CN111879936A - 检测食用油中呕吐毒素的酶联免疫试剂盒及其检测方法 - Google Patents

检测食用油中呕吐毒素的酶联免疫试剂盒及其检测方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111879936A
CN111879936A CN201910365553.XA CN201910365553A CN111879936A CN 111879936 A CN111879936 A CN 111879936A CN 201910365553 A CN201910365553 A CN 201910365553A CN 111879936 A CN111879936 A CN 111879936A
Authority
CN
China
Prior art keywords
vomitoxin
solution
enzyme
detecting
sample
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
CN201910365553.XA
Other languages
English (en)
Inventor
杜霞
洪霞
秦悦
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nanjing Yite Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Nanjing Yite Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nanjing Yite Biotechnology Co ltd filed Critical Nanjing Yite Biotechnology Co ltd
Priority to CN201910365553.XA priority Critical patent/CN111879936A/zh
Publication of CN111879936A publication Critical patent/CN111879936A/zh
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
    • G01N33/581—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with enzyme label (including co-enzymes, co-factors, enzyme inhibitors or substrates)
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
    • G01N21/77—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
    • G01N21/78—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator producing a change of colour

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Plasma & Fusion (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明为检测呕吐毒素的酶联免疫试剂盒及其检测方法，其检测灵敏、准确、快速，操作简便、特异性强，适用于大批样品的检测。所述试剂盒包括：包被呕吐毒素抗原的酶标板、呕吐毒素标准品、呕吐毒素抗体工作液、呕吐毒素酶标二抗工作液、底物液A、底物液B、终止液、浓缩稀释液和浓缩洗涤液。检测呕吐毒素的酶联免疫试剂盒的原理是固相间接竞争酶联免疫反应，把提取的样品、酶标二抗工作液和抗体工作液加入对应的酶标板微孔中，孵育一段时间后，洗板加入底物液A、底物液B，在酶的作用下显色剂呈现蓝色，加入终止液，颜色由蓝色变为黄色。显色的深浅与标准品或样品中呕吐毒素的含量成反比例关系。该方法可直接用于检测待测样品中呕吐毒素的残留量。

