CN111887155A - 一种提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法 - Google Patents

一种提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，包括：（1）采集蔷薇属植物幼嫩枝条，除去叶片和花朵，用洗衣粉溶液浸泡15~20min，再用自来水冲洗20~30s并浸泡5~10min，用无菌水反复冲洗3~5次，沥干备用；（2）将得到的幼苗枝条置于1~5℃的风冷箱中冷藏2~4天取出，灭菌处理后，用无菌滤纸吸干枝条表面水分，得无菌枝条；（3）将无菌枝条剪成多个长度为0.5~1cm的小段，置于愈伤诱导培养基中培养至切口边缘形成白色疏松的愈伤组织；（4）将愈伤组织分成0.1~0.5cm大小的小块，置于成苗培养基中培养，至外植体上出现欲分化的芽点和已分化的幼苗，继续培养至幼苗株高为1~3cm；（5）将幼苗转入生根培养基培养至根系长度为1~3cm，最后移栽。

Description

一种提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法
技术领域
本发明属于园艺作物育苗技术领域，具体涉及一种提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法。
背景技术
蔷薇属植物多为直立、蔓延或攀援灌木，多数被有皮刺、针刺或刺毛，稀无刺，有毛、无毛或有腺毛。叶互生，奇数羽状复叶，稀单叶、叶边缘有锯齿；托叶贴生或着生于叶柄上，稀无托叶。蔷薇多数是世界著名的观赏植物，全都为灌木，花瓣5裂或重瓣，花有香气，枝、茎常有刺；羽状复叶极稀单叶；雌蕊多数；花托成熟时肉质而有色泽；瘦果，生在杯状或坛状花托里面。广泛分布在亚、欧、北非、北美各洲寒温带至亚热带地区。有200多种，中国产91种，月季、玫瑰和蔷薇为其代表植物。
关于植物快速成苗的方法现有技术中也有相关公开，例如，申请号为CN201710926732.7的中国发明专利公开了一种提高大麦组培快速成苗的方法，步骤如下：1）选择直径大小为1-3cm的大麦幼胚，分别用酒精和次氯酸钠表面消毒，降低杂菌污染率；2）准确分离幼胚胚芽鞘，对盾片进行二次处理，诱导愈伤组织快速发生；3）根据幼胚的大小调整预培养和农杆菌侵染的时间，预防菌液过量；4）采用弱光遮蔽法提高绿点分化率和成苗率；5）调整愈伤诱导培养基、分化培养基和生根培养基的抗生素配比和使用时间，诱导愈伤组织快速成苗。本发明为大麦幼胚的组培方法，愈伤发生快，胚性愈伤多，可操作性强，绿点分化和成苗率高，不限于材料基因型的限制；建立的大麦幼胚转化再生体系，可为探索大麦遗传改良和细胞工程育种研究提供技术支撑。
又如，申请号为CN201810879671.8的中国发明专利公开了一种铁皮石斛快速成苗的方法，所述步骤依次包括1）取材与消毒；2）诱导培养，3）增殖分化培养将诱导形成的原球茎转入到增殖分化培养基中，同时部分原球茎开始分化出芽点并长出1～2片小叶，原球茎的增殖与芽分化同时进行；温度26℃，光照度2200~2500lx，光照时间为13h/d；4）生根培养；5）出瓶苗的过渡管理。本发明中通过各步骤的培育，在省去了炼苗环节，大大缩短了培育周期，节省成本的同时，而且保证了成苗的存活率。
基于上述现有技术的启示，本发明人基于从事此类产品设计制造多年丰富的实务经验及专业知识，并配合学理的运用，积极加以研究创新，以期创设一种提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，能够有效改进现有技术。本发明人经过不断的研究、设计，并经反复试作及改进后，终于创设出确具实用价值的本发明。
发明内容
本发明的主要目的在于克服现有技术中的不足，提供一种提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，它可以明显提高植株的存活率，且具有繁殖快、可规模化种植等优点。
本发明的目的及解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。
本发明提供了一种提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，所述方法包括以下步骤：
（1）采集蔷薇属植物幼嫩枝条，除去叶片和花朵，用洗衣粉溶液浸泡15~20min，再用自来水冲洗20~30s并浸泡5~10min，用无菌水反复冲洗3~5次，沥干备用；
（2）将上述步骤（1）中得到的幼苗枝条置于1~5℃的风冷箱中冷藏2~4天取出，灭菌处理后，用无菌滤纸吸干枝条表面水分，得无菌枝条；
（3）将上述得到的无菌枝条剪成多个长度为0.5~1cm的小段，置于愈伤诱导培养基中培养至切口边缘形成白色疏松的愈伤组织；
