CN112442443B - 一种核酸提取扩增一体化检测方法及检测连管 - Google Patents
一种核酸提取扩增一体化检测方法及检测连管 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112442443B CN112442443B CN202010528905.1A CN202010528905A CN112442443B CN 112442443 B CN112442443 B CN 112442443B CN 202010528905 A CN202010528905 A CN 202010528905A CN 112442443 B CN112442443 B CN 112442443B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- nucleic acid
- tube
- amplification
- liquid pipe
- acid extraction
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
- B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6806—Preparing nucleic acids for analysis, e.g. for polymerase chain reaction [PCR] assay
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Clinical Laboratory Science (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
本发明公开了一种核酸提取扩增一体化检测方法及检测连管,通过将分别装有裂解液、清洗液和反应液的试管呈水平排布并在顶部进行连通,分别在两管之间设置隔离装置,从而将裂解液、清洗液和反应液进行隔离;将样品加入装有裂解液的试管,在试管顶部利用外部磁体控制试管内的磁珠提取核酸,通过外部机构在试管顶部打开隔离装置,然后带动磁珠进入清洗液管,最终进入反应液管进行扩增,通过荧光检测扩增过程,从而实现核酸提取扩增检测的一体化。
Description
技术领域
本使发明属于体外诊断领域,涉及一种核酸提取扩增一体化检测方法及检测连管。
背景技术
磁珠法核酸提取原理是依据与硅胶膜离心柱相同的原理,运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后,制备成超顺磁性氧化硅纳米磁珠。该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合。利用二氧化硅包被的纳米磁性微球的超顺磁性,在Chaotropic盐(盐酸胍、异硫氰酸胍等)和外加磁场的作用下,能从血液、动物组织、食品、病原微生物等样本中分离出DNA和RNA,可应用在临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、分子生物学研究等多种领域。
核酸扩增检测技术是通过为核酸片段提供体外扩增的条件,使之成指数大量扩增并在核酸扩增过程中加入荧光染料或荧光标记物,采用光学装置检测出荧光信号的强弱,通过对荧光信号的处理分析得出核酸扩增结果的过程。
从核酸提取到扩增检测中间包含裂解、清洗、洗脱、扩增等步骤,目前主流技术必须要求在标准实验室中分步进行,整个过程容易对样本核酸造成污染,操作难度达,对操作人员要求高,不利于核酸检测技术的推广。
发明内容
为了解决现有技术的不足,本发明提供了一种核酸提取扩增一体化检测方法及检测连管,极大的简化了从核酸提取到扩增的操作难度,提高了检测效率,有效避免环境对样本的污染,提高检测准确度。
本发明的技术方案:一种核酸提取扩增一体化检测方法,其特征在于:通过将分别装有裂解液、清洗液和反应液的试管呈水平排布并在顶部进行连通,分别在两管之间设置隔离装置,从而将裂解液、清洗液和反应液进行隔离;反应液管的隔离装置上设置有毛细管,核酸扩增反应所需的生物试剂存储在毛细管内,当外部机构打开隔离装置时,毛细管内的生物试剂被注射至反应液管内,实现生物试剂的转移;将样品加入装有裂解液的试管,在试管顶部利用外部磁体控制试管内的磁珠提取核酸,通过外部机构在试管顶部打开隔离装置,然后带动磁珠进入清洗液管,最终进入反应液管进行扩增,通过荧光检测扩增过程,从而实现核酸提取扩增检测的一体化。
前述的一种核酸提取扩增一体化检测方法,其特征在于:所述裂解液管、清洗液管、反应液管的连通管顶部为平面。
前述的一种核酸提取扩增一体化检测方法,其特征在于:所述隔离装置由三脚柱塞、弹簧和隔离腔组成,三脚柱塞在隔离腔内上下移动实现打开和关闭隔离装置的功能。