Description

检测食用油中呕吐毒素的酶联免疫试剂盒及其检测方法
技术领域
本发明涉及酶联免疫检测技术领域，特别是检测呕吐毒素的酶联免疫试剂盒。
背景技术
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol，DON)又称呕吐毒素(vomitoxin)，主要是由镰刀菌的某些种产生的化学结构和生物活性相似的有毒代谢产物——单端孢霉烯族化合物中的一种。
DON广泛存在于全球，主要污染小麦、大麦、玉米等谷类作物，也污染粮食制品，人和动物在误食被该毒素污染的粮谷类后可以产生广泛的毒性效应。另外，它还常与其它的霉卤毒素如黄曲霉毒素共同污染农作物，进入人体后可以相互影响。近年来发现DON可能与人类食管癌、IGA肾病有关，对人类及动物的健康构成威胁。DON属于剧毒或中等毒物，研究表明，DON在体内可能有一定的蓄积，但无特殊的靶器官，具有很强的细胞毒性。人畜摄入了被DON污染的食物／饲料后，会导致厌食、呕吐、腹泻、发烧、站立不稳、反应迟钝等急性中毒症状，严重时损害造血系统造成死亡，但不同的动物对DON的敏感程度不一，猪是最敏感的动物。研究表明，DON可能对免疫系统有影响，有明显胚胎毒性和一定致畸作用，可能有遗传毒性，但无致癌、致突变作用。由于DON的危害严重，引起了各国的普遍重视。
目前，呕吐毒素的测定方法主要有高效液相色谱法、气相色谱法、薄层层析法、高效液相色谱-质谱联用法等，其检测结果准确可靠，但仪器设备比较昂贵，且样本前处理过程相对复杂。酶联免疫吸附法是一种准确、可靠、快速、特异的检测方法，适合于大批样品的快速筛选，近年来已广泛应用于食品安全检测行业。本发明旨在建立一种检测呕吐毒素的酶联免疫试剂盒及其检测方法。
发明内容
为了克服色谱法的不足，本发明提供一种检测呕吐毒素的酶联免疫试剂盒及其检测方法。该方法灵敏、准确、快速，操作简便、特异性强，适用于大批样品的快速检测。
本发明检测呕吐毒素的酶联免疫试剂盒，包括酶标板、呕吐毒素标准品、呕吐毒素抗体工作液、呕吐毒素酶标二抗工作液、底物液A、底物液B、终止液、浓缩稀释液和浓缩洗涤液。
本发明检测呕吐毒素的酶联免疫试剂盒的制备，包括以下步骤：酶标板的制备、呕吐毒素标准品的制备、呕吐毒素抗体工作液的制备、呕吐毒素酶标二抗工作液的制备、底物液A的制备、底物液B的制备、终止液的制备、浓缩稀释液的制备和浓缩洗涤液的制备。
其进一步特征在于：所述的酶标板经由呕吐毒素抗原包被制备，具体步骤是将呕吐毒素半抗原与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)偶联得到包被抗原，用0.05 mol/L pH 9.6的碳酸盐(CBS)缓冲液作为包被液，将呕吐毒素包被抗原稀释成1：40000比例，100 μL/孔，37℃避光孵育2 h，取出酶标板甩掉板内液体，加入经稀释的浓缩洗涤液300 μL/孔，洗板2次，30 s/次，然后加入0.5%牛血清白蛋白(BSA)封闭液，150 μL/孔，37℃放置1.5 h，甩掉封闭液直接拍干，拍干后的酶标板放置恒温间(25℃)晾干，抽检合格后将酶标板真空密封于4℃条件下保存。
呕吐毒素标准品浓度分别为0 ng/mL、0.05 ng/mL、0.15 ng/mL、0.45 ng/mL、1.35ng/mL、4.05 ng/mL。
所述呕吐毒素抗体工作液是采用呕吐毒素人工抗原免疫小鼠得到单克隆抗体，用抗体稀释液稀释成1：60000比例制备。
所述呕吐毒素酶标二抗工作液由酶标二抗加稀释液稀释成1：2000比例，所述底物液A为含有0.5 mmol/L的过氧化氢脲的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲溶液，所述底物液B为四甲基联苯二胺的乙醇溶液，所述终止液为2 mol/L的硫酸，所述浓缩稀释液是10倍浓缩稀释液，为0.1 mol/L的PBS，pH值范围7.0-7.5之间，所述浓缩洗涤液是10倍浓缩洗涤液，为含0.5% 吐温-20，0.1 mol/L的PBST，pH值范围7.0-7.5之间。
检测呕吐毒素的酶联免疫试剂盒及其检测方法，基于抗原抗体的间接竞争酶联免疫反应原理，该方法包括以下步骤：
(1)预处理待测样品，即将待测试的样品处理为液体样品，或者用有机溶剂提取待测样品，并将其复溶于样品稀释液中；
(2)将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20～25℃）平衡30 min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀；
(3)取包被有呕吐毒素抗原的酶标板，加标准品/样本50 μL/孔到对应的微孔中，加入呕吐毒素酶标二抗工作液，50 μL/孔，然后加入呕吐毒素抗体工作液，50 μL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温25℃避光环境中反应30 min；
(4)小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤工作液260 μL/孔，充分洗涤4~5次，每次间隔10 s，用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)；
(5)加入底物液A 50 μL/孔，底物液B 50 μL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应15～20 min；
(6)加入终止液50 μL/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450 nm处或双波长450/630 nm检测，测定每孔吸光度值（请在5 min内读完数据）；
(7)以的标准品浓度(ppb)的对数为横坐标，标准品百分吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线，对照标准曲线计算样品中呕吐毒素的含量。
其中，所述待测样品用以下方法进行预处理：
研磨待测样品，过筛，称取5 g研磨过滤后的样品加入50 mL 70%的甲醇溶液，在密封的容器里混合震荡10 min，离心取上清液用样品稀释液稀释成1：20比例，混匀待测。
本发明检测呕吐毒素的酶联免疫试剂盒及其检测方法的测定原理：样品中的呕吐毒素与酶标板上固定的抗原特异性竞争抗体，加入酶标二抗，与抗体反应，通过酶催化显色剂显色，根据显色的深浅来判断样品中呕吐毒素的含量。如果样品中的呕吐毒素含量少，显色深；反之，则显色浅。本发明的试剂盒检测方法操作简便，检测灵敏、准确、快速，适用于大批量样品的快速检测。
具体实施方式
呕吐毒素蛋白质偶联物的制备：
采用琥珀酸酐法得到带羧基的呕吐毒素半抗原衍生物，之后取0.05 mmol与载体蛋白BSA按10：1的结合比混合在0.05 mol/L pH 9.6的碳酸盐缓冲液(CBS)中，然后加入0.15mmol碳二亚胺，搅拌置室温反应24 h，最后于0.2 mol/L pH 7.6的PBS缓冲液中透析两天，除去未反应的半抗原，将得到的蛋白质偶联物溶液于-20℃保存备用。
呕吐毒素抗体的制备：
选用健康成年纯种BALA/C小鼠，取与蛋白质偶联制备的免疫抗原50μg与等量完全弗氏佐剂混合采用腹腔注射进行初次免疫，之后每隔3周用相同剂量免疫抗原加等量不完全弗氏佐剂采用腹腔注射进行二次、三次免疫，每次免疫6天后尾静脉采血测定抗血清效价至一定滴度后，用相同剂量不加佐剂进行末次免疫，3天后取脾制备脾细胞悬浮液与骨髓瘤细胞进行细胞融合，筛选出所需要的杂交瘤细胞系进行克隆化，选择处于对数生长期的杂交瘤细胞进行冻存，用于腹水制备，先腹腔注射0.5 ml液体石蜡于BALB/C鼠致敏，2周后腹腔注射1×106个杂交瘤细胞，接种细胞7-10天后可产生腹水，待腹水尽可能多时用注射器抽取腹水，反复收集数次，4000 rpm离心15 min，收集上清，采用辛酸-硫酸铵法纯化腹水对单克隆抗体进行纯化，冷冻干燥得冻干粉后于-20 ℃保存备用。
制备包被有呕吐毒素包被抗原的酶标板：
包被抗原是将呕吐毒素半抗原与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)偶联得到的，用0.05mol/L pH 9.6的碳酸盐(CBS)缓冲液作为包被液，将呕吐毒素抗原稀释成1:40000比例，100µL/孔，37℃放置2 h，取出酶标板甩掉板内液体，用稀释后的浓缩洗涤液300 µL/孔，洗板2次，30 s/次，然后加入0.5%牛血清白蛋白(BSA)封闭，150 µL/孔，37℃放置1.5 h，弃去封闭液，拍干后的酶标板放置恒温间(25℃)晾干，抽检合格后将酶标板真空密封后置4℃下保存。
呕吐毒素标准品配制浓度分别为0 ng/mL、0.05 ng/mL、0.15 ng/mL、0.45 ng/mL、1.35 ng/mL、4.05 ng/mL。
呕吐毒素抗体工作液的制备：采用呕吐毒素人工抗原免疫小鼠得到单克隆抗体，用抗体稀释液稀释成1：60000比例制备。
呕吐毒素酶标二抗工作液由酶标二抗加稀释液稀释成1：2000比例，底物液A为含有0.5 mmol/L的过氧化氢脲的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲溶液，底物液B为四甲基联苯二胺的乙醇溶液，终止液为2 mol/L的硫酸，浓缩稀释液是10倍浓缩稀释液，为0.1 mol/L的PBS，pH值范围7.0-7.5之间，浓缩洗涤液是10倍浓缩洗涤液，为含0.5% 吐温-20，0.01mol/L的PBST，pH值范围7.0-7.5之间。
基于上述制备的试剂，本发明用于检测呕吐毒素的酶联免疫试剂盒包括如下材料：
(1)96孔酶标板×1块；
(2)标准液×6瓶：(1mL/瓶) 0 ppm、0.05 ng/mL、0.15 ng/mL、0.45 ng/mL、1.35 ng/mL、4.05 ng/mL；
(3)抗体工作液 7 mL；
(4)酶标二抗工作液 7 mL；
(5)底物液A 7 mL；
(6)底物液B 7 mL；
(7)终止液 7 mL；
(8)10×浓缩稀释液 40 mL；
(9)10×浓缩洗涤液 40 mL；
本发明的试剂盒用于检测样品中呕吐毒素残留量时，通过以下步骤实施：样品预处理、用本发明试剂盒进行检测、分析结果。
(1)样品预处理
研磨待测样品，过筛，称取5 g研磨过滤后的样品加入50 mL 70%的甲醇溶液，在密封的容器里混合震荡10 min，离心取上清液用样品稀释液稀释成1：20比例，混匀待测。
(2)用本发明试剂盒检测待测样品中呕吐毒素残留量
取包被有呕吐毒素抗原的酶标板，加标准品/样本50 µL/孔到对应的微孔中；加入酶标二抗工作液，50 µL/孔，然后加入呕吐毒素抗体工作液，50 µL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温25℃避光环境中反应30 min；小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤工作液300 µL/孔，充分洗涤4次，浸泡15-30 s，用吸水纸拍干；加入底物液A 50 µL/孔，底物液B50 µL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应15 min；加入终止液50 µL/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450 nm处或双波长450/630 nm检测，测定每孔吸光度值（请在5 min内读完数据）；对比待测样品与标准品的吸光度值大小，定量分析待测样品中呕吐毒素残留量。
(3)分析结果
百分吸光度值的计算，标准品或样本的百分吸光度值等于标准品或样本的吸光度值的平均值(双孔)除以第一个标准(0标准)的吸光度值，再乘以100%，即
百分吸光度值(%) ＝B/B0×100%
其中B—标准溶液或样本溶液的平均吸光度值，B0—0 ppb标准溶液的平均吸光度值。
以呕吐毒素的标准品浓度(ppb)的对数为横坐标，标准品百分吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线，求出直线方程。将样本的百分吸光度值代入标准曲线中，从标准曲线上读出样本所对应的浓度，乘以其对应的稀释倍数即为样本中呕吐毒素的实际浓度。

Claims (8)

1.检测呕吐毒素的酶联免疫试剂盒及其检测方法，包括酶标板、呕吐毒素标准品、呕吐毒素抗体工作液、呕吐毒素酶标二抗工作液、底物液A、底物液B、终止液、浓缩稀释液和浓缩洗涤液。
2.检测呕吐毒素的酶联免疫试剂盒及其检测方法，包括以下步骤：酶标板的制备、呕吐毒素标准品的制备、呕吐毒素抗体工作液的制备、呕吐毒素酶标二抗工作液的制备、底物液A的制备、底物液B的制备、终止液的制备、浓缩稀释液的制备和浓缩洗涤液的制备。
3.根据权利要求2所述的检测呕吐毒素的酶联免疫试剂盒及其检测方法，其特征在于：所述的酶标板制备方法为将呕吐毒素半抗原与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)偶联得到呕吐毒素包被抗原，用0.05 mol/L pH 9.6的碳酸盐(CBS)缓冲液作为包被液，将包被抗原稀释成1：40000比例，100 μL/孔，37℃孵育2 h，取出酶标板甩掉板内液体，加入稀释后的浓缩洗涤液300 μL/孔，洗板2次，30 s/次，然后加入0.5%牛血清白蛋白(BSA)封闭，150 μL/孔，37℃放置1.5 h，弃去封闭液直接拍干，拍干后的酶标板放置恒温间(25℃)晾干，抽检合格后将酶标板真空密封于4℃条件下保存。
4.根据权利要求2所述的检测呕吐毒素的酶联免疫试剂盒及其检测方法，其特征在于：呕吐毒素标准品的浓度分别为0 ng/mL、0.05 ng/mL、0.15 ng/mL、0.45 ng/mL、1.35 ng/mL、4.05 ng/mL。
5.根据权利要求2所述的检测呕吐毒素的酶联免疫试剂盒及其检测方法，其特征在于：所述的呕吐毒素抗体工作液是采用呕吐毒素人工抗原免疫小鼠得到单克隆抗体，用抗体稀释液稀释成1：60000比例制备。
6.根据权利要求2所述的一种检测呕吐毒素的酶联免疫试剂盒及其检测方法，其特征在于：所述的呕吐毒素酶标二抗工作液由酶标二抗加稀释液稀释成1：2000比例，所述底物液A为含有0.5 mmol/L的过氧化氢脲的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲溶液，所述底物液B为四甲基联苯二胺的乙醇溶液，所述终止液为2 mol/L的硫酸，所述浓缩稀释液是10倍浓缩稀释液，其为0.1 mol/L的PBS，pH值范围7.0-7.5之间，所述浓缩洗涤液是10倍浓缩洗涤液，其为含0.5% 吐温-20，0.01 mol/L的PBST，pH值范围7.0-7.5之间。
7.权利要求2所述的检测呕吐毒素的酶联免疫试剂盒及其检测方法，基于抗原抗体的间接竞争酶联免疫反应原理，该方法的特征在于：预处理待测样品，取包被有呕吐毒素抗原的酶标板，按序分别加入标准品/样本、呕吐毒素酶标二抗工作液、呕吐毒素抗体工作液各50 μL/孔到对应的微孔中，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温25℃避光环境中反应30min，将孔内液体甩干，用洗涤工作液充分洗涤4~5次，每次间隔10 s，拍干后加入底物液A50 μL/孔，底物液B 50 μL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应15～20 min，加入终止液50 μL/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450 nm处或双波长450/630 nm检测，测定每孔吸光度值（请在5 min内读完数据），以的标准品浓度(ppb)的对数为横坐标，标准品百分吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线，对照标准曲线计算样品中呕吐毒素的含量。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述待测样品用以下方法进行预处理：研磨待测样品，过筛，称取5 g研磨过滤后的样品加入50 mL 70%的甲醇溶液，在密封的容器里混合震荡10 min，离心取上清液用样品稀释液稀释成1：20比例，混匀待测。
CN201910365553.XA 2019-05-01 2019-05-01 检测食用油中呕吐毒素的酶联免疫试剂盒及其检测方法 Withdrawn CN111879936A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910365553.XA CN111879936A (zh) 2019-05-01 2019-05-01 检测食用油中呕吐毒素的酶联免疫试剂盒及其检测方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910365553.XA CN111879936A (zh) 2019-05-01 2019-05-01 检测食用油中呕吐毒素的酶联免疫试剂盒及其检测方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111879936A true CN111879936A (zh) 2020-11-03