（4）将诱导获得的愈伤组织分成0.1~0.5cm大小的小块，置于成苗培养基中培养，至外植体上出现欲分化的芽点和已分化的幼苗，继续培养至幼苗株高为1~3cm；
（5）将上述株高为1~3cm的幼苗转入生根培养基培养至根系长度为1~3cm，最后移栽。
前述的提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，其中，所述步骤（1）中所述蔷薇属植物包括玫瑰、月季和蔷薇。
前述的提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，其中，所述步骤（2）中所述灭菌处理步骤为：先在无菌环境中用乙醇浸泡30~40s，然后无菌水冲洗5~10s，再放入氯化汞溶液中搅拌2~4min，最后置于甲醛溶液中浸泡10~20s，捞出后用无菌水冲洗5~6次。
前述的提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，其中，所述步骤（3）中所述愈伤诱导培养基成分为：B5+1~2mg/L 2,4-D+30g/L蔗糖+0.1mg/L Gln+0.2mg/L水解乳蛋白，琼脂0.7~1.0%，pH5.8-6.0。
前述的提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，其中，所述步骤（3）中所述培养条件为：温度28~30℃培养，光照强度1000~1200lux。
前述的提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，其中，所述步骤（4）中所述成苗培养基成分为：MS+蔗糖40000mg/L+KT 0.5~1.5mg/L+NAA 0.5~1.5mg/L+IAA 1~2mg/L+琼脂或卡拉胶或明胶6000~8000mg/L。
前述的提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，其中，所述步骤（4）中所述培养条件为：温度26~30℃，光照强度2000~2500lux。
前述的提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，其中，所述步骤（5）中所述生根培养基成分为：1/2MS+蔗糖40000mg/L+NAA 0.5~1.5mg/L+IBA 1.0~2.5mg/L。
前述的提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，其中，所述步骤（5）中所述培养条件为：温度22~25℃，光照强度1500lux。借由上述技术方案，本发明至少具有下列优点：本发明提供了一种提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，其具有正确的消毒时间和材料的处理方法；各个步骤中培养基成分构成以及培养温度和光照强度的设置提高了萌发率，使得最终移栽后幼苗存活率最高可达100%。本发明的方法时间缩短，成苗移植后成活率高，病虫害少，降低了大量成本，幼苗健壮挺拔，长势良好，整齐一致。
综上所述，本发明特殊的提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法能够保证植株的高存活率且培养周期短。其具有上述诸多的优点及实用价值，并在同类产品和方法中未见有类似的设计公开发表或使用而确属创新，其不论在方法上或功能上皆有较大的改进，在技术上有较大的进步，并产生了好用及实用的效果，且较现有的产品具有增进的多项功效，从而更加适于实用，而具有产业的广泛利用价值，诚为一新颖、进步、实用的新设计。
上述说明仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技术手段，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本发明的较佳实施例详细说明如后。
具体实施方式
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
