CN111892646A - 高效低毒的抗菌肽衍生物及其在制备抗细菌感染药物中的应用 - Google Patents
高效低毒的抗菌肽衍生物及其在制备抗细菌感染药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111892646A CN111892646A CN202010811230.1A CN202010811230A CN111892646A CN 111892646 A CN111892646 A CN 111892646A CN 202010811230 A CN202010811230 A CN 202010811230A CN 111892646 A CN111892646 A CN 111892646A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- amino acid
- sequence
- antibacterial peptide
- lysine
- acid residue
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000003910 polypeptide antibiotic agent Substances 0.000 title claims abstract description 210
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 title claims abstract description 35
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 9
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 title abstract description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 title abstract description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title abstract description 6
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 title abstract description 4
- 102000044503 Antimicrobial Peptides Human genes 0.000 claims abstract description 185
- 108700042778 Antimicrobial Peptides Proteins 0.000 claims abstract description 185
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 74
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims abstract description 66
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 58
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 36
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 claims abstract description 10
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 claims abstract description 10
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims abstract description 9
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 claims abstract description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 103
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 101
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 98
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 52
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 21
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 20
- 239000012620 biological material Substances 0.000 claims description 13
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 12
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 11
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 11
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 10
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 claims description 9
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 8
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 claims description 8
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 claims description 7
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 claims description 7
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 abstract description 21
- 231100001274 therapeutic index Toxicity 0.000 abstract description 20
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 abstract description 6
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 abstract description 6
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 abstract description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 abstract description 5
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 abstract description 3
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 14
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 14
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 14
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 12
- VNFWDYWTSHFRRG-SRVKXCTJSA-N Arg-Gln-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O VNFWDYWTSHFRRG-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 10
- LLUGJARLJCGLAR-CYDGBPFRSA-N Arg-Ile-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N LLUGJARLJCGLAR-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 10
- MWLYSLMKFXWZPW-ZPFDUUQYSA-N Gln-Arg-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O MWLYSLMKFXWZPW-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 10
- YLEIWGJJBFBFHC-KBPBESRZSA-N Gly-Phe-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CC=CC=C1 YLEIWGJJBFBFHC-KBPBESRZSA-N 0.000 description 10
- HBJZFCIVFIBNSV-DCAQKATOSA-N Leu-Arg-Asn Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O HBJZFCIVFIBNSV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 10
- QIJVAFLRMVBHMU-KKUMJFAQSA-N Lys-Asp-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O QIJVAFLRMVBHMU-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 10