Family

ID=73153786

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910365553.XA Withdrawn CN111879936A (zh) 2019-05-01 2019-05-01 检测食用油中呕吐毒素的酶联免疫试剂盒及其检测方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111879936A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113156126A (zh) * 2021-03-05 2021-07-23 清远海贝生物技术有限公司 用于检测呕吐毒素的elisa试剂盒及其检测方法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113156126A (zh) * 2021-03-05 2021-07-23 清远海贝生物技术有限公司 用于检测呕吐毒素的elisa试剂盒及其检测方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103018458B (zh) 超灵敏黄曲霉毒素b1酶联免疫检测试剂盒
Soares et al. Advances, challenges and opportunities for point-of-need screening of mycotoxins in foods and feeds
CN103257233A (zh) 一种同时可视化检测多种抗生素、非法添加剂及生物毒素的生物芯片及方法
Anfossi et al. Mycotoxins in food and feed: extraction, analysis and emerging technologies for rapid and on-field detection
CN111089956A (zh) 三重定量检测镰刀菌毒素的荧光微球免疫层析试纸条、其制备方法和应用
Pei et al. Colorimetric ELISA with an acid–base indicator for sensitive detection of ochratoxin A in corn samples
Guo et al. Europium nanosphere-based fluorescence strip sensor for ultrasensitive and quantitative determination of fumonisin B 1
CN106568967B (zh) 一种针对赭曲霉毒素a的灵敏检测方法
CN109400682B (zh) 模拟黄曲霉毒素b1抗原表位的环状多肽及其检测试剂盒
Yakubu et al. Aflatoxin: Occurrence, regulation, and detection in food and feed
CN111879936A (zh) 检测食用油中呕吐毒素的酶联免疫试剂盒及其检测方法
Zvereva et al. Fluorescence polarization immunoassay of ractopamine
CN105572336A (zh) 检测吡虫啉的酶联免疫试剂盒及其检测方法
Petrakova et al. Immunochromatographic test system for the detection of T-2 toxin
CN113125728A (zh) 一种检测杂色曲霉毒素的酶联免疫试剂盒制备
CN113125729A (zh) 一种检测橘青霉素的酶联免疫试剂盒及其检测方法
CN106610432A (zh) 一种检测灭多威的酶联免疫试剂盒及其检测方法
CN106568961A (zh) 一种检测百草枯的酶联免疫试剂盒及其检测方法
CN109776563B (zh) 呕吐毒素半抗原及其制备方法、人工抗原、试剂盒及呕吐毒素的检测方法
CN106610431A (zh) 一种检测苯霜灵的酶联免疫试剂盒及其检测方法
CN102539739A (zh) 定量检测食品和中药中速灭威含量试剂盒及其检测方法
CN107305213A (zh) 一种检测有机磷类和氨基甲酸酯类农药的方法及试剂盒
Shim et al. Determination of aflatoxin B1 in rice, barley, and feed by noninstrumental immunochromatographic strip-test and high sensitive ELISA
CN105510588A (zh) 一种检测草甘磷的酶联免疫试剂盒及其检测方法
CN113156126B (zh) 用于检测呕吐毒素的elisa试剂盒及其检测方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WW01 Invention patent application withdrawn after publication
WW01 Invention patent application withdrawn after publication

Application publication date: 20201103