采集蔷薇的幼嫩枝条，除去叶片和花朵，用洗衣粉溶液浸泡20min，再用自来水冲洗20s并浸泡5min，用无菌水反复冲洗5次，自然条件下沥干备用。将得到的幼苗枝条置于5℃的风冷箱中冷藏3天后取出，先在无菌环境中用乙醇浸泡30s，然后无菌水冲洗8s，再放入氯化汞溶液中搅拌3min，最后置于甲醛溶液中浸泡20s，捞出后用无菌水冲洗5次后，用无菌滤纸吸干枝条表面水分，得无菌枝条。将上述得到的无菌枝条剪成多个长度为0.5~1cm的小段，置于愈伤诱导培养基中，培养基成分为：B5+2mg/L 2,4-D+30g/L蔗糖+0.1mg/L Gln+0.2mg/L水解乳蛋白，琼脂1.0%，pH6.0，并在30℃、光照强度为1200lux的条件下培养，培养至切口边缘形成白色疏松的愈伤组织。将诱导获得的愈伤组织分成0.1~0.5cm大小的小块，置于成苗培养基中，培养基成分为：MS+蔗糖40000mg/L+KT 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L+IAA 2mg/L+琼脂7000mg/L，并在28℃，光照强度为2300lux的条件下培养，至外植体上出现欲分化的芽点和已分化的幼苗，继续培养至幼苗株高为1~3cm。将上述株高为1~3cm的幼苗转入生根培养基中，培养基成分为：1/2MS+蔗糖40000mg/L+NAA 0.8mg/L+IBA 1.5mg/L，并在25℃、光照强度为1500lux的条件下培养至根系长度为1~3cm，最后移栽。移栽2个月后统计幼苗存活率，为100%。
实施例2
采集月季的幼嫩枝条，除去叶片和花朵，用洗衣粉溶液浸泡20min，再用自来水冲洗25s并浸泡10min，用无菌水反复冲洗3次，自然条件下沥干备用。将得到的幼苗枝条置于3℃的风冷箱中冷藏4天后取出，先在无菌环境中用乙醇浸泡30s，然后无菌水冲洗10s，再放入氯化汞溶液中搅拌4min，最后置于甲醛溶液中浸泡20s，捞出后用无菌水冲洗5次后，用无菌滤纸吸干枝条表面水分，得无菌枝条。将上述得到的无菌枝条剪成多个长度为0.5~1cm的小段，置于愈伤诱导培养基中，培养基成分为：B5+1mg/L 2,4-D+30g/L蔗糖+0.1mg/L Gln+0.2mg/L水解乳蛋白，琼脂0.7%，pH6.0，并在30℃、光照强度为1000lux的条件下培养，培养至切口边缘形成白色疏松的愈伤组织。将诱导获得的愈伤组织分成0.1~0.5cm大小的小块，置于成苗培养基中，培养基成分为：MS+蔗糖40000mg/L+KT 1.0mg/L+NAA 1.5mg/L+IAA2mg/L+琼脂8000mg/L，并在28℃，光照强度为2000lux的条件下培养，至外植体上出现欲分化的芽点和已分化的幼苗，继续培养至幼苗株高为1~3cm。将上述株高为1~3cm的幼苗转入生根培养基中，培养基成分为：1/2MS+蔗糖40000mg/L+NAA 1.5mg/L+IBA 2.5mg/L，并在23℃、光照强度为1500lux的条件下培养至根系长度为1~3cm，最后移栽。移栽2个月后统计幼苗存活率，为98%。
实施例3
采集蔷薇的幼嫩枝条，除去叶片和花朵，用洗衣粉溶液浸泡15min，再用自来水冲洗20s并浸泡8min，用无菌水反复冲洗5次，自然条件下沥干备用。将得到的幼苗枝条置于1℃的风冷箱中冷藏2天后取出，先在无菌环境中用乙醇浸泡30s，然后无菌水冲洗5s，再放入氯化汞溶液中搅拌2min，最后置于甲醛溶液中浸泡10s，捞出后用无菌水冲洗5次后，用无菌滤纸吸干枝条表面水分，得无菌枝条。将上述得到的无菌枝条剪成多个长度为0.5~1cm的小段，置于愈伤诱导培养基中，培养基成分为：B5+2mg/L 2,4-D+30g/L蔗糖+0.1mg/L Gln+0.2mg/L水解乳蛋白，琼脂0.7%，pH5.8，并在28℃、光照强度为1200lux的条件下培养，培养至切口边缘形成白色疏松的愈伤组织。将诱导获得的愈伤组织分成0.1~0.5cm大小的小块，置于成苗培养基中，培养基成分为：MS+蔗糖40000mg/L+KT 1.5mg/L+NAA 1.0mg/L+IAA 1mg/L+卡拉胶6000mg/L，并在30℃，光照强度为2300lux的条件下培养，至外植体上出现欲分化的芽点和已分化的幼苗，继续培养至幼苗株高为1~3cm。将上述株高为1~3cm的幼苗转入生根培养基中，培养基成分为：1/2MS+蔗糖40000mg/L+NAA 0.8mg/L+IBA 1.5mg/L，并在25℃、光照强度为1500lux的条件下培养至根系长度为1~3cm，最后移栽。移栽2个月后统计幼苗存活率，为99%。
实施例4
采集玫瑰的幼嫩枝条，除去叶片和花朵，用洗衣粉溶液浸泡20min，再用自来水冲洗25s并浸泡10min，用无菌水反复冲洗3次，自然条件下沥干备用。将得到的幼苗枝条置于3℃的风冷箱中冷藏4天后取出，先在无菌环境中用乙醇浸泡30s，然后无菌水冲洗10s，再放入氯化汞溶液中搅拌4min，最后置于甲醛溶液中浸泡20s，捞出后用无菌水冲洗5次后，用无菌滤纸吸干枝条表面水分，得无菌枝条。将上述得到的无菌枝条剪成多个长度为0.5~1cm的小段，置于愈伤诱导培养基中，培养基成分为：B5+2mg/L 2,4-D+30g/L蔗糖+0.1mg/L Gln+0.2mg/L水解乳蛋白，琼脂0.8%，pH6.0，并在30℃、光照强度为1100lux的条件下培养，培养至切口边缘形成白色疏松的愈伤组织。将诱导获得的愈伤组织分成0.1~0.5cm大小的小块，置于成苗培养基中，培养基成分为：MS+蔗糖40000mg/L+KT 1.5mg/L+NAA 1.0mg/L+IAA1.5mg/L+明胶7000mg/L，并在28℃，光照强度为2500lux的条件下培养，至外植体上出现欲分化的芽点和已分化的幼苗，继续培养至幼苗株高为1~3cm。将上述株高为1~3cm的幼苗转入生根培养基中，培养基成分为：1/2MS+蔗糖40000mg/L+NAA 1.0mg/L+IBA 1.5mg/L，并在25℃、光照强度为1500lux的条件下培养至根系长度为1~3cm，最后移栽。移栽2个月后统计幼苗存活率，为96%。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，虽然本发明已以较佳实施例揭露如上，然而并非用以限定本发明，任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本发明技术方案范围内，当可利用上述揭示的方法及技术内容作出些许的更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。

Claims (9)

1.一种提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，所述方法包括以下步骤：
（1）采集蔷薇属植物幼嫩枝条，除去叶片和花朵，用洗衣粉溶液浸泡15~20min，再用自来水冲洗20~30s并浸泡5~10min，用无菌水反复冲洗3~5次，沥干备用；
（2）将上述步骤（1）中得到的幼苗枝条置于1~5℃的风冷箱中冷藏2~4天取出，灭菌处理后，用无菌滤纸吸干枝条表面水分，得无菌枝条；
（3）将上述得到的无菌枝条剪成多个长度为0.5~1cm的小段，置于愈伤诱导培养基中培养至切口边缘形成白色疏松的愈伤组织；
（4）将诱导获得的愈伤组织分成0.1~0.5cm大小的小块，置于成苗培养基中培养，至外植体上出现欲分化的芽点和已分化的幼苗，继续培养至幼苗株高为1~3cm；
（5）将上述株高为1~3cm的幼苗转入生根培养基培养至根系长度为1~3cm，最后移栽。
2.根据权利要求1所述的提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，其中，所述步骤（1）中所述蔷薇属植物包括玫瑰、月季和蔷薇。
3.根据权利要求1所述的提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，其中，所述步骤（2）中所述灭菌处理步骤为：先在无菌环境中用乙醇浸泡30~40s，然后无菌水冲洗5~10s，再放入氯化汞溶液中搅拌2~4min，最后置于甲醛溶液中浸泡10~20s，捞出后用无菌水冲洗5~6次。
4.根据权利要求1所述的提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，其中，所述步骤（3）中所述愈伤诱导培养基成分为：B5+1~2mg/L 2,4-D+30g/L蔗糖+0.1mg/L Gln+0.2mg/L水解乳蛋白，琼脂0.7~1.0%，pH5.8-6.0。
5.根据权利要求1所述的提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，其中，所述步骤（3）中所述培养条件为：温度28~30℃培养，光照强度1000~1200lux。
6.根据权利要求1所述的提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，其中，所述步骤（4）中所述成苗培养基成分为：MS+蔗糖40000mg/L+KT 0.5~1.5mg/L+NAA 0.5~1.5mg/L+IAA 1~2mg/L+琼脂或卡拉胶或明胶6000~8000mg/L。
7.根据权利要求1所述的提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，其中，所述步骤（4）中所述培养条件为：温度26~30℃，光照强度2000~2500lux。
8.根据权利要求1所述的提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，其中，所述步骤（5）中所述生根培养基成分为：1/2MS+蔗糖40000mg/L+NAA 0.5~1.5mg/L+IBA 1.0~2.5mg/L。
9.根据权利要求1所述的提高蔷薇属植物高效快速成苗的方法，其中，所述步骤（5）中所述培养条件为：温度22~25℃，光照强度1500lux。
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