CN111875588A - 对野生型肺癌肿瘤细胞具有杀伤性能的厄洛替尼衍生物及其制备方法 - Google Patents

对野生型肺癌肿瘤细胞具有杀伤性能的厄洛替尼衍生物及其制备方法 Download PDF

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CN111875588A CN202010787286.8A CN202010787286A CN111875588A CN 111875588 A CN111875588 A CN 111875588A CN 202010787286 A CN202010787286 A CN 202010787286A CN 111875588 A CN111875588 A CN 111875588A
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Abstract

本发明公开了一种对野生型细胞具有杀伤性能的厄洛替尼衍生物及其制备方法，属于药物合成技术领域。本发明的技术方案要点为：该厄洛替尼衍生物具有结构
Figure DDA0002622462580000011
其中n为1或2，其中n为1或2，R1和R2和R3和R4为不同的取代基。本发明以3,4‑二(2‑甲氧基乙养基)苯甲酸乙酯为原料，经过六步反应得到得到了一系列结构新颖的厄洛替尼‑1,2,3‑三氮唑类化合物；该类化合物对IDO1具有良好的抑制作用，1,2,3‑三氮唑结构能够与血红素中的Fe离子形成比较强烈的作用效果，竞争性的抑制IDO1酶活；该类化合物对野生型肺癌肿瘤细胞具有良好的抑制作用，同时对突变型肺癌肿瘤细胞也具有抑制作用，比厄洛替尼具有显著的肿瘤细胞抑制活性普遍性。

Description

对野生型肺癌肿瘤细胞具有杀伤性能的厄洛替尼衍生物及其 制备方法
技术领域
本发明属于具有抗肿瘤活性药物的合成技术领域，具体涉及一种对野生型肺癌肿瘤细胞具有杀伤性能的厄洛替尼衍生物及其制备方法。
背景技术
厄洛替尼(Erlotinib)又名特罗凯(Tarceva)，由Genetech、OSI、Roche三家公司共同研发，由Roche(瑞士罗氏)制药厂生产的首个表皮生长因子络氨酸激酶的选择性抑制剂。此药在我国、美国、欧洲分别于2006年4月、2004年11月以及2005年9月通过审批上市。同时，在2005年批准盐酸厄洛替尼与吉西他滨联用来治疗胰腺癌，是近年来首个被批准用于胰腺癌晚期治疗的药物。目前主要适用于在经过两个或者两个以上化疗方案失败后的，转移的非小细胞肺癌或者局部晚期的二、三线治疗；厄洛替尼含有喹唑啉骨架。在天然生物碱中存在喹唑啉衍生物，在药物化学中喹唑啉骨架也是重要的结构，许多含有喹唑啉结构的化合物表现出良好的抗癌、抗菌、消炎等作用。1,2,3-三氮唑是一种重要的农药、医药药效基团，具有良好的生物兼容性和芳香性。多年来，以1,2,3-三氮唑通常作为一种重要的药效基团，经过点击化学反应将不同底物的药效分子链接到一起，其经过结构改造显现出较好的效果。厄洛替尼作为一种抗癌药，已经出现了耐药性和不良反应。因此，开发具有能够抑制耐药性的肿瘤的化合物，具有良好的前景，我们和南开大学还有河南师范大学合作针对厄洛替尼进行了改造，并进行了相关活性测试。
发明内容
本发明所述的厄洛替尼衍生物的制备方法，其特征在于该厄洛替尼衍生物结构为：
Figure BDA0002622462560000011
其中n为1或2，R1和R2和R3和R4为不同的取代基。
本发明所述的的厄洛替尼衍生物的制备方法，其特征在于：
(1)：把一定量的3,4-二(2-甲氧基乙养基)苯甲酸乙酯溶于二氯乙烷中，在室温条件下搅拌均匀后加入N-碘代丁二酰亚胺，然后在室温反应至原料反应完全，过滤反应液，滤液倒入冰水中，加入饱和的氢氧化钠溶液，分出有机相，有机相再用稀盐酸溶液调节pH为中性，再次分出有机相，用无水硫酸镁干燥后浓缩得到6-碘-3,4-二(2-甲氧基乙养基)苯甲酸乙酯；所诉的3,4-二(2-甲氧基乙养基)苯甲酸乙酯与N-碘代丁二酰亚胺的投料量摩尔比为1:1.1～2。
(2)：在带有分水器的密闭的反应瓶中，把一定量的6-碘-3,4-二(2-甲氧基乙养基)苯甲酸乙酯和三(三苯基膦)氯化钴和1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯和碳酸铯加入到无水甲苯中，搅拌均匀后，通过氮气对反应瓶置换三次气体，然后缓慢升温至回流，回流搅拌反应一段时间后降至室温，缓慢滴加溶有叠氮基三甲基硅烷和碘化钾的甲苯溶液，滴加完后升温至70℃，保持该温度反应一段时间可以明显观察到反应液的颜色加深，由此可以判断苯环上的碘被置换，通过观察反应液颜色固定后升温至回流，然后向分水器中加入溶有氨基磺酸铵的水溶液，甲苯回流进入分水器与水混合，通过分水器缓慢向反应液中滴加混合液，再通过回流体系不断循环，持续反应一段时间后降至室温，然后向滤液中滴加稀盐酸，使滤液中的pH达到1～2，置于10℃条件下缓慢搅拌，逐渐有固体析出，过滤后在丙酮中重结晶，以此进一步除去碘引入的颜色，然后再次过滤，收集滤饼烘干后得到4,5-二(2-甲氧基乙养基)-2氨基苯甲酸乙酯盐酸盐；所诉的6-碘-3,4-二(2-甲氧基乙养基)苯甲酸乙酯与叠氮基三甲基硅烷与碘化钾与氨基磺酸铵的投料量摩尔比为1:1.2:0.1:1.5。
(3)：把一定量的4,5-二(2-甲氧基乙养基)-2胺基苯甲酸乙酯盐酸盐加入甲酰胺中，在室温条件下搅拌均匀后再加入溶有甲酸铵的甲酰胺溶液，在氮气氛围下，缓慢加热至一定温度，反应至原料反应完全，冷却至室温，向反应液中加入乙酸乙酯，搅拌一段时间后加入水，分出有机相，浓缩后得到6,7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-酮；所诉的4,5-二(2-甲氧基乙养基)-2胺基苯甲酸乙酯盐酸盐与酸铵的投料量摩尔比为1:3；所诉的反应温度为130～160℃。
(4)：把一定量的6,7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-酮和N,N-二甲基甲酰胺加入到二氯亚砜中，缓慢升温至回流，反应结束后，真空蒸除未反应完的二氯亚砜，然后在0～10℃条件下加入饱和碳酸氢钠溶液，搅拌后用二氯甲烷萃取多次，合并有机相，然后用饱和食盐水洗涤一次，再用水洗涤多次，无水硫酸钠干燥后浓缩得到6,7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-氯。
(5)：把一定量的6,7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-氯加入异丙醇中，在室温条件下搅拌均匀，然后加入间氨基苯乙炔，再次搅拌均匀，加热回流，反应一段时间后冷却至室温，有大量固体生成，抽滤后烘干得到厄洛替尼。
(6)：把一定量的厄洛替尼和叠氮化合物加入叔丁醇，水和四氢呋喃的溶液中，再加入一定量的五水硫酸铜和抗坏血酸钠，然后加热至70℃反应至监控厄洛替尼反应完全，向反应液中加入二氯甲烷，然后过滤反应液，分出有机相，浓缩后得到产品；所诉的厄洛替尼与叠氮化合物与五水硫酸铜与抗坏血酸钠的投料量质量比为2:2:1:2。
本发明所述的厄洛替尼衍生物的制备方法，其特征在于制备过程中的反应方程式为：
Figure BDA0002622462560000031
本发明所述的厄洛替尼衍生物在制备治疗或预防肺癌药物中的应用。
本发明的技术优势：
1，本发明得到了一系列结构新颖的厄洛替尼-1,2,3-三氮唑类化合物；
2，该类化合物对IDO1具有良好的抑制作用，1,2,3-三氮唑结构能够与血红素中的Fe离子形成比较强烈的作用效果，竞争性的抑制IDO1酶活，进而提高T细胞的释放，可以杀灭耐药性肿瘤细胞；
3，该类化合物对野生型肺癌肿瘤细胞具有良好的抑制作用，同时对突变型肺癌肿瘤细胞也具有抑制作用，比厄洛替尼具有显著的肿瘤细胞抑制活性普遍性。
附图说明
图1为实施例8所得到化合物的核磁氢谱
图2为实施例9所得到化合物的核磁氢谱
具体实施方式
以下通过实施例对本发明的上述内容做进一步详细说明，但不应该将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明上述内容实现的技术均属于本发明的范围。
实施例1
Figure BDA0002622462560000032
把3,4-二(2-甲氧基乙养基)苯甲酸乙酯3g溶于二氯乙烷30mL中，在室温条件下搅拌30min，然后分批加入N-碘代丁二酰亚胺2.5g，每批5g时间间隔10min，加完最后一批N-碘代丁二酰亚胺后在室温反应2h，TLC监控原料反应完全，过滤反应液，滤液倒入冰水30mL中，加入饱和的氢氧化钠溶液8mL，分出有机相，有机相再用稀盐酸溶液调节pH为中性，再次分出有机相，用无水硫酸镁干燥后浓缩得到6-碘-3,4-二(2-甲氧基乙养基)苯甲酸乙酯2.9g；1H NMR(400Hz,DMSO-d6):7.26(s,1H),7.11(s,1H),4.15(t,J1＝4.0Hz,J2＝4.0Hz,2H),4.11(t,J1＝4.0Hz,J2＝4.0Hz,2H),3.82-3.77(m,2H),3.74(t,J1＝4.0Hz,J2＝4.0Hz,2H),3.59-3.55(m,2H),3.39(s,3H),3.37(s,3H),1.28(t,J1＝4.0Hz,J2＝4.0Hz,3H)；LC-MS(ESI)：425[M+H]+
实施例2
Figure BDA0002622462560000041
把3,4-二(2-甲氧基乙养基)苯甲酸乙酯3g溶于二氯乙烷30mL中，在室温条件下搅拌30min，然后分批加入N-碘代丁二酰亚胺4.6g，每批1.15g时间间隔10min，加完最后一批N-碘代丁二酰亚胺后在室温反应1h，TLC监控原料反应完全，过滤反应液，滤液倒入冰水50mL中，加入饱和的氢氧化钠溶液10mL，分出有机相，有机相再用稀盐酸溶液调节pH为中性，再次分出有机相，用无水硫酸镁干燥后浓缩得到6-碘-3,4-二(2-甲氧基乙养基)苯甲酸乙酯3.7g；1H NMR(400Hz,DMSO-d6):7.26(s,1H),7.11(s,1H),4.15(t,J1＝4.0Hz,J2＝4.0Hz,2H),4.11(t,J1＝4.0Hz,J2＝4.0Hz,2H),3.82-3.77(m,2H),3.74(t,J1＝4.0Hz,J2＝4.0Hz,2H),3.59-3.55(m,2H),3.39(s,3H),3.37(s,3H),1.28(t,J1＝4.0Hz,J2＝4.0Hz,3H)；LC-MS(ESI)：425[M+H]+。
实施例3
Figure BDA0002622462560000042
在带有分水器的密闭的反应瓶中，把6-碘-3,4-二(2-甲氧基乙养基)苯甲酸乙酯4.5g和三(三苯基膦)氯化钴0.35g和1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯2g和碳酸铯3.2g加入到无水甲苯50mL中，搅拌均匀后，通过氮气对反应瓶置换三次气体，然后缓慢升温至回流，回流搅拌反应2h，然后降至室温，缓慢滴加溶有叠氮基三甲基硅烷1.4g和碘化钾0.17g的甲苯溶液10mL，滴加完后升温至70℃，保持该温度反应30min，反应过程中可以明显观察到反应液的颜色加深，由此可以判断苯环上的碘被置换，通过观察反应液颜色固定后升温至回流，然后向分水器中加入溶有氨基磺酸铵1.8g的水溶液10mL，甲苯回流进入分水器与水混合，通过分水器缓慢向反应液中滴加混合液，再通过回流体系不断循环，持续反应1h，降至室温，然后向滤液中滴加稀盐酸，使滤液中的pH达到1～2，置于10℃条件下缓慢搅拌，逐渐有固体析出，过滤后在丙酮和石油醚混合液中重结晶，以此进一步除去碘引入的颜色，然后再次过滤，收集滤饼烘干后得到4,5-二(2-甲氧基乙养基)-2氨基苯甲酸乙酯盐酸盐3.0g。
实施例4
Figure BDA0002622462560000051
在反应瓶中，把4,5-二(2-甲氧基乙养基)-2胺基苯甲酸乙酯盐酸盐3.5g加入甲酰胺20mL中，在室温条件下搅拌10min，然后再加入溶有甲酸铵2g的甲酰胺溶液10mL，在氮气氛围下，缓慢加热至130℃，反应6h，TLC监控原料反应完全，冷却至室温，向反应液中加入乙酸乙酯35mL，搅拌30min，然后加入水15mL，继续搅拌10min，分出有机相，浓缩后得到6,7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-酮2.7g。
实施例5
Figure BDA0002622462560000052
在反应瓶中，把6,7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-酮3g和N,N-二甲基甲酰胺1mL加入到二氯亚砜30mL中，缓慢升温至回流，反应结束后，真空蒸除未反应完的二氯亚砜，然后在0～10℃条件下加入饱和碳酸氢钠溶液20mL，搅拌20min，用二氯甲烷10mL萃取多次，合并有机相，然后用饱和食盐水洗涤一次，再用水洗涤多次，无水硫酸钠干燥后浓缩得到6,7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-氯2.4g。
实施例6
Figure BDA0002622462560000053
在反应瓶中，把6,7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-氯3g加入异丙醇50mL中，在室温条件下搅拌均匀，然后加入间氨基苯乙炔1.3g，再次搅拌均匀，加热回流，反应1.2h，缓慢冷却至室温，有大量固体生成，继续降温至0℃搅拌30min，抽滤后烘干得到厄洛替尼3.1g。
实施例7
Figure BDA0002622462560000061
把厄洛替尼1g和2-氟苄基叠氮1g加入叔丁醇10mL，水10mL和四氢呋喃10mL的溶液中，再加入五水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，然后加热至70℃反应至TLC监控厄洛替尼反应完全，向反应液中加入二氯甲烷，然后过滤反应液，分出有机相，浓缩后得到产品1.17g；1HNMR(400Hz,DMSO-d6):9.62(s,1H),9.11(s,1H),8.50(s,1H),8.38(s,1H),7.95(dd,J1＝4.0Hz,J2＝8.0Hz,3H),7.69-7.59(m,3H),7.54-7.47(m,2H),7.24(s,1H),4.34-4.29(m,4H),3.81-3.75(m,4H),3.39(s,3H),3.36(s,3H)；13C NMR(101Hz,DMSO-d6):156.85,154.07,153.40,153.12,148.54,147.47,147.40,140.64,131.92,130.76,129.60,126.53,126.10,123.37,122.73,121.07,119.47,117.77,117.57,109.45,108.67,103.69,70.61,70.54,68.84,68.50,58.87,58.81。
实施例8
Figure BDA0002622462560000062
把厄洛替尼1g和3,5-二溴苄基叠氮1g加入叔丁醇10mL，水10mL和四氢呋喃10mL的溶液中，再加入五水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠10mL，然后加热至70℃反应至TLC监控厄洛替尼反应完全，向反应液中加入二氯甲烷，然后过滤反应液，分出有机相，浓缩后得到产品1.21g；1H NMR(400Hz,DMSO-d6):9.56(s,1H),8.71(s,1H),8.48(s,1H),8.27(s,1H),7.91(d,J＝8.0Hz,2H),7.86(d,J＝4.0Hz,1H),7.63(s,2H),7.56(d,J＝8.0Hz,1H),7.46(t,J1＝8.0Hz,J2＝8.0Hz,1H),7.23(s,1H),5.69(s,2H),4.33-4.28(m,4H),3.81-3.74(m,4H),3.38(s,3H),3.36(s,3H)；13C NMR(101Hz,DMSO-d6):156.83,154.07,153.40,148.56,147.44,147.21,140.82,140.54,133.73,131.21,130.67,129.53,123.23,122.41,120.84,119.29,109.43,108.67,103.68,70.60,70.53,68.82,68.51,58.87,58.82,52.01。
实施例9
Figure BDA0002622462560000063
把厄洛替尼1g和4-甲基苯基叠氮1g加入叔丁醇10mL，水10mL和四氢呋喃10mL的溶液中，再加入五水硫酸铜0.5g和抗坏血酸钠1g，然后加热至70℃反应至TLC监控厄洛替尼反应完全，向反应液中加入二氯甲烷，然后过滤反应液，分出有机相，浓缩后得到产品0.66g；1H NMR(400Hz,DMSO-d6):9.63(s,1H),9.28(s,1H),8.51(s,1H),8.37(s,1H),7.95(d,J＝4.0Hz,2H),7.87(d,J＝8.0Hz,2H),7.67(d,J＝4.0Hz,1H),7.52(t,J1＝8.0Hz,J2＝4.0Hz,1H),7.45(d,J＝4.0Hz,2H),7.25(s,1H),4.34-4.30(m,4H),3.82-3.76(m,4H),3.39(s,3H),3.37(s,3H),2.51(s,3H)；13C NMR(101Hz,DMSO-d6):156.88,154.09,153.40,148.58,147.70,147.40,140.59,138.83,134.89,131.06,130.75,129.57,122.69,121.02,120.36,120.02,119.46,109.43,108.64,103.69,70.60,70.54,68.84,68.52,58.88,58.82,21.07。
实施例10
Figure BDA0002622462560000071
把厄洛替尼0.5g和苄基叠氮0.5g加入叔丁醇5mL，水5mL和四氢呋喃5mL的溶液中，再加入五水硫酸铜0.25g和抗坏血酸钠0.5g，然后加热至70℃反应至TLC监控厄洛替尼反应完全，向反应液中加入二氯甲烷，然后过滤反应液，分出有机相，浓缩后得到产品0.41g；1HNMR(400Hz,DMSO-d6):9.55(s,1H),8.66(s,1H),8.48(s,1H),8.26(s,1H),7.90(d,J＝12.0Hz,2H),7.56(d,J＝4.0Hz,1H),7.45(t,J1＝8.0Hz,J2＝8.0Hz,1H),7.41-7.33(m,5H),7.23(s,1H),5.66(s,2H),4.32-4.28(m,4H),3.80-3.74(m,4H),3.38(s,3H),3.36(s,3H)；13C NMR(101Hz,DMSO-d6):156.83,154.06,153.39,148.55,147.44,147.11,140.52,136.50,131.39,129.48,129.29,128.66,128.42,122.27,122.12,120.78,119.23,109.43,108.67,103.68,70.60,70.53,68.82,68.50,58.87,58.82,53.52。
实施例11
从CO2培养箱中取出具有活力的人宫颈癌Hela细胞培养皿，分别进行如下操作：在酒精灯旁进行无菌操作，打开皿盖，吸出培养液于废液缸中，用2mL的PBS洗培养瓶中的培养液两次，用0.25％的胰蛋白酶进行消化，待观察发现出现细胞间隙增大、细胞变成小圆圈形状时终止消化，使用移液枪吹打培养瓶底部使细胞脱落，将所得的细胞悬浮液转移至无菌离心管中，设置离心机为1000r/min，3min，进行离心，然后缓慢倾倒离心管中的上清液，加入2～5mL的培养液，于倒置显微镜下进行细胞计数。根据计数结果，将处于对数期生长的具有活力的人宫颈癌Hela细胞以每孔50000个细胞的数目铺于96孔细胞培养板中，用含10％胎牛血清的RPMI1640培养5～6小时，加入100μL用培养基稀释好的待测化合物(浓度分别为0.2umol/L，0.4umol/L，0.8umol/L，1.6umol/L，3.2umol/L，6.4umol/L，12.8umol/L，25.6umol/L)和重组人源干扰素γ(终浓度为100ng/mg)激活Hela细胞中的IDO1表达。操作完后将96孔细胞培养板放入富含5％二氧化碳的37℃细胞培养箱中培养18小时后，用一定量的3.05N的三氯乙酸终止反应，然后置于50℃孵育30分钟。细胞培养液经沉淀后，取上清液用对(N,N-二甲基)苯甲醛显色后经多功能酶标仪检测480nm处的吸光度。将不含药物只有IFNγ培养基处理的组作为100％(At)，只含0.1％DMSO培养基处理的组作为空白对照0％(Ab)；根据下面的公式计算不同条件处理时的吸光度：吸光度％＝(A-Ab)/(At-Ab)，A：药物处理+100ng/mL IFNγ，Ab：空白对照，At：没有药物只含有100ng/mL IFNγ；根据使用GraphPad Prism8.0软件生成具有IC50值的抑制曲线。实施例10得到的目标化合物为0.678μmol/L；实施例8得到的目标化合物为0.587μmol/L；实施例9得到的目标化合物为0.342μmol/L。
实施例12
从CO2培养箱中取出肺癌细胞H460，H1975，H1299，A549的培养皿，分别进行如下操作：在酒精灯旁进行无菌操作，打开皿盖，吸出培养液于废液缸中，用2mL的PBS洗培养瓶中的培养液两次，用0.25％的胰蛋白酶进行消化，待观察发现出现细胞间隙增大、细胞变成小圆圈形状时终止消化，使用移液枪吹打培养瓶底部使细胞脱落，将所得的细胞悬浮液转移至无菌离心管中，设置离心机为800r/min，3min，进行离心，然后缓慢倾倒离心管中的上清液，加入2～5mL的培养液，于倒置显微镜下进行细胞计数。根据计数结果，用相应的培养液将其配制成1×105cells/mL的单细胞悬液，然后接种于6孔板中，且每孔2mL。将6孔板放入37℃，5％CO2培养箱中培养24h。
提前24h将100μL肿瘤细胞悬液接种96孔中，1500～2000个细胞/孔；除去原培养基，分别加入100μL含不同测试药物(终浓度为1μM、2μM、4μM、8μM或16μM)的培养基继续培养48h，每组3个复孔，用0.1％DMSO作为对照；除去含药的培养基，加入100μL用完全培养基稀释的1X Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂，并将96孔板放置于培养箱孵育1～4h；使用Synergy HTX多功能酶标仪检测450nm处的吸光度；用吸光度计算抑制率，计算公式为：抑制率＝[(Ac-As)/(Ac-Ab)]×100％；As，实验孔(药物处理)；Ac，对照孔(0.1％DSMO处理)；Ab，空白组(不含细胞)。用Graph Pad Prism 8.0软件确定药物对细胞生长的半抑制浓度(IC50)。
实施例8得到的目标化合物分别为5.18μmol/L,3.31μmol/L,7.06μmol/L,5.80μmol/L，实施例9得到的目标化合物分别为3.77μmol/L,7.25μmol/L,4.97μmol/L,5.91μmol/L，厄洛替尼分别为6.04μmol/L，12.67μmol/L，22.31μmol/L，10.20μmol/L。
接下来通过相同的方法检测实施例8得到的目标化合物和厄洛替尼针对紫杉醇耐药的H460细胞的抑制活性，IC50分别为6.85μmol/L，厄洛替尼为＞28μmol/L，目标化合物对耐药性细胞抑制效果优于厄洛替尼。
以上实施例描述了本发明的基本原理、主要特征及优点，本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明原理的范围下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进均落入本发明保护的范围内。

Claims (9)

1.一种对野生型肺癌肿瘤细胞具有杀伤性能的厄洛替尼衍生物及其制备方法，其特征在于该厄洛替尼衍生物的结构式为：
Figure FDA0002622462550000011
其中n为1或2，R1和R2和R3和R4为不同的取代基。
2.根据权利要求1所述的一种对野生型肺癌肿瘤具有杀伤性能的厄洛替尼衍生物，其特征在于该厄洛替尼衍生物的具体制备步骤为：
(1)由3,4-二(2-甲氧基乙养基)苯甲酸乙酯经碘化反应得到6-碘-3,4-二(2-甲氧基乙养基)苯甲酸乙酯；
(2)、6-碘-3,4-二(2-甲氧基乙养基)苯甲酸乙酯氨基取代得到4,5-二(2-甲氧基乙养基)-2氨基苯甲酸乙酯盐酸盐；
(3)、4,5-二(2-甲氧基乙养基)-2氨基苯甲酸乙酯盐酸盐经环合得到6,7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-酮；
(4)、6,7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-酮氯化得到6,7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-氯；
(5)、6,7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-氯取代得到厄洛替尼；
(6)、厄洛替尼与叠氮类化合物反应得到目标化合物。
3.根据权利要求1所述的厄洛替尼衍生物的制备方法，其特征在于：步骤(1)为：把一定量的3,4-二(2-甲氧基乙养基)苯甲酸乙酯溶于二氯乙烷中，在室温条件下搅拌均匀后加入N-碘代丁二酰亚胺，然后在室温反应至原料反应完全，过滤反应液，滤液倒入冰水中，加入饱和的氢氧化钠溶液，分出有机相，有机相再用稀盐酸溶液调节pH为中性，再次分出有机相，用无水硫酸镁干燥后浓缩得到6-碘-3,4-二(2-甲氧基乙养基)苯甲酸乙酯；所诉的3,4-二(2-甲氧基乙养基)苯甲酸乙酯与N-碘代丁二酰亚胺的投料量摩尔比为1:1.1～2。
4.根据权利要求1所述的厄洛替尼衍生物的制备方法，其特征在于：步骤(2)为：在带有分水器的密闭的反应瓶中，把一定量的6-碘-3,4-二(2-甲氧基乙养基)苯甲酸乙酯和三(三苯基膦)氯化钴和1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯和碳酸铯加入到无水甲苯中，搅拌均匀后，通过氮气对反应瓶置换三次气体，然后缓慢升温至回流，回流搅拌反应一段时间后降至室温，缓慢滴加溶有叠氮基三甲基硅烷和碘化钾的甲苯溶液，滴加完后升温至70℃，保持该温度反应一段时间可以明显观察到反应液的颜色加深，由此可以判断苯环上的碘被置换，通过观察反应液颜色固定后升温至回流，然后向分水器中加入溶有氨基磺酸铵的水溶液，甲苯回流进入分水器与水混合，通过分水器缓慢向反应液中滴加混合液，再通过回流体系不断循环，持续反应一段时间后降至室温，然后向滤液中滴加稀盐酸，使滤液中的pH达到1～2，置于10℃条件下缓慢搅拌，逐渐有固体析出，过滤后在丙酮中重结晶，以此进一步除去碘引入的颜色，然后再次过滤，收集滤饼烘干后得到4,5-二(2-甲氧基乙养基)-2氨基苯甲酸乙酯盐酸盐；所诉的6-碘-3,4-二(2-甲氧基乙养基)苯甲酸乙酯与叠氮基三甲基硅烷与碘化钾与氨基磺酸铵的投料量摩尔比为1:1.2:0.1:1.5。
5.根据权利要求1所述的厄洛替尼衍生物的制备方法，其特征在于：步骤(3)为：把一定量的4,5-二(2-甲氧基乙养基)-2胺基苯甲酸乙酯盐酸盐加入甲酰胺中，在室温条件下搅拌均匀后再加入溶有甲酸铵的甲酰胺溶液，在氮气氛围下，缓慢加热至一定温度，反应至原料反应完全，冷却至室温，向反应液中加入乙酸乙酯，搅拌一段时间后加入水，分出有机相，浓缩后得到6,7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-酮；所诉的4,5-二(2-甲氧基乙养基)-2胺基苯甲酸乙酯盐酸盐与酸铵的投料量摩尔比为1:3；所诉的反应温度为130～160℃。
6.根据权利要求1所述的埃克替尼关键中间体的制备方法，其特征在于：步骤(4)为：把一定量的6,7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-酮和N,N-二甲基甲酰胺加入到二氯亚砜中，缓慢升温至回流，反应结束后，真空蒸除未反应完的二氯亚砜，然后在0～10℃条件下加入饱和碳酸氢钠溶液，搅拌后用二氯甲烷萃取多次，合并有机相，然后用饱和食盐水洗涤一次，再用水洗涤多次，无水硫酸钠干燥后浓缩得到6,7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-氯。
7.根据权利要求1所述的埃克替尼关键中间体的制备方法，其特征在于：步骤(5)为：把一定量的6,7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-氯加入异丙醇中，在室温条件下搅拌均匀，然后加入间氨基苯乙炔，再次搅拌均匀，加热回流，反应一段时间后冷却至室温，有大量固体生成，抽滤后烘干得到厄洛替尼。
8.根据权利要求1所述的埃克替尼关键中间体的制备方法，其特征在于：步骤(6)为：把一定量的厄洛替尼和叠氮化合物加入叔丁醇，水和四氢呋喃的溶液中，再加入一定量的五水硫酸铜和抗坏血酸钠，然后加热至70℃反应至监控厄洛替尼反应完全，向反应液中加入二氯甲烷，然后过滤反应液，分出有机相，浓缩后得到产品；所诉的厄洛替尼与叠氮化合物与五水硫酸铜与抗坏血酸钠的投料量质量比为2:2:1:2。
9.如权利要求1所诉的厄洛替尼衍生物在抑制IDO1活性及抗肿瘤活性中的应用。
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