一种核酸提取扩增一体化检测方法的检测连管,其特征在于:包括顶部带翻盖1的盒体2,用于连通裂解液管3、清洗液管4、反应液管5的连通管6,分别用于隔离裂解液管3、清洗液管4、反应液管5的隔离装置7,用于储存生物试剂的毛细管8。
前述的一种核酸提取扩增一体化检测方法的检测连管,其特征在于:所述隔离装置7,包括三脚柱塞9,弹簧10,隔离腔11。
前述的一种核酸提取扩增一体化检测方法的检测连管,其特征在于:所述毛细管8设置在清洗液管4和反应液管5之间的隔离装置7上。
前述的一种核酸提取扩增一体化检测方法的检测连管,其特征在于:所述毛细管8连接在隔离腔11和反应液管5之间。
前述的一种核酸提取扩增一体化检测方法的检测连管,其特征在于:所述隔离腔11的尾部设置有通孔。
与现有技术相比,本发明的增益效果为:本发明采用连通管将裂解液管、清洗液管、反应液管连接在一起,整个提取扩增过程在密闭条件下进行,有效避免了环境污染。本发明整个实验过程通过设备全自动完成提取扩增检测,极大的简化了实验操作难度。本发明采用水平排布方式可在反应液管顶部设置热盖解决扩增反应过程中的蒸发问题。
附图说明
图1为本发明的剖视图。
图2为本发明的立体视图。
图3本发明的三视图,主视图为仰视图。
图4为三脚柱塞立体视图。
图5位三脚柱塞三视图。
图6为隔离腔局部放大图。
实施方式
下面将结合本发明的附图,将本发明的技术实施方案清楚、完整的描述。
实施例。一种核酸提取扩增一体化检测方法,其特征在于:通过将分别装有裂解液、清洗液和反应液的试管呈水平排布并在顶部进行连通,分别在两管之间设置隔离装置,从而将裂解液、清洗液和反应液进行隔离;反应液管的隔离装置上设置有毛细管,核酸扩增反应所需的生物试剂存储在毛细管内,当外部机构打开隔离装置时,毛细管内的生物试剂被注射至反应液管内,实现生物试剂的转移;将样品加入装有裂解液的试管,在试管顶部利用外部磁体控制试管内的磁珠提取核酸,通过外部机构在试管顶部打开隔离装置,然后带动磁珠进入清洗液管,最终进入反应液管进行扩增,通过荧光检测扩增过程,从而实现核酸提取扩增检测的一体化。
所述裂解液管、清洗液管、反应液管的连通管顶部为平面,外部磁体可在该平面水平移动。
所述隔离装置由三脚柱塞、弹簧和隔离腔组成,三脚柱塞的顶部两脚要高出连通管顶部平面,三脚柱塞在隔离腔内上下移动实现打开和关闭隔离装置的功能,外部磁体可在三脚柱塞头部两脚之间穿行。
一种核酸提取扩增一体化检测方法的检测连管,如图1所示,包含:包括顶部带翻盖1的盒体2,用于连通裂解液管3、清洗液管4、反应液管5的连通管6,分别用于隔离裂解液管3、清洗液管4、反应液管5的隔离装置7,用于储存生物试剂的毛细管8。
如图3所示所示,所述隔离装置7包括三脚柱塞9,弹簧10,隔离腔11。
如图1所示所示,所述毛细管8设置在清洗液管4和反应液管5之间的隔离装置7上。
如图1所示所示,所述毛细管8连接在隔离腔11和反应液管5之间。
如图6所示所示,其特征在于:所述隔离腔11的尾部设置有通孔。
需要理解到的是:本实施例虽然对本发明作了比较详细的说明,但是这些说明,只是对发明的简单说明,而不是对发明的限制,任何不超出本发明实质精神内的发明创造,均落入发明的保护范围内。
Claims (8)
1.一种核酸提取扩增一体化检测方法,其特征在于:通过将分别装有裂解液、清洗液和反应液的试管呈水平排布并在顶部进行连通,分别在两管之间设置隔离装置,从而将裂解液、清洗液和反应液进行隔离;反应液管的隔离装置上设置有毛细管,核酸扩增反应所需的生物试剂存储在毛细管内,当外部机构打开隔离装置时,毛细管内的生物试剂被注射至反应液管内,实现生物试剂的转移;将样品加入装有裂解液的试管,在试管顶部利用外部磁体控制试管内的磁珠提取核酸,通过外部机构在试管顶部打开隔离装置,然后带动磁珠进入清洗液管,最终进入反应液管进行扩增,通过荧光检测扩增过程,从而实现核酸提取扩增检测的一体化。
2.如权利要求1所述的一种核酸提取扩增一体化检测方法,其特征在于:所述裂解液管、清洗液管、反应液管的连通管顶部为平面。
3.如权利要求1所述的一种核酸提取扩增一体化检测方法,其特征在于:所述隔离装置由三脚柱塞、弹簧和隔离腔组成,三脚柱塞在隔离腔内上下移动实现打开和关闭隔离装置的功能。
4.实现权利要求1至3任意一项所述的一种核酸提取扩增一体化检测方法的检测连管,其特征在于:包括顶部带翻盖(1)的盒体(2),用于连通裂解液管(3)、清洗液管(4)、反应液管(5)的连通管(6),分别用于隔离裂解液管(3)、清洗液管(4)、反应液管(5)的隔离装置(7),用于储存生物试剂的毛细管(8)。
5.如权利要求4所述的一种核酸提取扩增一体化检测方法的检测连管,其特征在于:所述隔离装置(7),包括三脚柱塞(9),弹簧(10),隔离腔(11)。
6.如权利要求4所述的一种核酸提取扩增一体化检测方法的检测连管,其特征在于:所述毛细管(8)设置在清洗液管(4)和反应液管(5)之间的隔离装置(7)上。
7.如权利要求4所述的一种核酸提取扩增一体化检测方法的检测连管,其特征在于:所述毛细管(8)连接在隔离腔(11)和反应液管(5)之间。
8.如权利要求5所述的一种核酸提取扩增一体化检测方法的检测连管,其特征在于:所述隔离腔(11)的尾部设置有通孔。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202010528905.1A CN112442443B (zh) | 2020-06-11 | 2020-06-11 | 一种核酸提取扩增一体化检测方法及检测连管 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202010528905.1A CN112442443B (zh) | 2020-06-11 | 2020-06-11 | 一种核酸提取扩增一体化检测方法及检测连管 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN112442443A CN112442443A (zh) | 2021-03-05 |
CN112442443B true CN112442443B (zh) | 2023-07-28 |
Family
ID=74733631
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202010528905.1A Active CN112442443B (zh) | 2020-06-11 | 2020-06-11 | 一种核酸提取扩增一体化检测方法及检测连管 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN112442443B (zh) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113234589B (zh) * | 2021-05-10 | 2024-03-26 | 宁波康程德诺生物医药有限公司 | 一种核酸快速提取四联管装置、试剂盒和提取方法 |
Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH07107962A (ja) * | 1993-10-12 | 1995-04-25 | Hitachi Ltd | 毛細管を用いた核酸増幅装置 |
EP1944368A1 (en) * | 2007-01-15 | 2008-07-16 | Konica Minolta Medical & Graphic, Inc. | Nucleic acid isolation method by heating on magnetic support |
CN104046555A (zh) * | 2013-03-13 | 2014-09-17 | 精工爱普生株式会社 | 核酸扩增反应用筒 |
CN105349530A (zh) * | 2015-12-11 | 2016-02-24 | 杭州优思达生物技术有限公司 | 一种新型的核酸检测方法及检测管 |
CN105733927A (zh) * | 2016-04-11 | 2016-07-06 | 广州市达安医疗器械有限公司 | 一种用于核酸提取的耗材及多联耗材 |
CN106916743A (zh) * | 2017-03-19 | 2017-07-04 | 北京化工大学 | 一体化核酸提取与扩增检测系统 |
CN108517290A (zh) * | 2018-05-31 | 2018-09-11 | 西安交通大学 | 一种基于不混溶相界面张力的五腔室核酸提取装置及方法 |
CN108660074A (zh) * | 2018-05-28 | 2018-10-16 | 北京贝泰科技有限公司 | 核酸提取pcr扩增检测一体化解决方案 |
CN108796126A (zh) * | 2018-06-12 | 2018-11-13 | 广州和实生物技术有限公司 | 一种用于检测hpv的试剂盒 |
-
2020
- 2020-06-11 CN CN202010528905.1A patent/CN112442443B/zh active Active
Patent Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH07107962A (ja) * | 1993-10-12 | 1995-04-25 | Hitachi Ltd | 毛細管を用いた核酸増幅装置 |
EP1944368A1 (en) * | 2007-01-15 | 2008-07-16 | Konica Minolta Medical & Graphic, Inc. | Nucleic acid isolation method by heating on magnetic support |
CN104046555A (zh) * | 2013-03-13 | 2014-09-17 | 精工爱普生株式会社 | 核酸扩增反应用筒 |
CN105349530A (zh) * | 2015-12-11 | 2016-02-24 | 杭州优思达生物技术有限公司 | 一种新型的核酸检测方法及检测管 |
CN105733927A (zh) * | 2016-04-11 | 2016-07-06 | 广州市达安医疗器械有限公司 | 一种用于核酸提取的耗材及多联耗材 |
CN106916743A (zh) * | 2017-03-19 | 2017-07-04 | 北京化工大学 | 一体化核酸提取与扩增检测系统 |
CN108660074A (zh) * | 2018-05-28 | 2018-10-16 | 北京贝泰科技有限公司 | 核酸提取pcr扩增检测一体化解决方案 |
CN108517290A (zh) * | 2018-05-31 | 2018-09-11 | 西安交通大学 | 一种基于不混溶相界面张力的五腔室核酸提取装置及方法 |
CN108796126A (zh) * | 2018-06-12 | 2018-11-13 | 广州和实生物技术有限公司 | 一种用于检测hpv的试剂盒 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN112442443A (zh) | 2021-03-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN111876468B (zh) | 一种全自动核酸检测方法及试管 | |
US11719608B2 (en) | Method for processing tissue samples | |
US20210011046A1 (en) | Sample processing and detecting kit with a material transfer structure | |
US20220176370A1 (en) | Method for purifying and testing biomolecules from biological samples | |
JP6735276B2 (ja) | 核酸サンプルを収集するためのシステム及び方法 | |
CN101990516B (zh) | 多用试样准备系统及其在集成分析系统中的使用 | |
WO2021170009A1 (zh) | 胎儿细胞捕获模块、用于胎儿细胞捕获的微流控芯片,及它们的使用方法 | |
US20060121624A1 (en) | Methods and systems for fluid delivery | |
JP2001526773A (ja) | 液体検体から細胞試料を収集する方法および装置 | |
WO2020107641A1 (zh) | 一种设置有微流控或纳米流控结构的生物反应装置 | |
US20230294090A1 (en) | Sample processing and detection apparatus and application thereof | |
TW200923097A (en) | Automated system and method for processing genetic material | |
CN108517290A (zh) | 一种基于不混溶相界面张力的五腔室核酸提取装置及方法 | |
CN112442443B (zh) | 一种核酸提取扩增一体化检测方法及检测连管 | |
CN103013814B (zh) | 一种核酸纯化装置 | |
WO2020213930A1 (ko) | 애널라이트 수집 장치, 이를 이용한 애널라이트 수집 방법 및 애널라이트 검사 시스템 | |
CN105021835A (zh) | 一种磁驱动生物样本处理装置及其处理方法 | |
CN214331361U (zh) | 一种用于核酸提取的齿轮箱 | |
KR102020369B1 (ko) | 분자진단 장치 및 이를 이용한 분자진단 방법 | |
CN214496301U (zh) | 一种核酸提取扩增检测试管 | |
CN115491297A (zh) | 一种集核酸提取纯化与数字化检测为一体的多层微流控芯片 | |
CN111849766A (zh) | 一种核酸提取扩增检测一体化分析仪 | |
CN112628357B (zh) | 一种用于核酸提取的齿轮箱 | |
CN110923134B (zh) | 一种核酸微流控制检测系统 | |
JP2022539739A (ja) | マイクロウェルからの標的物質の回収システムおよび方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |