CN111876468A - 一种全自动核酸检测方法及试管 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种全自动核酸检测方法及试管，通过将分别装有裂解液、清洗液和反应液的腔体呈水平排布并在侧面进行连通，分别在腔体之间设置固相或液相的疏水物质，从而将裂解液、清洗液和反应液进行隔离；将样品加入装有裂解液的腔体内进行混匀裂解，并利用纳米磁珠进行核酸提取，在试管外侧利用外部磁体控制试管内的纳米磁珠，依次通过清洗液腔体，反应液腔体，最终在反应液腔体进行扩增，其中，反应液所需生物试剂储存在疏水物质中，通过磁珠带入反应液中，核酸扩增过程中通过外部光学检测设备进行实时检测，从而实现核酸提取扩增检测的一体化。本发明整个实验过程通过设备全自动完成提取扩增检测，极大地简化了实验操作难度。

Description

一种全自动核酸检测方法及试管
技术领域
本发明属于体外诊断核酸检测领域，涉及一种全自动核酸检测方法及试管。
背景技术
磁珠法核酸提取原理是依据与硅胶膜离心柱相同的原理，运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后，制备成超顺磁性氧化硅纳米磁珠。该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合。利用二氧化硅包被的纳米磁性微球的超顺磁性，在Chaotropic盐（盐酸胍、异硫氰酸胍等）和外加磁场的作用下，能从血液、动物组织、食品、病原微生物等样本中分离出DNA和RNA，可应用在临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、分子生物学研究等多个领域。
核酸扩增检测技术是通过为核酸片段提供体外扩增的条件，使之成指数大量扩增并在核酸扩增过程中加入荧光染料或荧光标记物，采用光学装置检测出荧光信号的强弱，通过对荧光信号的处理分析得出核酸扩增结果的过程。
从核酸提取到扩增检测中间包含裂解、清洗、洗脱、扩增等步骤，目前主流技术必须要求在标准实验室中分步进行，整个过程容易对样本核酸造成污染，操作难度大，对操作人员要求高，不利于核酸检测技术的推广。
发明内容
为了解决现有技术的不足，本发明提供了一种全自动核酸检测方法及试管，极大地简化了从核酸提取到扩增的操作难度，提高了检测效率，有效避免环境对样本的污染，提高检测准确度。
本发明的技术方案：一种全自动核酸检测方法，通过将分别装有裂解液、清洗液和反应液的腔体呈水平排布并在侧面进行连通，分别在腔体之间设置固相或液相的疏水物质，从而将裂解液、清洗液和反应液进行隔离；将样品加入装有裂解液的腔体内进行混匀裂解，并利用纳米磁珠进行核酸提取，在试管外侧利用外部磁体控制试管内的纳米磁珠，依次通过清洗液腔体，反应液腔体，最终在反应液腔体进行扩增，其中，反应液所需生物试剂储存在疏水物质中，通过磁珠带入反应液中，核酸扩增过程中通过外部光学检测设备进行实时检测，从而实现核酸提取扩增检测的一体化。
前述的一种全自动核酸检测方法中，所述反应液所需生物试剂由疏水物质密封保存，通过外部设备对疏水物质进行加热融化从而释放生物试剂。
前述的一种全自动核酸检测方法中，所述外部光学检测设备检测孔设置反应液腔体的侧面。
前述的一种全自动核酸检测方法中，所述反应液腔的底部设置有外部磁体，用于吸附磁珠来减少磁珠对荧光信号的干扰。
一种全自动核酸检测试管，包括：主管体、环形管槽、锥形管体、翻盖；所述主管体、环形管槽、锥形管体的通过侧面连通；所述主管体为裂解液区；所述环形管槽为清洗区；所述锥形管为反应区。
前述的全自动核酸检测试管中，所述主管体的顶部设置有开口用于装入样本。
前述的全自动核酸检测试管中，所述环形管槽的两侧设置有疏水物质。
前述的全自动核酸检测试管中，所述锥形管体的底部为锥形透明管用于检测荧光信号。
前述的全自动核酸检测试管中，所述翻盖设置在主管体的顶部。
与现有技术相比，本发明的增益效果为：本发明检测试管将裂解液管、清洗液管、反应液管连接在一起，整个提取扩增过程在密闭条件下进行，有效避免了环境污染。本发明整个实验过程通过设备全自动完成提取扩增检测，极大地简化了实验操作难度。
附图说明
图1为本发明的剖视图。
图2为本发明的侧视图。
图3为图2中A-A向的剖视图。
附图中的标记为：1-主管体，2-环形管槽，3-锥形管体，4-翻盖。
具体实施方式
下面将结合本发明的附图，将本发明的技术实施方案清楚、完整地描述。
实施例。一种全自动核酸检测方法及试管，通过将分别装有裂解液、清洗液和反应液的腔体呈水平排布并在侧面进行连通，分别在腔体之间设置固相或液相的疏水物质，从而将裂解液、清洗液和反应液进行隔离；将样品加入装有裂解液的腔体内进行混匀裂解，并利用纳米磁珠进行核酸提取，在试管外侧利用外部磁体控制试管内的纳米磁珠，依次通过清洗液腔体，反应液腔体，最终在反应液腔体进行扩增，其中，反应液所需酶储存在石蜡中，通过磁珠带入反应液中，核酸扩增过程中通过外部光学检测设备进行实时检测，从而实现核酸提取扩增检测的一体化。
所述反应液所需的酶由石蜡密封保存，通过外部设备对石蜡进行加热融化从而释放酶。
所述外部光学检测设备检测孔设置反应液腔体的侧面。
所述反应液腔的底部设置有外部磁体，用于吸附磁珠来减少磁珠对荧光信号的干扰。
全自动核酸检测试管，如图1所示，包含：包括主管体1、环形管槽2、锥形管体3、翻盖4；如图3所示所述主管体1、环形管槽2、锥形管体3的通过侧面连通；所述主管体1为裂解液区；所述环形管槽2为清洗区；所述锥形管3为反应区。
所述主管体1的顶部设置有开口用于装入样本。
所述环形管槽2的两侧设置有疏水物质用于隔离裂解液区和反应液区。
如图3所示所述外部磁体设置在主管体1、环形管槽2的连通口处，当样品在主管体1内裂解完成，磁珠在外部磁体的吸引下在聚集，外部磁体沿环形管槽2的侧壁转动一周，带动磁珠从主管体1穿过疏水物质，液相的疏水物质可以为硅油，固相的疏水物质可以为石蜡，经环形管槽2的清洗液洗去磁珠内的杂质，穿过疏水物质进入锥形管体3进行核酸反应，所述核酸反应为PCR或者等温扩增反应；外部磁体继续沿环形管槽2的侧壁转动，磁珠被锥形管体3的侧壁挡在反应区内，设置在锥形管体3底部的外部磁体将磁珠吸引至锥形管体3的底部，通过外部光学设备检测锥形管体3的侧面。
所述锥形管体3的底部为锥形透明管用于检测荧光信号。
所述翻盖4设置在主管体1的顶部用于密封。

Claims (9)

1.一种全自动核酸检测方法，其特征在于：通过将分别装有裂解液、清洗液和反应液的腔体呈水平排布并在侧面进行连通，分别在腔体之间设置固相或液相的疏水物质，从而将裂解液、清洗液和反应液进行隔离；将样品加入装有裂解液的腔体内进行混匀裂解，并利用纳米磁珠进行核酸提取，在试管外侧利用外部磁体控制试管内的纳米磁珠，依次通过清洗液腔体，反应液腔体，最终在反应液腔体进行扩增，其中，反应液所需生物试剂储存在疏水物质中，通过磁珠带入反应液中，核酸扩增过程中通过外部光学检测设备进行实时检测，从而实现核酸提取扩增检测的一体化。
2.根据权利要求1所述的一种全自动核酸检测方法，其特征在于：所述反应液所需生物试剂由疏水物质密封保存，通过外部设备对疏水物质进行加热融化从而释放生物试剂。
3.根据权利要求1所述的一种全自动核酸检测方法，其特征在于：所述外部光学检测设备检测孔设置反应液腔体的侧面。
4.根据权利要求1所述的一种全自动核酸检测方法，其特征在于：所述反应液腔的底部设置有外部磁体，用于吸附磁珠来减少磁珠对荧光信号的干扰。
5.实现权力要求1至4任意一项所述的一种全自动核酸检测方法的检测试管，其特征在于：包括主管体（1）、环形管槽（2）、锥形管体（3）、翻盖（4）；所述主管体（1）、环形管槽（2）、锥形管体（3）的通过侧面连通；所述主管体（1）为裂解液区；所述环形管槽为清洗区；所述锥形管（3）为反应区。
6.根据权利要求5所述的全自动核酸检测试管，其特征在于：所述主管体（1）的顶部设置有开口用于装入样本。
7.根据权利要求5所述的全自动核酸检测试管，其特征在于：所述环形管槽（2）的两侧设置有疏水物质。
8.根据权利要求5所述的全自动核酸检测试管，其特征在于：所述锥形管体（3）的底部为锥形透明管用于检测荧光信号。
9.根据权利要求5所述的全自动核酸检测试管，其特征在于：所述翻盖（4）设置在主管体（1）的顶部。
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