- YXPJCVNIDDKGOE-MELADBBJSA-N Lys-Lys-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)C(=O)O YXPJCVNIDDKGOE-MELADBBJSA-N 0.000 description 10
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 10
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 241000588747 Klebsiella pneumoniae Species 0.000 description 7
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 7
- 229940045505 klebsiella pneumoniae Drugs 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 6
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 6
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 6
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 5
- JLWZLIQRYCTYBD-IHRRRGAJSA-N Leu-Lys-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O JLWZLIQRYCTYBD-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 5
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 5
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 5
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- 241000191963 Staphylococcus epidermidis Species 0.000 description 4
- MHHAWNPHDLCPLF-ULQDDVLXSA-N Val-Phe-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)CC1=CC=CC=C1 MHHAWNPHDLCPLF-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 4
- QTXGUIMEHKCPBH-FHWLQOOXSA-N Val-Trp-Lys Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)=CNC2=C1 QTXGUIMEHKCPBH-FHWLQOOXSA-N 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- JYHIVHINLJUIEG-BVSLBCMMSA-N Arg-Tyr-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O JYHIVHINLJUIEG-BVSLBCMMSA-N 0.000 description 3
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 3
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 238000002715 modification method Methods 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LXKNSJLSGPNHSK-KKUMJFAQSA-N Leu-Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N LXKNSJLSGPNHSK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- RRBGTUQJDFBWNN-MUGJNUQGSA-N (2s)-6-amino-2-[[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]hexanoyl]amino]hexanoyl]amino]hexanoic acid Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O RRBGTUQJDFBWNN-MUGJNUQGSA-N 0.000 description 1
- 241000588626 Acinetobacter baumannii Species 0.000 description 1
- OBFTYSPXDRROQO-SRVKXCTJSA-N Arg-Gln-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N OBFTYSPXDRROQO-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- LKDHUGLXOHYINY-XUXIUFHCSA-N Arg-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N LKDHUGLXOHYINY-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- CLICCYPMVFGUOF-IHRRRGAJSA-N Arg-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O CLICCYPMVFGUOF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- XUGATJVGQUGQKY-ULQDDVLXSA-N Arg-Lys-Phe Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XUGATJVGQUGQKY-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- XKDYWGLNSCNRGW-WDSOQIARSA-N Arg-Lys-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N)CCCCN)C(O)=O)=CNC2=C1 XKDYWGLNSCNRGW-WDSOQIARSA-N 0.000 description 1
- PAPSMOYMQDWIOR-AVGNSLFASA-N Arg-Lys-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O PAPSMOYMQDWIOR-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 241000588914 Enterobacter Species 0.000 description 1
- 241000194032 Enterococcus faecalis Species 0.000 description 1
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 1
- JFOKLAPFYCTNHW-SRVKXCTJSA-N Gln-Arg-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N JFOKLAPFYCTNHW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- VEPBEGNDJYANCF-QWRGUYRKSA-N Gly-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCCN VEPBEGNDJYANCF-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- YOZCKMXHBYKOMQ-IHRRRGAJSA-N Leu-Arg-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N YOZCKMXHBYKOMQ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- KPYAOIVPJKPIOU-KKUMJFAQSA-N Leu-Lys-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O KPYAOIVPJKPIOU-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- ALSRJRIWBNENFY-DCAQKATOSA-N Lys-Arg-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O ALSRJRIWBNENFY-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- VHNOAIFVYUQOOY-XUXIUFHCSA-N Lys-Arg-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O VHNOAIFVYUQOOY-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- GGAPIOORBXHMNY-ULQDDVLXSA-N Lys-Arg-Tyr Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)O GGAPIOORBXHMNY-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- LMVOVCYVZBBWQB-SRVKXCTJSA-N Lys-Asp-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN LMVOVCYVZBBWQB-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N Lys-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- RBEATVHTWHTHTJ-KKUMJFAQSA-N Lys-Leu-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O RBEATVHTWHTHTJ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- WBSCNDJQPKSPII-KKUMJFAQSA-N Lys-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O WBSCNDJQPKSPII-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- ATNKHRAIZCMCCN-BZSNNMDCSA-N Lys-Lys-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCCN)N ATNKHRAIZCMCCN-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- AZOFEHCPMBRNFD-BZSNNMDCSA-N Lys-Phe-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 AZOFEHCPMBRNFD-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- YUTZYVTZDVZBJJ-IHPCNDPISA-N Lys-Trp-Lys Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)=CNC2=C1 YUTZYVTZDVZBJJ-IHPCNDPISA-N 0.000 description 1
- WWXNZNWZNZPDIF-SRVKXCTJSA-N Pro-Val-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 WWXNZNWZNZPDIF-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000012864 cross contamination Methods 0.000 description 1
- 229940032049 enterococcus faecalis Drugs 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 231100001231 less toxic Toxicity 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 108010057952 lysyl-phenylalanyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 108010017391 lysylvaline Proteins 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 108010053725 prolylvaline Proteins 0.000 description 1
- 238000012113 quantitative test Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/08—Linear peptides containing only normal peptide links having 12 to 20 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4723—Cationic antimicrobial peptides, e.g. defensins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
本发明公开了高效低毒的抗菌肽衍生物及其在制备抗细菌感染药物中的应用。本发明将GF‑17抗菌肽和SAAP‑148抗菌肽中除赖氨酸Lys和精氨酸Arg外的任意一个氨基酸残基替换为赖氨酸Lys，获得了两组细胞毒性低、治疗指数高、生物相容性好的新型抗菌肽衍生物。通过实验证明：与天然抗菌肽相比，本发明的新型抗菌肽衍生物对细菌有更高的选择性毒性，即它们具有与天然抗菌肽相同或更强的杀菌作用，且对人类的细胞毒性明显降低，对红细胞造成的影响极低。本发明的新型抗菌肽衍生物对革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌具有广谱的杀伤效应，可以用于治疗对抗生素耐药的革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌感染引起的疾病，具有良好的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体涉及高效低毒的抗菌肽衍生物及其在制备抗细菌感染药物中的应用。
背景技术
耐药菌尤其是多药耐药菌的出现越来越威胁着人类的健康。其中多药耐药菌“ESKAPE”(粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和肠杆菌)威胁最大。抗菌肽(Antimicrobial peptides，AMPs)是一种作用机制明显不同于传统抗生素、能够快速杀灭细菌、真菌、病毒和寄生虫的多肽类物质，有望成为治疗感染性疾病的新型药物。不同于传统的抗生素，一般认为抗菌肽的作用靶点是细菌的细胞膜。抗菌肽与细菌的细胞膜相互作用，裂解细胞膜而导致细菌死亡。而细菌细胞膜的基本成分非常稳定，不易对抗菌肽产生耐药性。但抗菌肽不仅能够作用于微生物细胞膜，还能够裂解真核细胞的细胞膜，产生细胞毒性，这阻碍了其临床应用。
影响抗菌肽选择性毒性的因素很多，环境因素如离子强度、pH、血清等，抗菌肽自身因素包括抗菌肽的净电荷、螺旋性、疏水性和两亲性等，同时这些参数之间还相互影响。如何降低抗菌肽对真核细胞的毒性、提高抗菌肽对细菌的选择性毒性是目前抗菌肽研究的热点与难点。
发明内容
本发明的目的是提供细胞毒性低、治疗指数高、生物相容性好的新型抗菌肽。
第一方面，本发明保护一种多肽。
本发明保护的多肽是将抗菌肽中除赖氨酸和精氨酸外的任意一个氨基酸残基替换为赖氨酸后得到的多肽；所述抗菌肽为GF-17抗菌肽或SAAP-148抗菌肽。
上述多肽中，当所述抗菌肽为GF-17抗菌肽时，所述多肽为如下A1)-A12)中的任一种：
A1)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第1位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A2)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第2位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A3)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第5位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A4)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第6位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A5)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第9位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A6)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第12位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A7)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第13位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A8)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第16位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A9)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第17位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A10)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第7位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A11)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第11位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A12)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第15位氨基酸残基替换为赖氨酸。
进一步的，所述多肽为如下a1)-a12)中的任一种：
a1)序列表中序列1所示的多肽；
a2)序列表中序列2所示的多肽；
a3)序列表中序列3所示的多肽；
a4)序列表中序列4所示的多肽；
a5)序列表中序列5所示的多肽；
a6)序列表中序列6所示的多肽；
a7)序列表中序列7所示的多肽；
a8)序列表中序列8所示的多肽；
a9)序列表中序列9所示的多肽；
a10)序列表中序列10所示的多肽；
a11)序列表中序列11所示的多肽；
a12)序列表中序列12所示的多肽。
上述多肽中，所述抗菌肽为SAAP-148抗菌肽时，所述多肽为如下B1)-B12)中的任一种：
B1)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第1位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B2)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第4位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B3)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第5位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B4)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第8位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B5)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第9位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B6)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第11位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B7)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第12位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B8)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第15位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B9)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第16位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B10)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第18位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B11)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第19位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B12)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第22位氨基酸残基替换为赖氨酸。
进一步的，所述多肽为如下b1)-b12)中的任一种：
b1)序列表中序列13所示的多肽；
b2)序列表中序列14所示的多肽；
b3)序列表中序列15所示的多肽；
b4)序列表中序列16所示的多肽；
b5)序列表中序列17所示的多肽；
b6)序列表中序列18所示的多肽；
b7)序列表中序列19所示的多肽；
b8)序列表中序列20所示的多肽；
b9)序列表中序列21所示的多肽；
b10)序列表中序列22所示的多肽；
b11)序列表中序列23所示的多肽；
b12)序列表中序列24所示的多肽。
上述任一所述多肽具有如下X1)或X2)所述的功能：
X1)预防和/或治疗细菌感染引起的疾病；
X2)抑菌或杀菌或抗菌。
上述任一所述多肽可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。
第二方面，本发明保护与上述多肽相关的生物材料。
本发明保护的与上述多肽相关的生物材料为下述C1)至C8)中的任一种：
C1)编码上述多肽的核酸分子；
C2)含有C1)所述核酸分子的表达盒；
C3)含有C1)所述核酸分子的重组载体；
C4)含有C2)所述表达盒的重组载体；
C5)含有C1)所述核酸分子的重组微生物；
C6)含有C2)所述表达盒的重组微生物；
C7)含有C3)所述重组载体的重组微生物；
C8)含有C4)所述重组载体的重组微生物。
上述生物材料中，所述核酸分子可为如下1)或2)或3)或4)所示的核酸分子：
1)编码所述多肽的DNA分子；
2)编码所述多肽的cDNA分子
3)与1)或2)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且编码所述多肽的cDNA分子或基因组DNA分子；
4)在严格条件下与1)或2)限定的核苷酸序列杂交，且编码所述多肽的cDNA分子或基因组DNA分子。
本领域普通技术人员可以很容易地采用已知的方法，例如定向进化和点突变的方法，对本发明的编码所述多肽的核苷酸序列进行突变。那些经过人工修饰的，具有与本发明的所述多肽的核苷酸序列75％或者更高同一性的核苷酸，只要编码所述多肽且具有抑菌或杀菌或抗菌作用，均是衍生于本发明的核苷酸序列并且等同于本发明的序列。
这里使用的术语“同一性”指与天然核酸序列的序列相似性。“同一性”包括与本发明的编码所述多肽的核苷酸序列具有75％或更高，或85％或更高，或90％或更高，或95％或更高同一性的核苷酸序列。同一性可以用肉眼或计算机软件进行评价。使用计算机软件，两个或多个序列之间的同一性可以用百分比(％)表示，其可以用来评价相关序列之间的同一性。
上述生物材料中，所述严格条件是在2×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次5min，又于0.5×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次15min。
上述75％或75％以上同一性，可为80％、85％、90％或95％以上的同一性。
上述生物材料中，B2)所述的含有编码所述多肽的核酸分子的表达盒，是指能够在宿主细胞中表达所述多肽的DNA，该DNA不但可包括启动所述多肽基因转录的启动子，还可包括终止所述多肽基因转录的终止子。进一步，所述表达盒还可包括增强子序列。
可用现有的表达载体构建含有所述多肽基因表达盒的重组载体。
上述生物材料中，所述载体可为质粒、黏粒、噬菌体或病毒载体。
上述生物材料中，所述微生物可为酵母、细菌、藻或真菌。
第三方面，本发明保护上述多肽或生物材料的新用途。
本发明保护在上述多肽或生物材料在如下S1)-S4)中任一种中的应用：
S1)制备预防和/或治疗细菌感染引起的疾病的产品；
S2)预防和/或治疗细菌感染引起的疾病；
S3)制备抑菌或杀菌或抗菌的产品；
S4)抑菌或杀菌或抗菌。
第四方面，本发明保护如下T1)或T2)所述的方法：
T1)一种降低抗菌肽对真核细胞毒性的方法，包括如下步骤：将抗菌肽中除赖氨酸和精氨酸外的任意一个氨基酸残基替换为赖氨酸，得到抗菌肽衍生物；所述抗菌肽衍生物对真核细胞的毒性低于所述抗菌肽；
T2)一种提高抗菌肽杀菌功效的方法，包括如下步骤：将抗菌肽中除赖氨酸和精氨酸外的任意一个氨基酸残基替换为赖氨酸，得到抗菌肽衍生物；所述抗菌肽衍生物对细菌的杀菌功效高于所述抗菌肽；
所述抗菌肽为GF-17抗菌肽或SAAP-148抗菌肽。
上述方法中，当所述抗菌肽为GF-17抗菌肽时，所述抗菌肽衍生物为上述A1)-A12)任一所述的多肽或上述a1)-a12)任一所述的多肽。
当所述抗菌肽为SAAP-148抗菌肽时，所述抗菌肽衍生物为上述B1)-B12)任一所述的多肽或上述b1)-b12)任一所述的多肽。
上述方法中，所述T1)中，所述抗菌肽衍生物对真核细胞的毒性低于所述抗菌肽体现在所述抗菌肽衍生物对红细胞的溶血能力低于所述抗菌肽。
所述T2)中，所述抗菌肽衍生物对细菌的杀菌功效高于所述抗菌肽体现在所述抗菌肽衍生物的治疗指数高于所述抗菌肽。
所述治疗指数(TI)是抗菌肽或抗菌肽衍生物的最小溶血浓度(MHC)与抗菌肽或抗菌肽衍生物对几种细菌最小抑菌浓度(MIC)的几何平均数之比。在本发明中，所述细菌的种类为五种，具体为大肠杆菌Escherichia coli或金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus或绿脓杆菌Pseudomonas aeruginosa或表皮葡萄球菌Staphylococcus epidermidis或肺炎克雷伯杆菌Klebsiella pneumoniae。
所述最小抑菌浓度(MIC)界定为抗菌肽在此浓度时能够完全抑制细菌生长，而较其稍小的抗菌肽浓度不能够抑制细菌生长。所述最小溶血浓度(MHC)界定为刚刚引起10％的红细胞溶血的抗菌肽浓度。
第五方面，本发明保护一种产品。
本发明保护的产品的活性成分为上述多肽或生物材料；
所述产品的功能为如下X1)或X2)：
X1)预防和/或治疗细菌感染引起的疾病；
X2)抑菌或杀菌或抗菌。
上述任一所述应用或方法或产品中，所述细菌可为革兰氏阴性菌或革兰氏阳性菌。在本发明的具体实施例中，所述细菌具体可为大肠杆菌Escherichia coli或金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus或绿脓杆菌Pseudomonas aeruginosa或表皮葡萄球菌Staphylococcus epidermidis或肺炎克雷伯杆菌Klebsiella pneumoniae。
所述产品可为抑菌剂或杀菌剂或抗菌剂。
本发明将GF-17抗菌肽和SAAP-148抗菌肽中除赖氨酸Lys和精氨酸Arg外的任意一个氨基酸残基替换为赖氨酸Lys，获得了两组细胞毒性低、治疗指数高、生物相容性好的新型抗菌肽衍生物。通过用微量稀释法检测新型抗菌肽衍生物的杀菌活性，结果显示与天然抗菌肽GF-17或SAAP-148相比，新型抗菌肽衍生物对细菌的抑制作用增强，本发明还检测了新型抗菌肽衍生物对人红细胞的溶血活性，结果显示与天然抗菌肽GF-17或SAAP-148相比，新型抗菌肽衍生物溶血活性极低。通过实验证明：与天然抗菌肽相比，本发明的新型抗菌肽衍生物对细菌有更高的选择性毒性，即它们具有与天然抗菌肽相同或更强的杀菌作用，且对人类的细胞毒性明显降低，对红细胞造成的影响极低。本发明的新型抗菌肽衍生物对革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌具有广谱的杀伤效应，可以用于治疗对抗生素耐药的革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌感染引起的疾病，具有良好的应用前景。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。
下述实施例中的最小抑菌浓度(MIC)界定为抗菌肽在此浓度时能够完全抑制细菌生长，而较其稍小的抗菌肽浓度不能够抑制细菌生长。
下述实施例中的最小溶血浓度(MHC)界定为刚刚引起10％的红细胞溶血的抗菌肽浓度。
下述实施例中的治疗指数(TI)是抗菌肽的最小溶血浓度(MHC)与抗菌肽对几种细菌MIC的几何平均数(GM)之比。抗菌肽的治疗指数能够综合反映抗菌肽对真核细胞和对细菌的选择性毒性，是综合评价抗菌肽的常用指标。
实施例1、抗菌肽的改构方法及抗菌肽衍生物的制备
一、抗菌肽的改构方法
本发明的抗菌肽改构方法是将抗菌肽中除赖氨酸Lys和精氨酸Arg外的任意一个氨基酸残基替换为赖氨酸Lys。将单个氨基酸残基发生替换后的抗菌肽记作抗菌肽衍生物。
二、抗菌肽衍生物的制备
1、GF-17抗菌肽衍生物的制备
以GF-17抗菌肽为例，按照步骤一中的改构方法对GF-17抗菌肽进行改构，得到一组GF-17抗菌肽衍生物，命名为aGF1-aGF12。GF-17抗菌肽及GF-17抗菌肽衍生物aGF1-aGF12的氨基酸序列如表1所示。委托吉尔生化(上海)有限公司合成表1中的多肽。
表1、GF-17抗菌肽及其衍生物的氨基酸序列
2、SAAP-148抗菌肽衍生物的制备
以SAAP-148抗菌肽为例，按照步骤一中的改构方法对SAAP-148抗菌肽进行改构，得到一组SAAP-148抗菌肽衍生物，命名为SAAP1-SAAP12。SAAP-148抗菌肽及SAAP-148抗菌肽衍生物SAAP1-SAAP12的氨基酸序列如表2所示。委托吉尔生化(上海)有限公司合成表2中的多肽。
表2、SAAP-148抗菌肽及其衍生物的氨基酸序列
实施例2、抗菌肽衍生物的应用
一、GF-17抗菌肽衍生物的应用
1、GF-17抗菌肽衍生物的溶血能力测定
供试抗菌肽衍生物：实施例1制备的GF-17抗菌肽衍生物aGF1-aGF12，以GF-17抗菌肽作为对照。
按照如下方法分别测定GF-17抗菌肽及GF-17抗菌肽衍生物的溶血能力(对红细胞溶破作用能力)。具体步骤如下：
1)将人新鲜全血用PBS缓冲液(135mM NaCl，2.7mM KCl，1.5mM KH2PO4，and 8mMK2HPO4，pH 7.2)洗三次，每次450×g离心5min，然后将压实的红细胞用PBS缓冲液配成1.25％压积的红细胞悬液，取160μl红细胞悬液至96孔板中备用。
2)将抗菌肽或抗菌肽衍生物用PBS缓冲液倍比稀释，取40μl加入含有160μl红细胞悬液的96孔板中(抗菌肽衍生物的终浓度分别为100μM、50μM、25μM、12.5μM、6.25μM、3.13μM、1.56μM和0.78μM，红细胞的终浓度为1％(v/v))，实验过程中避免交叉污染。
3)设置不加抗菌肽及抗菌肽衍生物的孔为阴性对照组，加Triton X-100(终浓度为0.1％，v/v)孔为阳性对照组，设置3个平行孔，于37℃孵育30min。
4)将96孔板450×g离心5min，取100μl上清于新的96孔板中，在多功能酶标仪上检测各孔在450nm处的吸光度，计算各抗菌肽衍生物在不同浓度时的溶血率。溶血率＝(抗菌肽组OD450－阴性对照OD450)/(阳性对照OD450－阴性对照OD450)×100％。GF-17抗菌肽及GF-17抗菌肽衍生物的红细胞溶血率检测结果如表3所示。
表3、GF-17抗菌肽及其衍生物的红细胞溶血率
结果表明：相较抗菌肽GF-17，本发明的抗菌肽衍生物中除了aGF10对红细胞溶破能力增强外，其余均有不同程度的降低，其中，多肽aGF5、aGF6、aGF7及aGF8对红细胞溶破能力降低尤为显著。在抗菌肽或抗菌肽衍生物浓度为100μM时，抗菌肽GF-17的溶血率达到100％，而此时抗菌肽衍生物aGF5、aGF6、aGF7及aGF8的溶血率为3.85％，5.8％、8.7％和9.1％，说明GF-17对应位置的氨基酸替换成Lys残基有助于降低其对红细胞的溶血作用。
2、GF-17抗菌肽衍生物的杀菌活性测定
供试抗菌肽衍生物：实施例1制备的GF-17抗菌肽衍生物aGF1-aGF12，以GF-17抗菌肽作为对照。
供试菌种：大肠杆菌(Escherichia coli，购买自中国普通微生物保藏管理中心，ATCC编号为1.8732)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，购买自中国普通微生物保藏管理中心，ATCC编号为1.8721)、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa，购买自中国普通微生物保藏管理中心，ATCC编号为1.2421)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis，购买自中国普通微生物保藏管理中心，ATCC编号为1.4260)和肺炎克雷伯杆菌(Klebsiellapneumoniae，购买自中国普通微生物保藏管理中心，ATCC编号为1.1736)。
按微量稀释法用96孔板测定GF-17抗菌肽及GF-17抗菌肽衍生物对不同细菌的最小抑菌浓度。具体步骤如下：
1)菌种复苏，划线接种至LB平板，于微生物培养箱中37℃过夜培养，挑单克隆菌落于普通LB液体培养基中，于恒温摇床37℃，200×rpm培养细菌至对数生长期，用LB液体培养基稀释菌液至106CFU/ml。
2)将抗菌肽或抗菌肽衍生物溶于PBS缓冲液中，使其浓度分别为200μM、100μM、50μM、25μM、12.5μM、6.25μM、3.125μM、1.5625μM，得到不同浓度的抗菌肽或抗菌肽衍生物溶液。
3)将50μl不同浓度的抗菌肽或抗菌肽衍生物溶液分别与50μl稀释后的菌液于无菌96孔板中混匀，37℃共孵育20小时后用多功能酶标仪检测96孔板各孔在600nm处的吸光度。设置不加抗菌肽或抗菌肽衍生物、仅添加50μl PBS缓冲液和50μl稀释后的菌液组为阳性对照，不加抗菌肽或抗菌肽衍生物、仅添加50μl PBS缓冲液和50μl LB培养基组为阴性对照。通过检测各孔OD600值，与阴性对照和阳性对照对比，得出抗菌肽及抗菌肽衍生物的最小抑菌浓度(MIC)。按照步骤1中的方法计算抗菌肽及抗菌肽衍生物的最小溶血浓度(MHC)，并计算几何均数(GM)和治疗指数(TI)。几何均数(GM)是对各变量值的连乘积开项数次方根，具体计算公式如下：几何均数
其中，n为5；x1、x2、x3、x4和x5分别代表五种细菌的最小抑菌浓度(MIC)。治疗指数(TI)＝最小溶血浓度(MHC)/几何平均数(GM)。结果如表4所示。
表4、GF-17抗菌肽及其衍生物对五种细菌的最小抑菌浓度(μM)治疗指数
二、SAAP-148抗菌肽衍生物的应用
1、SAAP-148抗菌肽衍生物的溶血能力测定
供试抗菌肽衍生物：实施例1制备的SAAP-148抗菌肽衍生物SAAP1-SAAP12，以SAAP-148抗菌肽作为对照。
按照步骤一的1中的方法分别测定SAAP-148抗菌肽衍生物SAAP1-SAAP12的溶血能力(对红细胞溶破作用能力)。
SAAP-148抗菌肽及SAAP-148抗菌肽衍生物的红细胞溶血率检测结果如表5所示。
表5、SAAP-148抗菌肽及其衍生物的红细胞的溶血率
结果表明：相较SAAP-148抗菌肽，本发明的SAAP-148抗菌肽衍生物中除了SAAP13对红细胞溶破能力增强外，其余均有不同程度的降低，其中，抗菌肽衍生物SAAP7对红细胞溶破能力降低尤为显著。在SAAP-148抗菌肽或SAAP-148抗菌肽衍生物浓度为100μM时，SAAP-148抗菌肽的溶血率几乎达到100％，而此时多肽SAAP7的溶血率仅为10.11％。说明SAAP-148对应位置的氨基酸替换成Lys残基有助于降低其对红细胞的溶血作用。
2、SAAP-148抗菌肽衍生物的杀菌活性测定
供试抗菌肽衍生物：实施例1制备的SAAP-148抗菌肽衍生物SAAP1-SAAP12，以SAAP-148抗菌肽作为对照。
供试菌种：大肠杆菌(Escherichia coli，购买自中国普通微生物保藏管理中心，ATCC编号为1.8732)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，购买自中国普通微生物保藏管理中心，ATCC编号为1.8721)、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa，购买自中国普通微生物保藏管理中心，ATCC编号为1.2421)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis，购买自中国普通微生物保藏管理中心，ATCC编号为1.4260)和肺炎克雷伯杆菌(Klebsiellapneumoniae，购买自中国普通微生物保藏管理中心，ATCC编号为1.1736)。
按微量稀释法用96孔板测定SAAP-148抗菌肽衍生物SAAP1-SAAP12对不同细菌的最小抑菌浓度和最小溶血浓度，并计算治疗指数。具体步骤同步骤一的2中的方法。结果如表6所示。
表6、SAAP-148抗菌肽及其衍生物对五种细菌的最小抑菌浓度(μM)及其治疗指数
结果表明：SAAP-148抗菌肽及SAAP-148抗菌肽衍生物对金黄色葡萄球菌的杀菌作用都比较弱。SAAP-148抗菌肽的治疗指数为0.11，除了抗菌肽衍生物SAAP10-SAAP13的治疗指数低于SAAP-148外，其余SAAP-148抗菌肽衍生物的治疗指数均较SAAP-148增大，其中SAAP4的治疗指数为9.19，较SAAP-148提高了83倍。本发明合成的SAAP-148抗菌肽衍生物SAAP1-SAAP13对多种细菌具有广谱的杀伤效应，可以用于治疗对抗生素耐药菌感染引起的疾病。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
序列表
<110>中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
<120>高效低毒的抗菌肽衍生物及其在制备抗细菌感染药物中的应用
<160>24
<170>PatentIn version 3.5
<210>1
<211>17
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>1
Lys Phe Lys Arg Ile Val Gln Arg Ile Lys Asp Phe Leu Arg Asn Leu
1 5 10 15
Val
<210>2
<211>17
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>2
Gly Lys Lys Arg Ile Val Gln Arg Ile Lys Asp Phe Leu Arg Asn Leu
1 5 10 15
Val
<210>3
<211>17
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>3
Gly Phe Lys Arg Lys Val Gln Arg Ile Lys Asp Phe Leu Arg Asn Leu
1 5 10 15
Val
<210>4
<211>17
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>4
Gly Phe Lys Arg Ile Lys Gln Arg Ile Lys Asp Phe Leu Arg Asn Leu
1 5 10 15
Val
<210>5
<211>17
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>5
Gly Phe Lys Arg Ile Val Gln Arg Lys Lys Asp Phe Leu Arg Asn Leu
1 5 10 15
Val
<210>6
<211>17
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>6
Gly Phe Lys Arg Ile Val Gln Arg Ile Lys Asp Lys Leu Arg Asn Leu
1 5 10 15
Val
<210>7
<211>17
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>7
Gly Phe Lys Arg Ile Val Gln Arg Ile Lys Asp Phe Lys Arg Asn Leu
1 5 10 15
Val
<210>8
<211>17
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>8
Gly Phe Lys Arg Ile Val Gln Arg Ile Lys Asp Phe Leu Arg Asn Lys
1 5 10 15
Val
<210>9
<211>17
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>9
Gly Phe Lys Arg Ile Val Gln Arg Ile Lys Asp Phe Leu Arg Asn Leu
1 5 10 15
Lys
<210>10
<211>17
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>10
Gly Phe Lys Arg Ile Val Lys Arg Ile Lys Asp Phe Leu Arg Asn Leu
1 5 10 15
Val
<210>11
<211>17
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>11
Gly Phe Lys Arg Ile Val Gln Arg Ile Lys Lys Phe Leu Arg Asn Leu
1 5 10 15
Val
<210>12
<211>17
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>12
Gly Phe Lys Arg Ile Val Gln Arg Ile Lys Asp Phe Leu Arg Lys Leu
1 5 10 15
Val
<210>13
<211>24
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>13
Lys Lys Arg Val Trp Lys Arg Val Phe Lys Leu Leu Lys Arg Tyr Trp
1 5 10 15
Arg Gln Leu Lys Lys Pro Val Arg
20
<210>14
<211>24
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>14
Leu Lys Arg Lys Trp Lys Arg Val Phe Lys Leu Leu Lys Arg Tyr Trp
1 5 10 15
Arg Gln Leu Lys Lys Pro Val Arg
20
<210>15
<211>24
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>15
Leu Lys Arg Val Lys Lys Arg Val Phe Lys Leu Leu Lys Arg Tyr Trp
1 5 10 15
Arg Gln Leu Lys Lys Pro Val Arg
20
<210>16
<211>24
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>16
Leu Lys Arg Val Trp Lys Arg Lys Phe Lys Leu Leu Lys Arg Tyr Trp
1 5 10 15
Arg Gln Leu Lys Lys Pro Val Arg
20
<210>17
<211>24
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>17
Leu Lys Arg Val Trp Lys Arg Val Lys Lys Leu Leu Lys Arg Tyr Trp
1 5 10 15
Arg Gln Leu Lys Lys Pro Val Arg
20
<210>18
<211>24
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>18
Leu Lys Arg Val Trp Lys Arg Val Phe Lys Lys Leu Lys Arg Tyr Trp
1 5 10 15
Arg Gln Leu Lys Lys Pro Val Arg
20
<210>19
<211>24
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>19
Leu Lys Arg Val Trp Lys Arg Val Phe Lys Leu Lys Lys Arg Tyr Trp
1 5 10 15
Arg Gln Leu Lys Lys Pro Val Arg
20
<210>20
<211>24
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>20
Leu Lys Arg Val Trp Lys Arg Val Phe Lys Leu Leu Lys Arg Lys Trp
1 5 10 15
Arg Gln Leu Lys Lys Pro Val Arg
20
<210>21
<211>24
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>21
Leu Lys Arg Val Trp Lys Arg Val Phe Lys Leu Leu Lys Arg Tyr Lys
1 5 10 15
Arg Gln Leu Lys Lys Pro Val Arg
20
<210>22
<211>24
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>22
Leu Lys Arg Val Trp Lys Arg Val Phe Lys Leu Leu Lys Arg Tyr Trp
1 5 10 15
Arg Lys Leu Lys Lys Pro Val Arg
20
<210>23
<211>24
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>23
Leu Lys Arg Val Trp Lys Arg Val Phe Lys Leu Leu Lys Arg Tyr Trp
1 5 10 15
Arg Gln Lys Lys Lys Pro Val Arg
20
<210>24
<211>24
<212>PRT
<213>Artificial Sequence
<400>24
Leu Lys Arg Val Trp Lys Arg Val Phe Lys Leu Leu Lys Arg Tyr Trp
1 5 10 15
Arg Gln Leu Lys Lys Lys Val Arg
20
Claims (10)
1.一种多肽，是将抗菌肽中除赖氨酸和精氨酸外的任意一个氨基酸残基替换为赖氨酸后得到的多肽；所述抗菌肽为GF-17抗菌肽或SAAP-148抗菌肽。
2.根据权利要求1所述的多肽，其特征在于：当所述抗菌肽为GF-17抗菌肽时，
所述多肽为如下A1)-A12)中的任一种：
A1)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第1位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A2)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第2位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A3)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第5位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A4)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第6位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A5)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第9位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A6)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第12位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A7)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第13位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A8)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第16位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A9)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第17位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A10)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第7位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A11)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第11位氨基酸残基替换为赖氨酸；
A12)将GF-17抗菌肽氨基酸序列的第15位氨基酸残基替换为赖氨酸。
3.根据权利要求1或2所述的多肽，其特征在于：所述多肽为如下a1)-a12)中的任一种：
a1)序列表中序列1所示的多肽；
a2)序列表中序列2所示的多肽；
a3)序列表中序列3所示的多肽；
a4)序列表中序列4所示的多肽；
a5)序列表中序列5所示的多肽；
a6)序列表中序列6所示的多肽；
a7)序列表中序列7所示的多肽；
a8)序列表中序列8所示的多肽；
a9)序列表中序列9所示的多肽；
a10)序列表中序列10所示的多肽；
a11)序列表中序列11所示的多肽；
a12)序列表中序列12所示的多肽。
4.根据权利要求1所述的多肽，其特征在于：当所述抗菌肽为SAAP-148抗菌肽时，所述多肽为如下B1)-B12)中的任一种：
B1)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第1位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B2)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第4位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B3)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第5位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B4)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第8位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B5)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第9位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B6)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第11位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B7)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第12位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B8)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第15位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B9)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第16位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B10)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第18位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B11)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第19位氨基酸残基替换为赖氨酸；
B12)将SAAP-148抗菌肽氨基酸序列的第22位氨基酸残基替换为赖氨酸。
5.根据权利要求1或4所述的多肽，其特征在于：所述多肽为如下b1)-b12)中的任一种：
b1)序列表中序列13所示的多肽；
b2)序列表中序列14所示的多肽；
b3)序列表中序列15所示的多肽；
b4)序列表中序列16所示的多肽；
b5)序列表中序列17所示的多肽；
b6)序列表中序列18所示的多肽；
b7)序列表中序列19所示的多肽；
b8)序列表中序列20所示的多肽；
b9)序列表中序列21所示的多肽；
b10)序列表中序列22所示的多肽；
b11)序列表中序列23所示的多肽；
b12)序列表中序列24所示的多肽。
6.与权利要求1-5中任一所述多肽相关的生物材料，为下述C1)至C8)中的任一种：
C1)编码权利要求1-5中任一所述多肽的核酸分子；
C2)含有C1)所述核酸分子的表达盒；
C3)含有C1)所述核酸分子的重组载体；
C4)含有C2)所述表达盒的重组载体；
C5)含有C1)所述核酸分子的重组微生物；
C6)含有C2)所述表达盒的重组微生物；
C7)含有C3)所述重组载体的重组微生物；
C8)含有C4)所述重组载体的重组微生物。
7.权利要求1-5任一所述的多肽或权利要求6所述的生物材料在如下S1)-S4)中任一种中的应用：
S1)制备预防和/或治疗细菌感染引起的疾病的产品；
S2)预防和/或治疗细菌感染引起的疾病；
S3)制备抑菌或杀菌或抗菌的产品；
S4)抑菌或杀菌或抗菌。
8.如下T1)或T2)所述的方法：
T1)一种降低抗菌肽对真核细胞毒性的方法，包括如下步骤：将抗菌肽中除赖氨酸和精氨酸外的任意一个氨基酸残基替换为赖氨酸，得到抗菌肽衍生物；所述抗菌肽衍生物对真核细胞的毒性低于所述抗菌肽；
T2)一种提高抗菌肽杀菌功效的方法，包括如下步骤：将抗菌肽中除赖氨酸和精氨酸外的任意一个氨基酸残基替换为赖氨酸，得到抗菌肽衍生物；所述抗菌肽衍生物对细菌的杀菌功效高于所述抗菌肽；
所述抗菌肽为GF-17抗菌肽或SAAP-148抗菌肽。
9.一种产品，其活性成分为权利要求1-5任一所述的多肽或权利要求6所述的生物材料；
所述产品的功能为如下X1)或X2)：
X1)预防和/或治疗细菌感染引起的疾病；
X2)抑菌或杀菌或抗菌。
10.根据权利要求7所述的应用或权利要求8所述的方法或权利要求9所述的产品，其特征在于：所述细菌包括革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010811230.1A CN111892646B (zh) | 2020-08-13 | 2020-08-13 | 抗菌肽衍生物及其在制备抗细菌感染药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010811230.1A CN111892646B (zh) | 2020-08-13 | 2020-08-13 | 抗菌肽衍生物及其在制备抗细菌感染药物中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111892646A true CN111892646A (zh) | 2020-11-06 |
| CN111892646B CN111892646B (zh) | 2023-05-02 |
Family
ID=73230188
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010811230.1A Active CN111892646B (zh) | 2020-08-13 | 2020-08-13 | 抗菌肽衍生物及其在制备抗细菌感染药物中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111892646B (zh) |
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112409457A (zh) * | 2020-11-27 | 2021-02-26 | 常州大学 | 一类抗细菌多肽及其应用 |
| CN112724222A (zh) * | 2021-02-22 | 2021-04-30 | 青岛森盛生物医药科技有限公司 | 一种鱼源抗菌肽 |
| CN112724202A (zh) * | 2021-02-08 | 2021-04-30 | 中国海洋大学 | 一种抗菌肽及其应用 |
| CN112724201A (zh) * | 2021-02-08 | 2021-04-30 | 中国海洋大学 | 一种抗菌肽及其应用 |
| CN113912680A (zh) * | 2021-11-08 | 2022-01-11 | 中国药科大学 | 具有高抗菌活性的抗菌肽及其应用 |
| CN114773435A (zh) * | 2022-04-06 | 2022-07-22 | 上海交通大学 | 一种蚯蚓抗菌肽及其在广谱抗菌方面的应用 |
| CN114907447A (zh) * | 2022-02-23 | 2022-08-16 | 湖南大学 | 一种抗菌肽 |
| CN116874564A (zh) * | 2023-08-24 | 2023-10-13 | 东北农业大学 | 人源广谱抗菌肽及其应用 |
| CN117567590A (zh) * | 2023-04-23 | 2024-02-20 | 山东第一医科大学(山东省医学科学院) | 一种提高抗耐药菌活性的订书肽及其制备方法和应用 |
| CN117777245A (zh) * | 2023-06-13 | 2024-03-29 | 红河学院 | 一种虫草素-抗菌肽偶合物及其合成方法和应用 |
| CN118994420A (zh) * | 2024-10-23 | 2024-11-22 | 山东大学第二医院 | 一种具有杀伤耐药菌作用的抗菌肽及其应用 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1049166A (zh) * | 1989-07-07 | 1991-02-13 | 斯克里普斯临床学与研究基金会 | Magainin肽的取代类似物 |
| WO2011049914A2 (en) * | 2009-10-22 | 2011-04-28 | Board Of Regents Of The University Of Nebraska | Anti-hiv peptides and methods of use thereof |
| US20150259382A1 (en) * | 2011-11-21 | 2015-09-17 | Board Of Regents Of The University Of Nebraska | Anti-Microbial Peptides and Methods of Use Thereof |
| CN105859867A (zh) * | 2016-05-30 | 2016-08-17 | 黄石市中心医院 | 一种人源抗菌肽ll-37突变体及其应用 |
| CN108570102A (zh) * | 2018-05-07 | 2018-09-25 | 中国海洋大学 | 一种具有抗菌活性的多肽Pv26-3 |
-
2020
- 2020-08-13 CN CN202010811230.1A patent/CN111892646B/zh active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1049166A (zh) * | 1989-07-07 | 1991-02-13 | 斯克里普斯临床学与研究基金会 | Magainin肽的取代类似物 |
| WO2011049914A2 (en) * | 2009-10-22 | 2011-04-28 | Board Of Regents Of The University Of Nebraska | Anti-hiv peptides and methods of use thereof |
| US20150259382A1 (en) * | 2011-11-21 | 2015-09-17 | Board Of Regents Of The University Of Nebraska | Anti-Microbial Peptides and Methods of Use Thereof |
| CN105859867A (zh) * | 2016-05-30 | 2016-08-17 | 黄石市中心医院 | 一种人源抗菌肽ll-37突变体及其应用 |
| CN108570102A (zh) * | 2018-05-07 | 2018-09-25 | 中国海洋大学 | 一种具有抗菌活性的多肽Pv26-3 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| ANNA DE BREIJ等: "The antimicrobial peptide SAAP-148 combats drug-resistant bacteria and biofilms", 《SCI. TRANSL. MED.》 * |
| GUANGSHUN WANG等: "Design of Antimicrobial Peptides: Progress Made with Human Cathelicidin LL-37", 《ANTIMICROBIAL PEPTIDES》 * |
| XIUQING WANG等: "Amino Acid Composition Determines Peptide Activity Spectrum and Hot-Spot-Based Design of Merecidin", 《ADV. BIOSYS.》 * |
| 冯兴军 等: "鸭抗菌肽Cathelicidin的衍生物设计及抑菌机制研究", 《东北农业大学学报》 * |
| 张士坤: "电荷对抗菌肽与生物膜相互作用的影响", 《中国博士学位论文全文数据库（电子期刊）医药卫生科技辑》 * |
Cited By (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112409457A (zh) * | 2020-11-27 | 2021-02-26 | 常州大学 | 一类抗细菌多肽及其应用 |
| CN112724202A (zh) * | 2021-02-08 | 2021-04-30 | 中国海洋大学 | 一种抗菌肽及其应用 |
| CN112724201A (zh) * | 2021-02-08 | 2021-04-30 | 中国海洋大学 | 一种抗菌肽及其应用 |
| CN112724201B (zh) * | 2021-02-08 | 2022-07-26 | 中国海洋大学 | 一种抗菌肽及其应用 |
| CN112724222A (zh) * | 2021-02-22 | 2021-04-30 | 青岛森盛生物医药科技有限公司 | 一种鱼源抗菌肽 |
| CN113912680A (zh) * | 2021-11-08 | 2022-01-11 | 中国药科大学 | 具有高抗菌活性的抗菌肽及其应用 |
| CN114907447A (zh) * | 2022-02-23 | 2022-08-16 | 湖南大学 | 一种抗菌肽 |
| CN114773435A (zh) * | 2022-04-06 | 2022-07-22 | 上海交通大学 | 一种蚯蚓抗菌肽及其在广谱抗菌方面的应用 |
| CN114773435B (zh) * | 2022-04-06 | 2023-10-31 | 上海交通大学 | 一种蚯蚓抗菌肽及其在广谱抗菌方面的应用 |
| CN117567590A (zh) * | 2023-04-23 | 2024-02-20 | 山东第一医科大学(山东省医学科学院) | 一种提高抗耐药菌活性的订书肽及其制备方法和应用 |
| CN117567590B (zh) * | 2023-04-23 | 2024-04-12 | 山东第一医科大学(山东省医学科学院) | 一种提高抗耐药菌活性的订书肽及其制备方法和应用 |
| CN117777245A (zh) * | 2023-06-13 | 2024-03-29 | 红河学院 | 一种虫草素-抗菌肽偶合物及其合成方法和应用 |
| CN117777245B (zh) * | 2023-06-13 | 2024-06-07 | 红河学院 | 一种虫草素-抗菌肽偶合物及其合成方法和应用 |
| CN116874564B (zh) * | 2023-08-24 | 2024-01-26 | 东北农业大学 | 人源广谱抗菌肽及其应用 |
| CN116874564A (zh) * | 2023-08-24 | 2023-10-13 | 东北农业大学 | 人源广谱抗菌肽及其应用 |
| CN118994420A (zh) * | 2024-10-23 | 2024-11-22 | 山东大学第二医院 | 一种具有杀伤耐药菌作用的抗菌肽及其应用 |
| CN118994420B (zh) * | 2024-10-23 | 2025-01-24 | 山东大学第二医院 | 一种具有杀伤耐药菌作用的抗菌肽及其应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN111892646B (zh) | 2023-05-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111892646B (zh) | 抗菌肽衍生物及其在制备抗细菌感染药物中的应用 | |
| US5945507A (en) | Antimicrobial peptides | |
| Tencza et al. | Lentivirus-derived antimicrobial peptides: increased potency by sequence engineering and dimerization | |
| Tencza et al. | Novel antimicrobial peptides derived from human immunodeficiency virus type 1 and other lentivirus transmembrane proteins | |
| EP3274472B1 (en) | Antimicrobial peptides and methods of use thereof | |
| CN114057835A (zh) | 一种抗菌肽类似物及其制备方法与应用 | |
| US20110288007A1 (en) | Biocidal fusion peptide comprising ll-37 | |
| CN107022001A (zh) | 一种分离的母乳内源性抗菌多肽及其应用 | |
| CN107903308B (zh) | 一种抗菌肽kk26及其应用 | |
| JP6823789B2 (ja) | 新規な抗菌ペプチド、その変異体及び使用 | |
| CN114853865A (zh) | 一种改造体抗菌肽dsNCM1及其应用 | |
| CN104163861B (zh) | 一种爬行动物抗菌肽Alligatorin5及其应用 | |
| CN107266546B (zh) | 抗菌肽HlDFS1及其应用 | |
| CN104910266B (zh) | 一种武夷湍蛙抗菌肽及其编码基因和应用 | |
| CN113480630B (zh) | 一种长翼蝠来源抗菌肽ms-cath及其应用 | |
| CN113527461B (zh) | 一种马铁菊头蝠来源抗菌肽rf-cath1及其应用 | |
| CN115043924A (zh) | 一种改造体抗菌肽及其应用 | |
| CN115043925A (zh) | 一种改造体抗菌肽oNCM及其应用 | |
| CN110317253B (zh) | 一种鸡源抗菌肽及其制备方法 | |
| CN116406282A (zh) | 具有针对多药耐药性病原体的抗微生物活性的肽实体 | |
| CN108409833B (zh) | 一种新型杀念珠菌多肽fcp1及其制备方法 | |
| CN118005741B (zh) | 一种抗菌多肽ap16a及其制备方法和应用 | |
| CN107827988B (zh) | 嵌合穿膜抗菌肽t11n2及其应用 | |
| CA2047317A1 (en) | Amphiphilic peptide compositions and analogues thereof | |
| CN109553690B (zh) | 一种抗菌肽Cec4的杂合肽或其盐及应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |