3-6的整数;w为0-3的整数;A为-CH=CH-或-C≡C-;X为-NH-或-CH2-;
R4为低级烷基,取代的芳基烷基或取代的杂芳基烷基,R5和R6独立选自:氢、低级烷基、取代的芳烷基和取代的杂芳基烷基;或R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的4元、5元或6元杂环;R6为氢;或R4和R6与它们所连的氮和碳一起形成取代的4元、5元或6元杂环,R5为氢;
R7为-OR8或-NR8R9,其中R8和R9独立选自氢、低级烷基、芳基、芳基烷基或杂芳基烷基,或R8和R9与它们所连的氮一起形成取代的5元或6元杂环。
2.根据权利要求1的化合物,其中
Ar为1-羟基-2-萘基、2-羟基-1-萘基、3-羟基-2-吡啶基或2-羟基-3-喹喔啉基;
R1为氢;
R2为氢;
R3选自:
其中m为3-6的整数,n为0-3的整数,p为0-2的整数,q为0-2的整数,w为0-3的整数;A为-CH=CH-或-C=C-;X为-NH-或-CH2-;
R4为低级烷基,R5和R6为氢;或R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的4元、5元或6元杂环,R6为氢;
R7为-OH、-OCH3、-NH2、3′-氨基羧基-1′-哌啶基或-N(CH3)2。
3.根据权利要求2的化合物,其中Ar为1-羟基-2-萘基、R1为氢、R2为氢、R3为-(CH2)3NH(CNH)NH2,R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的5元杂环,R6为氢和R7为-NH2。
4.根据权利要求2的化合物,其中Ar是2—羟基—1—萘基,R′是氢,R2是氢,R3为—(CH2)3NH(CNH)NH2,R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的5元杂环,R6为氢,R7为—NH2。
5.治疗免疫调节的炎症的气雾剂组合物,包括处于药物上可接受的气雾化载体溶液或干粉中的权利要求1的化合物。
7.权利要求6的组合物,其中Ar为1-羟基-2-萘基、R1为氢、R2为氢、R3为-(CH2)3NH(CNH)NH2,R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的5元杂环,R6为氢和R7为-NH2。
8.权利要求6的组合物,其中Ar为2-羟基-1-萘基、R1为氢、R2为氢、R3为-(CH2)3NH(CNH)NH2,R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的5元杂环,R6为氢和R7为-NH2。
9.权利要求5的组合物,其中所述呼吸道的炎症为哮喘。
10.权利要求5的组合物,其中所述呼吸道的炎症为变应性鼻炎。
11.权利要求5的组合物,其中权利要求1所述的化合物以0.1-30mg/ml的浓度存在于所述载体溶液中。
12.权利要求5的组合物,还包括β-肾上腺素能促效剂化合物。
13.权利要求12的组合物,其中所述β-肾上腺素能促效剂化合物选自舒喘宁、叔丁喘宁、福莫忒醇(formoterol)、芬忒醇(fenoterol)和prenaline。
14.权利要求5的组合物,其中所述消炎的皮质甾类选自氯地米松、去炎松、flurisolide和地塞米松。
16.权利要求5的组合物,还包括溴化异丙托品。
17.药物组合物,包括与药物上可接受的载体结合的权利要求1化合物。
18.权利要求17的组合物,其中药物上可接受的载体包括无毒的药物上可接受的局部载体。
20.权利要求19的组合物,其中Ar为1-羟基-2-萘基、R1为氢、R2为氢、R3为-(CH2)3NH(CNH)NH2,R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的5元杂环,R6为氢和R7为-NH2。
21.权利要求19的组合物,其中Ar为2-羟基-1-萘基、R1为氢、R2为氢、R3为-(CH2)3NH(CNH)NH2,R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的5元杂环,R6为氢和R7为-NH2。
22.一种气雾剂装置,包括:
药物上接受的载体溶液或干粉中的权利要求1的化合物,和
将所述溶液或干粉转化适合吸入的气雾剂形式的装置。
24.权利要求23的组合物,其中Ar为l-羟基-2-萘基、R1为氢、R2为氢、R3为-(CH2)3NH(CNH)NH2,R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的5元杂环,R6为氢和R7为-NH2。
25.权利要求23的装置,其中Ar为2-羟基-1-萘基、R1为氢、R2为氢、R3为-(CH2)3NH(CNH)NH2,R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的5元杂环,R6为氢和R7为-NH2。
26.权利要求22的装置,其中所述化合物以0.1-30mg/ml的浓度存在于所述载体溶液中。
27.权利要求22的装置,还包括β-肾上腺素能促效剂化合物。
28.权利要求27的装置,其中所述β-肾上腺素能促效剂化合物选自舒喘宁、叔丁喘宁、福莫忒醇(formoterol)、芬忒醇(fenoterol)和prenaline。
29.权利要求22的装置,还包括消炎的皮质甾类。
30.权利要求29的装置,其中所述消炎的皮质甾类选自氯地米松、去炎松、flurisolide和地塞米松。
31.权利要求22的装置,还包括溴化异丙托品。
32.一种治疗变应性鼻炎的装置,包括:
药物上接受的载体溶液中的权利要求1的化合物,和
将所述溶液转化适合鼻内给药的气雾剂形式的装置。
33.权利要求32的装置,其中
Ar为1-羟基-2-萘基、2-羟基-1-萘基、3-羟基-2-吡啶基或2-羟基-3-喹喔啉基;
R1为氢;
R2为氢;
R3选自:
其中m为3-6的整数,n为0-3的整数,p为0-2的整数,q为0-2的整数,w为0-3的整数;A为-CH=CH-或-C≡C-;X为-NH-或-CH2-;
R4为低级烷基,R5和R6为氢;或R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的4元、5元或6元杂环,R6为氢;
R7为-OH、-OCH3、-NH2、3′-氨基羧基-1′-哌啶基或-N(CH3)2。
34.权利要求33的装置,其中Ar为1-羟基-2-萘基、R1为氢、R2为氢、R3为-(CH2)3NH(CNH)NH2,R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的5元杂环,R6为氢和R7为-NH2。
35.权利要求33的装置,其中Ar为2-羟基-1-萘基、R1为氢、R2为氢、R3为-(CH2)3NH(CNH)NH2,R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的5元杂环,R6为氢和R7为-NH2。
36.治疗呼吸道免疫调节的炎症的方法,所述方法包括给哺乳动物服用含有处于药物上可接受气雾化载体溶液或干粉中的权利要求1的化合物的吸入组合物。
37.权利要求36的方法,其中:
Ar为1-羟基-2-萘基、2-羟基-1-萘基、3-羟基-2-吡啶基或2-羟基-3-喹喔啉基;
R1为氢;
R2为氢;
R3选自:
其中m为3-6的整数,n为0-3的整数,p为0-2的整数,q为0-2的整数,w为0-3的整数;A为-CH=CH-或-C≡C-;X为-NH-或-CH2-;
R4为低级烷基,R5和R6为氢;或R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的4元、5元或6元杂环,R6为氢;
R7为-OH、-OCH3、-NH2、3′-氨基羧基-1′-哌啶基或-N(CH3)2。
38.权利要求37的方法,其中Ar为1-羟基-2-萘基、R1为氢、R2为氢、R3为-(CH2)3NH(CNH)NH2,R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的5元杂环,R6为氢和R7为-NH2。
39.权利要求37的方法,其中Ar为2-羟基-1-萘基、R1为氢、R2为氢、R3为-(CH2)3NH(CNH)NH2,R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的5元杂环,R6为氢和R7为-NH2。
40.权利要求36的方法,其中所述化合物以0.1-30mg/ml的浓度存在于所述载体溶液中。
41.权利要求36的方法,还包括β-肾上腺素能促效剂化合物。
42.权利要求41的方法,其中所述β-肾上腺素能促效剂化合物选自舒喘宁、叔丁喘宁、福莫忒醇(formoterol)、芬忒醇(fenoterol)和prenaline。
43.权利要求36的方法,还包括消炎的皮质甾类。
44.权利要求43的方法,其中所述消炎的皮质甾类选自氯地米松、去炎松、flurisolide和地塞米松。
45.权利要求36的方法,还包括溴化异丙托品。
46.治疗免疫调节的皮肤病的方法,所述方法包括用含药物上可接受的局部载体中的治疗有效量的权利要求1化合物的组合物对哺乳动物局部给药。
48.权利要求47的方法,其中Ar为1-羟基-2-萘基、R1为氢、R2为氢、R3为-(CH2)3NH(CNH)NH2,R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的5元杂环,R6为氢和R7为-NH2。
49.权利要求47的方法,其中Ar为2-羟基-1-萘基、R1为氢、R2为氢、R3为-(CH2)3NH(CNH)NH2,R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的5元杂环,R6为氢和R7为-NH2。
50.预防性治疗呼吸道免疫调节的炎症的方法,所述方法包括给哺乳动物服用含有处于可气雾剂药用的载体溶液或干粉中的预防有效量的权利要求1的化合物的吸入组合物。
51.权利要求50的方法,其中:
Ar为1-羟基-2-萘基、2-羟基-1-萘基、3-羟基-2-吡啶基或2-羟基-3-喹喔啉基;
R1为氢;
R2为氢;
R3选自:
其中m为3-6的整数,n为0-3的整数,p为0-2的整数,q为0-2的整数,w为0-3的整数;A为-CH=CH-或-C≡C-;X为-NH-或-CH2-;
R4为低级烷基,R5和R6为氢;或R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的4元、5元或6元杂环,R6为氢;
R7为-OH、-OCH3、-NH2、3′-氨基羧基-1′-哌啶基或-N(CH3)2。
52.权利要求51的方法,其中Ar为1-羟基-2-萘基、R1为氢、R2为氢、R3为-(CH2)3NH(CNH)NH2,R4和R4与它们所连的氮和碳一起形成取代的5元杂环,R6为氢和R7为-NH2。
53.权利要求51的方法,其中Ar为2-羟基-1-萘基、R1为氢、R2为氢、R3为-(CH2)3NH(CNH)NH2,R4和R5与它们所连的氮和碳一起形成取代的5元杂环,R6为氢和R7为-NH2。
54.权利要求50的方法,其中所述化合物以0.1-30mg/ml的浓度存在于所述载体溶液中。
55.权利要求50的方法,还包括β-肾上腺素能促效剂化合物。
56.权利要求55的方法,其中所述β-肾上腺素能促效剂化合物选自舒喘宁、叔丁喘宁、福莫忒醇(formoterol)、芬忒醇(fenoterol)和prenaline。
57.权利要求50的方法,还包括消炎的皮质甾类。
58.权利要求57的方法,其中所述消炎的皮质甾类选自氯地米松、去炎松、flurisolide和地塞米松。
59.权利要求36的方法,还包括溴化异丙托品。
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US3077093A | 1993-03-12 | 1993-03-12 | |
US3118793A | 1993-03-12 | 1993-03-12 | |
US08/031,187 | 1993-03-12 | ||
US08/030,770 | 1993-03-12 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN98102273A Division CN1234229A (zh) | 1993-03-12 | 1998-06-15 | 治疗免疫调节炎症的装置 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN1119019A true CN1119019A (zh) | 1996-03-20 |
CN1057772C CN1057772C (zh) | 2000-10-25 |
Family
ID=26706445
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN94191441A Expired - Fee Related CN1057772C (zh) | 1993-03-12 | 1994-03-11 | 治疗免疫调节的炎症的化合物和组合物 |
CN98102273A Pending CN1234229A (zh) | 1993-03-12 | 1998-06-15 | 治疗免疫调节炎症的装置 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN98102273A Pending CN1234229A (zh) | 1993-03-12 | 1998-06-15 | 治疗免疫调节炎症的装置 |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0688337A1 (zh) |
JP (1) | JPH08507768A (zh) |
KR (1) | KR100309616B1 (zh) |
CN (2) | CN1057772C (zh) |
AU (1) | AU683459B2 (zh) |
CZ (1) | CZ289930B6 (zh) |
FI (1) | FI954245A (zh) |
PL (1) | PL176941B1 (zh) |
SK (1) | SK282537B6 (zh) |
UA (1) | UA42719C2 (zh) |
WO (1) | WO1994020527A1 (zh) |
Families Citing this family (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0763016B1 (en) * | 1994-06-01 | 2000-01-26 | Axys Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for treating mast-cell mediated conditions |
JPH10506390A (ja) | 1994-09-23 | 1998-06-23 | アリス ファーマシューティカル コーポレイション | マスト細胞炎症症状を処置するための組成物及び方法 |
WO1997037969A1 (fr) | 1996-04-10 | 1997-10-16 | Ono Pharmaceutical Co., Ltd. | Inhibiteur de tryptase derives de guanidino |
HUP0003267A3 (en) * | 1996-07-30 | 2002-02-28 | Arris Pharmaceutical Corp San | Heteroaryl derivatives, pharmaceutical compositions containing them and process for producing them |
WO1998024886A1 (en) * | 1996-12-04 | 1998-06-11 | Brigham And Women's Hospital, Inc. | Mast cell protease that cleaves fibrinogen |
WO1998033812A1 (en) * | 1997-02-05 | 1998-08-06 | Brigham And Women's Hospital, Inc. | Mast cell protease peptide inhibitors |
EP1030844A1 (en) * | 1997-11-10 | 2000-08-30 | Array Biopharma Inc. | Compounds which inhibit tryptase activity |
US6221914B1 (en) * | 1997-11-10 | 2001-04-24 | Array Biopharma Inc. | Sulfonamide bridging compounds that inhibit tryptase activity |
WO1999026925A1 (fr) * | 1997-11-26 | 1999-06-03 | Yoshitomi Pharmaceutical Industries, Ltd. | Inhibiteurs de tryptase comprenant des composants d'amide heterocycliques |
SE9800729L (sv) * | 1998-03-06 | 1999-09-07 | Scotia Lipidteknik Ab | Ny topikal formulering I |
SE515982C2 (sv) * | 1998-03-06 | 2001-11-05 | Lipocore Holding Ab | Användning av en olja-i-vatten emulsion som bärare för framställning av en topikal kräm eller lotion |
DE19939910A1 (de) * | 1999-08-23 | 2001-03-01 | Morphochem Ag | Neue Verbindungen, die Tryptase-Aktivität hemmen |
GB0507577D0 (en) | 2005-04-14 | 2005-05-18 | Novartis Ag | Organic compounds |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4201863A (en) * | 1974-11-08 | 1980-05-06 | Mitsubishi Chemical Industries, Limited | N2 -Arylsulfonyl-L-argininamides and the pharmaceutically acceptable salts thereof |
US4456595A (en) * | 1982-12-06 | 1984-06-26 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Carboxy and substituted carboxy aroly peptides |
-
1994
- 1994-03-11 PL PL94310559A patent/PL176941B1/pl unknown
- 1994-03-11 CN CN94191441A patent/CN1057772C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1994-03-11 JP JP6520352A patent/JPH08507768A/ja not_active Ceased
- 1994-03-11 WO PCT/US1994/002706 patent/WO1994020527A1/en not_active Application Discontinuation
- 1994-03-11 AU AU63647/94A patent/AU683459B2/en not_active Ceased
- 1994-03-11 EP EP94910926A patent/EP0688337A1/en not_active Ceased
- 1994-03-11 UA UA95104466A patent/UA42719C2/uk unknown
- 1994-03-11 SK SK1129-95A patent/SK282537B6/sk unknown
- 1994-03-11 CZ CZ19952321A patent/CZ289930B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1994-03-11 KR KR1019950703932A patent/KR100309616B1/ko not_active IP Right Cessation
-
1995
- 1995-09-11 FI FI954245A patent/FI954245A/fi unknown
-
1998
- 1998-06-15 CN CN98102273A patent/CN1234229A/zh active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
SK282537B6 (sk) | 2002-10-08 |
AU6364794A (en) | 1994-09-26 |
AU683459B2 (en) | 1997-11-13 |
UA42719C2 (uk) | 2001-11-15 |
KR100309616B1 (ko) | 2002-02-28 |
EP0688337A1 (en) | 1995-12-27 |
SK112995A3 (en) | 1996-10-02 |
FI954245A (fi) | 1995-09-28 |
PL310559A1 (en) | 1995-12-27 |
JPH08507768A (ja) | 1996-08-20 |
WO1994020527A1 (en) | 1994-09-15 |
CN1057772C (zh) | 2000-10-25 |
CZ232195A3 (en) | 1996-07-17 |
CZ289930B6 (cs) | 2002-04-17 |
PL176941B1 (pl) | 1999-08-31 |
FI954245A0 (fi) | 1995-09-11 |
CN1234229A (zh) | 1999-11-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN1057772C (zh) | 治疗免疫调节的炎症的化合物和组合物 | |
US5525623A (en) | Compositions and methods for the treatment of immunomediated inflammatory disorders | |
CN1052730C (zh) | 具有生长激素释放特性的化合物 | |
RU2159229C2 (ru) | Производные циклоалкилена или гетероциклоалкилена, фармацевтическая композиция, аэрозольное устройство и способ лечения | |
CN1155571C (zh) | 含有γ-谷氨酰基和β-天冬氨酰基的免疫调制剂化合物及其制备方法 | |
US20120232004A1 (en) | Methods for Treating Autoimmune Disorders, and Reagents Related Thereto | |
HU226979B1 (en) | Bicyclic lactam inhibitor of interleukin-1-beta converting enzyme and pharmaceutical compositions containing them | |
JPH11508604A (ja) | カテプシンdならびにプラスメプシン▲i▼および▲ii▼のペプチド模倣インヒビター | |
EP1283869B1 (en) | Novel bee venom polypeptides and methods of use thereof | |
CN1304415C (zh) | 作为ace和nep抑制剂的吡喃衍生物 | |
CN1301269A (zh) | 模板结合的npyy2受体激动剂 | |
US20080311103A1 (en) | Anti-Inflammatory Peptides and Methods of Use Thereof | |
US4587250A (en) | Thiazaspirane derivatives, process for their preparation, and medicaments | |
US8710080B2 (en) | Prodrugs of [4 [4-(5-Aminomethyl-2-fluoro-phenyl)-piperidin-1-yl]-(1H-pyrrolo-pyridin-yl)-methanones and synthesis thereof | |
JPH08505143A (ja) | ジフルオロペンタペプチド誘導体抗炎症剤 | |
US5561113A (en) | New pseudopeptide compounds of neurokinins | |
JPH05148277A (ja) | アミノホスホン酸誘導体 | |
US5578601A (en) | Nonpeptide bradykinin antagonists | |
CA2288332A1 (en) | (3r)-3-amino-4-carboxybutyraldehyde derivatives inhibiting the release of interleukin-1/beta | |
JP4986335B2 (ja) | Vdac機能阻害剤 | |
CN101168560A (zh) | N-取代肽酰胺,其药物组合物与用途 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C53 | Correction of patent for invention or patent application | ||
COR | Change of bibliographic data |
Free format text: CORRECT: PATENTEE; FROM: ARRIS PHARMACEUTICAL CORPORATION TO: AXYS PHARMACEUTICAL CORPORATION |
|
CP01 | Change in the name or title of a patent holder |
Patentee after: AXYS Pharmaceuticals, Inc. Patentee before: Arris Pharmaceutical Corp. |
|
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
C19 | Lapse of patent right due to non-payment of the annual fee | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |